專利名稱：：一種藿香正氣軟膠囊指紋圖譜的測(cè)定方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種藿香正氣軟膠囊指紋圖譜的測(cè)定方法，具體地說(shuō)是用氣相色譜一質(zhì)譜聯(lián)用指紋圖譜方法來(lái)測(cè)定藿香正氣軟膠囊中有效成分的一種方法，屬于中藥現(xiàn)代化領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
：藿香正氣處方出自《太平惠民和劑局方.巻二》所載藿香正氣散，主要藥物組成有藿香、蒼術(shù)、半夏、厚樸、大腹皮、白芷、紫蘇、茯苓、陳皮、桔梗、甘草。具有解表和中，芳香化濁的功效，主要用于外感風(fēng)寒，內(nèi)有濕滯或感受暑濕，外見寒熱頭痛等表證，內(nèi)有胸腹?jié)M悶、腹痛泄瀉，口淡苔膩，脈濡緩等濕阻之證。本方常用于胃腸型感冒、急性胃腸炎或消化不良等具有上述證候者。天津中新藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司達(dá)仁堂制藥廠首家研發(fā)了我國(guó)第一個(gè)藿香正氣軟膠囊制劑。目前，藿香正氣軟膠囊廣泛用于現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的胃腸型感冒、急慢性腸炎等，被列為全國(guó)中醫(yī)醫(yī)院急診必備中成藥，國(guó)家中藥保護(hù)品種。中藥指紋圖譜是指某種中藥材或中成藥中所共有的、具有特征性的某類或數(shù)類成分的色譜或光譜的圖譜。在現(xiàn)階段中藥的有效成分絕大多數(shù)沒有明確的情況下，中藥指紋圖譜對(duì)于有效控制中藥材或中成藥的質(zhì)量具有重要的意義。日本漢方藥主要生產(chǎn)企業(yè)在20世紀(jì)80年代就已經(jīng)在企業(yè)內(nèi)部采用高效液相指紋圖譜控制質(zhì)量。美國(guó)FDA最近幾年制定的植物草藥指南中己經(jīng)明確把指紋圖譜作為混合物質(zhì)群的質(zhì)量控制方法(FDA.Guidanceoflndustry:BotanicalDrug(Draft).2004)。隨著研究的深入，人們發(fā)現(xiàn)，作為中醫(yī)理論的實(shí)踐產(chǎn)物，中藥，尤其是復(fù)方中藥，其中所含的任一成分都不能代表其整體療效。人們逐漸認(rèn)一識(shí)到，現(xiàn)行的參照西藥(合成藥)質(zhì)量控制模式的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)不能恰當(dāng)?shù)胤从持兴巸?nèi)在的質(zhì)量。從發(fā)展趨勢(shì)看，從現(xiàn)行的質(zhì)量控制模式向一種綜合的、宏觀的、可量化的鑒別與主要有效成分含量測(cè)定結(jié)合己是發(fā)展的趨勢(shì)。對(duì)于化學(xué)藥品而言，其藥效成分為結(jié)構(gòu)清晰的單一化合物，構(gòu)效關(guān)系明確，其含量和純度直接表達(dá)其有效及安全性。然而，中醫(yī)用藥的特點(diǎn)是復(fù)方配伍，任何單一的有效或活性成分的含量高低。均不能表達(dá)其整體的療效。例如，黃芪所含的黃芪甲苷(aastmgalosideIV)是當(dāng)前被選擇為質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的鑒別和含量測(cè)定的最為常見的目標(biāo)，但并沒有依據(jù)證明黃芪甲苷與黃芪的功能主治的明確聯(lián)系。同樣，黃連、黃柏、三棵針均含小檗堿，一般都以它作為檢測(cè)的目標(biāo)，但是三者的功能主治卻截然不同。復(fù)方制劑的情況就更加復(fù)雜。中醫(yī)這種不是一對(duì)一的非線性的理論和實(shí)踐說(shuō)明中藥質(zhì)量應(yīng)該采用某種宏觀的綜合的質(zhì)量評(píng)價(jià)手段。藿香正氣源于宋代《太平惠民和劑局方》，被稱為"祛濕圣藥"。達(dá)仁堂采用先進(jìn)工藝，制成同類品種中全國(guó)第一個(gè)軟膠囊劑型，很好地保存了揮發(fā)油，保證了療效。藿香正氣軟膠囊臨床上可應(yīng)用于胃腸型感冒、功能性消化不良、低熱、小兒厭食、濕疹、老年性腹脹等多種疾病。其治療效果已經(jīng)得到臨床的驗(yàn)證。是否能夠保證藥物質(zhì)量以及有效成分的含量，是決定藿香正氣軟膠囊療效的基礎(chǔ)。目前的藿香正氣軟膠囊的標(biāo)準(zhǔn)中僅僅對(duì)厚樸酚和和厚樸酚的含量進(jìn)行控制，這顯然對(duì)于控制藿香正氣軟膠囊的內(nèi)在質(zhì)量而言是遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠的。必須對(duì)其物質(zhì)群整體予以控制，從整體上有效表征藿香正氣軟膠囊的質(zhì)量。指紋圖譜作為中草藥及其提取物質(zhì)量控制的方法，已經(jīng)成為國(guó)際共識(shí)?，F(xiàn)在，對(duì)藿香正氣軟膠囊中化學(xué)組分為指標(biāo)的指紋圖譜建立方法未見報(bào)道。藥理實(shí)驗(yàn)表明，藿香正氣軟膠囊中的揮發(fā)性成分具有顯著的藥理活性，其中，廣藿香油具有顯著的藥理作用，廣藿香的水提物、去油水提物和揮發(fā)油均可抑制離體兔腸的自發(fā)收縮性和乙酰膽堿、氯化鋇引起的痙攣性收縮，對(duì)乙酰膽堿和氯化鋇引起的收縮作用強(qiáng)度順序是揮發(fā)油〉去油水提物>水提物。廣藿香油對(duì)胃排空、正常小鼠腸推進(jìn)運(yùn)動(dòng)以及新斯的明引起的小鼠腸推進(jìn)運(yùn)動(dòng)無(wú)影響且協(xié)同番瀉葉引起的小鼠腹瀉。廣藿香油還可抑制冰醋酸引起的內(nèi)臟絞痛。廣藿香水提物、揮發(fā)油以及去油其他部分均能不同程度地增加胃酸分泌，提高胃蛋白酶活性，增強(qiáng)胰腺分泌淀粉酶的功能，提高血清淀粉酶活力。廣藿香油對(duì)沙門氏菌、大腸桿菌、志賀菌、金黃色葡萄球菌等均有一定抑制作用。廣藿香油還具有較強(qiáng)的抗瘧作用，且對(duì)伯氏瘧原蟲抗青蒿酯鈉株有明顯的選擇性抑制作用和較強(qiáng)的逆轉(zhuǎn)抗性作用。莫小路等就廣藿香油對(duì)13種常見植物病原真菌的抑制活性進(jìn)行了研究，結(jié)果顯示廣藿香油對(duì)受試的13種植物病原真菌均有不同程度的抑制作用。廣藿香油對(duì)角叉菜膠、蛋清致大鼠足腫脹、二甲苯致小鼠耳廓腫脹等急性炎癥都有明顯的抑制作用，對(duì)由物理、化學(xué)刺激引起的疼痛有較強(qiáng)的鎮(zhèn)痛作用，對(duì)由2，4-二硝基苯酚引起的大鼠發(fā)熱有一定解熱作用。(任守忠，靳德軍等，廣藿香藥理作用研究進(jìn)展，中國(guó)現(xiàn)代中藥，2006，8(8):27-29)藥理實(shí)驗(yàn)還表明，紫蘇葉油也具有顯著的藥理作用，紫蘇葉揮發(fā)油具有解熱作用，且解熱效果優(yōu)于阿司匹林。具有抗微生物和抗菌作用，對(duì)自然污染的霉菌的抑制力明顯優(yōu)于尼泊金乙酯和苯甲酸，對(duì)革蘭氏陽(yáng)性菌核革蘭氏陰性菌的活性具有良好的抑制作用。具有止嘔作用，對(duì)洋地黃酊引起的家鴿嘔吐具有抑制作用。具有抗腫瘤作用，紫蘇葉揮發(fā)油具有抑制畸變腺囊病灶發(fā)展的作用，是結(jié)腸癌初期的抑制劑。紫蘇葉揮發(fā)油還具有鎮(zhèn)咳、化痰、降血脂作用。(顧文娟，張建梅等，紫蘇的藥理研究進(jìn)展，黑龍江畜牧獸醫(yī)，2006，8:26_28)為了更有效的對(duì)藿香正氣軟膠囊中的揮發(fā)性成分進(jìn)行質(zhì)量控制，本發(fā)明采用氣相色譜一質(zhì)譜聯(lián)用法(使用電子轟擊源)作為藿香正氣軟膠囊指紋圖譜的測(cè)定方法，氣相色譜一質(zhì)譜聯(lián)用法比單純的氣相色譜法具有更強(qiáng)的定性優(yōu)勢(shì)，它不但采用保留時(shí)間定性，而且釆用質(zhì)譜法進(jìn)行定性，可以明確所研究的主要成分。在指紋圖譜研究中，采用氣相色譜一質(zhì)譜聯(lián)用法可以明確判斷批間的異同處，找出相同與相異的成分，從而進(jìn)一步控制產(chǎn)品質(zhì)量，保證產(chǎn)品療效。該方法用于藿香正氣軟膠囊質(zhì)量控制迄今未見報(bào)道。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種藿香正氣軟膠囊指紋圖譜的測(cè)定方法，通過此測(cè)定方法，可以控制藿香正氣軟膠囊質(zhì)量。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案-一種藿香正氣軟膠囊指紋圖譜的測(cè)定方法，步驟如下-(a)供試品的制備取藿香正氣軟膠囊內(nèi)容物，置容量瓶中，加有機(jī)溶劑溶解，定容，即為供試品；(b)參照物溶液的制備精密量取環(huán)已酮、正十二垸、正十三烷、正十四烷、正十六垸或正十八烷，作為參照物溶液(內(nèi)標(biāo))；(C)色譜條件色譜柱為彈性石英毛細(xì)管柱，聚硅氧垸柱為固定相；程序溫度初始溫度40~100°C，以每分鐘26°C的速率升溫至230~280°C，氣化室溫度為230~280°C，接口溫度為230~280°C，質(zhì)荷比范圍為101000;(d)測(cè)定方法采用氣質(zhì)聯(lián)用測(cè)定；吸取供試品溶液，注入氣相色譜一質(zhì)譜聯(lián)用儀，測(cè)定，記錄l小時(shí)色譜圖；廣藿香醇峰面積作為l,計(jì)算峰面積相對(duì)比值。本發(fā)明優(yōu)選通過下列步驟實(shí)施所述(a)供試品的制備中，有機(jī)溶劑為石油醚、正己烷、乙醚、乙酸乙酯、苯、甲苯或二甲苯。所述聚硅氧垸柱為交聯(lián)苯基聚硅氧烷柱。所述參照物溶液選自環(huán)己酮、正十二垸、正十三垸、正十四垸、正十六垸或正十八垸中的一種，其目的是以此為參照，標(biāo)定出峰的相對(duì)時(shí)間。進(jìn)一步優(yōu)選的藿香正氣軟膠囊指紋圖譜測(cè)定方法，方法如下(a)供試品的制備取藿香正氣軟膠囊內(nèi)容物，精密稱定，加乙酸乙酯，加熱至沸，放冷，置容量瓶中，定容，即為供試品；(b)參照物溶液的制備精密量取正十四垸適量，作為參照物溶液(內(nèi)標(biāo))；(C)色譜條件色譜柱為彈性石英毛細(xì)管柱，交聯(lián)5%苯基甲基聚硅氧烷柱為固定相；程序溫度初始溫度5070'C，以每分鐘35。C的速率升溫至24027(TC，氣化室溫度為240270。C,接口溫度為240~270°C，質(zhì)荷比范圍為20750;(d)測(cè)定方法采用氣質(zhì)聯(lián)用測(cè)定；吸取供試品溶液，注入氣相色譜一質(zhì)譜聯(lián)用儀，測(cè)定，記錄l小時(shí)色譜圖；廣藿香醇峰面積作為l，計(jì)算峰面積相對(duì)比值。最佳的藿香正氣軟膠囊指紋圖譜測(cè)定方法，方法如下(a)供試品的制備取藿香正氣軟膠囊內(nèi)容物約10g，精密稱定，加正已烷2ml，緩緩加熱至沸，并保持微沸3小時(shí)，放冷；再用正已垸定容至5ml，混勻，即為供試品；(b)參照物溶液的制備精密量取正十四烷適量，加正已烷制成每lml含15mg的溶液，作為參照物溶液；(c)色譜條件色譜柱為彈性石英毛細(xì)管柱，交聯(lián)50%苯基甲基聚硅氧烷柱為固定相；程序溫度初始溫度6(TC，以每分鐘4'C的速率升溫至ll(TC，再以每分鐘rC的速率升溫至120°C，再以每分鐘5'C的速率升溫至18(TC，最后以每分鐘8。C的速率升溫至250°C,并保持20min;氣化室溫度為25(TC，接口溫度為25(TC，離子源(EI)溫度為200°C;分流比為50:1;檢測(cè)器電壓為1.2kV，質(zhì)荷比范圍為33500;(d)測(cè)定方法采用氣質(zhì)聯(lián)用測(cè)定；吸取供試品溶液，注入氣相色譜一質(zhì)譜聯(lián)用儀，測(cè)定，記錄1小時(shí)色譜圖；供試品指紋圖譜中正十四垸參照物峰為S峰，計(jì)算相對(duì)保留時(shí)間；廣藿香醇峰面積作為l，計(jì)算峰面積相對(duì)比值。一種藿香正氣軟膠囊的質(zhì)量控制方法，將藿香正氣軟膠囊采用上述方法測(cè)定，將待測(cè)產(chǎn)品指紋圖譜與所述指紋圖譜進(jìn)行比對(duì)，相似度在卯100%，認(rèn)為所述待測(cè)產(chǎn)品的質(zhì)量合格。一種藿香正氣軟膠囊，將其采用上述測(cè)定方法測(cè)定，所得指紋圖譜有49個(gè)共有指紋峰(含內(nèi)標(biāo)參照物峰)，分別為1號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間0.386RSD%0.442號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間0.429RSD%0.343號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間0.461RSD%0.394號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間0.565RSD%0.185號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間0.576RSD%0.286號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間0.791RSD%0.137號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間0.803RSD%0.168號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間0.847RSD%0.109號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間1.000RSD%—(為內(nèi)標(biāo)，正十四烷)10號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間1.067RSD%0.1111號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間1.158RSD%0.1712號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間1.175RSD%0.1913號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間1.212RSD%0.1914號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間1.221RSD%0.1915號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間1.286RSD%0.2316號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間1.308RSD%0.1417號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間1.348RSD%0.2218號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間1.384RSD%0.1619號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間1.498RSD%0.2720號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間1.512RSD%0.2721號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間1.526RSD%0.2622號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間1.559RSD%0.2623號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間1.604RSD%0.3924號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間1.682RSD%0.1225號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間1.695RSD%0.1026號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間1.709RSD%0.0927號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間1.748RSD%0.1028號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間1.802RSD%0.1829號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間1.822RSD%0.1530號(hào)峰現(xiàn)對(duì)保留時(shí)間1.837RSD%0.2031號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間1.873RSD%0.1932號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間1.884RSD%0.2033號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間1.906RSD%0.2434號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間1.917RSD%0.2435號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間1.935RSD%0.2536號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間1.971RSD%0.3437號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間1.996RSD%0.3238號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間2.127RSD%0.3339號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間2.135RSD%0.3140號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間2.225RSD%0.4041號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間2.237RSD%0.3942號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間2.248RSD%0.4043號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間2.283RSD%0.3944號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間2.294RSD%0.4145號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間2.316RSD%0.4446號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間2.340RSD%0.3847號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間2.668RSD%0.3848號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間2.683RSD%0.5949號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間2.887RSD%0.62其中單峰面積超過總峰面積5%的吸收峰有11個(gè)，分別為1號(hào)峰，相對(duì)保留時(shí)間0.386，RSD%0.442號(hào)峰，相對(duì)保留時(shí)間0.429，RSD%0.347號(hào)峰，相對(duì)保留時(shí)間0.803，RSD%0.1610號(hào)峰，相對(duì)保留時(shí)間1.067，RSD%0.1111號(hào)峰，相對(duì)保留時(shí)間1.158，RSD%0.1718號(hào)峰，相對(duì)保留時(shí)間1.384，RSD%1.1619號(hào)峰，相對(duì)保留時(shí)間1.498，RSD%0.2720號(hào)峰，相對(duì)保留時(shí)間1.512，RSD%0.2722號(hào)峰，相對(duì)保留時(shí)間1.559，RSD%0.2627號(hào)峰，相對(duì)保留時(shí)間1.748，RSD%0.1046號(hào)峰，相對(duì)保留時(shí)間2.340，RSD%0.58通過NIST質(zhì)譜圖檢索以及査閱文獻(xiàn)資料共鑒定出主要化學(xué)成分27個(gè)，詳見表1。表l主要化學(xué)成分鑒定表<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>的相對(duì)保留時(shí)間與相對(duì)峰面積，以相對(duì)保留時(shí)間與相對(duì)峰面積的平均失量作為對(duì)照指紋圖譜數(shù)據(jù)；以相對(duì)峰面積的平均失量作為對(duì)照，通過夾角余弦與相關(guān)系數(shù)兩種算法計(jì)算各批次樣品指紋圖譜與對(duì)照指紋圖譜間的相似度，各批次樣品指紋圖譜與對(duì)照指紋圖譜具有良好的相似性。具有特征性的11個(gè)共有峰，1號(hào)峰、2號(hào)峰、7號(hào)峰、IO號(hào)峰、ll號(hào)峰、18號(hào)峰、19號(hào)峰、20號(hào)峰、22號(hào)峰、27號(hào)峰、46號(hào)峰進(jìn)行峰面積的比值比較；其中1號(hào)峰、2號(hào)峰、7號(hào)峰、IO號(hào)峰來(lái)源于紫蘇葉油，ll號(hào)峰、18號(hào)峰、19號(hào)峰、20號(hào)峰、22號(hào)峰、27號(hào)峰、46號(hào)峰來(lái)源于廣藿香油。單峰面積占總峰面積大于5%，而小于10%的共有峰為18號(hào)峰、27號(hào)峰、46號(hào)峰；IO號(hào)峰單峰面積占總峰面積在5%附近，其它各峰單峰面積占總峰面積均小于5%。供試品圖譜中各特征性共有峰面積的比值與指紋圖譜中各共有峰面積的比值比較，18號(hào)峰、27號(hào)峰(單峰面積占總峰面積在5%10%)其差值不大于±30%;10號(hào)峰(單峰面積占總峰面積在5%附近)其差值不大于±50%;1號(hào)峰、7號(hào)峰、11號(hào)峰、19號(hào)峰、20號(hào)峰、22號(hào)峰(單峰面積占總峰面積在1%3%)，其差值不大于±80%;2號(hào)峰(單峰面積占總峰面積小于1%)，其差值不大于土100%。相似度確定采用相同方法測(cè)定，計(jì)算相似度，相似度90%100%范圍內(nèi)，確認(rèn)為相同指紋圖譜。本發(fā)明優(yōu)點(diǎn)如下-(1)以藿香正氣軟膠囊中主要有效成分紫蘇油和廣藿香油為指標(biāo)建立起來(lái)的氣質(zhì)聯(lián)用指紋圖譜，代表了藿香正氣軟膠囊的藥理活性，能有效地表征藿香正氣軟膠囊的質(zhì)量。從而實(shí)現(xiàn)對(duì)藿香正氣軟膠囊的化學(xué)成分進(jìn)行檢測(cè)，對(duì)中藥質(zhì)量進(jìn)行全面控制。(2)將藿香正氣軟膠囊中揮發(fā)性組分的指紋圖形作為一個(gè)整體看待，注重各個(gè)構(gòu)成指紋特征峰的前后順序和相互關(guān)系，注重整體特征，避免了因只測(cè)定一、二個(gè)化學(xué)成分而判定藿香正氣軟膠囊整體質(zhì)量的片面性，同時(shí)也防止為少數(shù)成分合格而人為處理的可能。本發(fā)明為完整、準(zhǔn)確評(píng)價(jià)藿香正氣軟膠囊的質(zhì)量提供了新的標(biāo)準(zhǔn)，為有效控制藿香正氣軟膠囊的質(zhì)量做出貢獻(xiàn)。(3)本發(fā)明具有穩(wěn)定、精密度高、重現(xiàn)性好的特點(diǎn)。本發(fā)明將指紋圖譜技術(shù)與氣質(zhì)聯(lián)用儀器相結(jié)合，對(duì)測(cè)定組分進(jìn)行定性定量的測(cè)定，其測(cè)定方法可作為藿香正氣軟膠囊成分測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜，以鑒別其有效成分。下面結(jié)合較佳實(shí)施方式和附圖對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的解釋說(shuō)明，對(duì)本發(fā)明不構(gòu)成限制。對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言，根據(jù)本發(fā)明所公開的技術(shù)內(nèi)容，本領(lǐng)域技術(shù)人員將很清楚本發(fā)明的其它實(shí)施方案，本發(fā)明實(shí)施例僅作為示例。在不違反本發(fā)明主旨及范圍的情況下，可對(duì)本發(fā)明進(jìn)行各種改變和改進(jìn)，例如，使用不同的檢測(cè)儀器所獲得的測(cè)定結(jié)果可能有所不同，但只要使用本發(fā)明所述的質(zhì)量控制方法，均在本發(fā)明保護(hù)范圍之內(nèi)。圖1為10批次樣品譜圖比較，譜圖基本一致，表明有效成分含量基本一致。圖2為對(duì)照指紋圖譜。圖3為全部18批藿香正氣軟膠囊供試品聚類分析結(jié)果圖。圖4為實(shí)施例2中3號(hào)樣品(批號(hào)為F292021)的指紋圖譜。圖5為實(shí)施例2中5號(hào)樣品(批號(hào)為2920098)的指紋圖譜。圖6為實(shí)施例2中8號(hào)樣品(批號(hào)為D292014)的指紋圖譜。具體實(shí)施例方式以下實(shí)施例使用的儀器和試劑1.島津氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(GCMS-QP2010)及GCMSsolutions工作站DB-5MS柱(30mX0.25mmX0.25um),安捷倫科技有限公司DB-17MS柱(30mX0.25腿X0.25nm)，安捷倫科技有限公司2.正已烷(分析純，天津市北方天醫(yī)化學(xué)試劑廠)正十四烷(天津市軒昂科工貿(mào)有限公司)乙酸乙酯(分析純，天津市北方天醫(yī)化學(xué)試劑廠)環(huán)已酮(天津市科密歐化學(xué)試劑開發(fā)中心)3.供試品2005年、2006年、2007年天津市中新藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司達(dá)仁堂制藥廠生產(chǎn)的藿香正氣軟膠囊樣品實(shí)施例l:藿香正氣軟膠囊指紋圖譜的測(cè)定一.供試品的制備分別取不同批次藿香正氣軟膠囊10批次(批號(hào)分別為F292004、F292007、F292021、F2920076、F2920098、F2920159、E292003、D292014、D291015、E291656，順次編號(hào)為110)，分別取每批次藿香正氣軟膠囊內(nèi)容物約10g，精密稱定，加正已垸2ml，緩緩加熱至沸，并保持微沸3小時(shí)，放冷。將正已垸液轉(zhuǎn)入10ml具塞刻度試管中，用少量正己烷清洗提取器23次，清洗液并入刻度試管中，精密加入?yún)⒄瘴锶芤?內(nèi)標(biāo))lml，再用正已垸定容至5ml，混勻，即得。二.參照物溶液的制備精密量取正十四垸適量，加正已烷制成每lml含15mg的溶液，作為參照物溶液(內(nèi)標(biāo))。三.測(cè)定采用氣相色譜一質(zhì)譜聯(lián)用法進(jìn)行測(cè)定色譜條件及系統(tǒng)適用性試驗(yàn)彈性石英毛細(xì)管柱(柱長(zhǎng)30m，內(nèi)徑0.25111111，膜厚度0.25pm)DB-17MS(交聯(lián)50%苯基甲基聚硅氧烷為固定相)；程序溫度初始溫度60°C，以每分鐘4'C的速率升溫至ll(TC，再以每分鐘rC的速率升溫至120°C，再以每分鐘5'C的速率升溫至180°C，最后以每分鐘8'C的速率升溫至25(TC，并保持20min;氣化室溫度為25(TC，接口溫度為250'C，離子源(EI)溫度為200°C;分流比為50:1;檢測(cè)器電壓為1.2kV，質(zhì)荷比范圍為33500。測(cè)定方法吸取供試品溶液llU，注入氣相色譜一質(zhì)譜聯(lián)用儀，測(cè)定，記錄l小時(shí)色譜圖。供試品指紋圖譜中正十四烷參照物峰為S峰，計(jì)算相對(duì)保留時(shí)間；廣藿香醇峰面積作為l,計(jì)算峰面積相對(duì)比值。四.結(jié)果10批次樣品的數(shù)據(jù)見表2和表3，相似度均》0.98，圖譜參見圖1和圖2。表2各共有峰相對(duì)保留時(shí)間<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>462.3462.3292.3392.3452.3452.3452.3492.3452.3272.3272.3400.3759472.6792.6502,6692.6772.6772.6772.6822.6782.6482.6482.6680.5313482.6952.6632.6842.6942.6932.6922.6982.6942.6602.6612.6830.5866492.9022.8652.8882.8992,8982.8972.9042.8992.8612.8612.8870.6210表3相對(duì)峰面積與相似度評(píng)價(jià)結(jié)果峰號(hào)樣品號(hào)賄離離)1234567891010.04880.06780.11440.09880.04200.09650.09870.08470.07880.08970.082020,01890.03080.05240.04650,02590.04610.04670.04060.02960.03410.037230.00530.00600.00830.00680.00320.00710.00720.00600.00600.00650.006240.05350.07150.01850.01750.05850.01800.01650.01630.03410.03910.034450.02560.02290.01830.01640.01970.01560.01650.01580.00970.01100.017160.03810.05700.00750.00730.04360.00800.00730.00500.02630.03190.023270.11550.16420.14040.簡(jiǎn)0.13230,12410.12310.12550.畫0.12560.128880.00770.01220.01410.01460,01080.01390.01330.01310.01340.01550,012991.00001.00001.00001.00001.00001.00001.00001.00001.00001.00001.0000100,22720.30610.22820.22190.22320.21810.21420.22200.22010.24300.2324110.12470,17540.13420.12820.12870.13670.13300.13210.16320.08820.1344120.01100.00560.01210.01030.00760.01460.01210.01320.00700.00670.0100130.01550.01180.02200.01730.01210.02360.02180.02090.01500.00810.0168140.04300.04960.04370.03880.04730.04750.04080.04220.05290.05150.0457150.00600,01200.02560.02320.00960.02410.02310.01900.00190.00200.0147160,07060.07140.07270.06990.06550.07300.06750,06640.05720.06120.0676170.醒0,12190.14220.12670,10900.13610.13580.13850.10390.11340.1244180.22300.29920.30470.28460.27380.29920.29260.29240.25910.29850.2827190.11990.17160.14680.14220.13790.15300.14910.14720.13940.16460.1472200.09430.12290.10940.10460.腦0.11010.10930.鹿30.10270.10590.1071210.02760,02580.03030.02870,02440.03110.03110.03180.02110.02360.0276220.06500.09320.06860.06660.06430.07130.07060.06730.07820.04970.0695230.06620.10360.07430.06440.06990.08330.07530.07220.13660.13400.0880<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>一.供試品的制備分別取不同批次藿香正氣軟膠囊8批次(批號(hào)分別為F292004、F292007、F292021、F2920076、F2920098、F2920159、E292003、D292014，樣品編號(hào)順次為18)，分別取每批次藿香正氣軟膠囊內(nèi)容物約10g，精密稱定，加乙酸乙酯2ml，緩緩加熱至沸，并保持微沸3小時(shí)，放冷。將乙酸乙酯液轉(zhuǎn)入10ml具塞刻度試管中，用少量乙酸乙酯清洗提取器23次，清洗液并入刻度試管中，精密加入?yún)⒄瘴锶芤?內(nèi)標(biāo))lml，再用乙酸乙酯定容至5ml，混勻，即得。二.參照物溶液的制備精密量取環(huán)己酮適量，加乙酸乙酯制成每lml含15mg的溶液，作為參照物溶液(內(nèi)標(biāo))三.測(cè)定采用氣相色譜一質(zhì)譜聯(lián)用法進(jìn)行測(cè)定色譜條件及系統(tǒng)適用性試驗(yàn)彈性石英毛細(xì)管柱(柱長(zhǎng)30m，內(nèi)徑0.25mm，膜厚度0.25pm)DB-5MS(交聯(lián)70%苯基甲基聚硅氧烷為固定相)；程序溫度初始溫度60°C，以每分鐘4。C的速率升溫至ll(TC，再以每分鐘1。C的速率升溫至120°C，再以每分鐘5。C的速率升溫至18(TC，最后以每分鐘8'C的速率升溫至25(TC，并保持20min;氣化室溫度為250。C，接口溫度為250。C，離子源(EI)溫度為200°C;分流比為50:1;檢測(cè)器電壓為1.2kV，質(zhì)荷比范圍為33500。測(cè)定方法吸取供試品溶液lyl，注入氣相色譜一質(zhì)譜聯(lián)用儀，測(cè)定，記錄l小時(shí)色譜圖。供試品指紋圖譜中環(huán)己烷參照物峰為S峰，計(jì)算相對(duì)保留時(shí)間；廣藿香醇峰面積作為l，計(jì)算峰面積相對(duì)比值。四.結(jié)果1.共有峰相對(duì)保留時(shí)間考察將8批藿香正氣軟膠囊供試品圖譜與指紋圖譜共有峰相對(duì)保留時(shí)間進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，結(jié)果見表l。結(jié)果表明，共有指紋峰相對(duì)保留時(shí)間一致，RSD<3%。表4共有峰相對(duì)保留時(shí)間考察<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table>2.峰面積相對(duì)比值比較將8批藿香正氣軟膠囊供試品圖譜與指紋圖譜特征指紋峰面積相對(duì)比值進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，結(jié)果見表5。結(jié)果表明，除批號(hào)為2920098的供試品圖譜(5號(hào)樣品)中2號(hào)峰(差值為156%〉100%)、批號(hào)為E292003的供試品圖譜(7號(hào)樣品)中7號(hào)峰(差值為-90%>-80%)超出藿香正氣軟膠囊指紋圖譜檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)(草案)中規(guī)定的范圍要求外，其它批次供試品圖譜中各峰均符合要求。表5峰面積相對(duì)比值比較<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table>4.相似度計(jì)算以藿香正氣軟膠囊指紋圖譜檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)(草案)中指紋圖譜共有模式(平均失量)為參照，通過相關(guān)系數(shù)與夾角余弦兩種算法進(jìn)行相似度計(jì)算。8批藿香正氣軟膠囊供試品檢測(cè)數(shù)據(jù)及相似度計(jì)算結(jié)果見表7、表8，結(jié)果表明，批號(hào)為F292021、2920098、D292014三批供試品圖譜與指紋圖譜共有模式(平均失量)間的相似度<0.9,不符合要求；其它各批供試品圖譜與指紋圖譜間的相似度〉0.9，均符合要求。表78批藿香正氣軟膠囊供試品檢測(cè)數(shù)據(jù)峰號(hào)樣品號(hào)124678指紋圖譜10.09440.08800.05690.08800.08760.07250.02840.01620.082020.10080.08750.05820.04450.08660.02960.01830.05830.037230細(xì)70.01090.00450.00630廁50.00540.01100.00270細(xì)240.07240.06360.04370.01680.01710.03280.01960細(xì)90.03440.04710.04820,02070.01680.00980.00980.04570.01620.017160.04660.04020.03520扁30.01560.02540.00770.01460.023270.22550.18610.13750.13020.09790,10450.01230.07150.128880.02980.02460,02140,01520.02310.01300.00540.02390.01299(S)1.0000l扁Ol扁Ol細(xì)Ol細(xì)Ol細(xì)Ol細(xì)Ol細(xì)Ol細(xì)O100.50520.46630.24240.22370.21750.21000.27650.23510.2324110.22870.23730.12730.13100.13090.19510.15970.14640.1344120.01090.00980.00870.01260扁20.00780.00890細(xì)30.0100130.01670.01260.01200.02130.01150.01550.01770.02560.0168140攝90.08090.03620.03790錢70.05240.08540.05870.0457150屈40.0272O.Ol卯0.02540.01720.00440.00000.01510.0147160.11870.11870.06480.07230.05250.05110.05910.05560.0676170,20200.20610,09610.13660.09700.10360.15550.10560.1244180.45230.45280.22220.28760.26950.24310.29970.27330.2827190.23940.23560.12360.14400.13850.13230.14170.14380.1472200.18020.18450.09620.10620.09790.10200.10950.10400.1071210.03540.03810.02100.03200.01900.02120.02510.01920.0276220.11990.12890.06650.06940.06440扁80.07760.07220扁5230.11010.11440.06360.06620.08330.12960.14990.10640.0880240.22290.21260.11040.07440.04250.24800.32770.25880.1621250.05420.06410.02640.02590.02190.02520.04280.02570.0270260.12230.12370.07860.07560馬20.08340.08490.07470細(xì)5270.66220.68580.37930.38380.37030.30910.36030.37450.3892280.03150.03140.01830.04940.01600.02130.01820.01620.0414290緒10扁20.00970扁70.01190.00%0.01650.01550.0104<table>tableseeoriginaldocumentpage24</column></row><table>聚類合并的距離尺度上，可以看出15號(hào)樣品與其它各批樣品的差距最大，然后是13、18號(hào)樣品與其它各批樣品存在差距。結(jié)果表明，聚類分析結(jié)果與相似度計(jì)算結(jié)果一致，13號(hào)樣品(批號(hào)為F292021)、15號(hào)樣品(批號(hào)為2920098)、18號(hào)樣品(批號(hào)為D292014)與其它各批樣品存在差異。6.圖譜考察為了找出差異存在的原因，將3號(hào)樣品(批號(hào)為F292021，圖4)、5號(hào)樣品(批號(hào)為2920098,圖5、8號(hào)樣品(批號(hào)為D292014，圖6)的供試品圖譜與藿香正氣軟膠囊指紋圖譜檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)(草案)中對(duì)照指紋圖譜(代表性樣品，批號(hào)為2920062)進(jìn)行圖譜比較分析。結(jié)果表明，3號(hào)樣品(批號(hào)為F292021)、5號(hào)樣品(批號(hào)為2920098)、8號(hào)樣品(批號(hào)為D292014)的供試品圖譜與藿香正氣軟膠囊指紋圖譜檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)(草案)中對(duì)照指紋圖譜(代表性樣品，批號(hào)為2920062)間的差異，主要來(lái)源于圖譜中42號(hào)峰、44號(hào)峰與46號(hào)峰(廣藿香醇)間的相對(duì)峰值比。7.相似度再計(jì)算為了考察42號(hào)峰、44號(hào)峰對(duì)相似度影響的大小程度，將42號(hào)峰、44號(hào)峰剔除，進(jìn)行相似度再計(jì)算(見表9、表IO)。結(jié)果表明，通過剔除42號(hào)峰、44號(hào)峰，相關(guān)系數(shù)法與夾角余弦法兩種算法計(jì)算，相似度結(jié)果均>0.90;結(jié)果證明，42號(hào)峰、44號(hào)峰是造成批號(hào)為F292021、2920098、D292014三批供試品圖譜與指紋圖譜間存在差異的主要因素。表9相似矩陣(相關(guān)系數(shù)法)批號(hào)F2920212920098D292014指紋圖譜F2920211扁0.9780.9760.98129200980.9781扁0.9410.933D2920140.9760.9411細(xì)0.977指紋圖譜0.9810.9330.9771.000表10相似矩陣(夾角余弦法)批號(hào)F2920212920098D292014指紋圖譜F2920211細(xì)0.9840.9820.98629200980.9841.0000.9570.951D2920140.9820.9571細(xì)0.983指紋圖譜0.9860.9510.9831細(xì)8.譜峰歸屬經(jīng)譜庫(kù)檢索，42號(hào)峰為蒼術(shù)醇(Hinesol)、44號(hào)峰為P-桉葉油醇(beta-Eudesmol)。蒼術(shù)醇與e-桉葉油醇是蒼術(shù)根莖中含有的主要化學(xué)成份，因此，認(rèn)為42號(hào)峰、44號(hào)峰來(lái)源于藿香正氣軟膠囊處方中的藥味一蒼術(shù)。五.結(jié)論通過指紋圖譜分析、相似度計(jì)算、聚類分析，證明批號(hào)為F292021、2920098、D292014三批供試品圖譜與指紋圖譜間存在差異。通過圖譜考察、相似度再計(jì)算、譜峰歸屬，發(fā)現(xiàn)造成批號(hào)為F292021、2920098、D292014三批供試品圖譜與指紋圖譜間存在差異的主要因素為來(lái)源于蒼術(shù)中的主要化學(xué)成份蒼術(shù)醇與e-桉葉油醇。介于以上分析結(jié)果，建議在生產(chǎn)過程中應(yīng)該對(duì)蒼術(shù)的質(zhì)量進(jìn)行控制。權(quán)利要求1.一種藿香正氣軟膠囊指紋圖譜的測(cè)定方法，其特征在于包括以下步驟(a)供試品的制備取藿香正氣軟膠囊內(nèi)容物，置容量瓶中，加有機(jī)溶劑溶解，定容，即為供試品；(b)參照物溶液的制備精密量取有機(jī)溶劑，作為參照物溶液(內(nèi)標(biāo))；(c)色譜條件色譜柱為彈性石英毛細(xì)管柱，聚硅氧烷柱為固定相；程序溫度初始溫度40～100℃，以每分鐘2～6℃的速率升溫至230～280℃，氣化室溫度為230～280℃，接口溫度為230～280℃，質(zhì)荷比范圍為10～1000；(d)測(cè)定方法采用氣質(zhì)聯(lián)用測(cè)定；吸取供試品溶液，注入氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀，測(cè)定，記錄1小時(shí)色譜圖。廣藿香醇峰面積作為1，計(jì)算峰面積相對(duì)比值。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藿香正氣軟膠囊指紋圖譜的測(cè)定方法，其特征在于所述的(a)供試品的制備中有機(jī)溶劑選自石油醚、正己烷、乙醚、乙酸乙酯、苯、甲苯或二甲苯。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藿香正氣軟膠囊指紋圖譜的測(cè)定方法，其特征在于所述的(b)參照物溶液的制備中有機(jī)溶劑選環(huán)已酮、正十二垸、正十三烷、正十四烷、正十六垸或正十八烷中的一種。4.一種藿香正氣軟膠囊指紋圖譜的測(cè)定方法，其特征在于包括以下步驟(a)供試品的制備取藿香正氣軟膠囊內(nèi)容物約10g，精密稱定，加正已垸2ml，緩緩加熱至沸，并保持微沸3小時(shí)，放冷；再用正已垸定容至5ml，混勻，即為供試品；(b)參照物溶液的制備精密量取正十四垸適量，加正已垸制成每lml含15mg的溶液，作為參照物溶液；(c)色譜條件色譜柱為彈性石英毛細(xì)管柱，交聯(lián)50%苯基甲基聚硅氧烷柱為固定相；程序溫度初始溫度6(Tc，以每分鐘4'c的速率升溫至iior，再以每分鐘rc的速率升溫至12(TC，再以每分鐘5'C的速率升溫至18(TC，最后以每分鐘8"C的速率升溫至25(TC，并保持20min;氣化室溫度為250。C，接口溫度為250。C，離子源(EI)溫度為20(TC;分流比為50:1;檢測(cè)器電壓為1.2kV,質(zhì)荷比范圍為33500;(d)測(cè)定方法采用氣質(zhì)聯(lián)用測(cè)定；吸取供試品溶液，注入氣相色譜一質(zhì)譜聯(lián)用儀，測(cè)定，記錄l小時(shí)色譜圖；供試品指紋圖譜中正十四垸參照物峰為S峰，計(jì)算相對(duì)保留時(shí)間；廣藿香醇峰面積作為l，計(jì)算峰面積相對(duì)比值。5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的藿香正氣軟膠囊的指紋圖譜測(cè)定方法，其特征在于所述藿香正氣軟膠囊的指紋圖譜中有49個(gè)特征峰，其中單峰面積超過總峰面積5%的吸收峰有11個(gè)，分別為1號(hào)峰，相對(duì)保留時(shí)間0.386，RSD%0.442號(hào)峰，相對(duì)保留時(shí)間0.429，RSD%0.347號(hào)峰，相對(duì)保留時(shí)間0.803，RSD%0.16IO號(hào)峰，相對(duì)保留時(shí)間1.067，RSD%0.11ll號(hào)峰，相對(duì)保留時(shí)間1.158，RSD%0.1718號(hào)峰，相對(duì)保留時(shí)間1.384，RSD%1.1619號(hào)峰，相對(duì)保留時(shí)間1.498，RSD%0.2720號(hào)峰，相對(duì)保留時(shí)間1.512，RSD%0.2722號(hào)峰，相對(duì)保留時(shí)間1.559，RSD%0.2627號(hào)峰，相對(duì)保留時(shí)間1.748，RSD%0.1046號(hào)峰，相對(duì)保留時(shí)間2.340，RSD%0.58。6.—種藿香正氣軟膠囊的質(zhì)量控制方法，其特征在于將藿香正氣軟膠囊采用權(quán)利要求4所述的測(cè)定方法測(cè)定，將待測(cè)產(chǎn)品指紋圖譜與所述指紋圖譜進(jìn)行比對(duì)，相似度在90100%，認(rèn)為所述待測(cè)產(chǎn)品的質(zhì)量合格。7.—種藿香正氣軟膠囊，其特征在于，將其采用權(quán)利要求4所述的測(cè)定方法測(cè)定，所得指紋圖譜有有49個(gè)特征峰，分別為-1號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間0.386RSD%0.442號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間0.429RSD%0.343號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間0.461RSD%0.394號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間0.565RSD%0.185號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間0.576RSD%0.286號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間0.791RSD%0.137號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間0.803RSD%0.168號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間0.847RSD%0.1010號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間1.067RSD%0.1111號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間1.158RSD%0.1712號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間1.175RSD%0.1913號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間1.212RSD%0.1914號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間1.221RSD%0.1915號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間1.286RSD%0.2316號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間1.308RSD%0.1417號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間1.348RSD%0.2218號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間1.384RSD%0.1619號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間1.498RSD%0.2720號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間1.512RSD%0.2721號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間1.526RSD%0.2622號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間1.559RSD%0.2623號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間1.604RSD%0.3924號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間1.682RSD%0.1225號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間1.695RSD%0.1026號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間1.709RSD°/。0.0927號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間1.748RSD%0.1028號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間1.802RSD%0.1829號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間1.822RSD%0.1530號(hào)峰現(xiàn)對(duì)保留時(shí)間1.837RSD%0.2031號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間1.873RSD%0.1932號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間1.884RSD%0.2033號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間1.906RSD%0.2434號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間L917RSD%0.2435號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間1.935RSD%0.2536號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間1.971RSD%0.3437號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間1.996RSD%0.3238號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間2.127RSD%0.3339號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間2.135RSD%0.3140號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間2.225RSD%0.4041號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間2.237RSD%0.3942號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間2.248RSD%0.4043號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間2.283RSD%0.3944號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間2.294RSD%0.4145號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間2.316RSD%0.4446號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間2.340RSD%0.3847號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間2.668RSD%0.3848號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間2.683RSD%0.5949號(hào)峰相對(duì)保留時(shí)間2.887RSD%0.62。全文摘要本發(fā)明涉及一種藿香正氣軟膠囊指紋圖譜的測(cè)定方法，屬于中藥現(xiàn)代化領(lǐng)域。藿香正氣軟膠囊指紋圖譜的測(cè)定方法，包括供試品的制備；參照物溶液的制備；色譜條件色譜柱為彈性石英毛細(xì)管柱，聚硅氧烷柱為固定相；程序溫度初始溫度40～100℃，以每分鐘2～6℃的速率升溫至230～280℃，氣化室溫度為230～280℃，接口溫度為230～280℃，質(zhì)荷比范圍為10～1000；測(cè)定方法采用氣質(zhì)聯(lián)用測(cè)定，記錄1小時(shí)色譜圖。廣藿香醇峰面積作為1，計(jì)算峰面積相對(duì)比值。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是將指紋圖譜技術(shù)與氣質(zhì)聯(lián)用儀器相結(jié)合，進(jìn)行定性定量的測(cè)定，可作為藿香正氣軟膠囊成分測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜，以鑒別其有效成分；方法穩(wěn)定、精密度高、重現(xiàn)性好。文檔編號(hào)G01N30/78GK101183091SQ20071006037公開日2008年5月21日申請(qǐng)日期2007年12月18日優(yōu)先權(quán)日2007年12月18日發(fā)明者彤劉,劉志青,琳孫,孫寶珍,江永萍,勤潘,石世學(xué),輝羅,金兆祥申請(qǐng)人:天津中新藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司達(dá)仁堂制藥廠