專利名稱：：一種復(fù)生康制劑及其制備方法和質(zhì)量檢測方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及復(fù)方藥物制劑及其分析領(lǐng)域，特別涉及一種復(fù)生康制劑及其制備方法和質(zhì)量檢測方法。
背景技術(shù)：
：中國專利申請200410012693.2(公開號CN1557380A)中公開了一種抗癌中藥口服制劑的制備工藝。該口服制劑具有活血化瘀，健脾消積的功效；用于胃癌、肝癌，能增強放療、化療的療效，并能增強肌體免疫功能；能改善肝癌患者臨床癥狀。該專利產(chǎn)品的產(chǎn)品名為復(fù)生康，為全國獨家生產(chǎn)的純中藥抗惡性腫瘤藥物。所以，需要專門的制備方法和質(zhì)量檢測方法以保證其質(zhì)量。目前，中華人民共和國國家藥品監(jiān)督管理局發(fā)布了復(fù)生康膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)WS-10199(ZD-0199)-2002，(收載《國家中成藥標(biāo)準(zhǔn)匯編》(口腔、腫瘤、兒科分冊)第386-388頁)自2002年12月1日起試行。該標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定了復(fù)生康制劑的制備和檢測方法。但是，原廠家在生產(chǎn)實踐過程中，發(fā)現(xiàn)該方法仍有不甚嚴謹之處，需要進一步修改和優(yōu)化；所以，實際生產(chǎn)中需要新的制備方法和質(zhì)量檢測方法來保證復(fù)生康制劑的質(zhì)量。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種復(fù)生康制劑及其制備方法和質(zhì)量檢測方法；該制劑原料中含有蒲葵子、喜樹果、莪術(shù)、柴胡、絞股藍、香菇、黃芪、甘草，其重量份數(shù)比為300:275:125:125:125:90:125:40;制備方法為將黃芪進行粉碎成黃芪細粉，將莪術(shù)提取得到莪術(shù)揮發(fā)油和水溶液，將其他原料藥處理，并加入莪術(shù)水溶液和黃芪細粉得到干膏，將該干膏與莪術(shù)揮發(fā)油混勻后裝入膠囊即得成品。檢測方法所檢測項目為蒲葵子提取物鑒別對照檢測，喜樹堿鑒別對照檢測，莪術(shù)提取物鑒別對照檢測，黃芪甲甙鑒別對照檢測，喜樹堿含量對照檢測，內(nèi)容物形態(tài)觀察檢測；每0.38克復(fù)生康制劑中，含有喜樹果按喜樹堿C2oHwN204計，為0.09-0.20毫克。本發(fā)明的目的是通過以下的技術(shù)方案實現(xiàn)的一種復(fù)生康制劑，原料中含有蒲葵子、喜樹果、莪術(shù)、柴胡、絞股藍、香菇、黃芪、甘草，其重量份數(shù)比為300:275:125:125:125:90:125:40;每0.38克復(fù)生康制劑中，含有喜樹果按喜樹堿C2oHwN204計，為0.09-0.20毫克；本發(fā)明的另一目的是通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)的一種復(fù)生康制劑，原料中含有蒲葵子、喜樹果、莪術(shù)、柴胡、絞股藍、香菇、黃芪、甘草，其重量份數(shù)比為300:275:125:125:125:90:125:40;所述的復(fù)生康制劑的制備方法為A.將所述的黃芪進行粉碎處理，得到黃芪細粉；B.將所述的莪術(shù)進行粉碎處理，得到莪術(shù)粗粒；將該莪術(shù)粗粒進行蒸餾提取處理，得到莪術(shù)揮發(fā)油；將蒸餾后得到的水溶液，另取容器收集;所述的蒸餾提取處理中，莪術(shù)與水的重量之比為l:6;C.將所述的蒲葵子、絞股藍、柴胡、甘草加水煎煮2次，每次1.5-2.5小時，合并煎液，進行第一次過濾處理，得到濾液A;將濾液A與上述莪術(shù)蒸餾后得到的水溶液合并，濃縮為的清膏；向該清膏中加乙醇至含醇量為63%，攪勻，密閉，靜置20-28小時，優(yōu)選為24小時，進行第二次過濾處理，得到濾液B;將濾液B濃縮得到稠膏A;所述的2次煎煮中，蒲葵子、絞股藍、柴胡、甘草的總重量與水的重量之比分別為1:10和1:8;D.將所述的香菇加水煎煮3次，每次0.8-1.5小時，得到香菇煎液；將每次得到的香菇煎液進行過濾處理，得到香菇濾液，合并每次得到的香菇濾液，得到香菇總濾液；將所述的香菇總濾液濃縮得到稠膏B，與所述的稠膏A合并，再加入所述的黃芪細粉105重量份和磷酸磷酸氫^50重量份，混勻，進行干燥處理，得到干膏A;所述的3次煎煮中，香菇和水的重量比分別為1:8、1:6、和1:4;E.將所述的喜樹果粉碎成最粗粉，進行浸漬和滲漉處理，得到喜樹果漉液；將該喜樹果漉液濃縮得到稠膏C，加所述的黃芪細粉20重量份和磷酸氫鈣20重量份，混勻，進行干燥處理，得到干膏B;將上述干膏A和干膏B合并，進行粉碎處理，得到干膏細粉；所述的浸漬處理的時間為36小時；所述的浸漬和滲漉處理中，喜樹果最粗粉與喜樹果漉液的重量比為1:8;F.向所述的莪術(shù)揮發(fā)油中，加磷酸氫鈣20重量份混勻，再與所述的干膏細粉混勻，加磷酸氫鈣至380重量份，混勻，裝入膠囊，即得成品。本發(fā)明的另一目的是通過以下的技術(shù)方案實現(xiàn)的一種復(fù)生康制劑，原料中含有蒲葵子、喜樹果、莪術(shù)、柴胡、絞股藍、香菇、黃芪、甘草，其重量份數(shù)比為300:275:125:125:125:卯125:40;每0.38克復(fù)生康制劑中，含有喜樹果按喜樹堿<:2必16]^04計，為0.09-0.20毫克；所述的復(fù)生康制劑的質(zhì)量檢測項目所采用的檢測方法為蒲葵子提取物鑒別對照檢測、喜樹堿鑒別對照檢測、莪術(shù)提取物鑒別對照檢測、黃芪甲甙鑒別對照檢測的方法均為薄層色譜法，喜樹堿含量對照檢測的方法為高效液相色譜法，內(nèi)容物形態(tài)觀察檢測的方法為顯微鏡鏡檢；所述的各項檢測的過程為I.蒲葵子提取物鑒別對照檢測A.復(fù)生康制劑供試品溶液制備a.取所述的復(fù)生康制劑，加入甲醇溶解，得到復(fù)生康制劑溶液；所述的復(fù)生康制劑與甲醇的重量比為0.2-3:2;b.將所述復(fù)生康制劑溶液進行超聲提取處理15-25分鐘，再靜置30-45分鐘，得到上清液；吸取該上清液作為供試品溶液；B.蒲葵子提取物對照品溶液制備a.取蒲葵子對照藥材加水煎煮0.5-1.5小時，濾過，得到蒲葵子一級濾液；所述的蒲葵子與水的重量比為0.7-6:20;b.將所述的蒲葵子一級濾液進行濃縮處理，得到蒲葵子濃縮液；向該濃縮液中加入乙醇，過濾，得到蒲葵子二級濾液；所述的蒲葵子濃縮液和蒲葵子一級濾液的體積比為20:3;所述的蒲葵子濃縮液與乙醇的體積比為1:2;C.將所述的蒲葵子二級濾液蒸發(fā)處理，除去乙醇，得到蒲葵子殘渣，加入甲醇，得到蒲葵子提取物對照品溶液；所述的甲醇與蒲葵子對照藥材的重量比為0.5:0.7-6;C.薄層色譜法檢測吸取所述的復(fù)生康制劑供試品溶液、蒲葵子提取物對照品溶液，分別點樣于同一硅膠G薄層板上，進行展開處理，并檢視；檢視的結(jié)果為復(fù)生康制劑供試品溶液色譜中，在與蒲葵子對照品溶液色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的主斑點；所述的展開劑為氯仿-丙酮-甲醇-乙酸混合溶液，該混合溶液中，氯仿、丙酮、甲醇、乙酸的體積比為14-3.5:4-1:3-0.8:1-0.3;顯色處理的參數(shù)為顯色劑為2%三氯化鐵溶液與1%鐵氰化鉀溶液的混合溶液，該混合溶液中，2%三氯化鐵溶液與1%鐵氰化鉀溶液的體積比為1:1;II.喜樹堿鑒別對照檢測A.復(fù)生康制劑供試品溶液制備a.取所述的復(fù)生康制劑，加入甲醇溶解，得到復(fù)生康制劑溶液；所述的復(fù)生康制劑與水的重量比為0.2-3:2;b.將所述復(fù)生康制劑溶液進行超聲提取處理15-25分鐘，再靜置30-45分鐘，得到上清液；吸取該上清液作為供試品溶液；B.喜樹堿對照品溶液制備取喜樹堿對照品溶解于氯仿-乙醇混合溶液，得到喜樹堿對照品溶液；該溶液的濃度為lmg/ml;所述的氯仿-乙醇混合溶液中，氯仿和乙醇的體積比為l:1;C.薄層色譜法檢測吸取所述的復(fù)生康制劑供試品溶液、喜樹堿對照品溶液，分別點樣于同一硅膠H薄層板上，進行展開處理，并檢視；檢視的結(jié)果為復(fù)生康制劑供試品溶液色譜中，在與喜樹堿對照品溶液色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的亮藍色的熒光斑點；所述的展開處理中，所述的展開劑為氯仿-丙酮混合溶液，該混合溶液中，氯仿與丙酮的體積比為14-3.5:6-1.5;III.莪術(shù)鑒別對照檢測A.復(fù)生康制劑供試品溶液制備a.取所述的復(fù)生康制劑，加入乙醚溶解，得到復(fù)生康制劑溶液；所述的復(fù)生康制劑與乙醚的重量比為1.7-15:10;b.將所述復(fù)生康制劑溶液進行超聲提取處理10-20分鐘，再靜置30-45分鐘，得到上清液；吸取該上清液作為供試品溶液；B.莪術(shù)提取物對照品溶液制備a.取處方項下入藥的莪術(shù)對照藥材3-5個，進行粉碎處理，得到莪術(shù)細粉；向該細粉中加入乙醚，得到莪術(shù)細粉和乙醚的混合物；所述的莪術(shù)細粉與乙醚的重量比為0.3-3:10;b.將所述的莪術(shù)細粉和乙醚的混合物進行超聲提取處理10-20分鐘，再靜置30-45分鐘，得到莪術(shù)上清液；吸取所述的莪術(shù)上清液作為莪術(shù)提取物對照品溶液；C.薄層色譜法檢測吸取所述的復(fù)生康制劑供試品溶液、喜樹堿對照品溶液，分別點樣于同一硅膠H薄層板上，進行展開處理，并檢視；檢視的結(jié)果為復(fù)生康制劑供試品溶液色譜中，在與莪術(shù)提取物對照品溶液色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的櫻桃紅色的主斑點；所述的展開處理中，所述的展開劑為石油醚-醋酸乙酯混合溶液，該混合溶液中，石油醚與醋酸乙酯的體積比為18-4.5:2-0.5;IV.黃芪甲甙鑒別對照檢測A.復(fù)生康制劑供試品溶液制備a.取所述的復(fù)生康制劑，加入乙醚溶解，得到復(fù)生康制劑溶液；所述的復(fù)生康制劑與乙醚的重量比為1.7-15:10;b.將所述復(fù)生康制劑溶液進行超聲提取處理10-20分鐘，再靜置30-45分鐘，得到一級殘渣；將所述的一級殘渣蒸發(fā)處理，除去乙醚，得到二級殘渣；c.向所述的二級殘渣中第一次加水煎煮，再進行第一次過濾，得到第一次濾液和第一次濾渣；向所述的第二次濾渣中加水煎煮，再進行第二次過濾，得到第二次濾液；合并所述的第一次濾液和第二次濾液，得到總濾液；所述的復(fù)生康制劑與每次加水的重量比為1.7-15:20;所述的每次煎煮時間為20-35分鐘；d.將所述的總濾液用正丁醇進行2次提取處理，合并每次得到的提取液，得到總提取液；所述的總濾液與每次提取處理中的正丁醇的體積比為40:20;e.將所述的總提取液用氨試液進行2次洗滌處理，每次保留總提取液層，得到氨試液洗滌處理過的總提取液；所述的洗滌處理中，總提取液與第一次洗滌處理的氨試液的體積比為40:20;所述的2次洗滌處理中，氨試液每次的體積比為20:20;f.將所述的氨試液洗滌處理過的總提取液中的正丁醇蒸干，得到三級殘渣；向所述的三級殘渣中加入水，得到三級殘渣溶液；所述的復(fù)生康制劑與水的重量比為1.7-15:5;g.將所述的三級殘渣溶液通過吸附樹脂柱，用水對該吸附樹脂柱進行洗脫處理，棄去水洗脫液；再用40%的乙醇溶液對該吸附樹脂柱進行洗脫處理，棄去40%的乙醇溶液洗脫液；再用70%的乙醇溶液對該吸附樹脂柱進行洗脫處理，收集70%的乙醇溶液洗脫液；所述的三級殘渣溶液、水、40%的乙醇溶液、70%的乙醇溶液的體積比為5:80:100:80;h.將所述的70%的乙醇溶液洗脫液蒸干，得到四級殘渣；向所述的四級殘渣中加入甲醇，得到四級殘渣的甲醇溶液，即為復(fù)生康制劑供試品溶液；所述的復(fù)生康制劑與甲醇的重量比為1.7-15:0.5;B.黃芪甲甙對照品溶液制備取黃芪甲甙對照品溶解于甲醇，得到黃芪甲甙對照品溶液；該溶液的濃度為lmg/ml;C.薄層色譜法檢測吸取所述的復(fù)生康制劑供試品溶液、黃芪甲甙對照品溶液，分別點樣于同一硅膠G薄層板上，進行展開處理，并檢視；檢視的結(jié)果為在復(fù)生康制劑供試品溶液色譜中，在與黃芪甲甙對照品溶液色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點；所述的展開處理中，所述的展開劑為氯仿-甲醇-水混合溶液，該混合溶液中，氯仿、甲醇、水的體積比為26-6.5:14-3.5:4-1;V.喜樹堿含量對照檢測A.復(fù)生康制劑供試品溶液制備精密配置復(fù)生康制劑供試品溶液；B.喜樹堿對照品溶液制備精密稱取喜樹堿對照品，加入甲醇配制成5ug/ml的溶液，即為喜樹堿對照品溶液；C.高效液相色譜法測定分別精密吸取復(fù)生康制劑供試品溶液與喜樹堿對照品溶液各20n1，注入液相色譜儀，測定，即得；測定結(jié)果為每0.38克復(fù)生康制劑中，含有喜樹果按喜樹堿C2GH16N2CX^t，為0.09-0.20毫克；在所述的高效液相色譜法中，用十八垸基硅烷鍵合硅膠為填充劑，甲醇-水為流動相，甲醇與水的體積比為28-110:23-90;本發(fā)明的有益效果為1.本發(fā)明采用薄層色譜的方法對復(fù)生康制劑進行蒲葵子提取物、喜樹堿、莪術(shù)提取物、黃芪甲甙的定性檢測；薄層色譜的方法具有分離能力強、靈敏度高、分離速度快、顯色方便等優(yōu)點；且操作簡便、儀器簡單。2.本發(fā)明采用高效液相色譜的方法對復(fù)生康制劑進行喜樹堿含量對照檢測。高效液相色譜的方法具有分辨率和靈敏度高、分析速度快、重復(fù)性好、定量精度高、應(yīng)用范圍廣等優(yōu)點。且適于分析高沸點、大分子、強極性、熱穩(wěn)定性差的化合物。3.本發(fā)明采用顯微鏡鏡檢的方法對復(fù)生康制劑進行內(nèi)容物形態(tài)觀察檢測，該方法直觀形象，操作簡便。4.本發(fā)明采用定性和定量結(jié)合的方法檢測復(fù)生康制劑，確保其質(zhì)量，檢測方法嚴謹、數(shù)據(jù)可靠。5.本發(fā)明中所述的制備方法中，主要重新確定了關(guān)鍵工藝參數(shù)，能保證藥品的安全性、有效性及質(zhì)量均一性，體現(xiàn)了制法的科學(xué)性、合理性及可行性。具體實施方式實施例1:一種復(fù)生康制劑，原料中含有蒲葵子、喜樹果、莪術(shù)、柴胡、絞股藍、香菇、黃芪、甘草，其重量份數(shù)比為300:275:125:125:125:90:125:40;每0.38克復(fù)生康制劑中，含有喜樹果按喜樹堿C2QH16N204計，為0.09-0.20毫克；所述的復(fù)生康制劑的質(zhì)量檢測項目所采用的檢測方法為蒲葵子提取物鑒別對照檢測、喜樹堿鑒別對照檢測、莪術(shù)提取物鑒別對照檢測、黃芪甲甙鑒別對照檢測的方法均為薄層色譜法，喜樹堿含量對照檢測的方法為高效液相色譜法，內(nèi)容物形態(tài)觀察檢測的方法為顯微鏡鏡檢；所述的各項檢測的過程為檢測過程如下I.蒲葵子提取物鑒別對照檢測A.復(fù)生康制劑供試品溶液制備-a.取所述的復(fù)生康制劑，加入甲醇溶解，得到復(fù)生康制劑溶液；所述的復(fù)生康制劑與水的重量比為0.2-3:2;所述的復(fù)生康制劑的用量為0.2-3g,所述的甲醇的用量為2ml;b.將所述復(fù)生康制劑溶液進行超聲提取處理15-25分鐘，優(yōu)選為15分鐘；再靜置30-45分鐘，優(yōu)選為40分鐘；得到上清液；吸取該上清液作為供試品溶液;所述的超聲提取處理中，功率為50W-100W，頻率為40KHz;B.蒲葵子提取物對照品溶液制備a.取蒲葵子對照藥材加水煎煮0.5-1.5小時，濾過，得到蒲葵子一級濾液；所述的蒲葵子對照藥材與水的重量比為0.7-6:20;所述的蒲葵子對照藥材的用量為0.7-6g，所述的水的用量為20ml;b.將所述的蒲葵子一級濾液進行濃縮處理，得到蒲葵子濃縮液；向該濃縮液中加入乙醇，過濾，得到蒲葵子二級濾液；所述的蒲葵子濃縮液和蒲葵子一級濾液的體積比為20:3;所述的蒲葵子濃縮液與乙醇的體積比為l:2;向所述的蒲葵子濃縮液中加入乙醇后，攪拌均勻，在密閉條件下靜置4小時后再進行過濾；所述的蒲葵子濃縮液的體積為3ml;所述的乙醇的用量為6ml;c.將所述的蒲葵子二級濾液蒸發(fā)處理，除去乙醇，得到蒲葵子殘渣，加入甲醇，得到蒲葵子提取物對照品溶液；所述的甲醇與蒲葵子對照藥材的重量比為0.5:0.7-6;所述的甲醇的用量為0.5ml;C.薄層色譜法檢測吸取所述的復(fù)生康制劑供試品溶液、蒲葵子提取物對照品溶液，分別點樣于同一硅膠G薄層板上，進行展開處理，并檢視；檢視的結(jié)果為復(fù)生康制劑供試品溶液色譜中，在與蒲葵子對照品溶液色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的主斑點；所述的薄層色譜檢測法記載于中國藥典2005年版一部附錄VIB;所述蒲葵子提取物對照品溶液和復(fù)生康制劑供試品溶液的體積比為l:1;所述的蒲葵子提取物的溶液點樣量為8-10!U，所述的復(fù)生康試劑供試品溶液的點樣量為8-lOiU;所述的硅膠G薄層版的粘合劑為羧甲基纖維素鈉；所述的展開處理中，展開劑為氯仿-丙酮-甲醇-乙酸混合溶液，該混合溶液中，氯仿、丙酮、甲醇、乙酸的體積比為14-3.5:4-1:3-0.8:1-0.3，顯色處理的參數(shù)為顯色劑為2%三氯化鐵溶液與1%鐵氰化鉀溶液的混合溶液,該混合溶液中，2%三氯化鐵溶液與1%鐵氰化鉀溶液的體積比為1:1;II.喜樹堿鑒別對照檢測A.復(fù)生康制劑供試品溶液制備a.取所述的復(fù)生康制劑，加入甲醇溶解，得到復(fù)生康制劑溶液；所述的復(fù)生康制劑與水的重量比為0.2-3:2;所述的復(fù)生康制劑的用量為0.2-3g，所述的水的用量為20ml;b.將所述復(fù)生康制劑溶液進行超聲提取處理15-25分鐘，優(yōu)選為15分鐘；再靜置30-45分鐘，優(yōu)選為40分鐘；得到上清液；吸取該上清液作為供試品溶液;所述的超聲提取處理中，功率為50W-100W，頻率為40KHz;B.喜樹堿對照品溶液制備取喜樹堿對照品溶解于氯仿-乙醇混合溶液，得到喜樹堿對照品溶液；該溶液的濃度為lmg/ml;所述的氯仿-乙醇混合溶液中，氯仿和乙醇的體積比為1:1;C.薄層色譜法檢測吸取所述的復(fù)生康制劑供試品溶液、喜樹堿對照品溶液，分別點樣于同一硅膠H薄層板上，進行展開處理，并檢視；檢視的結(jié)果為復(fù)生康制劑供試品溶液色譜中，在與喜樹堿對照品溶液色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的亮藍色的熒光斑點；所述的薄層色譜檢測法記載于中國藥典2005年版一部附錄VIB;所述喜樹堿對照品溶液的和復(fù)生康制劑供試品溶液的體積比為1:1;所述的喜樹堿對照品溶液的點樣量為lUl，所述的復(fù)生康試劑供試品溶液的點樣量為llU;所述的硅膠H薄層版的粘合劑為羧甲基纖維素鈉；所述的展開處理中，展開劑為氯仿-丙酮混合溶液，該混合溶液中，氯仿與丙酮的體積比為14-3.5:6-1.5;所述的檢視在波長為365nm的紫外燈下進行；III.莪術(shù)鑒別對照檢測A.復(fù)生康制劑供試品溶液制備a.取所述的復(fù)生康制劑，加入乙醚溶解，得到復(fù)生康制劑溶液；所述的復(fù)生康制劑與乙醚的重量比為1.7-15:10;所述的復(fù)生康制劑的用量為1.7-15g，所述的乙醚的用量為10ml;b.將所述復(fù)生康制劑溶液進行超聲提取處理10-20分鐘，優(yōu)選為15分鐘；再靜置30-45分鐘，優(yōu)選為30分鐘，得到上清液；吸取該上清液作為供試品溶液;所述的超聲提取處理中，功率為50W-100W，頻率為40KHz;B.莪術(shù)提取物對照品溶液制備a.取處方項下入藥的莪術(shù)對照藥材3-5個，進行粉碎處理，得到莪術(shù)細粉；向該細粉中加入乙醚，得到莪術(shù)細粉和乙醚的混合物；所述的莪術(shù)細粉與乙醚的重量比為0.3-3:10;所述的莪術(shù)對照藥材的用量為0.3-3g,所述的乙醚的用量為10ml;所述的莪術(shù)細粉的粒徑為75-150"m;b.將所述的莪術(shù)細粉和乙醚的混合物進行超聲提取處理10-20分鐘，優(yōu)選為15分鐘；再靜置30-45分鐘，優(yōu)選為30分鐘；得到莪術(shù)上清液；吸取所述的莪術(shù)上清液作為莪術(shù)提取物對照品溶液；所述的超聲提取處理中，功率為50W-100W，頻率為40KHz;C.薄層色譜法檢測吸取所述的復(fù)生康制劑供試品溶液、莪術(shù)對照品溶液，分別點樣于同一硅膠H薄層板上，進行展開處理，并檢視；檢視的結(jié)果為復(fù)生康制劑供試品溶液色譜中，在與莪術(shù)提取物對照品溶液色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的櫻桃紅色的主斑點；所述的薄層色譜檢測法記載于中國藥典2005年版一部附錄VIB;所述莪術(shù)提取物對照品溶液的和復(fù)生康制劑供試品溶液的體積比為6:10-15;所述的莪術(shù)提取物的點樣量為6!U，所述的復(fù)生康試劑供試品溶液的點樣量為10-15U1;所述的硅膠H薄層版的粘合劑為羧甲基纖維素鈉；所述的展開處理中，展開劑為石油醚-醋酸乙酯混合溶液，該混合溶液中，石油醚與醋酸乙酯的體積比為18-4.5:2-0.5，所述的石油醚的溫度為6(TC-9(TC;顯色處理的參數(shù)為顯色劑為香草醛試液；IV.黃芪甲甙鑒別對照檢測A.復(fù)生康制劑供試品溶液制備a.取所述的復(fù)生康制劑，加入乙醚溶解，得到復(fù)生康制劑溶液；所述的復(fù)生康制劑與乙醚的重量比為1.7-15:10;所述的復(fù)生康制劑的用量為1.7-15g，所述的乙醚的用量為10ml;b.將所述復(fù)生康制劑溶液進行超聲提取處理10-20分鐘，優(yōu)選為15分鐘；再靜置30-45分鐘，優(yōu)選為30分鐘，得到一級殘渣；將所述的一級殘渣蒸發(fā)處理，除去乙醚，得到二級殘渣；所述的超聲提取處理中，功率為50W-100W,頻率為40KHz;c.向所述的二級殘渣中第一次加水煎煮，再進行第一次過濾，得到第一次濾液和第一次濾渣；向所述的第二次濾渣中加水煎煮，再進行第二次過濾，得到第二次濾液；合并所述的第一次濾液和第二次濾液，得到總濾液;所述的復(fù)生康制劑與每次加水的重量比為1.7-15:20,水的用量為20ml;所述的每次煎煮時間為20-35分鐘；d.將所述的總濾液用正丁醇進行2次提取處理，合并每次得到的提取液，得到總提取液；所述的總濾液與每次提取處理中的正丁醇的體積比為40:20;所述的正丁醇為水飽和的正丁醇，用量為每次20ml;e.將所述的總提取液用氨試液進行2次洗滌處理，每次保留總提取液層，得到氨試液洗滌處理過的總提取液；所述的洗滌處理中，總提取液與第一次洗滌處理的氨試液的體積比為40:20;所述的2次洗滌處理中，氨試液每次的體積相同，用量為每次為20ml;f.將所述的氨試液洗滌處理過的總提取液中的正丁醇蒸干，得到三級殘渣；向所述的三級殘渣中加入水，得到三級殘渣溶液并將其放冷到室溫；所述的復(fù)生康制劑與水的重量比為1.7-15:5;所述的水的用量為5ml;g.將所述的三級殘渣溶液通過吸附樹脂柱，用水對該吸附樹脂柱進行洗脫處理，棄去水洗脫液；再用40%的乙醇溶液對該吸附樹脂柱進行洗脫處理，棄去40%的乙醇溶液洗脫液；再用70%的乙醇溶液對該吸附樹脂柱進行洗脫處理，收集70%的乙醇溶液洗脫液；所述的三級殘渣溶液、水、40%的乙醇溶液、70%的乙醇溶液的體積比為5:80:100:80;所述的水、40%的乙醇溶液、70%的乙醇溶液的用量分別為80ml、100ml、80ml;h.將所述的70%的乙醇溶液洗脫液蒸干，得到四級殘渣；向所述的四級殘渣中加入甲醇，得到四級殘渣的甲醇溶液，即為復(fù)生康制劑供試品溶液；所述的復(fù)生康制劑與甲醇的重量比為1.7-15:0.5;所述的甲醇的用量為0.5ml;B.黃芪甲甙對照品溶液制備取黃芪甲甙對照品溶解于甲醇，得到黃芪甲甙對照品溶液；該溶液的濃度為lmg/ml;C.薄層色譜法檢測吸取所述的復(fù)生康制劑供試品溶液、黃甚甲式對照品溶液，分別點樣于同一硅膠G薄層板上，進行展開處理，并檢視；檢視的結(jié)果為在復(fù)生康制劑供試品溶液色譜中，在與黃甚甲甙對照品溶液色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點；所述的薄層色譜檢測法記載于中國藥典2005年版一部附錄VIB;所述黃芪甲甙對照品溶液的和復(fù)生康制劑供試品溶液的體積比為1:1;所述的黃芪甲甙對照品溶液的點樣量為2ul，所述的復(fù)生康試劑供試品溶液的點樣量為2lU;所述的硅膠G薄層版的粘合劑為羧甲基纖維素鈉；所述的展開處理中，展開劑為氯仿-甲醇-水混合溶液，該混合溶液中，氯仿、甲醇、水的體積比為26-6.5:14-3.5:4-1;顯色處理的參數(shù)為顯色劑為10%硫酸乙醇溶液；將所述的硅膠G薄層板噴以顯色劑后，在105'C條件下加熱2-7分鐘，即可檢視結(jié)果；在復(fù)生康制劑供試品溶液色譜中，在與黃甚甲甙對照品溶液色譜相應(yīng)的位置上，在365nm的紫外燈下顯相同的橙黃色熒光斑點，在日光下顯相同的棕褐色斑點；V.喜樹堿含量對照檢測A.復(fù)生康制劑供試品溶液制備精密配置復(fù)生康制劑供試品溶液；具體的操作方法為取所述的裝量差異項下的復(fù)生康制劑混勻，精密稱定0.3g，置于具塞錐形瓶中，向該瓶中精密加入甲醇25ml，得到復(fù)生康制劑混合溶液，再將該瓶密塞，稱定總重量A;再將所述的復(fù)生康制劑混合溶液超聲處理60分鐘，放冷至室溫，稱定總重量B，用甲醇補足總重量B與總重量A減少的差量；所述的超聲處理中，功率為50W-100W，頻率為40KHz;再將補足所述的差量的復(fù)生康制劑混合液搖勻，進行過濾處理，取續(xù)濾液作為復(fù)生康制劑供試品溶液；B.喜樹堿對照品溶液制備精密稱取喜樹堿對照品，加入甲醇配制成5ug/ml的溶液，即為喜樹堿對照品溶液；C.高效液相色譜法測定分別精密吸取復(fù)生康制劑供試品溶液與喜樹堿對照品溶液各20u1，注入液相色譜儀，測定，即得；測定結(jié)果為每0.38克復(fù)生康制劑中，含有喜樹果按喜樹堿C2()H16N20^t，為0.09-0.20毫克；所述的高效液相色譜法測定記載于中國藥典2005年版一部附錄VID;在所述的高效液相色譜法中，用十八烷基硅垸鍵合硅膠為填充劑，甲醇-水為流動相，甲醇與水的體積比為28-110:23-90;檢測波長為254nm;理論板數(shù)按喜樹堿峰計算，應(yīng)不低于2000。在本實施例中，在配制所述的復(fù)生康制劑供試品溶液，用于各項檢測時，復(fù)生康試劑的重量可以在給出的配比范圍內(nèi)靈活組合，在此不一一枚舉；在配制所述的蒲葵子提取物對照品溶液、莪術(shù)提取物對照品溶液用于檢測時，蒲葵子對照藥材、莪術(shù)對照藥材的重量可以在給出的配比范圍內(nèi)靈活組合，在此不一一枚舉；在利用薄層色譜法進行各項檢測時，所述的各個展開劑中的各個組分的體積可以在給出的配比范圍內(nèi)靈活組合，在此不一一枚舉。本實施例中配制所述的復(fù)生康制劑供試品溶液和各個對照品溶液的過程中，使用的重量單位是克(g)，體積單位是毫升(ml);本實施例中進行所述的各個組分的薄層色譜法檢測和高效液相色譜檢測的過程中，點樣及進樣用量的體積單位是微升(w)。本實施例中所述的各種對照藥材和化學(xué)試劑均可以在市場及相關(guān)機構(gòu)購買得到。本實施例中所述的提取處理、洗滌處理、蒸干、過濾中所用的設(shè)備均為常規(guī)設(shè)備，均可以在市場上購買得到。本實施例中采用薄層色譜(ThinLayerChromatography,TLC)法進行蒲葵子提取物鑒別對照檢測，喜樹堿鑒別對照檢測，莪術(shù)提取物鑒別對照檢測，黃芪提取物鑒別對照檢測；薄層色譜法是具有操作簡便、儀器簡單、分離速度快、分離能力強、靈敏度高、顯色方便等優(yōu)點，適用于微量樣品的分離鑒定。一方面，薄層色譜法適用于小量樣品(少到10嗎-100嗎，甚至0.01嗎)的分離；另一方面，若在制作薄層板時，把吸附層加厚，將樣品點成一條線，則可分離多達500mg的樣品，因此又可用來精制樣品。故此法特別適用于揮發(fā)性較小或在較高溫度易發(fā)生變化而不能用氣相色譜分析的物質(zhì)。本實施例中采用高效液相色譜法進行喜樹堿含量對照檢測；高效液相色譜法具有如下優(yōu)點高效液相色譜(HighPerformanceLiquidChromatography,HPLC)采用了高壓輸液泵、高靈敏度檢測器和高效微粒固定相，適于分析高沸點不易揮發(fā)、分子量大、不同極性的有機化合物。，高效液相色譜是最為常用的分離和檢測手段，在有機化學(xué)、生物化學(xué)、醫(yī)學(xué)、藥物開發(fā)與檢測、化工、食品科學(xué)、環(huán)境監(jiān)測、商檢和法檢等方面都有廣泛的應(yīng)用。高效液相色譜與傳統(tǒng)的經(jīng)典液相色譜相比有以下優(yōu)點速度快，通常分析一個樣品在1530min，有些樣品甚至在5min內(nèi)即可完成；分辨率高，可選擇固定相和流動相以達到最佳分離效果；靈敏度高，紫外檢測器可達0.01ng，熒光和電化學(xué)檢測器可達0.1pg;色譜柱可反復(fù)使用，用一根色譜柱可分離不同的化合物；樣品量少，容易回收，樣品經(jīng)過色譜柱后不被破壞，可以收集單一組分或做制備。實施例2:本實施例是在實施例1基礎(chǔ)上的優(yōu)選方案。本實施例中，用于所述的各項檢測的復(fù)生康制劑供試品溶液制備過程中，復(fù)生康制劑的用量進一步優(yōu)化；在配制所述的蒲葵子提取物對照品溶液、莪術(shù)提取物對照品溶液用于檢測時，蒲葵子對照藥材、莪術(shù)對照藥材的取樣量進一步優(yōu)化；所述的各項檢測中，所述的各種展開劑的組分配比進一步優(yōu)化；本實施例的操作方法與實施例1相同；I.蒲葵子提取物鑒別對照檢測-A.復(fù)生康制劑供試品溶液制備所述的復(fù)生康制劑與甲醇的重量比為1:2;所述的復(fù)生康制劑的用量為lg，所述的甲醇的用量為2ml;B.蒲葵子提取物對照品溶液制備所述的蒲葵子對照藥材與水的重量比為2:20;所述的蒲葵子對照藥材的用量為2g,所述的水的用量為20ml;將所述的蒲葵子二級濾液蒸發(fā)處理，除去乙醇，得到蒲葵子殘渣，加入甲醇，得到蒲葵子提取物對照品溶液；所述的甲醇與蒲葵子對照藥材的重量比為0.5:2;所述的甲醇的用量為0.5ml;C.薄層色譜法檢測所述的展開劑為氯仿-丙酮-甲醇-乙酸混合溶液，該混合溶液中，氯仿、丙酮、甲醇、乙酸的體積比為7:2:1.5:0.5;顯色處理的參數(shù)為顯色劑為2%三氯化鐵溶液與1%鐵氰化鉀溶液的混合溶液，該混合溶液中，2%三氯化鐵溶液與1%鐵氰化鉀溶液的體積比為1:1;II.喜樹堿鑒別對照檢測A.復(fù)生康制劑供試品溶液制備所述的復(fù)生康制劑與甲醇的重量比為1:2;所述的復(fù)生康制劑的用量為lg，所述的甲醇的用量為2ml;C.薄層色譜法檢測所述的展開劑為氯仿-丙酮混合溶液，該混合溶液中，氯仿與丙酮的體積比為7:3;III.莪術(shù)鑒別對照檢測A.復(fù)生康制劑供試品溶液制備所述的復(fù)生康制劑與乙醚的重量比為5:10;所述的復(fù)生康制劑的用量為5g，所述的乙醚的用量為10ml;B.莪術(shù)提取物對照品溶液制備取處方項下入藥的莪術(shù)對照藥材3-5個，進行粉碎處理，得到莪術(shù)細粉；向該細粉中加入乙醚，得到莪術(shù)細粉和乙醚的混合物；所述的莪術(shù)細粉與乙醚的重量比為l:10;所述的莪術(shù)對照藥材的用量為lg，所述的乙醚的用量為10ml;所述的莪術(shù)細粉的粒徑為75-150um;C.薄層色譜法檢測所述的展開劑為石油醚-醋酸乙酯混合溶液，該混合溶液中，石油醚與醋酸乙酯的體積比為9:1;IV.黃芪甲甙鑒別對照檢測A.復(fù)生康制劑供試品溶液制備所述的復(fù)生康制劑與乙醚的重量比為5:10;所述的復(fù)生康制劑的用量為5g，所述的乙醚的用量為10ml;向所述的二級殘渣中第一次加水煎煮，再進行第一次過濾，得到第一次濾液和第一次濾渣；向所述的第二次濾渣中加水煎煮，再進行第二次過濾，得到第二次濾液；合并所述的第一次濾液和第二次濾液，得到總濾液；所述的復(fù)生康制劑與每次加水的重量比為5:20，水的用量為20ml;將所述的氨試液洗滌處理過的總提取液中的正丁醇蒸干，得到三級殘渣；向所述的三級殘渣中加入水，得到三級殘渣溶液；所述的復(fù)生康制劑與水的重量比為5:5;所述的水的用量為5ml;將所述的70%的乙醇溶液洗脫液蒸干，得到四級殘渣；向所述的四級殘渣中加入甲醇，得到四級殘渣的甲醇溶液，即為復(fù)生康制劑供試品溶液;所述的復(fù)生康制劑與甲醇的重量比為5:0.5;所述的甲醇的用量為0.5ml;C.薄層色譜法檢測所述的展開劑為氯仿-甲醇-水混合溶液，該混合溶液中，氯仿、甲醇、水的體積比為13:7:2;V.喜樹堿含量對照檢測高效液相色譜法測定甲醇-水為流動相，甲醇與水的體積比為55:45;蒲葵子鑒別對照檢測中，原標(biāo)準(zhǔn)WS-10199(ZD-0199)-2002中，"以氯仿-甲醇-甲酸(5:0.8:0.2)為展開劑"，顯色劑為"1.5%硫酸鐵銨溶液"；本實施例中，所述的展開劑為氯仿-丙酮-甲醇-乙酸混合溶液，該混合溶液中，氯仿-丙酮-甲醇-乙酸的體積比為7:2:1.5:0.5;所述的顯色劑為2%三氣化鐵溶液與1%鐵氰化鉀溶液的混合溶液，該混合溶液中，2%三氯化鐵溶液與1%鐵氰化鉀溶液的體積比為1:1;其改進的理由如下1.本制劑蒲葵子鑒別項下的展開劑和顯色劑，其方法于1998年提出，2000年收載廣西地方標(biāo)準(zhǔn)，2002年國家藥品監(jiān)督管理局批準(zhǔn)試行。從1998年到2006年，試行情況良好。但在近3年來的生產(chǎn)實踐中，發(fā)現(xiàn)其展開劑和顯色劑并不理想。經(jīng)反復(fù)對比實驗，確定將其展開劑和顯色劑修訂為"以氯仿-丙酮-甲醇-乙酸(7:2:1.5:0.5)為展開劑"，"噴以2%三氯化鐵-1%鐵氰化鉀(1:1)混合溶液"為顯色劑。修訂后的方法，經(jīng)11批樣品試驗，其薄層色譜圖在分離、重現(xiàn)性和顯色清晰方面，明顯優(yōu)于原標(biāo)準(zhǔn)。2.據(jù)調(diào)査，目前國內(nèi)幾家中藥材大市場內(nèi)的蒲葵子，其籽粒未完全成熟的約占30%左右。3.蒲葵子的質(zhì)量可能受不同產(chǎn)地的氣候、土壤、施肥、種植技術(shù)和其他因素的影響。其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)為廣西中藥材標(biāo)準(zhǔn)第二冊第271頁。莪術(shù)鑒別對照檢測中，對于莪術(shù)對照藥材的處理為原標(biāo)準(zhǔn)WS-10199(ZD-0199)-2002為"另取莪術(shù)對照藥材lg";本實施例中為處方項下入藥的莪術(shù)對照藥材3-5個，進行粉碎處理，得到莪術(shù)細粉；向該細粉中加入乙醚，得到莪術(shù)細粉和乙醚的混合物；所述的莪術(shù)細粉與乙醚的重量比為1:10;所述的莪術(shù)對照藥材的用量為lg;其改進的理由如下:l.目前，中國藥品生物制品檢定所只能提供溫莪術(shù)對照藥材，而2005版中國藥典收載有蓬莪術(shù)、廣西莪術(shù)和溫莪術(shù)。2.不同產(chǎn)地的莪術(shù)，揮發(fā)油的主要成分及含量均不相同，見下表:<table>tableseeoriginaldocumentpage27</column></row><table>3.其揮發(fā)油薄層色譜圖也不盡相同(記載于中藥材大辭典第772-779頁)。不同產(chǎn)地的莪術(shù)與其他中藥材制成制劑后，其中揮發(fā)油的薄層色譜更為復(fù)雜；4.目前，中藥材市場產(chǎn)品地區(qū)分類及純度普遍較差(含莪術(shù))，這與不同產(chǎn)地的氣候、土壤、施肥和種植技術(shù)有關(guān)；與市場產(chǎn)品質(zhì)量管理欠缺有關(guān)。5.本實施例中所述的方法更切合生產(chǎn)實際，強調(diào)了中藥材生產(chǎn)產(chǎn)地的重要性，符合國食藥監(jiān)注[2008]3號文第4條之規(guī)定。6.本次修訂的方法，經(jīng)11批樣品試驗，其薄層色譜圖較原標(biāo)準(zhǔn)在分離、重現(xiàn)性和相應(yīng)的位置等方面，效果明顯增強。實施例3:本實施例是在實施例1基礎(chǔ)上的優(yōu)選方案。本實施例中，用于所述的各項檢測的復(fù)生康制劑供試品溶液制備過程中，復(fù)生康制劑的用量進一步優(yōu)化；在配制所述的蒲葵子提取物對照品溶液、莪術(shù)提取物對照品溶液用于檢測時，蒲葵子對照藥材、莪術(shù)對照藥材的取樣量進一步優(yōu)化；所述的各項檢測中，所述的各種展開劑的組分配比進一步優(yōu)化；本實施例的操作方法與實施例1相同；I.蒲葵子提取物鑒別對照檢測-A.復(fù)生康制劑供試品溶液制備所述的復(fù)生康制劑與甲醇的重量比為0.3:2;所述的復(fù)生康制劑的用量為0.3§，所述的甲醇的用量為2ml;B.蒲葵子提取物對照品溶液制備所述的蒲葵子對照藥材與水的重量比為0.3:20;所述的蒲葵子對照藥材的用量為0.3g，所述的水的用量為20ml;將所述的蒲葵子二級濾液蒸發(fā)處理，除去乙醇，得到蒲葵子殘渣，加入甲醇，得到蒲葵子提取物對照品溶液；所述的甲醇與蒲葵子對照藥材的重量比為0.5:0.3;所述的甲醇的用量為0.5ml;C.薄層色譜法檢測所述的展開劑為氯仿-丙酮-甲醇-乙酸混合溶液，該混合溶液中，氯仿、丙酮、甲醇、乙酸的體積比為4:1.5:0.9:0.3;II.喜樹堿鑒別對照檢測A.復(fù)生康制劑供試品溶液制備所述的復(fù)生康制劑與甲醇的重量比為0.3:2;所述的復(fù)生康制劑的用量為0,3g，所述的甲醇的用量為2ml;C.薄層色譜法檢測所述的展開劑為氯仿-丙酮混合溶液，該混合溶液中，氯仿與丙酮的體積比為4:1.8;III.莪術(shù)鑒別對照檢測A.復(fù)生康制劑供試品溶液制備所述的復(fù)生康制劑與乙醚的重量比為2:10;所述的復(fù)生康制劑的用量為2g，所述的乙醚的用量為10ml;B.莪術(shù)提取物對照品溶液制備取處方項下入藥的莪術(shù)對照藥材3-5個，進行粉碎處理，得到莪術(shù)細粉；向該細粉中加入乙醚，得到莪術(shù)細粉和乙醚的混合物；所述的莪術(shù)細粉與乙醚的重量比為0.5:10;所述的莪術(shù)對照藥材的用量為0.5g，所述的乙醚的用量為10ml;所述的莪術(shù)細粉的粒徑為75-150um;C.薄層色譜法檢測所述的展開劑為石油醚-醋酸乙酯混合溶液，該混合溶液中，石油醚與醋酸乙酯的體積比為5:0.8;IV.黃芪甲甙鑒別對照檢測A.復(fù)生康制劑供試品溶液制備所述的復(fù)生康制劑與乙醚的重量比為2:10;所述的復(fù)生康制劑的用量為2g，所述的乙醚的用量為10ml;向所述的二級殘渣中第一次加水煎煮，再進行第一次過濾，得到第一次濾液和第一次濾渣；向所述的第二次濾渣中加水煎煮，再進行第二次過濾，得到第二次濾液；合并所述的第一次濾液和第二次濾液，得到總濾液;所述的復(fù)生康制劑與每次加水的重量比為2:20，水的用量為20ml;將所述的氨試液洗滌處理過的總提取液中的正丁醇蒸干，得到三級殘渣；向所述的三級殘渣中加入水，得到三級殘渣溶液；所述的復(fù)生康制劑與水的重量比為2:5;所述的水的用量為5ml;將所述的70%的乙醇溶液洗脫液蒸干，得到四級殘渣；向所述的四級殘渣中加入甲醇，得到四級殘渣的甲醇溶液，即為復(fù)生康制劑供試品溶液;所述的復(fù)生康制劑與甲醇的重量比為2:0.5;所述的甲醇的用量為0.5ml;C.薄層色譜法檢測所述的展開劑為氯仿-甲醇-水混合溶液，該混合溶液中，氯仿、甲醇、水的體積比為7:4:1;V.喜樹堿含量對照檢測高效液相色譜法測定甲醇-水為流動相，甲醇與水的體積比為28:23;實施例4:本實施例是在實施例1基礎(chǔ)上的優(yōu)選方案。本實施例中，用于所述的各項檢測的復(fù)生康制劑供試品溶液制備過程中，復(fù)生康制劑的用量進一步優(yōu)化；在配制所述的蒲葵子提取物對照品溶液、莪術(shù)提取物對照品溶液用于檢測時，蒲葵子對照藥材、莪術(shù)對照藥材的取樣量進一步優(yōu)化；所述的各項檢測中，所述的各種展開劑的組分配比進一步優(yōu)化；本實施例的操作方法與實施例1相同；I.蒲葵子提取物鑒別對照檢測A.復(fù)生康制劑供試品溶液制備所述的復(fù)生康制劑與甲醇的重量比為3:2;所述的復(fù)生康制劑的用量為3g，所述的甲醇的用量為2ml;B.蒲葵子提取物對照品溶液制備所述的蒲葵子對照藥材與水的重量比為6:20;所述的蒲葵子對照藥材的用量為6g，所述的水的用量為20ml;將所述的蒲葵子二級濾液蒸發(fā)處理，除去乙醇，得到蒲葵子殘渣，加入甲醇，得到蒲葵子提取物對照品溶液；所述的甲醇與蒲葵子對照藥材的重量比為0.5:6;所述的甲醇的用量為0.5ml;C.薄層色譜法檢測所述的展開劑為氯仿-丙酮-甲醇-乙酸混合溶液，該混合溶液中，氯仿、丙酮、甲醇、乙酸的體積比為14:4:3:1;II.喜樹堿鑒別對照檢測A.復(fù)生康制劑供試品溶液制備所述的復(fù)生康制劑與甲醇的重量比為3:2;所述的復(fù)生康制劑的用量為3g，所述的甲醇的用量為2ml;C.薄層色譜法檢測所述的展開劑為氯仿-丙酮混合溶液，該混合溶液中，氯仿與丙酮的體積比為14:8;III.莪術(shù)鑒別對照檢測A.復(fù)生康制劑供試品溶液制備所述的復(fù)生康制劑與乙醚的重量比為15:10;所述的復(fù)生康制劑的用量為15g，所述的乙醚的用量為10ml;B.莪術(shù)提取物對照品溶液制備取處方項下入藥的莪術(shù)對照藥材3-5個，進行粉碎處理，得到莪術(shù)細粉；向該細粉中加入乙醚，得到莪術(shù)細粉和乙醚的混合物；所述的莪術(shù)細粉與乙醚的重量比為3:10;所述的莪術(shù)對照藥材的用量為3g，所述的乙醚的用量為10ml;所述的莪術(shù)細粉的粒徑為75-150ym;C.薄層色譜法檢測所述的展開劑為石油醚-醋酸乙酯混合溶液，該混合溶液中，石油醚與醋酸乙酯的體積比為16:1;IV.黃芪甲甙鑒別對照檢測A.復(fù)生康制劑供試品溶液制備所述的復(fù)生康制劑與乙醚的重量比為15:10;所述的復(fù)生康制劑的用量為15g，所述的乙醚的用量為10ml;向所述的二級殘渣中第一次加水煎煮，再進行第一次過濾，得到第一次濾液和第一次濾渣；向所述的第二次濾渣中加水煎煮，再進行第二次過濾，得到第二次濾液；合并所述的第一次濾液和第二次濾液，得到總濾液;所述的復(fù)生康制劑與每次加水的重量比為15:20，水的用量為20ml;將所述的氨試液洗滌處理過的總提取液中的正丁醇蒸干，得到三級殘渣；向所述的三級殘渣中加入水，得到三級殘渣溶液；所述的復(fù)生康制劑與水的重量比為15:5;所述的水的用量為5ml;將所述的70%的乙醇溶液洗脫液蒸干，得到四級殘渣；向所述的四級殘渣中加入甲醇，得到四級殘渣的甲醇溶液，即為復(fù)生康制劑供試品溶液;所述的復(fù)生康制劑與甲醇的重量比為15:0.5;所述的甲醇的用量為0.5ml;C.薄層色譜法檢測所述的展開劑為氯仿-甲醇-水混合溶液，該混合溶液中，氯仿、甲醇、水的體積比為25:14:4;V.喜樹堿含量對照檢測高效液相色譜法測定甲醇-水為流動相，甲醇與水的體積比為110:90;實施例5:本實施例為本發(fā)明所述的復(fù)生康制劑的內(nèi)容物形態(tài)觀察檢測結(jié)果。取該復(fù)生康膠囊內(nèi)容物，置光學(xué)顯微鏡下觀察的結(jié)果為纖維成束或離散，壁厚，表面有縱裂紋，兩端成掃帚狀或平截狀。實施例6:本實施例為實施例1-5中的復(fù)生康制劑的制備方法。一種復(fù)生康制劑，原料中包括蒲葵子、喜樹果、莪術(shù)、柴胡、絞股藍、香菇、黃芪、甘草，其重量份數(shù)比為300:275:125:125:125:90:125:40;其特征在于:每0.38克復(fù)生康制劑中，含有喜樹果按喜樹堿C2。H16N204計，為0.09-0.20毫克；所述的復(fù)生康制劑的制備方法為A.將所述的黃芪進行粉碎處理，得到黃芪細粉；B.將所述的莪術(shù)進行粉碎處理，得到莪術(shù)粗粒；將該莪術(shù)粗粒，進行蒸餾提取處理，得到莪術(shù)揮發(fā)油；將蒸餾后得到的水溶液，另取容器收集；所述的蒸餾提取處理中，莪術(shù)與水的重量之比為1:6;所述的莪術(shù)粗粒的粒徑為5mm-8mm;C.將所述的蒲葵子、絞股藍、柴胡、甘草加水煎煮2次，每次1.5-2.5小時，優(yōu)選為2小時，合并煎液，進行第一次過濾處理，得到濾液A;將濾液A與上述莪術(shù)蒸餾后得到的水溶液合并，濃縮為的清膏；向該清膏中加乙醇至含醇量為63%，攪勻，密閉，靜置20-28小時，優(yōu)選為24小時，進行第二次過濾處理，得到濾液B;將濾液B濃縮得到稠膏A;所述的2次煎煮中，蒲葵子、絞股藍、柴胡、甘草的總重量與水的重量之比分別為1:10和1:8;所述的清膏的密度為1.041.05g/cm3，溫度為8(TC;所述的稠膏A的密度為1.381.41g/cm3，溫度為80'C;所述的第一過濾處理中，使用300目網(wǎng)篩；所述的第二次過濾中，使用濾紙；D.將所述的香菇加水煎煮3次，每次0.8-1.5小時，優(yōu)選為1小時，得到香菇煎液；將每次得到的香菇煎液進行過濾處理，得到香菇濾液，合并每次得到的香菇濾液，得到香菇總濾液；將所述的香菇總濾液濃縮得到稠膏B，與所述的稠膏A合并，再加入所述的黃芪細粉105重量份和磷酸磷酸氫鈣50重量份，混勻，進行干燥處理，得到干膏A;所述的3次煎煮中，香菇和水的重量比分別為1:8、1:6、和1:4;所述的稠膏B的密度為1.381.41g/cm3，溫度為8(TC;所述的過濾處理中，使用300目網(wǎng)篩；所述的干燥處理的溫度為60'C;E.將所述的喜樹果粉碎成最粗粉，進行浸漬和滲漉處理，得到喜樹果漉液；將該喜樹果漉液濃縮得到稠膏C，加所述的黃芪細粉20重量份和磷酸氫鈣20重量份，混勻，進行干燥處理，得到干膏B;將上述干膏A和干膏B合并，進行粉碎處理，得到干膏細粉；所述的浸漬和滲漉處理中，照流浸膏劑與浸膏劑項下的滲漉法(中國藥典2005年版一部附錄I0)，用80%乙醇作溶劑，浸漬36小時后，緩緩滲漉，收集喜樹果漉液；所述的喜樹果最粗粉與喜樹果漉液的重量比為1:8;所述的稠膏C的密度為1.38~1.41g/cm3，溫度為8(TC;所述的干燥處理的溫度為50-60°C;F.向所述的莪術(shù)揮發(fā)油中，加磷酸氫鈣20重量份混勻，再與所述的干膏細粉混勻，加磷酸氫鈣至380重量份，混勻，裝入膠囊，即得成品。本實施例中的重量單位可以是克，也可以是千克；本實施例中所述的各種原料藥和化學(xué)試劑均為常規(guī)產(chǎn)品，均可在市場購買得到；本實施例中所述的各種制備方法均為常規(guī)方法；本實施例中使用的設(shè)備均為常規(guī)設(shè)備，均可在市場購買得到。本實施例中所述的復(fù)生康制劑的制備方法，比原標(biāo)準(zhǔn)WS-10199(ZD-0199)-2002中所述的方法更加優(yōu)化了關(guān)鍵的工藝參數(shù)，理由如下l.制法中主要工藝參數(shù)的確定能保證藥品的安全性、有效性及質(zhì)量均一性，體現(xiàn)了制法的科學(xué)性、合理性及可行性。原復(fù)生康膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制法項下關(guān)鍵工藝參數(shù)未明確，現(xiàn)依據(jù)國食藥監(jiān)注[2008]287號文相關(guān)要求，予于確定。2.根據(jù)試驗設(shè)計、試驗結(jié)果和驗證，確定關(guān)鍵工藝參數(shù)。如影響喜樹堿得率的因素有乙醇濃度、滲漉速度和漉液收集量.我們采用了均勻設(shè)計法，條件設(shè)計為3因素3水平，對乙醇滲漉提取喜樹果工藝條件進行研究，將每因素6個水平排列組合，其數(shù)據(jù)輸入計算機軟件SAS(美國)系統(tǒng)，進行統(tǒng)計分析，得回歸方程Y=陽7.515675E—0.2+1.425393E-0.3XX1+1.378933E-0.4*X1*X3回歸分析結(jié)果表明，在本試驗條件下，喜樹堿得率(Y)與滲漉速度(X2)無關(guān),與乙醇濃度(X1)及漉液收集量(X3)成正比。再應(yīng)用網(wǎng)格法進行優(yōu)化處理，得18組優(yōu)化結(jié)果，通過比較,確定漉液收集量為8倍量(即關(guān)鍵工藝參數(shù))。3.根據(jù)國家藥典委員會相關(guān)專家的建議，復(fù)生康制劑制備方法的改進,確定關(guān)鍵工藝參數(shù)10處，擬報國家藥典委員會。附國食藥監(jiān)注[2008]287號文相關(guān)要求中藥工藝相關(guān)問題的處理原則過渡期品種的中藥8、9類注冊申請是依據(jù)2002年12月公布實施的《藥品注冊管理辦法(試行)》和2005年5月公布實施的《藥品注冊管理辦法》，按照工藝無質(zhì)的改變申請減免臨床試驗直接申報生產(chǎn)的改劑型注冊申請，以及申報生產(chǎn)的仿制藥申請。減免臨床試驗的前提是藥用物質(zhì)的一致性，處方、工藝等的一致是保證改劑型產(chǎn)品與原劑型的一致，仿制藥與已上市藥品一致的基礎(chǔ)。在技術(shù)審評中有部分改劑型及仿制品種的中藥注冊申請存在原質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)工藝不明確的情況，難以保證申請注冊的品種與原劑型或已有國家標(biāo)準(zhǔn)品種的一致性，此外，此類品種還應(yīng)進行必要的工藝研究，以說明所用工藝的合理性。為科學(xué)、合理地評價減免臨床試驗改劑型及仿制的有效性和安全性，保證公眾用藥安全，根據(jù)國家局《關(guān)于印發(fā)過渡期品種集中審評工作方案的通知》(國食藥監(jiān)辦(2008)128號)的精神，結(jié)合相關(guān)的法規(guī)和技術(shù)要求，在評價質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中制法不明確及工藝研究相關(guān)問題時應(yīng)遵循以下原則一、關(guān)于國家標(biāo)準(zhǔn)中制法不明確的判斷及處理原則(一)制法中主要工藝參數(shù)的確定原則制法中主要工藝參數(shù)的確定原則是保證藥品的安全性、有效性及質(zhì)量均一性，體現(xiàn)制法的科學(xué)性、合理性及可行性。主要工藝參數(shù)是指前處理、提取、純化及成型工藝等步驟中的關(guān)鍵參數(shù)。(二)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制法項下工藝是否明確的處理原則1.國家標(biāo)準(zhǔn)中無制法項，屬工藝不明確。2.國家標(biāo)準(zhǔn)中有制法項，但關(guān)鍵工藝參數(shù)不明確，屬工藝不明確。(三)關(guān)鍵工藝參數(shù)是否明確的判斷標(biāo)準(zhǔn)1.前處理工藝參數(shù)粉碎工藝制法中如有藥材是粉碎后直接入藥的，應(yīng)明確粉碎部分藥材的用量。2.提取工藝參數(shù)(1)煎煮或回流提取工藝中提取溶媒(包括溶媒濃度)、提取次數(shù)、提取時間均應(yīng)明確。(2)滲漉提取中應(yīng)明確滲漉溶媒(包括溶媒濃度)、溶媒用量或滲漉液收集量。滲漉終點明確的視為收集量明確。(3)浸泡工藝中浸泡溶媒(包括溶媒濃度)、浸泡時間均應(yīng)明確。(4)蒸餾提取中標(biāo)明"提取揮發(fā)油"，未明確采用何種方法，則視為采用常規(guī)的水蒸汽蒸餾方法，屬工藝參數(shù)明確。(5)水解工藝中溶媒種類、酸堿種類、用量(pH值)、水解時間、水解溫度均應(yīng)明確。(6)發(fā)酵工藝(包括列于制法項或附在質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)后的)涉及因素較多(如菌種、培養(yǎng)基、酶類、溫度等)，難以保證與原標(biāo)準(zhǔn)工藝的一致性，一般認為工藝參數(shù)不明確。六神曲等自然發(fā)酵的工藝除外。(7)其他提取工藝參數(shù)提取物制備工藝參數(shù)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中在制法項或標(biāo)準(zhǔn)最后附有提取物的制備方法，參照關(guān)鍵工藝參數(shù)的判斷原則進行判斷。若提取物的制備工藝不明確，屬標(biāo)準(zhǔn)不明確。3.純化工藝參數(shù)(1)醇沉工藝中醇沉后的含醇量應(yīng)明確。(2)水沉工藝中水沉的加水量應(yīng)明確。(3)柱分離工藝中分離介質(zhì)種類、用量、徑高比，洗脫溶媒種類、用量、流速、上樣量等均應(yīng)明確。(4)萃取純化中萃取溶媒、溶媒量、萃取次數(shù)均應(yīng)明確。(5)酸堿處理中加入的酸堿種類、用量(pH值)均應(yīng)明確。4.成型工藝參數(shù)一些特殊制劑(泡騰制劑、滴丸、分散片、軟膠囊等)主要輔料的種類應(yīng)明確。二、關(guān)于工藝研究相關(guān)問題的判斷標(biāo)準(zhǔn)及處理原則申請減免臨床試驗的改劑型及仿制藥的注冊申請，相關(guān)國家標(biāo)準(zhǔn)的關(guān)鍵工藝參數(shù)應(yīng)明確，仿制藥的藥用物質(zhì)基礎(chǔ)應(yīng)與被仿制藥一致，改劑型品種與原劑型相比工藝應(yīng)無質(zhì)的改變，在以上前提下，還應(yīng)對其他一般工藝參數(shù)進行研究。未對國家標(biāo)準(zhǔn)中不明確的工藝參數(shù)進行研究，屬于以下情形的，可認為該品種的工藝研究不符合要求1.提取未對原標(biāo)準(zhǔn)中不明確的一般提取工藝參數(shù)進行研究的，如未對煎煮提取的加水量等進行有針對性研究的。2.純化未對原標(biāo)準(zhǔn)中不明確的一般純化工藝參數(shù)進行研究的，如未對大孔樹脂純化工藝的藥液上樣濃度等進行研究的。3.制劑未根據(jù)所采用制劑技術(shù)的特點進行相應(yīng)研究的，如采用環(huán)糊精包合揮發(fā)油，未對包合條件進行研究的。未根據(jù)制劑的特點進行相應(yīng)的制劑成型工藝研究的，如改劑型時未對制劑處方(輔料種類及用量)等進行考察的；由難溶性的有效成分制成的口服固體制劑，未在制劑處方篩選時對溶出度進行考察的。4.試驗方法試驗設(shè)計不合理的，如正交試驗的因素(如水提與醇沉工藝一并考察)、水平或指標(biāo)選擇不當(dāng)?shù)?；正交試驗研究中存在明顯錯誤的。權(quán)利要求1.一種復(fù)生康制劑，原料中包括蒲葵子、喜樹果、莪術(shù)、柴胡、絞股藍、香菇、黃芪、甘草，其重量份數(shù)比為300∶275∶125∶125∶125∶90∶125∶40，其特征在于每0.38克復(fù)生康制劑中，含有喜樹果按喜樹堿C20H16N2O4計，為0.09-0.20毫克。2.—種復(fù)生康制劑的質(zhì)量檢測方法，該制劑的原料中包括蒲葵子、喜樹果、莪術(shù)、柴胡、絞股藍、香菇、黃芪、甘草，其重量份數(shù)比為300:275:125:125:125:90:125:40;其特征在于每0.38克復(fù)生康制劑中，含有喜樹果按喜樹堿C2()H16N20jt，為0.09-0.20毫克；所述的復(fù)生康制劑的質(zhì)量檢測方法所檢測項目為內(nèi)容物形態(tài)觀察檢測，蒲葵子提取物鑒別對照檢測，喜樹堿鑒別對照檢測，莪術(shù)提取物鑒別對照檢測，黃芪甲甙鑒別對照檢測，喜樹堿含量對照檢測。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的復(fù)生康制劑的質(zhì)量檢測方法，其特征在于內(nèi)容物形態(tài)觀察檢測的方法為顯微鏡鏡檢，蒲葵子提取物鑒別對照檢測、喜樹堿鑒別對照檢測，莪術(shù)提取物鑒別對照檢測、黃芪甲甙鑒別對照檢測的方法均為薄層色譜法，喜樹堿含量對照檢測的方法為高效液相色譜法。4.根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的復(fù)生康制劑的質(zhì)量檢測方法，其特征在于，內(nèi)容物形態(tài)觀察檢測的結(jié)果為該內(nèi)容物中，纖維成束或離散，壁厚，表面有縱裂紋，兩端成掃帚狀或平截狀。5.根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的復(fù)生康制劑的質(zhì)量檢測方法，其特征在于，所述的各項檢測的過程為I.蒲葵子提取物鑒別對照檢測A.復(fù)生康制劑供試品溶液制備a.取所述的復(fù)生康制劑，加入甲醇溶解，得到復(fù)生康制劑溶液；所述的復(fù)生康制劑與甲醇的重量比為0.2-3:2;b.將所述復(fù)生康制劑溶液進行超聲提取處理15-25分鐘，再靜置30-45分鐘，得到上清液；吸取該上清液作為供試品溶液；B.蒲葵子提取物對照品溶液制備a.取蒲葵子對照藥材加水煎煮0.5-1.5小時，濾過，得到蒲葵子一級濾液；所述的蒲葵子與水的重量比為0.7-6:20;b.將所述的蒲葵子一級濾液進行濃縮處理，得到蒲葵子濃縮液；向該濃縮液中加入乙醇，過濾，得到蒲葵子二級濾液；所述的蒲葵子濃縮液和蒲葵子一級濾液的體積比為20:3;所述的蒲葵子濃縮液與乙醇的體積比為1:2;C.將所述的蒲葵子二級濾液蒸發(fā)處理，除去乙醇，得到蒲葵子殘渣，加入甲醇，得到蒲葵子提取物對照品溶液；所述的甲醇與蒲葵子對照藥材的重量比為0.5:0.7-6;C.薄層色譜法檢測吸取所述的復(fù)生康制劑供試品溶液、蒲葵子提取物對照品溶液，分別點樣于同一硅膠G薄層板上，進行展開處理，并檢視；檢視的結(jié)果為復(fù)生康制劑供試品溶液色譜中，在與蒲葵子對照品溶液色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的主斑點；所述的展開劑為氯仿-丙酮-甲醇-乙酸混合溶液，該混合溶液中，氯仿、丙酮、甲醇、乙酸的體積比為14-3.5:4-1:3-0.8:1-0.3;顯色處理的參數(shù)為顯色劑為2%三氯化鐵溶液與1%鐵氰化鉀溶液的混合溶液，該混合溶液中，2%三氯化鐵溶液與1%鐵氰化鉀溶液的體積比為1:1;II.喜樹堿鑒別對照檢測A.復(fù)生康制劑供試品溶液制備a.取所述的復(fù)生康制劑，加入甲醇溶解，得到復(fù)生康制劑溶液；所述的復(fù)生康制劑與水的重量比為0.2-3:2;b.將所述復(fù)生康制劑溶液進行超聲提取處理15-25分鐘，再靜置30-45分鐘，得到上清液；吸取該上清液作為供試品溶液；B.喜樹堿對照品溶液制備取喜樹堿對照品溶解于氯仿-乙醇混合溶液，得到喜樹堿對照品溶液；該溶液的濃度為lmg/ml;所述的氯仿-乙醇混合溶液中，氯仿和乙醇的體積比為l:1;C.薄層色譜法檢測吸取所述的復(fù)生康制劑供試品溶液、喜樹堿對照品溶液，分別點樣于同一硅膠H薄層板上，進行展開處理，并檢視；檢視的結(jié)果為復(fù)生康制劑供試品溶液色譜中，在與喜樹堿對照品溶液色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的亮藍色的熒光斑點；所述的展開處理中，所述的展開劑為氯仿-丙酮混合溶液，該混合溶液中，氯仿與丙酮的體積比為14-3.5:6誦1.5;III.莪術(shù)鑒別對照檢測A.復(fù)生康制劑供試品溶液制備-a.取所述的復(fù)生康制劑，加入乙醚溶解，得到復(fù)生康制劑溶液；所述的復(fù)生康制劑與乙醚的重量比為1.7-15:10;b.將所述復(fù)生康制劑溶液進行超聲提取處理10-20分鐘，再靜置30-45分鐘，得到上清液；吸取該上清液作為供試品溶液；B.莪術(shù)提取物對照品溶液制備a.取處方項下入藥的莪術(shù)對照藥材3-5個，進行粉碎處理，得到莪術(shù)細粉；向該細粉中加入乙醚，得到莪術(shù)細粉和乙醚的混合物；所述的莪術(shù)細粉與乙醚的重量比為0.3-3:10;b.將所述的莪術(shù)細粉和乙醚的混合物進行超聲提取處理10-20分鐘，再靜置30-45分鐘，得到莪術(shù)上清液；吸取所述的莪術(shù)上清液作為莪術(shù)提取物對照品溶液；C.薄層色譜法檢測吸取所述的復(fù)生康制劑供試品溶液、喜樹堿對照品溶液，分別點樣于同一硅膠H薄層板上，進行展開處理，并檢視；檢視的結(jié)果為復(fù)生康制劑供試品溶液色譜中，在與莪術(shù)提取物對照品溶液色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的櫻桃紅色的主斑點；所述的展開處理中，所述的展開劑為石油醚-醋酸乙酯混合溶液，該混合溶液中，石油醚與醋酸乙酯的體積比為18-4.5:2-0.5;IV.黃芪甲甙鑒別對照檢測A.復(fù)生康制劑供試品溶液制備a.取所述的復(fù)生康制劑，加入乙醚溶解，得到復(fù)生康制劑溶液；所述的復(fù)生康制劑與乙醚的重量比為1.7-15:10;b.將所述復(fù)生康制劑溶液進行超聲提取處理10-20分鐘，再靜置30-45分鐘，得到一級殘渣；將所述的一級殘渣蒸發(fā)處理，除去乙醚，得到二級殘渣；c.向所述的二級殘渣中第一次加水煎煮，再進行第一次過濾，得到第一次濾液和第一次濾渣；向所述的第二次濾渣中加水煎煮，再進行第二次過濾，得到第二次濾液；合并所述的第一次濾液和第二次濾液，得到總濾液；所述的復(fù)生康制劑與每次加水的重量比為1.7-15:20;所述的每次煎煮時間為20-35分鐘；d.將所述的總濾液用正丁醇進行2次提取處理，合并每次得到的提取液，得到總提取液；所述的總濾液與每次提取處理中的正丁醇的體積比為40:20;e.將所述的總提取液用氨試液進行2次洗滌處理，每次保留總提取液層，得到氨試液洗滌處理過的總提取液；所述的洗滌處理中，總提取液與第一次洗滌處理的氨試液的體積比為40:20;所述的2次洗漆處理中，氨試液每次的體積比為20:20;f.將所述的氨試液洗滌處理過的總提取液中的正丁醇蒸干，得到三級殘渣；向所述的三級殘渣中加入水，得到三級殘渣溶液；所述的復(fù)生康制劑與水的重量比為1.7-15:5;g.將所述的三級殘渣溶液通過吸附樹脂柱，用水對該吸附樹脂柱進行洗脫處理，棄去水洗脫液；再用40%的乙醇溶液對該吸附樹脂柱進行洗脫處理，棄去40%的乙醇溶液洗脫液；再用70%的乙醇溶液對該吸附樹脂柱進行洗脫處理，收集70%的乙醇溶液洗脫液；所述的三級殘渣溶液、水、40%的乙醇溶液、70%的乙醇溶液的體積比為5:80:100:80;h.將所述的70%的乙醇溶液洗脫液蒸干，得到四級殘渣；向所述的四級殘渣中加入甲醇，得到四級殘渣的甲醇溶液，即為復(fù)生康制劑供試品溶液；所述的復(fù)生康制劑與甲醇的重量比為1.7-15:0.5;B.黃芪甲甙對照品溶液制備取黃芪甲甙對照品溶解于甲醇，得到黃芪甲甙對照品溶液；該溶液的濃度為lmg/ml;C.薄層色譜法檢測吸取所述的復(fù)生康制劑供試品溶液、黃芪甲甙對照品溶液，分別點樣于同一硅膠G薄層板上，進行展開處理，并檢視；檢視的結(jié)果為在復(fù)生康制劑供試品溶液色譜中，在與黃芪甲甙對照品溶液色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點；所述的展開處理中，所述的展開劑為氯仿-甲醇-水混合溶液，該混合溶液中，氯仿、甲醇、水的體積比為26-6.5:14-3.5:4-1;V.喜樹堿含量對照檢測A.復(fù)生康制劑供試品溶液制備精密配置復(fù)生康制劑供試品溶液；B.喜樹堿對照品溶液制備精密稱取喜樹堿對照品，加入甲醇配制成5ug/ml的溶液，即為喜樹堿對照品溶液；C.高效液相色譜法測定-分別精密吸取復(fù)生康制劑供試品溶液與喜樹堿對照品溶液各20^1，注入液相色譜儀，測定，即得；測定結(jié)果為每0.38克復(fù)生康制劑中，含有喜樹果按喜樹堿C2oHwN204計，為0.09-0.20毫克；在所述的高效液相色譜法中，用十八烷基硅垸鍵合硅膠為填充劑，甲醇-水為流動相，甲醇與水的體積比為28-110:23-90o6.根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的復(fù)生康制劑的質(zhì)量檢測方法，其特征在于，所述的各項檢測的過程為I.蒲葵子提取物鑒別對照檢測A.復(fù)生康制劑供試品溶液制備所述的復(fù)生康制劑與甲醇的重量比為l:2;B.蒲葵子提取物對照品溶液制備-所述的蒲葵子對照藥材與水的重量比為2:20;將所述的蒲葵子二級濾液蒸發(fā)處理，除去乙醇，得到蒲葵子殘渣，加入甲醇，得到蒲葵子提取物對照品溶液；所述的甲醇與蒲葵子對照藥材的重量比為0.5:2;C.薄層色譜法檢測所述的展開劑為氯仿-丙酮-甲醇-乙酸混合溶液，該混合溶液中，氯仿、丙酮、甲醇、乙酸的體積比為7:2:1.5:0.5;II.喜樹堿鑒別對照檢測A.復(fù)生康制劑供試品溶液制備所述的復(fù)生康制劑與甲醇的重量比為l:2;C.薄層色譜法檢測所述的展開劑為氯仿-丙酮混合溶液，該混合溶液中，氯仿與丙酮的體積比為7:3;in.莪術(shù)鑒別對照檢測A.復(fù)生康制劑供試品溶液制備所述的復(fù)生康制劑與乙醚的重量比為5:10;B.莪術(shù)提取物對照品溶液制備所述的莪術(shù)細粉與乙醚的重量比為1:10;C.薄層色譜法檢測所述的展開劑為石油醚-醋酸乙酯混合溶液，該混合溶液中，石油醚與醋酸乙酯的體積比為9:1;IV.黃芪甲甙鑒別對照檢測A.復(fù)生康制劑供試品溶液制備所述的復(fù)生康制劑與乙醚的重量比為5:10;向所述的二級殘渣中第一次加水煎煮，再進行第一次過濾，得到第一次濾液和第一次濾渣；向所述的第二次濾渣中加水煎煮，再進行第二次過濾，得到第二次濾液；合并所述的第一次濾液和第二次濾液，得到總濾液;所述的復(fù)生康制劑與每次加水的重量比為5:20;將所述的氨試液洗滌處理過的總提取液中的正丁醇蒸干，得到三級殘渣；向所述的三級殘渣中加入水，得到三級殘渣溶液；所述的復(fù)生康制劑與水的重量比為5:5;將所述的70%的乙醇溶液洗脫液蒸干，得到四級殘渣；向所述的四級殘渣中加入甲醇，得到四級殘渣的甲醇溶液，即為復(fù)生康制劑供試品溶液;所述的復(fù)生康制劑與甲醇的重量比為5:0.5;C.薄層色譜法檢測-所述的展開劑為氯仿-甲醇-水混合溶液，該混合溶液中，氯仿、甲醇、水的體積比為13:7:2;V.喜樹堿含量對照檢測高效液相色譜法測定甲醇-水為流動相，甲醇與水的體積比為55:45p7.根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的復(fù)生康制劑的質(zhì)量檢測方法，其特征在于，所述的各項檢測的過程為I.蒲葵子提取物鑒別對照檢測A.復(fù)生康制劑供試品溶液制備所述的復(fù)生康制劑與甲醇的重量比為0.3:2;B.蒲葵子提取物對照品溶液制備所述的蒲葵子對照藥材與水的重量比為0.3:20;將所述的蒲葵子二級濾液蒸發(fā)處理，除去乙醇，得到蒲葵子殘渣，加入甲醇，得到蒲葵子提取物對照品溶液；所述的甲醇與蒲葵子對照藥材的重量比為0.5:0.3;C.薄層色譜法檢測所述的展開劑為氯仿-丙酮-甲醇-乙酸混合溶液，該混合溶液中，氯仿、丙酮、甲醇、乙酸的體積比為4:1.5:0.9:0.3;II.喜樹堿鑒別對照檢測A.復(fù)生康制劑供試品溶液制備所述的復(fù)生康制劑與甲醇的重量比為0.3:2;C.薄層色譜法檢測所述的展開劑為氯仿-丙酮混合溶液，該混合溶液中，氯仿與丙酮的體積比為4:1.8;III.莪術(shù)鑒別對照檢測A.復(fù)生康制劑供試品溶液制備所述的復(fù)生康制劑與乙醚的重量比為2:10;B.莪術(shù)提取物對照品溶液制備所述的莪術(shù)細粉與乙醚的重量比為0.5:10;C.薄層色譜法檢測所述的展開劑為石油醚-醋酸乙酯混合溶液，該混合溶液中，石油醚與醋酸乙酯的體積比為5:0.8;IV.黃芪甲甙鑒別對照檢測A.復(fù)生康制劑供試品溶液制備所述的復(fù)生康制劑與乙醚的重量比為2:10;向所述的二級殘渣中第一次加水煎煮，再進行第一次過濾，得到第一次濾液和第一次濾渣；向所述的第二次濾渣中加水煎煮，再進行第二次過濾，得到第二次濾液；合并所述的第一次濾液和第二次濾液，得到總濾液；所述的復(fù)生康制劑與每次加水的重量比為2:20;將所述的氨試液洗滌處理過的總提取液中的正丁醇蒸干，得到三級殘渣；向所述的三級殘渣中加入水，得到三級殘渣溶液；所述的復(fù)生康制劑與水的重量比為2:5;將所述的70%的乙醇溶液洗脫液蒸干，得到四級殘渣；向所述的四級殘渣中加入甲醇，得到四級殘渣的甲醇溶液，即為復(fù)生康制劑供試品溶液；所述的復(fù)生康制劑與甲醇的重量比為2:0.5;C.薄層色譜法檢測所述的展開劑為氯仿-甲醇-水混合溶液，該混合溶液中，氯仿、甲醇、水的體積比為7:4:1;V.喜樹堿含量對照檢測高效液相色譜法測定甲醇-水為流動相，甲醇與水的體積比為28:2308.根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的復(fù)生康制劑的質(zhì)量檢測方法，其特征在于，所述的各項檢測的過程為I.蒲葵子提取物鑒別對照檢測A.復(fù)生康制劑供試品溶液制備所述的復(fù)生康制劑與甲醇的重量比為3:2;B.蒲葵子提取物對照品溶液制備-所述的蒲葵子對照藥材與水的重量比為6:20;將所述的蒲葵子二級濾液蒸發(fā)處理，除去乙醇，得到蒲葵子殘渣，加入甲醇，得到蒲葵子提取物對照品溶液；所述的甲醇與蒲葵子對照藥材的重量比為0.5:6;C.薄層色譜法檢測所述的展開劑為氯仿-丙酮-甲醇-乙酸混合溶液，該混合溶液中，氯仿、丙酮、甲醇、乙酸的體積比為14:4:3:1;II.喜樹堿鑒別對照檢測A.復(fù)生康制劑供試品溶液制備所述的復(fù)生康制劑與甲醇的重量比為3:2;C.薄層色譜法檢測所述的展開劑為氯仿-丙酮混合溶液，該混合溶液中，氯仿與丙酮的體積比為14:8;III.莪術(shù)鑒別對照檢測A.復(fù)生康制劑供試品溶液制備所述的復(fù)生康制劑與乙醚的重量比為15:10;B.莪術(shù)提取物對照品溶液制備所述的莪術(shù)細粉與乙醚的重量比為3:10;C.薄層色譜法檢測所述的展開劑為石油醚-醋酸乙酯混合溶液，該混合溶液中，石油醚與醋酸乙酯的體積比為16:1;IV.黃芪甲甙鑒別對照檢測A.復(fù)生康制劑供試品溶液制備所述的復(fù)生康制劑與乙醚的重量比為15:10;向所述的二級殘渣中第一次加水煎煮，再進行第一次過濾，得到第一次濾液和第一次濾渣；向所述的第二次濾渣中加水煎煮，再進行第二次過濾，得到第二次濾液；合并所述的第一次濾液和第二次濾液，得到總濾液；所述的復(fù)生康制劑與每次加水的重量比為15:20;將所述的氨試液洗滌處理過的總提取液中的正丁醇蒸干，得到三級殘渣；向所述的三級殘渣中加入水，得到三級殘渣溶液；所述的復(fù)生康制劑與水的重量比為15:5;將所述的70%的乙醇溶液洗脫液蒸干，得到四級殘渣；向所述的四級殘渣中加入甲醇，得到四級殘渣的甲醇溶液，即為復(fù)生康制劑供試品溶液;所述的復(fù)生康制劑與甲醇的重量比為15:0.5;C.薄層色譜法檢測所述的展開劑為氯仿-甲醇-水混合溶液，該混合溶液中，氯仿、甲醇、水的體積比為25:14:4;V.喜樹堿含量對照檢測高效液相色譜法測定甲醇-水為流動相，甲醇與水的體積比為110:90。9.一種復(fù)生康制劑的制備方法，該制劑的原料中包括蒲葵子、喜樹果、莪術(shù)、柴胡、絞股藍、香菇、黃芪、甘草，其重量份數(shù)比為300:275:125:125:125:90:125:40;其特征在于每0.38克復(fù)生康制劑中，含有喜樹果按喜樹堿C2。HwN204計，為0.09-0.20毫克；制備步驟為A.將所述的黃芪進行粉碎處理，得到黃芪細粉；B.將所述的莪術(shù)進行粉碎處理，得到莪術(shù)粗粒；將該莪術(shù)粗粒進行蒸餾提取處理，得到莪術(shù)揮發(fā)油；將蒸餾后得到的水溶液，另取容器收集;所述的蒸餾提取處理中，莪術(shù)與水的重量之比為l:6;C.將所述的蒲葵子、絞股藍、柴胡、甘草加水煎煮2次，每次1.5-2.5小時，合并煎液，進行第一次過濾處理，得到濾液A;將濾液A與上述莪術(shù)蒸餾后得到的水溶液合并，濃縮為的清膏；向該清膏中加乙醇至含醇量為63%，攪勻，密閉，靜置20-28小時，優(yōu)選為24小時，進行第二次過濾處理，得到濾液B;將濾液B濃縮得到稠膏A;所述的2次煎煮中，蒲葵子、絞股藍、柴胡、甘草的總重量與水的重量之比分別為l:10和1:8;D.將所述的香菇加水煎煮3次，每次0.8-1.5小時，得到香菇煎液；將每次得到的香菇煎液進行過濾處理，得到香恭濾液，合并每次得到的香菇濾液，得到香菇總濾液；將所述的香菇總濾液濃縮得到稠膏B，與所述的稠膏A合并，再加入所述的黃芪細粉105重量份和磷酸磷酸氫鈣50重量份，混勻，進行干燥處理，得到干膏A;所述的3次煎煮中，香菇和水的重量比分別為1:8、1:6、和1:4;E.將所述的喜樹果粉碎成最粗粉，進行浸漬和滲漉處理，得到喜樹果漉液；將該喜樹果漉液濃縮得到稠膏C，加所述的黃芪細粉20重量份和磷酸氫鈣20重量份，混勻，進行干燥處理，得到干膏B;將上述干膏A和干膏B合并，進行粉碎處理，得到干膏細粉；所述的浸漬處理的時間為36小時；所述的浸漬和滲漉處理中，喜樹果最粗粉與喜樹果漉液的重量比為1:8;F.向所述的莪術(shù)揮發(fā)油中，加磷酸氫鈣20重量份混勻，再與所述的干膏細粉混勻，加磷酸氫鈣至380重量份，混勻，裝入膠囊，即得成品。全文摘要本發(fā)明提供一種復(fù)生康制劑及其制備方法和質(zhì)量檢測方法；該制劑原料中含有蒲葵子、喜樹果、莪術(shù)、柴胡、絞股藍、香菇、黃芪、甘草；制備方法為將黃芪進行粉碎成黃芪細粉，將莪術(shù)提取得到揮發(fā)油和水溶液，將其他原料藥處理，并加入莪術(shù)水溶液和黃芪細粉得到干膏，將該干膏與揮發(fā)油混勻后裝入膠囊即得成品。檢測項目為蒲葵子提取物鑒別對照檢測，喜樹堿鑒別對照檢測，莪術(shù)提取物鑒別對照檢測，黃芪甲甙鑒別對照檢測，喜樹堿含量對照檢測，內(nèi)容物形態(tài)觀察檢測；每0.38克復(fù)生康制劑中，含有喜樹堿C₂₀H₁₆N₂O₄0.09-0.20毫克；該制備方法重新確定關(guān)鍵工藝參數(shù)，能保證藥品的安全性、有效性、質(zhì)量均一性；該檢測方法定性和定量相結(jié)合、方法嚴謹、數(shù)據(jù)可靠。文檔編號G01N30/00GK101357207SQ20081022256公開日2009年2月4日申請日期2008年9月22日優(yōu)先權(quán)日2008年9月22日發(fā)明者鋒闕申請人:鋒闕