專(zhuān)利名稱:測(cè)量對(duì)象物測(cè)量器具、測(cè)量裝置和測(cè)量方法
技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā)明涉及用于測(cè)量生物試料、食品、土壤等分析對(duì)象試料中含有的測(cè)量對(duì)象物的器具、裝置和方法。
背景技術(shù):
用于測(cè)量試料中的測(cè)量對(duì)象物的方法之一是免疫色層分析法(イムノクロマトグラフイ一)所涉及的測(cè)量法。免疫色層分析法可根據(jù)其測(cè)量原理分為流通型(フロ一スル一型)和橫流型(ラテラルフロ一型),不過(guò),近幾年,橫流型的免疫色層分析法成為主流。關(guān)于橫流型的免疫色層分析法,例如有人報(bào)告了使用在同一平面上的由可借助于毛細(xì)流來(lái)互相連接的第1部分和第2部分構(gòu)成的免疫色層分析法用裝置的試料中的測(cè)量對(duì)象物的測(cè)量法(例如,參照特開(kāi)平1-63865號(hào)公報(bào),特開(kāi)平10-73592號(hào)公報(bào))。
此處,該第1部分是含有可移動(dòng)地受到支撐的示跡器的試料添加部位,該示跡器例如由對(duì)以著色核糖體、著色聚合物空心顆粒等標(biāo)識(shí)進(jìn)行了標(biāo)識(shí)的測(cè)量對(duì)象物具有特異性的配體構(gòu)成,該第2部分是含有被固定化了的結(jié)合劑,可視地檢出該不溶性小胞記號(hào)的存否的部位,該結(jié)合劑對(duì)測(cè)量對(duì)象物具有特異性,以在第2部分結(jié)合了的示跡器被可視化的量存在。
還有人報(bào)告了使用免疫色層分析法用裝置的試料中的測(cè)量對(duì)象物的測(cè)量法(例如,特開(kāi)平1-32169號(hào)公報(bào)),該免疫色層分析法用裝置含有第1部分和第2部分,第1部分含有在準(zhǔn)可溶性蛋白質(zhì)的存在下含浸膠體粒子標(biāo)識(shí)物質(zhì)而干燥了的東西,第2部分含有測(cè)量對(duì)象物和膠體粒子標(biāo)識(shí)物質(zhì)結(jié)合所得的固定化試劑。
然而,這些方法都是可視地檢出試料中的測(cè)量對(duì)象物的測(cè)量方法,因而專(zhuān)用于定性分析或半定量分析,不能適用于定量分析。因此,現(xiàn)有免疫色層分析法所涉及的測(cè)量,其應(yīng)用范圍限于妊娠判斷等非常有限的范圍(例如,參照特表平1-503174號(hào)公報(bào))。
另一方面,使用水晶振子等壓電振子的定量分析和定性分析是公知的。本方法是利用抗原-抗體間的互相作用、互補(bǔ)性核酸間的互相作用,在水晶振子上生成復(fù)合體,把與復(fù)合體生成伴隨的質(zhì)量變化作為水晶振子的振動(dòng)數(shù)的變化來(lái)進(jìn)行捕捉的方法。到現(xiàn)在為止,有人報(bào)告了例如使用在水晶振子上被固定化了的蛋白質(zhì)A來(lái)檢出試料中的IgG的方法(例如,參照「分析化學(xué)(Analytical Chemistry)」,美國(guó)化學(xué)會(huì),1987年,第59卷,第23號(hào),2760-2763頁(yè)),使用在水晶振子上被固定化了的試樣DNA來(lái)檢出試料中的靶核酸的方法等(例如,參照特開(kāi)平1-35269號(hào)公報(bào))。
近幾年,隨著檢驗(yàn)方法的迅速化、多樣化的發(fā)展,從在被檢者的近旁采取試料,直到測(cè)量結(jié)果的輸出,這樣進(jìn)行的床邊檢驗(yàn)(ポイントオブケアテステイング)(POCT)盛行起來(lái)了,因而期盼可對(duì)應(yīng)POCT的可定量分析的測(cè)量裝置和測(cè)量方法的開(kāi)發(fā)。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種用于對(duì)生物試料等試料中包含的測(cè)量對(duì)象物迅速且簡(jiǎn)便、精度很好地進(jìn)行定量分析的器具、裝置和方法。
本發(fā)明與以下的(1)~(35)有關(guān)。
(1)一種測(cè)量對(duì)象物測(cè)量用器具,在試料中的測(cè)量對(duì)象物可借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)的支持體上具有試料添加部位(S)和檢出部位(Q),其特征在于,該檢出部位具有被2個(gè)電極夾著的壓電振子,在該壓電振子上預(yù)先固定了捕捉劑A(c1)或測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物(c1’),在該支持體上具有保持了黏合劑(b1),使其可借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)的黏合劑保持部位(BR)。
(2)上述(1)記載的器具,其中,該黏合劑保持部位設(shè)置在該試料添加部位和該檢出部位之間。
(3)上述(1)記載的器具,其中,該黏合劑保持部位夾隔該檢出部位而設(shè)置在該試料添加部位的相反側(cè)。
(4)一種測(cè)量對(duì)象物測(cè)量用器具,在試料中的測(cè)量對(duì)象物可借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)的支持體上具有試料添加部位(S)和檢出部位(Q),其特征在于,該檢出部位由被2個(gè)電極間夾著的壓電振子構(gòu)成,在該壓電振子上預(yù)先固定了與測(cè)量對(duì)象物結(jié)合的捕捉劑A(c1),或是標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物或測(cè)量對(duì)象物和黏合劑的復(fù)合物,以及與測(cè)量對(duì)象物或測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物和標(biāo)識(shí)化黏合劑結(jié)合的捕捉劑B(c3),在該支持體上具有保持了黏合劑(b1),使其可借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)的黏合劑保持部位(BR),而且在該支持體上具有在該黏合劑保持部位和檢出部位之間固定了測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物(b5),使其不會(huì)借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng),或在該支持體上保持了測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物(b5),使其可借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)的測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物固定部位(DF)或測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物保持部位(DR)。
(5)上述(1)~(4)中的任意一種記載的器具,其中,黏合劑是被標(biāo)識(shí)了的東西。
(6)一種測(cè)量對(duì)象物測(cè)量用器具,在試料中的測(cè)量對(duì)象物可借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)的支持體上具有試料添加部位(S)和檢出部位(Q),其特征在于,該檢出部位具有被2個(gè)電極夾著的壓電振子,在該壓電振子上預(yù)先固定了黏合劑(c2),在該支持體上具有保持了測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物(b2),使其可借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)的測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物保持部位(DR)。
(7)上述(6)記載的器具,其中,該測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物保持部位設(shè)置在該試料添加部位和該檢出部位之間。
(8)上述(6)記載的器具,其中,該測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物保持部位夾隔該檢出部位而設(shè)置在該試料添加部位的相反側(cè)。
(9)一種測(cè)量對(duì)象物測(cè)量用器具,在試料中的測(cè)量對(duì)象物可借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)的支持體上具有試料添加部位(S)和檢出部位(Q),其特征在于,該檢出部位由被2個(gè)電極間夾著的壓電振子構(gòu)成,在該壓電振子上預(yù)先固定了捕捉劑B(c3),在該支持體上具有保持了測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物(b2)和黏合劑(b3),使其可借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)的測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物保持部位(DR)和黏合劑保持部位(BR)。
(10)一種測(cè)量對(duì)象物測(cè)量用器具,在試料中的測(cè)量對(duì)象物可借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)的支持體上具有試料添加部位(S)和檢出部位(Q),其特征在于,該檢出部位具有被2個(gè)電極間夾著的壓電振子,在該壓電振子上預(yù)先固定了與測(cè)量對(duì)象物結(jié)合的黏合劑(c2),在該支持體上具有保持了測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物(b2),使其可借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)的測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物保持部位(DR),而且在該支持體上具有在該測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物保持部位和檢出部位之間的支持體中固定了黏合劑(b4),使其不會(huì)借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)的黏合劑固定部位(BF)。
(11)上述(6)~(10)中的任意一種記載的器具,其中,測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物是被標(biāo)識(shí)了的東西。
(12)上述(5)或(11)記載的器具,其中,該標(biāo)識(shí)是不溶性小胞體。
(13)上述(12)記載的器具,其中,該不溶性小胞體是金屬膠體或膠乳。
(14)一種測(cè)量對(duì)象物測(cè)量用器具,在試料中的測(cè)量對(duì)象物可借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)的支持體上具有試料添加部位(S)和檢出部位(Q),其特征在于,該檢出部位由被2個(gè)電極間夾著的壓電振子構(gòu)成,在該壓電振子上固定了捕捉劑A(c1)、測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物(c1′)、黏合劑(c2)或捕捉劑B(c3)。
(15)上述(1)~(14)中的任意一種記載的器具,其中,還含有展開(kāi)液吸收部位(d)。
(16)上述(1)~(15)中的任意一種記載的器具,其中,在該檢出部位,除了固定了捕捉劑A(c1)、測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物(c1′)、黏合劑(c2)或捕捉劑B(c3)的被2個(gè)電極夾著的壓電振子以外,還具有另一個(gè)被2個(gè)電極夾著的壓電振子,該壓電振子未固定捕捉劑A(c1)、測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物(c1′)、黏合劑(c2)和捕捉劑B(c3)中的任何一種。
(17)上述(1)~(16)中的任意一種記載的器具,其中,該壓電振子是水晶振子。
(18)一種測(cè)量對(duì)象物測(cè)量裝置,具有上述(1)~(17)中的任意一種記載的器具;與該器具的壓電振子的電極連接,測(cè)量該壓電振子的振動(dòng)數(shù)的振動(dòng)數(shù)測(cè)量電路;以及與該振動(dòng)數(shù)測(cè)量電路連接,根據(jù)振動(dòng)數(shù)來(lái)運(yùn)算測(cè)量對(duì)象物濃度的濃度運(yùn)算電路。
(19)一種試料中的測(cè)量對(duì)象物的定量方法,根據(jù)與在壓電振子上被固定了的物質(zhì)特異性地結(jié)合而產(chǎn)生的該壓電振子的振動(dòng)數(shù)的變化,對(duì)試料中的測(cè)量對(duì)象物進(jìn)行定量,其特征在于,在壓電振子上預(yù)先固定了捕捉劑A(c1)或測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物(c1′),采用試料中的測(cè)量對(duì)象物和黏合劑可借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)的支持體,向該捕捉劑A或該測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物供給試料和該黏合劑,使其與在壓電振子上被固定了的物質(zhì)特異性地結(jié)合。
(20)上述(19)記載的定量方法,其中,借助于相同方向的毛細(xì)流對(duì)該捕捉劑A或該測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物供給該試料和該黏合劑。
(21)上述(19)記載的定量方法,其中,借助于相反方向的毛細(xì)流對(duì)該捕捉劑A或該測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物供給該試料和該黏合劑。
(22)一種試料中的測(cè)量對(duì)象物的定量方法,根據(jù)與在壓電振子上被固定了的物質(zhì)特異性地結(jié)合而產(chǎn)生的該壓電振子的振動(dòng)數(shù)的變化,對(duì)試料中的測(cè)量對(duì)象物進(jìn)行定量,其特征在于,在壓電振子上預(yù)先固定了捕捉劑A(c1)或捕捉劑B(c3),采用固定了測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物(b5),使其不會(huì)借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng),而試料中的測(cè)量對(duì)象物和黏合劑(b1)可借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)的支持體,向該捕捉劑A或捕捉劑B供給試料和該黏合劑,使其與在壓電振子上被固定了的物質(zhì)特異性地結(jié)合。
(23)一種試料中的測(cè)量對(duì)象物的定量方法,根據(jù)與在壓電振子上被固定了的物質(zhì)特異性地結(jié)合而產(chǎn)生的該壓電振子的振動(dòng)數(shù)的變化,對(duì)試料中的測(cè)量對(duì)象物進(jìn)行定量,其特征在于,在壓電振子上預(yù)先固定了捕捉劑A(c1)或捕捉劑B(c3),采用試料中的測(cè)量對(duì)象物、黏合劑(b1)和測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物(b5)可借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)的支持體,向該捕捉劑A或捕捉劑B供給試料、該黏合劑和該測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物,使其與在壓電振子上被固定了的物質(zhì)特異性地結(jié)合。
(24)上述(17)~(23)中的任意一種記載的方法,其中,黏合劑是被標(biāo)識(shí)了的東西。
(25)一種試料中的測(cè)量對(duì)象物的定量方法,根據(jù)與在壓電振子上被固定了的物質(zhì)特異性地結(jié)合而產(chǎn)生的該壓電振子的振動(dòng)數(shù)的變化,對(duì)試料中的測(cè)量對(duì)象物進(jìn)行定量,其特征在于,在壓電振子上預(yù)先固定了黏合劑(c2),采用試料中的測(cè)量對(duì)象物和測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物(b2)可借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)的支持體,向該黏合劑供給試料和該測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物,使其與在壓電振子上被固定了的物質(zhì)特異性地結(jié)合。
(26)上述(25)記載的定量方法,其中,借助于相同方向的毛細(xì)流對(duì)該黏合劑供給該試料和該測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物。
(27)上述(25)記載的定量方法,其中,借助于相反方向的毛細(xì)流對(duì)該黏合劑供給該試料和該測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物。
(28)一種試料中的測(cè)量對(duì)象物的定量方法,根據(jù)與在壓電振子上被固定了的物質(zhì)特異性地結(jié)合而產(chǎn)生的該壓電振子的振動(dòng)數(shù)的變化,對(duì)試料中的測(cè)量對(duì)象物進(jìn)行定量,其特征在于,在壓電振子上預(yù)先固定了捕捉劑B(c3),采用試料中的測(cè)量對(duì)象物、測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物(b2)和黏合劑(b3)可借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)的支持體,向該捕捉劑B供給試料、該測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物和該黏合劑,使其與在壓電振子上被固定了的物質(zhì)特異性地結(jié)合。
(29)一種試料中的測(cè)量對(duì)象物的定量方法,根據(jù)與在壓電振子上被固定了的物質(zhì)特異性地結(jié)合而產(chǎn)生的該壓電振子的振動(dòng)數(shù)的變化,對(duì)試料中的測(cè)量對(duì)象物進(jìn)行定量,其特征在于,在壓電振子上預(yù)先固定了黏合劑(c2),采用固定了黏合劑(b4),使其不會(huì)借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng),而試料中的測(cè)量對(duì)象物和測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物(b2)可借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)的支持體,向該黏合劑供給試料和測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物,使其與在壓電振子上被固定了的物質(zhì)特異性地結(jié)合。
(30)上述(25)~(29)中的任意一種記載的方法,其中,測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物是被標(biāo)識(shí)了的東西。
(31)上述(24)或(30)記載的定量方法,其中,該標(biāo)識(shí)是不溶性小胞體。
(32)上述(31)記載的定量方法,其中,該不溶性小胞體是金屬膠體或膠乳。
(33)一種試料中的測(cè)量對(duì)象物的定量方法,根據(jù)與在壓電振子上被固定了的物質(zhì)特異性地結(jié)合而產(chǎn)生的該壓電振子的振動(dòng)數(shù)的變化,對(duì)試料中的測(cè)量對(duì)象物進(jìn)行定量,其特征在于,在壓電振子上預(yù)先固定了捕捉劑A(c1),采用試料中的測(cè)量對(duì)象物可借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)的支持體,向該捕捉劑A供給試料,使其與在壓電振子上被固定了的物質(zhì)特異性地結(jié)合。
(34)上述(17)~(29)中的任意一種記載的方法,其中,再采用未固定捕捉劑A(c1)、測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物(c1′)、黏合劑(c2)和捕捉劑B(c3)中的任何一種的第二壓電振子,向捕捉劑A(c1)、測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物(c1′)、黏合劑(c2)或捕捉劑B(c3)被固定化了第一壓電振子和第二壓電振子供給試料,作為對(duì)照來(lái)使用第二振動(dòng)數(shù)。
(35)上述(19)~(34)中的任意一種記載的方法,其中,壓電振子是水晶振子。
本發(fā)明的試料中的測(cè)量對(duì)象物測(cè)量用器具和試料中的測(cè)量對(duì)象物測(cè)量方法是免疫色層分析法用器具和使用了免疫色層分析法用器具的方法,其特征在于,作為檢出器具和檢出方法,分別利用了壓電振子和使用它的檢出方法。本發(fā)明的特征在于,使在設(shè)置在支持體上的試料添加部位添加了的試料借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而在支持體上移動(dòng),最終在位于檢出部位的壓電振子上形成復(fù)合體,作為振動(dòng)數(shù)的變化來(lái)檢出復(fù)合體形成量。
在本發(fā)明中使用的試料沒(méi)有特別限制,例如可以是全血、血漿、血清、臍帶血、髓液、唾液、羊水、尿、汗、胰液、眼淚等生物試料及食品、土壤等。還有,在這些生物試料中添加水媒介或有機(jī)溶劑、上述水媒介和上述有機(jī)溶劑的混合溶劑等而稀釋了的東西也可以作為試料來(lái)使用。
作為水媒介,只要能溶解生物試料,沒(méi)有特別限制,例如可以是脫離子水、蒸餾水、緩沖液等,不過(guò),優(yōu)選的是緩沖液。緩沖液用的緩沖劑只要具有緩沖能力即可,沒(méi)有特別的限定,可以是pH1~11的例如乳酸緩沖劑、檸檬酸緩沖劑、醋酸緩沖劑、琥珀酸緩沖劑、酞酸緩沖劑、磷酸緩沖劑、三乙醇胺緩沖劑、二乙醇胺緩沖劑、賴氨酸緩沖劑、巴比土酸緩沖劑、三(羥甲基)氨基甲烷緩沖劑、咪唑緩沖劑、蘋(píng)果酸緩沖劑、草酸緩沖劑、甘氨酸緩沖劑、硼酸緩沖劑、碳酸緩沖劑、甘氨酸緩沖劑、古德(グツド)緩沖劑等。作為古德緩沖劑,例如可以是2-嗎啉乙磺酸(MES)、雙(2-羥乙基)亞氨基三(羥甲基)甲烷(Bis-Tris)、N-(2-乙酰胺)亞氨二醋酸(ADA)、哌嗪-N,N’-雙(2-乙磺酸)(PIPES)、N-(2-乙酰氨基)-2-氨基乙磺酸(ACES)、3-嗎啉基-2-羥基丙磺酸(MOPSO)、N,N-雙(2-羥乙基)-2-氨基乙磺酸(BES)、3-嗎啉丙磺酸(MOPS)、N-[三(羥甲基)甲基]-2-氨基乙磺酸(TES)、2-[4-(2-羥乙基)-1-哌嗪]乙磺酸(HEPES)、3-[N,N-雙(2-羥乙基)氨基]-2-羥基丙磺酸(DIPSO)、N-三(羥甲基)甲氨基-2-羥基丙磺酸(TAPSO)、哌嗪-N,N’-雙(2-羥基乙磺酸)(POPSO)、3-[4-(2-羥乙基)-1-哌嗪]-2-羥基丙磺酸(HEPPSO)、3-[4-(2-羥乙基)-1-哌嗪]丙磺酸[(H)EPPS],N-[三(羥甲基)甲基]甘氨酸(Tricine)、N,N-雙(2-羥乙基)甘氨酸(Bicine)、N-三(羥甲基)甲基-3-胺基丙磺酸(TAPS)、N-環(huán)己基-2-胺基乙磺酸(CHES)、N-環(huán)己基-3-氨基-2-羥基丙磺酸(CAPSO)、N-環(huán)己基-3-胺基丙磺酸(CAPS)等。緩沖液的濃度只要是適合測(cè)量的濃度即可,沒(méi)有特別的限制,不過(guò),優(yōu)選的是0.001~2.0mol/L,更優(yōu)選的是0.005~1.0mol/L,特別優(yōu)選的是0.01~0.1mol/L。
作為有機(jī)溶劑,可以是乙腈、己烷、甲醇、乙醇、二氯甲烷、氯仿、丙酮、二甲基甲酰胺、二氧六圜和二甲基亞砜等。
還有,對(duì)于食品、土壤,經(jīng)過(guò)預(yù)處理之后也可以作為試料來(lái)使用。此處,食品、土壤的預(yù)處理例如可以是上述水媒介或上述有機(jī)溶劑、上述水媒介和上述有機(jī)溶劑的混合溶劑等適當(dāng)?shù)娜軇┧婕暗膶?duì)食品、土壤中的成分的提取、化學(xué)修飾等。
作為化學(xué)修飾,例如可以是食品、土壤中的成分的化學(xué)試劑所涉及的構(gòu)造變換等。
在本發(fā)明中作為測(cè)量對(duì)象物,只要是與特定的物質(zhì)特異性地形成復(fù)合體的東西即可,沒(méi)有特別的限制,例如可以是用酵素反應(yīng)來(lái)測(cè)量的成分、用抗原抗體反應(yīng)來(lái)測(cè)量的成分、通過(guò)其它特別的反應(yīng)來(lái)測(cè)量的成分等。
作為通過(guò)酵素反應(yīng)而被測(cè)量的生物成分,例如可以是葡萄糖、1,5-脫水山梨醇、糖白蛋白、血紅蛋白A1c、巖藻糖、尿素、尿酸、氨、肌酸酐、總膽固醇、游離膽固醇、高密度脂蛋白中的膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白中的膽固醇(LDL-C)、超低密度脂蛋白中的膽固醇(VLDL-C)、殘樣脂蛋白中的膽固醇(RLP-C)、甘油三酸酯、磷脂、總蛋白、白蛋白、球蛋白、膽紅素、膽汁酸、硅鋁帶酸、乳酸、丙酮酸、游離脂肪酸、甘油三酸酯、胺基代丙酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、肌酸磷酸激酶(CPK)、磷酸激酶(PK)、淀粉酶、脂酶、膽堿酯酶、γ-谷氨酰轉(zhuǎn)酞酶、亮氨酸氨酞酶、L-乳酸脫氫酵素(LDH)、醛縮酶、堿磷酸酶、酸磷酸酶、N-乙酰氨基葡萄糖酶、鳥(niǎo)嘌呤酶、單胺氧化酶等。
作為通過(guò)抗原抗體反應(yīng)而被測(cè)量的成分,例如可以是IgG、IgM、IgA、IgE、阿樸蛋白AI、阿樸蛋白AII、阿樸蛋白B、阿樸蛋白E、風(fēng)濕因子、D-二聚體、氧化LDL、糖化LDL、糖白蛋白、三典甲狀腺胺酸(T3)、總四典甲狀腺原胺酸(T4)、藥劑(抗癲癇劑等)、C-反應(yīng)性蛋白(CRP)、細(xì)胞分裂素類(lèi)、α-甲胎蛋白(AFP)、癌胎兒性抗原(CEA)、CA19-9(糖鏈抗原(carbohydrate antigen)19-9)、CA15-3(糖蛋白抗原(carbohydrate antigen)15-3)、CA-125(糖鏈抗原(carbohydrateantigen)125)、PIVKA-II(異常凝血酶原II(Protein induced by vitamin Kabsence-II))、甲狀旁腺荷爾蒙(PTH)、絨毛膜促性腺素激素(hCG)、甲狀腺刺激荷爾蒙(TSH)、胰島素、C-肽、雌激素、抗谷氨酸脫碳酸酵素(GAD)抗體、胃蛋白酶原、HBV抗原、抗B型肝炎病毒(HBV)抗體、C型肝炎病毒(HCV)抗原、抗HCV抗體、成人T細(xì)胞性白血病病毒1形式(HTLV-I)抗原、抗HTLV-I抗體、人免疫不全病毒(HIV)抗體、流行性感冒病毒抗原、抗流行性感冒病毒抗體、抗結(jié)核菌抗體、結(jié)核菌抗原(TBGL)、枝原體抗體、血紅蛋白A1c、心房性鈉利尿肽(ANP)、腦損傷性鈉利尿肽(BNP)、肌鈣蛋白T、肌鈣蛋白I、肌酸磷酸激酶-MB(CK-MB)、肌紅蛋白、H-FABP(人心臟原來(lái)脂肪酸結(jié)合蛋白)、霉毒類(lèi)[脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(DON),雪腐鐮刀菌烯醇(NIV),T-2毒素(T2)等]、內(nèi)分泌攪亂物質(zhì)類(lèi)[雙酚A,壬基苯酚,鄰苯二甲酸二丁酯,多氯化聯(lián)苯(PCB)類(lèi),二氧芑類(lèi),滴滴涕,丁蝸錫等]、大腸菌等菌類(lèi)、蛋、奶、小麥、蕎麥、花生等食物過(guò)敏物質(zhì)及口那搖扁虱(コナヒヨウダニ)、頭亞搖扁虱(トヤヒヨウダニ)等扁虱類(lèi)等過(guò)敏物質(zhì)、抗過(guò)敏物質(zhì)抗體等。
作為通過(guò)其它特異性結(jié)合而被測(cè)量的成分,可以是核酸、植物凝血素等,例如可以是對(duì)ras等癌遺傳基因、p53等癌抑制遺傳基因等進(jìn)行編碼的DNA或RNA、肽核酸、適體、糖蛋白等。
在本發(fā)明的測(cè)量對(duì)象物測(cè)量器具中,試料添加部位(S)、支持體(e)和檢出部位(Q)設(shè)置在基材上,可以根據(jù)需要而設(shè)置展開(kāi)液添加部位(B)、展開(kāi)液吸收部位(d)等。
本發(fā)明中的支持體(e)是通過(guò)展開(kāi)液的毛細(xì)流來(lái)聯(lián)結(jié)試料添加部位(S)和檢出部位(Q)的東西,是根據(jù)需要,進(jìn)一步聯(lián)結(jié)添加含有或不含有黏合劑、標(biāo)識(shí)化黏合劑、測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物或標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物等的展開(kāi)液的展開(kāi)液添加部位(B)的東西,只要是使試料中的測(cè)量對(duì)象物可借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而在試料添加部位和檢出部位,根據(jù)需要,和展開(kāi)液添加部位之間移動(dòng),并且可根據(jù)需要而使標(biāo)識(shí)化黏合劑、標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物、黏合劑和測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物與展開(kāi)液一起移動(dòng)地保持或固定的東西即可,沒(méi)有特別限制。
作為試料添加部位(S)和支持體(e)的材質(zhì),可以相同或者不同,例如可以是玻璃纖維、纖維素、尼龍、交聯(lián)葡聚糖、各種色層分析法用紙、硝化纖維素等,優(yōu)選的是硝化纖維素。
作為展開(kāi)液,例如可以是上述水媒介或有機(jī)溶劑等。
在本發(fā)明中,可與展開(kāi)液一起移動(dòng)地保持或固定在支持體上或者固定在水晶振子上的黏合劑,只要是與測(cè)量對(duì)象物特異性地結(jié)合的東西即可,沒(méi)有特別限制,例如可以是由抗原和與該抗原特異性地結(jié)合的抗體或適體構(gòu)成的組合中的任意一方要素、由糖類(lèi)和對(duì)該糖類(lèi)的植物凝血素構(gòu)成的組合中的任意一方要素、由DNA和與該DNA互補(bǔ)性的DNA構(gòu)成的組合中的任意一方要素。
在本發(fā)明中,作為固定在支持體或壓電振子上或者使之與標(biāo)識(shí)結(jié)合而保持在可與展開(kāi)液一起移動(dòng)的支持體上的測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物,只要是對(duì)于黏合劑,與試料中的測(cè)量對(duì)象物競(jìng)爭(zhēng)性地進(jìn)行反應(yīng)即可,沒(méi)有特別限制,例如可以是含有對(duì)測(cè)量對(duì)象物本身、黏合劑的表位的物質(zhì)等。
在本發(fā)明中,作為與黏合劑或測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物結(jié)合的標(biāo)識(shí),只要是能作為振動(dòng)數(shù)的變化量而檢出壓電振子上生成了的復(fù)合體即可,沒(méi)有特別限制,不過(guò),優(yōu)選的是質(zhì)量大的標(biāo)識(shí)。作為質(zhì)量大的標(biāo)識(shí),例如可以是不溶性小胞體等。作為不溶性小胞體,例如可以是金屬膠體、膠乳等。作為金屬膠體,例如可以是金膠體等。作為金膠體的粒子徑,優(yōu)選的是1~500nm,更優(yōu)選的是10~100nm。作為膠乳的粒子徑,優(yōu)選的是1~2000nm,更優(yōu)選的是50~500nm。
在本發(fā)明中,可與展開(kāi)液一起移動(dòng)地保持在支持體上的標(biāo)識(shí)化黏合劑只要是與測(cè)量對(duì)象物特異性地結(jié)合,并且發(fā)送依賴于在壓電振子上生成了的含有標(biāo)識(shí)化黏合劑的復(fù)合體的量的信息即可,沒(méi)有特別限制。在本發(fā)明中,可與展開(kāi)液一起移動(dòng)地保持在支持體上的標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物只要是與黏合劑特異性地結(jié)合,并且發(fā)送依賴于在壓電振子上生成了的含有標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物的復(fù)合體的量的信息即可,沒(méi)有特別限制。
黏合劑或測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物和標(biāo)識(shí)可以物理地結(jié)合,也可以化學(xué)地結(jié)合。作為物理的結(jié)合,例如可以是物理吸著等。作為化學(xué)結(jié)合,例如可以是共價(jià)結(jié)合、非共價(jià)結(jié)合等。作為非共價(jià)結(jié)合,例如可以是靜電性結(jié)合、氫結(jié)合、疏水結(jié)合、配位結(jié)合等。作為使標(biāo)識(shí)和黏合劑或測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物通過(guò)共價(jià)結(jié)合而結(jié)合來(lái)調(diào)制標(biāo)識(shí)化黏合劑的方法,例如可以是采用2價(jià)性的交聯(lián)劑等交聯(lián)劑,通過(guò)交聯(lián)劑使標(biāo)識(shí)和黏合劑結(jié)合的方法。
在本發(fā)明中,在試料中的測(cè)量對(duì)象物的檢出部位使用的壓電振子,只要是由具有壓電效應(yīng)的結(jié)晶構(gòu)成的東西即可,沒(méi)有特別限制,作為結(jié)晶,例如可以是水晶、羅謝爾鹽、電子石等的結(jié)晶、鉭酸鋰(LiTaO2)、鈮酸鋰(LiNbO3)等氧化物單晶或氧化鋅(ZnO)等,優(yōu)選的是水晶。
優(yōu)選的是,壓電振子與適當(dāng)?shù)恼駝?dòng)數(shù)測(cè)量電路聯(lián)結(jié),使得能通過(guò)顯示等來(lái)檢出壓電振子的振動(dòng)數(shù),而且優(yōu)選的是,與根據(jù)檢出了的振動(dòng)數(shù)的變化來(lái)運(yùn)算測(cè)量對(duì)象物濃度的濃度運(yùn)算電路聯(lián)結(jié)。作為壓電振子,只要是被電極夾著的壓電振子即可,沒(méi)有特別限制,作為水晶振子,例如可以采用由精工·東京電波或億尼夏木(イニシアム)公司制的水晶振子構(gòu)成的傳感器芯片。
本發(fā)明的器具中具有固定了黏合劑、捕捉劑A、捕捉劑B或測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物的第一壓電振子,不過(guò)優(yōu)選的是,除了第一壓電振子之外,還具有對(duì)于黏合劑、捕捉劑A、捕捉劑B和測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物全都不固定的第二壓電振子的東西。
作為復(fù)合體,只要是與壓電振子上的黏合劑、捕捉劑A、捕捉劑B或測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物特異性地結(jié)合而形成的東西即可,例如可以是根據(jù)三明治法生成的復(fù)合體或根據(jù)競(jìng)爭(zhēng)法生成的復(fù)合體等。作為復(fù)合體的具體方式,例如可以是具有捕捉劑A-測(cè)量對(duì)象物-標(biāo)識(shí)化黏合劑的構(gòu)成的復(fù)合體、測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物-標(biāo)識(shí)化黏合劑、黏合劑-標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物、捕捉劑B-黏合劑-標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物、捕捉劑B-標(biāo)識(shí)化黏合劑-測(cè)量對(duì)象物、捕捉劑A-測(cè)量對(duì)象物等。
在本發(fā)明中,在壓電振子上被固定化的捕捉劑A只要是與測(cè)量對(duì)象物結(jié)合,通過(guò)其自身、測(cè)量對(duì)象物和標(biāo)識(shí)化黏合劑參與的三明治反應(yīng),能生成三明治型復(fù)合體(捕捉劑A-測(cè)量對(duì)象物-標(biāo)識(shí)化黏合劑)即可,沒(méi)有特別限制。標(biāo)識(shí)化黏合劑上的測(cè)量對(duì)象物識(shí)別部位和捕捉劑A上的測(cè)量對(duì)象物識(shí)別部位可以相同,不過(guò)優(yōu)選的是不同。作為捕捉劑A,例如可以是與作為測(cè)量對(duì)象物的抗原結(jié)合的抗體、與由作為測(cè)量對(duì)象物的單鏈DNA和互補(bǔ)性的被標(biāo)識(shí)了的DNA結(jié)合而獲得的雙鏈DNA特異性地結(jié)合的物質(zhì)或單鏈DNA等。
在本發(fā)明中,在壓電振子上被固定化的捕捉劑B是與標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物或測(cè)量對(duì)象物和黏合劑的復(fù)合體,以及,測(cè)量對(duì)象物或測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物和標(biāo)識(shí)化黏合劑的復(fù)合體進(jìn)行結(jié)合,不過(guò),只要是不生成把測(cè)量對(duì)象物夾在中間的三明治型復(fù)合體即可,沒(méi)有特別限制。作為捕捉劑B,例如可以是對(duì)與作為測(cè)量對(duì)象物的抗原結(jié)合的抗體的Fc區(qū)域進(jìn)行識(shí)別的抗體等。
在壓電振子上的黏合劑、捕捉劑A、捕捉劑B或測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物的固定化,只要是捕捉劑A、捕捉劑B或測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物被固定化,在借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)出了支持體的液體通過(guò)壓電振子時(shí)不移動(dòng)即可,沒(méi)有特別限制,可以物理地或化學(xué)地結(jié)合,作為物理的結(jié)合,例如可以是物理吸著等,作為化學(xué)的結(jié)合,例如可以是共價(jià)結(jié)合、氫結(jié)合、疏水結(jié)合、配位結(jié)合等。具體而言,可以是通過(guò)使巰化了的捕捉劑A、巰化了的捕捉劑B或巰化了的測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物與壓電振子上的金電極結(jié)合來(lái)進(jìn)行固定化的方法。
在本發(fā)明中,可以在支持體上作為展開(kāi)液添加部位來(lái)設(shè)置保持黏合劑或標(biāo)識(shí)化黏合劑,或者測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物或標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物的部位。作為用于展開(kāi)液添加部位的材料,只要是使得試料中的測(cè)量對(duì)象物可借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而在試料添加部位和支持體之間移動(dòng),并且可根據(jù)需要而使標(biāo)識(shí)化黏合劑、標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物、黏合劑和測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物與展開(kāi)液一起移動(dòng)地保持或固定的東西即可,沒(méi)有特別限制。
作為展開(kāi)液添加部位的材質(zhì),可以與試料添加部位和支持體的材質(zhì)相同或不同,例如可以是玻璃纖維、纖維素、尼龍、交聯(lián)葡聚糖、各種色層分析法用紙、硝化纖維素等,優(yōu)選的是硝化纖維素。
在本發(fā)明中,為了吸收·保持含有不被在壓電振子上被固定化了的黏合劑、捕捉劑A、捕捉劑B或測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物捕捉的成分的展開(kāi)液,可以在支持體上設(shè)置展開(kāi)液吸收部位(d)??梢栽谡归_(kāi)液吸收部位使用吸水性高分子化合物。作為吸水性高分子化合物,例如可以是纖維素、玻璃纖維、棉花、聚氨基甲酸酯等。
振動(dòng)數(shù)測(cè)量電路可以與本發(fā)明的測(cè)量對(duì)象測(cè)量器具的2個(gè)電極聯(lián)結(jié)起來(lái)使用,只要是能檢出壓電振子的振動(dòng)數(shù)的東西即可,沒(méi)有特別限制,可以使用公知的東西。優(yōu)選的是振動(dòng)數(shù)測(cè)量電路中具有顯示振動(dòng)數(shù)的顯示部,不過(guò),也可以沒(méi)有顯示部。作為濃度運(yùn)算電路,可以與該振動(dòng)數(shù)測(cè)量電路聯(lián)結(jié)起來(lái)使用,只要是依據(jù)用已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品獲得振動(dòng)數(shù)的數(shù)據(jù),根據(jù)用未知濃度的試料獲得的振動(dòng)數(shù)來(lái)計(jì)算濃度的東西,沒(méi)有特別限制,可以使用公知的東西。優(yōu)選的是該濃度運(yùn)算電路中具有顯示振動(dòng)數(shù)的顯示部,不過(guò),也可以沒(méi)有顯示部。
優(yōu)選的是,振動(dòng)數(shù)測(cè)量電路和濃度運(yùn)算電路在本發(fā)明的測(cè)量對(duì)象物測(cè)量用器具內(nèi)組裝成一體,不過(guò),也可以構(gòu)成為獨(dú)立于聯(lián)結(jié)了振動(dòng)數(shù)測(cè)量電路或濃度運(yùn)算電路的振動(dòng)數(shù)測(cè)量電路的部件。
作為振動(dòng)數(shù)測(cè)量電路和濃度運(yùn)算電路,可以是億尼夏木公司制的阿飛尼可思(アフイニクス)Q中使用的恒溫測(cè)量部和數(shù)據(jù)處理裝置等。優(yōu)選的是,在該運(yùn)算電路中組裝了表示結(jié)果的顯示板。
使用了用于檢量線制作的已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品的測(cè)量可以采用同一測(cè)量對(duì)象物測(cè)量用裝置,時(shí)間序列地進(jìn)行,不過(guò)優(yōu)選的是,采用組合多個(gè)測(cè)量對(duì)象物測(cè)量用裝置而構(gòu)成的裝置,同時(shí)進(jìn)行試料中的測(cè)量對(duì)象物的測(cè)量和標(biāo)準(zhǔn)試料的測(cè)量。再有,在同一支持體上并置了2個(gè)壓電振子的器具,一方壓電振子采用固定了捕捉劑A(c1)、測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物(c1′)、黏合劑(c2)或捕捉劑B(c3)的第一壓電振子,另一方壓電振子采用對(duì)于捕捉劑A(c1)、測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物(c1′)、黏合劑(c2)和捕捉劑B(c3)全都沒(méi)固定的第二壓電振子,在根據(jù)第一壓電振子的振動(dòng)數(shù)的變化來(lái)求出試料中的測(cè)量對(duì)象物濃度時(shí),扣除第二壓電振子的振動(dòng)數(shù)的變化來(lái)進(jìn)行補(bǔ)正,這種方法是特別優(yōu)選的。
作為測(cè)量試料中的測(cè)量對(duì)象物和標(biāo)準(zhǔn)品時(shí)的反應(yīng)溫度,只要是能進(jìn)行特異性反應(yīng)的條件即可,沒(méi)有特別限制,不過(guò),通常在0~100℃進(jìn)行,優(yōu)選的是10~60℃,更優(yōu)選的是20~40℃。
本發(fā)明的測(cè)量對(duì)象物測(cè)量用裝置中可以含有用于判別試料被確實(shí)添加了這一點(diǎn)的控制線??刂凭€通常使用免疫色層分析法中使用的東西,在支持體上和壓電振子上都能形成,不過(guò),優(yōu)選的是在支持體上形成。作為控制線,可以是以下方式。在試料為生物試料的場(chǎng)合,可以是含有可移動(dòng)地保持了在與白蛋白等蛋白質(zhì)結(jié)合的2次抗體上結(jié)合了酵素、熒光物質(zhì)、發(fā)光物質(zhì)等功能性物質(zhì)的功能性物質(zhì)結(jié)合2次抗體的支持體上的部位和與生物試料中含有的白蛋白等蛋白質(zhì)結(jié)合的1次抗體被固定化了的支持體上的部位的控制線。作為試料,生物試料被確實(shí)添加的話,試料中的白蛋白等蛋白質(zhì)到達(dá)控制線,在該控制線上通過(guò)三明治反應(yīng)而形成復(fù)合體(含有1次抗體、白蛋白等蛋白質(zhì)和標(biāo)識(shí)化2次抗體的復(fù)合體)。例如采用比色法、熒光法、發(fā)光法來(lái)檢出該復(fù)合體中的功能性物質(zhì),就能確認(rèn)試料添加的有無(wú)。
還有,在標(biāo)識(shí)化黏合劑與試料在相同方向在支持體上移動(dòng),在壓電振子上形成三明治型復(fù)合體的場(chǎng)合,例如可以是檢出壓電振子上未被捕捉的標(biāo)識(shí)化黏合劑的控制線。作為這樣的控制線,例如可以是在支持體上任意的位置固定了與標(biāo)識(shí)化黏合劑結(jié)合的捕捉劑的控制線。試料被確實(shí)添加的話,未被壓電振子捕捉的標(biāo)識(shí)化黏合劑就被該控制線捕捉。用該控制線捕捉標(biāo)識(shí)化黏合劑的話,由于標(biāo)識(shí)化黏合劑中的標(biāo)識(shí)(例如金膠體粒子、著色膠乳等),控制線就會(huì)著色,因而就能以目測(cè)來(lái)判定試料是否被添加了??刂凭€優(yōu)選的是例如相對(duì)于檢出部位設(shè)置在試料添加部位的相反側(cè)的支持體上。
測(cè)量對(duì)象物、標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物和黏合劑的比率沒(méi)有特別限制,不過(guò),優(yōu)選的是設(shè)定為0~1,000,000∶1∶1~1,000,000,更優(yōu)選的是0~1,000∶1∶1~1,000。
以下,具體地說(shuō)明本發(fā)明的試料中的測(cè)量對(duì)象物濃度測(cè)量用裝置和測(cè)量方法。
圖1是表示本發(fā)明的測(cè)量對(duì)象物測(cè)量用器具的具體方式的一個(gè)例子的概略圖,圖1(a)是俯視圖,圖1(b)是側(cè)視圖。
該器具在基材上設(shè)置了試料添加部位(S)、支持體(e)和具有被2個(gè)電極夾著的水晶振子的檢出部位(Q),該試料添加部位、支持體和檢出部位由上部蓋子覆蓋,可借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)地被聯(lián)結(jié)。在水晶振子上固定了捕捉劑A、測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物、黏合劑或捕捉劑B。試料添加部位可以采用與支持體相同的素材,也可以不同。在試料添加部位,在上部蓋子上,為能添加試料而設(shè)置了孔?;牡牟馁|(zhì)沒(méi)有特別限制,不過(guò),優(yōu)選的是采用樹(shù)脂。水晶振子的2個(gè)電極可與外部連接。
圖2是表示本發(fā)明的測(cè)量對(duì)象物測(cè)量用器具的具體方式的一個(gè)例子的概略圖,圖2(a)是俯視圖,圖2(b)是側(cè)視圖。
該器具在基材上設(shè)置了試料添加部位(S)、展開(kāi)液添加部位(B)、支持體(e)和具有被2個(gè)電極夾著的水晶振子的檢出部位(Q),該試料添加部位、展開(kāi)液添加部位、支持體和檢出部位由上部蓋子覆蓋,可借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)地被聯(lián)結(jié)。另外,試料添加部位和展開(kāi)液添加部位可以采用與支持體相同的素材,也可以不同。在試料添加部位,在上部蓋子上,為能添加試料而設(shè)置了孔。還有,展開(kāi)液添加部位可以設(shè)置孔,也可以不設(shè)置。還有,在展開(kāi)液添加部位可以設(shè)置黏合劑不會(huì)借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)地被固定在支持體上的黏合劑固定部位、黏合劑可借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)地被保持的黏合劑保持部位、測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物不會(huì)借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)地被固定在支持體上的測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物固定部位或測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物可借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)地被保持的測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物保持部位。基材的材質(zhì)沒(méi)有特別限制,不過(guò),優(yōu)選的是采用樹(shù)脂。
圖3是表示本發(fā)明的測(cè)量對(duì)象物測(cè)量用器具的具體方式的一個(gè)例子的概略圖,圖3(a)是俯視圖,圖3(b)是側(cè)視圖。
該器具在基材上設(shè)置了試料添加部位(S)、展開(kāi)液添加部位(B)、支持體(e)、具有被2個(gè)電極夾著的水晶振子的檢出部位(Q)和展開(kāi)液吸收部位(d),該試料添加部位、展開(kāi)液添加部位、支持體、檢出部位和展開(kāi)液吸收部位由上部蓋子覆蓋,可借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)地被聯(lián)結(jié)。另外,試料添加部位和展開(kāi)液添加部位可以采用與支持體相同的素材,也可以不同。在試料添加部位,在上部蓋子上,為能添加試料而設(shè)置了孔。還有,展開(kāi)液添加部位可以設(shè)置孔,也可以不設(shè)置。還有,在展開(kāi)液添加部位可以設(shè)置黏合劑不會(huì)借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)地被固定在支持體上的黏合劑固定部位、黏合劑可借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)地被保持的黏合劑保持部位、測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物不會(huì)借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)地被固定在支持體上的測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物固定部位或測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物可借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)地被保持的測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物保持部位。基材的材質(zhì)沒(méi)有特別限制,不過(guò),優(yōu)選的是采用樹(shù)脂。展開(kāi)液吸收部位可以使用吸水性高分子化合物。作為吸水性高分子化合物,例如可以是纖維素、玻璃纖維、棉花、聚氨基甲酸酯等。
圖4是表示本發(fā)明的測(cè)量對(duì)象物測(cè)量用器具的具體方式的一個(gè)例子的概略圖,圖4(a)是俯視圖,圖4(b)是側(cè)視圖。
該器具在基材上設(shè)置了試料添加部位(S)、展開(kāi)液添加部位(B)、支持體(e)、具有被2個(gè)電極夾著的水晶振子的檢出部位(Q)、展開(kāi)液吸收部位(d)和控制線,該試料添加部位、展開(kāi)液添加部位、支持體、檢出部位、展開(kāi)液吸收部位和控制線由上部蓋子覆蓋,可借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)地被聯(lián)結(jié)。另外,試料添加部位和展開(kāi)液添加部位可以采用與支持體相同的素材,也可以不同。在試料添加部位,在上部蓋子上,為能添加試料而設(shè)置了孔。還有,展開(kāi)液添加部位可以設(shè)置孔,也可以不設(shè)置。還有,在展開(kāi)液添加部位可以設(shè)置黏合劑不會(huì)借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)地被固定在支持體上的黏合劑固定部位、黏合劑可借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)地被保持的黏合劑保持部位、測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物不會(huì)借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)地被固定在支持體上的測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物固定部位或測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物可借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)地被保持的測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物保持部位。基材的材質(zhì)沒(méi)有特別限制,不過(guò),優(yōu)選的是采用樹(shù)脂。展開(kāi)液吸收部位可以使用吸水性高分子化合物。作為吸水性高分子化合物,例如可以是纖維素、玻璃纖維、棉花、聚氨基甲酸酯等。
圖5是表示本發(fā)明的測(cè)量對(duì)象物測(cè)量用器具的具體方式的一個(gè)例子的概略圖,圖5(a)是俯視圖,圖5(b)是側(cè)視圖。
該器具在基材上設(shè)置了試料添加部位(S)、展開(kāi)液添加部位(B)、支持體(e)、具有被2個(gè)電極夾著的水晶振子的檢出部位(Q)和展開(kāi)液吸收部位(d),該試料添加部位、展開(kāi)液添加部位、支持體、檢出部位和展開(kāi)液吸收部位由上部蓋子覆蓋,可借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)地被聯(lián)結(jié)。另外,試料添加部位和展開(kāi)液添加部位可以采用與支持體相同的素材,也可以不同。在試料添加部位,在上部蓋子上,為能添加試料而設(shè)置了孔。還有,展開(kāi)液添加部位可以設(shè)置孔,也可以不設(shè)置。還有,在展開(kāi)液添加部位可以設(shè)置黏合劑不會(huì)借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)地被固定在支持體上的黏合劑固定部位、黏合劑可借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)地被保持的黏合劑保持部位、測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物不會(huì)借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)地被固定在支持體上的測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物固定部位或測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物可借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)地被保持的測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物保持部位?;牡牟馁|(zhì)沒(méi)有特別限制,不過(guò),優(yōu)選的是采用樹(shù)脂。展開(kāi)液吸收部位可以使用吸水性高分子化合物。作為吸水性高分子化合物,例如可以是纖維素、玻璃纖維、棉花、聚氨基甲酸酯等。設(shè)置了水晶振子插入空間,使得在檢出部位插入的水晶振子可拆裝。
圖6是表示本發(fā)明的測(cè)量對(duì)象物測(cè)量用裝置的具體方式的一個(gè)例子的概略圖,圖6(a)是俯視圖,圖6(b)是側(cè)視圖。
該裝置在基材上設(shè)置了試料添加部位(S)、展開(kāi)液添加部位(B)、支持體(e)、具有被2個(gè)電極夾著的水晶振子的檢出部位(Q)和展開(kāi)液吸收部位(d),該試料添加部位、展開(kāi)液添加部位、支持體、檢出部位和展開(kāi)液吸收部位由上部蓋子覆蓋,可借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)地被聯(lián)結(jié)的器具通過(guò)該器具的水晶振子的電極而與具有振動(dòng)數(shù)測(cè)量電路和濃度運(yùn)算電路的振動(dòng)數(shù)測(cè)量裝置聯(lián)結(jié)。
圖7是表示本發(fā)明的測(cè)量對(duì)象物測(cè)量用裝置的具體方式的一個(gè)例子的概略圖,圖7(a)是圖7的外觀俯視圖,圖7(b)是外觀側(cè)視圖,圖7(c)是除去了上部蓋子的俯視圖,圖7(d)是除去了上部蓋子的側(cè)視圖。
該裝置在基材上設(shè)置了試料添加部位(S)、展開(kāi)液添加部位(B)、支持體(e)、具有被2個(gè)電極夾著的水晶振子的檢出部位(Q)和展開(kāi)液吸收部位(d),該試料添加部位、展開(kāi)液添加部位、支持體、檢出部位和展開(kāi)液吸收部位由上部蓋子覆蓋,可借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)地被聯(lián)結(jié),在該器具的基材中,設(shè)置了具有振動(dòng)數(shù)測(cè)量電路和濃度測(cè)量電路的振動(dòng)數(shù)測(cè)量裝置,該器具通過(guò)水晶振子的電極而與該裝置聯(lián)結(jié)。
圖8示意地示例了試料添加部位(S)和展開(kāi)液添加部位(B)的聯(lián)結(jié)部。各個(gè)部件由可借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)的不同的材質(zhì)或同樣的材質(zhì)構(gòu)成,例如可以配置成以第1方式、第2方式、第3方式、第4方式圖示了的樣態(tài)。
圖9示意地示例了支持體(e)、檢出部位(Q)和展開(kāi)液吸收部位(d)的聯(lián)結(jié)部。檢出部位被壓電振子插入,借助于上部蓋子、支持體或壓吸收性素材與壓電振子的微小間隙,展開(kāi)液就可借助于毛細(xì)流而從支持體移動(dòng)到展開(kāi)液吸收部位。吸收性素材可以與構(gòu)成展開(kāi)液吸收部位的素材相同。
圖10是表示本發(fā)明的測(cè)量對(duì)象物測(cè)量用器具的具體方式的一個(gè)例子的俯視概略圖。
該器具在基材上設(shè)置了試料添加部位(S)、展開(kāi)液添加部位(B)、支持體(e)、具有被2個(gè)電極夾著的水晶振子的檢出部位(Q)和展開(kāi)液吸收部位(d),該試料添加部位、展開(kāi)液添加部位、支持體、檢出部位和展開(kāi)液吸收部位由上部蓋子覆蓋,可借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)地被聯(lián)結(jié)。在該器具中,在檢出部位,在水晶振子插入空間插入了兩個(gè)水晶振子。
在該例子中,2個(gè)水晶振子相對(duì)于展開(kāi)液的移動(dòng)方向平行設(shè)置,不過(guò),也可以對(duì)展開(kāi)液的移動(dòng)方向垂直設(shè)置2個(gè)水晶振子。
在一個(gè)水晶振子上固定了捕捉劑A(c1)、測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物(c1′)、黏合劑(c2)或捕捉劑B(c3),而在另一個(gè)水晶振子上對(duì)于捕捉劑A(c1)、測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物(c1′)、黏合劑(c2)和捕捉劑B(c3)都未固定。用該裝置就能補(bǔ)正非特異性反應(yīng)。
圖11表示圓盤(pán)狀地配置了1至n個(gè)的多個(gè)測(cè)量對(duì)象物測(cè)量器具而成的器具的例子。把試料和已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)同時(shí)添加在試料添加部位,從而作成檢量線,同時(shí)求出試料中的測(cè)量物質(zhì)濃度。
圖12表示長(zhǎng)方形地配置了1至n個(gè)的多個(gè)測(cè)量對(duì)象物測(cè)量器具而成的器具的例子。把試料和已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)同時(shí)添加在試料添加部位,從而作成檢量線,同時(shí)求出試料中的測(cè)量物質(zhì)濃度。
作為本發(fā)明的試料中的測(cè)量對(duì)象物測(cè)量用器具,例如可以有以下方式的方法。
作為測(cè)量對(duì)象物測(cè)量用器具的第1例(參照?qǐng)D13和圖14),例如可以是設(shè)計(jì)成如下方式的試料中的測(cè)量對(duì)象物測(cè)量用器具具有設(shè)置在含有測(cè)量對(duì)象物的試料可借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)的支持體上的試料添加部位(S)、與測(cè)量對(duì)象物結(jié)合的黏合劑預(yù)先與標(biāo)識(shí)結(jié)合而成并且可借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)地保持在支持體上的標(biāo)識(shí)化黏合劑(b1)以及與測(cè)量對(duì)象物結(jié)合的捕捉劑A(c1)被固定化了的壓電振子或是測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物(c1′)被固定化了的壓電振子,試料和該標(biāo)識(shí)化黏合劑借助于相同方向的毛細(xì)流而向在支持體上被固定在了壓電振子上的捕捉劑A或測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物移動(dòng)。
優(yōu)選的是,標(biāo)識(shí)化黏合劑預(yù)先保持在支持體上的黏合劑保持部位(BR),不過(guò),也可以是標(biāo)識(shí)化黏合劑不保持在支持體上,而是作為配劑(キツト)而被供給的方式。還有,在該器具中,可以在試料添加部位和檢出部位之間設(shè)置展開(kāi)液添加部位。該標(biāo)識(shí)化黏合劑可以根據(jù)需要而溶解于展開(kāi)液,與試料一起或分別從試料添加部位,或從設(shè)置在試料添加部位和檢出部之間的展開(kāi)液添加部位,根據(jù)需要而溶解于展開(kāi)液,與試料添加同時(shí)或在不同的時(shí)期添加使用。
此處,在壓電振子上與測(cè)量對(duì)象物結(jié)合的捕捉劑A(c1)被固定化了的場(chǎng)合(參照?qǐng)D13),該器具可用于所有基于三明治測(cè)量法的原理的測(cè)量方法,在壓電振子上與標(biāo)識(shí)化黏合劑結(jié)合的測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物(c1′)被固定化了的場(chǎng)合(參照?qǐng)D14),該裝置可用于所有基于競(jìng)爭(zhēng)測(cè)量法的原理的測(cè)量方法。另外,也可以使用未被標(biāo)識(shí)的黏合劑,代替標(biāo)識(shí)化黏合劑。
作為測(cè)量對(duì)象物測(cè)量用器具的第2例(參照?qǐng)D15和圖16),例如可以是設(shè)計(jì)成如下方式的試料中的測(cè)量對(duì)象物測(cè)量用器具具有設(shè)置在含有測(cè)量對(duì)象物的試料可借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)的支持體上的試料添加部位(S)、與測(cè)量對(duì)象物結(jié)合的黏合劑預(yù)先與標(biāo)識(shí)結(jié)合而成并且可借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)地保持在支持體上的標(biāo)識(shí)化黏合劑(b1)以及與測(cè)量對(duì)象物結(jié)合的捕捉劑A(c1)被固定化了的壓電振子或是測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物(c1′)被固定化了的壓電振子,試料和該標(biāo)識(shí)化黏合劑借助于相反方向的毛細(xì)流而向在支持體上被固定在了壓電振子上的捕捉劑A或測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物移動(dòng)。
優(yōu)選的是,標(biāo)識(shí)化黏合劑預(yù)先保持在支持體上的黏合劑保持部位(BR),不過(guò),也可以是標(biāo)識(shí)化黏合劑不保持在支持體上,而是作為配劑而被供給的方式。還有,在該器具中,可以在試料添加部位和檢出部位之間設(shè)置展開(kāi)液添加部位。該標(biāo)識(shí)化黏合劑可以根據(jù)需要而溶解于展開(kāi)液,與試料一起或分別從試料添加部位,或從設(shè)置在試料添加部位和檢出部之間的展開(kāi)液添加部位,根據(jù)需要而溶解于展開(kāi)液,與試料添加同時(shí)或在不同的時(shí)期添加使用。
此處,在壓電振子上與測(cè)量對(duì)象物結(jié)合的捕捉劑A(c1)被固定化了的場(chǎng)合(參照?qǐng)D15),該器具可用于所有基于三明治測(cè)量法的原理的測(cè)量方法,在壓電振子上與標(biāo)識(shí)化黏合劑結(jié)合的測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物(c1′)被固定化了的場(chǎng)合(參照?qǐng)D16),該裝置可用于所有基于競(jìng)爭(zhēng)測(cè)量法的原理的測(cè)量方法。另外,也可以使用未被標(biāo)識(shí)的黏合劑,代替標(biāo)識(shí)化黏合劑。
作為測(cè)量對(duì)象物測(cè)量用器具的第3例(參照?qǐng)D17或圖18),例如可以是設(shè)計(jì)成如下方式的試料中的測(cè)量對(duì)象物測(cè)量用器具具有設(shè)置在含有測(cè)量對(duì)象物的試料可借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)的支持體上的試料添加部位(S)、與測(cè)量對(duì)象物結(jié)合的黏合劑預(yù)先與標(biāo)識(shí)結(jié)合而成并且可借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)地保持在支持體上的標(biāo)識(shí)化黏合劑(b1)、與標(biāo)識(shí)化黏合劑結(jié)合并且在支持體上被固定化了的或可移動(dòng)地保持在支持體上的測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物(b5)以及結(jié)合于與標(biāo)識(shí)化黏合劑結(jié)合了的測(cè)量對(duì)象物的捕捉劑A(c1)被固定化了的壓電振子,試料、該標(biāo)識(shí)化黏合劑可借助于相同方向的毛細(xì)流在支持體上向被固定在了壓電振子上的捕捉劑A或測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物移動(dòng),并且,測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物保持或固定在試料添加部位和檢出部位之間的支持體上。
優(yōu)選的是,測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物固定在試料添加部位和檢出部位之間的支持體上,標(biāo)識(shí)化黏合劑預(yù)先保持在支持體上,不過(guò),也可以是標(biāo)識(shí)化黏合劑不保持在支持體上,而是作為配劑而被供給的方式。還有,在該器具中,可以在試料添加部位和檢出部位之間設(shè)置展開(kāi)液添加部位。該標(biāo)識(shí)化黏合劑可以根據(jù)需要而溶解于展開(kāi)液,與試料一起或分別從試料添加部位,或從設(shè)置在試料添加部位和黏合劑固定部位之間的展開(kāi)液添加部位,根據(jù)需要而溶解于展開(kāi)液,與試料添加同時(shí)或在不同的時(shí)期添加使用。
另外,也可以使用未被標(biāo)識(shí)的黏合劑,代替標(biāo)識(shí)化黏合劑。在該例子中,優(yōu)選的是,測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物(b5)和捕捉劑A(c1)是不產(chǎn)生特異性結(jié)合反應(yīng)的組合。
作為測(cè)量對(duì)象物測(cè)量用器具的第4例(參照?qǐng)D19或圖20),例如可以是設(shè)計(jì)成如下方式的試料中的測(cè)量對(duì)象物測(cè)量用器具具有設(shè)置在含有測(cè)量對(duì)象物的試料可借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)的支持體上的試料添加部位(S)、與測(cè)量對(duì)象物結(jié)合的黏合劑預(yù)先與標(biāo)識(shí)結(jié)合而成并且可借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)地保持在支持體上的標(biāo)識(shí)化黏合劑(b1)、與標(biāo)識(shí)化黏合劑結(jié)合并且在支持體上被固定化了的或可移動(dòng)地保持在支持體上的測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物(b5)以及與標(biāo)識(shí)化黏合劑結(jié)合的捕捉劑B(c3)被固定化了的壓電振子,試料、該標(biāo)識(shí)化黏合劑可借助于相同方向的毛細(xì)流在支持體上向被固定在了壓電振子上的捕捉劑B移動(dòng),并且,測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物保持或固定在試料添加部位和檢出部位之間的支持體上。
優(yōu)選的是,測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物固定在試料添加部位和檢出部位之間的支持體上,標(biāo)識(shí)化黏合劑預(yù)先保持在支持體上,不過(guò),也可以是標(biāo)識(shí)化黏合劑不保持在支持體上,而是作為配劑而被供給的方式。還有,在該器具中,可以在試料添加部位和測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物的保持或固定部位之間設(shè)置展開(kāi)液添加部位。該標(biāo)識(shí)化黏合劑可以根據(jù)需要而溶解于展開(kāi)液,與試料一起或分別從試料添加部位,或從設(shè)置在試料添加部位和黏合劑固定部位之間的展開(kāi)液添加部位,根據(jù)需要而溶解于展開(kāi)液,與試料添加同時(shí)或在不同的時(shí)期添加使用。
另外,也可以使用未被標(biāo)識(shí)的黏合劑,代替標(biāo)識(shí)化黏合劑。在該例子中,優(yōu)選的是,測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物(b5)和試料中的測(cè)量對(duì)象物是不同的物質(zhì)的組合。
作為測(cè)量對(duì)象物測(cè)量用器具的第5例(參照?qǐng)D21),例如可以是設(shè)計(jì)成如下方式的試料中的測(cè)量對(duì)象物測(cè)量用器具具有設(shè)置在含有測(cè)量對(duì)象物的試料可借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)的支持體上的試料添加部位(S)、測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物與標(biāo)識(shí)結(jié)合而成并且可借助于毛細(xì)流而移動(dòng)地保持在支持體上的標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物(b2)以及與測(cè)量對(duì)象物和標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物結(jié)合的捕捉劑(c2)被固定化了的壓電振子,試料和標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物借助于相同方向的毛細(xì)流在支持體上向被固定在了壓電振子上的捕捉劑移動(dòng)。
優(yōu)選的是,標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物預(yù)先保持在支持體上,不過(guò),也可以是標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物不保持在支持體上,而是作為配劑而被供給的方式。還有,在該器具中,可以在試料添加部位和檢出部位之間設(shè)置展開(kāi)液添加部位。標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物可以根據(jù)需要而溶解于展開(kāi)液,與試料一起或分別從試料添加部位,或從設(shè)置在試料添加部位和檢出部之間的展開(kāi)液添加部位,根據(jù)需要而溶解于展開(kāi)液,與試料添加同時(shí)或在不同的時(shí)期添加使用。
作為測(cè)量對(duì)象物測(cè)量用器具的第6例(圖22),例如可以是設(shè)計(jì)成如下方式的試料中的測(cè)量對(duì)象物測(cè)量用器具具有設(shè)置在含有測(cè)量對(duì)象物的試料可借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)的支持體上的試料添加部位(S)、測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物與標(biāo)識(shí)結(jié)合而成并且可借助于毛細(xì)流而移動(dòng)地保持在支持體上的標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物(b2)以及與測(cè)量對(duì)象物和標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物結(jié)合的捕捉劑(c2)被固定化了的壓電振子,試料和標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物借助于相反方向的毛細(xì)流在支持體上向被固定在了壓電振子上的捕捉劑移動(dòng)。
優(yōu)選的是,標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物預(yù)先保持在相對(duì)于檢出部位為試料添加部位的相反側(cè)的支持體上,不過(guò),也可以是標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物不保持在支持體上,而是分開(kāi)的配劑的方式。還有,在該器具中,可以設(shè)置在相對(duì)于檢出部位為試料添加部位的相反側(cè)設(shè)置的展開(kāi)液添加部位。在標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物預(yù)先保持在支持體上的場(chǎng)合,可以設(shè)置,也不可以設(shè)置展開(kāi)液添加部位,不過(guò),優(yōu)選的是設(shè)置展開(kāi)液添加部位。在該場(chǎng)合,可以從該展開(kāi)液添加部位添加上述展開(kāi)液,使該標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物向檢出部位移動(dòng)。在標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物未預(yù)先保持在支持體上的場(chǎng)合,設(shè)置展開(kāi)液添加部位,標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物在與試料添加同時(shí)或在不同的時(shí)期從該展開(kāi)液添加部位添加使用。
另外,也可以使用未被標(biāo)識(shí)的黏合劑,代替標(biāo)識(shí)化黏合劑。
作為測(cè)量對(duì)象物測(cè)量用器具的第7例(圖23),例如可以是設(shè)計(jì)成如下方式的試料中的測(cè)量對(duì)象物測(cè)量用器具具有設(shè)置在含有測(cè)量對(duì)象物的試料可借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)的支持體上的試料添加部位(S)、測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物與標(biāo)識(shí)結(jié)合而成并且可借助于毛細(xì)流而移動(dòng)地保持在支持體上的標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物(b2)、與測(cè)量對(duì)象物和測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物結(jié)合而成并且可借助于毛細(xì)流而移動(dòng)地保持在支持體上的黏合劑(b3)以及與標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物所結(jié)合了的黏合劑和測(cè)量對(duì)象物所結(jié)合了的黏合劑結(jié)合的捕捉劑B(c3)被固定化了的壓電振子,試料、標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物和黏合劑借助于同一毛細(xì)流在支持體上向被固定在了壓電振子上的捕捉劑B移動(dòng)。
優(yōu)選的是,標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物和黏合劑預(yù)先保持在支持體上,不過(guò),也可以是從由標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物和黏合劑構(gòu)成的群中選取的一個(gè)或二個(gè)不保持在支持體上,未被支持體保持的成分和該器具作為配劑被供給的方式。還有,在該器具中,可以在試料添加部位和檢出部位之間設(shè)置展開(kāi)液添加部位。標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物和黏合劑可以根據(jù)需要而溶解于展開(kāi)液,與試料一起或分別從試料添加部位,或從設(shè)置在試料添加部位和檢出部之間的展開(kāi)液添加部位,根據(jù)需要而溶解于展開(kāi)液,與試料添加同時(shí)或在不同的時(shí)期添加使用。
標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物被保持的部位和黏合劑被保持的部位只要位于試料添加部位和檢出部位之間即可,可以是同一部位,也可以是不同部位。
作為測(cè)量對(duì)象物測(cè)量用器具的第8例(圖24),例如可以是設(shè)計(jì)成如下方式的試料中的測(cè)量對(duì)象物測(cè)量用器具具有設(shè)置在含有測(cè)量對(duì)象物的試料可借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)的支持體上的試料添加部位(S)、測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物與標(biāo)識(shí)結(jié)合而成并且可借助于毛細(xì)流而移動(dòng)地保持在支持體上的標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物(b2)、與測(cè)量對(duì)象物和測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物結(jié)合并且在支持體上被固定化了的黏合劑(b4)以及與測(cè)量對(duì)象物和標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物結(jié)合的捕捉劑(c2)被固定化了的壓電振子,試料和標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物借助于相同方向的毛細(xì)流在支持體上向被固定在了壓電振子上的捕捉劑移動(dòng),并且,黏合劑固定在試料添加部位和檢出部位之間的支持體上。
優(yōu)選的是,黏合劑固定在試料添加部位和檢出部位之間的支持體上,標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物預(yù)先保持在支持體上,不過(guò),也可以是標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物不保持在支持體上,而是作為配劑而被供給的方式。還有,在該器具中,可以在試料添加部位和黏合劑固定部位之間設(shè)置展開(kāi)液添加部位。標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物可以根據(jù)需要而溶解于展開(kāi)液,與試料一起或分別從試料添加部位,或從設(shè)置在試料添加部位和黏合劑固定部位之間的展開(kāi)液添加部位,根據(jù)需要而溶解于展開(kāi)液,與試料添加同時(shí)或在不同的時(shí)期添加使用。
還有,在上述測(cè)量對(duì)象物測(cè)量器具的第1~8方式的各自中,如圖10所示,也可以在檢出部位并置2個(gè)壓電振子,設(shè)置展開(kāi)液吸收部位,如圖4所示地設(shè)置控制線。
在檢出部位具有2個(gè)壓電振子的本發(fā)明的器具是特別優(yōu)選的方式,在該場(chǎng)合,其特征在于,在一個(gè)壓電振子上固定捕捉劑A(c1)、測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物(c1′)、黏合劑(c2)或捕捉劑B(c3)中的任意一種,在另一壓電振子上什么不固定。采用本器具能減少含有測(cè)量對(duì)象物的試料所產(chǎn)生的非特異性反應(yīng)所引起的測(cè)量不正確,不會(huì)受到非特異性反應(yīng)的影響,可進(jìn)行正確的測(cè)量。
還有,控制線是用于確認(rèn)目的反應(yīng)發(fā)生了的部位,可以設(shè)置在支持體上的任意位置。在展開(kāi)液吸收部位或支持體上的任意位置,例如使捕捉劑B固定,就能形成控制線。
在上述測(cè)量對(duì)象物測(cè)量器具的圖13~24的例子中,如上所述,可以組裝成聯(lián)結(jié)了振動(dòng)數(shù)測(cè)量電路或把振動(dòng)數(shù)測(cè)量電路和濃度運(yùn)算器聯(lián)結(jié)起來(lái)的振動(dòng)數(shù)測(cè)量電路的裝置。
本發(fā)明的器具,其大小沒(méi)有特別限制,不過(guò),優(yōu)選的是寬度0.01~30cm,長(zhǎng)度0.1~30cm,厚度1~10,000μm,更優(yōu)選的是寬度0.1~10cm,長(zhǎng)度0.5~15cm,厚度10~1,000μm,特別優(yōu)選的是寬度0.2~5cm,長(zhǎng)度1.0~10cm,厚度50~500μm。
作為本發(fā)明的試料中的測(cè)量對(duì)象物的測(cè)量方法,例如可以是以下方式的方法。
作為測(cè)量方法的第1例(參照?qǐng)D13和圖14),例如可以是包含以下工序的試料中的測(cè)量對(duì)象物的測(cè)量方法(1)借助于相同方向的毛細(xì)流向在壓電振子上被固定了的捕捉劑A(c1)或測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物(c1′)供給試料中的測(cè)量對(duì)象物和與測(cè)量對(duì)象物結(jié)合的標(biāo)識(shí)化黏合劑(b1)的工序;(2)使捕捉劑A和測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物與標(biāo)識(shí)化黏合劑和測(cè)量對(duì)象物反應(yīng),形成反應(yīng)復(fù)合體的工序;(3)在反應(yīng)開(kāi)始后的任意時(shí)間測(cè)量壓電振子的振動(dòng)數(shù)的工序;以及(4)根據(jù)在(3)的工序中測(cè)量出的振動(dòng)數(shù)和表示采用已知濃度的測(cè)量對(duì)象物作成了的振動(dòng)數(shù)和濃度的關(guān)系的檢量線,求出試料中的測(cè)量對(duì)象物的濃度的工序。
作為本測(cè)量方法,例如可以是使用上述測(cè)量用器具的第1例的方法。
在本測(cè)量方法中,可以是使試料中的測(cè)量對(duì)象物與標(biāo)識(shí)化黏合劑一起在支持體上借助于毛細(xì)流而移動(dòng),也可以是使試料中的測(cè)量對(duì)象物和標(biāo)識(shí)化黏合劑具有時(shí)間差而移動(dòng)。作為使試料中的測(cè)量對(duì)象物與標(biāo)識(shí)化黏合劑一起在支持體上借助于毛細(xì)流而移動(dòng)的方法,例如可以是在試料添加時(shí)已經(jīng)保持了標(biāo)識(shí)化黏合劑的支持體上添加試料的方法、在試料添加部位添加混合試料和標(biāo)識(shí)化黏合劑所得的混合液的方法等。作為使試料中的測(cè)量對(duì)象物和標(biāo)識(shí)化黏合劑具有時(shí)間差而移動(dòng)的方法,例如可以是在試料添加部位添加試料之后,在相同部位添加標(biāo)識(shí)化黏合劑的方法等。
在采用捕捉劑A被固定化了的壓電振子的場(chǎng)合,在壓電振子上形成含有捕捉劑A、測(cè)量對(duì)象物和標(biāo)識(shí)化黏合劑的復(fù)合體。另一方面,在采用測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物被固定化了的壓電振子的場(chǎng)合,在壓電振子上形成含有測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物和標(biāo)識(shí)化黏合劑的復(fù)合體。
測(cè)量復(fù)合體被固定化了的壓電振子的振動(dòng)數(shù),另一方面,預(yù)先測(cè)量試料中的測(cè)量對(duì)象物與標(biāo)識(shí)化黏合劑一起在支持體上借助于毛細(xì)流而移動(dòng)之前的壓電振子的振動(dòng)數(shù),算出測(cè)量出的2個(gè)振動(dòng)數(shù)的差(扣除空白振動(dòng)數(shù))。
可以根據(jù)該扣除空白振動(dòng)數(shù)和采用預(yù)先已知濃度的測(cè)量對(duì)象物的溶液而作成了的檢量線(表示測(cè)量對(duì)象物的濃度和扣除空白振動(dòng)數(shù)的關(guān)系的檢量線),測(cè)量試料中的測(cè)量對(duì)象物濃度。
作為測(cè)量方法的第2例(參照?qǐng)D15和圖16),例如可以是包含以下工序的試料中的測(cè)量對(duì)象物的測(cè)量方法(1)測(cè)量對(duì)象物和標(biāo)識(shí)化黏合劑借助于毛細(xì)流而在支持體上,向與結(jié)合了標(biāo)識(shí)化黏合劑的測(cè)量對(duì)象物結(jié)合的捕捉劑A被固定化了的壓電振子,或與標(biāo)識(shí)化黏合劑結(jié)合的測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物被固定化了的壓電振子,在相反方向移動(dòng)的工序;(2)在與結(jié)合了標(biāo)識(shí)化黏合劑的測(cè)量對(duì)象物結(jié)合的捕捉劑A被固定化了的壓電振子,或與標(biāo)識(shí)化黏合劑結(jié)合的測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物被固定化了的壓電振子上,進(jìn)行三明治反應(yīng)或競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)的工序;(3)測(cè)量(2)的工序后的壓電振子的振動(dòng)數(shù)的工序;(4)根據(jù)在(3)的工序中測(cè)量出的振動(dòng)數(shù)和采用已知濃度的測(cè)量對(duì)象物作成了的檢量線,求出試料中的測(cè)量對(duì)象物的濃度的工序。
作為本測(cè)量方法,例如可以是使用了上述測(cè)量用器具的第2例的方法。
在本測(cè)量方法中,試料中的測(cè)量對(duì)象物在支持體上移動(dòng)的方向和標(biāo)識(shí)化黏合劑在支持體上移動(dòng)的方向相反。優(yōu)選的是,試料中的測(cè)量對(duì)象物和標(biāo)識(shí)化黏合劑在壓電振子上進(jìn)行三明治反應(yīng)或競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)的條件。作為這樣的條件,例如可以是在標(biāo)識(shí)化黏合劑預(yù)先保持在支持體上的場(chǎng)合,同時(shí)進(jìn)行試料向試料添加部位的添加和展開(kāi)液向展開(kāi)液添加部位的添加的方式,在標(biāo)識(shí)化黏合劑未預(yù)先保持在支持體上的場(chǎng)合,同時(shí)進(jìn)行試料向試料添加部位的添加和標(biāo)識(shí)化黏合劑含有溶液向展開(kāi)液添加部位的添加的方式。
在采用捕捉劑A被固定化了的壓電振子的場(chǎng)合,在壓電振子上形成含有捕捉劑A、測(cè)量對(duì)象物和標(biāo)識(shí)化黏合劑的復(fù)合體。另一方面,在采用測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物被固定化了的壓電振子的場(chǎng)合,在壓電振子上形成含有測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物和標(biāo)識(shí)化黏合劑的復(fù)合體。
測(cè)量復(fù)合體被固定化了的壓電振子的振動(dòng)數(shù)。另一方面,預(yù)先測(cè)量試料中的測(cè)量對(duì)象物與標(biāo)識(shí)化黏合劑一起在支持體上借助于毛細(xì)流而移動(dòng)之前的壓電振子的振動(dòng)數(shù),算出測(cè)量出的2個(gè)振動(dòng)數(shù)的差(扣除空白振動(dòng)數(shù))。
可以根據(jù)該扣除空白振動(dòng)數(shù)的差和采用預(yù)先已知濃度的測(cè)量對(duì)象物的溶液而作成了的檢量線(表示測(cè)量對(duì)象物的濃度和扣除空白振動(dòng)數(shù)的關(guān)系的檢量線),測(cè)量試料中的測(cè)量對(duì)象物濃度。
作為測(cè)量方法的第3例(參照?qǐng)D17和圖18),例如可以是包含以下工序的試料中的測(cè)量對(duì)象物的測(cè)量方法(1)在支持體上,測(cè)量對(duì)象物和在支持體上被保持或固定化了的測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物(b5)對(duì)標(biāo)識(shí)化黏合劑(b1)進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)的工序;(2)在(1)的競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)中未被測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物捕捉的成分,或被在支持體上可移動(dòng)地被保持了的測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物捕捉了的成分借助于毛細(xì)流而在支持體上移動(dòng),而且通過(guò)與測(cè)量對(duì)象物和測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物結(jié)合的捕捉劑A(c1)被固定化了的壓電振子的工序;(3)測(cè)量(2)的工序后的壓電振子的振動(dòng)數(shù)的工序;(4)根據(jù)在(3)的工序中測(cè)量出的振動(dòng)數(shù)和采用已知濃度的測(cè)量對(duì)象物作成了的檢量線,求出試料中的測(cè)量對(duì)象物的濃度的工序。
作為本測(cè)量方法,例如可以是使用了上述測(cè)量用器具的第3例的方法。
在本測(cè)量方法中,含有通過(guò)在支持體上的競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)而在支持體上未被捕捉的測(cè)量對(duì)象物和標(biāo)識(shí)化黏合劑的復(fù)合體或含有測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物和標(biāo)識(shí)化黏合劑的復(fù)合體,在捕捉劑A被固定化了的壓電振子上被捕捉。作為在支持體上的競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)的方式,在標(biāo)識(shí)化黏合劑預(yù)先保持在支持體上(保持在試料添加部位和測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物固定化部位之間的區(qū)域)場(chǎng)合,可以是在試料添加部位添加試料的方法等,在標(biāo)識(shí)化黏合劑未預(yù)先保持在支持體上的場(chǎng)合,可以是在試料添加部位添加試料和標(biāo)識(shí)化黏合劑的混合溶液的方法等。
在壓電振子上,含有捕捉劑A、測(cè)量對(duì)象物和標(biāo)識(shí)化黏合劑的復(fù)合體,或含有捕捉劑A、測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物和標(biāo)識(shí)化黏合劑的復(fù)合體被固定化。測(cè)量復(fù)合體被固定化了的壓電振子的振動(dòng)數(shù),另一方面,預(yù)先測(cè)量競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)在支持體上發(fā)生之前的壓電振子的振動(dòng)數(shù),算出測(cè)量出的2個(gè)振動(dòng)數(shù)的差(扣除空白振動(dòng)數(shù))。
可以根據(jù)該扣除空白振動(dòng)數(shù)的差和采用預(yù)先已知濃度的測(cè)量對(duì)象物的溶液而作成了的檢量線(表示測(cè)量對(duì)象物的濃度和扣除空白振動(dòng)數(shù)的關(guān)系的檢量線),測(cè)量試料中的測(cè)量對(duì)象物濃度。在該例中,優(yōu)選的是,測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物(b5)和捕捉劑A(c1)是不產(chǎn)生特異性結(jié)合反應(yīng)的組合。
作為測(cè)量方法的第4例(參照?qǐng)D19和圖20),例如可以是包含以下工序的試料中的測(cè)量對(duì)象物的測(cè)量方法(1)在支持體上,測(cè)量對(duì)象物和測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物(b5)對(duì)標(biāo)識(shí)化黏合劑(b1)進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)的工序;(2)在(1)的競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)中含有測(cè)量對(duì)象物和標(biāo)識(shí)化黏合劑的復(fù)合體,或含有測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物和標(biāo)識(shí)化黏合劑的復(fù)合體借助于毛細(xì)流而在支持體上移動(dòng),而且通過(guò)與結(jié)合了測(cè)量對(duì)象物的黏合劑結(jié)合的捕捉劑B(c3)被固定化了的壓電振子的工序;(3)測(cè)量(2)的工序后的壓電振子的振動(dòng)數(shù)的工序;(4)根據(jù)在(3)的工序中測(cè)量出的振動(dòng)數(shù)和采用已知濃度的測(cè)量對(duì)象物作成了的檢量線,求出試料中的測(cè)量對(duì)象物的濃度的工序。
作為本測(cè)量方法,例如可以是使用了上述測(cè)量用器具的第4例的方法。
在本測(cè)量方法中,含有通過(guò)在支持體上的競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)而在支持體上未被捕捉的測(cè)量對(duì)象物和標(biāo)識(shí)化黏合劑的復(fù)合體在捕捉劑A被固定化了的壓電振子上被捕捉。作為在支持體上的競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)的方式,在標(biāo)識(shí)化黏合劑預(yù)先保持在支持體上(保持在試料添加部位和測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物固定化部位之間的區(qū)域)場(chǎng)合,可以是在試料添加部位添加試料的方法等,在標(biāo)識(shí)化黏合劑未預(yù)先保持在支持體上的場(chǎng)合,可以是在試料添加部位添加試料和標(biāo)識(shí)化黏合劑的混合溶液的方法等。
在壓電振子上,含有捕捉劑B、測(cè)量對(duì)象物和標(biāo)識(shí)化黏合劑的復(fù)合體,或含有捕捉劑B、測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物和標(biāo)識(shí)化黏合劑的復(fù)合體被固定化。測(cè)量復(fù)合體被固定化了的壓電振子的振動(dòng)數(shù),另一方面,預(yù)先測(cè)量競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)在支持體上發(fā)生之前的壓電振子的振動(dòng)數(shù),算出測(cè)量出的2個(gè)振動(dòng)數(shù)的差(扣除空白振動(dòng)數(shù))。
可以根據(jù)該扣除空白振動(dòng)數(shù)和采用預(yù)先已知濃度的測(cè)量對(duì)象物的溶液而作成了的檢量線(表示測(cè)量對(duì)象物的濃度和扣除空白振動(dòng)數(shù)的關(guān)系的檢量線),測(cè)量試料中的測(cè)量對(duì)象物濃度。在該例中,優(yōu)選的是,含有測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物(b5)和標(biāo)識(shí)化黏合劑的復(fù)合體,與含有測(cè)量對(duì)象物和標(biāo)識(shí)化黏合劑的復(fù)合體相比,是對(duì)捕捉劑B的反應(yīng)性不同這樣的組合。
作為測(cè)量方法的第5例(參照?qǐng)D21),例如可以是包含以下工序的試料中的測(cè)量對(duì)象物的測(cè)量方法(1)試料中的測(cè)量對(duì)象物和標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物(b2)借助于毛細(xì)流而在支持體上移動(dòng)的工序;(2)移動(dòng)了的溶液再通過(guò)黏合劑(c2)被固定化了的壓電振子的工序;(3)測(cè)量(2)的工序后的壓電振子的振動(dòng)數(shù)的工序;以及(4)根據(jù)在(3)的工序中測(cè)量出的振動(dòng)數(shù)和采用已知濃度的測(cè)量對(duì)象物而作成了的檢量線,測(cè)量試料中的測(cè)量對(duì)象物的濃度的工序。
作為本測(cè)量方法,例如可以是使用上述測(cè)量用器具的第5例的方法。
在本測(cè)量方法中,優(yōu)選的是試料中的測(cè)量對(duì)象物和標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物在壓電振子上進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)的條件。作為這樣的條件,例如,在標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物預(yù)先保持在支持體上的場(chǎng)合,可以是向試料添加部位添加試料的方式,在標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物未預(yù)先保持在支持體上的場(chǎng)合,可以是在試料添加部位添加試料和標(biāo)識(shí)化黏合劑的混合溶液的方式。
在壓電振子上,形成含有測(cè)量對(duì)象物和黏合劑的復(fù)合體和含有標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物和黏合劑的復(fù)合體。測(cè)量這些復(fù)合體被固定化了的壓電振子的振動(dòng)數(shù)。另一方面,預(yù)先測(cè)量試料中的測(cè)量對(duì)象物與標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物一起在支持體上借助于毛細(xì)流而移動(dòng)之前的壓電振子的振動(dòng)數(shù),算出測(cè)量出的2個(gè)振動(dòng)數(shù)的差(扣除空白振動(dòng)數(shù))。
此處,含有測(cè)量對(duì)象物和黏合劑的復(fù)合體所引起的振動(dòng)數(shù)與含有標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物和黏合劑的復(fù)合體所引起的振動(dòng)數(shù)相比,是極小的。試料中的測(cè)量對(duì)象物與標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物一起在支持體上借助于毛細(xì)流而移動(dòng)之前的壓電振子的振動(dòng)數(shù)是一定的,因而對(duì)于扣除空白振動(dòng)數(shù),含有測(cè)量對(duì)象物和黏合劑的復(fù)合體所引起的扣除空白振動(dòng)數(shù)與含有標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物和黏合劑的復(fù)合體所引起的扣除空白振動(dòng)數(shù)相比,是非常小的。因此,可以認(rèn)為,含有測(cè)量對(duì)象物和黏合劑的復(fù)合體和含有標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物和黏合劑的復(fù)合體被固定化了的壓電振子所引起的扣除空白振動(dòng)數(shù)與含有標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物和黏合劑的復(fù)合體被固定化了的壓電振子所引起的扣除空白振動(dòng)數(shù)大體上相等。
根據(jù)該扣除空白振動(dòng)數(shù)的差和采用預(yù)先已知濃度的測(cè)量對(duì)象物的溶液而作成了的檢量線(表示測(cè)量對(duì)象物的濃度和扣除空白振動(dòng)數(shù)的關(guān)系的檢量線),測(cè)量試料中的測(cè)量對(duì)象物濃度。
作為測(cè)量方法的第6例(參照?qǐng)D22),例如可以是包含以下工序的試料中的測(cè)量對(duì)象物的測(cè)量方法(1)測(cè)量對(duì)象物和標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物(b2)借助于毛細(xì)流而在支持體上向與測(cè)量對(duì)象物和標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物結(jié)合的黏合劑(c2)被固定化了的壓電振子,在互相相反方向移動(dòng)的工序;(2)在黏合劑被固定化了的壓電振子上,進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)的工序;(3)測(cè)量(2)的工序后的壓電振子的振動(dòng)數(shù)的工序;(4)根據(jù)在(3)的工序中測(cè)量出的振動(dòng)數(shù)和采用已知濃度的測(cè)量對(duì)象物作成了的檢量線,測(cè)量試料中的測(cè)量對(duì)象物的濃度的工序。
作為本測(cè)量方法,例如可以是使用上述測(cè)量用器具的第6例的方法。
在本測(cè)量方法中,試料中的測(cè)量對(duì)象物移動(dòng)在支持體上移動(dòng)的方向和標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物在支持體上移動(dòng)的方向相反。優(yōu)選的是,試料中的測(cè)量對(duì)象物和標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物在壓電振子上進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)的條件。作為這樣的條件,例如可以是,在標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物預(yù)先保持在支持體上的場(chǎng)合,同時(shí)進(jìn)行試料向試料添加部位的添加和展開(kāi)液向展開(kāi)液添加部位的添加的方式,在標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物未預(yù)先保持在支持體上的場(chǎng)合,同時(shí)進(jìn)行試料向試料添加部位的添加和標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物含有溶液向展開(kāi)液添加部位的添加的方式。
在壓電振子上,形成含有測(cè)量對(duì)象物和黏合劑的復(fù)合體和含有標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物和黏合劑的復(fù)合體。如上述的測(cè)量方法3中敘述的,可以認(rèn)為,含有測(cè)量對(duì)象物和黏合劑的復(fù)合體和含有標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物和黏合劑的復(fù)合體被固定化了的壓電振子所引起的扣除空白振動(dòng)數(shù)與含有標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物和黏合劑的復(fù)合體被固定化了的壓電振子所引起的扣除空白振動(dòng)數(shù)大體上相等。
根據(jù)該扣除空白振動(dòng)數(shù)的差和采用預(yù)先已知濃度的測(cè)量對(duì)象物的溶液而作成了的檢量線(表示測(cè)量對(duì)象物的濃度和扣除空白振動(dòng)數(shù)的關(guān)系的檢量線),測(cè)量試料中的測(cè)量對(duì)象物濃度。
作為測(cè)量方法的第7例(參照?qǐng)D23),例如可以是包含以下工序的試料中的測(cè)量對(duì)象物的測(cè)量方法(1)在支持體上,試料中的測(cè)量對(duì)象物與標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物(b2)對(duì)黏合劑(b3)進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)的工序;(2)在(1)的競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)中形成的反應(yīng)生成物借助于毛細(xì)流在支持體上移動(dòng),而且通過(guò)與測(cè)量對(duì)象物所結(jié)合了的黏合劑和/或標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物所結(jié)合了的黏合劑結(jié)合的捕捉劑B(c3)被固定化了的壓電振子的工序;(3)測(cè)量(2)的工序后的壓電振子的振動(dòng)數(shù)的工序;(4)根據(jù)在(3)的工序中測(cè)量出的振動(dòng)數(shù)和采用已知濃度的測(cè)量對(duì)象物作成了的檢量線,測(cè)量試料中的測(cè)量對(duì)象物的濃度的工序。
作為本測(cè)量方法,例如可以是使用上述測(cè)量用器具的第7例的方法。
在本測(cè)量方法中,含有通過(guò)在支持體上的競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)而形成了的測(cè)量對(duì)象物和黏合劑的復(fù)合體和含有標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物和黏合劑的復(fù)合體借助于毛細(xì)流在支持體上移動(dòng),在壓電振子上這些復(fù)合體被捕捉劑B捕捉。作為在支持體上的競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)的方式,在標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物和黏合劑兩者預(yù)先保持在支持體上的場(chǎng)合,可以是在該支持體上向試料添加部位添加試料的方法等,在只有標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物和黏合劑中的任意一方保持在支持體上的場(chǎng)合,可以是在該支持體上向支持體上的試料添加部位添加試料和另一方要素的混合溶液。還有,在標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物和黏合劑兩者都未保持在支持體上的場(chǎng)合,可以是向支持體上的試料添加部位添加試料、標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物和黏合劑的混合溶液的方法。
在壓電振子上,含有標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物、黏合劑和捕捉劑B的復(fù)合體和含有測(cè)量對(duì)象物、黏合劑和捕捉劑B的復(fù)合體被固定化??梢哉J(rèn)為,與上述測(cè)量方法3的場(chǎng)合同樣,含有標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物、黏合劑和捕捉劑B的復(fù)合體和含有測(cè)量對(duì)象物、黏合劑和捕捉劑B的復(fù)合體被固定化了的壓電振子所引起的扣除空白振動(dòng)數(shù)與含有標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物、黏合劑和捕捉劑B的復(fù)合體被固定化了的壓電振子所引起的扣除空白振動(dòng)數(shù)大體上相等。
根據(jù)該扣除空白振動(dòng)數(shù)的差和采用預(yù)先已知濃度的測(cè)量對(duì)象物的溶液而作成了的檢量線(表示測(cè)量對(duì)象物的濃度和扣除空白振動(dòng)數(shù)的關(guān)系的檢量線),測(cè)量試料中的測(cè)量對(duì)象物濃度。
作為測(cè)量方法的第8例(參照?qǐng)D24),例如可以是包含以下工序的試料中的測(cè)量對(duì)象物的測(cè)量方法(1)支持體上,測(cè)量對(duì)象物和標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物(b2)對(duì)在支持體上被固定化了的黏合劑(b4)進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)的工序;(2)在(1)的競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)中未被黏合劑捕捉的成分借助于毛細(xì)流而在支持體上移動(dòng),而且通過(guò)黏合劑被固定化了的壓電振子的工序;(3)測(cè)量(2)的工序后的壓電振子的振動(dòng)數(shù)的工序;(4)根據(jù)在(3)的工序中測(cè)量出的振動(dòng)數(shù)和采用已知濃度的測(cè)量對(duì)象物作成了的檢量線,測(cè)量試料中的測(cè)量對(duì)象物的濃度的工序。
作為本測(cè)量方法,例如可以是使用上述測(cè)量用器具的第8例的方法。
在本測(cè)量方法中,含有通過(guò)在支持體上的競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)而在支持體上未被捕捉的測(cè)量對(duì)象物和標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物的復(fù)合體在捕捉劑被固定化了的壓電振子上被捕捉。作為在支持體上的競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)的方式,在標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物預(yù)先保持在支持體上(保持在試料添加部位和黏合劑固定化部位之間的區(qū)域)場(chǎng)合,可以是在試料添加部位添加試料的方法等,在標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物未預(yù)先保持在支持體上的場(chǎng)合,可以是在試料添加部位添加試料和標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物的混合溶液的方法等。
在壓電振子上,形成含有標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物和黏合劑的復(fù)合體和含有測(cè)量對(duì)象物和黏合劑的復(fù)合體。如上述的測(cè)量方法3中敘述的,可以認(rèn)為,含有標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物和黏合劑的復(fù)合體和含有測(cè)量對(duì)象物和黏合劑的復(fù)合體被固定化了的壓電振子所引起的扣除空白振動(dòng)數(shù)與含有標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物、黏合劑和捕捉劑B的復(fù)合體被固定化了的壓電振子所引起的扣除空白振動(dòng)數(shù)大體上相等。
根據(jù)該扣除空白振動(dòng)數(shù)的差和采用預(yù)先已知濃度的測(cè)量對(duì)象物的溶液而作成了的檢量線(表示測(cè)量對(duì)象物的濃度和扣除空白振動(dòng)數(shù)的關(guān)系的檢量線),測(cè)量試料中的測(cè)量對(duì)象物濃度。
還有,在上述測(cè)量方法的第1~8方式的各自中,如圖10所示,也可以使用在檢出部位并置了2個(gè)壓電振子的裝置、設(shè)置了展開(kāi)液吸收部位的裝置、設(shè)置了圖4所示的控制線的裝置進(jìn)行測(cè)量。
使用在檢出部位有2個(gè)壓電振子的裝置進(jìn)行測(cè)量的方法是特別優(yōu)選的方式,在該場(chǎng)合,使用在第一壓電振子上固定捕捉劑A(c1)、測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物(c1′)、黏合劑(c2)或捕捉劑B(c3)中的任意一種,在另外的第二壓電振子上什么都不固定的壓電振子。其特征在于,例如采用測(cè)量方法第1~8(參照?qǐng)D13~24)中的任意一種方法使試料向檢出部位移動(dòng),開(kāi)始了特異性反應(yīng)之后,測(cè)量第一壓電振子的振動(dòng)數(shù)和第二壓電振子的振動(dòng)數(shù),對(duì)照使用第二壓電振子的振動(dòng)數(shù)??梢愿鶕?jù)第一振動(dòng)數(shù)和第二振動(dòng)數(shù)的差,根據(jù)用預(yù)先已知濃度的測(cè)量對(duì)象物獲得的數(shù)據(jù)而作成的檢量線,求出應(yīng)該測(cè)量物質(zhì)的濃度。采用本方法就減少含有測(cè)量對(duì)象物的試料所引起的非特異性反應(yīng)所引起的測(cè)量的不正確,可不受非特異性反應(yīng)的影響而進(jìn)行更正確的測(cè)量。
還有,例如,在圖4所示的支持體上設(shè)置了的控制線是用于確認(rèn)目的反應(yīng)發(fā)生了的部位,通過(guò)確認(rèn)控制線的反應(yīng),就能判斷確實(shí)發(fā)生了目的反應(yīng)。在控制線上發(fā)生了反應(yīng)這一點(diǎn),例如可以通過(guò)標(biāo)識(shí),通過(guò)色調(diào)的變化來(lái)取得。
在上述測(cè)量方法的第1~8例中,如上所述,使用聯(lián)結(jié)了振動(dòng)數(shù)測(cè)量電路或聯(lián)結(jié)振動(dòng)數(shù)測(cè)量電路和濃度運(yùn)算電路而成的振動(dòng)數(shù)測(cè)量電路的裝置,就能求出振動(dòng)數(shù)或濃度。
以下,通過(guò)實(shí)施例更詳細(xì)地說(shuō)明本發(fā)明,不過(guò),它們絲毫不限定本發(fā)明的范圍。另外,在本實(shí)施例中,使用了下列廠家的試劑和設(shè)備。
抗人CRP·羊多克隆抗體(IgG;口思慕百(コスモバイオ)公司制),抗人CRP·鼠單克隆抗體(IgG;口思慕百公司制),抗人胰島素·鼠單克隆抗體(IgG;口思慕百公司制),金膠體標(biāo)識(shí)化抗人免疫球蛋白·羊多克隆抗體(IgG;大不列顛生物細(xì)胞國(guó)際公司制),CRP標(biāo)準(zhǔn)液(口思慕百公司制),硼酸(關(guān)東化學(xué)公司制),咪唑(關(guān)東化學(xué)公司制),三(羥甲基)氨基甲烷(以下記作三基(トリス))(關(guān)東化學(xué)公司制),2-亞氨硫趕鹽酸鹽(2-イミノチオラン塩酸塩)(關(guān)東化學(xué)公司制),吐溫20(關(guān)東化學(xué)公司制),BSA(東方(オリエンタル)酵母公司制),聚苯乙烯微蘇菲(ポリスチレンマイクロスフイア)DS02B(班古司(バングス)公司制),戊二醛(關(guān)東化學(xué)公司制),己烷(關(guān)東化學(xué)公司制),葡聚糖凝膠G-25列(亞麻暹羅生物科學(xué)公司制),微到撒(マイクロド一サ)(生物道特公司制),生物庫(kù)安持(バイオジエツト?クアンチ)3000(生物道特公司制),水晶振子傳感器芯片(27MHz)(億尼夏木公司制),硝化纖維素膜片[AccuFlowG型(修來(lái)合&修誒路(シユライヒヤ一&シユエル)公司制);FF85(修來(lái)合&修誒路公司制)],吸收紙[300型,470型(修來(lái)合&修誒路公司制)]。
圖1是表示測(cè)量對(duì)象物測(cè)量用器具的一個(gè)例子的圖。
圖2是表示測(cè)量對(duì)象物測(cè)量用器具的一個(gè)例子的圖。
圖3是表示測(cè)量對(duì)象物測(cè)量用器具的一個(gè)例子的圖。
圖4是表示測(cè)量對(duì)象物測(cè)量用器具的一個(gè)例子的圖。
圖5是表示測(cè)量對(duì)象物測(cè)量用器具的一個(gè)例子的圖。
圖6是表示測(cè)量對(duì)象物測(cè)量用器具的一個(gè)例子的圖。
圖7是表示測(cè)量對(duì)象物測(cè)量用器具的一個(gè)例子的圖。
圖8是表示測(cè)量對(duì)象物測(cè)量用器具的試料添加部位和展開(kāi)液添加部位的聯(lián)結(jié)的例子的圖。
圖9是表示測(cè)量對(duì)象物測(cè)量用器具的支持體、檢出部位和展開(kāi)液吸收部位的聯(lián)結(jié)的例子的圖。
圖10是表示圖測(cè)量對(duì)象物測(cè)量用器具的一個(gè)例子的圖。
圖11是表示圖測(cè)量對(duì)象物測(cè)量用器具的一個(gè)例子的圖。
圖12是表示圖測(cè)量對(duì)象物測(cè)量用器具的一個(gè)例子的圖。
圖13是表示組裝了捕捉劑A被固定化了的水晶振子的測(cè)量對(duì)象物測(cè)量用器具的第1例的示意圖。
圖14是表示組裝了測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物被固定化了的水晶振子的測(cè)量對(duì)象物測(cè)量用器具的第1例的示意圖。
圖15是表示組裝了捕捉劑A被固定化了的水晶振子的測(cè)量對(duì)象物測(cè)量用器具的第2例的示意圖。
圖16是表示組裝了測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物被固定化了的水晶振子的測(cè)量對(duì)象物測(cè)量用器具的第2例的示意圖。
圖17是表示組裝了捕捉劑A被固定化了的水晶振子的測(cè)量對(duì)象物測(cè)量用器具的第3例的示意圖。
圖18是表示組裝了捕捉劑A被固定化了的水晶振子的測(cè)量對(duì)象物測(cè)量用器具的第3例的示意圖。
圖19是表示組裝了捕捉劑B被固定化了的水晶振子的測(cè)量對(duì)象物測(cè)量用器具的第4例的示意圖。
圖20是表示組裝了捕捉劑B被固定化了的水晶振子的測(cè)量對(duì)象物測(cè)量用器具的第4例的示意圖。
圖21是表示組裝了捕捉劑被固定化了的水晶振子的測(cè)量對(duì)象物測(cè)量用器具的第5例的示意圖。
圖22是表示組裝了捕捉劑被固定化了的水晶振子的測(cè)量對(duì)象物測(cè)量用器具的第6例的示意圖。
圖23是表示組裝了捕捉劑B被固定化了的水晶振子的測(cè)量對(duì)象物測(cè)量用器具的第7例的示意圖。
圖24是表示組裝了捕捉劑被固定化了的水晶振子的測(cè)量對(duì)象物測(cè)量用器具的第8例的示意圖。
圖25是表示在實(shí)施例1中制造出的測(cè)量對(duì)象物測(cè)量用器具的一個(gè)例子的圖。
圖26是表示使用了實(shí)施例1的測(cè)量對(duì)象物測(cè)量用器具的試料中的CRP濃度的測(cè)量所給出的試料中的CRP濃度和振動(dòng)數(shù)的減少量的關(guān)系的檢量線。
圖27是表示在比較例1中使用了的現(xiàn)有型的免疫色層分析法器具的圖。
圖28是表示在實(shí)施例4中制造出的測(cè)量對(duì)象物測(cè)量用器具的一個(gè)例子的圖。
符號(hào)說(shuō)明●測(cè)量對(duì)象物 黏合劑 標(biāo)識(shí) 標(biāo)識(shí)化黏合劑 測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物 標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物 捕捉劑A 捕捉劑B具體實(shí)施方式
實(shí)施例1CRP測(cè)量用器具(1)抗人CRP·羊多克隆抗體(IgG)向水晶振子的固定把抗人CRP·羊多克隆抗體(IgG)溶解于0.1mol/L的硼酸緩沖液(pH8.0)中,調(diào)制成2.0mg/mL的抗人CRP·羊多克隆抗體(IgG)的溶液。在該溶液(1.0mL)中添加1.0mg/mL的2-亞氨硫趕水溶液(0.3mL),在30℃下進(jìn)行0.5小時(shí)反應(yīng)之后,把所獲得的反應(yīng)混合物通過(guò)使用葡聚糖凝膠G-25的柱層析法進(jìn)行分離[溶出溶劑0.1mmol/L硼酸緩沖液(pH8.0)],獲得0.2mg/mL的巰化了的抗人CRP·羊多克隆抗體(IgG)的硼酸緩沖液溶液。
用微到撒生物庫(kù)安持3000向水晶振子傳感器芯片(27MHz)的表面滴下該巰化了的抗人CRP·羊多克隆抗體(IgG)的硼酸緩沖液溶液,在室溫下靜置15小時(shí),這樣就在水晶振子中央的金電極上固定了抗人CRP·羊多克隆抗體(IgG)。
并且,用含有0.1%的吐溫20(0.1%)、1%的牛血清白蛋白(以下記作BSA)的10mmol/L磷酸緩沖液(pH7.4)洗滌金電極,除去未反應(yīng)的巰化了的抗人CRP·羊多克隆抗體(IgG)。
(2)聚苯乙烯微蘇菲標(biāo)識(shí)化抗人CRP·鼠單克隆抗體(IgG)的調(diào)制在0.01mg/mL的抗人CRP·鼠單克隆抗體(IgG)的磷酸緩沖化生理食鹽水(含有0.15mol/L氯化鈉的pH7.2、10mmol/L磷酸緩沖液)(以下記作PBS)(1mL)中添加粒徑0.5μm以下的聚苯乙烯微蘇菲DS02B(班古司公司制)的0.5%水溶液(10mL),在37℃下靜置2小時(shí)之后,在4℃,以12000rpm對(duì)混合物進(jìn)行1小時(shí)離心分離。在除去浮層而獲得的沉淀物[含有聚苯乙烯微蘇菲標(biāo)識(shí)化抗人CRP·鼠單克隆抗體(IgG)的沉淀物]中添加含有0.6% BSA的pH7.8、10mmol/L咪唑緩沖液(50mL),通過(guò)超聲波處理使混合物分散,制成標(biāo)識(shí)液。
(3)標(biāo)識(shí)化黏合劑保持部件的作成使(2)中調(diào)制成的標(biāo)識(shí)液在室溫下在硝化纖維素膜片(AccuFlowG型)中含浸1小時(shí)之后,使該膜片在室溫、3mmHg以下進(jìn)行真空干燥,制成保持了聚苯乙烯微蘇菲標(biāo)識(shí)化抗人CRP·鼠單克隆抗體(IgG)的標(biāo)識(shí)化黏合劑保持部件。
(4)CRP測(cè)量用器具的制作把由棉花(修來(lái)合&修誒路公司制)構(gòu)成的試料添加用的試料添加用部件、在(3)中制成的標(biāo)識(shí)化黏合劑保持部件、由硝化纖維素膜片(FF85)構(gòu)成的支持體、在(1)中制成的抗人CRP·羊多克隆抗體(IgG)被固定化了的水晶振子和吸收紙300(修來(lái)合&修誒路公司制)所構(gòu)成的展開(kāi)液吸收部件分別配置在試料添加部位、展開(kāi)液添加部位、支持體、檢出部位和展開(kāi)液吸收部位,制成圖25所示的CRP測(cè)量用器具。
實(shí)施例2使用了CRP測(cè)量用器具的試料中的CRP濃度的測(cè)量(1)檢量線的制作向圖25的試料添加部位滴下了試料(5μL)。其次,從同部位,繼續(xù)添加了pH7.5、10mmol/L三基緩沖液。該緩沖液一邊稀釋試料,一邊到達(dá)微蘇菲標(biāo)識(shí)化抗人CRP·鼠單克隆抗體(IgG)結(jié)合了的保持部件,在此處試料中的CRP和微蘇菲標(biāo)識(shí)化抗人CRP·鼠單克隆抗體(IgG)進(jìn)行反應(yīng)。反應(yīng)液借助于毛細(xì)流進(jìn)一步在膜片上前進(jìn),到達(dá)水晶振子上的微小的空間而填滿了空間。在該水晶振子上,CRP和微蘇菲標(biāo)識(shí)化抗人CRP·鼠單克隆抗體(IgG)的復(fù)合體與在水晶振子上被固定化了的抗人CRP·羊多克隆抗體(IgG)進(jìn)行反應(yīng)。與試料中的CRP濃度成比例,微蘇菲標(biāo)識(shí)化抗人CRP·鼠單克隆抗體(IgG)在水晶振子上被固定化。反應(yīng)液被反應(yīng)液吸收部件吸收之后,取出水晶振子,將其安裝在阿飛尼可思Q(億尼夏木公司制)上,在容器中加上pH7.5、10mmol/L三基緩沖液,5分后測(cè)量出振動(dòng)數(shù)。
作為試料,分別使用了①僅pH7.5、10mmol/L三基緩沖液,②0.05μg/mL的CRP標(biāo)準(zhǔn)液,③0.1μg/mL的CRP標(biāo)準(zhǔn)液,④0.2μg/mL的CRP標(biāo)準(zhǔn)液,以及⑤0.4μg/mL的CRP標(biāo)準(zhǔn)液。按每種試料換掉水晶振子,測(cè)量了振動(dòng)數(shù)。首先測(cè)量添加試料之前的振動(dòng)數(shù),接著測(cè)量?jī)H添加①pH7.5、10mmol/L三基緩沖液(5μL),緩沖液被吸收墊吸收之后的振動(dòng)數(shù),算出了兩振動(dòng)數(shù)的差(把該振動(dòng)數(shù)的差作為Δ1)。其次,代替①pH7.5、10mmol/L三基緩沖液(5μL),添加②~⑤的各試料(5μL),與①的場(chǎng)合同樣,測(cè)量添加各試料之前的振動(dòng)數(shù)和添加各試料,反應(yīng)液被吸收墊吸收之后的振動(dòng)數(shù),算出了兩振動(dòng)數(shù)的差(把與各試料對(duì)應(yīng)的振動(dòng)數(shù)的差作為Δ2~Δ5)。第1表和圖26表示從各振動(dòng)數(shù)的差(Δ2~Δ5)中扣除了Δ1的值,即,扣除了空白振動(dòng)數(shù)的減少量(-ΔF/Hz)和CRP濃度的關(guān)系。
第1表
如第1表和圖26所示,判明了采用實(shí)施例1CRP測(cè)量用器具,CRP在0.00~0.40μg/mL的范圍,能得到良好的直線性。
(2)人血清中的CRP濃度的測(cè)量作為試料,使用人血清代替CRP標(biāo)準(zhǔn)液,與(1)中的檢量線制作的場(chǎng)合同樣,測(cè)量振動(dòng)數(shù)的變化量,根據(jù)(1)中制成的檢量線,算出了該人血清中的CRP濃度,為0.092μg/mL。另一方面,采用作為CRP測(cè)量用配劑的艾克斯忒路(エクステル)CRP(協(xié)和麥底克斯(協(xié)和メデツクス)公司制)測(cè)量了該人血清中的CRP濃度,為0.094μg/mL。因此判明了,采用實(shí)施例1的CRP測(cè)量器具就能正確測(cè)量人血清中的CRP濃度。
比較例1與試料中的CRP濃度測(cè)量有關(guān)的實(shí)施例1的CRP測(cè)量器具和現(xiàn)有型免疫色層分析法用裝置的比較用圖27所示的含有試料添加用的試料添加用部件、微蘇菲標(biāo)識(shí)化抗人CRP·鼠單克隆抗體(IgG)結(jié)合了的標(biāo)識(shí)化黏合劑保持部件、由硝化纖維素膜片(FF85)構(gòu)成的支持體、由抗人CRP·羊多克隆抗體(IgG)固定化部位和吸收紙300構(gòu)成的展開(kāi)液吸收部件的現(xiàn)有型的免疫色層分析法用器具,研究了試料中的CRP的檢出界限。作為試料,分別使用了①僅pH7.5、10mmol/L三基緩沖液,②0.05μg/mL的CRP標(biāo)準(zhǔn)液,③0.1μg/mL的CRP標(biāo)準(zhǔn)液,④0.2μg/mL的CRP標(biāo)準(zhǔn)液,⑤0.4μg/mL的CRP標(biāo)準(zhǔn)液,以及⑥4.0μg/mL的CRP標(biāo)準(zhǔn)液。結(jié)果,只在⑥試料的場(chǎng)合,能以目測(cè)確認(rèn)青線。因此判明了,與現(xiàn)有型的免疫色層分析法用裝置相比,本發(fā)明的現(xiàn)有型的免疫色層分析法用裝置能高靈敏度地測(cè)量試料中的CRP。
實(shí)施例3抗結(jié)核菌表面糖脂抗原抗體(抗TBGL抗體)用測(cè)量器具把金膠體標(biāo)識(shí)化抗人免疫球蛋白·鼠單克隆抗體(IgG)用含有0.15mol/L的濃度的氯化鈉的pH7.4、10mmol/L的磷酸緩沖液稀釋100倍,把該被稀釋了的金膠體標(biāo)識(shí)化抗體溶液作為標(biāo)識(shí)液。使含浸了該標(biāo)識(shí)液的吸收紙470型在3mmHg以下進(jìn)行真空干燥,制成標(biāo)識(shí)化黏合劑保持部件。
在水晶振子上含浸涂布以海藻糖機(jī)密口類(lèi)特(トレハロ一スジミコレ一ト)為主要成分的結(jié)核菌表面糖脂抗原(TBGL)的0.1mg/mL己烷溶液,在3mmHg以下進(jìn)行真空干燥后,用含有1%BSA的10mmol/L的磷酸緩沖液進(jìn)行封阻,制成TBGL固定化水晶振子。
采用上述標(biāo)識(shí)化黏合劑保持部件和TBGL固定化水晶振子,以與實(shí)施例1同樣的方法,制成抗TBGL抗體測(cè)量用器具。采用該裝置,把健常人(20歲以下)的血清、結(jié)核患者的血清以及遺傳TBGL抗體的截止標(biāo)準(zhǔn)液(抗體值2單位;協(xié)和麥底克斯公司制)作為試料,測(cè)量各試料中的振動(dòng)數(shù),算出試料添加前的振動(dòng)數(shù)和測(cè)量出的振動(dòng)數(shù)的差[振動(dòng)數(shù)的減少量(-ΔF/Hz)],根據(jù)算出了的振動(dòng)數(shù),算出了健常人(20歲以下)的血清中包含的抗TBGL抗體的滴定率和結(jié)核患者的血清中包含的抗TBGL抗體的滴定率。第2表表示結(jié)果。
第2表
如第2表所示,在健常人的血清中,抗TBGL抗體的滴定率在截止值以下,而在結(jié)核患者的血清中,抗TBGL抗體的滴定率在截止值以上。因此表明了,可以采用本發(fā)明的抗TBGL測(cè)量用器具進(jìn)行結(jié)核的診斷。
實(shí)施例4胰島素測(cè)量用器具
(1)含有金膠體標(biāo)識(shí)化抗人胰島素·鼠單克隆抗體(IgG)的標(biāo)識(shí)化黏合劑保持部件的制作把抗人胰島素·鼠單克隆抗體(IgG)溶解于0.1mol/L的硼酸緩沖液(pH8.0)中,調(diào)制成2.0mg/mL的抗人胰島素·鼠單克隆抗體(IgG)的溶液。在該溶液(1.0mL)中添加1.0mg/mL的2-亞氨硫趕水溶液(0.3mL),在30℃下進(jìn)行0.5小時(shí)反應(yīng)之后,把所獲得的反應(yīng)混合物通過(guò)使用葡聚糖凝膠G-25的柱層析法進(jìn)行分離[溶出溶劑0.1mmol/L硼酸緩沖液(pH8.0)],獲得0.2mg/mL的巰化了的抗人胰島素·鼠單克隆抗體(IgG)的硼酸緩沖液溶液。
在該巰化了的抗人胰島素·鼠單克隆抗體(IgG)的硼酸緩沖液溶液(1mL)中添加粒徑40nm的金膠體粒子10mL,在室溫下使之反應(yīng)10分鐘,調(diào)制成金膠體粒子標(biāo)識(shí)化抗人胰島素·鼠單克隆抗體含有溶液。在該溶液中添加含有0.6%BSA的pH7.8、10mmol/L咪唑緩沖液(50mL),并且把對(duì)該混合溶液實(shí)施超聲波處理后的東西作為標(biāo)識(shí)液。使硝化纖維素膜片[AccuFlowG型]含浸了該標(biāo)識(shí)液之后,在室溫下按1小時(shí),在3mmHg以下使該膜片進(jìn)行真空干燥,制成保持了金膠體粒子標(biāo)識(shí)化抗人胰島素·鼠單克隆抗體的標(biāo)識(shí)化黏合劑保持部件。
(2)胰島素向硝化纖維素膜片的固定在硝化纖維素膜片(FF85)的一定區(qū)域上,用生物庫(kù)安持3000滴下1%戊二醛水溶液,在室溫下干燥0.5小時(shí)之后,用生物庫(kù)安持3000在同一區(qū)域上滴下了0.2mg/mL的胰島素水溶液。在室溫下反應(yīng)2小時(shí)之后,用生物庫(kù)安持3000在同一區(qū)域上滴下1%BSA的PBS溶液,制成胰島素在硝化纖維素膜片上被固定化了的支持體。
(3)抗鼠IgG·羊多克隆抗體向水晶振子的固定以與實(shí)施例1的(1)同樣的方法,使抗鼠IgG·羊多克隆抗體巰化,進(jìn)行了該巰化抗鼠IgG·羊多克隆抗體向水晶振子傳感器芯片(27MHz)中央的金電極上的固定化。
(4)胰島素測(cè)量用器配置含有在(1)中制成的金膠體粒子標(biāo)識(shí)化抗人胰島素·鼠單克隆抗體(IgG)的標(biāo)識(shí)化黏合劑保持部件、由在(2)中制成的胰島素固定化硝化纖維素膜片構(gòu)成的支持體、在(3)中制成的抗鼠IgG·羊多克隆抗體固定化水晶振子、由吸收紙300構(gòu)成的展開(kāi)液吸收部件,制成圖28所示的胰島素測(cè)量用免疫色層分析法用帶,制成胰島素測(cè)量用器具。
實(shí)施例5使用了胰島素測(cè)量用器具的試料中的胰島素的測(cè)量在試料添加用部件上滴下了試料(5μL)。其次,從同孔繼續(xù)添加了pH7.5、10mmol/L三基緩沖液。該緩沖液一邊稀釋試料,一邊到達(dá)金膠體粒子標(biāo)識(shí)化抗人胰島素·鼠單克隆抗體(IgG)結(jié)合了的支持體,在此處與試料中的胰島素金膠體粒子標(biāo)識(shí)化抗人胰島素·鼠單克隆抗體(IgG)進(jìn)行反應(yīng)。反應(yīng)液借助于毛細(xì)流進(jìn)一步在膜片上前進(jìn),與試料中的胰島素未結(jié)合的金膠體粒子標(biāo)識(shí)化抗人胰島素·鼠單克隆抗體(IgG)在胰島素固定化部位被捕捉。在該胰島素固定部分的反應(yīng)后,未被胰島素固定部分固定化的胰島素和金膠體粒子標(biāo)識(shí)化抗人胰島素·鼠單克隆抗體(IgG)的復(fù)合體借助于毛細(xì)流在水晶振子上移動(dòng),填滿了水晶振子上的微小空間。該復(fù)合體在抗鼠IgG·羊多克隆抗體固定化水晶振子上被捕捉,反應(yīng)液被吸收墊吸收。反應(yīng)液被吸收墊吸收之后,取出水晶振子,將其安裝在阿飛尼可思Q(億尼夏木公司制)上,在容器中加上pH7.5、10mmol/L三基緩沖液,5分后測(cè)量了振動(dòng)數(shù)。
作為試料,分別使用了①pH7.5、10mmol/L三基緩沖液和②300ng/mL的胰島素標(biāo)準(zhǔn)液。按每種試料換掉水晶振子,測(cè)量了振動(dòng)數(shù)。首先測(cè)量添加試料之前的振動(dòng)數(shù),接著測(cè)量添加①pH7.5、10mmol/L三基緩沖液(5μL),緩沖液被吸收墊吸收之后的振動(dòng)數(shù),算出了兩振動(dòng)數(shù)的差(把該振動(dòng)數(shù)的差作為Δ1)。其次,代替①pH7.5、10mmol/L三基緩沖液(5μL),添加②的試料(5μL),與①的場(chǎng)合同樣,測(cè)量添加各試料之前的振動(dòng)數(shù)和添加各試料,反應(yīng)液被吸收墊吸收之后的振動(dòng)數(shù),算出了兩振動(dòng)數(shù)的差(把與各試料對(duì)應(yīng)的振動(dòng)數(shù)的差作為Δ2)。從振動(dòng)數(shù)的差(Δ2)中扣除了Δ1的值,即,扣除了空白的值為1375(-ΔF/Hz)。
其次,作為試料,使用糖尿病患者的血清代替胰島素標(biāo)準(zhǔn)液(300ng/mL),進(jìn)行了同樣的測(cè)量,扣除了空白的值為577(-ΔF/Hz)。根據(jù)該值算出了該血清中的胰島素濃度為126ng/mL。另一方面,采用作為胰島素測(cè)量用配劑的開(kāi)迷路密胰島素(ケミルミインスリン)(拜耳醫(yī)學(xué)公司制)測(cè)量了該血清中的胰島素濃度,為125ng/mL。因此判明了,采用實(shí)施例4的器具能正確測(cè)量人血清中的胰島素濃度。
實(shí)施例6檢量線作成用帶配劑的CRP測(cè)量用器具準(zhǔn)備6枚在實(shí)施例1中制成的CRP測(cè)量用器具,如圖11所示,將其排列成放射狀。在中心附近的各試料添加部位,例如,在器具1的添加部位添加被檢液,與試料同量,在器具2~6的添加部位分別添加在實(shí)施例2中使用了的5種標(biāo)準(zhǔn)液,即①僅pH7.5、10mmol/L三基緩沖液,②0.05μg/mL的CRP標(biāo)準(zhǔn)液,③0.1μg/mL的CRP標(biāo)準(zhǔn)液,④0.2μg/mL的CRP標(biāo)準(zhǔn)液以及⑤0.4μg/mL的CRP標(biāo)準(zhǔn)液。與實(shí)施例2中的方法同樣,根據(jù)扣除了器具2~6中的空白振動(dòng)數(shù)的變化量,制作檢量線,把扣除了器具1中的空白振動(dòng)數(shù)的變化量適用于該檢量線,就能測(cè)量該被檢液中的CRP濃度。
工業(yè)實(shí)用性本發(fā)明提供一種實(shí)現(xiàn)了高靈敏度定量分析的簡(jiǎn)便的免疫色層分析法測(cè)量用器具、裝置和測(cè)量方法。
權(quán)利要求
1.一種測(cè)量對(duì)象物測(cè)量用器具,在試料中的測(cè)量對(duì)象物可借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)的支持體上具有試料添加部位(S)和檢出部位(Q),其特征在于,該檢出部位具有被2個(gè)電極夾著的壓電振子,在該壓電振子上預(yù)先固定了捕捉劑A(c1)或測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物(c1’),在該支持體上具有保持了黏合劑(b1),使其可借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)的黏合劑保持部位(BR)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的器具,其中,該黏合劑保持部位設(shè)置在該試料添加部位和該檢出部位之間。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的器具,其中,該黏合劑保持部位夾隔該檢出部位而設(shè)置在該試料添加部位的相反側(cè)。
4.一種測(cè)量對(duì)象物測(cè)量用器具,在試料中的測(cè)量對(duì)象物可借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)的支持體上具有試料添加部位(S)和檢出部位(Q),其特征在于,該檢出部位由被2個(gè)電極間夾著的壓電振子構(gòu)成,在該壓電振子上預(yù)先固定了與測(cè)量對(duì)象物結(jié)合的捕捉劑A(c1),或是標(biāo)識(shí)化測(cè)量對(duì)象物或測(cè)量對(duì)象物和黏合劑的復(fù)合物,以及與測(cè)量對(duì)象物或測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物和標(biāo)識(shí)化黏合劑的復(fù)合體結(jié)合的捕捉劑B(c3),在該支持體上具有保持了黏合劑(b1),使其可借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)的黏合劑保持部位(BR),而且在該支持體上具有在該黏合劑保持部位和檢出部位之間固定了測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物(b5),使其不會(huì)借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng),或在該支持體上保持了測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物(b5),使其可借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)的測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物固定部位(DF)或測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物保持部位(DR)。
5.根據(jù)權(quán)利要求1~4中任意一項(xiàng)所述的器具,其中,黏合劑是被標(biāo)識(shí)了的東西。
6.一種測(cè)量對(duì)象物測(cè)量用器具,在試料中的測(cè)量對(duì)象物可借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)的支持體上具有試料添加部位(S)和檢出部位(Q),其特征在于,該檢出部位具有被2個(gè)電極夾著的壓電振子,在該壓電振子上預(yù)先固定了黏合劑(c2),在該支持體上具有保持了測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物(b2),使其可借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)的測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物保持部位(DR)。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的器具,其中,該測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物保持部位設(shè)置在該試料添加部位和該檢出部位之間。
8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的器具,其中,該測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物保持部位夾隔該檢出部位而設(shè)置在該試料添加部位的相反側(cè)。
9.一種測(cè)量對(duì)象物測(cè)量用器具,在試料中的測(cè)量對(duì)象物可借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)的支持體上具有試料添加部位(S)和檢出部位(Q),其特征在于,該檢出部位由被2個(gè)電極間夾著的壓電振子構(gòu)成,在該壓電振子上預(yù)先固定了捕捉劑B(c3),在該支持體上具有保持了測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物(b2)和黏合劑(b3),使其可借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)的測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物保持部位(DR)和黏合劑保持部位(BR)。
10.一種測(cè)量對(duì)象物測(cè)量用器具,在試料中的測(cè)量對(duì)象物可借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)的支持體上具有試料添加部位(S)和檢出部位(Q),其特征在于,該檢出部位具有被2個(gè)電極間夾著的壓電振子,在該壓電振子上預(yù)先固定了與測(cè)量對(duì)象物結(jié)合的黏合劑(c2),在該支持體上具有保持了測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物(b2),使其可借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)的測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物保持部位(DR),而且在該支持體上具有在該測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物保持部位和檢出部位之間的支持體中固定了黏合劑(b4),使其不會(huì)借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)的黏合劑固定部位(BF)。
11.根據(jù)權(quán)利要求6~10中任意一項(xiàng)所述的器具,其中,測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物是被標(biāo)識(shí)了的東西。
12.根據(jù)權(quán)利要求5或11所述的器具,中,該標(biāo)識(shí)是不溶性小胞體。
13.根據(jù)權(quán)利要求12所述的器具,其中,該不溶性小胞體是金屬膠體或膠乳。
14.一種測(cè)量對(duì)象物測(cè)量用器具,在試料中的測(cè)量對(duì)象物可借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)的支持體上具有試料添加部位(S)和檢出部位(Q),其特征在于,該檢出部位由被2個(gè)電極間夾著的壓電振子構(gòu)成,在該壓電振子上固定了捕捉劑A(c1)、測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物(c1′)、黏合劑(c2)或捕捉劑B(c3)。
15.根據(jù)權(quán)利要求1~14中任意一項(xiàng)所述的器具,其中,還含有展開(kāi)液吸收部位(d)。
16.根據(jù)權(quán)利要求1~15中任意一項(xiàng)所述的器具,其中,在該檢出部位,除了固定了捕捉劑A(c1)、測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物(c1′)、黏合劑(c2)或捕捉劑B(c3)的被2個(gè)電極夾著的壓電振子以外,還具有另一個(gè)被2個(gè)電極夾著的壓電振子,該壓電振子未固定捕捉劑A(c1)、測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物(c1′)、黏合劑(c2)和捕捉劑B(c3)中的任何一種。
17.根據(jù)權(quán)利要求1~16中任意一項(xiàng)所述的器具,其中,該壓電振子是水晶振子。
18.一種測(cè)量對(duì)象物測(cè)量裝置,具有權(quán)利要求1~17中任意一項(xiàng)所述的器具;與該器具的壓電振子的電極連接,測(cè)量該壓電振子的振動(dòng)數(shù)的振動(dòng)數(shù)測(cè)量電路;以及與該振動(dòng)數(shù)測(cè)量電路連接,根據(jù)振動(dòng)數(shù)來(lái)運(yùn)算測(cè)量對(duì)象物濃度的濃度運(yùn)算電路。
19.一種試料中的測(cè)量對(duì)象物的定量方法,根據(jù)與在壓電振子上被固定了的物質(zhì)特異性地結(jié)合而產(chǎn)生的該壓電振子的振動(dòng)數(shù)的變化,對(duì)試料中的測(cè)量對(duì)象物進(jìn)行定量,其特征在于,在壓電振子上預(yù)先固定了捕捉劑A(c1)或測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物(c1′),采用試料中的測(cè)量對(duì)象物和黏合劑可借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)的支持體,向該捕捉劑A或該測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物供給試料和該黏合劑,使其與在壓電振子上被固定了的物質(zhì)特異性地結(jié)合。
20.根據(jù)權(quán)利要求19所述的定量方法,其中,借助于相同方向的毛細(xì)流對(duì)該捕捉劑A或該測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物供給該試料和該黏合劑。
21.根據(jù)權(quán)利要求19所述的定量方法,其中,借助于相反方向的毛細(xì)流對(duì)該捕捉劑A或該測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物供給該試料和該黏合劑。
22.一種試料中的測(cè)量對(duì)象物的定量方法,根據(jù)與在壓電振子上被固定了的物質(zhì)特異性地結(jié)合而產(chǎn)生的該壓電振子的振動(dòng)數(shù)的變化,對(duì)試料中的測(cè)量對(duì)象物進(jìn)行定量,其特征在于,在壓電振子上預(yù)先固定了捕捉劑A(c1)或捕捉劑B(c3),采用固定了測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物(b5),使其不會(huì)借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng),而試料中的測(cè)量對(duì)象物和黏合劑(b1)可借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)的支持體,向該捕捉劑A或捕捉劑B供給試料和該黏合劑,使其與在壓電振子上被固定了的物質(zhì)特異性地結(jié)合。
23.一種試料中的測(cè)量對(duì)象物的定量方法,根據(jù)與在壓電振子上被固定了的物質(zhì)特異性地結(jié)合而產(chǎn)生的該壓電振子的振動(dòng)數(shù)的變化,對(duì)試料中的測(cè)量對(duì)象物進(jìn)行定量,其特征在于,在壓電振子上預(yù)先固定了捕捉劑A(c1)或捕捉劑B(c3),采用試料中的測(cè)量對(duì)象物、黏合劑(b1)和測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物(b5)可借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)的支持體,向該捕捉劑A或捕捉劑B供給試料、該黏合劑和該測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物,使其與在壓電振子上被固定了的物質(zhì)特異性地結(jié)合。
24.根據(jù)權(quán)利要求17~23中任意一項(xiàng)所述的方法,其中,黏合劑是被標(biāo)識(shí)了的東西。
25.一種試料中的測(cè)量對(duì)象物的定量方法,根據(jù)與在壓電振子上被固定了的物質(zhì)特異性地結(jié)合而產(chǎn)生的該壓電振子的振動(dòng)數(shù)的變化,對(duì)試料中的測(cè)量對(duì)象物進(jìn)行定量,其特征在于,在壓電振子上預(yù)先固定了黏合劑(c2),采用試料中的測(cè)量對(duì)象物和測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物(b2)可借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)的支持體,向該黏合劑供給試料和該測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物,使其與在壓電振子上被固定了的物質(zhì)特異性地結(jié)合。
26.根據(jù)權(quán)利要求25所述的定量方法,其中,借助于相同方向的毛細(xì)流對(duì)該黏合劑供給該試料和該測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物。
27.根據(jù)權(quán)利要求25所述的定量方法,其中,借助于相反方向的毛細(xì)流對(duì)該黏合劑供給該試料和該測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物。
28.一種試料中的測(cè)量對(duì)象物的定量方法,根據(jù)與在壓電振子上被固定了的物質(zhì)特異性地結(jié)合而產(chǎn)生的該壓電振子的振動(dòng)數(shù)的變化,對(duì)試料中的測(cè)量對(duì)象物進(jìn)行定量,其特征在于,在壓電振子上預(yù)先固定了捕捉劑B(c3),采用試料中的測(cè)量對(duì)象物、測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物(b2)和黏合劑(b3)可借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)的支持體,向該捕捉劑B供給試料、該測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物和該黏合劑,使其與在壓電振子上被固定了的物質(zhì)特異性地結(jié)合。
29.一種試料中的測(cè)量對(duì)象物的定量方法,根據(jù)與在壓電振子上被固定了的物質(zhì)特異性地結(jié)合而產(chǎn)生的該壓電振子的振動(dòng)數(shù)的變化,對(duì)試料中的測(cè)量對(duì)象物進(jìn)行定量,其特征在于,在壓電振子上預(yù)先固定了黏合劑(c2),采用固定了黏合劑(b4),使其不會(huì)借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng),而試料中的測(cè)量對(duì)象物和測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物(b2)可借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)的支持體,向該黏合劑供給試料和測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物,使其與在壓電振子上被固定了的物質(zhì)特異性地結(jié)合。
30.根據(jù)權(quán)利要求25~29中任意一項(xiàng)所述的方法,其中,測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物是被標(biāo)識(shí)了的東西。
31.根據(jù)權(quán)利要求24或30所述的定量方法,其中,該標(biāo)識(shí)是不溶性小胞體。
32.根據(jù)權(quán)利要求31所述的定量方法,其中,該不溶性小胞體是金屬膠體或膠乳。
33.一種試料中的測(cè)量對(duì)象物的定量方法,根據(jù)與在壓電振子上被固定了的物質(zhì)特異性地結(jié)合而產(chǎn)生的該壓電振子的振動(dòng)數(shù)的變化,對(duì)試料中的測(cè)量對(duì)象物進(jìn)行定量,其特征在于,在壓電振子上預(yù)先固定了捕捉劑A(c1),采用試料中的測(cè)量對(duì)象物可借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)的支持體,向該捕捉劑A供給試料,使其與在壓電振子上被固定了的物質(zhì)特異性地結(jié)合。
34.根據(jù)權(quán)利要求17~29中任意一項(xiàng)所述的方法,其中,再采用未固定捕捉劑A(c1)、測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物(c1′)、黏合劑(c2)和捕捉劑B(c3)中的任何一種的第二壓電振子,向捕捉劑A(c1)、測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物(c1′)、黏合劑(c2)或捕捉劑B(c3)被固定化了第一壓電振子和第二壓電振子供給試料,作為對(duì)照來(lái)使用第二振動(dòng)數(shù)。
35.根據(jù)權(quán)利要求19~34中任意一項(xiàng)所述的方法,其中,壓電振子是水晶振子。
全文摘要
根據(jù)本發(fā)明,提供一種測(cè)量對(duì)象物測(cè)量用器具和使用該器具的試料中的測(cè)量對(duì)象物的定量方法,該測(cè)量對(duì)象物測(cè)量用器具,在試料中的測(cè)量對(duì)象物可借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)的支持體上具有試料添加部位(S)和檢出部位(Q),其特征在于,該檢出部位具有被2個(gè)電極夾著的壓電振子,在該壓電振子上預(yù)先固定了捕捉劑A(c1)或測(cè)量對(duì)象物類(lèi)似物(c1’),在該支持體上具有可借助于展開(kāi)液的毛細(xì)流而移動(dòng)地保持了黏合劑(b1)的黏合劑保持部位(BR)。
文檔編號(hào)G01N33/543GK1833169SQ200480022739
公開(kāi)日2006年9月13日 申請(qǐng)日期2004年8月11日 優(yōu)先權(quán)日2003年8月11日
發(fā)明者三池彰, 角田春樹(shù) 申請(qǐng)人:協(xié)和梅迪克斯株式會(huì)社