Epz-6438的合成方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種N-[ (4，6-二甲基-2-羰基-1，2-二氫-3-吡啶基）甲基]-5-[乙基 (四氫-2H-4-吡喃基）氨基]-4-甲基-4^(嗎啉甲基ΜΙ,Ι^二苯基]-3-甲酰胺的制備方 法，屬于化工和化學(xué)醫(yī)藥領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002]ΕΡΖ-6438是一種有效的，選擇性ΕΖΗ2抑制劑，無細(xì)胞試驗(yàn)中Ki和IC50分別為2.5ηΜ 和llnM，比作用于ΕΖΗ1選擇性高35倍，比作用于14種其他ΗΜΤ選擇性高4500多倍。
[0003] 體外研究表明：EPZ-6438濃度依賴性降低野生型或SMARCB1突變細(xì)胞中總體 H3K27Me3水平，并引起去除SMARCB1的MRT細(xì)胞系中強(qiáng)的抗增殖作用，IC50范圍為32nM到 ΙΟΟΟηΜΑΡΖ-6438引起神經(jīng)元分化的基因表達(dá)和細(xì)胞周期抑制，同時(shí)抑制Hedgehog通路基 因，MYC和EZH2(Knutson SK，et al.Proc Natl Acad Sci U S Α·2013，110(19)，7922-7927.)。在幾種EZH2突變體淋巴瘤細(xì)胞中，EPZ-6438的抗增殖作用被氫化潑尼松或地塞米 松增強(qiáng)
[0004](Johnston LD,et al.ASH Annual Meeting Abstracts.2013)〇
[0005]體內(nèi)研究表明：皮下注射G401異種移植物的SCID小鼠體內(nèi)，
[0006]EPZ-6438引起腫瘤郁積，并且在給藥期間，產(chǎn)生顯著的腫瘤生長(zhǎng)延遲，而對(duì)體重影 響較?。↘nutsonSK，etal.ProcNatlAcadSci1^厶.2013，110(19)，7922-7927.)<^卩2-6438是口服生物可利用的野生型和突變型EZH2選擇性抑制劑。目前處于臨床Π期試驗(yàn)，用 于治療彌漫性大B細(xì)胞性淋巴瘤。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]本發(fā)明的目的在于提供一種EPZ-6438的合成方法，該方法反應(yīng)條件溫和，成本低， 收率高，對(duì)環(huán)境污染少，適于工業(yè)化生產(chǎn)。
[0008]本發(fā)明解決其技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案是：
[0009] 1、一種EPZ-6438的合成方法，包括以下步驟：
[0010] 1)以2-甲基-3-氨基-5-溴苯甲酸甲酯為起始主原料，2-甲基-3-氨基-5-溴苯甲酸 甲酯中的氨基在酸性條件下，和四氫吡喃酮發(fā)生親核加成反應(yīng)，脫水、用還原劑還原，得2-甲基-3-[(四氫-2H-4-吡喃基)氨基]-5-溴苯甲酸甲酯(式I);
[0011] 2) 2-甲基-3-[(四氫-2H-4-吡喃基)氨基]-5-溴苯甲酸甲酯中的氨基在酸性條件 下，和乙醛發(fā)生親核加成反應(yīng)，脫水、用還原劑還原，得2-甲基-3-[乙基（四氫-2H-4-吡喃 基)氨基]-5-溴苯甲酸甲酯(式Π);
[0012]3)2-甲基-3-[乙基（四氫-2H-4-啦喃基)氨基]-5-溴苯甲酸甲酯堿性條件下水解， 再與4,6二甲基-3-氨甲基吡啶-2(1H)_酮中的氨基反應(yīng)，生成N-[(4,6-二甲基-2-羰基-1， 2-二氫-3-吡啶基）甲基]-2-甲基-3-[乙基（四氫-2H-4-吡喃基）氨基]-5-溴苯甲酰胺（式 m);
[0013] 4)N-[(4,6-二甲基-2-羰基-1,2-二氫-3-啦啶基）甲基]-2-甲基-3-[乙基（四氫- 2H-4-吡喃基)氨基]-5-溴苯甲酰胺和4-(4-嗎啉甲基)苯硼酸頻哪酯在催化劑催化下發(fā)生 偶聯(lián)反應(yīng)，得到EPZ-6438;
[0017] 其中步驟1)中的起始原料2-甲基-3-氨基-5-溴苯甲酸甲酯可以直接從市場(chǎng)上購(gòu) 買(武漢普億諾化工有限公司），也可以通過以下方法制備：
[0018] 1、制取中間產(chǎn)物2-甲基-3-硝基-5-溴苯甲酸
[0019] (1)按照下述摩爾比稱取各原料：
[0020] 2-甲基-3-硝基苯甲酸：1.0
[0021 ] 5，5-二甲基-1，3-二溴-2，4-咪唑啉二酮:0 · 558
[0022] (2)進(jìn)行苯環(huán)的溴代反應(yīng)：
[0023] 將符合上述配比要求的2-甲基-3-硝基苯甲酸溶解在濃硫酸中，
[0024]攪拌下分批加5，5-二甲基-1，3-二溴-2，4-咪唑啉二酮。5，5-二甲基-1，3-二溴-2， 4-咪唑啉二酮有二個(gè)溴可以參與反應(yīng)，實(shí)際上它是過量的。反應(yīng)畢，5，5-二甲基-1，3-二溴-2，4-咪唑啉二酮轉(zhuǎn)化成5，5-二甲基-2，4-咪唑啉二酮，易溶于水，混合物倒入冰水中，產(chǎn)物 得到純化。其中，濃硫酸的用量(體積)為2-甲基-3-硝基苯甲酸用量(質(zhì)量)的4.0~5.0倍； 反應(yīng)溫度為室溫，反應(yīng)時(shí)間為4~6h。
[0025] 合成路線為：
[0026]
[0027]2、制取中間產(chǎn)物2-甲基-3-硝基-5-溴苯甲酸甲酯 [0028]方法一：
[0029] (1)按照下述摩爾比稱取各原料：
[0030]2-甲基-3-硝基-5-溴苯甲酸：1.0
[0031] 碘甲烷：2.0~4.0
[0032]碳酸鈉： 2.0~4.0
[0033](2)進(jìn)行親核取代反應(yīng)：
[0034]將2-甲基-3-硝基-5-溴苯甲酸、碘甲烷和碳酸鈉按上述配比要求進(jìn)行混合反應(yīng)。 無機(jī)鹽通過抽濾和用水洗滌除去。其中，溶劑DMF的用量(體積)為2-甲基-3-硝基-5-溴苯甲 酸的用量(質(zhì)量)的8~11倍;反應(yīng)溫度為50~70°C，反應(yīng)時(shí)間為7~1Oh。
[0035]合成路線為：
[0036]
[0037]方法二:雖然方法一的產(chǎn)率較高，但是用到了價(jià)格較高的碘甲烷，并且是過量的。 方法二用甲醇代替碘甲烷，和羧酸發(fā)生酯化反應(yīng)得到產(chǎn)物。甲醇既是試劑又是溶劑，濃硫酸 是催化劑。其中，反應(yīng)溫度是回流，反應(yīng)時(shí)間10~13h。
[0038] 合成路線為：
[0039]
[0040] 3、制取中間產(chǎn)物2-甲基-3-氨基-5-溴苯甲酸甲酯 [0041 ] (1)按照下述摩爾比稱取各原料：
[0042]2-甲基-3-硝基-5-溴苯甲酸甲酯：1 · 0
[0043] 氯化銨：3.0~5.0
[0044] 鐵粉： 4.0~8.0
[0045](2)進(jìn)行硝基的還原反應(yīng)：
[0046]將2-甲基-3-硝基-5-溴苯甲酸甲酯、氯化銨和鐵粉按上述配比要求進(jìn)行混合，在 混合溶劑:水/甲醇中發(fā)生硝基的還原反應(yīng)，得到中間產(chǎn)物。
[0047]硝基化合物還原成胺，常用的方法有:金屬加酸還原法，催化氫化法，硫化物還原 法。由于2-甲基-3-硝基-5-溴苯甲酸甲酯含有酯基，在強(qiáng)酸性條件下易水解，所以加強(qiáng)酸弱 堿鹽氯化銨，呈弱酸性，避免了酯基的水解。其中，混合溶劑水/甲醇（1:1)的用量(體積)為 2-甲基-3-硝基-5-溴苯甲酸甲酯用量(質(zhì)量）的8~12倍;反應(yīng)溫度為70~90°C，反應(yīng)時(shí)間為 10~13h〇
[0048] 合成路線為：
[0049]
[0050]具體地，所述步驟1)中的還原劑為三乙酰氧基硼氫化鈉，2-甲基-3-氨基-5-溴苯 甲酸甲酯、四氫吡喃酮和三乙酰氧基硼氫化鈉的摩爾比為1: (1-1.5): (2-3)。
[0051]具體地，所述步驟1)中2-甲基-3-氨基-5-溴苯甲酸甲酯和四氫吡喃酮親核加成反 應(yīng)溫度為室溫，反應(yīng)時(shí)間為15_20min，還原反應(yīng)溫度為室溫，反應(yīng)時(shí)間為3-5h。
[0052]合成路線為：
[0053]
[0054] 具體地，所述步驟2)中的還原劑為三乙酰氧基硼氫化鈉，2-甲基_3-[(四氫-2H-4-吡喃基）氨基]-5-溴苯甲酸甲酯、乙醛和三乙酰氧基硼氫化鈉的摩爾比為1:(1-1.5) :(2-3)〇
[0055] 具體地，所述步驟2)中2-甲基_3-[(四氫-2H-4-吡喃基)氨基]-5-溴苯甲酸甲酯和 乙醛親核加成反應(yīng)溫度為室溫，反應(yīng)時(shí)間為15_20min，還原反應(yīng)溫度為室溫，反應(yīng)時(shí)間為3-5h〇
[0056] 合成路線為：
[00571
[0058] 具體地，所述步驟3)中2-甲基-3-[乙基（四氫-2H-4-吡喃基)氨基]-5-溴苯甲酸甲 酯和4,6二甲基-3-氨甲基吡啶-2(1H)_酮反應(yīng)的催化劑為六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三 吡咯烷基磷，2-甲基-3-[乙基（四氫-2H-4-吡喃基)氨基]-5-溴苯甲酸甲酯、4,6二甲基-3-氨甲基吡啶-2(1H)_酮和六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷的摩爾比為1:(1-3): (1-2)〇
[0059]合成路線為：
[0060]
[0061]其中4,6二甲基-3-氨甲基吡啶-2(1H)_酮可以從市場(chǎng)直接購(gòu)買，也可以通過原料 4,6二甲基-3-氰基吡啶-2(1H)_酮進(jìn)行合成。步驟為:4,6二甲基-3-氰基吡啶-2(1H)_酮在 Raney鎳催化下，氰基加氫，還原成氨基。其中，催化劑用量為4,6二甲基-3-氰基P比啶-2 (1H)-酮的5%，溶劑甲醇的用量(體積)為4,6二甲基-3-氰基吡啶-2(1H)_酮（質(zhì)量）的15~ 25倍，反應(yīng)壓力為常壓，室溫反應(yīng)，反應(yīng)時(shí)間3-4h。
[0062]合成路線為：
[0063]
[0064] 共棒m，尸/Γ還步驟4;屮N-U4，(3-一干趣-2-規(guī)趣-1，一a-；j-吡啶基）甲基]-2-甲 基-3-[乙基（四氫-2H-4-吡喃基)氨基]-5-溴苯甲酰胺、4-(4-嗎啉甲基)苯硼酸頻哪酯和催 化劑的摩爾比為1:(1-1.5): 0.1。
[0065]具體地，所述步驟4)中的催化劑為四（三苯基膦)鈀。
[0066] 具體地，所述步驟4)中N_[ (4，6-二甲基-2-羰基-1，2-二氫-3-吡啶基）甲基]-2-甲 基-3-[乙基（四氫-2H-4-吡喃基)氨基]-5-溴苯甲酰胺和4-(4-嗎啉甲基)苯硼酸頻哪酯的 反應(yīng)溫度90~100°C，反應(yīng)時(shí)間4~6h。
[0067]合成路線為：
[0068]
[0069]其中4-(4-嗎啉甲基)苯硼酸頻哪酯可以從市場(chǎng)直接購(gòu)買，也可以通過如下方法合 成。
[0070]首先4-甲?；脚鹚岷皖l哪醇在分子篩的催化下，發(fā)生脫水反應(yīng)，生成4_(4,4,5， 5-四甲基-1，3，2-二氧環(huán)戊硼-2-基)苯甲醛。
[0071]第二步反應(yīng)，發(fā)生還原氨化反應(yīng)。
[0072](1)按照下述摩爾比稱取各原料： 4-(4, 4, 5, 5-四甲基-1，3, 2-二氧環(huán)戊硼-2-基)苯甲醛：L0 嗎啉： 4. .0
[0073] 氰基硼氫化鈉 1.0 二氯化鋅 0. S
[0074] (2)還原氨化反應(yīng)：
[0075] 首先4_(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧環(huán)戊硼-2-基）苯甲醛中的醛基和嗎啉在催 化劑二氯化鋅作用下，發(fā)生親核加成反應(yīng)，再脫去一分子水得到亞胺，然后亞胺被氰基硼氫 化鈉還原成產(chǎn)物。其中，嗎啉是過量的，溶劑無水甲醇的用量(體積)為4-(4,4,5,5_四甲基-1，3,2_二氧環(huán)戊硼-2-基)苯甲醛(質(zhì)量)的20~25倍;還原氨化反應(yīng)在室溫進(jìn)行，反應(yīng)時(shí)間3 ~5h〇
[0076] 合成路線為：
[0077]
[0078] 本發(fā)明的有益效果是:本發(fā)明提供的一種EPZ-6438的合成方法，該方法反應(yīng)條件 溫和，成本低，收率高，對(duì)環(huán)境污染少，適于工業(yè)化生產(chǎn)。
【具體實(shí)施方式】[0079] 實(shí)施例1
[0080] 步驟1):2-甲基_3-[(四氫-2H-4-吡喃基)氨基]-5-溴苯甲酸甲酯的合成
[0081]
[0082