專利名稱：：一種檢測乳和乳制品中重金屬鉛含量的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種檢測方法，特別涉及一種檢測乳和乳制品中重金屬鉛含量的方法。屬于化學(xué)成份檢測的
技術(shù)領(lǐng)域：
。
背景技術(shù)：
：鉛是已知毒性最大、累積性極強(qiáng)的重金屬之一。當(dāng)鉛長期蓄積于人體時，會嚴(yán)重危害神經(jīng)、造血系統(tǒng)及消化系統(tǒng)，對嬰兒的智力和身體發(fā)育影響尤其嚴(yán)重。已被列為食品衛(wèi)生監(jiān)督的重要元素。目前微量鉛的測定方法很多，氰化物發(fā)生-原子熒光光譜法測鉛是近年發(fā)展較快的一種新的分析技術(shù)。氫化物-原子熒光光譜法將樣品加酸消解后，在酸性介質(zhì)中，樣品中的鉛與硼氫化鉀反應(yīng)生成鉛的氫化物。以氬氣為載氣，將氫化物導(dǎo)入電熱石英原子化器中原子化，在鉛空心陰極燈照射下，基態(tài)鉛原子被激發(fā)至高能態(tài)，在去活化回到基態(tài)時，發(fā)射出特征波長的熒光，其熒光強(qiáng)度與鉛含量成正比，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)系列進(jìn)行定量。現(xiàn)有的原子熒光光譜法測定乳中鉛的方法中鐵氰化鉀直接加入樣品溶液里，穩(wěn)定性差，精密度低。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種檢測乳和乳制品中重金屬鉛含量的方法，其穩(wěn)定性好，精密度較高。本發(fā)明提供了一種檢測乳和乳制品中重金屬鉛含量的方法，包括如下步驟1)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線制備多個不同濃度的鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液，并對其分別檢測，根據(jù)所測得的數(shù)據(jù)，繪制鉛含量與檢測結(jié)果之間的標(biāo)準(zhǔn)曲線；2)制備樣品并用配制好的還原劑和載流液上機(jī)檢測，得到檢測結(jié)果；3)將步驟2)中的檢測結(jié)果與所述的標(biāo)準(zhǔn)曲線比對，即得到樣品中鉛的含量;4)上述步驟中所使用的檢測儀器為原子熒光光度計(jì)。優(yōu)選的，上述步驟l)中的鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為0.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0ng/mL。上述標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制方法為加入鉛標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液(100ng/mL)0.0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5mL，用少量純水稀釋后，各加入0.5mL鹽酸和0.5mL10g/L草酸溶液，用純水準(zhǔn)確定容至25mL，搖勻，放置30min。更優(yōu)選的，步驟2)中樣品的制備方法包括以下步驟a)稱取樣品于微波消解管中，加入硝酸，在微波消解爐消解完全后加水，在電熱板上趕酸；趕酸3-4次。b)趕酸完全后用純水將樣品洗入容量瓶中，定容，搖勻；c)根據(jù)樣品反應(yīng)后廢液酸度，用純水稀釋樣液，放置30min;上述步驟c)中可用純水把試樣液稀釋成合適濃度使反應(yīng)后的廢液pH值控制在8-9。本發(fā)明中，步驟2)中的還原劑優(yōu)選由以下成分組成氫氧化鈉(或氫氧化鉀)5g/L、硼氫化鉀20-40g/L、鐵氰化鉀15-25g/L,更優(yōu)選的，硼氫化鉀的濃度為20g/L，鐵氰化鉀的濃度為15g/L。其制備方法為先溶解氫氧化鈉，再溶解硼氫化鉀，最后溶解鐵氰化鉀后，用純水溶解并定容。本發(fā)明中，步驟2)中的載流液優(yōu)選是2M的鹽酸(v/v)。本發(fā)明中的原子熒光光度計(jì)檢測參數(shù)優(yōu)選為爐高為6mm時，負(fù)高壓220V-230V，燈電流60-65mA，載氣和屏蔽氣為氬氣，流量分別為400mL/min和1000mL/min。本發(fā)明的檢測乳和乳制品中重金屬鉛含量的方法把鐵氰化鉀加入到還原劑里，控制反應(yīng)溶液的酸度，檢出限為0.1106^g/L、回收率為95%-105%、相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.6%，針對于現(xiàn)有方法，其精密度明顯提高。并且，本發(fā)明的檢測參數(shù)下，靈敏度高、儀器價格低廉，適合用于大量分析乳和乳制品中鉛的含量。圖1顯示的是本發(fā)明的一個實(shí)施例中爐高與熒光強(qiáng)度的關(guān)系；圖2顯示的是本發(fā)明的一個實(shí)施例中鐵氰化鉀濃度與熒光強(qiáng)度的關(guān)系；圖3顯示的是本發(fā)明的一個實(shí)施例中硼氫化鉀濃度與熒光強(qiáng)度的關(guān)系；圖4顯示的是本發(fā)明的一個實(shí)施例中鹽酸加入量與熒光強(qiáng)度的關(guān)系；圖5顯示的是本發(fā)明的一個實(shí)施例中草酸加入量與熒光強(qiáng)度的關(guān)系；圖6顯示的是本發(fā)明的一個實(shí)施例中鉛標(biāo)準(zhǔn)曲線示意圖。具體實(shí)施方案下面將結(jié)合具體實(shí)施方案對本發(fā)明的方法做更詳細(xì)的說明。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，下述實(shí)施例均用于對本發(fā)明所要求保護(hù)的范圍進(jìn)行實(shí)例性的描述，以此概括本發(fā)明的各參數(shù)的相對范圍，因而不能將之理解為對本發(fā)明的一種具體限制。實(shí)施例1檢測參數(shù)的選擇及繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線l.實(shí)驗(yàn)步驟U儀器與試劑AFS-2202E型雙道原子熒光光度計(jì)(北京海光儀器公司)微波消解爐(美國CEM，MARSXPRESS)電熱板鉛標(biāo)準(zhǔn)儲備液1000|ig/mL，國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中心鉛標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液100ng/mL，精確吸取鉛標(biāo)準(zhǔn)儲備液，逐級稀釋至100ng/mL。草酸溶液(10g/L):稱取1.0g草酸，加入純水溶解定容至100mL，混勻。還原劑由氫氧化鈉1克，硼氫化鉀4克和鐵氰化鉀3克組成。先溶解氫氧化鈉，再溶解硼氫化鉀，最后溶解鐵氰化鉀，用純水溶解并定容至200mL，現(xiàn)用現(xiàn)配。上述氫氧化鈉可由氫氧化鉀代替。鹽酸(2%):吸取10mL鹽酸，用純水定容至500mL。硝酸、鹽酸優(yōu)級純。1.2儀器條件燈電流60mA;光電倍增管負(fù)高壓220V;原子化器高度6mm;載氣(氬氣)流量400mL/min;屏蔽氣(氬氣)流量1000mL/min;讀數(shù)時間IOS;延遲時間l.Os;測量方法標(biāo)準(zhǔn)曲線法；讀取方式峰面積；還原劑氫氧化鈉1克，硼氫化鉀4克，鐵氰化鉀3克，先溶解氫氧化鈉，再溶解硼氫化鉀，最后溶解鐵氰化鉀后,用純水溶解并定容至200mL，現(xiàn)用現(xiàn)配；掩蔽劑10^L草酸；載流液2%鹽酸。1.3標(biāo)準(zhǔn)工作曲線的繪制取25ml容量瓶6個，依次加入鉛標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液0.0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5mL(各相當(dāng)于鉛濃度O.O、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0ng/mL)，用少量純水稀釋后，各加入0.5mL鹽酸和0.5mL10g/L草酸溶液，用純水準(zhǔn)確定容至25mL，搖勻。放置30min后檢測。1.4樣品處理稱取0.5-1.0克乳或乳粉樣品，置于微波消解管中，加入10毫升硝酸，在微波消解爐消解完全后加20mL純水，在電熱板上趕酸3次。用純水洗入25mL容量瓶中，并準(zhǔn)確定容至25mL，搖勻。根據(jù)反應(yīng)后廢液酸度用純水稀釋，將PH值控制在8-9，大約稀釋5倍，放置30min后按上述工作條件進(jìn)行檢測。微波消解條件見表1。表l微波消解條件<table>complextableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>2.檢測條件的選擇2.1儀器工作參數(shù)的選擇實(shí)驗(yàn)2丄1爐高分別將爐高調(diào)至4、5、6、7、8mm測熒光強(qiáng)度，原子化器增高，即爐高小，熒光強(qiáng)度增大，過高時會出現(xiàn)嚴(yán)重干擾，背景噪音過大，原子化器過低，熒光強(qiáng)度低。圖1顯示的是爐高與熒光強(qiáng)度的實(shí)驗(yàn)結(jié)果曲線，爐高為6mm時，儀器靈敏度和穩(wěn)定性較好。2丄2負(fù)高壓隨著負(fù)高壓的增大，熒光強(qiáng)度也相應(yīng)增大，但噪音也相應(yīng)增大。圖2顯示的是鐵氰化鉀濃度與熒光強(qiáng)度的實(shí)驗(yàn)結(jié)果曲線；實(shí)驗(yàn)證明，選擇負(fù)高壓為220V-230V，熒光強(qiáng)度較為穩(wěn)定。2丄3燈電流隨著燈電流的增強(qiáng)，熒光強(qiáng)度增大，燈電流過低時不穩(wěn)定，過高時影響燈的使用壽命。實(shí)驗(yàn)證明，選擇燈電流60-65mA熒光強(qiáng)度較好。2丄4載氣(氬氣)、屏蔽氣(氬氣)流量載氣過大，相當(dāng)于稀釋樣品的濃度，使熒光強(qiáng)度減小。載氣過小時，火焰不穩(wěn)定。本實(shí)施例選擇載氣、屏蔽氣流量分別為400mL/min和1000mL/min。2.2鐵氫化鉀濃度的選擇鐵氰化鉀作為基體改進(jìn)劑，可以減少其它金屬所造成的干擾，通過比較濃度為0%、0.5%、1.0%、1.5%、2.0%、2.5%、3.0%的鐵氰化鉀溶液，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖2所示，發(fā)現(xiàn)1.5%-2.5%范圍內(nèi)時熒光強(qiáng)度穩(wěn)定。本實(shí)施例選擇加入鐵氰化鉀濃度為1.5%。2.3硼氫化鉀濃度的選擇通過實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)熒光強(qiáng)度隨還原劑硼氫化鉀濃度增大而增大，如圖3所示，硼氫化鉀濃度2.0%-4.0%范圍內(nèi)熒光強(qiáng)度趨于穩(wěn)定。本實(shí)施例優(yōu)選加入硼氫化鉀濃度為2%。2.4酸度的選擇鉛的氫化物生成反應(yīng)條件對酸度要求非?？量蹋蠓磻?yīng)后廢液的PH值范圍控制在8-9左右。如圖4所示，50mL體系中加入濃鹽酸量為0.5-1.0mL時熒光強(qiáng)度穩(wěn)定。優(yōu)選加入鹽酸量為l.OmL。2.5掩蔽劑草酸加入量的影響如圖5所示，實(shí)驗(yàn)表明，在50mL體系中10g/L草酸加入量0.5-1.5mL時熒光強(qiáng)度穩(wěn)定。優(yōu)選草酸加入量為1.0mL。2.6標(biāo)準(zhǔn)曲線及線形范圍工作參數(shù)儀器參數(shù)爐高為6mm，負(fù)高壓220V-230V，燈電流60-65mA，載氣和屏蔽氣為氬氣，流量分別為400mL/min和1000mL/min。對標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行檢測，繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，如圖6所示，相關(guān)系數(shù)為0.9996，回歸方程為1&79.27*0+18.912。經(jīng)試驗(yàn)測得鉛在0-100ng/mL范圍內(nèi)呈線性關(guān)系。2.7最低檢出限根據(jù)儀器給定的檢出限測定程序，連續(xù)測定標(biāo)準(zhǔn)空白溶液和標(biāo)準(zhǔn)系列的熒光信號，計(jì)算出此方法的檢出限為0.1106pg/L。2.8精密度考察按實(shí)驗(yàn)方法11次重復(fù)測量濃度為10.00pg/L鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液，計(jì)算出相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.6%。2.9加標(biāo)回收率實(shí)驗(yàn)采用加標(biāo)回收方法，稱取已知含量的樣品，分別加入三種不同濃度的鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液做回收率實(shí)驗(yàn)，檢測結(jié)果見表2。表2回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果<table>complextableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>在選定的最佳測定條件下，此方法檢出限為0.1106pg/L、回收率為95%-105%、相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.6%。表明本發(fā)明的方法是一種檢出限低、靈敏度高、儀器價格低廉，適用于分析乳和乳制品中鉛含量的方法。實(shí)施例2本發(fā)明與現(xiàn)有方法精密度對比實(shí)驗(yàn)按本發(fā)明與現(xiàn)有實(shí)驗(yàn)方法重復(fù)測量11次濃度為10.00pg/L鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液，計(jì)算其精密度，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表3。同時，以現(xiàn)有方法重復(fù)測量11次濃度為10.00pg/L鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液，計(jì)算其精密度，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表4。現(xiàn)有方法的步驟如下準(zhǔn)確吸取5.00毫升100ng/mL鉛標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液于50毫升容量瓶中，加入1.0mL鹽酸(1+1)、1.0mL10g/L草酸溶液、2.0mL100g/L鐵氰化鉀溶液，用純水準(zhǔn)確定容至50mL，混勻，配制成10.00pg/L鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液。用配制好的還原劑和載流液11次重復(fù)測量其熒光強(qiáng)度，儀器自動計(jì)算出精密度?，F(xiàn)有方法的檢測參數(shù)爐高8mm、負(fù)高壓323V、燈電流75mA、載氣(氬氣)流量800mL/min、屏蔽氣(氬氣)流量1000mL/min，還原劑稱取5.0g硼氫化鈉溶于500毫升2g/L氫氧化鈉溶液中，混勻，現(xiàn)用現(xiàn)配。表3本發(fā)明的方法精密度實(shí)驗(yàn)結(jié)果測定次數(shù)熒光強(qiáng)度相對標(biāo)準(zhǔn)偏差1439.9212439.2993433.5094439.2765436.3440.6%6434.456436.7398434,9269437.17110439.87111441.504表4現(xiàn)有方法精密度實(shí)驗(yàn)結(jié)果測定次數(shù)熒光強(qiáng)度相對標(biāo)準(zhǔn)偏差1414,6212417.516438.0624426.216429.5172.02%6428.2217424.2768420.3819438.06210420.21611439.162從以上檢測結(jié)果可以看出本發(fā)明方法比現(xiàn)有方法穩(wěn)定性好、精密度高。本本發(fā)明方法通過把鐵氰化鉀加入到還原劑里，控制反應(yīng)溶液的酸度，效果明顯。實(shí)施例3檢測條件采用實(shí)施例1所優(yōu)選的參數(shù)。實(shí)驗(yàn)步驟1)稱取0.5-1.0克樣品，酸酸乳、純牛奶于微波消解管中，加入10毫升硝酸，在微波消解爐消解完全后加20mL水在電熱板上趕酸3次。2)趕酸完全后用純水洗入25mL容量瓶中并準(zhǔn)確定容至25mL，搖勻。3)準(zhǔn)確吸取5.00毫升上述定容好的樣液于25mL容量瓶中，加入0.5mL10g/L草酸溶液，用純水定容至25毫升，放置30min。此時，試樣液反應(yīng)后廢液PH值在8-9范圍內(nèi)。4)還原劑的配制氫氧化鈉1克，硼氫化鉀4克，鐵氰化鉀3克，先溶解氫氧化鈉，再溶解硼氫化鉀，最后溶解鐵氰化鉀，用純水溶解并定容至200mL，現(xiàn)用現(xiàn)配。5)載流液的配制吸取10mL濃鹽酸，用純水定容至500mL，混勻。6)標(biāo)準(zhǔn)系列溶液的配制取25ml容量瓶6個，依次加入鉛標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液0.0、0.5、1,0、1.5、2.0、2.5ml(各相當(dāng)于鉛濃度0.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0、ng/mL)，用少量純水稀釋后，各加入0.5mL鹽酸和0.5mL10g/L草酸溶液，用純水準(zhǔn)確定容至25mL、搖勻。放置30min。7)用配制好的還原劑和載流液上機(jī)檢測。將檢測結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)曲線對比，得到各個樣品中鉛的含量。檢測結(jié)果如表5所示。表5檢測乳和乳制品鉛含量的結(jié)果<table>complextableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>本發(fā)明的檢測乳和乳制品中重金屬鉛含量的方法把鐵氰化鉀加入到還原劑里，控制反應(yīng)溶液的酸度，檢出限為0.1106ng/L、回收率為95%-105%、相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.6%，相比于現(xiàn)有方法，其精密度明顯提高。并且，本發(fā)明的檢測參數(shù)下，靈敏度高、儀器價格低廉，適合用于大量分析乳和乳制品中鉛的含量。權(quán)利要求1.一種檢測乳和乳制品中重金屬鉛含量的方法，包括如下步驟1)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線制備多個不同濃度的鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液，并對其分別檢測，根據(jù)所測得的數(shù)據(jù)，繪制鉛含量與檢測結(jié)果之間的標(biāo)準(zhǔn)曲線；2)制備樣品并用配制好的還原劑和載流液上機(jī)檢測，得到檢測結(jié)果；3)將步驟2)中的檢測結(jié)果與所述的標(biāo)準(zhǔn)曲線比對，即得到樣品中鉛的含量；4)上述步驟中所使用的檢測儀器為原子熒光光度計(jì)。2.如權(quán)利要求l所述的方法，其特征在于，所述步驟l)中的鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為0.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0ng/mL。3.如權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，所述用鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制方法為加入鉛標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液(100ng/mL)0.0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5mL，用少量純水稀釋后，各加入0.5mL鹽酸和0.5mL10g/L草酸溶液，用純水準(zhǔn)確定容至25mL，搖勻，放置30min。4.如權(quán)利要求l所述的方法，其特征在于，所述步驟2)中所述樣品的制備方法包括以下步驟a)稱取樣品于微波消解管中，加入硝酸，在微波消解爐消解完全后加水，在電熱板上趕酸；b)趕酸完全后用純水將樣品洗入容量瓶中，定容，搖勻；c)根據(jù)樣品反應(yīng)后廢液酸度，用純水稀釋樣品溶液，放置30min;5.如權(quán)利要求4所述的的方法，其特征在于，所述趕酸要進(jìn)行3-4次。6.如權(quán)利要求5所述的檢測乳和乳制品中重金屬鉛含量的方法，其特征在于，所述步驟c)中試樣液反應(yīng)后的廢液pH值控制在8-9。7.如權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，所述步驟c)中用純水把試樣液稀釋五倍。8.如權(quán)利要求l所述的檢測乳和乳制品中重金屬鉛含量的方法，其特征在于所述步驟2)中的還原劑由以下成分組成氫氧化鈉(或氫氧化鉀)5g/L、硼氫化鉀20-40g/L、鐵氰化鉀15-25g/L，其制備方法為先溶解氫氧化鈉，再溶解硼氫化鉀，最后溶解鐵氰化鉀后，用純水溶解并定容。9.如權(quán)利要求l所述的方法，其特征在于，所述步驟2)中的載流液是2%的鹽酸(v/v)。10.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述原子熒光光度計(jì)檢測參數(shù)為爐高為6mm時，負(fù)高壓220V-230V，燈電流60-65mA,載氣和屏蔽氣為氬氣，流量分別為400mL/min和1000mL/min。全文摘要本發(fā)明涉及一種檢測乳和乳制品中重金屬鉛含量的方法，包括如下步驟1)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線；2)制備樣品并用配制好的還原劑和載流液上機(jī)檢測，得到檢測結(jié)果；3)將步驟2)中的檢測結(jié)果與所述的標(biāo)準(zhǔn)曲線比對，即得到樣品中鉛的含量；4)上述步驟中所使用的檢測儀器為原子熒光光度計(jì)。本發(fā)明的方法對原子熒光光度計(jì)的工作條件及實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行優(yōu)化，在選定的最佳測定條件下，把鐵氰化鉀加入到還原劑里，控制反應(yīng)溶液的酸度。本方法檢出限低，靈敏度高，儀器價格低廉，適合用于分析乳和乳制品中鉛的含量。文檔編號G01N1/34GK101344483SQ200810132249公開日2009年1月14日申請日期2008年7月22日優(yōu)先權(quán)日2008年7月22日發(fā)明者娃高申請人:內(nèi)蒙古蒙牛乳業(yè)(集團(tuán))股份有限公司