專利名稱：用蜂蜜殘?jiān)龠M(jìn)宿輪蟲生長的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于水污染控制技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種用生物活性物質(zhì)促進(jìn)宿輪蟲 (ifo6rafrac^sp.)生長的方法。通過投加富含活性物質(zhì)的蜂蜜殘?jiān)_(dá)到有效促進(jìn) 宿輪蟲的生長的目的。
背景技術(shù)：
宿輪蟲是一種在基質(zhì)(活性污泥、生物膜)上周叢生活、以懸浮顆粒為食物的小 型后生動(dòng)物，它對(duì)減少污水處理系統(tǒng)中的懸浮固體并提高透視度有很大貢獻(xiàn)，但其在 污水處理裝置中的密度卻不高，因此，設(shè)法促進(jìn)宿輪蟲的生長從而提高其密度對(duì)污水 處理具有非常重要的意義。
生物活性物質(zhì)是一類植物或動(dòng)物內(nèi)源性物質(zhì)，對(duì)生物機(jī)體有特定的活性功能。目 前生物活性物質(zhì)主要用于醫(yī)療衛(wèi)生、健康保健等方面，而用于如輪蟲這樣的小型后生 動(dòng)物的研究還很少。當(dāng)前的研究僅發(fā)現(xiàn)幾種生育酚化合物可增加宿輪蟲的壽命和生育 力，但對(duì)污水處理經(jīng)濟(jì)成本過高。因此尋找一種經(jīng)濟(jì)有效的生物活性物質(zhì)成為解決宿 輪蟲在污水處理裝置中的密度的關(guān)鍵性問題。
蜂蜜殘?jiān)翘崛》涿酆笫Ｓ嗟膹U渣，內(nèi)含很多蜂膠和花粉，它們中含有黃酮類、 萜烯類、維生素和其它生物活性物質(zhì)。目前利用蜂蜜殘?jiān)鼇泶龠M(jìn)宿輪蟲的生長尚屬首 例，其對(duì)資源的循環(huán)利用也有重要的意義。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種有效促進(jìn)宿輪蟲生長的方法。
本發(fā)明是通過投加富含活性物質(zhì)的蜂蜜殘?jiān)?，使宿輪蟲的生長得到顯著促進(jìn)；同 時(shí)可使蜂蜜殘?jiān)儚U為用，實(shí)現(xiàn)資源的循環(huán)利用。
一種用蜂蜜殘?jiān)龠M(jìn)宿輪蟲生長的方法，其特征在于具體步驟如下
a. 配制輪蟲的培養(yǎng)液，其配比為0.06 1.00gCaCO3， 6 8mL 1M的磷酸鹽緩沖液
(pH=6.5)，加入蒸餾水配至lOOOmL，煮沸并滅菌；
b. 用肉湯培養(yǎng)基大量培養(yǎng)葡萄球菌(5top/^/ococa^)，經(jīng)離心后作為輪蟲食物；
c. 預(yù)培養(yǎng)從污水中采集宿輪蟲，分離后置入口徑為60mm的培養(yǎng)皿中，加入8mL步驟a的培養(yǎng)液、步驟b的葡萄球菌10S 10Scells'mL—1、蜂蜜殘?jiān)?昭，實(shí)驗(yàn)室 內(nèi)在25'C光照培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)，預(yù)培養(yǎng)時(shí)間持續(xù)7天；
d. 在培養(yǎng)皿中放入6個(gè)從預(yù)培養(yǎng)的培養(yǎng)皿中隨機(jī)挑取的輪蟲幼體(不帶卵輪蟲)，加 入8mL的輪蟲培養(yǎng)液，葡萄球菌10S 10Scells'mL'1，再加入3 15昭的蜂蜜殘?jiān)?每天向培養(yǎng)皿中補(bǔ)充與初始日培養(yǎng)皿中含同等濃度的蜂蜜殘?jiān)捌咸亚蚓妮喯x 培養(yǎng)液；
e. 每隔24小時(shí)計(jì)數(shù)培養(yǎng)容器中成活宿輪蟲的數(shù)量，培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)ll天后結(jié)束。
本發(fā)明的主要內(nèi)容為在口徑為60mm的培養(yǎng)皿中，內(nèi)含8mL用CaC03、磷酸 鹽緩沖液和蒸餾水配制而成的輪蟲培養(yǎng)液，投加不同量的蜂蜜殘?jiān)云咸亚蚓鸀檩?蟲食物，葡萄球菌的投加量為10S l()8celkmL—、在25卩光照培養(yǎng)箱中進(jìn)行輪蟲的 培養(yǎng)。培養(yǎng)時(shí)間為11天，這時(shí)大多數(shù)輪蟲的增長速率開始下降。每隔24小時(shí)計(jì)數(shù)培 養(yǎng)容器中成活宿輪蟲的數(shù)量。試驗(yàn)周期內(nèi)每天向培養(yǎng)皿中補(bǔ)充的輪蟲培養(yǎng)液為與初 始日每個(gè)培養(yǎng)皿中含同等濃度的蜂蜜殘?jiān)捌咸亚蚓?br> 本發(fā)明的特點(diǎn)是選用蜂蜜殘?jiān)@種食品生產(chǎn)廢料作為添加劑用于促進(jìn)宿輪蟲的 生長， 一方面其對(duì)宿輪蟲的促生長作用非常顯著，可使宿輪蟲對(duì)數(shù)增長期內(nèi)的種群增 長率達(dá)0.87d—、遠(yuǎn)高于不投加蜂蜜殘?jiān)鼤r(shí)的0.55d";另一方面可使蜂蜜殘?jiān)儚U為 用，實(shí)現(xiàn)資源的循環(huán)利用，也使未來實(shí)際運(yùn)用到污水處理中時(shí)更經(jīng)濟(jì)。
本發(fā)明制備的宿輪蟲可用于減少污水處理系統(tǒng)中的懸浮固體并提高污水透視度。
具體實(shí)施例方式
本發(fā)明的實(shí)施例是
(1) 配制輪蟲的培養(yǎng)液，其配比為0.06 1.00gCaCO3， 6 8mLlM的磷酸鹽 緩沖液(pH=6.5)，加入約1000mL的蒸餾水，煮沸并滅菌；
(2) 用肉湯培養(yǎng)基大量培養(yǎng)葡萄球菌，經(jīng)離心后作為輪蟲食物；
(3) 預(yù)培養(yǎng)從上海市曲陽污水處理廠好氧工藝段污水中采集宿輪蟲，分離后 置入口徑為60mm的培養(yǎng)皿中，加入8mL步驟(1)的培養(yǎng)液、步驟(2)的葡萄球 菌10S 10ScellsTnU1、蜂蜜殘?jiān)?嗎，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)在25'C光照培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)，預(yù)培 養(yǎng)時(shí)間持續(xù)7天；
(4) 在每個(gè)培養(yǎng)皿中放入6個(gè)從預(yù)培養(yǎng)的培養(yǎng)皿中隨機(jī)挑取的輪蟲幼體(不帶卵輪蟲)，加入8mL的輪蟲培養(yǎng)液，葡萄球菌10S 108cells'mL'1，再分別加入0.0、 4.5 5.0、 7.0 7.5、 9.5 10.0、 12.0 12.5、 14.0 14.5|ag的蜂蜜殘?jiān)?，每個(gè)實(shí)驗(yàn)做 三個(gè)重復(fù)，其中投加蜂蜜殘?jiān)縊.(Hig的設(shè)為控制組，每天向培養(yǎng)皿中補(bǔ)充與初始日 每個(gè)培養(yǎng)皿中含同等濃度的蜂蜜殘?jiān)捌咸亚蚓妮喯x培養(yǎng)液；
(5)每隔24小時(shí)計(jì)數(shù)培養(yǎng)容器中成活宿輪蟲的數(shù)量，培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)ll天后結(jié)束， 這時(shí)大多數(shù)輪蟲的增長速率開始下降。
本實(shí)施例中宿輪蟲的促生長作用非常顯著，可使宿輪蟲對(duì)數(shù)增長期內(nèi)的種群增長 率達(dá)0.87d"，遠(yuǎn)高于對(duì)比例中不投加蜂蜜殘?jiān)鼤r(shí)的0.55cT1。
權(quán)利要求
1. 一種用蜂蜜殘?jiān)龠M(jìn)宿輪蟲生長的方法，其特征在于該方法具體步驟如下a. 配制輪蟲的培養(yǎng)液，將0.06～1.00g CaCO3，6～8mL1M的磷酸鹽緩沖液(pH＝6.5)，加入蒸餾水配至1000mL，煮沸并滅菌；b. 用肉湯培養(yǎng)基大量培養(yǎng)葡萄球菌，經(jīng)離心后作為輪蟲食物；c. 預(yù)培養(yǎng)從污水中采集宿輪蟲，分離后置入口徑為60mm的培養(yǎng)皿中，加入8mL步驟a的培養(yǎng)液、步驟b的葡萄球菌106～108cells·mL-1、蜂蜜殘?jiān)?μg，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)在25℃光照培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)時(shí)間持續(xù)7天；d. 在培養(yǎng)皿中放入6個(gè)從預(yù)培養(yǎng)的培養(yǎng)皿中隨機(jī)挑取的輪蟲幼體(不帶卵輪蟲)，加入8mL的輪蟲培養(yǎng)液，葡萄球菌106～108cells·mL-1，再加入3～15μg的蜂蜜殘?jiān)?，每天向培養(yǎng)皿中補(bǔ)充與初始日培養(yǎng)皿中含同等濃度的蜂蜜殘?jiān)捌咸亚蚓妮喯x培養(yǎng)液；e. 每隔24小時(shí)計(jì)數(shù)培養(yǎng)容器中成活宿輪蟲的數(shù)量，培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)11天后結(jié)束。
全文摘要
本發(fā)明為一種用蜂蜜殘?jiān)龠M(jìn)宿輪蟲生長的方法，屬水污染控制技術(shù)領(lǐng)域。通過投加富含活性物質(zhì)黃酮類和萜烯類等的蜂蜜殘?jiān)_(dá)到有效促進(jìn)宿輪蟲的生長的目的。本發(fā)明是在用CaCO₃、磷酸鹽緩沖液和蒸餾水配制而成的輪蟲培養(yǎng)液中，投加蜂蜜殘?jiān)?，以葡萄球菌為輪蟲食物，在25℃光照培養(yǎng)箱中進(jìn)行輪蟲的培養(yǎng)。本發(fā)明的選用蜂蜜殘?jiān)@種食品生產(chǎn)廢料作為添加劑用于促進(jìn)宿輪蟲的生長，一方面其對(duì)宿輪蟲的促生長作用非常顯著，可使宿輪蟲對(duì)數(shù)增長期內(nèi)的種群增長率達(dá)0.87d^-1，遠(yuǎn)高于不投加蜂蜜殘?jiān)鼤r(shí)的0.55d^-1；另一方面可使蜂蜜殘?jiān)儚U為用，實(shí)現(xiàn)資源的循環(huán)利用，也使未來實(shí)際運(yùn)用到污水處理中時(shí)更經(jīng)濟(jì)。
文檔編號(hào)C02F3/32GK101433190SQ20081020397
公開日2009年5月20日 申請(qǐng)日期2008年12月4日 優(yōu)先權(quán)日2008年12月4日
發(fā)明者丁國際, 楊芳芳, 沈成媛 申請(qǐng)人:上海大學(xué)