專利名稱：組織石蠟切片脫蠟方法
技術領域：
本發(fā)明涉及病理學組織切片技術領域，特別是一種具有簡易、環(huán)保、費用低廉特點的組織石蠟切片脫蠟方法。
背景技術：
組織石蠟切片是在觀察組織形態(tài)和免疫組化等定性分析中最常用的一種切片技術，廣泛應用于臨床病理診斷和實驗研究。為了觀察組織首先要去除石蠟切片的石蠟，即脫石蠟。組織石蠟切片的常規(guī)脫蠟方法是使用有機溶劑，例如使用二甲苯為常用脫蠟劑。在該脫蠟方法中不僅操作煩瑣，需要多個步驟，而且二甲苯污染環(huán)境、對人體有害。然而為改善這種情況，到目前為止，改良的脫蠟方法仍多以有機溶劑為脫蠟劑，或使用洗潔精溶液脫蠟，但對人體和環(huán)境也仍有不良影響。

發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的旨在為克服現(xiàn)有技術的不足，而提供一種組織石蠟切片脫蠟方法，該方法操作簡單，環(huán)保、安全。
本發(fā)明為解決上述問題公開了一種組織石蠟切片脫蠟方法。其特征在于所說的脫蠟步驟是將石蠟組織切片放入第一缸脫蠟液中，于60-70℃溫度下恒溫浸泡10-20分鐘；取出切片后再直接放入第二缸脫蠟液中以相同條件重復上一步操作；然后用水沖洗即完成；所說的脫蠟液是用水配制的含按體積1％-1.5％的聚乙醇辛基苯基醚水溶液。
本發(fā)明還公開了一種組織石蠟切片作免疫組化需要抗原熱修復的組織石蠟切片脫蠟方法。其特征在于所說的脫蠟步驟是先將脫蠟液預熱到95℃至100℃，5-10分鐘，再把組織切片放入脫蠟液中浸泡10-20分鐘，然后用自來水沖洗即完成；所說的脫蠟液是用抗原修復液配制的含按體積1％-1.5％的聚乙醇辛基苯基醚溶液。
本發(fā)明的有益效果是聚乙醇辛基苯基醚(Triton X-100)對人體無不良影響，操作過程簡單易行，不產(chǎn)生環(huán)境污染物，且費用低廉，脫蠟效果明確。當用組織石蠟切片作免疫組化需要抗原熱修復時，可直接用脫蠟修復液同時進行脫蠟和抗原修復，不需要另行脫蠟?？朔顺Ｒ?guī)脫蠟法操作煩瑣、污染環(huán)境、有害身體健康的問題。此外本發(fā)明的脫蠟液可重復使用2-3次。
具體實施方式本發(fā)明的組織石蠟切片脫蠟方法其步驟是將組織石蠟切片放入第一缸脫蠟液中，于60-65℃溫度下恒溫浸泡10-15分鐘；取出切片后再直接放入第二缸脫蠟液中，于60-65℃溫度下恒溫再浸泡10-15分鐘；然后用自來水沖洗即完成。
當用組織石蠟切片作免疫組化需要抗原熱修復時，可直接用用于抗原修復的脫蠟液同時進行脫蠟和抗原修復，不需要另行脫蠟。脫蠟修復時，將用于抗原修復的脫蠟液放入抗原修復盒內(nèi)預熱到所需溫度一般95℃以上，5-10分鐘，再把組織切片放入抗原修復盒進行脫蠟和抗原修復，時間同一般抗原修復液。此時只用一個缸即可。
其中1)脫蠟液的配制將蒸餾水與Triton X-100(化學名聚乙醇辛基苯基醚(分析純))以體積比99∶1混合，充分攪拌。
2)用于抗原修復的脫蠟液配制將抗原修復液，如枸椽酸鹽緩沖液或EDTA溶液與Triton X-100以體積比99∶1混合，充分攪拌。
實施例將按上述方法制備的脫蠟液，倒入兩個玻璃染色缸，并放入水浴鍋中預熱。組織石蠟切片浸泡于其中一缸中，于60℃恒溫浸泡10分鐘。將組織切片直接取出后，再放入另一缸中，于60℃恒溫浸泡10分鐘。然后將組織切片從溶液中取出，用自來水沖洗。即可按常規(guī)方法再進行蘇木素-伊紅染色，常規(guī)脫水，中性樹膠封固等步驟。
將脫蠟液配成用于抗原修復的脫蠟液，用抗原熱修復盒修復，方法同一般組織石蠟切片脫蠟后的抗原熱修復，組織切片從溶液中取出后，用自來水沖洗，即可行免疫組化染色，常規(guī)脫水，中性樹膠封固。
本發(fā)明采取雙盲法閱片，與常規(guī)二甲苯脫蠟方法比較，染色結果均無差異，脫蠟液和用于抗原修復的脫蠟液脫蠟效果確切。
權利要求
1.一種組織石蠟切片脫蠟方法，其特征在于所說的脫蠟步驟是將組織石蠟切片放入第一缸脫蠟液中，于60-70℃溫度下恒溫浸泡10-20分鐘；取出切片后再直接放入第二缸脫蠟液中以相同條件重復上一步操作；然后用水沖洗即完成；所說的脫蠟液是用水配制的含按體積1％-1.5％的聚乙醇辛基苯基醚水溶液。
2.根據(jù)權利要求1所述的組織石蠟切片脫蠟方法，其特征在于所說的脫蠟液用蒸餾水與聚乙醇辛基苯基醚以體積比99∶1充分攪拌混合制備而成。
3.根據(jù)權利要求1或2所述的組織石蠟切片脫蠟方法，其特征在于所說的脫蠟液的恒溫溫度為60-65℃。
4.根據(jù)權利要求1或2所述的組織石蠟切片脫蠟方法，其特征在于所說的在脫蠟液中浸泡時間為10-15分鐘，并且浸泡兩次。
5.根據(jù)權利要求1或2所述的組織石蠟切片脫蠟方法，其特征在于所說的沖洗用水是自來水。
6.一種組織石蠟切片脫蠟方法，其特征在于所說的脫蠟步驟是先將脫蠟液預熱到95℃至100℃，5-10分鐘，再把組織切片放入脫蠟液中浸泡10-20分鐘，然后用自來水沖洗即完成；所說的脫蠟液是用抗原修復液配制的含按體積1％-1.5％的聚乙醇辛基苯基醚溶液。
7.根據(jù)權利要求6所述的組織石蠟切片脫蠟方法，其特征在于所說的抗原修復液是枸椽酸鹽緩沖液或EDTA溶液。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種組織石蠟切片脫蠟方法。該方法將蒸餾水與Triton X－100(聚乙醇辛基苯基醚)以體積比99∶1混合，充分攪拌制備脫蠟液。使用此種溶液脫蠟時，將組織石蠟切片放入第一缸脫蠟液中，于60－70℃溫度下恒溫浸泡10－20分鐘；取出切片后再直接放入第二缸脫蠟液中以相同條件重復上一步操作；然后用水沖洗即完成。如需抗原熱修復，將用抗原熱修復液配制含1％Triton X－100的脫蠟修復液。本發(fā)明不同于以往的石蠟切片脫蠟法，所用脫蠟劑TritonX－100對人體無不良影響、環(huán)保、價格低廉，操作步驟簡單易行。
文檔編號G01N1/28GK1975367SQ200610129808
公開日2007年6月6日 申請日期2006年12月1日 優(yōu)先權日2006年12月1日
發(fā)明者王騰飛, 車永哲 申請人:南開大學