一種清洗超濾膜包的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種清洗超濾膜包的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 超濾是膜分離技術(shù)的一種，是以壓強(qiáng)差為推動(dòng)力的過(guò)程，其分離機(jī)理是依靠穩(wěn)定 的壓力和流速，通過(guò)膜孔徑實(shí)現(xiàn)篩分作用，在分子水平上進(jìn)行分離，迫使小分子成分被濾 出，大分子被截留。由于超濾可在常溫下完成，且無(wú)需添加其它物質(zhì)，通過(guò)選用不同截留特 性的膜組件構(gòu)成膜分離系統(tǒng)對(duì)有效成分進(jìn)行分離、濃縮、純化，故超濾膜被廣泛應(yīng)用于環(huán) 保、食品、醫(yī)藥等領(lǐng)域。
[0003] 目前生物制品生產(chǎn)中，超濾已呈現(xiàn)顯著的技術(shù)優(yōu)勢(shì)。超濾膜包是以膜為過(guò)濾介質(zhì)， 而濾膜完整性既是保證超濾除雜效果的重要條件，也是保證分離效果的前提。濾膜是特殊 的高分子結(jié)構(gòu)，由于使用過(guò)程中清洗、再生、反復(fù)使用頻率較高，會(huì)出現(xiàn)膜孔堵塞、膜穿透及 膜滲漏、膜包污染等現(xiàn)象，易導(dǎo)致菌毒或生物活性成分的泄露，從而造成抗原損失或環(huán)境污 染。目前，濾膜纖維的完整性檢測(cè)大都依賴(lài)于超濾膜包廠家的檢測(cè)方法，超濾膜包經(jīng)反復(fù)使 用后清洗再生，廠家建議通過(guò)膜完整性檢測(cè)儀檢測(cè)膜包完整性后即仍可使用，而實(shí)際應(yīng)用 中超濾膜包經(jīng)反復(fù)使用后清洗、再生，再使用廠家給定的清洗方法和檢測(cè)程序處理后，再次 檢測(cè)合格的膜包對(duì)菌毒或生物活性成分分離效果已不好，且使用儀器檢測(cè)膜包完整性較繁 瑣，需要反復(fù)拆卸膜包，此方法并不適用于需要連續(xù)生產(chǎn)的生物制品制備領(lǐng)域。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的在于提供一種操作簡(jiǎn)單、清洗效果良好、適用于反復(fù)清洗再生的超 濾膜包的清洗方法。
[0005] 本發(fā)明提供的一種清洗超濾膜包的方法，包括以下步驟：
[0006] (1)在超濾膜包清洗系統(tǒng)的進(jìn)液端和回流端安裝壓力表；使用熱堿鹽混合液清洗 超濾膜包，清洗過(guò)程中控制進(jìn)液端和回流端的壓力；
[0007] (2)使用PBS緩沖液清洗平衡超濾膜包；平衡過(guò)程中控制進(jìn)液端和回流端的壓力。
[0008] 本發(fā)明清洗方法適用的超濾膜包為新使用超濾膜包或反復(fù)使用后的超濾膜包。
[0009] 本發(fā)明方法還包括步驟（3)將注射用水通過(guò)管道連接至超濾膜包清洗系統(tǒng)的進(jìn) 液端，控制進(jìn)液端和回流端的壓力，待回流端流出的注射用水顯示PH值為6-7,測(cè)取水流 量，計(jì)算水通率。
[0010] 為防止引入熱源物質(zhì)或其他雜質(zhì)，使用的注射用水為過(guò)濾后注射用水。
[0011] 水通率=平均水流量/初始水流量X 1〇〇%。當(dāng)膜包為第一次使用時(shí)，定義本次水 流量均值為初始水流量；若為反復(fù)使用的超濾膜包則定義本次水流量為平均水流量，單位 均為 ml/min〇
[0012] 當(dāng)水通率多70%，即認(rèn)為清洗效果達(dá)標(biāo)，超濾膜包完整性良好。
[0013] 當(dāng)水通率〈70%需要再次執(zhí)行步驟（1)和（2)的操作，求算水通率。若第三次后仍 是不合格，再使用超濾膜包廠家指定方法檢測(cè)膜包完整性，進(jìn)一步確認(rèn)膜完整性是否良好。
[0014] 待水通率彡70 %后，再使用0.01-0. 05mol/L的PBS緩沖溶液平衡超濾膜包 3-8min，至回流溶液顯示為pH為7。
[0015] 本發(fā)明提供的一種清洗超濾膜包的方法中，步驟（1)熱堿鹽混合液是指30-50°C 的0. 1-1. Omol/L氫氧化鈉、0. 1% -0. 3%次氯酸鈉、2% -7%吐溫80的混合液。
[0016] 優(yōu)選地，步驟⑴熱堿鹽混合液是指30-40 °C的0. 3-0. 8mol/L氫氧化鈉、 0. 1% -0. 3%次氯酸鈉、2% -7%吐溫80的混合液。
[0017] 步驟（1)清洗時(shí)間為20_30min。
[0018] 步驟（1)和步驟（2)的進(jìn)液端壓力控制在10-20psi，回流端壓力控制在l-3psi。
[0019] 步驟（2)中 PBS 緩沖液的濃度為 0· 01-0. 05mol/L，pH 值為 7. 0-7. 4。
[0020] 優(yōu)選地，步驟（2)中PBS緩沖液的濃度為0· 01mol/L，pH值為7. 2。
[0021] 步驟（2)清洗平衡超濾膜包的時(shí)間為0. 5-lh。
[0022] 本發(fā)明清洗超濾膜包的方法可應(yīng)用于純化病毒液，進(jìn)一步可應(yīng)用于疫苗制備方法 中。
[0023] 本發(fā)明清洗超濾膜包的方法具有以下優(yōu)點(diǎn)及有益效果：
[0024] (1)使用本發(fā)明的熱堿鹽混合液循環(huán)清洗，可有效去除廠家保存超濾膜包使用的 堿與甘油混合保存液，也可有效去除經(jīng)反復(fù)使用后超濾膜纖維中殘留的小分子雜蛋白及其 他小分子殘留；且清除時(shí)間僅為20-30min，就能達(dá)到有效清洗的目的，遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于廠家指導(dǎo) 的 40_60min。
[0025] (2)使用0· 01-0. 05mol/L PBS (ρΗ7· 2)溶液清洗平衡，能夠使膜纖維表面張力大 大降低，雜質(zhì)分散開(kāi)以達(dá)到潤(rùn)濕、均勻分散、少量增溶作用，并最終達(dá)到去除雜質(zhì)的目的；經(jīng) 本發(fā)明方法清洗的超濾膜包7次清洗的水通率均在90%以上。當(dāng)使用超濾膜包廠家指導(dǎo)的 清洗方法沖洗后，7次清洗之后水通率僅在70%以上。水通率為73%的超濾膜包再使用本 發(fā)明方法進(jìn)行清洗時(shí)，不僅清洗所用時(shí)間大大減少，且清洗效果優(yōu)良，水通率又達(dá)到91 %。
[0026] (3)安裝壓力表以檢測(cè)操作過(guò)程中的壓力，為檢測(cè)初始水流量和平均水流量 提供可靠性數(shù)據(jù)，并可確保在清洗壓力范圍內(nèi)（操作壓力范圍：〇· 05bar-0. 12bar或 5psi-12psi)完成透析濃縮菌毒或生物活性成分液，保證操作過(guò)程中膜包完整性的可控性， 較好的降低透析、濃縮過(guò)程中膜穿透、膜滲漏等風(fēng)險(xiǎn)。
[0027] (4)本發(fā)明方法簡(jiǎn)單易控，所使用溶液均為疫苗生產(chǎn)過(guò)程中常用溶液，不會(huì)增加產(chǎn) 品質(zhì)量安全風(fēng)險(xiǎn)，且可有效預(yù)防因泄露導(dǎo)致產(chǎn)品損失、環(huán)境污染、人員危險(xiǎn)事件。
[0028] (5)與現(xiàn)有技術(shù)的清洗方法相比，經(jīng)過(guò)本發(fā)明方法清洗的超濾膜包能夠有效降低 抗原損耗，保證了抗原產(chǎn)品的質(zhì)量，間接降低生產(chǎn)成本。
【具體實(shí)施方式】
[0029] 以下實(shí)施例進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明的內(nèi)容，但不應(yīng)理解為對(duì)本發(fā)明的限制。在不背離 本發(fā)明精神和實(shí)質(zhì)的情況下，對(duì)本發(fā)明方法、步驟或條件所作的修改或替換，均屬于本發(fā)明 的范圍。
[0030] 若未特別指明，實(shí)施例中所用的技術(shù)手段為本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的常規(guī)手段； 實(shí)施例中所用的試劑為市售商品。實(shí)施例中所用的超濾膜包購(gòu)自P公司。廠家提供的超濾 膜包的清洗方法為：常溫下使用0. 5-1. Omol/L氫氧化鈉溶液循環(huán)清洗超濾膜包0. 5-1. Oh， 控制清洗壓力（進(jìn)液端和回流端的操作壓力范圍：〇· 05bar-0. 12bar或5psi-12psi)，之 后使用緩沖液沖洗堿液〇. 5-1. 0h，再使用緩沖液或注射用水檢測(cè)超濾膜包水通率，水通率 多70 %為合格，水通率合格后繼續(xù)使用緩沖液平衡超濾膜包后就可以進(jìn)行生產(chǎn)操作。
[0031] 實(shí)施例1清洗超濾膜包的方法（1)
[0032] 將新膜包從堿與甘油混合保存液取出，用純化水沖洗去除表面堿溶液。將潔凈后 膜包安裝至超濾夾具中，且分別在進(jìn)液端、回流端安裝壓力表，以檢測(cè)操作過(guò)程中的壓力。
[0033] 清洗：
[0034] (1)堿鹽混合液循環(huán)清洗：
[0035] 配制溫度40°C 0. lmol/L氫氧化鈉、5%吐溫80與0. 25%次氯酸鈉堿鹽混合液。將 堿鹽混合液通過(guò)管道連接至超濾系統(tǒng)進(jìn)液端，通過(guò)控制蠕動(dòng)泵泵速將超濾系統(tǒng)進(jìn)液端壓 力控制在15psi，回流端壓力控制在2psi。保證進(jìn)液與回流端壓力穩(wěn)定在上述壓力范圍內(nèi)，