可再水化的多糖顆粒和海綿體的制作方法【專利摘要】組織和其他身體結構可用水化組合物保護，該水化組合物是由自由流動、基本無膠原質(zhì)的可再水化多糖顆粒和可再水化多糖海綿體形成。在不結塊的情況下顆粒的再水化可通過在生物相容水易混溶極性分散劑如乙醇中分散顆粒并將分散體與足夠的顆粒水性溶劑結合從而將其轉(zhuǎn)化為粘性水凝膠而進行。該水化組合物可有助于將受損的、發(fā)炎的或手術修復的表面恢復成正常狀態(tài)，例如，通過一種或多種愈合機制諸如炎性應答的調(diào)節(jié)、吞噬作用、粘膜重塑、纖毛再生或其他正常功能的完全或部分恢復?！緦＠f明】可再水化的多糖顆粒和海綿體[00011本發(fā)明專利申請是國際申請?zhí)枮镻CT/US2009/041589，國際申請日為2009年4月23日，進入中國國家階段的申請?zhí)枮?00980119930.6，名稱為"可再水化的多糖顆粒和海綿體"的發(fā)明專利申請的分案申請。發(fā)明領域[0002]本發(fā)明涉及多糖和用于身體的材料。[0003]背景[0004]某些多糖材料已經(jīng)用于手術修復或藥物遞送。關于這些材料的文獻包括美國專利號5,820，608(Luzio等）、5,993,846(Friedman等）、6,123,965(Jacob等）、6,342,251B1(11111111等）、6,706,69082(1^丨(^等）、6,835,38981(0〇11丨等）和7，195,67582(01?^31^等）；美國專利申請公開號US2005/0208122Al(Allen等）；公布的PCT申請?zhí)朩093/21906A(BrownUniversityResearchFoundation)和Weng等，RheologicalCharacterizationofinSituCrosslinkableHydrogelsFormulatedfromOxidizedDextranandN_CarboxyethylChitosan(由氧化葡聚糖和N-羧乙基殼聚糖配制的原位可交聯(lián)水凝膠的流變性表征），Biomacromolecules，8，1109-1115(2007)。多糖凝膠可以用作耳、鼻和咽喉(ENT)手術中的組織封閉劑。[0005]發(fā)明概述[0006]為了避免在保存期間過度降解，需要將多糖凝膠材料以干燥形式(例如，作為粉末或海綿體)包裝，并且僅在使用之前再水化材料。再水化有時存在困難。一些再水化材料提供具有物理性能差的凝膠或海綿體。在一些情況下，再水化凝膠的物理性能可以經(jīng)原位交聯(lián)來改善，但可能增加這樣的風險一一過度交聯(lián)的凝膠會不經(jīng)意地以大塊固體的形式移位(例如，吸入)至肺或其他地方。一些外部交聯(lián)劑可損害組織，或可導致非常長的或難以控制的停留時間。[0007]在一個方面，本發(fā)明提供了一種組合物，其包含基本上不含膠原的脫水熱交聯(lián)多糖的自由流動可再水化顆粒。在一個示例性實施方式中，所述顆粒包含纖維素例如羧甲基纖維素(CMC)，并且可以提供具有一種或多種所需性質(zhì)的再水化凝膠，所述性質(zhì)包括迅速、無團塊的再水化；當被噴霧或注射時的觸變行為;一旦固定就位后的高粘度和粘性凝膠性質(zhì)；可控的生物降解性質(zhì)，對過早生物降解的抵抗力和分解或移位而不產(chǎn)生大塊固體的能力。在另一個示例性實施方式中，顆粒包括CMC和殼聚糖的混合物，并可提供具有一種或多種如公開的CMC再水化凝膠所提供的期望性質(zhì)，以及一種或多種另外期望性質(zhì)的再水化凝膠，另外期望性質(zhì)包括固有的抗微生物(例如，殺菌)行為;止血能力或促進傷口愈合。本發(fā)明的再水化凝膠可以有助于將受損的、發(fā)炎的或手術修復的表面(例如，粘膜組織表面)恢復成正常狀態(tài)，例如，通過一種或多種愈合機制諸如炎性應答的調(diào)節(jié)、吞噬作用、粘膜重塑、纖毛再生(reciliation)或其他正常功能的完全或部分恢復。[0008]在另一個方面，本發(fā)明提供了一種可植入物品，其包含可再水化的多孔海綿體，所述多孔海綿體包含基本上不含膠原的脫水熱交聯(lián)多糖。所述海綿體可以被包裝且是壓縮形式的固體，可以被修剪成所需尺寸或形狀用于在治療部位植入，并且可以在植入之前或之后被再水化。本發(fā)明的海綿體的示例性實施方式包括由CMC制成的海綿體和由CMC以及殼聚糖的混合物制成的海綿體。[0009]在另一個方面，本發(fā)明提供了一種制備形成多糖凝膠的組合物的方法，該方法包括提供基本上不含膠原的多糖溶液，將所述溶液干燥以形成粉末，并且將所述粉末脫水熱交聯(lián)以形成自由流動的顆粒，所述顆粒當被再水化時將提供多糖凝膠。本發(fā)明方法的示例性實施方式包括從CMC和從CMC與殼聚糖的混合物制備粉末的方法。[0010]在另一個方面，本發(fā)明提供了一種制備可植入物品的方法，該方法包括提供基本上不含膠原的多糖溶液，將所述溶液凍干以形成干燥的多孔海綿體，將所述海綿體脫水熱交聯(lián)，并且任選地將所述海綿體壓縮，從而形成可植入物品，所述可植入物品當被再水化時將形成多糖海綿體。此本發(fā)明方法的示例性實施方式包括從CMC和從CMC與殼聚糖的混合物制備海綿體的方法。[0011]在另一個方面，本發(fā)明提供了一種治療組織和其他身體結構的方法。該方法包括在其上施用包含再水化的基本上不含膠原的脫水熱交聯(lián)多糖的凝膠或海綿體。[0012]再水化可以表現(xiàn)出其他困難。一些干粉物質(zhì)當與水合并時易于結塊。團塊可能難以分散并且可堵塞注射器、套管或噴嘴。還在另一個方面，本發(fā)明提供了一種將干粉組合物轉(zhuǎn)變?yōu)槟z的方法，所述方法包括將自由流動的多糖顆粒分散在生物相容的水易混溶的極性分散劑中，以及將所得到的分散體與充足的所述顆粒的水性溶劑合并從而將它們轉(zhuǎn)變?yōu)檎承运z。所述多糖顆粒可以是交聯(lián)的或未交聯(lián)的，并且如果是交聯(lián)的，則交聯(lián)可以是脫水熱交聯(lián)或使用單獨的交聯(lián)劑進行的交聯(lián)。所述多糖顆?？梢允腔旧喜缓z原的。所述多糖顆?？梢曰旧鲜菃我坏亩嗵?，或兩種或更多種多糖的共混物?？梢孕纬烧承运z而沒有可見的未水化多糖的團塊。本發(fā)明的方法可以緊接著進行一種治療方法，所述方法包括將所述粘性水凝膠層注射或噴霧在組織(例如，粘膜組織)或其他身體結構上的步驟。[0013]附圖簡要說明[0014]圖1是顯示本發(fā)明的治療方法的示意性視圖；[0015]圖2是可以在本發(fā)明的治療方法中使用的分配工具的立體圖；[0016]圖3是本發(fā)明的海綿體的立體圖；和[0017]圖4是處于壓縮狀態(tài)的本發(fā)明海綿體的立體圖。[0018]圖5是顯示酸滴定三種殼聚糖懸浮液的曲線圖。[0019]圖6和圖7是顯示在90°C和120°C時脫水熱交聯(lián)的殼聚糖凝膠的粘結結果的圖。[0020]在附圖的各張圖中類似的附圖標記表示類似的元件。附圖中的元件沒有按比例繪制。[0021]詳述[0022]下面的詳述描述了某些實施方式，并且不能認為具有限制性的意義。本文中的所有重量、量和比率為按重量計，除非另外具體地注明。下面顯示的術語具有下列的含義：[0023]術語"粘附性"是指將身體結構或假體材料與組織粘在一起，指將組織與組織粘在一起使其緊密地接觸持續(xù)延長的時間，或指形成將身體結構、假體材料或組織跨越正常開放的空間彼此連接的組織。[0024]術語"抗微生物"是指在金黃色葡萄球菌、銅綠假單孢菌、肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌或粘膜炎莫拉菌(Moraxellacatarrhalis)的一種或多種的群體中導致大于90%的數(shù)值減少(即，至少1個對數(shù)數(shù)量級的減少)的能力。[0025]術語"附著"和"粘附"當用來提及細菌生物膜和表面時是指該生物膜建立在和至少部分地涂敷在或覆蓋在該表面上，并且具有一些對從該表面上去除的抵抗力。因為此關系的性質(zhì)是復雜的和理解甚少，因此這種使用并不意在有特殊的附著或粘附機制。[0026]術語"細菌生物膜"是指附著在表面上的細菌的群落，在該群體中的生物體包含在由該細菌產(chǎn)生的細胞外多糖(EPS)基質(zhì)中。[0027]術語"生物相容的"當用來提及物質(zhì)時是指該物質(zhì)表現(xiàn)出對身體的不顯著的有害或不良作用。[0028]術語"生物可降解的"當用來提及物質(zhì)時是指該物質(zhì)在體內(nèi)將降解或蝕解以形成小的化學或物理種類。此類降解過程可以是酶促的、化學的或物理的。[0029]術語"生物可吸收的"當用來提及物質(zhì)時是指該物質(zhì)能夠被身體吸收。[0030]術語"粘性的"當用來提及液體或凝膠時是指當置于水平面上時該液體或凝膠將趨于(但不一定在所有情況下)粘住其自身并且形成單一團塊。[0031]術語"粉碎的"當用來提及顆粒物質(zhì)時是指顆粒已經(jīng)通過切割、磨碎、粉碎、搗碎或采用外部施加力量的其他顆粒破碎工藝被破碎并且尺寸減小。[0032]術語"共形的"當用來提及施用于組織或其他身體結構的組合物時是指該組合物可以在已經(jīng)施用該組合物的區(qū)域上形成基本上連續(xù)的層。[0033]術語"分離"、"去除"和"破壞"當用于提及附著或粘附在表面上的細菌生物膜時是指至少顯著量的最初存在于該表面上的生物膜不再附著或粘附于該表面。這種使用不意在有特殊的分離、去除或破壞機制。[0034]術語"流體"當用來提及物質(zhì)時是指該物質(zhì)是其損耗模量(G〃）大于其儲能模量(V)且損耗角正切值(tanS)大于1的液體。[0035]術語"凝膠"當用來提及物質(zhì)時是指該物質(zhì)是可變形的（即，不是固體），G〃小于G'且tan3小于1。[0036]術語"凝膠化"當用來提及凝膠層的形成時是指G〃等于V且taM等于1的時刻。[0037]術語"止血器"是指停止血流的裝置或材料。[0038]術語"水凝膠"當用來提及凝膠時是指該凝膠是親水的且含有水。[0039]術語"水化的"當用來提及裝置或物質(zhì)時是指該裝置或物質(zhì)含有均勻分布的化學鍵合的水。"完全水化的"裝置或物質(zhì)不能吸收額外的水化作用的水。"部分水化的"裝置或物質(zhì)能夠吸收額外的水化作用的水。[0040]術語"內(nèi)耳"是指半規(guī)管和耳蝸。[0041]術語"中耳"是指由鼓膜、內(nèi)部結構諸如聽骨鏈、周圍襯里和邊緣結構諸如乳突限定的區(qū)域。[0042]術語"粘膜附著劑"當用來提及裝置或物質(zhì)時是指該裝置或物質(zhì)將粘附于粘液被覆上皮。[0043]術語"鼻腔或竇腔"是指在鼻和竇內(nèi)限定正常充氣通道和小室的各種組織，包括但不限于鼻孔、鼻甲（nasalconcha)或鼻甲骨(turbinate)、額竇、篩竇、蝶竇和上頌竇、竇口(sinusostia)和鼻咽（nasopharnyx)〇[0044]術語"多糖"包括多糖的衍生物和改性多糖，以及各多糖種類和改性的各多糖種類的衍生物。例如，術語"羧甲基纖維素"包括羧甲基纖維素衍生物和改性的羧甲基纖維素，術語"殼聚糖"包括殼聚糖衍生物和改性的殼聚糖，術語"淀粉"包括淀粉衍生物和改性淀粉。[0045]術語"保護性的"當用來提及在組織或其他身體結構上的組合物層時是指該層有助于使損傷的、發(fā)炎的或手術修復的組織表面恢復至正常狀態(tài)，例如，通過一種或多種愈合機制諸如炎性應答的調(diào)節(jié)、吞噬作用、粘膜重塑、纖毛再生或其他正常功能的完全或部分恢復。[0046]術語"停留時間"當用來提及在組織或其他身體結構上的保護性凝膠層時是指在肉眼觀察下凝膠層或其一部分在體內(nèi)仍然就位所持續(xù)的時間期限。[0047]術語"溶劑化"是指形成含有溶劑或其他載體的溶液或分散體，溶質(zhì)溶解或懸浮在所述溶劑或載體內(nèi)。[0048]術語"基本上不含膠原的"是指含有足夠低量的膠原使得不會造成傳播或感染牛海綿狀腦病(BSE)或變異性克雅氏病(variantCreutzfeldt-Jakobdisease)(vCJD)。[0049]術語"薄的"當用來提及在組織或其他身體結構上的保護層時是指具有小于約2毫米的平均厚度。[0050]參照圖1，本發(fā)明的治療方法可以在患者的鼻腔或竇腔100中進行，竇腔包括上頌竇110a、110b和額竇112a、112b，它們都可以通過鼻孔114a、114b進入。應當注意，患者的外部特征，包括鼻孔114a、114b以虛線顯示。當患者患有例如慢性鼻炎及鼻竇炎時，與上頌竇ll〇a相關的一個或多個治療部位諸如治療部位116可以經(jīng)醫(yī)療或如果需要經(jīng)手術治療。治療部位116包括上頌竇110a的纖毛上皮并且可以包括棲息在相關的生物膜中的細菌的相關層(在圖1中未顯示）。治療部位不必限于自然組織并且可以包括人工結構(在圖1中未顯示）諸如竇填塞材料或支架，其也可以至少部分地用細菌生物膜層覆蓋。如果存在，生物膜可以使用溶劑化系統(tǒng)（例如美國專利申請公開號US2007/0264310A1中所述的溶劑化系統(tǒng)）去除，該系統(tǒng)可以使用帶有含有灌洗管(隱藏在圖1中）的活節(jié)式(articulatable)輸送管122的導引器120來施用至治療部位116,通過所述輸送管122,溶劑化系統(tǒng)可以流動至導引器120的遠端處的噴嘴124并且因此流動至治療部位。溶劑化系統(tǒng)和生物膜的殘留物可以從治療部位經(jīng)吸引管（隱藏在圖1中）被去除。本發(fā)明的可再水化凝膠組合物可以同樣地使用導引器120中的相同或不同的灌洗管在治療部位處施用。本領域技術人員要理解，該可再水化凝膠(和如果使用，溶劑化系統(tǒng))可以使用其他方法或裝置施用至治療部位。示例性的其他方法包括動力噴霧或其他噴涂法、灌洗、噴霧(misting)、涂抹(mopping)、芯吸(wicking)、滴落(dripping)和環(huán)鉆術，并且示例性的其他裝置包括噴霧嘴(例如，單個元件或多個元件的噴霧嘴)和注射器(例如，單管或多管玻璃或塑料注射器和沖洗球）。治療方法還可以在其他身體部分中進行。治療方法特別地用于非血管應用，包括治療耳、鼻或咽喉中或附近的組織(例如粘膜組織)或結構和肢體或脊柱中的開口、隱窩、通道或關節(jié)。[0051]圖2顯示示例性的工具200,其可以用于本發(fā)明的治療方法中。工具200包括手柄202和導引器222,其遠端224(總體參考)包括噴嘴、灌洗和吸引管(在圖2中未單獨編號）。工具200可以任選地進一步包括第一致動器組件226(總體參考)和第二致動器組件228(總體參考）。第一致動器組件226中的導輪230可以由用戶操作以實現(xiàn)導引器222的彎曲，并且第二致動器組件228中的導輪232可以由用戶操作以實現(xiàn)從導引器222的遠端224噴出的液體相對于導引器222的移動或旋轉(zhuǎn)。手柄202通常用作工具200的各種其他元件的外殼并且作為導引器222的支撐。手柄202可以具有手槍柄樣的形狀，限定把手部234和機頭236。把手部234的大小和形狀制成為適于用戶的手抓握，而機頭236則適于與導引器222連接。扳機238和相關的傳感器和閥門（圖2中未顯示)可以用來控制本發(fā)明的可再水化凝膠(和如果使用，公開的溶劑化系統(tǒng))通過灌洗管240和然后通過遠端224的噴嘴并到所需的治療部位上的流動。扳機238可以設置以多向運動范圍并且與一個或多個附加的傳感器和閥門（圖2中未顯示)相關聯(lián)以控制溶劑化系統(tǒng)、生物膜殘留物和其他碎片從治療部位通過遠端224的吸引管去除并且從此進入至吸引管242中。扳機238還可以用來控制本發(fā)明的可再水化凝膠通過灌洗管240中的獨立腔的流動并且從此通過遠端224的噴嘴流動至所需治療部位上。[0052]施用的可再水化凝膠可以填充治療部位(例如，鼻腔或竇腔，或一部分肢體或脊柱中的開口、隱窩、通道或關節(jié)），在此情況下，本發(fā)明的凝膠層可以是非常厚的，并且不接觸空氣或其他附近的氣體，并且在整個層上具有不同的厚度。本發(fā)明的可再水化凝膠還可以作為薄膜或其他共形涂層施用，在此情況下本發(fā)明的凝膠層可以是相對薄的，并且暴露于空氣或其他附近的氣體，并且在整個層上具有基本上均一的厚度?？稍偎z組合物提供保護層，該保護層可以是粘性的、彈性的或粘彈性的。該保護層理想地粘附于治療部位處的粘膜或其他天然組織(例如，軟骨或骨)并且抵抗分離或其他破壞直至凝膠層發(fā)生天然的降解或吸收，例如，在1天至幾天(例如，2、3、或4天）、幾周或幾個月的體內(nèi)停留時間后。同時細菌再建群(recolonization)或再感染可以顯著地減少或避免，并且可以發(fā)生改善的愈合和纖毛再生(reciliation)。保護性凝膠層可以提供多種治療優(yōu)勢，包括但不限于抵抗細菌粘附、抗感染特性、局部免疫調(diào)節(jié)、組織保護、減少或消除疼痛或出血、減少炎癥、優(yōu)化纖毛再生環(huán)境、減少與重要解剖結構的粘附等等。這些優(yōu)勢可以由多種機制引起，包括a)殺死細菌，b)抑制細菌建群，c)抑制細菌與組織的粘附，d)減少組織發(fā)病或膿腫形成，e)減少或防止疾病復發(fā)(例如，特別是減少與細菌毒素和EPS相關的慢性炎癥），f)在愈合期間涂敷和保護組織，諸如通過保持濕潤的傷口，從而促進血小板聚集，或通過閉合干性傷口而不會形成過度粗糙的結構，g)止血，h)優(yōu)化粘膜纖毛再生的環(huán)境，i)加速纖毛的生長或再生和j)將一種或多種治療劑遞送至治療部位。理想地保護性凝膠層將粘附于一部分粘膜，而使未粘附部分中的纖毛游離以經(jīng)歷自然的有節(jié)律的纖毛運動（即，纖毛擺動），如果需要也將抗微生物劑或其他的治療劑遞送至治療部位，并且理想地將阻礙或阻止細菌粘附于治療部位。[0053]圖3顯示了處于非壓縮狀態(tài)的本發(fā)明的海綿體的實例30,且圖4顯示處于壓縮狀態(tài)的本發(fā)明的海綿體的實例40。在再水化前的非壓縮形式中，海綿體30提供基本上無水的多孔硫醇化多糖基質(zhì)。壓縮的海綿體諸如海綿體40可以施用多種技術在脫水熱交聯(lián)之前或之后形成，所述技術包括用相對的滾筒擠壓、壓延輥、接受外部氣壓或內(nèi)部真空的塑料袋和本領域普通技術人員可以想到的其他壓縮技術。海綿體的壓縮或非壓縮形式的任一種均可以用于醫(yī)療過程中。在治療部位中放置海綿體諸如海綿體30或海綿體40之前，海綿體可以被修剪成所需大小或形狀(例如，如果在制造場所完成，修剪使用合適的凸凹模，或如果在放置時完成修剪則使用剪刀或外科手術刀）。然后未修剪的或修剪的海綿體可以再水化。如果先前被壓縮，則可以允許海綿體在插入至治療部位之前、期間或之后膨脹。安放的海綿體可以提供各種治療優(yōu)勢，如上面結合保護性凝膠層所述的那些。[0054]大量多糖可以用于本發(fā)明的可再水化凝膠組合物和本發(fā)明的海綿體中。除了纖維素和殼聚糖，示例性的多糖包括瓊脂、藻酸鹽、角叉菜膠、幾丁質(zhì)、硫酸軟骨素、葡聚糖、半乳甘露聚糖、糖原、透明質(zhì)酸、淀粉和其他能夠形成水凝膠或自支撐海綿體的生物相容的多糖。還可以使用多糖的衍生物(包括氧化的多糖鹽)和混合物(包括衍生物）。含有多糖的混合物的組合物特別理想地用于形成水凝膠和海綿體，使用單一的多糖不能提供其特性。例如，含有CMC和殼聚糖的組合物可以提供特別合意的一組特性。其他合意的組合物包括含有殼聚糖以及藻酸鹽、透明質(zhì)酸或硫酸軟骨素的那些。選擇的一種或多種多糖理想地可以經(jīng)如下面詳述的脫水熱縮合反應來交聯(lián)，并且可以如此地交聯(lián)多糖混合物中的一種或所有多糖。所選擇的一種或多種多糖還理想地是水溶性的或可以例如，通過適當?shù)乃峄饔枚兊檬撬苄缘?。[0055]多種纖維素可用于公開的可再水化凝膠和公開的海綿體中，包括CMC、甲基纖維素、乙基纖維素、羥丙基纖維素、羥丙基甲基纖維素和半纖維素，以及其衍生物，包括氧化的纖維素。示例性的纖維素材料可從多個商業(yè)來源獲得，包括DowWolffCellulosics公司（例如，羧甲基纖維素鈉產(chǎn)品的WAL0CEL?CRT系列）、HercUleS公司（例如，纖維素膠和羧甲基纖維素產(chǎn)品的AQUAL0N?系列）和Sigma-Aldrich公司（例如，N〇.C4021微粒纖維素）。纖維素材料理想是以顆粒形式獲得，例如，為自由流動顆粒，其平均顆粒直徑小于約1mm，小于約100μm，約1到約80μηι，或小于Ιμπι。[0056]1.多種殼聚糖可用于公開的可再水化凝膠和公開的海綿體中。示例性的未修飾殼聚糖及其鹽(包括檸檬酸鹽、硝酸鹽、乳酸鹽、磷酸鹽、氯化物和谷氨酸鹽)可從多個商業(yè)來源獲得，包括KitoZymeS.A.、FlukaChemieAG、FMCBioPolymerAS的NovaMatrix部門和Sigma-Aldrich公司。殼聚糖也可以通過水解使幾丁質(zhì)（聚-N-乙?；?D-葡糖胺)脫乙?；匀コ由系囊阴；鶃砗铣?。生成的聚合物具有多個重復單位(例如，約30-約3000個重復單位，約60-約600個重復單位，或?qū)τ谒x擇的終端用途可能需要的此類其他量），它們的一些或全部含有脫乙?；被?例如，全部重復單位的約30-約100%或約60-約95%)，剩余的重復單位(如果有的話)含有乙?；被?。聚合物是陽離子的并且可以被認為由葡萄胺單體組成。殼聚糖可以具有多種數(shù)均分子量，例如，約5-約2000kDa，約10-約500kDa，或約10-約100kDa。殼聚糖可以是例如，數(shù)均分子量小于約50kDa的超低分子量物質(zhì)，數(shù)均分子量為約50-約200kDa的低分子量物質(zhì)，數(shù)均分子量為約200-約500kDa的中分子量物質(zhì)或數(shù)均分子量大于約500kDa的高分子量物質(zhì)。殼聚糖衍生物還可以采用，例如，其中一個或多個羥基或氨基已經(jīng)被修飾以改變衍生物的溶解度或粘膜粘附特性的衍生物。示例性的衍生物包括硫醇化殼聚糖，以及非硫醇化殼聚糖衍生物，例如乙?；⑼榛蚧腔瘹ぞ厶?例如，〇-烷基醚，0-?；ィ栯x子化三甲基殼聚糖和用聚乙二醇改性的殼聚糖）。殼聚糖衍生物可從多種來源獲得。例如，硫醇化殼聚糖可從ThioMatrixForschungsBeratungs公司和MucobiomerBiotechnologischeForschungs-undEntwicklungs公司獲得，或通過殼聚糖與合適的硫醇化試劑反應制備，如公開的PCT申請W003/020771A1以及Roldo等人的Mucoadhesivethiolatedchitosansasplatformsfororalcontrolleddrugdelivery:synthesisandinvitroevaluation,EuropeanJournalofPharmaceuticsandBiopharmaceutics，57,115-121(2004);Krauland等人，ViscoelasticPropertiesofaNewinsituGellingThiolatedChitosanConjugate，DrugDevelopmentAndIndustrialPharmacy，31,885-893(2005)，Bernkop-Schniirch，Thiomers:Anewgenerationofmucoadhesivepolymers，AdvancedDrugDeliveryReviews?57?1569-1582(2005);和Bernkop-Schniirch等人，Thiomers:Preparationandinvitroevaluationofamucoadhesivenanoparticulatedrugdeliverysystem，InternationaljournalofPharmaceutics，317，76_81(2006)中所述D硫醇化殼聚糖理想地以顆粒形式獲得，例如，作為自由流動的顆粒，其平均粒徑小于約1mm，小于約100μπι，約1-約80μπι，或小于Ιμπ^其他類型多糖(例如，瓊脂、藻酸鹽、角叉菜膠、幾丁質(zhì)、硫酸軟骨素、葡聚糖、半乳甘露聚糖、糖原、透明質(zhì)酸、淀粉)的來源可以由本領域技術人員基于與上面對纖維素和殼聚糖所給出的那些類似的選擇特性來選擇。[0057]當在混合物中合并時，每種多糖的量可以廣泛地變化以獲得所需的性質(zhì)組合。例如，通過改變共混物中兩種多糖的比率，可以改變該共混物的生物可降解或生物可吸收特性和停留時間。兩種多糖的混合物可以例如含有約99-約1%的第一種多糖和約1-約99%的第二種多糖，或約80-約20%的第一種多糖和約20-約80%的第二種多糖，或約60-約40%的第一種多糖和約40-約60%的第二種多糖。通過適當?shù)剡x擇混合物中多糖的類型和量，可以獲得具有可調(diào)性質(zhì)的可再水化凝膠和海綿體。例如，CMC和殼聚糖的共混物可由于具有殼聚糖而具有良好的抑菌性能，和由于具有CMC而具有可控的、持續(xù)的和可調(diào)的降解速率，而單獨使用殼聚糖可形成具有固有的較差的機械和再吸收性能的凝膠或海綿體，并且單獨使用CMC可形成不具有殺菌性能的凝膠或海綿體。[0058]本發(fā)明的可再水化凝膠組合物和海綿體基本上不含膠原。理想地可再水化凝膠組合物和海綿體充分地不含有膠原（例如，根本不含有膠原），從而適于在全球范圍內(nèi)銷售而在人類中沒有限制地使用。[0059]本發(fā)明的可再水化凝膠組合物和海綿體任選地在被包裝和發(fā)送至終端用戶之前進行交聯(lián)。交聯(lián)優(yōu)選地使用脫水熱交聯(lián)工藝進行。對于本發(fā)明的可再水化凝膠，這優(yōu)選地通過將自由流動的可再水化多糖顆粒脫水熱交聯(lián)以形成自由流動的可再水化交聯(lián)多糖顆粒來完成。換句話說，顆粒優(yōu)選地是本身單獨地被交聯(lián)，而仍然是自由流動的并且能夠以后快速地溶解和再水化。對于本發(fā)明的海綿體，交聯(lián)優(yōu)選地通過將成形的多孔物品脫水熱交聯(lián)來完成，所述物品已經(jīng)通過將所需多糖的溶液放置在合適的模具中并且將所述溶液凍干以形成具有與所需的非壓縮的海綿體形狀相對應的形狀的多孔固體而制成。換句話說，海綿體優(yōu)選地在交聯(lián)之前成形和制備成多孔的。[0060]脫水熱交聯(lián)實際上是一種固體狀態(tài)交聯(lián)工藝，其中材料暴露于熱和減壓的一種或兩種，從而導致初步脫水，緊接著經(jīng)分子間或分子內(nèi)縮合過程丟失額外的水并且形成交聯(lián)鍵。沒有必要加入外來的交聯(lián)劑，并且在本發(fā)明的顆粒的情況下，所述試劑的存在可能使得難以保持其自由流動性。脫水熱交聯(lián)理想地包括將待交聯(lián)的產(chǎn)物脫水至小于約1%的含水量，并且使用充足的額外熱量或真空以達到所需的交聯(lián)密度。例如，在缺少真空的條件下，可以采用約80°C之上，約90°C之上，約100°C之上或約120°C之上的溫度，較高的溫度通常提供較快的反應速率。多糖理想地不加熱至足以導致褐變的程度，并且相應地優(yōu)選小于160°C或小于150°C的溫度。在環(huán)境壓力下可能需要相當長的加熱時間，例如，在140-150°C下約40小時加上用于加熱和冷卻的約總計20小時。當使用減壓時，可以采用較低的溫度，并且優(yōu)選至多約1mmHg，和優(yōu)選至多約10-3mmHg的壓力。因此，溫度越高，所需的真空越低或達到指定的交聯(lián)密度所需的加熱時間越少，且反之亦然。因此難以規(guī)定確切的加熱時間或加熱時間的范圍，盡管可以采用至少約10小時，至少約20小時，至少約30小時或約40-約60小時（不計算加熱和冷卻所需的時間）的時間。在許多情況下，足以用經(jīng)驗來確定加熱時間、溫度和壓力，例如通過使用實施例中所示的凝膠保留時間測試(GelRetentionTimetest)來評價是否已經(jīng)獲得了適當?shù)慕宦?lián)度。對于未交聯(lián)的樣品，凝膠保留時間可以為例如，1天或更少，而通過使用適當程度的脫水熱交聯(lián)，凝膠保留時間例如可以延長至至少2天和優(yōu)選約3-約7天。與其脫水熱交聯(lián)形式相比，未交聯(lián)的樣品還可以傾向于不太快速地再水化，吸收較多的水或形成更為粘性的凝膠或糊。與研磨成粉末形式的常規(guī)交聯(lián)材料相比，脫水熱交聯(lián)的顆粒可以是未粉碎的，可以由縮合反應(例如，導致失水的脫水反應，或?qū)е聛G失其他小分子諸如氯化氫、甲醇或乙酸的反應)而交聯(lián)，而不由其他交聯(lián)反應(例如，包括加聚反應(例如，乙烯基的加聚反應）的反應、離子反應或包括硫化物或胺基的反應)而交聯(lián)。與研磨成粉末形式的常規(guī)交聯(lián)材料相比，脫水熱交聯(lián)顆粒還可以具有較窄的多分散指數(shù)，較低的數(shù)均分子量，經(jīng)歷更多交聯(lián)的能力，較低的生產(chǎn)成本和較低的制造資本需求。[0061]當兩種或更多種多糖用來制備本發(fā)明的再水化凝膠時，在摻合顆粒之前脫水熱交聯(lián)過程可以對一種或多于一種的多糖進行。這容許通過改變一些性質(zhì)包括用于每種多糖組分的交聯(lián)時間、溫度或真空，然后在對個別的共混組分完成一個或多個脫水熱交聯(lián)反應后將交聯(lián)的（或如果需要，未交聯(lián)的）組分共混來對下述的性質(zhì)進行定制，所述性質(zhì)諸如膠凝行為、膠凝時間和植入后的降解時間。如果需要，得到的共混物可以進行額外的脫水熱交聯(lián)反應。顆粒還可以保持分開的狀態(tài)，并且以后由終端用戶混合，盡管這與在制造場所形成混合物相比通常會不太便利。[0062]用于本發(fā)明的海綿體的脫水熱交聯(lián)條件類似于可以用于多糖種類的那些。當兩種或更多種多糖用來制備本發(fā)明的海綿體時，多糖的混合物可以在溶液中形成、凍干和脫水熱交聯(lián)。作為另一種方式，所述混合物中的一種或多種多糖可以是脫水熱交聯(lián)的，并且所述混合物中剩余的一種或多種多糖可以吸收進脫水熱交聯(lián)的聚合物中，并且得到的膨脹的物品可以被凍干以形成海綿體。這些和其他相關的方法可以容許改變性質(zhì)定制的程度。[0063]本發(fā)明的可再水化凝膠組合物和海綿體典型地將進行滅菌和置于合適的密封包裝（例如，合適材料制成的注射器、瓶子或袋子）中，然后裝運給終端用戶?？梢酝ㄟ^使用滅菌方法諸如γ輻射或電子束(E-Beam)加工以導致可控的斷鏈來進行額外的性質(zhì)定制。冷電離輻射滅菌（例如，冷E-Beam滅菌)可以用來限制斷鏈程度，如尚未批準的以與本申請同一日申請的PCT申請(代理人案卷號P0035142.00和151-P-35142W001)中所討論的那樣。[0064]本發(fā)明的可再水化凝膠組合物和海綿體可以在放置于或插入在治療部位中之前被再水化，或可以以干燥狀態(tài)放置，然后原位再水化(例如，經(jīng)由加入外部提供的再水化流體，通過攝取內(nèi)源性流體，或兩者）。再水化海綿體通常是直接進行的，并可以通過將海綿體用水或含有任何其他所需成分的水溶液浸泡或飽和來進行。例如，生理鹽水可以是優(yōu)選的并且是容易地獲得的再水化溶液，如果需要可以使用其他的物質(zhì)諸如磷酸緩沖鹽水(PBS)。再水化可再水化凝膠顆?？梢匀缟纤霰憩F(xiàn)出其他困難，其原因是一些干粉物質(zhì)當與水合并時傾向于形成團塊。然而，通過將可再水化凝膠顆粒分散在生物相容的水易混溶的極性分散劑中，然后將分散體與充足的水性顆粒溶劑（即顆粒的水基溶劑)混合來將所述顆粒轉(zhuǎn)變?yōu)檎承运z來避免結塊。分散劑因此是顆粒的足夠差的溶劑，使得顆粒和分散劑的混合物將不會形成真溶液。在顆粒和分散劑已經(jīng)通過例如將它們漩渦在一起而攪拌后，所述分散體中的顆粒理想地為充分地小，使得該分散體是穩(wěn)定的或準穩(wěn)定的（例如，膠態(tài)分散體或適度持久的懸浮液）。不受理論的限制，水性顆粒溶劑的加入被認為容許在每個懸浮的顆粒的表面處經(jīng)由周圍的分散劑溶解至該水性顆粒溶劑相中而幾乎同時地發(fā)生再水化，從而容許形成粘性水凝膠，而不形成可見的未水化多糖的團塊。以此方式，分散的多糖可以與水或水溶液合并以形成無團塊的水凝膠，即使干粉狀多糖通常不會那樣。在許多情況下，本發(fā)明的方法可以用來使用兩個注射器之間的通道、溫和的攪動或其他簡單的混合技術而不需要使用機械攪拌器，制備令人滿意的無團塊的凝膠。本發(fā)明的混合方法還可以容許形成非常濃縮的水凝膠，其不能通過僅將粉末狀多糖與水或酸化水混合來獲得。多糖濃度典型地取決于選擇的分子量，并且例如可以是再水化凝膠的約1-約20%，約1-約10%或約1-約5%。凝膠可以理想地在小于30分鐘、小于20分鐘、小于10分鐘、小于5分鐘、小于1分鐘內(nèi)或甚至在再水化后基本上立即形成。對于沒有立即再水化的多糖，可以理想地在多糖已經(jīng)變得太粘而不能噴霧或另外通過小的孔口分配之前將粉末飽和并將其注射。[0065]分散劑和水性顆粒溶劑的選擇可以取決于選擇的多糖。對于例如在純水中溶解度相對差但當水被酸化時變得可溶的殼聚糖的多糖，去離子水可以用作分散劑并且酸化水可以用作水性顆粒溶劑。還可以使用分散劑和水性溶劑的其他組合。例如，乙醇、異丙醇或丙酮可以用作許多多糖(包括殼聚糖和含殼聚糖的混合物）的分散劑，且去離子水、生理鹽水或PBS可以用作水性顆粒溶劑。[0066]本發(fā)明的可再水化凝膠顆粒可以如上所述是交聯(lián)的或未交聯(lián)的，并且如果是交聯(lián)的則交聯(lián)可以是脫水熱交聯(lián)或使用單獨的交聯(lián)劑(例如，京尼平(genipin)、氧化多糖或戊二醛)進行的交聯(lián)。當使用單獨的交聯(lián)劑交聯(lián)時，得到的聚合物可以任選地被凍干，并且如果需要，被分散以提供自由流動的顆粒。[0067]本發(fā)明的可再水化凝膠組合物和海綿體可以在再水化之前或之后任選地包括多種其他組分。示例性的其他成分包括其他溶劑、酸、堿、緩沖劑、抗微生物劑、治療劑和其他輔劑。酸、堿或緩沖劑可以例如將凝膠保持在用于接觸人類組織的適當PH，例如，大于5的pH，接近中性的pH，或小于8.5的pH。示例性的緩沖劑包括巴比妥鈉、甘氨酰胺、甘氨酸、氯化鉀、磷酸鉀、鄰苯二甲酸氫鉀、乙酸鈉、檸檬酸鈉、磷酸鈉和它們的共輒酸。[0068]本發(fā)明的可再水化凝膠組合物和海綿體理想地是固有的抗微生物劑，而不需要加入單獨的抗微生物劑。如果需要可以采用單獨的抗微生物劑。所述抗微生物劑的有用的列舉可以參見，例如，上面提到的美國專利申請公開號US2007/0264310A1。[0069]可以用于本發(fā)明的可再水化凝膠組合物和海綿體中的示例性治療劑包括適合用于目標治療部位處的任何物質(zhì)，包括止痛劑、抗膽堿能藥、抗真菌劑、抗組胺劑、留體或非甾體抗炎劑、抗寄生蟲劑、抗病毒劑、生物抑菌組合物(biostaticcompositions)、化療/抗腫瘤劑、細胞因子、減充血劑、止血劑(例如凝血酶）、免疫抑制劑、粘液溶解劑、核酸、肽類、蛋白質(zhì)、類固醇、血管收縮劑、維生素、它們的混合物和本領域技術人員知曉的其他治療性物質(zhì)。所述治療劑的有用的列舉可以參見，例如，上面提到的美國專利申請公開號US2007/0264310A1中。[0070]可以包含在本發(fā)明的可再水化凝膠組合物和海綿體中的其他輔劑包括染料、顏料或其他著色劑（例如，F(xiàn)D&C3號紅、FD&C20號紅、FD&C6號黃、FD&C2號藍、D&C5號綠、D&C4號橙、D&C8號紅、焦糖、二氧化鈦、水果或蔬菜著色劑諸如甜菜粉或β-胡蘿卜素、姜黃根、紅辣椒和本領域技術人員知曉的其他物質(zhì)）；指示劑;調(diào)味劑或甜味劑包括但不限于茴香油、櫻桃、肉桂油、檸檬油(例如，檸檬油、黎莓油或橙油）、可可、桉樹、草藥芳香劑(例如丁香油、鼠尾草油或肉桂油）、乳糖、麥芽糖、薄荷醇、薄荷油、糖精、環(huán)拉酸鈉、薄荷油（留蘭香油）、山梨醇、蔗糖、香草醛、冬青油、木糖醇和它們的混合物;抗氧化劑;消泡劑;和流變學改性劑包括增稠劑和觸變膠。本發(fā)明的可再水化凝膠組合物和海綿體理想地不含有可能潛在地損害患者組織或結構例如鼻腔或竇腔中的粘膜組織的成分。[0071]在需要從組織中去除水，例如，以從息肉或水腫組織中去除流體的那些情況下，高滲劑可以用于本發(fā)明的可再水化凝膠組合物和海綿體中。示例性的高滲劑包括呋塞米、氯化鈉凝膠和可以從組織或物質(zhì)中抽出水的其他鹽制劑，它們直接或間接地改變粘膜層的滲透壓量(osmolarcontent)。當需要治療劑的持續(xù)釋放或延遲釋放時，還可以包括釋放劑改性劑。[0072]本發(fā)明的可再水化凝膠組合物和海綿體可以理想地用作多步驟治療方案的一部分，其破壞細菌生物膜并且阻礙其復發(fā)。例如，可以進行一系列步驟，其可以廣義地分類為清潔/破壞、殺死、充氣、保護/涂覆和愈合。清洗/破壞步驟可以通過結合圖1和圖2施用如上討論的溶劑化系統(tǒng)來進行。殺死步驟可以通過將適當?shù)目刮⑸飫糜谥委煵课粊磉M行。這可以例如通過將抗微生物劑包含在溶劑化系統(tǒng)中作為單獨應用的組合物，或包含在溶劑化系統(tǒng)和單獨應用的組合物兩者中來實現(xiàn)。抗微生物劑還可以在操作后應用或施用。充氣步驟可以通過開放閉塞的或部分閉塞的通道，例如，對于鼻部應用的竇或竇口，從而向被治療組織提供空氣通道或改善空氣通道來進行。這可以例如通過手術去除阻塞性組織結構或手工地將所述結構移位來實現(xiàn)。保護/涂覆步驟可以通過用本發(fā)明的凝膠組合物涂覆由此治療的組織的至少一部分，或通過用本發(fā)明的海綿體覆蓋由此治療的組織的至少一部分來進行。愈合步驟可以通過允許清洗的、保護的和封閉的組織表面經(jīng)歷恢復至正常狀態(tài)的過程來進行，例如，通過一種或多種愈合機制諸如炎性應答的調(diào)節(jié)、吞噬作用、粘膜重塑、纖毛再生或正常功能的完全或部分恢復。多步驟治療方案可以包括或緊接著清除步驟，在該步驟中凝膠組合物或海綿體是充分生物可降解的或生物可再吸收的，從而在所需的時間期限內(nèi)從治療部位消失，所述時間期限，例如，超過1天、超過3天，或約4-約7天，并且理想地不脫落大的固體塊。本發(fā)明的方法可以有利地在無需手術的條件下實現(xiàn)，例如，通過普通的吸入/吸出技術應用和去除任選的溶劑化系統(tǒng)，或通過簡單地沖洗受感染組織緊接著應用本發(fā)明的凝膠組合物或海綿體。等同的一系列步驟可以在一部分中耳或內(nèi)耳中以多步驟治療方案進行。關于所述治療方案的更多細節(jié)可以參見美國專利申請公開號2007/0264310A1。[0073]本發(fā)明進一步在下面的非限制性實施例中進行闡明。[0074]實施例1[0075]脫水熱交聯(lián)的CMC[0076]粉末狀駿甲基纖維素鈉(EmergingTechnologies公司的CMC52MSC)與1%的二氧化鈦混合，并通過10小時加熱到140°C、在150-160°C加熱40小時和10小時冷卻到環(huán)境溫度進行脫水熱交聯(lián)。獲得平均顆粒直徑約為40微米的自由流動白色粉末。將粉末以1.5克包裝在聚氨酯袋中并在30kGy進行電子束滅菌。[0077]實施例2[0078]注射器再水化和分配[0079]將0.7g實施例1的CMC粉末與3mL去離子水在10mLLUER-L0K?注射器（Becton，Dickinson公司）中混合。注射器用LUER?連接器(Becton，Dickinson公司）連接到第二個這樣的10mL注射器，且交替地將注射器柱塞下壓以再水化粉末。獲得含許多塊體的混合不良的物質(zhì)，且塊體堵塞注射器之間的通道。在第二試驗中，將0.7g實施例1的CMC粉末與0.5mL乙醇組合并搖蕩，得到明顯穩(wěn)定的懸浮液。第二注射器中3mL的去離子水被加入到懸浮液中，然后注射器柱塞交替下壓以混合成分，導致逐漸形成清澈、均質(zhì)水凝膠，該水凝膠完全沒有可見的未水化的CMC顆粒。該水凝膠可易于通過2.7mm內(nèi)徑、10cm長的套管注入到目標表面，形成濃稠、高粘性、無明顯顆粒的均勻凝膠。凝膠看起來有點像無定形海綿體。[0080]實施例3[0081]粘性[0082]實施例2中凝膠樣品被放置在MTS張力測試機(MTSSystems公司）中膠原涂覆的銷釘之間，且在25.4mm/min的分離速度下評估，以確定凝膠-膠原鍵合的張力粘結強度。獲得約55kPa的值，然而用未交聯(lián)CMC粉末制成的凝膠，僅獲得約35kPa。[0083]實施例4[0084]凝膠保留時間[0085]再水化1.5g實施例1粉末以用實施例2的方法形成無塊體凝膠。將凝膠浸入200mLPBS，然后倒入150μπι篩網(wǎng)，使其排水并稱重。將凝膠返回到收集的PBS溶液中，存放過夜，篩分和再稱重過程重復共三次，此時凝膠消失。最終3天測試持續(xù)時間被記錄為凝膠保留時間。未脫水熱交聯(lián)的實施例1CMC粉末的凝膠的凝膠保留時間小于1天。[0086]實施例5[0087]殼聚糖懸浮液和凝膠[0088]從螃蟹殼獲得的高分子量粉末狀殼聚糖（Sigma-A1drich公司的高粘殼聚糖BI0CHEMICA?)被懸浮在去離子水中，添加水平為10、25和50g/L。以1MHC1滴定攪拌的50毫升每種懸浮液。如圖5所示，其中10、25和50g/L懸浮液被分別標為曲線A、B和C，pH值隨酸加入而逐漸減小。pH值在約pH6和酸加入少于lmL時通過拐點，相應于可觀察的凝膠形成的開始。高粘度凝膠在pH值通過另一個拐點時獲得，pH約4.5,對于曲線A、B和C酸加入分別為約2、3或5mL。在更低pH值時，殼聚糖然后完全水化且額外的酸進一步酸化水和稀釋凝膠。[0089]在單獨的實驗中，高分子量殼聚糖的1%溶液通過加入殼聚糖粉末到含1%醋酸的去離子水中形成。用裝配了CP-52錐錠的BR00KFIELDTMDV-II+Pro錐板粘度計，在37°C評估時溶液具有453cP的粘度。類似制備的低分子量殼聚糖的1%溶液(來自Sigma-Aldrich公司的BI0CHEMICA低粘度殼聚糖)具有185cP粘度。[0090]實施例6[0091]脫水熱交聯(lián)的殼聚糖粘性[0092]使用實施例1中方法，將低分子量和高分子量粉末狀殼聚糖在90°C脫水熱交聯(lián)10小時，或在120°C脫水熱交聯(lián)20小時，加到不同量的1MHC1中，形成凝膠，并用實施例3的方法評估粘性。圖6示出在90°C交聯(lián)的殼聚糖的粘性結果，圖7示出在120°C交聯(lián)的殼聚糖的粘性結果。[0093]在單獨的試驗中，中等分子量的殼聚糖在120°C用實施例1中方法脫水熱交聯(lián)40小時，并用實施例2中方法評估粘性。獲得約65kPa的值，然而用未交聯(lián)CMC粉末形成的凝膠僅獲得約41kPa的值。[0094]實施例7[0095]多糖混合物[0096]在系列試驗中，粉末狀殼聚糖(超低分子量殼聚糖低聚糖乳酸鹽，或BI0CHEMICATM低粘度或中等粘度螃蟹殼殼聚糖，這些都來自Sigma-Aldrich公司）是以其本身、殼聚糖混合物或以與實施例1粉末狀CMC的混合物使用的，并與用不同量的HC1或醋酸酸化的水混合。形成的混合物用動力型攪拌器攪動5分鐘。這樣做使得能夠進行下述抗微生物測試，但如果要求在手術前進行則非常不便利。評估攪拌的溶液以確定所形成凝膠對大腸桿菌(E.Coli)、金黃色葡萄球菌(S.Aureus)、綠膿桿菌(P.Aeruginosa)，以及某些情形中對肺炎鏈球菌(S·Pneumoniae)的抗微生物活性?？刮⑸锘钚栽u估使用抑菌板方法的改進抑菌圈(modifiedzone)，其中少量凝膠跨瓊脂平板劃線，該瓊脂平板已經(jīng)以所需的微生物新劃線。與抑菌測試中傳統(tǒng)抑菌圈不同一一其中抗生素浸泡的紙盤是貼著瓊脂表面設置的且抗生素經(jīng)瓊脂向外擴散，凝膠的粘性阻止了這樣的擴散。因此結果在本質(zhì)上符合Boolean邏輯，且主要提供是否發(fā)生抑菌的指示。結果在下面表1中示出。[0101]表1中的結果表明，殼聚糖和殼聚糖與多糖羧甲基纖維素的混合物可被再水化以提供具有固有抗微生物性的凝膠層。[0102]實施例8[0103]自由流動交聯(lián)的粉末可通過在水中溶解干燥粉末狀多糖聚合物如羧甲基殼聚糖以產(chǎn)生含約5wt.%聚合物的粘性溶液進行制備。通過將每種溶液裝入10mLLUER-L0K?注射器(Becton，Dickinson公司），用LUER?連接器(Becton，Dickinson公司）連接該注射器與另一注射器，并交替地下壓注射器柱塞以在兩個注射器之間交換流體數(shù)次，將含l〇wt.%雙醛淀粉或〇.lwt.%戊二醛的交聯(lián)劑溶液與聚合物溶液快速混合。停頓短時間后一一該時間內(nèi)發(fā)生交聯(lián)，應獲得粘性凝膠。通過冷凍和凍干已凍的凝膠，然后研磨凍干產(chǎn)品，凝膠可轉(zhuǎn)化為顆粒。[0104]實施例9[0105]自由流動交聯(lián)的粉末也可通過在非溶劑化液體交聯(lián)劑或非溶劑化交聯(lián)劑溶液中浸泡干燥的粉末狀多糖聚合物而制備。實施例8中使用的干燥粉末狀羧甲基殼聚糖原料可被浸泡在乙二醇二縮水甘油醚(如Sigma-Aldrich的E27203乙二醇二縮水甘油醚）中足夠長時間，以允許交聯(lián)發(fā)生。形成的自由流動的、交聯(lián)顆粒的物質(zhì)以甲醇洗滌，除去殘余交聯(lián)劑并微熱干燥。取決于所選多糖，可采用多種交聯(lián)劑。例如，乙二醇二縮水甘油醚可以用六亞甲基二縮水甘油醚或與羥基或氨基反應的其他縮水甘油基交聯(lián)劑代替。如果多糖含伯胺基，則可采用適當反應性的交聯(lián)劑，如雙醛淀粉、氧化的甲基纖維素或戊二醛。[0106]實施例10[0107]用類似于實施例8所述的10mL注射器的兩個3mL注射器，快速混合等體積的2.5wt.%的羧甲基殼聚糖在PBS中的溶液和1Owt.%的雙醛淀粉。得到的粘性水凝膠從注射器后面擠出以提供保持形狀的物質(zhì)。[0108]實施例11[0109]等體積的5wt.%的羧甲基殼聚糖在PBS中的溶液在冷凍和室溫下經(jīng)電子束輻射交聯(lián)。將得到的水凝膠凍干為可容易粉末化的海綿體。當放入PBS中時，海綿體保持三到七天。[0110]盡管在本文中已經(jīng)闡明并且描述了具體的實施方式，用于說明優(yōu)選的實施方式，但本領域普通技術人員要理解的是預期達到相同目的的大量可替代的或等價的實現(xiàn)方式可以代替所示和所述的【具體實施方式】，而不背離本發(fā)明的范圍。本申請意在涵蓋本文所討論的優(yōu)選實施方式的任何改動或變型。因此，顯然，本發(fā)明旨在僅由權利要求及其等同形式來限制?！局鳈囗棥?.一種將干粉組合物轉(zhuǎn)變?yōu)槟z的方法，所述方法包括：a)將自由流動的多糖顆粒分散在生物相容的水易混溶的極性分散劑中，以及b)將所得到的分散體與充足的所述顆粒的水性溶劑合并從而將它們轉(zhuǎn)變?yōu)檎承运z。2.根據(jù)權利要求1所述的方法，其中所述水易混溶的極性分散劑是水，以及所述顆粒的水性溶劑是酸化水。3.根據(jù)權利要求1所述的方法，其中所述水易混溶的極性分散劑包括乙醇。4.根據(jù)權利要求1所述的方法，其中所述水易混溶的極性分散劑包括異丙醇或丙酮。5.根據(jù)權利要求1所述的方法，其中所述多糖顆粒已被交聯(lián)。6.根據(jù)權利要求1所述的方法，其中所述多糖顆粒已被脫水熱交聯(lián)。7.根據(jù)權利要求1所述的方法，其中所述多糖顆粒已經(jīng)用單獨的交聯(lián)劑交聯(lián)。8.根據(jù)權利要求1所述的方法，其中所述多糖顆粒是未交聯(lián)的。9.根據(jù)權利要求1所述的方法，其中所述多糖顆粒是基本上不含膠原的。10.根據(jù)權利要求1所述的方法，其中所述多糖顆?；臼菃我坏亩嗵恰?1.根據(jù)權利要求1所述的方法，其中所述多糖顆粒是兩種或更多種多糖的混合物。12.根據(jù)權利要求1所述的方法，其中所述多糖包括纖維素、殼聚糖、瓊脂、藻酸鹽、角叉菜膠、幾丁質(zhì)、硫酸軟骨素、葡聚糖、半乳甘露聚糖、糖原質(zhì)、透明質(zhì)酸、淀粉及其混合物。13.根據(jù)權利要求1所述的方法，其中所述多糖包括氧化的多糖或鹽。14.根據(jù)權利要求1所述的方法，其中所述多糖包括羧甲基纖維素。15.根據(jù)權利要求1所述的方法，其中所述多糖基本上只是羧甲基纖維素。16.根據(jù)權利要求1所述的方法，其中所述多糖包括殼聚糖。17.根據(jù)權利要求16所述的方法，其中所述殼聚糖是未修飾的。18.根據(jù)權利要求1所述的方法，其中所述多糖包括殼聚糖和另一種多糖的混合物。19.根據(jù)權利要求1所述的方法，其中所述多糖包括羧甲基纖維素和殼聚糖的混合物。20.根據(jù)權利要求1所述的方法，其包括形成粘性水凝膠，而沒有可見的未水化多糖的團塊。21.根據(jù)權利要求1所述的方法，進一步包括將所述粘性水凝膠的層注射或噴霧在粘膜組織上。22.根據(jù)權利要求1所述的方法，進一步包括將所述粘性水凝膠注射或噴霧在肢體的開口、隱窩、通道或關節(jié)中。23.根據(jù)權利要求1所述的方法，進一步包括將所述粘性水凝膠注射或噴霧在脊柱中的開口、隱窩、通道或關節(jié)中?！疚臋n編號】C08L1/28GK106046396SQ201610369681【公開日】2016年10月26日【申請日】2009年4月23日【發(fā)明人】M·F·米恩笛,D·A·奧利弗,B·J·瓦卡洛【申請人】麥德托尼克公司