專(zhuān)利名稱(chēng)：一種血漿脂質(zhì)成份吸附分離聚合物多孔膜材料、制備及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明提供了一種新型功能聚合物多孔膜材料、制備方法及其在血漿脂質(zhì)成份吸附或分離中的應(yīng)用。該發(fā)明所提供的聚合物多孔膜材料涉及臨床血液凈化應(yīng)用中血漿脂質(zhì)成份的選擇性吸附、分離介質(zhì)材料，屬于生物醫(yī)用材料以及醫(yī)療器械材料領(lǐng)域。該發(fā)明所涉及的一種新型聚合物多孔膜由不同平均孔徑尺寸的醫(yī)用等級(jí)聚合物無(wú)紡布作為出發(fā)材料，經(jīng)過(guò)表面核輻照接枝改性以及表面共價(jià)偶聯(lián)固定系列手臂膽固醇吸附配基等過(guò)程制備得到。
背景技術(shù)：
當(dāng)前心腦血管系統(tǒng)疾病已經(jīng)發(fā)展成為威脅人類(lèi)健康的三大主要臨床疾病之一，全世界每年有800～1000萬(wàn)人死于心血管相關(guān)疾病。據(jù)2006年12月1日發(fā)布的《中國(guó)心血管病報(bào)告2005》統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)，現(xiàn)在中國(guó)臨床死于心血管病的人數(shù)每年已經(jīng)達(dá)到約三百萬(wàn)，占所有總死亡人數(shù)的45％左右，并且這些心腦血管疾病死亡病例又絕大多數(shù)死于高血脂所導(dǎo)致的動(dòng)脈硬化。臨床醫(yī)學(xué)研究表明高脂血癥是引起動(dòng)脈硬化乃至冠心病和心肌梗塞的重要因素[New Eng.J.Med.1990，322，1700]，同時(shí)發(fā)現(xiàn)臨床冠心病與患者血漿脂質(zhì)成份中低密度脂蛋白(LDL)濃度異常，其含量過(guò)高存在緊密關(guān)系[Mayo Clin Proc，1999，74，466]。降低患者血漿脂質(zhì)成份中過(guò)高低密度脂蛋白(LDL)的含量被發(fā)現(xiàn)能夠有效地改善臨床病例的心腦血管流變性和狀況[New Eng.J.Med，1995，333，1301]，有益于高血脂癥所導(dǎo)致的心血管疾病的治療。因而，最新美國(guó)國(guó)家膽固醇教育計(jì)劃(National Cholesterol Education Program，NCEP)指南強(qiáng)調(diào)指出，降低血漿脂質(zhì)成份中低密度脂蛋白(LDL)的濃度已經(jīng)成為預(yù)防動(dòng)脈硬化、降低冠心病發(fā)病率的重要有力措施，尤其是對(duì)于通過(guò)膳食控制和臨床藥物治療都沒(méi)有效果的遺傳性高膽固醇血癥患者顯得更加重要。
為了更高效率、安全地去除臨床高血脂癥病人血漿中的有害脂質(zhì)成份，如低密度脂蛋白(LDL)、極低密度脂蛋白(VLDL)以及過(guò)高的膽固醇與甘油三酯(TG)。近二十年來(lái)，臨床醫(yī)學(xué)和生物材料科學(xué)研究者持續(xù)、不斷探索新的高效臨床治療方法與開(kāi)發(fā)相應(yīng)的新型生物醫(yī)療器械，希望研究得到生物相容性良好、吸附分離選擇性高、人體生物微環(huán)境中穩(wěn)定、后功能化容易的低成本新型血液凈化材料，以期應(yīng)用實(shí)現(xiàn)降低臨床高血脂癥患者血漿中有害脂質(zhì)成份的含量。血液凈化材料的已有研究發(fā)展表明早期研發(fā)的血漿交換凈化法(Plasma Exchange)、血漿雙重濾過(guò)法(Double-Filtration PlasmaPheresis)到目前臨床已經(jīng)極少使用，新的免疫吸附(Immuno-adsorption)、肝素誘導(dǎo)沉淀(HELP)等血液凈化方法與材料得到進(jìn)一步的發(fā)展。同時(shí)大量的醫(yī)學(xué)臨床應(yīng)用實(shí)驗(yàn)表明這些新的凈化材料與治療方法將會(huì)導(dǎo)致新的免疫反應(yīng)、體內(nèi)過(guò)敏反應(yīng)，并且血液凈化操作流程復(fù)雜，相關(guān)醫(yī)療設(shè)備造價(jià)昂貴，難以大范圍應(yīng)用推廣，因此逐漸呈淘汰的趨勢(shì)。目前臨床上應(yīng)用相對(duì)較多的血液凈化方法磺化葡聚糖纖維素吸附法(DSC)，應(yīng)用結(jié)果表明仍然存在纖維素微珠機(jī)械強(qiáng)度差、制造成本高等現(xiàn)實(shí)缺點(diǎn)，有待進(jìn)一步改進(jìn)。
另一方面，血液凈化技術(shù)的最新發(fā)展表明，全血直接吸附法(DALI)正在得到越來(lái)越多的關(guān)注，而其相關(guān)血液凈化吸附分離材料是該項(xiàng)技術(shù)的核心關(guān)鍵。到目前為止，世界范圍內(nèi)尚沒(méi)有能夠真正應(yīng)用到臨床全血?jiǎng)討B(tài)灌流吸附低密度脂蛋白(LDL)的優(yōu)良吸附劑，特別是運(yùn)用多孔生物分離膜材料吸附分離LDL的成功報(bào)道較少。美國(guó)Parham等人報(bào)道系列借助羧基負(fù)電性聚丙烯酸修飾聚砜纖維微孔膜凈化低密度脂蛋白LDL的方法[US Patent 54 96637，5187010，5236644，5258149]。但是該方法存在微孔膜制備過(guò)程很復(fù)雜，條件要求較高，而且制備過(guò)程中需要使用溶劑等問(wèn)題。同時(shí)為了在膜表面更好地錨定聚丙烯酸，需要加入的致孔劑，這些是否會(huì)在血漿動(dòng)態(tài)灌流凈化過(guò)程中導(dǎo)致不良反應(yīng)的發(fā)生，成為新的關(guān)注疑點(diǎn)。另外日本H.Yokota等人報(bào)道運(yùn)用滌綸(PET)無(wú)紡布為基材，通過(guò)通過(guò)高能電子輻射誘導(dǎo)表面接枝共聚合丙烯酸。在此基礎(chǔ)上，通過(guò)一定長(zhǎng)度的手臂將基材表面的丙烯酸羧基(COOH)與低密度脂蛋白LDL的特異性結(jié)合小分子(如短鏈的多肽、硫酸葡聚糖小分子等)共價(jià)鍵合固定，從而制備得到一系列LDL吸附材料(如特開(kāi)平6-178807，特開(kāi)平6-237997，特開(kāi)平5-301043)。然而，盡管上述方法所得LDL凈化材料的動(dòng)態(tài)灌流效果較為理想，但是生產(chǎn)上述吸附凈化材料所需高能電子輻射設(shè)備昂貴，并且表面接枝共聚合效率不高。同時(shí)存在特異性結(jié)合小分子試劑合成與基材表面羧基偶聯(lián)過(guò)程復(fù)雜，凈化材料的血液相容性、生物毒性不清楚等現(xiàn)實(shí)問(wèn)題，因此距離臨床實(shí)際應(yīng)用尚有較長(zhǎng)距離。
關(guān)于血液凈化材料的研究，國(guó)內(nèi)南開(kāi)大學(xué)生物材料研究中心報(bào)道了幾種性能優(yōu)良的低密度脂蛋白LDL吸附劑，如郭賢權(quán)等最近報(bào)道了珠狀交聯(lián)聚乙烯醇凝膠固載的牛磺酸吸附配體的LDL吸附劑[中國(guó)生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)報(bào)，2001，20(4)，317]，同時(shí)還報(bào)道了以交聯(lián)聚甲基丙烯酸縮水甘油酯為出發(fā)原料，合成制備得到的一系列不同距離上含有兩個(gè)磺酸基團(tuán)的高分子吸附劑[中國(guó)生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)報(bào)，2001，20(1)，17]。傅國(guó)旗等在活化多孔殼聚糖珠表面上，通過(guò)一定長(zhǎng)度的碳?xì)涫直刍瘜W(xué)偶聯(lián)色氨酸作為配基，制備成功LDL吸附劑，并且試驗(yàn)表明其對(duì)低密度脂蛋白LDL具有較高的吸附容量和較好的吸附選擇性，同時(shí)具有良好的血液相容性[科學(xué)通訊，2003，48(17)，1840]。袁毅等在類(lèi)似吸附載體的基礎(chǔ)上，通過(guò)磺化和固定膽固醇配體制備成功一種具有雙親性的低密度脂蛋白LDL吸附劑[離子交換與吸附，2003，19(1)，49]。總體來(lái)看，上述幾種相對(duì)比較好的LDL吸附劑的介質(zhì)載體都為聚合物凝膠體系，其機(jī)械力學(xué)強(qiáng)度能否長(zhǎng)時(shí)間承受血液凈化動(dòng)態(tài)灌流過(guò)程中伴生的壓力與多向剪切力，同時(shí)其作為吸附劑的材料血液相容性、生物毒性還有待進(jìn)一步研究，并且制備方法與工程相對(duì)比較復(fù)雜，規(guī)?；a(chǎn)有一定困難。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種血漿脂質(zhì)成份吸附分離聚合物多孔膜材料；本發(fā)明的目的還提供一種血漿脂質(zhì)成份吸附分離聚合物多孔膜材料的制備方法；本發(fā)明的另一目的是提供一種血漿脂質(zhì)成份吸附分離聚合物多孔膜材料的應(yīng)用。以應(yīng)用于血漿動(dòng)態(tài)灌流選擇性地吸附分離有害脂質(zhì)成份低密度脂蛋白(LDL)、極低密度脂蛋白(VLDL)以及過(guò)高的總膽固醇(TC)與甘油三酯(TG)。
本發(fā)明是以水不溶性、生物穩(wěn)定性良好的系列平均孔徑的醫(yī)用聚合物無(wú)紡布為出發(fā)載體材料，通過(guò)60Co γ-射線(xiàn)共輻照接枝共聚合聚丙烯酸表面導(dǎo)入親水性、負(fù)電性羧基官能團(tuán)以后，進(jìn)一步借助系列長(zhǎng)度的碳?xì)涫直墼噭┑脑O(shè)計(jì)與共價(jià)偶聯(lián)，在多孔膜載體材料表面固定能夠與低密度脂蛋白(LDL)等疏水締合的膽固醇配基，從而最終制備得到基于上述吸附載體表面負(fù)電性羧基以及膽固醇配基的血漿脂質(zhì)成份吸附分離材料。本發(fā)明所提供的新型聚合物多孔膜材料的吸附機(jī)制在于綜合利用基于低密度脂蛋白(LDL)生物結(jié)構(gòu)模型的疏水締合相互作用(LDL的膽固醇組分與吸附載體表面的膽固醇配基)與靜電吸引力(LDL的表面正電性載脂蛋白B結(jié)構(gòu)部分與吸附載體的負(fù)電性丙烯酸羧基基團(tuán))，也就是偶聯(lián)的膽固醇配基能夠與低密度脂蛋白(LDL)的內(nèi)核膽固醇部分產(chǎn)生疏水作用，插入LDL內(nèi)部，同時(shí)改性聚合物無(wú)紡布多孔膜載體剩余的負(fù)電性羧基基團(tuán)能夠促進(jìn)吸附載體與LDL載脂蛋白B所帶正電荷的靜電相互吸引作用，提高綜合吸附分離能力以及多種脂蛋白的吸附選擇性(高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、極低密度脂蛋白)。由于該發(fā)明所提供的一種新型血漿脂質(zhì)成份吸附分離多孔膜材料載體制備中采用丙烯酸與膽固醇配基已經(jīng)被大量實(shí)驗(yàn)證明具有良好生物相容性、血液相容性及血漿脂質(zhì)成份選擇性結(jié)合親和力，并且采用了比較便利的60Co γ-射線(xiàn)共輻照接枝共聚合載體改性技術(shù)，因此本發(fā)明將提供一種生物體內(nèi)微環(huán)境安全、血漿脂質(zhì)成份分離有效、生物相容性良好、制造成本價(jià)廉的載體材料。本發(fā)明提供的新型載體材料將有可能應(yīng)用于由于血漿脂質(zhì)成份如低密度脂蛋白LDL等異常偏高所誘發(fā)的冠心病、動(dòng)脈粥樣硬化等臨床患者的血液凈化治療。
本發(fā)明的一種血漿脂質(zhì)成份選擇性吸附分離聚合物多孔膜載體材料是于輻照接枝共聚合丙烯酸的醫(yī)用聚合物無(wú)紡布表面的羧基共價(jià)偶聯(lián)固定疏水性膽固醇吸附配基。所述的輻照接枝共聚合丙烯酸的醫(yī)用聚合物無(wú)紡布表面的羧基與膽固醇配基的摩爾比為8∶1～4。
所述的輻照接枝共聚合聚丙烯酸的醫(yī)用聚合物無(wú)紡布是以平均孔徑為0.05～100μm水不溶性醫(yī)用聚合物無(wú)紡布經(jīng)過(guò)60Coγ-射線(xiàn)共輻照接枝共聚合丙烯酸。
所述的醫(yī)用聚合物無(wú)紡布是醫(yī)用滌綸無(wú)紡布或者醫(yī)用聚丙烯無(wú)紡布，材質(zhì)為每平方厘米5～30毫克。
所述的共輻照接枝共聚合丙烯酸的醫(yī)用聚合物無(wú)紡布是丙烯酸的接枝率為5～150％重量。
本發(fā)明所提供的一種血漿脂質(zhì)成份吸附分離聚合物多孔膜載體材料，其制備過(guò)程中以水不溶性、生物微環(huán)境穩(wěn)定、無(wú)毒性的不同平均孔徑尺寸規(guī)格的醫(yī)用聚合物無(wú)紡布為出發(fā)材料。
上述制備過(guò)程中所采用的無(wú)紡布出發(fā)材料可以是醫(yī)用滌綸無(wú)紡布或者是聚丙烯無(wú)紡布，其應(yīng)用可能的材質(zhì)規(guī)格為每平方厘米5～30毫克，比較理想的為每平方厘米5～20毫克，最理想的為每平方厘米8～15毫克。
根據(jù)本發(fā)明所提供的一種血漿脂質(zhì)成份吸附分離聚合物多孔膜載體材料的制備方法，從合成出發(fā)采用醫(yī)用聚合物無(wú)紡布的平均孔徑可能的范圍為0.05～100μm，比較理想的平均孔徑尺寸為0.05～20μm，比較適合制備和吸附應(yīng)用的平均孔徑是0.1～10.0μm。
上述系列不同平均孔徑的醫(yī)用無(wú)紡布出發(fā)材料，首先經(jīng)過(guò)預(yù)先裁剪、加工成5.0cm×5.0cm2尺寸的實(shí)驗(yàn)樣品。然后依次順序在丙酮溶液、水溶液中運(yùn)用超聲波清洗15～30分鐘，取出真空干燥至恒重備后續(xù)制備工序使用。
根據(jù)本發(fā)明所提供的一種血漿脂質(zhì)成份吸附分離聚合物多孔膜載體材料的制備方法，將上述經(jīng)過(guò)超聲波清洗、干燥以后的不同材質(zhì)規(guī)格、不同平均孔徑尺寸的醫(yī)用聚合物無(wú)紡布試樣浸泡于一定濃度的丙烯酸溶液中，采用60Co γ-射線(xiàn)共輻照接枝共聚合方法，制備表面接枝共聚合丙烯酸改性的系列聚合物多孔膜吸附載體材料。
上述60Co γ-射線(xiàn)共輻照接枝共聚合丙烯酸過(guò)程中，丙烯酸水溶液?jiǎn)误w濃度的可能范圍是1～50wt％，可以避免溶液中丙烯酸發(fā)生明顯競(jìng)爭(zhēng)性均聚反應(yīng)的比較理想的丙烯酸水溶液濃度為1～30wt％，應(yīng)用最為理想的共輻照接枝共聚合丙烯酸水溶液?jiǎn)误w濃度為5～20wt％。其中，wt表示重量。
根據(jù)本發(fā)明所提供的一種血漿脂質(zhì)成份吸附分離聚合物多孔膜載體材料的制備方法，采用60Co γ-射線(xiàn)共輻照接枝共聚合丙烯酸制備改性試樣過(guò)程中，為了有效地防止水溶液中丙烯酸單體的自聚合，提高載體材料表面的接枝率，因此需要加入合適的阻聚劑。以常用的硫酸亞鐵鹽為例，丙烯酸水溶液中可能的阻聚劑用量范圍是0.1～5.0wt％，相對(duì)接枝共聚合效果比較理想的阻聚劑用量為0.5～2.5wt％。
同時(shí)上述共輻照接枝共聚合過(guò)程中，催化劑能夠促進(jìn)該發(fā)明所提供的一種血漿脂質(zhì)成份吸附分離聚合物多孔膜載體材料的60Co γ-射線(xiàn)共輻照表面接枝共聚合丙烯酸的效率。以常用硫酸催化劑為例，可能有效的用量是含有0.1～5％重量的硫酸，比較理想的用量為0.5～1.0％。
上述不同材質(zhì)規(guī)格、不同平均孔徑的醫(yī)用聚合物無(wú)紡布出發(fā)原材料，在60Co γ-射線(xiàn)共輻照接枝共聚合過(guò)程中，經(jīng)過(guò)含有上述濃度丙烯酸單體、阻聚劑、催化劑的水溶液浸泡16～24小時(shí)后，置于60Co γ-射線(xiàn)源輻射場(chǎng)中，通過(guò)輻照劑量的控制，制備系列接枝率的共聚丙烯酸改性多孔膜載體材料。60Co γ-射線(xiàn)共輻照接枝共聚合制備過(guò)程發(fā)現(xiàn)，上述60Co γ-射線(xiàn)應(yīng)用可能的輻照總劑量范圍是10～50kGy，比較理想的輻照總劑量為20～50kGy。
根據(jù)本發(fā)明所提供的一種血漿脂質(zhì)成份吸附分離聚合物多孔膜載體材料的制備方法，上述不同材質(zhì)規(guī)格、不同平均孔徑的醫(yī)用聚合物無(wú)紡布出發(fā)原材料試樣在60Co γ-射線(xiàn)輻照接枝共聚合丙烯酸后，從溶液中取出，用純水反復(fù)洗凈后真空干燥至恒重后得到系列規(guī)格、平均孔徑以及接枝程度的聚丙烯酸改性聚合物多孔膜載體材料。通過(guò)接枝共聚合反應(yīng)前后載體材料重量的變化，可以定量計(jì)算相應(yīng)接枝率5～150wt％，通過(guò)酸堿滴定可以定量測(cè)出膜表面羧基的含量為10～200μmol/cm2。
根據(jù)本發(fā)明所提供的一種血漿脂質(zhì)成份吸附分離聚合物多孔膜載體材料的制備方法，為了有效提高制備所得吸附載體的選擇性與吸附分離效率，將在上述經(jīng)過(guò)60Co γ-射線(xiàn)共輻照接枝共聚合丙烯酸改性的系列多孔膜載體材料表面進(jìn)一步固定具有通過(guò)疏水締合作用增強(qiáng)吸附分離效果的膽固醇吸附配基，并且上述膽固醇吸附配基在多孔載體膜材料表面的固定是采用手臂試劑共價(jià)偶聯(lián)的方法實(shí)現(xiàn)。
上述的共價(jià)偶聯(lián)的手臂通常由脂肪族二醇類(lèi)有機(jī)化合物合成得到，二醇類(lèi)有機(jī)化合物分子結(jié)構(gòu)中可能的碳原子數(shù)范圍為2～10，如乙二醇、1，3-丙二醇、1，2-丙二醇、1，4-丁二醇、1，5-戊二醇、1，6-己二醇、1，7-庚二醇、1，8-辛二醇，1，10-癸二醇等，其中比較理想的是乙二醇、1，4-丁二醇或1，6-己二醇。
根據(jù)本發(fā)明所提供的一種血漿脂質(zhì)成份吸附分離聚合物多孔膜載體材料的制備方法，為了在60Co γ-射線(xiàn)共輻照接枝共聚合丙烯酸改性的系列多孔膜載體材料表面羧基上共價(jià)偶聯(lián)固定具有不同碳原子長(zhǎng)度碳?xì)涫直?碳原子數(shù)為2～10)的膽固醇配基，因此需要預(yù)先合成具有不同碳原子長(zhǎng)度碳?xì)涫直鄣膯喂倌芏饶懝檀寂浠鵞HO-(CH2)n-O-CHOL]，其中CHOL是膽固醇基。其制備方法是在除水、除氧容器中或在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，迅速將對(duì)甲基苯磺酸(OTs)裝入其中，然后緩慢滴加溶有膽固醇的干燥吡啶，溶液逐漸變成粉紅色，繼續(xù)攪拌反應(yīng)5～24小時(shí)，得手臂膽固醇配基的合成前驅(qū)體CHOL-OTs；制備過(guò)程中可采用如下方法后處理將反應(yīng)液倒入5％碳酸鉀溶液中，冰浴攪拌1小時(shí)，抽濾后的固體溶于二氯甲烷中，用水反復(fù)洗滌、分液，無(wú)水硫酸鈉干燥過(guò)夜，抽濾后旋干二氯甲烷，丙酮重結(jié)晶得以純化。進(jìn)一步將所述的合成前驅(qū)體加入已經(jīng)除水、除氧的反應(yīng)器中，同時(shí)加入一定量上述可能的脂肪族二元醇手臂試劑化合物，在含氧有機(jī)溶劑中回流5～24小時(shí)，所述的含氧有機(jī)溶劑可以是二氧六環(huán)、乙醚等。其后減壓除去溶劑，剩余物溶于乙酸乙酯中，繼續(xù)用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌三次、飽和氯化鈉水溶液洗滌三次，無(wú)水硫酸鈉干燥過(guò)夜，最終得到含n＝2～10碳原子長(zhǎng)度碳?xì)涫直鄣膯瘟u基官能度膽固醇配基[HO-(CH2)n-O-CHOL]。上述反應(yīng)可能的物料摩爾比為對(duì)甲苯磺酸/脂肪二醇/膽固醇＝2～10∶5～20∶1，比較理想的范圍是對(duì)甲苯磺酸/脂肪二醇/膽固醇＝2～5∶5～10∶1。
根據(jù)本發(fā)明所提供的一種血漿脂質(zhì)成份吸附分離聚合物多孔膜載體材料的制備方法，上述具有不同碳原子長(zhǎng)度碳?xì)涫直鄣膯瘟u基官能度膽固醇配基在接枝共聚合丙烯酸改性的聚合物多孔膜載體材料表面共價(jià)偶聯(lián)固定的方法為首先在除水、除氧條件下，根據(jù)上述接枝共聚合丙烯酸改性的聚合物多孔膜載體材料表面已經(jīng)含有的丙烯酸羧基(COOH)含量，按一定的設(shè)計(jì)偶聯(lián)配體比例，在通氮?dú)鈼l件下加入單羥基官能度膽固醇配基[HO-(CH2)n-O-CHOL]、偶聯(lián)促進(jìn)劑N，N′-二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)和4-二甲氨基吡啶(DMAP)。然后注入40～80ml的二氯甲烷溶劑，攪拌5～10分鐘后，將上述已經(jīng)接枝共聚合丙烯酸改性的不同規(guī)格、不同平均孔徑的聚合物多孔膜載體材料放入反應(yīng)器中，保持在室溫下繼續(xù)攪拌反應(yīng)24～48小時(shí)。反應(yīng)完成以后將接枝共聚合膽固醇配基的上述多孔膜載體材料取出，以二氯甲烷為溶劑，采用索氏提取管抽提24小時(shí)除去未反應(yīng)的小分子反應(yīng)物，真空干燥得到表面共價(jià)偶聯(lián)固定手臂膽固醇配基的丙烯酸改性的聚合物多孔膜載體材料。
上述共價(jià)偶聯(lián)反應(yīng)中使用的物料比例應(yīng)用可能的范圍是丙烯酸表面接枝共聚合改性的聚合物多孔膜載體表面羧基量(COOH)/膽固醇配基(HO-CHOL)或者連有不同碳?xì)涫直鄣膯瘟u基官能度膽固醇配基[HO-(CH2)n-O-CHOL]/N，N′-二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)/4-二甲氨基吡啶(DMAP)＝5～10∶1～5∶3～5∶1～3，偶聯(lián)反應(yīng)效果比較理想的范圍是丙烯酸表面接枝共聚合改性的聚合物多孔膜載體表面羧基量(COOH)/膽固醇配基(HO-CHOL)或者連有不同碳?xì)涫直鄣膯瘟u基官能度膽固醇配基[HO-(CH2)n-O-CHOL]/N，N′-二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)/4-二甲氨基吡啶(DMAP)＝8∶1～4∶3～5∶2。
本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)根據(jù)該發(fā)明所提供的一種新型血漿脂質(zhì)成份吸附分離聚合物多孔膜材料、制備及其應(yīng)用，具有如下優(yōu)點(diǎn)
(1)制備方法簡(jiǎn)單、工藝條件易于控制，載體材料制備重復(fù)性良好。整個(gè)制備工藝流程中的關(guān)鍵控制參數(shù)是輻射總劑量、接枝共聚合反應(yīng)丙烯酸水溶液?jiǎn)误w濃度、膽固醇配基的濃度。多孔吸附分離膜材料的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明制備受其它參數(shù)影響較小，而上述幾個(gè)關(guān)鍵工藝參數(shù)易于精確控制，重復(fù)性好，適合規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)。
(2)本發(fā)明所采用的出發(fā)原材料來(lái)源廣泛，生產(chǎn)成本低。本發(fā)明所采用的主要出發(fā)材料醫(yī)用聚合物無(wú)紡布與丙烯酸價(jià)格低廉，并且其它輔助制備材料，如膽固醇配基、偶聯(lián)催化劑、偶聯(lián)手臂試劑脂肪二醇價(jià)格也不高。
(3)本發(fā)明所提供的一種新型血漿脂質(zhì)成份吸附分離聚合物多孔膜材料，其血液相容性良好、浸提液無(wú)毒、適合紫外等常規(guī)醫(yī)用消毒方法。
(4)根據(jù)本發(fā)明所提供的一種新型血漿脂質(zhì)成份吸附分離聚合物多孔膜材料，其血漿有害脂質(zhì)成份低密度脂蛋白(LDL)吸附膜活性效率，低密度脂蛋白(LDL)、總膽固醇(TC)和甘油三酯(TG)的靜態(tài)吸附能力達(dá)到比吸附分離前最高下降54.1％、48.3％、49.5％。同時(shí)，本發(fā)明所提供的聚合物多孔膜載體動(dòng)態(tài)灌流吸附表明，LDL、TC和TG比吸附分離前最高降低32.0％、55.3％、49.4％。
(5)本發(fā)明所提供的一種新型血漿脂質(zhì)成份吸附分離聚合物多孔膜材料應(yīng)用前景廣泛。不僅可能應(yīng)用于臨床高血脂癥患者血液凈化，同時(shí)可能應(yīng)用于血液制品加工產(chǎn)業(yè)，從不符合輸血標(biāo)準(zhǔn)廢棄血漿中通過(guò)該發(fā)明所提供的吸附分離載體材料以及相關(guān)分離輔助設(shè)備回收血漿，加工血液制品。
具體實(shí)施方法以下通過(guò)實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行具體說(shuō)明，將有助于對(duì)本發(fā)明的理解，但并不限制本發(fā)明的內(nèi)容。實(shí)施例中所采用的化學(xué)分析方法具體說(shuō)明如下(1)多孔吸附分離膜表面羧基含量的定量分析方法取經(jīng)過(guò)60Co-射線(xiàn)共輻照接枝共聚合丙烯酸制備改性所得試樣一塊(5×5cm2)，放入100ml容積的錐形瓶中，然后加入50mol/L濃度的NaOH溶液50ml，室溫下靜止浸泡24小時(shí)。提取浸泡液10ml，用已經(jīng)標(biāo)定濃度的鹽酸溶液滴定，記錄滴定終點(diǎn)時(shí)所用鹽酸溶液的體積，并且每個(gè)試樣滴定分析三次，取平均值。因此，多孔膜表面接枝丙烯酸羧基的含量可以通過(guò)以下公式計(jì)算得到 =n(Vi-V0)25×5]]>其中n為鹽酸的濃度，Vi為試樣滴定所用鹽酸溶液的體積，V0為未經(jīng)丙烯酸接枝共聚合改性的多孔膜載體空白參照滴定所用鹽酸溶液的體積。
(2)血漿低密度脂蛋白LDL濃度的分析方法采用一步法(即酶法)分析，其原理為人血清與試劑R1中的聚陰離子及聚離子反應(yīng)，在表面活性劑的作用下，除低密度脂蛋白LDL以外的其它脂蛋白與膽固醇酯酶、膽固醇氧化酶等發(fā)生化學(xué)反應(yīng)而被消除。當(dāng)加入試劑R2后，其中的表面活性劑迅速發(fā)生作用，并釋放LDL，并在酶作用下單一催化LDL-C反應(yīng)，發(fā)生現(xiàn)色反應(yīng)，其顯色程度與血清中LDL-C含量成正比。
測(cè)定所用試劑的規(guī)格及成份(試劑盒購(gòu)自上海榮盛生物技術(shù)有限公司 滬食藥監(jiān)械(準(zhǔn))字2005第2401199號(hào))R12*40ml R22*10ml，校準(zhǔn)液1*1ml(使用時(shí)1ml蒸餾水復(fù)溶)。
R1由聚陰離子及膽固醇酯酶、膽固醇氧化酶、酚、過(guò)氧化氫酶、表面活性劑等組成。
R2由過(guò)氧化物酶、4-氨基安替比林、緩沖液及表面活性劑等組成。
工作液配制試劑R14ml與試劑R21ml混勻。
工作液在2～8℃可穩(wěn)定3天。(最好使用前臨時(shí)配制)。
測(cè)試程序?qū)⒋郎y(cè)樣品10μl加入1ml工作液中充分混勻，37℃水浴10分鐘后，以空白管(10μl蒸餾水加入1ml工作液)調(diào)零，分別讀取樣本管和校準(zhǔn)管(10μl標(biāo)準(zhǔn)液加入1ml工作液)的在546nm處紫外吸光度值，計(jì)算低密度脂蛋白LDL的含量 (3)高密度脂蛋白HDL濃度測(cè)定方法采用一步法(即酶法)測(cè)定，其原理人血清與試劑R1中的聚陰離子及聚離子反應(yīng)，在表面活性劑的作用下于脂蛋白周?chē)纬煞€(wěn)定的保護(hù)層，當(dāng)加入試劑R2后，表面活性劑迅速釋放HDL，并在酶作用下單一催化HDL-C反應(yīng)，其顯色程度與血清中高密度脂蛋白HDL-C含量成正比。
測(cè)定所用試劑的規(guī)格及成份(試劑盒購(gòu)自上海榮盛生物技術(shù)有限公司 滬食藥監(jiān)械(準(zhǔn))字2005第2401199號(hào))R12*40ml R22*10ml，校準(zhǔn)液1*1ml(使用時(shí)1ml蒸餾水復(fù)溶)R1聚陰離子及膽固醇酯酶、膽固醇氧化酶、酚、過(guò)氧化氫酶、表面活性劑等組成。
R2過(guò)氧化物酶、4-氨基安替比林、緩沖液及表面活性劑等組成。
工作液配制4ml R1與1ml的R2試劑混勻，可在2～8℃下可穩(wěn)定3天。(最好使用前臨時(shí)配制)。
測(cè)試程序?qū)⒋郎y(cè)試樣10μl加入1ml工作液中充分混勻，37℃中水浴10分鐘后，以空白管(10μl蒸餾水加入1ml工作液)調(diào)零，分別讀取樣本管和校準(zhǔn)管(10μl標(biāo)準(zhǔn)液加入1ml工作液)的在546nm處的紫外吸光度值，由此計(jì)算高密度脂蛋白HDL的濃度 (4)血漿總膽固醇TC濃度的測(cè)定方法采用CHOD-PAP法，其原理待測(cè)試樣中游離及脂化的膽固醇，經(jīng)下述反應(yīng)產(chǎn)生醌亞胺，可用紫外分光光度計(jì)在500nm處測(cè)定其吸光度，根據(jù)吸光度的變化，計(jì)算血漿膽固醇的含量。

測(cè)定所用試劑的規(guī)格及成份(上海榮盛生物技術(shù)有限公司滬食藥監(jiān)械(準(zhǔn))字2005第2401199號(hào))R1(緩沖液)2×25ml R2(酶試劑)2×25ml校準(zhǔn)液(5.16mmol/l或200mg/dl)1×1mlPiPes35mmol/L，膽酸鈉0.5mmol/L膽固醇脂酶＞0.2U/ml，膽固醇氧化酶＞0.1U/ml
酚28mmol/l，過(guò)氧化物酶＞0.8U/ml4-氨基安替比林0.5mmol/l，pH7.0工作液配制緩沖液1份與酶試劑1份等量混勻，儲(chǔ)存于2～8℃可穩(wěn)定30天。
測(cè)試程序?qū)⒋郎y(cè)10μl加入1ml工作液中，充分混勻，37℃水浴10分鐘后，以空白管(10μl蒸餾水加入1ml工作液)調(diào)零，分別讀取樣本管和校準(zhǔn)管(10μl標(biāo)準(zhǔn)液加入1ml工作液)在500nm處的紫外吸光值，由此計(jì)算 總膽固醇mmol/l＝mg/dl×0.0258(5)三酯TG濃度的測(cè)定方法采用TRIGLYCERIDES KIT(酶比色法)法，其原理待測(cè)樣品中的甘油三酯經(jīng)下述反應(yīng)產(chǎn)生紅紫色色素，可用紫外分光光度計(jì)定量測(cè)定。
測(cè)定所用試劑的規(guī)格及成份(上海榮盛生物技術(shù)有限公司 滬食藥監(jiān)械(準(zhǔn))字2005第2401199號(hào))2×25mlPipes45mmol/L；氯化鎂5mmol/L；過(guò)氧化物酶＞0.8U/ml；脂蛋白酯酶＞100U/ml；ESBmT 3mmol/l；4-氨基安替比0.75mmol/L；3-磷酸甘油氧化酶＞4U/ml；甘油激酶＞1.5U/ml； ATP0.9mmol/l，pH7.5.
測(cè)試程序?qū)⒋郎y(cè)樣品10μl加入1ml工作液中充分混勻，37℃水浴10分鐘后，以空白管(10μl蒸餾水加入1mlT作液)調(diào)零，分別讀取樣本管和校準(zhǔn)管(10μl標(biāo)準(zhǔn)液加入1ml工作液)在500nm處紫外分光光度計(jì)吸光度值，由此計(jì)算甘油三酯TG的濃度
甘油三酯mg/dl＝甘油三酯mmol/L×88.5(6)表面全反射紅外光譜ATR-FITR分析將樣品剪成10mm×80ml的長(zhǎng)條在付里葉變換紅外光譜儀AVATAR-360上進(jìn)行測(cè)試。
實(shí)施例1將平均孔徑0.1μm的醫(yī)用聚丙烯無(wú)紡布裁剪成5cm×5cm2的試樣，依次在丙酮和水中超聲波清洗15～30分鐘，真空干燥備用。然后，將上述試樣浸泡于含丙烯酸單體10％(質(zhì)量百分比)的水溶液中，溶液中另含有1.0％硫酸亞鐵阻聚劑、0.5％硫酸催化劑，浸泡24小時(shí)后，將樣品置于60Co γ-射線(xiàn)源輻射場(chǎng)中，控制累計(jì)輻照總劑量30kGy。取出上述輻照處理試樣后，洗凈、干燥、稱(chēng)重并計(jì)算得到丙烯酸的共聚接枝率為30wt％，相應(yīng)所得多孔膜載體材料的表面羧基含量為25μmol/cm2，ATR-FITR紅外光譜分析發(fā)現(xiàn)該試樣在1700cm-1處新出現(xiàn)一個(gè)很強(qiáng)的吸收帶，是羧基吸收的特征信號(hào)，表明丙烯酸已被成功接枝共聚合引入聚丙烯無(wú)紡布表面，得到聚丙烯酸改性的聚丙烯無(wú)紡布多孔膜載體材料。
實(shí)施例2將0.45μm的醫(yī)用聚丙烯無(wú)紡布裁剪成5cm×5cm2的試樣，依次在丙酮和水中超聲波清洗15～30分鐘，真空干燥備用。然后將上述試樣浸泡于含有15％丙烯酸單體的水溶液中。溶液中同時(shí)含有0.5％的硫酸亞鐵阻聚劑、1.0％的硫酸催化劑，浸泡24小時(shí)候后，將樣品置于60Co γ-射線(xiàn)源輻射場(chǎng)中，控制累計(jì)輻照總劑量為20kGy。取出上述輻照處理試樣后，洗凈、干燥、稱(chēng)重并計(jì)算得到丙烯酸的共聚合接枝率為84％，定量滴定表面羧基含量為70μmol/cm2。ATR-FITR紅外光譜分析發(fā)現(xiàn)在1700cm-1處出現(xiàn)一個(gè)很強(qiáng)的吸收峰，對(duì)應(yīng)于羧基的特征吸收信號(hào)，表明84％接枝率、0.45μm平均孔徑的聚丙烯酸改性的聚丙烯無(wú)紡布多孔膜載體材料。
實(shí)施例3取250ml容積三口瓶一只，除水、除氧后，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，迅速將對(duì)甲基苯磺酸25克裝入其中，然后緩慢滴加溶有25克膽固醇的200ml干燥吡啶，溶液逐漸變成粉紅色。繼續(xù)攪拌反應(yīng)24小時(shí)后，反應(yīng)液倒入5％碳酸鉀溶液中，冰浴攪拌1小時(shí)，抽濾后的固體溶于二氯甲烷中，用水反復(fù)洗滌、分液，無(wú)水硫酸鈉干燥過(guò)夜。抽濾后旋干二氯甲烷，丙酮中重結(jié)晶，得到對(duì)甲苯磺酸保護(hù)的膽固醇配基中間體(CHOL-OTs)。然后將其移入已除水、除氧的反應(yīng)瓶中，加入20ml的1，4-丁二醇，以二氧六環(huán)為溶劑，回流24小時(shí)后，減壓除去溶劑，并將剩余物溶于乙酸乙酯中，依次用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌三次、飽和氯化鈉水溶液洗滌三次，無(wú)水硫酸鈉干燥過(guò)夜，最終得到含有4個(gè)碳原子長(zhǎng)度手臂單羥基官能度膽固醇配基[HO-(CH2)4-O-CHOL]。
實(shí)施例4取250ml三口瓶一支，除水、除氧后，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，迅速將對(duì)甲基苯磺酸25克裝入，然后緩慢滴加溶有25克膽固醇的200ml干燥吡啶，溶液逐漸變成粉紅色，繼續(xù)攪拌反應(yīng)24小時(shí)，反應(yīng)液倒入5％碳酸鉀溶液中，冰浴攪拌1小時(shí)。抽濾后的固體溶于二氯甲烷中，用水反復(fù)洗滌、分液，無(wú)水硫酸鈉干燥過(guò)夜，抽濾后旋干二氯甲烷，丙酮重結(jié)晶，得到對(duì)甲苯磺酸保護(hù)的膽固醇配基中間體CHOL-OTs。將上述膽固醇配基中間體CHOL-OTs加入已經(jīng)除水、除氧處理的反應(yīng)瓶中，再加入15克1，6-己二醇，以二氧六環(huán)為溶劑，回流24小時(shí)。然后，減壓除去溶劑，將剩余物溶于乙酸乙酯中，依次用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌三次、飽和氯化鈉水溶液洗滌三次，無(wú)水硫酸鈉干燥過(guò)夜，最終得到含有6個(gè)碳原子長(zhǎng)度手臂單羥基官能度膽固醇配基[HO-(CH2)6-O-CHOL]。
實(shí)施例5取100ml容積的反應(yīng)管除水、除氧后，根據(jù)上述實(shí)施例2所得的丙烯酸接枝改性的聚丙烯無(wú)紡布多孔膜的表面羧基含量，按羧基/膽固醇配基(HO-CHOL)/N，N′-二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)/4-二甲氨基吡啶(DMAP)＝8∶1∶5∶2的物料摩爾比例，在通氮?dú)鈼l件下，加入無(wú)碳?xì)涫直鄣哪懝檀寂浠?HO-CHOL)、偶聯(lián)催化劑N，N′-二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)與4-二甲氨基吡啶(DMAP)。然后注入50ml二氯甲烷，攪拌5～10分鐘后，將上述實(shí)施例2所得的丙烯酸接枝改性的聚丙烯無(wú)紡布多孔膜放入反應(yīng)管中，室溫下攪拌反應(yīng)24小時(shí)。膽固醇配基偶聯(lián)反應(yīng)結(jié)束以后，將偶聯(lián)膽固醇配基的丙烯酸接枝改性的聚丙烯無(wú)紡布多孔膜取出，以二氯甲烷作溶劑，運(yùn)用索氏提取管抽提24小時(shí)以除去未反應(yīng)物質(zhì)，真空干燥，最終得到無(wú)手臂直接偶聯(lián)膽固醇吸附配基的聚合物多孔膜載體材料。
實(shí)施例6取100ml容積的反應(yīng)管除水、除氧后，根據(jù)上述實(shí)施例2所得的丙烯酸接枝改性的聚丙烯無(wú)紡布多孔膜的表面羧基含量，按羧基/膽固醇配基/N，N′-二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)/4-二甲氨基吡啶(DMAP)＝8∶4∶3∶2的物料摩爾比例，在通氮?dú)鈼l件下，加入上述實(shí)施例3制備所得4個(gè)碳原子長(zhǎng)度手臂單羥基官能度膽固醇配基[HO-(CH2)4-O-CHOL]、偶聯(lián)催化劑N，N′-二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)與4-二甲氨基吡啶(DMAP)。然后注入50ml二氯甲烷，攪拌5～10分鐘后，將上述實(shí)施例2所得的丙烯酸接枝改性的聚丙烯無(wú)紡布多孔膜放入反應(yīng)管中，室溫下攪拌反應(yīng)24小時(shí)。膽固醇配基偶聯(lián)反應(yīng)結(jié)束以后，將偶聯(lián)膽固醇配基的丙烯酸接枝改性的聚丙烯無(wú)紡布多孔膜取出，以二氯甲烷作溶劑，運(yùn)用索氏提取管抽提24小時(shí)以除去未反應(yīng)物質(zhì)，真空干燥，最終得到偶聯(lián)4個(gè)碳原子手臂的膽固醇吸附配基的聚合物多孔膜載體材料。
實(shí)施例7取100ml容積的反應(yīng)管除水、除氧后，根據(jù)上述實(shí)施例2所得的丙烯酸接枝改性的聚丙烯無(wú)紡布多孔膜的表面羧基含量，按羧基/膽固醇配基/N，N′-二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)/4-二甲氨基吡啶(DMAP)＝8∶2∶5∶2的比例，在通氮?dú)鈼l件下，加入上述實(shí)施例4制備所得6個(gè)碳原子長(zhǎng)度手臂單羥基官能度膽固醇配基[HO-(CH2)6-O-CHOL]、偶聯(lián)催化劑N，N′-二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)與4-二甲氨基吡啶(DMAP)。然后注入50ml二氯甲烷，攪拌5～10分鐘后，將上述實(shí)施例2所得的丙烯酸接枝改性的聚丙烯無(wú)紡布多孔膜放入反應(yīng)管中，室溫下攪拌反應(yīng)24小時(shí)。膽固醇配基偶聯(lián)反應(yīng)結(jié)束以后，將偶聯(lián)膽固醇配基的丙烯酸接枝改性的聚丙烯無(wú)紡布多孔膜取出，以二氯甲烷作溶劑，運(yùn)用索氏提取管抽提24小時(shí)以除去未反應(yīng)物質(zhì)，真空干燥，最終得到偶聯(lián)6個(gè)碳原子手臂的膽固醇吸附配基的聚合物多孔膜載體材料。
實(shí)施例8將上述實(shí)施例5、6、7制備所得聚合物多孔膜載體材料剪成碎片，裝入10ml樣品瓶中，吸取6ml模擬生理溶液(pH＝7.4)將其充分溶脹，然后用注射器將樣品瓶中的模擬生理溶液徹底抽干，加入2ml人血漿。然后密封在37℃下振蕩3小時(shí)后，檢測(cè)等溫吸附前后LDL、HDL、TG、TC的變化情況，結(jié)果如下表所示(其中空白對(duì)照樣是孔徑為0.45um，未接枝丙烯酸的聚丙烯無(wú)紡布)

實(shí)施例9將采樣于高血脂癥患者的分離血漿5ml動(dòng)態(tài)灌流經(jīng)過(guò)裝有6層實(shí)施例4所得的多孔膜載體材料吸附分離器，動(dòng)態(tài)灌流速度1ml/min，灌流2小時(shí)后，血漿中的LDL的濃度由111.64mg/dl降低為75.9mg/dl、HDL的濃度由51.77mg/dl降低為28.00mg/dl、TC的含量由160.31mg/dl下降為71.65mg/dl、TG的含量由522.80mg/dl下降為274.47mg/dl。
權(quán)利要求
1.一種血漿脂質(zhì)成份選擇性吸附分離聚合物多孔膜載體材料，其特征在于所述多孔膜載體材料是由輻照接枝共聚合丙烯酸的醫(yī)用聚合物無(wú)紡布表面的羧基共價(jià)偶聯(lián)固定疏水性膽固醇吸附配基得到；所述的輻照接枝共聚合聚丙烯酸的醫(yī)用聚合物無(wú)紡布表面的羧基與膽固醇配基的摩爾比為8∶1～4。
2.如權(quán)利要求1所述的一種血漿脂質(zhì)成份選擇性吸附分離聚合物多孔膜載體材料，其特征是所述的輻照接枝共聚合聚丙烯酸的醫(yī)用聚合物無(wú)紡布是以平均孔徑為0.1～50μm水不溶性醫(yī)用聚合物無(wú)紡布經(jīng)過(guò)60Coγ-射線(xiàn)共輻照接枝共聚合丙烯酸，膜表面羧基的含量為10～200μmol/cm2。
3.如權(quán)利要求2所述的一種血漿脂質(zhì)成份選擇性吸附分離聚合物多孔膜載體材料，其特征是所述的醫(yī)用聚合物無(wú)紡布是醫(yī)用滌綸無(wú)紡布或者醫(yī)用聚丙烯無(wú)紡布，平均孔徑為0.05～100μm，材質(zhì)為每平方厘米5～30毫克。
4.如權(quán)利要求1或2所述的一種血漿脂質(zhì)成份選擇性吸附分離聚合物多孔膜載體材料，其特征是所述的共輻照接枝共聚合丙烯酸的醫(yī)用聚合物無(wú)紡布是聚丙烯酸的接枝率為5～150％重量。
5.如權(quán)利要求1的一種血漿脂質(zhì)成份選擇性吸附分離聚合物多孔膜載體材料的制備方法，其特征是包括以下步驟(1)60Coγ-射線(xiàn)共輻照表面接枝共聚合丙烯酸將清洗過(guò)醫(yī)用聚合物無(wú)紡布在含1～50％重量的丙烯酸、0.1～5.0％重量的阻聚劑和[H+]＝0.1～0.2M濃度催化劑的水溶液中浸泡16～24小時(shí)后；然后置于60Coγ-射線(xiàn)輻射場(chǎng)中，控制輻照總劑量10～50kGy；取出、洗凈、干燥，得到丙烯酸表面接枝共聚改性的聚合物多孔膜載體材料；(2)表面共價(jià)偶聯(lián)固定疏水性膽固醇吸附配基在無(wú)水、無(wú)氧條件下，將膽固醇配基、N，N′-二環(huán)己基碳二亞胺和4-二甲氨基吡啶混合，所述的羧基∶羥基單官能度膽固醇配基∶N，N′-二環(huán)己基碳二亞胺∶4-二甲氨基吡啶的摩爾比為＝8∶1～4∶3～5∶2；加入上述步驟(1)制備所得的丙烯酸表面接枝共聚改性的聚合物多孔膜載體材料，室溫下反應(yīng)12～48小時(shí)，干燥；所述的羥基單官能度膽固醇配基具有如下分子式HO-(CH2)n-O-CHOL，其中，n＝0～10，CHOL是膽固醇基。
6.如權(quán)利要求5所述的血漿脂質(zhì)成份選擇性吸附分離聚合物多孔膜載體材料的制備方法，其特征是步驟(1)所述的醫(yī)用聚合物無(wú)紡布的清洗是將孔徑為0.1～50μm的醫(yī)用聚合物無(wú)紡布依次在丙酮和水中超聲波清洗15～30分鐘，真空干燥。
7.如權(quán)利要求5所述的血漿脂質(zhì)成份選擇性吸附分離聚合物多孔膜載體材料的制備方法，其特征是步驟(1)所述的浸泡是醫(yī)用聚合物無(wú)紡布在含1～30％重量的丙烯酸單體、0.5～2.5％重量的阻聚劑和[H+]＝0.1～0.2M濃度的催化劑水溶液中浸泡。
8.如權(quán)利要求5所述的一種血漿脂質(zhì)成份選擇性吸附分離聚合物多孔膜載體材料的制備方法，其特征是步驟(1)所述的阻聚劑是硫酸亞鐵。
9.如權(quán)利要求5所述的血漿脂質(zhì)成份選擇性吸附分離聚合物多孔膜載體材料的制備方法，其特征是步驟(2)所述的羥基單官能度膽固醇配基通過(guò)顯示方法合成在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，對(duì)甲基苯磺酸中緩慢滴加溶有膽固醇的干燥吡啶，反應(yīng)5～24小時(shí)，得膽固醇配基的反應(yīng)前驅(qū)體CHOL-OTs，將該前驅(qū)體在除水、除氧的條件下、含氧有機(jī)溶劑中，與碳原子數(shù)為2～10的手臂試劑脂肪族二元醇回流5～24小時(shí)，得到含n＝2～10碳原子長(zhǎng)度碳?xì)涫直鄣牧u基官單能度膽固醇配基，其中，OTs是對(duì)甲基苯磺酸基，CHOL是膽固醇基，所述的對(duì)甲苯磺酸、脂肪二醇和膽固醇的摩爾比為2～10∶5～20∶1。
10.如權(quán)利要求9所述的血漿脂質(zhì)成份選擇性吸附分離聚合物多孔膜載體材料的制備方法，其特征是所述反應(yīng)物料的摩爾比為對(duì)甲苯磺酸∶脂肪二醇∶膽固醇＝2～10∶5～20∶1。
11.如權(quán)利要求10所述的血漿脂質(zhì)成份選擇性吸附分離聚合物多孔膜載體材料的制備方法，其特征是所述的反應(yīng)物料的摩爾比范圍是對(duì)甲苯磺酸∶脂肪二醇∶膽固醇＝2～5∶5～10∶1。
12.如權(quán)利要求9所述的血漿脂質(zhì)成份選擇性吸附分離聚合物多孔膜載體材料的制備方法，其特征是所述手臂的合成試劑脂肪族二醇化合物是乙二醇、1，3-丙二醇、1，2-丙二醇、1，4-丁二醇、1，5-戊二醇、1，6-己二醇、1，7-庚二醇、1，8-辛二醇或1，10-丁二醇。
13.如權(quán)利要求1所述一種血漿脂質(zhì)成份選擇性吸附分離聚合物多孔膜載體材料的用途，其特征是主要應(yīng)用于血漿脂質(zhì)成份的吸附分離、臨床高血脂癥病人的血液動(dòng)態(tài)灌流凈化材料或廢棄血漿分離再生利用輔助材料。
全文摘要
本發(fā)明旨在提供一種血漿脂質(zhì)成份選擇性吸附分離聚合物多孔膜載體材料、制備方法以及相關(guān)應(yīng)用。該聚合物多孔膜載體材料是以平均孔徑為0.05～100μm醫(yī)用聚合物無(wú)紡布為出發(fā)原材料，通過(guò)
文檔編號(hào)B01J20/28GK101024149SQ20071003640
公開(kāi)日2007年8月29日 申請(qǐng)日期2007年1月12日 優(yōu)先權(quán)日2007年1月12日
發(fā)明者曹阿民, 侯小東, 張濤 申請(qǐng)人:中國(guó)科學(xué)院上海有機(jī)化學(xué)研究所