專利名稱：：心寧膠囊的質量檢測方法
技術領域：
：本發(fā)明屬于中藥制劑的質量控制領域，特別涉及心寧膠囊的質量檢測方法。
背景技術：
：心寧膠囊是由丹參300g、槐花150g、川芎150g、三七54g、紅花150g、降香150g、赤芍150g。以上七味，三七、川芎粉碎成細粉，過篩，備用；其余丹參等五味，第一次加8倍量水煎煮3小時，第二次加6倍量水煎煮2小時，第三次加6倍量水煎煮1小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮成相對密度為1.051.15(6070°C)的清膏，干燥，與上述細粉混勻，制粒，填充，制成1000粒，每粒裝0.38g，即得。系由已有國家標準的藥品"心寧片"改劑型而得。原心寧片質量標準中含量測定，是檢測處方中丹參藥材所含的丹參素鈉，進行丹參素鈉含量方法學研究，加樣回收率達不到要求，因而無法有效控制其質量。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于克服上述缺點而提供的一種方法穩(wěn)定、重現(xiàn)性好、有利于對產(chǎn)品質量進行控制的心寧膠囊的質量檢測方法。本發(fā)明的一種心寧膠囊的質量檢測方法，包括如下步驟(1)鑒別:a、取本品內(nèi)容物3g，加乙醚50ml，超聲處理20分鐘，濾過，藥渣備用。濾液揮干，殘渣加乙酸乙酯lml使溶解，作為供試品溶液。另取川芎對照藥材lg，加乙醚20ml，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各5iU，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯(9:l)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。b、取(a)項下備用藥渣，揮干溶劑，加甲醇50ml，加熱回流30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水50ml使溶解，用水飽和正丁醇提取2次，每次30ml，合并正丁醇液，用氨試液洗滌2次，每次60ml，正丁醇液蒸干，殘渣加甲醇lml使溶解，作為供試品溶液。另取三七對照藥材0.5g，加甲醇20ml，超聲處理30分鐘，同法制成對照藥材溶液。再取三七皂苷Rl對照品，加甲醇制成每lml含lmg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005版一部附錄VIB)試驗，吸取上述三種溶液各4iU，分別點于同一硅膠G薄層板上，以二氯甲烷-甲醇-水(65:35:IO)I(TC放置12小時的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105t:加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜及對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。c、取本品內(nèi)容物3g，加乙醇10ml，振搖5分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇2ml使溶解，作為供試品溶液。另取蘆丁對照品，加甲醇制成每lml含4mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005版一部附錄VIB)試驗，吸取供試品溶液10iU，對照品溶液5111，分別點于同一硅膠6薄層板上，以乙酸乙酯-甲酸-水(18:3:4.5)的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以三氯化鋁試液，熱風吹至斑點顯色清晰，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。d、取本品內(nèi)容物3g，加乙醇溶液20ml，加熱回流30分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。另取赤芍對照藥材0.5g，加乙醇10ml，振搖5分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇2ml溶解，作為對照藥材溶液。再取芍藥苷對照品，加甲醇制成每lml含2mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005版一部附錄VIB)試驗，吸取供試品溶液10iU，對照藥材溶液5iU，對照品溶液10iU，分別點于同一硅膠G薄層板上，以二氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-濃氨試液(s:i:4:i)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，在105t:加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜及對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。(2)含量測定照高效液相色譜法(中國藥典2005版一部附錄VID)測定。a、色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-乙腈-水-乙酸(28:10:61:1)為流動相；檢測波長為286nm;流速為O.8ml/分鐘；柱溫25°C。理論板數(shù)按丹酚酸B峰計算應不低于2000。b、對照品溶液的制備取丹酚酸B對照品適量，精密稱定，加50X甲醇制成每lml含70iig的溶液，即得。c、供試品溶液的制備取本品約0.2g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入75X甲醇50ml，密塞，稱定重量，超聲處理(功率250W，頻率34KHZ)30分鐘，放冷，再稱定重量，用75%甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。d、測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10ii1，注入液相色譜儀，測定，即得。上述的心寧膠囊的質量檢測方法，其中本品每粒含丹參以丹酚酸8((:36113。016)計，不得少于2.5mg。上述的心寧膠囊的質量檢測方法，其中還可設檢查步驟應符合膠囊劑項下有關的各項規(guī)定(中國藥典2005年版一部附錄IL)。本發(fā)明與現(xiàn)有技術相比，具有明顯的有益效果，由以上技術方案可知同一體系中對川芎、三七、蘆丁、芍藥苷進行鑒別，丹參藥材對心血管系統(tǒng)起作用的主要是丹參的水溶性成分，選用對加樣回收率能達到要求，而且重復性好的水溶液性成分丹酚酸B作為含量測定指標成分，通過色譜條件選擇、供試品溶液的制備選擇、系統(tǒng)適用性、線性關系、精密度、樣品穩(wěn)定性、樣品重現(xiàn)性、樣品加樣回收率、樣品測定等試驗確定含量測定方法，使得心寧膠囊質量更容易控制，且方法穩(wěn)定、重現(xiàn)性好。具體實施例方式以下通過試驗例來進一步說明本發(fā)明方法的有益效果?！?、鑒別1.1儀器、對照品、對照藥材、試劑和試藥儀器BYCDE薄層自動鋪板器；電子天平(十萬分之一)AE240型。試劑乙酸乙酉旨、乙醚、甲酸、丙酮、二氯甲烷、正己烷、甲醇、氨水、甲苯、硫酸、正丁醇均為分析純。對照品蘆丁對照品(批號100080-200306)、三七皂苷Rl對照品(批號110745-200415)、芍藥苷對照品(批號110736-200320)由中國藥品生物制品檢定所提供。對照藥材川芎對照藥材(批號120918-200608)、紅花對照藥材(批號120907-200408)、三七對照藥材(批號120941-200304)、降香對照藥材(批號120952-200506)由中國藥品生物制品檢定所提供。試藥心寧膠囊由貴陽新天藥業(yè)股份有限公司提供。1.2鑒別本鑒別為川芎薄層鑒別，參照心寧片質量標準鑒別(1)。確定了正文心寧膠囊川芎TLC檢查方法，經(jīng)3批中試樣品試驗，該方法穩(wěn)定，重現(xiàn)性好，且陰性無干擾。1.3鑒別本鑒別為三七薄層鑒別。參照心寧片質量標準鑒別(2)。心寧片質量標準鑒別(2)中供試品處理方法為取〔鑒別〕(1)項下備用藥渣，揮干，加甲醇50ml，超聲30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水50ml使溶解，用水飽和正丁醇提取2次，每次30ml，合并正丁醇液，用氨試液洗滌2次，每次60ml，取正丁醇液蒸干，殘渣加甲醇lml使溶解，即得。為了能充分提取，因此將提取條件改為改在哪了？取〔鑒別〕(l)項下備用藥渣，揮干，加甲醇50ml，加熱回流30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水50ml使溶解，用水飽和正丁醇提取2次，每次30ml，合并正丁醇液，用氨試液洗滌2次，每次60ml，取正丁醇液蒸干，殘渣加甲醇lml使溶解，即得。另取三七對照藥材0.5g，加甲醇20ml，超聲處理30分鐘，同法制成對照藥材溶液。再取三七皂苷R1對照品，加甲醇制成每lml含lmg的溶液，作為對照品溶液。經(jīng)過試驗，該方法分離效果較好，故列入正文。1.3.2吸附劑的選擇參照心寧片質量標準鑒別(2)，選用硅膠G，分離效果較好，故將其列入正文。1.3.3展開劑的選擇按照心寧片質量標準鑒別(2)，用二氯甲烷取代原心寧片鑒別(2)展開劑中毒性試劑三氯甲烷，即是以二氯甲烷-甲醇-水(65:35:IO)I(TC放置12小時的下層溶液為展開劑。經(jīng)過試驗，該方法分離效果較好，故列入正文。1.3.4顯色劑的選擇按照心寧片質量標準鑒別(2)，以10%硫酸乙醇溶液為顯色劑，結果斑點顯色清晰，故列入正文。綜上所述，確定了正文心寧膠囊三七TLC檢查方法，經(jīng)3批中試樣品試驗，該方法穩(wěn)定，重現(xiàn)性好，且陰性無干擾。1.4鑒別本鑒別為槐花薄層鑒別。1.4.1提取條件的選擇方法一、取本品內(nèi)容物3g，加甲醇10ml，振搖10分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。方法二、取本品內(nèi)容物3g，加乙醇10ml，振搖5分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇2ml使溶解，作為供試品溶液。另取蘆丁對照品，加甲醇制成每lml含4mg的溶液，作為對照品溶液。經(jīng)過試驗，方法二分離效果較好，故列入正文。1.4.2吸附劑的選擇選用硅膠G，分離效果較好，故將其列入正文。1.4.3展開劑的選擇方法一、以乙酸乙酯-甲酸-水(8:1:1);方法二、以乙酸乙酯-甲酸-水(18:3:4.5)上層溶液為展開劑。經(jīng)過實驗，以方法二乙酸乙酯-甲酸-水(is:3:4.5)為展開劑，分離效果較好，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點，故將方法二展開劑列入正文。1.4.4顯色劑的選擇以三氯化鋁試液為顯色劑，結果斑點在365nm下檢視清晰，故列入正文。綜上所述，確定了正文心寧膠囊槐花TLC檢查方法，經(jīng)3批中試樣品試驗，該方法穩(wěn)定、重現(xiàn)性好，且陰性無干擾。1.5鑒別本鑒別為赤芍薄層鑒別。1.5.l提取條件的選擇取本品內(nèi)容物3g，加乙醇溶液20ml，加熱回流30分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。另取赤芍對照藥材0.5g，加乙醇10ml，振搖5分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇2ml溶解，作為對照藥材溶液。再取芍藥苷對照品，加甲醇制成每lml含2mg的溶液，作為對照品溶液。經(jīng)過試驗，該方法分離效果較好，故列入正文。1.5.2吸附劑的選擇參照《中國藥典》2005年版赤芍藥材質量標準鑒別(2)，選用硅膠G，分離效果較好，故將其列入正文。1.5.3展開劑的選擇參照《中國藥典》2005年版赤芍藥材質量標準鑒別(2)，方法一、以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(40:5:io:0.2);方法二、以二氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-濃氨試液(8:i:4:i)為展開劑。經(jīng)過實驗，以方法二二氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-濃氨試液(8:i:4:i)為展開劑，分離效果較好，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點，故將方法二展開劑列入正文。1.5.4顯色劑參照《中國藥典》2005年版赤芍藥材質量標準鑒別(2)，以5%香草醛硫酸溶液為顯色劑，結果斑點顯色清晰，故列入正文。綜上所述，確定了正文心寧膠囊赤芍TLC檢查方法，經(jīng)3批中試樣品試驗，該方法穩(wěn)定、重現(xiàn)性好，且陰性無干擾。除此之外，還對方中紅花、降香進行了TLC鑒別，結果方法不可行，所以未列入質量標準草案正文。二、檢查1.1—般檢查1.1.1裝量差異按(中國藥典2005年版一部附錄IL)膠囊劑項下規(guī)定，依法檢查，結果均符合規(guī)定。1.1.2崩解時限按(中國藥典2005年版一部附錄XI1A)崩解時限檢查法規(guī)定，依法檢查，結果均符合規(guī)定。1.1.3水分按(中國藥典2005年版一部附錄IXH)水分測定法規(guī)定，依法檢查，結果均符合規(guī)定。1.1.4微生物限度檢查按《中國藥典》2005年版一部"微生物限度標準"規(guī)定，依法檢查，結果均符合規(guī)定。1.2重金屬及砷鹽檢查1.2.1重金屬檢查按《中國藥典》2005版一部附錄IXE重金屬檢查法第二法檢查。結果小于百萬分之十。1.2.2砷鹽檢查按《中國藥典》2005版一部附錄IXF砷鹽檢查法第一法檢查。結果小于百萬分之二。根據(jù)以上的檢驗結果，說明本品中重金屬、砷鹽都符合規(guī)定，且含量都很低，因此不列入質量標準草案。三、含量測定照高效液相色譜法(《中國藥典》2005年版一部附錄VID)測定。本品原劑型標準中含量測定，是檢測處方中丹參藥材所含的丹參素鈉，但我們參照原劑型含量測定的方法進行丹參素鈉含量方法學研究，結果加樣回收率達不到要求(具體數(shù)據(jù)見下表)，而資料顯示丹參藥材對心血管系統(tǒng)起作用的主要是丹參的水溶性成分，所以我們對丹參的另一水溶液性成分丹酚酸B進行了研究，結果表明該方法不僅加樣回收率能達到要求，而且重復性好，故將本品含測指標成分確定為丹酚酸B。丹參素鈉加樣回收率編號123456稱樣量(g)0.50280.44810,51730.55900.42750.4900樣品含量(mg/g)1.73加入丹參素鈉對照品的量(mg)0.999對照品峰面積389.434785供試品峰面積224.01097211.21814227.91739236.66887206.92372220.36496回收率(％)84.7284.3785.2084.6984.6584.14平均回收率(％)84.63RSD%0.43.1儀器、對照品、試劑和試藥3.1.1儀器Agilent1100型高效液相色譜儀、VWD檢測器、Agilent化學工作站；超聲波清洗器CX-250型(頻率29-34KHz，功率250W，北京醫(yī)療設備二廠)；電子天平(萬分之一)BS-210S型(塞多利斯公司)；電子天平(十萬分之一)AE240型(Mettler公司)。3.1.2對照品丹酚酸B對照品(批號111562-200504)供含量測定用，購于中國藥品生物制品檢定所。3.1.3試劑甲醇、冰醋酸為分析純；甲醇、乙腈為色譜純；水為重蒸餾水。3.1.4試藥心寧膠囊樣品由貴陽新天藥業(yè)股份有限公司提供。3.2對照品溶液的制備對照品貯備液精密稱取丹酚酸B對照品18.15mg，置50ml量瓶中，加75%甲醇溶液，溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得每lml含0.363mg的溶液。對照品溶液①精密量取上述對照品貯備溶液10ml，置50ml量瓶中，加75%甲醇溶液溶解瓶稀釋至刻度，搖勻，即得每lml含72.6iig的溶液。對照品溶液②精密量取上述對照品貯備溶液2ml，置5ml量瓶中，加75%甲醇溶液溶解瓶稀釋至刻度，搖勻，即得每lml含145.2iig的溶液。3.3色譜條件試驗方法一色譜柱十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑(伊利特0DS2C18250mmX4.6mm，5iim)流速1.0ml/分鐘檢測波長286nm供試品溶液的制備取本品約0.2g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入75%甲醇50ml，稱定重量，超聲處理(功率250W，頻率34KHZ)30分鐘，放冷，再稱定重量，用75%甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，作為供試品溶液。以甲醇-乙腈_甲酸-水(30:10:1:59)為流動相，分別精密吸取對照品溶液(C=145.g/ml)和供試品溶液各ioia，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。結果從供試品圖譜中可以看出，丹酚酸B峰與其它峰之間分離度低，峰形差，表明該流動相不能作為本實驗的色譜條件。方法二色譜柱十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑(伊利特0DS2C18250mmX4.6mm，5iim)流速0.8ml/分鐘柱溫25。C檢測波長286nm供試品溶液的制備取本品約0.2g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入75%甲醇50ml，稱定重量，超聲處理(功率250W，頻率34KHZ)30分鐘，放冷，再稱定重量，用75%甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，作為供試品溶液。以甲醇-乙腈-水-乙酸(28:10:61:l)為流動相，分別精密吸取對照品溶液(C=72.g/ml)和供試品溶液各ioia，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。結果從供試品圖譜中可以看出，丹酚酸B峰與其它峰之間有良好的分離度、峰形好、柱效高，故將該色譜條件作為本實驗的色譜條件。3.4供試品溶液的制備選擇方法l:取本品約O.2g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入75X甲醇50ml，稱定重量，超聲處理(功率250W，頻率34KHZ)15分鐘，放冷，再稱定重量，用75%甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。方法2:取本品約O.2g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入75X甲醇50ml，稱定重量，超聲處理(功率250W，頻率34KHZ)30分鐘，放冷，再稱定重量，用75%甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。方法3:取本品約O.2g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入75X甲醇50ml，稱定重量，超聲處理(功率250W，頻率34KHZ)60分鐘，放冷，再稱定重量，用75%甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。分別精密吸取丹酚酸B對照品溶液(C=72.6iig/ml)禾卩3個供試品溶液各10iU，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，結果見下表方法對照品峰面積供試品稱樣量(g)供試品峰面積丹酚酸B含量(mg/g)90.22721058.3862317.262979.656980.25251191.8311817.4930.28711288.8599917.41結論從以上試驗結果可以看出，各方法中，丹酚酸B峰與其它峰之間均有良好的分離，方法2、3含量無明顯變化，綜合考慮故將方法2列入正文，即為取本品內(nèi)容物約0.2g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入75%甲醇50ml，稱定重量，超聲處理(功率250W，頻率34KHZ)30分鐘，放冷，再稱定重量，用75%甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。3.5系統(tǒng)適用性試驗取本品約0.2g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入75%甲醇50ml，稱定重量，超聲處理(功率250W，頻率34KHZ)30分鐘，放冷，再稱定重量，用75%甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，作為供試品溶液；另取陰性樣品同法制成陰性樣品溶液。精密吸取對照品溶液(72.6iig/ml)、陰性樣品溶液和供試品溶液各10ii1注入液相色譜儀，記錄色譜圖。從色譜圖中可看出，供試品在與對照品保留時間相應的位置上有峰，且峰形好，而陰性樣品在相應的位置上無峰，說明陰性樣品對樣品測定無干擾。樣品在圖譜中的丹酚酸B峰的理論板數(shù)為4072，與其它物質有良好的分離，峰形好，綜合考慮，規(guī)定本實驗的理論塔板數(shù)按丹酚酸B峰計算，應不得低于2000。3.6線性關系試驗對照品溶液①精密量取7.2項下丹酚酸B對照品貯備液(C=0.363mg/ml)lml，置25ml量瓶中，加75%甲醇溶液稀釋至刻度，搖勻，即得每lml含0.01452mg的溶液對照品溶液②精密量取7.2項下丹酚酸B對照品貯備液(C=0.363mg/ml)2ml，置25ml量瓶中，加75%甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得每lml含0.02904mg的溶液。對照品溶液③精密量取7.2項下丹酚酸B對照品貯備液(C=0.363mg/ml)3ml，置25ml量瓶中，加75%甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得每lml含0.04356mg的溶液。對照品溶液④精密量取7.2項下丹酚酸B對照品溶液①(C=72.6iig/ml)20ml，置25ml量瓶中，加75%甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得每lml含0.05808mg的溶液。對照品溶液⑤用7.2項下丹酚酸B對照品溶液①，即為每lml含72.6yg的溶液。對照品溶液⑥用7.2項下丹酚酸B對照品溶液②，即為每lml含145.2yg的溶液。精密吸取上述6個對照品溶液各lOia，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，結果見下表序號123456對照品溶液0.014520.029040.043560.058080.072600.14520濃度(mg/ml)10<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>以峰面積為縱坐標，以濃度(mg/ml)為橫坐標作線性關系圖得線性方程Y=13578x+0.367R=0.9999擬合過原點的直線方程為Y=13582xR=0.9999將對照品濃度代入上述兩式計算，相對標準偏差小于1.0%，故可認為標準曲線過原點，回歸方程截距為零，由此含量測定可采用外標一點法計算。對照品溶液濃度在0.01452mg/ml0.14520mg/ml之間線性關系良好。3.7精密度試驗精密吸取丹酚酸B對照品溶液(C二72.6iig/ml)10iil，注入液相色譜儀，連續(xù)進樣5次，記錄色譜圖，結果見下表序號12345峰面積989.34619993.96088991.11658998.21259992.64935平均峰面積993,057118RSD0.3%實驗結果表明，該方法有良好的精密度。3.8樣品穩(wěn)定性試驗取本品(批號20061101)內(nèi)容物約0.2g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入75%甲醇50ml，稱定重量，超聲處理(功率250W，頻率34KHZ)30分鐘，放冷，再稱定重量，用75%甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，作為供試品溶液。分別精密吸取供試品溶液10ia，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，并將供試品溶液放置0、l、2、4、8、12小時后，分別精密吸取供試品溶液10iU進樣測定，記錄色譜圖，結果見下表序號0124812峰面積983.09088978.09497989.94714983.88788980,78119967.79297平均值9肌599172RSD0.8%從上述試驗結果得出，供試品溶液在12小時內(nèi)穩(wěn)定性良好。3.9樣品重重性試驗取本品(批號20061101)內(nèi)容物約0.2g(平行樣5份)，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入75%甲醇50ml，稱定重量，超聲處理(功率250W，頻率34KHZ)30分鐘，放冷，再稱定重量，用75%甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，作為供試品溶液。分別精密吸取對照品溶液(濃度為72.6iig/ml)和五份供試品溶液各10ii1進樣測定，結果見下表序號1234511<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>通過上述試驗結果得出，該方法的樣品重現(xiàn)性好。3.IO樣品加樣回收率試驗對照品溶液的制備用7.2項下丹酚酸B對照品溶液①，即為每1ml含72.6yg的溶液。取本品(批號20061101)內(nèi)容物約O.lg(平行樣6份)，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入上述丹酚酸B對照品25ml，再精密加入75%甲醇25ml，稱定重量，超聲處理(功率250W，頻率34KHZ)30分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，作為供試品溶液。分別精密吸取丹酚酸B對照品溶液(C=72.6g/ml)及上述6份供試品溶液各10iU，分別進樣測定，結果見下表M測得總量一M樣品中含丹酚酸B量<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>從上述實驗結果得出，該方法有良好的回收率。3.ll樣品測定三批中試樣品含量測定結果見下表<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>含量限度計算公式丹參藥材中丹酚酸B最低含量x丹參藥材處方量x1000-x31%(轉移率)IOOO粒根據(jù)上述計算公式計算結果為2.79mg/粒，因此規(guī)定本品每粒含丹參以丹酚酸B(C36H3。016)計，不得少于2.5mg。實施例—種心寧膠囊的質量檢測方法，包括如下步驟(1)鑒別:a、取本品內(nèi)容物3g，加乙醚50ml，超聲處理20分鐘，濾過，藥渣備用。濾液揮干，殘渣加乙酸乙酯lml使溶解，作為供試品溶液。另取川芎對照藥材lg，加乙醚20ml，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各5iU，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯(9:l)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。b、取(a)項下備用藥渣，揮干溶劑，加甲醇50ml，加熱回流30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水50ml使溶解，用水飽和正丁醇提取2次，每次30ml，合并正丁醇液，用氨試液洗滌2次，每次60ml，正丁醇液蒸干，殘渣加甲醇lml使溶解，作為供試品溶液。另取三七對照藥材0.5g，加甲醇20ml，超聲處理30分鐘，同法制成對照藥材溶液。再取三七皂苷Rl對照品，加甲醇制成每lml含lmg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005版一部附錄VIB)試驗，吸取上述三種溶液各4iU，分別點于同一硅膠G薄層板上，以二氯甲烷-甲醇-水(65:35:10)1(TC放置12小時的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105t:加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜及對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。c、取本品內(nèi)容物3g，加乙醇10ml，振搖5分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇2ml使溶解，作為供試品溶液。另取蘆丁對照品，加甲醇制成每lml含4mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005版一部附錄VIB)試驗，吸取供試品溶液10iU，對照品溶液5111，分別點于同一硅膠6薄層板上，以乙酸乙酯-甲酸-水(18:3:4.5)的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以三氯化鋁試液，熱風吹至斑點顯色清晰，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。d、取本品內(nèi)容物3g，加乙醇溶液20ml，加熱回流30分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。另取赤芍對照藥材0.5g，加乙醇10ml，振搖5分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇2ml溶解，作為對照藥材溶液。再取芍藥苷對照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005版一部附錄VIB)試驗，吸取供試品溶液10iU，對照藥材溶液5iU，對照品溶液10iU，分別點于同一硅膠G薄層板上，以二氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-濃氨試液(s:i:4:i)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，在105t:加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜及對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。(2)檢查應符合膠囊劑項下有關的各項規(guī)定(中國藥典2005年版一部附錄IL)。(3)含量測定照高效液相色譜法(中國藥典2005版一部附錄VID)測定。a、色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-乙腈-水-乙酸(28:10:61:1)為流動相；檢測波長為286nm;流速為0.8ml/分鐘；柱溫25°C。理論板數(shù)按丹酚酸B峰計算應不低于2000。b、對照品溶液的制備取丹酚酸B對照品適量，精密稱定，加50X甲醇制成每lml含70iig的溶液，即得。c、供試品溶液的制備取本品約0.2g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入75X甲醇50ml，密塞，稱定重量，超聲處理(功率250W，頻率34KHZ)30分鐘，放冷，再稱定重量，用75%甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。d、測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10ii1，注入液相色譜儀，測定，即得。本品每粒含丹參以丹酚酸8((:36113。016)計，不得少于2.5mg。權利要求一種心寧膠囊的質量檢測方法，包括如下步驟(1)鑒別a、取本品內(nèi)容物3g，加乙醚50ml，超聲處理20分鐘，濾過，藥渣備用；濾液揮干，殘渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作為供試品溶液；另取川芎對照藥材1g，加乙醚20ml，同法制成對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以體積比9∶1正己烷-乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；b、取a項下備用藥渣，揮干溶劑，加甲醇50ml，加熱回流30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水50ml使溶解，用水飽和正丁醇提取2次，每次30ml，合并正丁醇液，用氨試液洗滌2次，每次60ml，正丁醇液蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取三七對照藥材0.5g，加甲醇20ml，超聲處理30分鐘，同法制成對照藥材溶液；再取三七皂苷R1對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各4μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以體積比65∶35∶10二氯甲烷-甲醇-水10℃放置12小時的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜及對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；c、取本品內(nèi)容物3g，加乙醇10ml，振搖5分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇2ml使溶解，作為供試品溶液；另取蘆丁對照品，加甲醇制成每1ml含4mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液10μl，對照品溶液5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以體積比18∶3∶4.5乙酸乙酯-甲酸-水的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以三氯化鋁試液，熱風吹至斑點顯色清晰，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；d、取本品內(nèi)容物3g，加乙醇溶液20ml，加熱回流30分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液；另取赤芍對照藥材0.5g，加乙醇10ml，振搖5分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇2ml溶解，作為對照藥材溶液；再取芍藥苷對照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液10μl，對照藥材溶液5μl，對照品溶液10μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以體積比8∶1∶4∶1二氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-濃氨試液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜及對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；(2)含量測定照高效液相色譜法測定；a、色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以體積比28∶10∶61∶1甲醇-乙腈-水-乙酸為流動相；檢測波長為286nm；流速為0.8ml/分鐘；柱溫25℃；理論板數(shù)按丹酚酸B峰計算應不低于2000；b、對照品溶液的制備取丹酚酸B對照品適量，精密稱定，加50％甲醇制成每1ml含70μg的溶液，即得；c、供試品溶液的制備取本品約0.2g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入75％甲醇50ml，密塞，稱定重量，功率250W、頻率34KHZ超聲處理30分鐘，放冷，再稱定重量，用75％甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；d、測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得。2.如權利要求1所述的心寧膠囊的質量檢測方法，其中本品每粒含丹參以丹酚酸B計，不得少于2.5mg。3.權利要求2所述的心寧膠囊的質量檢測方法，其中檢查應符合膠囊劑項下有關的各項規(guī)定。全文摘要本發(fā)明公開了一種心寧膠囊的質量檢測方法，包括如下步驟鑒別川芎、三七、蘆丁、芍藥苷TLC檢查；含量測定照高效液相色譜法測定；a、色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗b、對照品溶液的制備取丹酚酸B對照品適量，精密稱定，加50％甲醇制成每1ml含70μg的溶液，即得。c、供試品溶液的制備d、測定法。檢查應符合膠囊劑項下有關的各項規(guī)定。本方法穩(wěn)定、重現(xiàn)性好、有利于對產(chǎn)品質量進行控制。文檔編號G01N30/90GK101703583SQ20091010291公開日2010年5月12日申請日期2009年11月30日優(yōu)先權日2009年11月30日發(fā)明者董大倫申請人:貴陽新天藥業(yè)股份有限公司