專利名稱:一種hiv陽(yáng)性血清的替代物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā)明涉及免疫生化領(lǐng)域,特別涉及一種HIV陽(yáng)性血清的替代物。
背景技術(shù):
現(xiàn)有技術(shù)中,對(duì)于檢測(cè)人類兔疫缺陷病毒抗體,通常采用酶聯(lián)免疫試劑盒,此種試劑盒的陽(yáng)性對(duì)照血清經(jīng)過(guò)滅活處理,但是目前對(duì)于試劑盒中HIV抗體的能保持活性,同時(shí)試劑盒中HIV病毒徹底滅活的方法并沒(méi)有定論。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是由于現(xiàn)有技術(shù)中檢測(cè)人類兔疫缺陷病毒抗體試劑盒中陽(yáng)性對(duì)照血清可能存在潛在的感染,這樣對(duì)于需要檢測(cè)的人來(lái)說(shuō)有一種潛在的危險(xiǎn),本發(fā)明為解決已有技術(shù)中的上述技術(shù)問(wèn)題,所采用的技術(shù)方案是提供一種HIV陽(yáng)性血清的替代物,所述的替代物是將非人的抗HIV抗體或其處理液與正常人免疫球蛋白或其處理液通過(guò)交聯(lián)反應(yīng)得到的交聯(lián)物。本發(fā)明的實(shí)質(zhì)是把非人的抗HIV的抗體活性(即與HIV抗原的反應(yīng)活性)和正常人免疫球蛋白的抗原活性(即與抗人免疫球蛋白抗體酶結(jié)合物的反應(yīng)活性)相結(jié)合,從而達(dá)到消除人抗致病因子抗體陽(yáng)性血清(或血漿)中可能帶有致病因子的危險(xiǎn)性又具備抗致病因子抗體陽(yáng)性血清的反應(yīng)性的目的,其中非人的抗HIV抗體可以是單克隆抗體。基因工程抗體或HIV抗原(病毒裂解物或合成肽或基因工程肽)免疫動(dòng)物得到的抗體??梢允峭暾目贵w或具抗體活性的片段。正常人免疫球蛋白是指無(wú)抗HIV抗體活性的人免疫球蛋白,即經(jīng)酶免疫測(cè)定法(EIA)檢測(cè)HIV為陰性的人免疫球蛋白,可以是完整的人免疫球蛋白或其片段。交聯(lián)的方法有多種,如常用的有戊二醛法、苯酮法等。
本發(fā)明和已有技術(shù)相對(duì)照,本發(fā)明的替代物來(lái)源于非人的抗HIV抗體和正常人免疫球蛋白,因此從根本上避免了陽(yáng)性血清潛在感染的危險(xiǎn)性。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1①將8mg抗HIV單克隆抗體溶解于2ml 0.1M PH7.5 PBS,于23℃下,攪拌加入0.2umol SPDP,反應(yīng)30分鐘后,裝透析袋,對(duì)0.1M PH7.5PBS透析,換液四次。
②將16mg人兩種球蛋白(抗HIV抗體活性經(jīng)EIA檢測(cè)為陰性)溶解于2ml 0.1M PH7.5 PBS,于23℃下,攪拌加入0.4umol SPDP,反應(yīng)30分鐘后,裝透析袋,對(duì)0.1M PH4.5醋酸鹽緩沖液透析,換液四次。加入終濃度為25mM的DTT于23℃下,反應(yīng)30分鐘,裝透析袋,對(duì)0.1M PH7.5PBS透析,換液四次。
③將①、②中的處理物混合,于23℃反應(yīng)1小時(shí),于4℃下反應(yīng)24小時(shí),即得交聯(lián)物,離心會(huì)沉淀,上清用正常人血清或血漿稀釋備用,并加入萬(wàn)分之一疏柳汞防腐,特性不變。
權(quán)利要求
1.一種HIV陽(yáng)性血清的替代物,其特征在于所述的替代物是將非人的抗HIV抗體或其處理液與正常人免疫球蛋白或其處理液通過(guò)交聯(lián)反應(yīng)得到的交聯(lián)物。
2.如權(quán)利要求1所述的一種HIV陽(yáng)性血清的替代物,其特征在于非人的抗HIV抗體為單克隆抗體。
3.如權(quán)利要求1所述的一種HIV陽(yáng)性血清的替代物,其特征在于非人的抗HIV抗體為基因工程抗體或HIV抗原免疫動(dòng)物得到的抗體。
4.如權(quán)利要求1或3所述的一種HIV陽(yáng)性血清的替代物,其特征在于所述的抗體是完整的抗體或具抗體活性的片段。
5.如權(quán)利要求1或3所述的一種HIV陽(yáng)性血清的替代物,其特征在于所述的抗體是完整的人免疫球蛋白或其片段。
全文摘要
一種HIV陽(yáng)性血清的替代物,是將非人的抗HIV抗體或其處理液與正常人免疫球蛋白或其處理液通過(guò)交聯(lián)反應(yīng)得到的交聯(lián)物。本發(fā)明的實(shí)質(zhì)是把非人的抗HIV的抗體活性(即與HIV抗原的反應(yīng)活性)和正常人免疫球蛋白的抗原活性(即與抗人免疫球蛋白抗體酶結(jié)合物的反應(yīng)活性)相結(jié)合,從而達(dá)到消除人抗致病因子抗體陽(yáng)性血清(或血漿)中可能帶有致病因子的危險(xiǎn)性又具備抗致病因子抗體陽(yáng)性血清的反應(yīng)性的目的,本發(fā)明的替代物來(lái)源于非人的抗HIV抗體和正常人免疫球蛋白,因此從根本上避免了陽(yáng)性血清潛在感染的危險(xiǎn)性。
文檔編號(hào)G01N33/66GK1488944SQ02137358
公開(kāi)日2004年4月14日 申請(qǐng)日期2002年10月9日 優(yōu)先權(quán)日2002年10月9日
發(fā)明者曾立波 申請(qǐng)人:上海市刑事科學(xué)技術(shù)研究所