專利名稱：青柏潔身洗液中苦參堿含量的測定方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種苦參堿(C15H24N2O)含量測定方法，特別涉及青柏潔身洗液中的有效成分——苦參堿的測定方法。
背景技術(shù)：
青柏潔身洗液為一種中成藥的婦科外用洗液，現(xiàn)收載于《國家中成藥標(biāo)準(zhǔn)匯編中成藥地方標(biāo)準(zhǔn)上升國家標(biāo)準(zhǔn)部分外科婦科分冊》(國家藥品監(jiān)督管理局，2002)第339～342頁，處方由下列藥物組成苦參120g、黃連80g、黃柏120g、花椒40g、蛇床子120g、黃芪120g、何首烏120g、地膚子120g、大青葉120g、赤芍120g、當(dāng)歸120g、月桂醇硫酸鈉4g、苯甲酸2g，制法為將以上十一味藥材，加水煎煮二次，第一次2小時(shí)，第二次1.5小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮成相對密度為1.20～1.25(50℃)的清膏，加入乙醇，使含醇量達(dá)70％，靜置48小時(shí)，濾過，回收乙醇，加水至規(guī)定量，再加入月桂醇硫酸鈉、苯甲酸使溶解，靜置24小時(shí)，濾過，即得。青柏潔身洗液中的有效成分為苦參堿，在青柏潔身洗液現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)的含量測定項(xiàng)中，對苦參堿含量測定是采用薄層色譜法對苦參堿進(jìn)行掃描的方法，由于薄層色譜法操作過程繁瑣，受薄層板、操作人員、儀器等因素影響太大，所以其重現(xiàn)性差，很難達(dá)到準(zhǔn)確測定其中苦參堿的含量的目的，從而造成青柏潔身洗液質(zhì)量可控性差。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是針對上述技術(shù)中存在的不足之處，提供一種采用高效液相色譜法測定青柏潔身洗液中苦參堿(C15H24N2O)的方法。
該發(fā)明提供的高效液相色譜法測定青柏潔身洗液中苦參堿方法，其中色譜條件為用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；柱溫15～52℃；以甲醇-水(水中含0.5～5％四氫呋喃及0.01～1％氨水)(0.5～1.5∶0.5～1.5)為流動相；流速0.5～2ml/min，檢測波長202～280nm。
其中對照品溶液制備方法為精密稱取苦參堿對照品適量，加甲醇配制成0.01～0.1mg/ml的溶液，即得。
其中供試品溶液制備方法為精密量取供試品5～20ml，加濃氨試液0.25～1ml，用氯仿振搖提取3次以上，每次20ml，合并氯仿液，蒸干，殘?jiān)由倭柯确?約5ml)溶解，裝入堿性氧化鋁柱(80～200目，1～5g)，氯仿-甲醇(2～10∶0～2)溶液10～50ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)蛹状既芙獠⑥D(zhuǎn)移至50ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液即得。
其中測定方法為分別精密吸取對照品溶液5～40μl，供試品溶液5～40μl，注入液相色譜儀，測定，計(jì)算，即得。其計(jì)算方法為每毫升含苦參堿量＝樣品峰面積/對照品峰面積×對照品濃度×樣品稀釋倍數(shù)。
采本發(fā)明的方法與現(xiàn)行檢測方法薄層掃描法相比，具有快速、準(zhǔn)確、重復(fù)性好的優(yōu)點(diǎn)。它不受儀器、人員操作等因素影響，誤差很小，結(jié)果可信。
具體實(shí)施例方式色譜條件 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；柱溫42℃；以甲醇-水(含3％四氫呋喃，0.03％氨水)(1∶1)為流動相；流速0.9ml/min，檢測波長220nm。理論塔板數(shù)按苦參堿計(jì)算應(yīng)不低于5000。
對照品溶液的制備精密稱取苦參堿對照品適量，加甲醇配制成0.02mg/ml的溶液，即得。
供試品溶液的制備 精密量取本品10ml，加濃氨試液0.5ml，用氯仿振搖提取4次，每次20ml，合并氯仿液，蒸干，殘?jiān)由倭柯确?約5ml)溶解，裝入堿性氧化鋁柱(100目，3g)，氯仿∶甲醇(9∶1)20ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)蛹状既芙獠⑥D(zhuǎn)移至50ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液即得。
測定法 分別精密吸取對照品溶液20μl，供試品溶液20μl，注入液相色譜儀，測定，計(jì)算，即得。其計(jì)算方法為每毫升含苦參堿量＝樣品峰面積/對照品峰面積×對照品濃度×50ml/10ml。
本品每1ml含苦參以苦參堿(C15H24N2O)計(jì)，不得少于0.12mg。
權(quán)利要求
1.青柏潔身洗液中苦參堿含量的測定方法，其特征在于包括下列步驟A、制備對照品溶液精密稱取苦參堿對照品適量，加甲醇配制成0.01～0.1mg/ml的溶液；B、制備供試品溶液精密量取供試品5～20ml，加濃氨試液0.25～1ml，用氯仿振搖提取3次以上，每次15～20ml，合并氯仿液，蒸干，殘?jiān)蛹s5ml氯仿溶解，裝入1～5g、80～200目的堿性氧化鋁柱，用2～10份氯仿0～2份甲醇溶液10～50ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)蛹状既芙獠⑥D(zhuǎn)移至50ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液即得。C、別精密吸取對照品溶液5～40μl，供試品溶液5～40μl，注入液相色譜儀，測定，計(jì)算得出結(jié)果。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的青柏潔身洗液中苦參堿含量的測定方法，其特征在于其色譜條件為用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；柱溫15～52℃；以0.5～1.5份甲醇-0.5～1.5份水為流動相；流速0.5～2ml/min，檢測波長202～280nm。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的青柏潔身洗液中苦參堿含量的測定方法，其特征在于所述水中含0.5～5％四氫呋喃及0.01～1％氨水。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的青柏潔身洗液中苦參堿含量的測定方法，其特征在于所述苦參堿含量的計(jì)算方法為每ml含苦參堿量等于樣品峰面積與對照品峰面積之比乘以對照品濃度再乘以樣品稀釋倍數(shù)。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種青柏潔身洗液中苦參堿的測定方法，包括下列步驟制備對照品溶液精密稱取苦參堿對照品適量，加甲醇配制成0.01～0.1mg/ml的溶液；制備供試品溶液精密量取本品5～20ml，加濃氨試液0.25～1ml，用氯仿振搖提取3次以上，每次20ml，合并氯仿液，蒸干，殘?jiān)由倭柯确?約5ml)溶解，裝入堿性氧化鋁柱(80～200目，1～5g)，氯仿－甲醇(2～10∶0～2)10～50ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)蛹状既芙獠⑥D(zhuǎn)移至50ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液即得，分別精密吸取對照品溶液5～40μl，供試品溶液5～40μl，注入液相色譜儀，測定，計(jì)算得出結(jié)果。采本發(fā)明具有快速、準(zhǔn)確、重復(fù)性好的優(yōu)點(diǎn)。它不受儀器、人員操作等因素影響，誤差很小，結(jié)果可信度高。
文檔編號G01N30/86GK101046467SQ200610060119
公開日2007年10月3日 申請日期2006年3月30日 優(yōu)先權(quán)日2006年3月30日
發(fā)明者易八賢 申請人:國藥控股深圳中藥有限公司