專利名稱：一種高效液相色譜系統(tǒng)共聚焦型激光誘導(dǎo)熒光檢測器的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本實用新型涉及高效液相色譜系統(tǒng)的檢測器，特別是一種配置有新型檢測池的高效液相色譜系統(tǒng)共聚焦型激光誘導(dǎo)熒光檢測器。
背景技術(shù)：
熒光檢測作為一種高靈敏檢測技術(shù)在高效液相色譜(HPLC)系統(tǒng)中應(yīng)用比較廣泛。通過選擇激發(fā)或發(fā)射波長以適應(yīng)不同的樣品，該技術(shù)的最低檢測限一般為10-8～10-9摩爾/升。隨著科技和社會的發(fā)展，目前的生物技術(shù)、環(huán)境和食品中對痕量組分分析的要求有時達到10-12摩爾/升甚至更低，傳統(tǒng)的熒光檢測器不能滿足要求。用激光為激發(fā)光源的激光誘導(dǎo)熒光檢測(Laser-Induced FluorescenceDetection，LIF-D)是目前靈敏度最高的檢測手段之一，近年來得到了快速發(fā)展。共聚焦型LIF-D具有結(jié)構(gòu)簡單、熒光收集效率高等優(yōu)點，在毛細管電泳檢測中應(yīng)用非常廣泛，但將其應(yīng)用于HPLC系統(tǒng)，需要設(shè)計專門的檢測池，目前報道的柱后檢測池包括無窗池、射流池、鞘流池?；谶@些柱后檢測池的熒光檢測池除鞘流池外均是基于正交型光學結(jié)構(gòu)，盡管有報道鞘流池用于共聚焦光學結(jié)構(gòu)，但鞘流池制作過程復(fù)雜、操作煩瑣。
實用新型內(nèi)容本實用新型的目的在于提供一種高效液相色譜系統(tǒng)共聚焦型激光誘導(dǎo)熒光檢測器。該檢測器通過柱上檢測池或柱后檢測池可以和毛細管液相色譜及普通高效液相色譜系統(tǒng)在線聯(lián)用，主要適用于生物、環(huán)境、藥物和食品檢測等領(lǐng)域中的痕量組分檢測。
本實用新型的目的是通過以下技術(shù)方案來實現(xiàn)的本實用新型包括激發(fā)光源、光學平臺及檢測池，激發(fā)光源位于光學平臺的一側(cè)，檢測池固設(shè)在光學平臺上。
其中所述光學平臺內(nèi)由上至下同軸依次設(shè)有物鏡、分束鏡、濾光片、凸透鏡及光闌，光電轉(zhuǎn)化器件設(shè)置在光闌的下方，其中分束鏡與激發(fā)光源發(fā)出的平行光束成45°角；所述光電轉(zhuǎn)化器件可為光電倍增管、光電池、光電二極管或電荷耦合器件；所述激發(fā)光源可為半導(dǎo)體激光器、半導(dǎo)體泵浦固體激光器或氣體激光器；所述檢測池內(nèi)設(shè)有兩個液流管道，兩液流管道下方設(shè)有檢測窗，不銹鋼墊片壓在檢測窗上，在檢測池上還開有定位孔及固定孔；所述檢測池為柱后檢測池，兩個液流管道與激發(fā)光路在同一平面并相互成120°。
本實用新型的優(yōu)點與積極效果為本實用新型用于高效液相色譜，具有結(jié)構(gòu)緊湊、體積小、熒光收集效率高等優(yōu)點。同時，所研制的柱后檢測池的光學窗口為平面光窗，相對于橫截面為圓柱型的毛細管柱上檢測池具有更低的光學反射和散射，即光學背景小，有利于得到更低的檢測靈敏度。


圖1為本實用新型的整體結(jié)構(gòu)示意圖；圖2為本實用新型柱后檢測池的結(jié)構(gòu)示意圖；圖3為本實用新型激光誘導(dǎo)熒光檢測核黃素的色譜圖。
具體實施方式
以下結(jié)合附圖對本實用新型作進一步詳述。
如圖1所示，本發(fā)明采用熒光收集光路和激發(fā)光路在檢測池9的同側(cè)且同軸的共聚焦光學結(jié)構(gòu)。包括激發(fā)光源1、光學平臺2及檢測池9，激發(fā)光源1位于光學平臺2的一側(cè)，檢測池9固設(shè)在光學平臺2上。光學平臺2內(nèi)由上至下同軸依次設(shè)有物鏡8、分束鏡3、濾光片4、凸透鏡5及光闌6，光電轉(zhuǎn)化器件7設(shè)置在光闌6的下方，其中分束鏡3與激發(fā)光源1發(fā)出的平行光束成45°角。光電轉(zhuǎn)化器件7可為光電倍增管(PMT)、光電池、光電二極管或電荷耦合器件(CCD)。激發(fā)光源1可為半導(dǎo)體激光器、半導(dǎo)體泵浦固體激光器或氣體激光器。
如圖2所示，檢測池9內(nèi)設(shè)有兩個液流管道11，兩液流管道11下方設(shè)有檢測窗10，不銹鋼墊片12壓在檢測窗10上，在檢測池9上還開有定位孔13及固定孔14，檢測池9通過定位孔13定位于光學平臺2上，并通過固定孔14固定在光學平臺2上。檢測池9為柱后檢測池，兩個液流管道11與激發(fā)光路在同一平面并相互成120°，檢測池9的材質(zhì)為不銹鋼或聚醚醚酮(PEEK)等惰性材料。該檢測池9主要適用于HPLC系統(tǒng)和流動注射分析系統(tǒng)。
在檢測時，激發(fā)光源1發(fā)出的平行光束成45°照射到分束鏡3上，被反射、經(jīng)物鏡8、檢測窗10聚焦到檢測池9中。液體流過液流管道11時，若樣品中有熒光，被激發(fā)光路照射后，樣品發(fā)出的熒光由物鏡8收集、由凸鏡5聚焦，經(jīng)光闌6至光電轉(zhuǎn)化器件7被轉(zhuǎn)化為可供檢測的電信號。
如圖3所示，為本實用新型用于檢測核黃素。
測試條件HPLC系統(tǒng)液相色譜高壓輸液泵一臺，分離柱為4.6×150mm C18，5μ，(ZORBAX，HP)；流動相水/甲醇(70/30)。柱后檢測池池體積7μL。
測試結(jié)果取信噪比為3，該LIF-D對核黃素的濃度檢測限為0.1μg/L。
權(quán)利要求1.一種高效液相色譜系統(tǒng)共聚焦型激光誘導(dǎo)熒光檢測器，其特征在于包括激發(fā)光源(1)、光學平臺(2)及檢測池(9)，激發(fā)光源(1)位于光學平臺(2)的一側(cè)，檢測池(9)固設(shè)在光學平臺(2)上。
2.按權(quán)利要求1所述的高效液相色譜系統(tǒng)共聚焦型激光誘導(dǎo)熒光檢測器，其特征在于所述光學平臺(2)內(nèi)由上至下同軸依次設(shè)有物鏡(8)、分束鏡(3)、濾光片(4)、凸透鏡(5)及光闌(6)，光電轉(zhuǎn)化器件(7)設(shè)置在光闌(6)的下方，其中分束鏡(3)與激發(fā)光源(1)發(fā)出的平行光束成45°角。
3.按權(quán)利要求2所述的高效液相色譜系統(tǒng)共聚焦型激光誘導(dǎo)熒光檢測器，其特征在于所述光電轉(zhuǎn)化器件(7)可為光電倍增管、光電池、光電二極管或電荷耦合器件。
4.按權(quán)利要求1或2所述的高效液相色譜系統(tǒng)共聚焦型激光誘導(dǎo)熒光檢測器，其特征在于所述激發(fā)光源(1)可為半導(dǎo)體激光器、半導(dǎo)體泵浦固體激光器或氣體激光器。
5.按權(quán)利要求1所述的高效液相色譜系統(tǒng)共聚焦型激光誘導(dǎo)熒光檢測器，其特征在于所述檢測池(9)內(nèi)設(shè)有兩個液流管道(11)，兩液流管道(11)下方設(shè)有檢測窗(10)，不銹鋼墊片(12)壓在檢測窗(10)上，在檢測池上還開有定位孔(13)及固定孔(14)。
6.按權(quán)利要求5所述的高效液相色譜系統(tǒng)共聚焦型激光誘導(dǎo)熒光檢測器，其特征在于所述檢測池(9)為柱后檢測池，兩個液流管道(11)與激發(fā)光路在同一平面并相互成120°。
專利摘要本實用新型涉及高效液相色譜系統(tǒng)的檢測器，特別是一種配置有新型檢測池的高效液相色譜系統(tǒng)共聚焦型激光誘導(dǎo)熒光檢測器，包括激發(fā)光源、光學平臺及檢測池，激發(fā)光源位于光學平臺的一側(cè)，檢測池固設(shè)在光學平臺上。所述光學平臺內(nèi)由上至下同軸依次設(shè)有物鏡、分束鏡、濾光片、凸透鏡及光闌，光電轉(zhuǎn)化器件設(shè)置在光闌的下方，其中分束鏡與激發(fā)光源發(fā)出的平行光束成45°角；所述檢測池內(nèi)設(shè)有兩個液流管道，兩液流管道下方設(shè)有檢測窗，不銹鋼墊片壓在檢測窗上，在檢測池上還開有定位孔及固定孔；所述檢測池為柱后檢測池，兩個液流管道與激發(fā)光路在同一平面并相互成120°。本實用新型具有結(jié)構(gòu)緊湊、體積小、熒光收集效率高等優(yōu)點。
文檔編號G01N21/64GK2793726SQ20052009102
公開日2006年7月5日 申請日期2005年5月27日 優(yōu)先權(quán)日2005年5月27日
發(fā)明者關(guān)亞風, 楊丙成 申請人:中國科學院大連化學物理研究所