專利名稱：：同時(shí)測(cè)定有機(jī)氯類(lèi)和擬除蟲(chóng)菊酯類(lèi)農(nóng)藥多項(xiàng)殘留物的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明屬于農(nóng)藥殘留分析
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體涉及一種同時(shí)測(cè)定有機(jī)氯類(lèi)和擬除蟲(chóng)菊酯類(lèi)農(nóng)藥多項(xiàng)殘留物的方法。
背景技術(shù)：
：盡管有機(jī)氯類(lèi)殺蟲(chóng)劑已經(jīng)不推薦或禁止在煙草上使用，擬除蟲(chóng)菊酯類(lèi)殺蟲(chóng)劑有些是正在推薦使用，但有機(jī)氯類(lèi)和擬除蟲(chóng)菊酯類(lèi)殺蟲(chóng)劑殘留仍然是國(guó)內(nèi)外煙草及煙草制品中比較關(guān)注的煙草農(nóng)藥殘留。因此，國(guó)內(nèi)外對(duì)這兩類(lèi)農(nóng)藥殘留均建立規(guī)范的方法，如煙草及煙草制品中有機(jī)氯殺蟲(chóng)劑殘留分析的方法有《GB/T13596-2004煙草及煙草制品有機(jī)氯農(nóng)藥殘留量的測(cè)定氣相色譜法》，擬除蟲(chóng)菊酯類(lèi)殺蟲(chóng)劑殘留分析的方法有《GB/T13595-2004煙草及煙草制品擬除蟲(chóng)菊酯殺蟲(chóng)劑、有機(jī)磷殺蟲(chóng)劑、含氮農(nóng)藥殘留量的測(cè)定》等。這兩個(gè)標(biāo)準(zhǔn)只能對(duì)煙草及煙草制品中有機(jī)氯類(lèi)、擬除蟲(chóng)菊酯類(lèi)殺蟲(chóng)劑殘留分別測(cè)定，而不能同時(shí)測(cè)定。到目前為止，還未見(jiàn)同時(shí)測(cè)定有機(jī)氯類(lèi)和擬除蟲(chóng)菊酯類(lèi)殺蟲(chóng)劑多項(xiàng)殘留物的方法。因此現(xiàn)有技術(shù)測(cè)定有機(jī)氯及擬除蟲(chóng)菊酯類(lèi)殺蟲(chóng)劑多項(xiàng)殘留物的效率低、時(shí)間長(zhǎng)、成本高。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)不能同時(shí)測(cè)定有機(jī)氯類(lèi)和擬除蟲(chóng)菊酯類(lèi)農(nóng)藥多項(xiàng)殘留物的不足，提供一種簡(jiǎn)便、快速、靈敏度高、儀器通用性強(qiáng)的同時(shí)測(cè)定有機(jī)氯類(lèi)和擬除蟲(chóng)菊酯類(lèi)農(nóng)藥多項(xiàng)殘留物的方法。本發(fā)明的目的這樣實(shí)現(xiàn)的，技術(shù)方案包括下列工序A、煙樣經(jīng)粉碎使粒徑小于450iim，按每克煙樣1020ml的量加入提取液及內(nèi)標(biāo)液，超聲波提取，經(jīng)裝有無(wú)水硫酸鈉的漏斗過(guò)濾，獲得提取液；B、提取液加至Florisil柱固相萃取，洗脫，收集洗脫液；C、洗脫液用氣相色譜儀分析，采用Elite5MS毛細(xì)管柱；載氣為高純N2;恒流方式，流速0.51.5ml/min;進(jìn)樣口溫度280320。C，檢測(cè)器溫度330370°C;不分流進(jìn)樣，進(jìn)樣量12iiL;初溫IO(TC，以8°C/min由IO(TC升至18(TC，保持4min，再以5°C/min由18(TC升至27(TC，保持15min至樣品全部流出；D、采用標(biāo)準(zhǔn)品的保留時(shí)間進(jìn)行定性，內(nèi)標(biāo)法定量。本發(fā)明采用超聲波提取、固相萃取柱進(jìn)行凈化，簡(jiǎn)化了操作步驟，工作效率高、凈化效果好，能同時(shí)測(cè)定六六六、DDT等17種有機(jī)氯類(lèi)和甲氰菊酯等7種擬除蟲(chóng)菊酯類(lèi)殺蟲(chóng)劑以及氟節(jié)胺1種植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑共25種農(nóng)藥的多項(xiàng)殘留物。本發(fā)明回收率高、重復(fù)性好，能滿足多項(xiàng)殘留物分析要求。圖1為發(fā)明方法添加有機(jī)氯和擬除蟲(chóng)菊酯類(lèi)農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品的煙葉樣品色譜圖；圖2為空白煙葉樣品色譜圖。3圖中1、a-BHC，2、六氯苯，3、P_BHC，4、Y_BHC，5、S-BHC，6、七氯，7、艾氏劑，8、環(huán)氧七氯A，9、環(huán)氧七氯B，10、氯丹，ll、0，p，-DDE，12、氟節(jié)胺，13、a-硫丹，14、狄氏劑，15、p，p，—DDE，16、o，p，—DDD，17、p，p，—DDD，18、o，p，—DDT，19、p，p，-DDT，20、甲氰菊酯，21、內(nèi)標(biāo)，22、高效氟氯氰菊酯，23、氯菊酯A，24、氯菊酯B，25、氟氯氰菊酯A，26、氟氯氰菊酯B，27、氟氯氰菊酯C，28、氟氯氰菊酯D，29、氯氰菊酯A，30、氯氰菊酯B，31、氯氰菊酯C，32、氯氰菊酯D，33、氰戊菊酯，34、順式氰戊菊酯，35、溴氰菊酯。具體實(shí)施例方式下面結(jié)合附圖與實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說(shuō)明，但不以任何方式對(duì)本發(fā)明加以限制，任何基于本發(fā)明所作的變換均屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。本發(fā)明技術(shù)方案包括下列工序A、煙樣經(jīng)粉碎使粒徑小于450iim，按每克煙樣1020ml的量加入提取液及內(nèi)標(biāo)液，超聲波提取，經(jīng)裝有無(wú)水硫酸鈉的漏斗過(guò)濾，獲得提取液；B、提取液加至Florisil柱固相萃取，洗脫，收集洗脫液；C、洗脫液用氣相色譜儀分析，采用Elite5MS毛細(xì)管柱；載氣為高純N2;恒流方式，流速0.51.5ml/min;進(jìn)樣口溫度280320。C，檢測(cè)器溫度330370°C;不分流進(jìn)樣，進(jìn)樣量12iiL;初溫IO(TC，以8°C/min由IO(TC升至18(TC，保持4min，再以5°C/min由18(TC升至27(TC，保持15min至樣品全部流出；D、采用標(biāo)準(zhǔn)品的保留時(shí)間進(jìn)行定性，內(nèi)標(biāo)法定量。所述的提取液為正己烷乙腈混合液(v:v=i:i)，或正己烷乙酸乙酯混合液(v:v=1:i)，或正己烷丙酮混合液(v:v=i:i)，或正己烷二氯甲烷混合液(v:v=i:i)，或正己烷甲醇混合液(v:v=i:i)，或乙腈二氯甲烷混合液(v:v=i:i)。所述的內(nèi)標(biāo)為十二氯代八氫-l，3，4-次甲基-lH-環(huán)丁并(c，d)雙茂(滅蟻靈)，或2，4，5，6-四氯間二甲苯，或十氯聯(lián)苯。所述的超聲提取采用提取液浸泡lh，超聲提取1015min;或超聲提取3045min。所述的C工序的洗脫液用氣相色譜儀分析在同一色譜條件下，用同一ECD檢測(cè)器，同時(shí)測(cè)定25種農(nóng)藥殘留物。下面通過(guò)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)加以說(shuō)明。稱取2.0g粉碎至粒徑小于450ym的煙樣于50ml刻度試管，添加有機(jī)氯類(lèi)和擬除蟲(chóng)菊酯類(lèi)殺蟲(chóng)劑標(biāo)樣，使煙葉中的17種有機(jī)氯類(lèi)殺蟲(chóng)劑含量達(dá)到0.05iig/g、7種擬除蟲(chóng)菊酯類(lèi)殺蟲(chóng)劑和1種植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑含量達(dá)到0.5iig/g，再加入20ml正己烷-乙腈混合液(V:V=l:1)及內(nèi)標(biāo)液超聲提取30min，靜置，經(jīng)裝有無(wú)水硫酸鈉的漏斗濾至燒瓶中凈化。提取液加至Florisil柱固相萃取柱(500mg/6ml，Agilent產(chǎn)品)，分別用3ml正己烷、3ml乙腈預(yù)淋Florisil固相萃取柱，加入提取液，用1:1的正己烷_(kāi)乙腈混合液5ml洗脫，洗脫液用氣相色譜儀分析。分析條件采用PerkinElmerClarus500GC(配ECD)氣相色譜儀，色譜柱:Elite5MS(30mX0.25mmX0.25iim，PE公司產(chǎn)品)毛細(xì)管柱;載氣高純^，恒流方式，流速lml/min;進(jìn)樣口溫度300°C，檢測(cè)器溫度350°C;不分流進(jìn)樣，進(jìn)樣量2yL。4柱溫程序初溫100°C，以8°C/min由IO(TC升至18(TC，保持4min，再以5°C/min由180°C升至27(TC，保持15min至樣品全部流出。采用標(biāo)準(zhǔn)品的保留時(shí)間進(jìn)行定性，以十二氯代八氫-l，3，4-次甲基-lH-環(huán)丁并(c，d)雙茂(滅蟻靈)作內(nèi)標(biāo)進(jìn)行定量分析。在上述實(shí)驗(yàn)條件下，內(nèi)標(biāo)及各組份化合物分離完全(見(jiàn)附圖1)，可對(duì)這些組份進(jìn)行定性、定量分析。由色譜圖(見(jiàn)附圖1、2)可知，無(wú)干擾峰，峰形對(duì)稱尖銳、信號(hào)強(qiáng)、信噪比高。以正己烷為溶劑，分別配制系列混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，其中有機(jī)氯濃度為0.01、0.02、0.03、0.04、0.05、0.06、0.07、0.08、0.09、0.10yg/mL，對(duì)應(yīng)的擬除蟲(chóng)菊酯類(lèi)農(nóng)藥和植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑濃度為0.10、0.20、0.30、0.40、0.50、0.60、0.70、0.80、0.90、1.00iig/mL，共10個(gè)混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，在上述色譜條件下進(jìn)行色譜分析，采用標(biāo)準(zhǔn)品的保留時(shí)間定性，十二氯代八氫-l，3，4-次甲基-lH-環(huán)丁并(c，d)雙茂(滅蟻靈)作內(nèi)標(biāo)定量，各組份的線性關(guān)系、相關(guān)系數(shù)、檢出限見(jiàn)表l，表明檢測(cè)方法靈敏。表l各組份線性關(guān)系和檢出限<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>選用煙葉樣品，分別添加有機(jī)氯類(lèi)和除蟲(chóng)菊酯類(lèi)農(nóng)藥進(jìn)行回收試驗(yàn)，重復(fù)進(jìn)行6次平行實(shí)驗(yàn)，結(jié)果見(jiàn)表2，各組份回收率83.28%102.33%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差2.85%5.44%，說(shuō)明本方法對(duì)17種有機(jī)氯類(lèi)殺蟲(chóng)劑、7種擬除蟲(chóng)菊酯類(lèi)殺蟲(chóng)劑和l種植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑殘留有較好的回收率和精密度，能滿足多項(xiàng)殘留物分析要求。表2方法的回收率和精密度<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>3.6588.563.4393.242.950.01七飄84.943.7689.323.3294.212.850.01艾氏劑84.983.6589.543.5894.683.320.01環(huán)氧七氯A85.464.1289.683.7695.233.520.01環(huán)氧七氯B84.864.3388.244.1193.823.700.01氯丹88.424.5394.643.7499.523.220.01o,p'-DDE85.354.8490.223.7895.963.820.01a-硫丹85.874.6891.884.3696.543.460.01狄氏劑84.684.2591.864.2695.643.860.01p,p'-DDE86.213.9892.854.1497.123.780.01o,p'-DDD83.944.6288.844.1694.463.810.024.69SO7/1U7./，0《/1A3g5r>r>，o,p'-DDT84.404.6389.324.5293.653.580.01p,p'-DDT88.324.2292.634.1497.234.200.01殺蟲(chóng)劑添加量(pg/g)0.251.02.0檢出限回收率RSD回收率RSD%回收率RSD%%本發(fā)明具有以下特點(diǎn)1、采用超聲波提取、商品化固相萃取柱進(jìn)行凈化、農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品的保留時(shí)間定性、內(nèi)標(biāo)法定量，只用氣相色譜儀配備通用ECD檢測(cè)器就可直接檢測(cè)，相對(duì)GC-MS而言，儀器運(yùn)行成本更低，儀器操作更簡(jiǎn)便，通用性更強(qiáng)。2、簡(jiǎn)化了操作步驟，效率高、凈化效果好，能同時(shí)測(cè)定六六六、DDT等17種有機(jī)氯類(lèi)和甲氰菊酯等7種擬除蟲(chóng)菊酯類(lèi)殺蟲(chóng)劑以及氟節(jié)胺1種植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑共25種農(nóng)藥的多項(xiàng)殘留物，回收率83.28%102.33%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差2.85%5.44%，能滿足多項(xiàng)殘留物分析要求。86.445.4490.324.3495.043.480.0285.784.9891.123.7696.223.620.0283.985.4286.524.6290.384.240.05o廣<1,5.16/o4.0193.244.140.0285.165.3287.634.4590.163.980.0484.884.5688.494.3493.424.100.0485.754.4990.604.0294.253.580.0293.324.4896.824.13102.333.560.02氰酯酯氟菊酯酯酯菊氯酯氰菊菊菊胺氰效菊氯氰戊氰節(jié)甲高氯氟氯氰溴氟權(quán)利要求一種同時(shí)測(cè)定有機(jī)氯類(lèi)和擬除蟲(chóng)菊酯類(lèi)農(nóng)藥多項(xiàng)殘留物的方法，其特征在于包括下列工序A、煙樣經(jīng)粉碎使粒徑小于450μm，按每克煙樣10～20ml的量加入提取液及內(nèi)標(biāo)液，超聲波提取，經(jīng)裝有無(wú)水硫酸鈉的漏斗過(guò)濾，獲得提取液；B、提取液加至Florisil柱固相萃取，洗脫，收集洗脫液；C、洗脫液用氣相色譜儀分析，采用Elite5MS毛細(xì)管柱；載氣為高純N2；恒流方式，流速0.5～1.5ml/min；進(jìn)樣口溫度280～320℃，檢測(cè)器溫度330～370℃；不分流進(jìn)樣，進(jìn)樣量1～2μL；初溫100℃，以8℃/min由100℃升至180℃，保持4min，再以5℃/min由180℃升至270℃，保持15min至樣品全部流出；D、采用標(biāo)準(zhǔn)品的保留時(shí)間進(jìn)行定性，內(nèi)標(biāo)法定量。2.如權(quán)利要求1所述的同時(shí)測(cè)定有機(jī)氯類(lèi)和擬除蟲(chóng)菊酯類(lèi)農(nóng)藥多項(xiàng)殘留物的方法，其特征在于所述的提取液為正己烷乙腈混合液(v:v=i:i)，或正己烷乙酸乙酯混合液(v:v=i:i)，或正己烷丙酮混合液(v:v=i:i)，或正己烷二氯甲烷混合液(v:v=i:i)，或正己烷甲醇混合液(v:v=i:i)，或乙腈二氯甲烷混合液(v:v=i:i)。3.如權(quán)利要求i所述的同時(shí)測(cè)定有機(jī)氯類(lèi)和擬除蟲(chóng)菊酯類(lèi)農(nóng)藥多項(xiàng)殘留物的方法，其特征在于所述的內(nèi)標(biāo)為十二氯代八氫-i，3，4-次甲基-iH-環(huán)丁并(c，d)雙茂(滅蟻靈)，或2，4，5，6-四氯間二甲苯，或十氯聯(lián)苯。4.如權(quán)利要求1所述的同時(shí)測(cè)定有機(jī)氯類(lèi)和擬除蟲(chóng)菊酯類(lèi)農(nóng)藥多項(xiàng)殘留物的方法，其特征在于所述的超聲提取采用提取液浸泡lh，超聲提取1015min;或超聲提取3045min。5.如權(quán)利要求1所述的同時(shí)測(cè)定有機(jī)氯類(lèi)和擬除蟲(chóng)菊酯類(lèi)農(nóng)藥多項(xiàng)殘留物的方法，其特征在于所述的C工序的洗脫液用氣相色譜儀分析在同一色譜條件下，用同一ECD檢測(cè)器，同時(shí)測(cè)定25種農(nóng)藥殘留物。全文摘要一種同時(shí)測(cè)定有機(jī)氯類(lèi)和擬除蟲(chóng)菊酯類(lèi)農(nóng)藥多項(xiàng)殘留物的方法，包括下列工序煙樣經(jīng)粉碎使粒徑小于450μm，按每克煙樣10～20ml的量加入提取液及內(nèi)標(biāo)液，超聲波提取，經(jīng)裝有無(wú)水硫酸鈉的漏斗過(guò)濾，獲得提取液；提取液加至Florisil柱固相萃取，洗脫，收集洗脫液；洗脫液用氣相色譜儀分析，采用Elite5MS毛細(xì)管柱；載氣為高純N2；恒流方式，流速0.5～1.5ml/min；進(jìn)樣口溫度280～320℃，檢測(cè)器溫度330～370℃；不分流進(jìn)樣，進(jìn)樣量1～2μL；初溫100℃，以8℃/min由100℃升至180℃，保持4min，再以5℃/min由180℃升至270℃，保持15min至樣品全部流出；采用標(biāo)準(zhǔn)品的保留時(shí)間進(jìn)行定性，內(nèi)標(biāo)法定量。本發(fā)明采用超聲波提取、固相萃取柱進(jìn)行凈化，簡(jiǎn)化了操作步驟，工作效率高、凈化效果好，能同時(shí)測(cè)定六六六、DDT等17種有機(jī)氯類(lèi)和甲氰菊酯等7種擬除蟲(chóng)菊酯類(lèi)殺蟲(chóng)劑以及氟節(jié)胺1種植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑共25種農(nóng)藥的多項(xiàng)殘留物。本發(fā)明回收率高、重復(fù)性好，能滿足多項(xiàng)殘留物分析要求。文檔編號(hào)G01N30/06GK101793879SQ20101010620公開(kāi)日2010年8月4日申請(qǐng)日期2010年2月5日優(yōu)先權(quán)日2010年2月5日發(fā)明者丁元明,唐旭兵,宋春滿,師君麗,方敦煌,旦有明申請(qǐng)人:云南省煙草農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院