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      通過(guò)對(duì)子宮內(nèi)膜的月經(jīng)組織(經(jīng)期組織)的測(cè)試而確定子宮內(nèi)膜狀況的方法

      文檔序號(hào):5860091閱讀:426來(lái)源:國(guó)知局
      專利名稱:通過(guò)對(duì)子宮內(nèi)膜的月經(jīng)組織(經(jīng)期組織)的測(cè)試而確定子宮內(nèi)膜狀況的方法
      技術(shù)領(lǐng)域
      本發(fā)明涉及子宮內(nèi)膜的檢查。通過(guò)測(cè)試子宮內(nèi)膜的月經(jīng)組織(經(jīng)期組織)來(lái)進(jìn)行分析。
      領(lǐng)域現(xiàn)狀目前在發(fā)達(dá)國(guó)家普遍遭遇不育,其是一個(gè)十分確定的問(wèn)題。主要?dú)w因于目前想要小孩的配偶的年齡。與早些年相比,年齡顯著增長(zhǎng),因而,不僅婦女的荷爾蒙系統(tǒng)減弱,男人的精子也隨著時(shí)間經(jīng)歷變更。
      幸運(yùn)的是,成功受孕的兩個(gè)重要障礙雄性因素和輸卵管因素(輸卵管阻塞)已被克服,但這不是因?yàn)橹委熌芨纳凭?,而是在更高程度上因?yàn)閟permaterichysis和體外授精技術(shù)(IVF)。IVF是克服輸卵管阻塞問(wèn)題的唯一技術(shù)。
      然而,盡管這類方法在全球范圍建立起來(lái),其結(jié)果并不如預(yù)想的成功。就著床而言,其成功率為5-40%,而IVF輔助懷孕的胎兒排斥率卻更高一點(diǎn)。
      子宮內(nèi)膜是實(shí)體組織,從其內(nèi)部覆蓋著子宮,受到荷爾蒙的周期性作用的影響。在28天的循環(huán)中,由月經(jīng)的第一天開(kāi)始,在雌激素作用下,子宮內(nèi)膜厚度增加,其所包含的腺體增長(zhǎng)。子宮內(nèi)膜的功能層,在每個(gè)周期中脫落又重新形成,其發(fā)育于子宮內(nèi)膜基層,位于更深層水平上。
      卵巢的排卵發(fā)生在月經(jīng)周期的第14天。然后,黃體即培育卵母細(xì)胞的卵泡的剩余部分,產(chǎn)生黃體酮。黃體酮為胎兒著床預(yù)備已發(fā)育妥當(dāng)?shù)淖訉m內(nèi)膜。在周期的末期,由于黃體的退化,功能停止,子宮內(nèi)膜的功能層未接受到黃體酮的加強(qiáng)活性而脫落(月經(jīng))。由于荷爾蒙的作用,子宮內(nèi)膜的細(xì)胞組成經(jīng)歷周期性的變化,其最終目標(biāo)是著床和胎兒的保護(hù)(一旦受精)。
      值得指出的是,月經(jīng)組織并不象傳統(tǒng)上認(rèn)為的那樣是血液。月經(jīng)物質(zhì)不凝結(jié),而其所含的白血球細(xì)胞的比例與血液完全不同。給人血液印象的大量的紅血球細(xì)胞著位于脈管外的月經(jīng)前子宮內(nèi)膜中,結(jié)果隨月經(jīng)組織釋放出來(lái),同時(shí)伴有子宮內(nèi)膜細(xì)胞的其余部分。因而,“月經(jīng)組織”的概念對(duì)應(yīng)于周期中最后一天的子宮內(nèi)膜。
      技術(shù)觀點(diǎn)為能夠受精和保護(hù)胎兒,需要一定條件。這些條件致使子宮內(nèi)膜成為能夠保護(hù)外源(非自身)抗原的唯一器官,與人類生理學(xué)(免疫學(xué))控制外來(lái)移植的排斥的規(guī)律相反。遺憾的是,還不能理解子宮內(nèi)膜在此點(diǎn)上是如何成為普遍規(guī)律的例外的。然而,感染的存在(尤其是由支原體引起的感染)以及免疫病理學(xué)因素已經(jīng)從各種層次上牽涉到預(yù)防著床或胎兒的保護(hù),即如果沒(méi)有染色體缺陷或其它明顯的原因?qū)е绿号懦狻?br> 通過(guò)采用多種技術(shù)研究750名有不育病史和500名有流產(chǎn)病史的婦女,我們得出結(jié)論,免疫系統(tǒng)的的特定細(xì)胞定居在子宮內(nèi)膜,其在著床過(guò)程及胎兒的保護(hù)中發(fā)揮著關(guān)鍵的作用。更進(jìn)一步,我們得出結(jié)論,遷移到子宮內(nèi)膜的有毒的白血球細(xì)胞可能在試圖消滅微生物時(shí),在子宮內(nèi)膜中形成既不利于著床、也不利于胎兒保護(hù)的微環(huán)境。
      發(fā)明描述作為上述結(jié)果,我們認(rèn)為收集脫落的子宮內(nèi)膜組織(月經(jīng)組織)是有目的的和有用的,可利用其來(lái)分析子宮內(nèi)膜的狀況。該項(xiàng)檢查可在常規(guī)基礎(chǔ)上進(jìn)行達(dá)到下列目的研究子宮內(nèi)膜淋巴細(xì)胞亞群的組成。
      研究子宮內(nèi)膜中微生物的存在。
      研究子宮內(nèi)膜的細(xì)胞組成(用于各種診斷目的)。
      同步分析淋巴細(xì)胞亞群的組成和檢測(cè)微生物。
      遺憾的是,當(dāng)今世界對(duì)于子宮內(nèi)膜的敵意(hostility)估計(jì)不足,這反映在成功授精后的妊娠機(jī)會(huì)。
      根據(jù)我們的觀點(diǎn),不成功嘗試很大部分歸結(jié)于子宮內(nèi)膜的敵意。維系這一概念基于下列事實(shí),在大多數(shù)嘗試中著床不成功,即便使用的精子和卵子來(lái)自可生育的供體。
      目前,研究子宮內(nèi)膜的方法有下列5種途徑陰道內(nèi)超聲波檢查法。該方法測(cè)定子宮內(nèi)膜的厚度,其反映子宮內(nèi)膜對(duì)雌激素的反應(yīng)。在設(shè)計(jì)體外授精方案和確定排卵時(shí)間時(shí)要考慮這一指征。然而,這一檢查在應(yīng)用時(shí)受到限制,因其在炎癥存在下、有胎兒排異風(fēng)險(xiǎn)等時(shí)不能從子宮內(nèi)膜的接受物上產(chǎn)生任何信息。
      子宮輸卵管造影術(shù)。該檢查方法用來(lái)遮蔽子宮腔并描繪輸卵管的通透性。也可看到子宮內(nèi)膜多卵囊(polypodes)。然而,該方法在胎兒著床的子宮內(nèi)內(nèi)膜的適應(yīng)性(作為微環(huán)境時(shí))方面不能獲得信息。
      子宮鏡檢查術(shù)。這是一種檢查子宮內(nèi)膜表面的可視方法。可用來(lái)測(cè)定子宮內(nèi)膜的多卵囊、形態(tài)缺陷和聯(lián)合,甚至炎癥,只要它們已引起可視的損傷。然而,該方法不能用來(lái)研究微環(huán)境以確定子宮內(nèi)膜如何不利于接受和保護(hù)(發(fā)育)胎兒。該檢查方法的特征在于其相對(duì)較高的花費(fèi)和需要麻醉。
      子宮內(nèi)膜活組織切片檢查。這是一種特別有用的檢查方法,可用來(lái)確定月經(jīng)周期所處的狀態(tài)、當(dāng)前周期中的排卵時(shí)間、黃體不充分,甚至可通過(guò)組織的分子分析確定微生物的存在。因?yàn)檫@是迄今唯一一種能使我們確定子宮內(nèi)膜的細(xì)胞組成和得出有關(guān)導(dǎo)致不孕癥或胎兒排異因素的結(jié)論的方法,因而可從活組織材料的檢查中獲取有關(guān)子宮內(nèi)膜免疫學(xué)狀況的重要和有價(jià)值的信息。通過(guò)針或麻醉后的刮除術(shù)取得材料。該方法的缺點(diǎn)在于相對(duì)比較疼痛和不能反復(fù)進(jìn)行。除此以外,如果針撮不準(zhǔn)確,還存在傷害的危險(xiǎn),因此,取樣操作的醫(yī)生必須高度專業(yè)化。另外,用該方法不可能對(duì)子宮內(nèi)膜進(jìn)行完整的免疫學(xué)研究,因?yàn)榻M織已經(jīng)過(guò)福爾馬林固定,并在經(jīng)處理后的組織中,許多淋巴細(xì)胞分子發(fā)生改變,通過(guò)常規(guī)方法(免疫組織化學(xué))不能識(shí)別,其結(jié)果不能得出結(jié)論。
      宮頸液培養(yǎng)。這是用來(lái)診斷生殖道感染的極其重要的常規(guī)檢查方法。該方法在測(cè)定陰道和宮頸感染時(shí)高度靈敏,但用于診斷子宮內(nèi)膜炎癥時(shí)似乎并不同樣靈敏。導(dǎo)致不育的微生物有上升的趨向,顯示取向于子宮內(nèi)膜和輸卵管,因此,有增長(zhǎng)的可能,事實(shí)上十分常見(jiàn)的現(xiàn)象是宮頸液培養(yǎng)結(jié)果為陰性,盡管在子宮內(nèi)膜中存在微生物病因。已有利用取得的宮頸液通過(guò)分子DNA測(cè)試(聚合酶鏈反應(yīng),PCR)來(lái)檢測(cè)微生物的嘗試。兩種測(cè)定方式(宮頸液培養(yǎng)對(duì)月經(jīng)組織檢查)的靈敏度未見(jiàn)差異報(bào)道。因而,作為方法培養(yǎng)的靈敏度是毋庸置疑的,然而問(wèn)題在于取樣的部位不適當(dāng)。應(yīng)注意的是,用于培養(yǎng)的宮頸液的取樣部位離胎兒著床的部位要大于5厘米。
      本發(fā)明方法陳述為研究不孕癥或胎兒排異風(fēng)險(xiǎn),檢查月經(jīng)組織樣品以確定子宮內(nèi)膜中微生物的存在和子宮內(nèi)膜的細(xì)胞組成。
      實(shí)施本發(fā)明的方法在首次大量月經(jīng)潮階段,檢查下的婦女將前一個(gè)月經(jīng)周期的100-1000μl脫落的子宮內(nèi)膜(月經(jīng)組織)收集在50ml的廣口試管中,試管中包含少量的等滲緩沖液(維持pH穩(wěn)定性和保護(hù)細(xì)胞的生存能力)。
      月經(jīng)潮是自動(dòng)和自然發(fā)生的,在婦女方面不需要特別的努力,2-15分鐘的間隔足夠用于材料的收集。
      詳細(xì)方法婦女取坐勢(shì),將無(wú)蓋試管的管口放在陰戶的靠后邊緣,液滴自由流入試管中。依月經(jīng)量,材料將因重力流入管底與緩沖液混合。在有些情況下,由于具有高粘性(存在粘液等),組織液滴停留在管口或管壁上,只需將管蓋蓋上上下?lián)u動(dòng)幾次,以便緩沖液將樣本吸取向管底。
      收集的試管為標(biāo)準(zhǔn)試管。既然迄今為止還沒(méi)有作為研究月經(jīng)組織的常規(guī)檢查,所以尚無(wú)可商業(yè)購(gòu)得的特殊試管。
      優(yōu)選的是收集試管應(yīng)透明,有圓錐或圓形的管底,在管壁及圓錐形管底必須有顯示體積的刻度,因?yàn)橹徊杉苌袤w積的的組織。優(yōu)選的是試管的圓錐形或圓形管底起始于5ml刻度處,其直徑逐漸減小并每隔0.25ml做刻度標(biāo)記。此類試管可由使用的婦女購(gòu)得,滅菌并包含由等滲緩沖液(即等滲液,其維持pH穩(wěn)定性和保護(hù)細(xì)胞的生存能力)。
      在研究不育和胎兒排異風(fēng)險(xiǎn)的情形下,根據(jù)該發(fā)明的一種應(yīng)用,子宮內(nèi)膜檢查可要求采用專門的免疫表型分析來(lái)進(jìn)行子宮內(nèi)膜淋巴細(xì)胞的研究。如果這樣,遵循明確已制定的方法,從樣本中分離淋巴細(xì)胞更加容易,并且此點(diǎn)的研究可根據(jù)方法進(jìn)行,這些方法已描述為對(duì)來(lái)自不同體液(血液、胸膜液等)的其他對(duì)應(yīng)細(xì)胞群的檢查。
      更具體而言,如

      圖1左部所顯示,從樣本中提取淋巴細(xì)胞,用雙層Ficoll(第一層為100%Ficoll,第二層75%RPMI)進(jìn)行。樣本用三倍體積的正常的滅菌鹽溶液(09%NaCl)稀釋,放置在雙層Ficoll的頂部,形成層。接著在900rpm離心45分鐘,然后如圖1左部所示分離下部的細(xì)胞層。再用磷酸鹽緩沖的鹽水洗兩(2)次。最后,標(biāo)記淋巴細(xì)胞并通過(guò)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀來(lái)分析。
      子宮內(nèi)膜組織的收集可在婦女家中方便地進(jìn)行,但必須自收集5-6個(gè)小時(shí)內(nèi)帶到。應(yīng)明確的是樣本一定要在月經(jīng)最初的30個(gè)小時(shí)內(nèi)收集,因?yàn)檫M(jìn)行上述檢查要求有足夠量的淋巴細(xì)胞。
      為檢查子宮內(nèi)膜,本發(fā)明的另一項(xiàng)應(yīng)用可包括研究是否存在微生物(即支原體、衣原體等)或其它微生物。在此情形下,樣本收集可在月經(jīng)期的任一階段進(jìn)行。每位婦女可在家中收集材料并在更長(zhǎng)的時(shí)間內(nèi)(長(zhǎng)達(dá)1周)帶來(lái),通過(guò)DNA測(cè)試檢測(cè)微生物。換言之,即使月經(jīng)開(kāi)始于公共假期,待檢查的婦女用試管收集材料并通過(guò)郵件寄出,因此這對(duì)于居住在離實(shí)驗(yàn)室很遠(yuǎn)的地方(省、島嶼等)的人也十分方便。這種檢測(cè)引起婦科問(wèn)題的微生物的方法不僅可用來(lái)研究研究胎兒著床的微環(huán)境以及鑒定鑒定問(wèn)題,而且可在嘗試要小孩前進(jìn)行測(cè)試,以避免將來(lái)的任何生殖失敗。其重要性在于年輕時(shí)的微生物感染,如衣原體或支原體感染可能導(dǎo)致輸卵管阻塞或輸卵管積水。下列詳細(xì)描述將顯示本發(fā)明檢查微生物存在的方法是至今為止比陰道液培養(yǎng)或一般宮頸液研究方法更靈敏。更進(jìn)一步,本發(fā)明的檢查微生物的方法,其優(yōu)點(diǎn)對(duì)處女更明顯。
      圖2顯示建議的檢查方法對(duì)于檢測(cè)與子宮內(nèi)膜相關(guān)的微生物感染的靈敏度。作為常規(guī)方法宮頸液檢測(cè)子宮內(nèi)膜微生物的靈敏度為30-60%。作為備選方法宮頸液分子檢測(cè)(例如PCR)子宮內(nèi)膜微生物的靈敏度為45-60%。月經(jīng)組織的培養(yǎng)不用于篩選子宮內(nèi)膜的微生物,其靈敏度低于5%。另一方面,本發(fā)明建議的分子檢測(cè)月經(jīng)組織的方法(PCR)篩選子宮內(nèi)膜的微生物的靈敏度為100%。
      本發(fā)明的另一項(xiàng)應(yīng)用是檢查子宮內(nèi)膜的細(xì)胞組成,其可用于診斷目的(即未排卵周期)。
      在本發(fā)明的其他應(yīng)用中,從子宮內(nèi)膜組織分離淋巴細(xì)胞并培養(yǎng)。這些淋巴細(xì)胞經(jīng)初始檢查有足夠比例(即達(dá)到全部淋巴細(xì)胞群的70%以上)的子宮內(nèi)膜NK型(天然殺傷細(xì)胞)淋巴細(xì)胞(CD56+CD16-CD3-),然后進(jìn)行培養(yǎng)。細(xì)胞上清液(培養(yǎng)液)可用于淋巴細(xì)胞源自同一身體或不同身體中研究對(duì)同種異體移植物排斥(外源移植)的抑制。同樣的淋巴細(xì)胞上清液也可用于淋巴細(xì)胞源自同一婦女或另一婦女的胎兒排異終止。
      本發(fā)明方法的優(yōu)點(diǎn)就利用天然狀態(tài)下的月經(jīng)組織物種測(cè)定不育狀況的優(yōu)點(diǎn)而言,下列幾點(diǎn)需要強(qiáng)調(diào)易于提取足夠量的材料在這方面,本方法優(yōu)于其它技術(shù)。婦女避免了婦科檢查的壓力,可以獨(dú)自在家中收集樣本,如果第一次嘗試失敗,可重復(fù)收集。此外,借助試管底部的刻度,婦女可以監(jiān)控所收集樣本的量。采集的量(100-1000μl)足夠用于下述所有的檢查??紤]到有關(guān)檢查或甚至預(yù)防不育的信息,該方法與子宮內(nèi)膜活組織切片檢查相比,特別有優(yōu)勢(shì)。
      低花費(fèi)包含緩沖液的特殊的收集試管價(jià)格極其低廉,只相當(dāng)于子宮內(nèi)膜活組織切片檢查花費(fèi)的1%-0.5%。
      檢驗(yàn)的靈敏度(結(jié)果的有效性)已經(jīng)檢查近200名有不育和/或流產(chǎn)病史的婦女(在雅典的LOCUS MEDICUS Ltd.實(shí)驗(yàn)室),通過(guò)篩查月經(jīng)組織樣本中的支原體和衣原體,我們觀察到在最近已經(jīng)過(guò)宮頸液檢查未檢測(cè)到前述微生物的共140名婦女中,有44%人型支原體(Mycoplasma hominis)(MH)呈陽(yáng)性結(jié)果,32%解脲尿支原體(Ureaplesma urealyticum)(UU)為陽(yáng)性,而46%砂眼衣原體(Chlamydia trachomatis)(CT)為陽(yáng)性。這意味著,用宮頸液培養(yǎng)方法檢測(cè)MH呈陰性的婦女,實(shí)際上攜帶微生物,因?yàn)椴捎帽景l(fā)明建議的檢驗(yàn)方法(月經(jīng)組織液滴),44%的婦女檢查結(jié)果為陽(yáng)性。同樣地,在用宮頸液檢查UU為陰性的婦女中,32%的婦女用本發(fā)明中的方法檢查結(jié)果為陽(yáng)性。
      考慮到這些微生物在不育的病理生理學(xué)上有十分重要的作用,它們是導(dǎo)致流產(chǎn)的基本因素,月經(jīng)組織檢查具有明顯的決定性的價(jià)值,因?yàn)樵擁?xiàng)檢查可清楚地指出胎兒著床部位是否被危險(xiǎn)的微生物所感染。
      就衣原體感染而言,在用常規(guī)檢驗(yàn)方法檢查為陰性的例子中,用月經(jīng)組織檢查檢測(cè)到感染的百分率為46%。
      衣原體的存在直接與輸卵管阻塞相關(guān),這類感染在20-25歲的婦女中尤為常見(jiàn),即便在婦女決定懷孕前,為防患與未然,檢查子宮內(nèi)膜有無(wú)衣原體是十分必要的。
      與用分子方法檢測(cè)細(xì)針獲取的生物活體樣本中的同種微生物相比,用分子方法檢測(cè)月經(jīng)樣本中的微生物更加靈敏。其優(yōu)點(diǎn)在于這樣的事實(shí),月經(jīng)組織由子宮內(nèi)膜的全部物質(zhì)的代表性材料組成,當(dāng)然不同于僅采集局部一點(diǎn)的生物活體檢查材料。
      此外,在通過(guò)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的免疫表型分析過(guò)程中,由于分離過(guò)程能使得目的細(xì)胞保持完全的生存能力,因而淋巴細(xì)胞中的分子能保持不變并可用于檢測(cè)。
      就這一點(diǎn)而言,本發(fā)明方法遠(yuǎn)優(yōu)于固定的活組織檢查材料的免疫表型分析。其原因在于,用于保存活組織檢查材料的固定化合物福爾馬林,即使能保護(hù)被固定材料的結(jié)構(gòu)不被分解,也會(huì)改變其分子結(jié)構(gòu)。換言之,人們通過(guò)活組織檢查獲得的僅僅是觀察的材料,不能應(yīng)用于大范圍的測(cè)試?;罱M織檢查材料的另一個(gè)用處是提取DNA以進(jìn)行微生物研究。代替活組織檢查材料,本發(fā)明方法可利用取自子宮內(nèi)膜材料進(jìn)行功能分析,而不僅限于觀察之用。
      本方法的再現(xiàn)性本方法的一個(gè)重要優(yōu)點(diǎn)在于其可重復(fù)因而能監(jiān)測(cè)治療效果。免疫治療,其志在減少子宮內(nèi)膜中有毒細(xì)胞供應(yīng),以及抗生素治療,其旨在消滅微生物,兩者均可在待檢婦女中得到監(jiān)測(cè)。本方法特別重要的特征在于其靈敏性和專業(yè)性,其能夠分別使假陰性和假陽(yáng)性的結(jié)果最小化。簡(jiǎn)言之,在抗生素治療后,進(jìn)行重新檢查確認(rèn)沒(méi)有微生物,可確切地認(rèn)定為陰性結(jié)果。
      子宮內(nèi)膜的同期性使用本發(fā)明的方法可安全進(jìn)行月經(jīng)周期最后一天的細(xì)胞成分的研究。婦女有時(shí)月經(jīng)不規(guī)則,其它方法的檢驗(yàn)結(jié)果不能與婦女體內(nèi)狀況同步。當(dāng)進(jìn)行子宮內(nèi)膜活組織檢查時(shí),由于月經(jīng)周期的最后一天不能確定,去除的子宮內(nèi)膜的程度不能評(píng)價(jià)。
      本方法的本質(zhì)即本發(fā)明的目的,是提出研究不育的新途徑并對(duì)治療結(jié)果作出評(píng)價(jià),該方法基于月經(jīng)周期最后階段的淋巴細(xì)胞群的組成。沒(méi)有其它方法可解決這一問(wèn)題,很明顯,本方法的檢驗(yàn)結(jié)果包括婦女能以高的成功率進(jìn)行體外授精的重要標(biāo)準(zhǔn)。
      本方法的應(yīng)用實(shí)施例圖3顯示根據(jù)其體積(垂直軸)和粒度(水平軸)得出得子宮內(nèi)膜組織中淋巴細(xì)胞的分布,分別采集自能生育的婦女(圖3A)和不育的婦女(圖3B)。
      圖3A和圖3B中箭頭所指的圓圈內(nèi)的細(xì)胞對(duì)婦女接納和保護(hù)胎兒是至關(guān)重要的。這些稱為NK(天然殺傷細(xì)胞)的淋巴細(xì)胞(CD56+CD16-CD3-)維持子宮內(nèi)膜對(duì)胎兒的“友善”,其數(shù)量必須達(dá)到全部淋巴細(xì)胞的60%以上。淋巴細(xì)胞的總量在圖3A和圖3B中為圓圈中所顯示的細(xì)胞。
      很明顯,存在于不育婦女子宮內(nèi)膜中的這類細(xì)胞顯著減少。根據(jù)我們自己所做未出版的觀察,經(jīng)過(guò)持續(xù)至少2個(gè)月經(jīng)周期的合適治療后(如抗生素治療),這類細(xì)胞所占的百分率增高,婦女可提高胎兒著床和保護(hù)的機(jī)會(huì)。
      這類細(xì)胞在不育婦女的外周血中也減少。然而,在子宮內(nèi)膜中,這類細(xì)胞的比例似乎不受其它因素的影響,此類因素如生殖道感染、尿道感染等。圖3A和圖3B中小圓圈內(nèi)的細(xì)胞為與血球細(xì)胞相似的淋巴細(xì)胞。它們包括有毒群體,其雖然能夠保護(hù)子宮內(nèi)膜免于感染,但(其中的部分,大約近一半)對(duì)胎兒也是有毒的。圖3A和圖3B描繪的是本方法的全球第一例的特定應(yīng)用,其構(gòu)成了本發(fā)明的目的。
      月經(jīng)組織樣本檢查后,我們認(rèn)為只有當(dāng)其樣本成像與正常的樣本相似時(shí),如圖3A所示,即有足夠的子宮內(nèi)膜NK型淋巴細(xì)胞,圖中箭頭所顯示,婦女嘗試體外授精或spematerichysis才是有意義的。
      權(quán)利要求
      1.一種檢查子宮內(nèi)膜的方法,其通過(guò)收集和分析子宮內(nèi)膜的月經(jīng)組織(經(jīng)期組織)進(jìn)行。
      2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其中對(duì)月經(jīng)組織的檢查涉及淋巴細(xì)胞亞群組成的研究以評(píng)估子宮內(nèi)膜是否適合著床和胎兒保護(hù)。
      3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其中對(duì)月經(jīng)組織的檢查涉及有性活動(dòng)的婦女以及處女的子宮內(nèi)膜是否存在微生物的研究。
      4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其中對(duì)月經(jīng)組織的檢查涉及月經(jīng)組織的細(xì)胞組成的研究。
      5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其中對(duì)月經(jīng)組織的檢查涉及淋巴細(xì)胞亞群組成和是否存在微生物的同步研究。
      6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其中對(duì)子宮內(nèi)膜的檢查用來(lái)監(jiān)測(cè)免疫治療或抗生素治療的結(jié)果。
      7.根據(jù)權(quán)利要求1和2所述的方法,其中100至1000μl量的月經(jīng)組織采集自月經(jīng)潮的前30個(gè)小時(shí)階段,收集后馬上與等滲緩沖液混合以保持pH的穩(wěn)定性和細(xì)胞的生存能力,以及其中樣本研究最遲應(yīng)在提取樣本后5-6小時(shí)內(nèi)進(jìn)行。
      8.根據(jù)權(quán)利要求1和3所述的方法,其中100至1000μl量的月經(jīng)組織采集自月經(jīng)潮的任何階段,收集后馬上與等滲緩沖液混合以保持pH的穩(wěn)定性和細(xì)胞的生存能力,并且其中樣本檢查可在提取樣本后的1周內(nèi)進(jìn)行。
      9.淋巴細(xì)胞的上清液(培養(yǎng)液),其源自并已分離自月經(jīng)組織,所述月經(jīng)組織由占總淋巴細(xì)胞70%以上的子宮內(nèi)膜NK型所組成,該淋巴細(xì)胞的上清液用于研究對(duì)外源移植物排斥的阻塞或抑制,所述外源移植物與淋巴細(xì)胞源自同體或異體,以及用于研究預(yù)防淋巴細(xì)胞源自同一婦女或另一婦女的胎兒流產(chǎn)。
      10.用來(lái)收集月經(jīng)組織的試管,其特征在于質(zhì)地透明、具起始于5-ml刻度處的圓錐形或圓形的管底、自刻度5-ml的位置直徑開(kāi)始變小,在管壁和圓錐形或圓形管底具有細(xì)分的體積刻度,每隔0.25ml可見(jiàn)到細(xì)分的刻度。
      全文摘要
      本發(fā)明涉及子宮內(nèi)膜檢查。通過(guò)利用子宮內(nèi)膜的月經(jīng)組織(經(jīng)期組織)的檢驗(yàn)來(lái)進(jìn)行分析,收集經(jīng)期組織的目的正在于此。進(jìn)行檢驗(yàn)以研究淋巴細(xì)胞亞群的組成,以便評(píng)估子宮內(nèi)膜是否適合于著床和胎兒的保護(hù)。進(jìn)行此類測(cè)試也可研究子宮內(nèi)膜是否存在微生物以及經(jīng)期組織的細(xì)胞組成。本發(fā)明還描述了一種用于收集子宮內(nèi)膜組織的試管,該試管具有某些有利于經(jīng)期組織測(cè)試的特征。
      文檔編號(hào)G01N33/569GK1526070SQ02801781
      公開(kāi)日2004年9月1日 申請(qǐng)日期2002年5月20日 優(yōu)先權(quán)日2001年5月21日
      發(fā)明者瓦西利奧斯·齊列瓦可斯, 瓦西利奧斯 齊列瓦可斯 申請(qǐng)人:瓦西利奧斯·齊列瓦可斯, 瓦西利奧斯 齊列瓦可斯
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