一種快速高通量篩選油藏本源聚合物產(chǎn)生菌的方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及油藏微生物菌種資源研究領(lǐng)域，具體為一種用于快速高通量篩選油藏本源聚合物產(chǎn)生菌的方法。該方法主要步驟如下：取目標(biāo)油藏采出液在模擬油藏溫度下富集培養(yǎng)，對(duì)富集培養(yǎng)液進(jìn)行平板劃線或稀釋涂布，獲得單菌落；分別挑取不同形態(tài)的單菌落接種于裝有發(fā)酵培養(yǎng)基的96孔板的小孔內(nèi)，覆蓋上無(wú)菌透氣膜，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；用滅菌牙簽挑取96孔內(nèi)的發(fā)酵液，選取發(fā)酵液能拉絲的菌株進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)和粘度測(cè)定驗(yàn)證，獲得油藏本源的聚合物產(chǎn)生菌。本發(fā)明方法是一種簡(jiǎn)便，快捷，高通量的篩選油藏本源聚合物產(chǎn)生菌的方法，為油藏聚合物產(chǎn)生菌的資源研究奠定了方法基礎(chǔ)。
【專利說(shuō)明】
一種快速高通量篩選油藏本源聚合物產(chǎn)生菌的方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及油藏微生物菌種資源研究領(lǐng)域，具體為一種用于快速高通量篩選油藏 本源聚合物產(chǎn)生菌的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 聚合物可以調(diào)整油層的吸水剖面，控制高滲地層的流度比；還可以選擇性封堵地 層，改善地層滲透率，增大掃油面積，并降低水油比。在水驅(qū)過(guò)程中，聚合物可以增加水相的 粘度，降低水相的流動(dòng)性，減少指進(jìn)，提高波及系數(shù)與掃油效率，從而提高采收率。目前，所 使用的聚丙烯酰胺等化學(xué)聚合物耐溫抗鹽性差，一般只適用于礦化度低、二價(jià)金屬離子含 量少的油藏。生物聚合物與化學(xué)聚合物相比，在高鹽度下仍保持較高的粘度，抗剪切能力 強(qiáng)，剪切力存在下分子結(jié)構(gòu)不發(fā)生變化、剪切力消失后粘度具有可恢復(fù)性。
[0003] 微生物提高采油率因其潛力大、成本低、環(huán)境友好，有望成為油田高含水開(kāi)發(fā)后期 的主力驅(qū)油技術(shù)之一。利用微生物代謝產(chǎn)生生物聚合物是微生物提高采油率的機(jī)理之一。 因此，篩選出適合于不同油藏的聚合物產(chǎn)生菌種資源，具有重要意義。但是，目前從油藏采 出液中篩選聚合物產(chǎn)生菌的方法，工作量大，篩選效率較低。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的在于提供一種快速高通量篩選油藏本源聚合物產(chǎn)生的方法，解決現(xiàn) 有篩選方法工作量大、操作繁瑣、篩選效率低等問(wèn)題，采用該方法可以簡(jiǎn)單、快速地篩選獲 得目標(biāo)油藏本源聚合物產(chǎn)生菌種資源。
[0005] 本發(fā)明所提供的篩選油藏本源聚合物產(chǎn)生菌株的方法，具體步驟如下：
[0006] -種快速高通量篩選油藏本源聚合物產(chǎn)生菌的方法，1)目標(biāo)油藏采出液先在模擬 油藏溫度下富集培養(yǎng)，然后，對(duì)富集培養(yǎng)液進(jìn)行平板劃線或稀釋涂布，獲得單菌落;2)挑取 單菌落接種于裝有發(fā)酵培養(yǎng)基的微生物培養(yǎng)板或細(xì)胞培養(yǎng)板的小孔內(nèi)，在培養(yǎng)板上覆蓋無(wú) 菌透氣膜，進(jìn)行培養(yǎng);3)培養(yǎng)結(jié)束后，用滅菌牙簽挑取細(xì)胞培養(yǎng)板板孔內(nèi)的發(fā)酵液，選取發(fā) 酵液能拉絲的菌株即為潛在的油藏本源聚合物產(chǎn)生菌。
[0007] 步驟1)取目標(biāo)油藏采出液加入到裝有富集培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中，在模擬油藏溫度 下、160-200rpm/min，富集培養(yǎng) 2-4 天；
[0008] 目標(biāo)油藏采出液與富集培養(yǎng)基體積比為2-6:100;
[0009] 富集培養(yǎng)基配方為：可溶性淀粉3〇-45g，NaN〇3 0.5-1.5g，KH2P〇4 0.5-1.5g，MgS〇4 0.25-0.75g，KCl l-1.5g，NaCl l-1.5g,酵母膏l(xiāng)-1.2g，去離子水 1L。
[0010] 步驟2)將富集培養(yǎng)后分離到的單菌落，分別接種于裝有0.08-0.12ml發(fā)酵培養(yǎng)基 的微生物培養(yǎng)板或細(xì)胞培養(yǎng)板的小孔內(nèi)中，并至少留下一孔不接種作為空白對(duì)照，并在培 養(yǎng)板上覆蓋無(wú)菌透氣膜;在模擬油藏溫度下、160-200rpm/min，培養(yǎng)2-4天；
[0011] 發(fā)酵培養(yǎng)基配方為：可溶性淀粉30-45g，NaN03 0.5-1.5g，KH2P04 0.5-1.5g，K2HP〇4 0 · 5-1 · 5g，MgS〇4 0 · 25-0 · 75g，去離子水 1L。
[0012] 步驟3)取出培養(yǎng)后的微生物培養(yǎng)板或細(xì)胞培養(yǎng)板，在超凈工作臺(tái)中，用滅菌的牙 簽攪拌后，逐一挑取培養(yǎng)板上各小孔內(nèi)的發(fā)酵液，觀察發(fā)酵液是否具有拉絲特性，發(fā)酵液能 拉出肉眼可見(jiàn)絲線的菌株，即為潛在的油藏本源聚合物產(chǎn)生菌。
[0013] 將油藏本源聚合物產(chǎn)生菌進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)和粘度測(cè)定驗(yàn)證，獲得油藏本源的聚合物 產(chǎn)生菌:選取潛在的油藏本源聚合物產(chǎn)生菌（即培養(yǎng)板內(nèi)發(fā)酵液能拉絲的菌株)接種于裝有 發(fā)酵培養(yǎng)基的搖瓶中，挑取2-3接種環(huán)培養(yǎng)板內(nèi)能拉絲的發(fā)酵液于70ml-100ml發(fā)酵培養(yǎng)基 中，在模擬油藏溫度下、160-200rpm/min，進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)4-6天;然后，測(cè)定發(fā)酵液的粘度，進(jìn) 一步驗(yàn)證菌株產(chǎn)胞外聚合物的能力，于35°C、粘度計(jì)轉(zhuǎn)子轉(zhuǎn)速為50rpm條件下，測(cè)定發(fā)酵液 粘度高于20(通常為20-8000)mpa · s的菌株即為最終獲得的目的菌株。
[0014]利用旋轉(zhuǎn)粘度計(jì)（如Brookfield博力飛粘度計(jì))對(duì)潛在的聚合物產(chǎn)生菌的發(fā)酵液 進(jìn)行粘度測(cè)定，待粘度計(jì)調(diào)零校正后，向粘度計(jì)的測(cè)量杯中加入70-100ml發(fā)酵液，啟動(dòng)粘度 計(jì)轉(zhuǎn)子進(jìn)行粘度檢測(cè)，待讀數(shù)穩(wěn)定l〇min-15min以上后，讀取粘度計(jì)所顯示的數(shù)值作為發(fā)酵 液的粘度值。
[0015] 步驟2)挑取單菌落時(shí)，挑取盡可能多的不同形態(tài)的單菌落;而相同形態(tài)的單菌落 中挑取至少一個(gè)。
[0016] 可溶性淀粉為用大米、玉米、小米、土豆的淀粉制備的可溶性淀粉中的一種或二種 以上。
[0017]模擬油藏溫度是指采出液的來(lái)源油藏的溫度。
[0018] 模擬油藏溫度為25-45Γ。
[0019] 微生物培養(yǎng)板或細(xì)胞培養(yǎng)板為96孔板
[0020] 本發(fā)明的有益效果：
[0021 ] 1)將96孔板加入到菌種篩選過(guò)程中，提高了篩選通量和速度。
[0022] 2)利用發(fā)酵液是否拉絲作為聚合物產(chǎn)生菌的篩選標(biāo)準(zhǔn)，簡(jiǎn)單實(shí)用，并且提高了篩 選效率。
【附圖說(shuō)明】
[0023] 圖1為實(shí)施例1高通量篩選聚合物產(chǎn)生菌的發(fā)酵液拉絲效果圖。
【具體實(shí)施方式】
[0024] 1)培養(yǎng)基的制備：
[0025] 富集培養(yǎng)基的制備：用電子天平分別稱量：40g可溶性淀粉，0.5g NaN03,0.5g KH2P〇4,0.25g MgS〇4，lg KCl，lg NaCl，lg酵母膏，在去離子水中混勻后使用容量瓶中定容 到1L，加氫氧化鈉調(diào)節(jié)PH值至7.2，分裝后于115°(：滅菌3〇1^11。
[0026] 發(fā)酵培養(yǎng)基的制備：用電子天平分別稱量：40g可溶性淀粉，0.5g NaN03,0.5g KH2P〇4，0 · 5g K2HP〇4，0 · 25g MgS〇4，在去離子水中混勻后使用容量瓶中定容到1L，加氫氧化 鈉調(diào)節(jié)PH值至7.2，分裝后于115°(：滅菌3〇1^11。
[0027] LB培養(yǎng)基的制備：用電子天平分別稱量：10g NaCl，10g蛋白胨，5g酵母膏，在去離 子水中混勻后使用容量瓶中定容到1L，加氫氧化鈉調(diào)節(jié)PH值至7.2，分裝后于121°C滅菌 20min〇
[0028] 2)油藏采出液的富集培養(yǎng):在超凈工作臺(tái)中，取5ml油藏采出液加入到裝有100ml 富集培養(yǎng)基的250ml三角瓶中。然后，在模擬油藏溫度下、180rpm/min，培養(yǎng)3天。
[0029]富集培養(yǎng)基配方為：可溶性淀粉40g，NaN03 0.5g，KH2P〇4 0.5g，MgS〇4 0.25g，KCl lg，NaCl lg,酵母膏l(xiāng)g，去離子水定容1L。
[0030] 3)獲得單菌落:用滅菌的接種環(huán)取一環(huán)富集培養(yǎng)液，在超凈工作臺(tái)中，劃線到LB平 板上;將劃線后的LB平板在恒溫培養(yǎng)箱中于模擬油藏溫度下倒置培養(yǎng)1天。
[0031 ] 4)單菌落的高通量培養(yǎng):挑取菌落形態(tài)不同（東秀珠，蔡妙英等.2001.常見(jiàn)細(xì)菌系 統(tǒng)鑒定手冊(cè).科學(xué)出版社.北京.）的單菌落分別接種到每孔裝有〇. lml發(fā)酵培養(yǎng)基的微生物 96孔培養(yǎng)板中，在恒溫培養(yǎng)箱中于模擬油藏溫度下培養(yǎng)3天。
[0032]發(fā)酵培養(yǎng)基配方為：可溶性淀粉40g，NaN03 0.5g，KH2P〇4 0.5g，K2HP〇4 0.5g，MgS〇4 0.25g，去離子水定容1L。
[0033] 5)發(fā)酵液拉絲法篩選具有聚合物產(chǎn)生潛力的菌株:將培養(yǎng)完成的96孔培養(yǎng)板放入 超凈工作臺(tái)中，用滅菌的牙簽略作攪拌后，逐一挑取各個(gè)小孔內(nèi)的發(fā)酵液，發(fā)酵液能拉出肉 眼可見(jiàn)絲線的菌株，為陽(yáng)性菌株，記為"+" ；發(fā)酵液不能拉絲的菌株，記為。
[0034] 6)菌株產(chǎn)聚合物的驗(yàn)證：用接種環(huán)分別挑取5)中篩選出的陽(yáng)性菌株的發(fā)酵液2-3 接種環(huán)接種到裝有70ml-100ml發(fā)酵培養(yǎng)基的250ml搖瓶中。在模擬油藏溫度下，180rpm/ min，培養(yǎng)5天。培養(yǎng)結(jié)束后，使用粘度計(jì)對(duì)菌株的發(fā)酵液進(jìn)行粘度測(cè)定，驗(yàn)證該快速高通量 篩選方法的準(zhǔn)確性，并最終獲得油藏本源聚合物產(chǎn)生菌菌種資源。
[0035] 以下通過(guò)具體實(shí)施例，對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案做進(jìn)一步具體的說(shuō)明，但是本發(fā)明并 不限于如下實(shí)施例。
[0036] 實(shí)施例1:
[0037]應(yīng)用本發(fā)明方法從某油田七中區(qū)油藏采出液中篩選聚合物產(chǎn)生菌，具體過(guò)程如 下：
[0038]在超凈工作臺(tái)中，取某油田的油藏采出液5ml，加入到裝有100ml富集培養(yǎng)基的 250ml搖瓶中，并于39°C，180rpm/min的條件下，進(jìn)行為期3天的富集培養(yǎng)。
[0039]用滅菌的接種環(huán)取一環(huán)富集培養(yǎng)液在LB平板上劃線，平板在培養(yǎng)箱中經(jīng)過(guò)24h培 養(yǎng)后，于超凈工作臺(tái)中，用滅菌牙簽挑取平板上的93個(gè)單菌落接入每孔裝有0. lml發(fā)酵培養(yǎng) 基的96孔板中，并覆蓋透氣膜，于39°C，180rpm/min的條件下，培養(yǎng)3天。其中，d5，d6，d7三個(gè) 孔為不接菌的對(duì)照。
[0040] 對(duì)各個(gè)小孔內(nèi)的發(fā)酵液進(jìn)行拉絲檢測(cè)，篩選具有聚合物產(chǎn)生潛力的菌株，將培養(yǎng) 后的96孔板放入超凈工作臺(tái)中，輕輕揭開(kāi)透氣膜，記錄下目標(biāo)孔編號(hào)后，用滅菌的牙簽略作 攪拌后挑取發(fā)酵液，能拉出肉眼可見(jiàn)絲線的發(fā)酵液，為陽(yáng)性菌株，記為"+"。獲得了 10株具有 聚合物產(chǎn)生潛力的菌株，結(jié)果如表1所不，編號(hào)分別為al，a8，a9，d2，dl2，e3，f5，gl，g3和 hl0〇
[0041] 用接種環(huán)分別挑取全部93個(gè)菌株的發(fā)酵液2接種環(huán)分別接種到裝有70ml發(fā)酵培養(yǎng) 基的250ml搖瓶中，于39°C，180rpm/min的條件下，培養(yǎng)5天。培養(yǎng)結(jié)束后，測(cè)定發(fā)酵液粘度， 對(duì)陽(yáng)性菌株的產(chǎn)聚合物能力進(jìn)一步驗(yàn)證，獲得某油藏本源的聚合物產(chǎn)生菌。為了驗(yàn)證發(fā)明 方法的可靠性，結(jié)果為陰性的菌株，在此也進(jìn)行了擴(kuò)大培養(yǎng)和粘度檢測(cè)，實(shí)際應(yīng)用時(shí)可不做 此步。各個(gè)菌株發(fā)酵液相應(yīng)的粘度值如表1所示。
[0042]實(shí)施例1的結(jié)果(如表1所示)表明，發(fā)酵液拉絲結(jié)果為陰性的菌株，后期擴(kuò)大培養(yǎng)， 檢測(cè)其發(fā)酵液的粘度與不接菌的對(duì)照發(fā)酵液類似，均小于2mpa · s;而陽(yáng)性菌株，后期擴(kuò)大 培養(yǎng)，檢測(cè)其發(fā)酵液的粘度在36.7-2384mpa · s之間，證明了此方法作為聚合物產(chǎn)生菌篩選 方法的可靠性。在96孔板中，除去d5，d6，d7三個(gè)不接菌的對(duì)照，對(duì)93個(gè)菌株通過(guò)發(fā)酵液拉絲 檢測(cè)，可以排除83個(gè)陰性菌株，只需對(duì)10個(gè)陽(yáng)性菌株進(jìn)行下一步的擴(kuò)大培養(yǎng)，粘度測(cè)定驗(yàn)證 表明，10個(gè)陽(yáng)性菌株均為聚合物產(chǎn)生，充分顯示出了該快速高通量篩選方法的高效性和可 靠性。
[0043]表1:某油田七中區(qū)油藏采出液中聚合物產(chǎn)生菌篩選結(jié)果 [0044]
[0045]
[0046] 實(shí)施例2:
[0047] 應(yīng)用本發(fā)明方法從某油田采油二廠油藏采出液中篩選聚合物產(chǎn)生菌，
[0048] 具體過(guò)程如下：
[0049]在超凈工作臺(tái)中，取油藏采出液5ml，加入到裝有100ml富集培養(yǎng)基的250ml搖瓶 中，并于45°C，180rpm/min的條件下，進(jìn)行為期3天的富集培養(yǎng)。
[0050]用滅菌的接種環(huán)取一環(huán)富集培養(yǎng)液在LB平板上劃線，平板在培養(yǎng)箱中經(jīng)過(guò)24h培 養(yǎng)后，于超凈工作臺(tái)中，用滅菌牙簽挑取平板上的單菌落接入每孔裝有〇. lml發(fā)酵培養(yǎng)基的 96孔板中，并覆蓋透氣膜，于45°C，180rpm/min的條件下，培養(yǎng)3天。其中，hlO，hll，hl2Sf 孔為不接菌的對(duì)照。
[0051 ]對(duì)各個(gè)小孔內(nèi)的發(fā)酵液進(jìn)行拉絲檢測(cè)，篩選具有聚合物產(chǎn)生潛力的菌株，將培養(yǎng) 后的96孔板放入超凈工作臺(tái)中，輕輕揭開(kāi)透氣膜，記錄下目標(biāo)孔編號(hào)后，用滅菌的牙簽略作 攪拌后挑取發(fā)酵液，能拉出肉眼可見(jiàn)絲線的發(fā)酵液，為陽(yáng)性菌株，記為"+"。獲得了 8株具有 聚合物產(chǎn)生潛力的菌株，結(jié)果如表2所不，編號(hào)分別為b2，b6，b7，d4，d8，el，g4和g9。
[0052] 用接種環(huán)分別挑取8個(gè)陽(yáng)性菌株的發(fā)酵液2接種環(huán)分別接種到裝有100ml發(fā)酵培養(yǎng) 基的250ml搖瓶中。于45°C，180rpm/min的條件下，培養(yǎng)5天。培養(yǎng)結(jié)束后，測(cè)定發(fā)酵液粘度， 對(duì)陽(yáng)性菌株的產(chǎn)聚合物能力進(jìn)一步驗(yàn)證，獲得某油藏本源的聚合物產(chǎn)生菌。8個(gè)菌株發(fā)酵液 相應(yīng)的粘度值如表2所示。
[0053] 結(jié)果表明，經(jīng)96孔板培養(yǎng)，發(fā)酵液拉絲檢測(cè)后，篩到8株陽(yáng)性菌，經(jīng)擴(kuò)大培養(yǎng)后，測(cè) 定發(fā)酵液粘度為68-1672mpa · s，即8株菌均為聚合物產(chǎn)生菌。
[0054]表2:某油田采油二廠油藏采出液中聚合物產(chǎn)生菌篩選結(jié)果 [0055]
[0056]
[0057] 本發(fā)明方法是一種簡(jiǎn)便，快捷，高通量的篩選油藏本源聚合物產(chǎn)生菌的方法，為油 藏聚合物產(chǎn)生菌的資源研究奠定了方法基礎(chǔ)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種快速高通量篩選油藏本源聚合物產(chǎn)生菌的方法，其特征在于：1)目標(biāo)油藏采出 液先在模擬油藏溫度下富集培養(yǎng)，然后，對(duì)富集培養(yǎng)液進(jìn)行平板劃線或稀釋涂布，獲得單菌 落;2)挑取單菌落接種于裝有發(fā)酵培養(yǎng)基的微生物培養(yǎng)板或細(xì)胞培養(yǎng)板的小孔內(nèi)，在培養(yǎng) 板上覆蓋無(wú)菌透氣膜，進(jìn)行培養(yǎng);3)培養(yǎng)結(jié)束后，用滅菌牙簽挑取細(xì)胞培養(yǎng)板板孔內(nèi)的發(fā)酵 液，選取發(fā)酵液能拉絲的菌株即為潛在的油藏本源聚合物產(chǎn)生菌。2. 按照權(quán)利要求1所述的快速高通量篩選油藏本源聚合物產(chǎn)生菌的方法，其特征在于： 步驟1)取目標(biāo)油藏采出液加入到裝有富集培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中，在模擬油藏溫度下、160-200rpm/min，富集培養(yǎng)2-4天； 目標(biāo)油藏采出液與富集培養(yǎng)基體積比為2-6:100; 富集培養(yǎng)基配方為：可溶性淀粉30_45g，NaN03 0.5-1.5g，KH2P〇4 0.5-1.5g，MgS〇4 0.25-0.75g，KCl l-1.5g，NaCl l-1.5g,酵母膏l(xiāng)-1.2g，去離子水 1L。3. 按照權(quán)利要求1所述的快速高通量篩選油藏本源聚合物產(chǎn)生菌的方法，其特征在于： 步驟2)將富集培養(yǎng)后分離到的單菌落，分別接種于裝有0.08-0.12ml發(fā)酵培養(yǎng)基的微生物 培養(yǎng)板或細(xì)胞培養(yǎng)板的小孔內(nèi)中，并至少留下一孔不接種作為空白對(duì)照，并在培養(yǎng)板上覆 蓋無(wú)菌透氣膜;在模擬油藏溫度下、160-200rpm/min，培養(yǎng)2-4天； 發(fā)酵培養(yǎng)基配方為:可溶性淀粉3〇-458，恥勵(lì)30.5-1.58，1012?〇4〇.5-1.58，1( 2冊(cè)〇4〇.5-1.5g，MgS〇4 0.25-0.75g，去離子水 1L。4. 按照權(quán)利要求1所述的高快速高通量篩選油藏本源聚合物產(chǎn)生菌的方法，其特征在 于:步驟3)取出培養(yǎng)后的微生物培養(yǎng)板或細(xì)胞培養(yǎng)板，在超凈工作臺(tái)中，用滅菌的牙簽攪拌 后，逐一挑取培養(yǎng)板上各小孔內(nèi)的發(fā)酵液，觀察發(fā)酵液是否具有拉絲特性，發(fā)酵液能拉出肉 眼可見(jiàn)絲線的菌株，即為潛在的油藏本源聚合物產(chǎn)生菌。5. 按照權(quán)利要求1所述的快速高通量篩選油藏本源聚合物產(chǎn)生菌的方法，其特征在于： 將油藏本源聚合物產(chǎn)生菌進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)和粘度測(cè)定驗(yàn)證，獲得油藏本源的聚合物產(chǎn)生 菌:選取潛在的油藏本源聚合物產(chǎn)生菌（即培養(yǎng)板內(nèi)發(fā)酵液能拉絲的菌株)接種于裝有發(fā)酵 培養(yǎng)基的搖瓶中，挑取2-3接種環(huán)培養(yǎng)板內(nèi)能拉絲的發(fā)酵液于70ml-100ml發(fā)酵培養(yǎng)基中，在 模擬油藏溫度下、160-200rpm/min，進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)4-6天;然后，測(cè)定發(fā)酵液的粘度，進(jìn)一步 驗(yàn)證菌株產(chǎn)胞外聚合物的能力，于35°C、粘度計(jì)轉(zhuǎn)子轉(zhuǎn)速為50rpm條件下，測(cè)定發(fā)酵液粘度 高于20mpa · s的菌株即為最終獲得的目的菌株。6. 按照權(quán)利要求5所述的快速高通量篩選油藏本源聚合物產(chǎn)生菌的方法，其特征在于： 利用旋轉(zhuǎn)粘度計(jì)對(duì)潛在的聚合物產(chǎn)生菌的發(fā)酵液進(jìn)行粘度測(cè)定，待粘度計(jì)調(diào)零校正后，向 粘度計(jì)的測(cè)量杯中加入7 0 -10 0 m 1發(fā)酵液，啟動(dòng)粘度計(jì)轉(zhuǎn)子進(jìn)行粘度檢測(cè)，待讀數(shù)穩(wěn)定 10min-15min以上后，讀取粘度計(jì)所顯示的數(shù)值作為發(fā)酵液的粘度值。7. 按照權(quán)利要求1所述的快速高通量篩選油藏本源聚合物產(chǎn)生菌的方法，其特征在于： 步驟2)挑取單菌落時(shí)，挑取盡可能多的不同形態(tài)的單菌落;而相同形態(tài)的單菌落中挑 取至少一個(gè)。8. 按照權(quán)利要求2或3所述的快速高通量篩選油藏本源聚合物產(chǎn)生菌的方法，其特征在 于： 可溶性淀粉為用大米、玉米、小米、土豆的淀粉制備的可溶性淀粉中的一種或二種以 上。9. 按照權(quán)利要求1、2、3或5所述的快速高通量篩選油藏本源聚合物產(chǎn)生菌的方法，其特 征在于:模擬油藏溫度是指采出液的來(lái)源油藏的溫度。10. 按照權(quán)利要求1、2、3或5所述的快速高通量篩選油藏本源聚合物產(chǎn)生菌的方法，其 特征在于:模擬油藏溫度為25-45Γ。
【文檔編號(hào)】C12N1/02GK106085862SQ201610398618
【公開(kāi)日】2016年11月9日
【申請(qǐng)日】2016年6月6日
【發(fā)明人】張穎, 郭超, 趙峰, 史榮久, 崔慶鋒, 韓斯琴
【申請(qǐng)人】中國(guó)科學(xué)院沈陽(yáng)應(yīng)用生態(tài)研究所, 中國(guó)石油天然氣股份有限公司勘探開(kāi)發(fā)研究院廊坊分院