專利名稱：子癇前期風(fēng)險的檢測的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種評估孕婦發(fā)生子癇前期風(fēng)險的方法。特別地，本發(fā)明涉及一種孕婦發(fā)生子癇前期風(fēng)險的早期檢測方法。
背景技術(shù)：
子癇前期(pre-eclampsia, PE)影響著5%的妊娠初產(chǎn)婦并且在全球每年折磨著大約4百萬婦女。在全世界，子癇前期仍是導(dǎo)致孕產(chǎn)婦死亡的主要原因，并且對大量的嬰兒發(fā)病率和死亡率負(fù)有重要責(zé)任。此外，子癇前期增加了高血壓、冠狀動脈疾病、中風(fēng)和2型糖尿病的風(fēng)險，對婦女之后的生活健康產(chǎn)生影響。同時子癇前期的確切病因尚未可知，越來越多的證據(jù)表明此疾病是復(fù)雜的相互作用結(jié)果，包括在妊娠早期子宮胎盤動脈的重塑缺陷導(dǎo)致的胎盤灌注不足以及母體對胎盤源觸發(fā)的反應(yīng)，涉及脈管系統(tǒng)，連同炎癥和氧化應(yīng)激相 關(guān)的凝血過程。子癇前期臨床發(fā)病前血漿大范圍變化，因此引起預(yù)測生物標(biāo)志物鑒定的強烈興趣。已經(jīng)提出了數(shù)目眾多的候選生物標(biāo)志物來預(yù)測疾病，包括胎盤激素類、血管生成因子和脂類。迄今為止，作為對子癇前期風(fēng)險的早期預(yù)測檢測，沒有出現(xiàn)一個(也沒有任何組合物)能滿足臨床應(yīng)用所需的特異性和靈敏性。所以，臨床醫(yī)生不能為高危的妊娠初產(chǎn)婦提供有針對性的監(jiān)控或有效的預(yù)防性治療。本發(fā)明的目的就是為了解決至少一個上述問題。

發(fā)明內(nèi)容
申請人:已經(jīng)確定了一組與孕婦發(fā)生子癇前期的早期風(fēng)險預(yù)測有關(guān)的代謝物，例如在妊娠大約11-17周時的子癇前期風(fēng)險預(yù)測。此組代謝物如表I所示。申請人已表明表I所示的一種或多種代謝物的豐度發(fā)生改變(差別或調(diào)整(modulated)豐度)與婦女之后發(fā)生(或患有)子癇前期的風(fēng)險增加相關(guān)，特別地選自由下述組的代謝物(此后稱為“首選代謝物”)，所述組包括5_羥色氨酸、單糖、癸?；舛緣A(decanoylcarnitine)、甲基戊二酸和/或已二酸、油酸、二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid)和/或二十二碳三炔酸(docosatriynoic acid)、Y - 丁內(nèi)酯和 / 或二氫-3 (2H)-呋喃酮(oxolan-3_one)、2-氧代戍酸和/或氧代甲基丁酸(oxo-methylbutanoic acid)、乙酰乙酸、六癸烯?；?二十碳四烯基-sn_ 甘油(hexadecenoyl-eicosatetraenoyl-sn-glycerol )、I-憐酸-鞘氨醇、I-憐酸-二氫鞘氨醇、和維他命D3衍生物。因此，本發(fā)明涉及懷孕早期在發(fā)生常規(guī)臨床癥狀前使用一種或多種代謝物，以確定孕婦發(fā)生子癇前期風(fēng)險的手段，或者輔助確定孕婦存在發(fā)生子癇前期的風(fēng)險。表I所示的大多數(shù)代謝物，與參考豐度(正常妊娠時的代謝物豐度，即陰性對照)相比豐度增加，這與發(fā)生子癇前期風(fēng)險增加相關(guān)，然而對于其中三種代謝物，與參考豐度相比豐度的降低與發(fā)生子癇前期風(fēng)險增加相關(guān)。應(yīng)該理解，可以采用陽性對照作為參考，在這種情況下對于表I所示的大多數(shù)代謝物，與參考豐度(發(fā)生子癇前期孕婦的代謝物豐度)相比豐度的降低與發(fā)生子癇前期風(fēng)險增加相關(guān)，對于其中一種代謝物，與參考豐度相比豐度的增加與發(fā)生子癇前期風(fēng)險增加相關(guān)。
表I表I.在發(fā)現(xiàn)和驗證階段鑒定的代謝物
權(quán)利要求
1.一種用于孕婦發(fā)生子癇前期風(fēng)險的早期檢測的試驗方法，包含測定取自妊娠11至17周婦女的測試生物樣品含量的步驟，以測定至少一種代謝物生物標(biāo)志物的豐度，所述代謝物生物標(biāo)志物選自5-羥色氨酸、單糖、癸?；鈮A、甲基戊二酸和/或已二酸、油酸、二十二碳六烯酸和/或二十二碳三炔酸、Y-丁內(nèi)酯和/或二氫-3 (2H)-呋喃酮、2-氧代戊酸和/或氧代甲基丁酸、乙酰乙酸、六癸烯?；?二十碳四烯基-sn-甘油、I-磷酸-鞘氨醇、I-磷酸-二氫鞘氨醇、和維他命D3衍生物；其中所述至少一種代謝物生物標(biāo)志物相對于此所述至少一種代謝物生物標(biāo)志物的參考豐度的調(diào)整豐度與孕婦發(fā)生子癇前期的風(fēng)險相關(guān)。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的試驗方法，其中所述測試生物樣品獲自妊娠14至16周的婦女。
3.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的試驗方法，其中所述參考豐度為參考生物樣品中的代謝物標(biāo)志物的豐度，所述參考生物樣品取自與所述測試生物樣品在相同周的妊娠階段(+/-I周)的受試者，以及，其中所述受試者為順利妊娠。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的試驗方法，其中所述順利妊娠是沒有子癇前期的妊娠，或者沒有子癇前期和其他任何并發(fā)癥的妊娠。
5.根據(jù)權(quán)利要求I所述的試驗方法，其中所述參考豐度為取自確實發(fā)生子癇前期的受試者的生物樣品中的代謝物標(biāo)志物的豐度。
6.根據(jù)上述任何權(quán)利要求所述的試驗方法，包含測定下列基本全部的生物標(biāo)志物豐度的步驟并且將所有所述生物標(biāo)志物的豐度與所述孕婦發(fā)生子癇前期的風(fēng)險關(guān)聯(lián)，其中，所述生物標(biāo)志物包括5_羥色氨酸、單糖、癸酰基肉堿、甲基戊二酸和/或已二酸、油酸、二十二碳六烯酸和/或二十二碳三炔酸、Y-丁內(nèi)酯和/或二氫-3 (2H)-呋喃酮、2-氧代戊酸和/或氧代甲基丁酸、乙酰乙酸、六癸烯?；?二十碳四烯基-sn-甘油、I-磷酸-鞘氨醇、I-磷酸-二氫鞘氨醇、和維他命D3衍生物。
7.根據(jù)上述任何權(quán)利要求所述的試驗方法，包含測定多個生物標(biāo)志物的豐度的步驟并且將生物標(biāo)志物組合的豐度與所述孕婦發(fā)生子癇前期的風(fēng)險關(guān)聯(lián)，所述生物標(biāo)志物包括5-羥色氨酸、單糖、癸酰基肉堿、甲基戊二酸和/或已二酸、油酸、二十二碳六烯酸和/或二十二碳三炔酸、Y -丁內(nèi)酯和/或二氫-3 (2H)-呋喃酮、2-氧代戊酸和/或氧代甲基丁酸、乙酰乙酸、六癸烯酰基-二十碳四烯基-sn-甘油、I-磷酸-鞘氨醇、I-磷酸-二氫鞘氨醇、和維他命D3衍生物。
8.根據(jù)權(quán)利要求I至7中的任何一項所述的試驗方法，進(jìn)一步包含檢測婦女至少一項臨床風(fēng)險變量的步驟以增加檢測的靈敏性和/或特異性。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的試驗方法，其中所述臨床風(fēng)險變量選自下組，該組包括血壓、體重指數(shù)、年齡、子癇前期或冠心病的家族史和包括胎兒的生物統(tǒng)計學(xué)測量以及臍帶和子宮動脈多普勒波形分析的超聲參數(shù)。
10.根據(jù)權(quán)利要求8或9所述的試驗方法，其中所述試驗方法包括將基于生物標(biāo)志物的預(yù)測風(fēng)險和至少一項臨床風(fēng)險變量與子癇前期的發(fā)生的整體風(fēng)險關(guān)聯(lián)。
11.根據(jù)權(quán)利要求7所述的試驗方法，進(jìn)一步包括檢測包括孕婦的年齡、體重指數(shù)和血壓的多個臨床風(fēng)險變量的步驟并且將基于生物標(biāo)志物組合的預(yù)測風(fēng)險和所述年齡、體重指數(shù)和血壓的風(fēng)險變量與子癇前期的發(fā)生的整體風(fēng)險相關(guān)聯(lián)的步驟。
12.—種監(jiān)測子癇前期治療有效性的試驗方法，包括測定表I中的一種或每種代謝物的豐度水平的步驟并且將檢測到的所述一種或每種代謝物的豐度水平與所述一種或每種代謝物的參考豐度值關(guān)聯(lián)的步驟，所述代謝物取自被診斷為患有子癇前期并且正在接受治療的孕婦的生物樣品。
13.根據(jù)權(quán)利要求12所述的試驗方法，其中代謝物生物標(biāo)志物選自由5-羥色氨酸、單糖、癸?；鈮A、甲基戊二酸和/或已二酸、油酸、二十二碳六烯酸和/或二十二碳三炔酸、Y -丁內(nèi)酯和/或二氫-3 (2H)-呋喃酮、2-氧代戊酸和/或氧代甲基丁酸、乙酰乙酸、六癸烯酰基-二十碳四烯基-sn-甘油、I-磷酸-鞘氨醇、I-磷酸-二氫鞘氨醇、和維他命D3衍生物組成的組。
14.根據(jù)權(quán)利要求12所述的試驗方法，包括測定多個生物標(biāo)志物的豐度的步驟并且將生物標(biāo)志物組合的豐度與子癇前期治療的有效性相關(guān)聯(lián)，其中，所述生物標(biāo)志物包括5-羥色氨酸、單糖、癸?；鈮A、甲基戊二酸和/或已二酸、油酸、二十二碳六烯酸和/或二十二碳三炔酸、Y -丁內(nèi)酯和/或二氫-3 (2H)-呋喃酮、2-氧代戊酸和/或氧代甲基丁酸、乙酰乙酸、六癸烯酰基-二十碳四烯基-sn-甘油、I-磷酸-鞘氨醇、I-磷酸-二氫鞘氨醇、和維他命D3衍生物。
15.一種用于孕婦發(fā)生高血壓疾病風(fēng)險的早期檢測的試驗方法，包括對取自妊娠11至17周婦女的測試生物樣品進(jìn)行分析的步驟，以測定一選自表I所示代謝物生物標(biāo)志物組的豐度，其中相對于所述代謝物生物標(biāo)志物的參考豐度的所述代謝物生物標(biāo)志物的調(diào)整豐度與婦女發(fā)生高血壓疾病增加的風(fēng)險有關(guān)。
16.根據(jù)權(quán)利要求15所述的試驗方法，其中高血壓疾病選自由子癇、輕度子癇前期、慢性高血壓、EPH妊娠中毒癥、妊娠高血壓、并發(fā)子癇前期、HELLP綜合征和腎病組成的組。
17.一種治療或預(yù)防孕婦子癇前期的方法，包括在早期妊娠階段根據(jù)任何權(quán)利要求I至11的方法檢測婦女發(fā)生子癇前期風(fēng)險的步驟，以及，其中當(dāng)婦女被鑒定為具有發(fā)生子癇前期風(fēng)險時，應(yīng)用臨床干預(yù)措施治療或預(yù)防子癇前期。
18.一種用于執(zhí)行檢測孕婦子癇前期風(fēng)險的方法的系統(tǒng)，所述系統(tǒng)包括 -一測定系統(tǒng)，用于檢測取自孕婦樣品中的代謝物生物標(biāo)志物的豐度，所述代謝物生物標(biāo)志物選自表1，特別地選自5-羥色氨酸、單糖、癸?；鈮A、甲基戊二酸和/或已二酸、油酸、二十二碳六烯酸和/或二十二碳三炔酸、Y - 丁內(nèi)酯和/或二氫-3 (2H)-呋喃酮、2-氧代戊酸和/或氧代甲基丁酸、乙酰乙酸、六癸烯酰基-二十碳四烯基-sn-甘油、I-磷酸-鞘氨醇、I-磷酸-二氫鞘氨醇、和維他命D3衍生物； -可選地，一存儲系統(tǒng)，用于存儲由所述測定系統(tǒng)生成的代謝物豐度數(shù)據(jù)； -一比較系統(tǒng)，用于將來自所述測定系統(tǒng)的豐度數(shù)據(jù)與參考豐度數(shù)據(jù)比較，以提供子癇前期風(fēng)險的定量評估；以及 -一顯示模塊，用于顯示所述子癇前期的定量評估。
19.根據(jù)權(quán)利要求18所述的系統(tǒng)，其中所述測定系統(tǒng)包括質(zhì)譜儀或者液相色譜儀器。
20.一種計算機程序，其中，當(dāng)在一臺計算機上執(zhí)行時，所述程序使所述計算機能夠執(zhí)行用于早期預(yù)測孕婦發(fā)生子癇前期風(fēng)險的方法，所述程序包括用于以下方面的指令 -輸入表I中的至少一種代謝物生物標(biāo)志物的豐度，所述豐度通過對取自妊娠11至17周婦女的測試生物樣品進(jìn)行分析得到； -將所述至少一種代謝物生物標(biāo)志物的豐度與所述至少一種代謝物生物標(biāo)志物的參考豐度比較；以及 -基于比較步驟測定子癇前期風(fēng)險的定量評估。
21.根據(jù)權(quán)利要求20所述的計算機程序，其中輸入選自下述組的至少一種代謝物生物標(biāo)志物的豐度，所述組包括5-羥色氨酸、單糖、癸?；鈮A、甲基戊二酸和/或已二酸、油酸、二十二碳六烯酸和/或二十二碳三炔酸、Y - 丁內(nèi)酯和/或二氫-3 (2H)-呋喃酮、2-氧代戊酸和/或氧代甲基丁酸、乙酰乙酸、六癸烯?；?二十碳四烯基-sn-甘油、1-磷酸-鞘氨醇、1-磷酸-二氫鞘氨醇、和維他命D3衍生物。
22.根據(jù)權(quán)利要求20所述的計算機程序，其中輸入多種代謝物生物標(biāo)志物的豐度，所述代謝物生物標(biāo)志物包括5-羥色氨酸、單糖、癸?；鈮A、甲基戊二酸和/或已二酸、油酸、二十二碳六烯酸和/或二十二碳三炔酸、Y-丁內(nèi)酯和/或二氫-3 (2H)-呋喃酮、2-氧代戊酸和/或氧代甲基丁酸、乙酰乙酸、六癸烯?；?二十碳四烯基-sn-甘油、1-磷酸-鞘氨醇、1-磷酸-二氫鞘氨醇、和維他命D3衍生物。
23.根據(jù)權(quán)利要求20或21所述的計算機程序，其中測定所述子癇前期風(fēng)險定量評估的步驟包括使用多元判別PLS-DA模型測定子癇前期的可能性。
24.—種計算機程序記錄介質(zhì),所述記錄介質(zhì)存儲根據(jù)權(quán)利要求20至23中任何一項的計算機程序。
25.一個計算機程序，包括用于使計算機執(zhí)行權(quán)利要求I至16中任何一項所述的試驗方法的程序指令。
全文摘要
本發(fā)明提供一種用于孕婦高血壓疾病風(fēng)險的早期預(yù)測的方法，所述高血壓疾病包括例如子癇、輕度子癇前期、慢性高血壓、EPH妊娠中毒癥、妊娠高血壓、并發(fā)子癇前期、HELLP綜合征、或腎病。
文檔編號G01N33/68GK102893156SQ201080063774
公開日2013年1月23日 申請日期2010年12月21日 優(yōu)先權(quán)日2009年12月21日
發(fā)明者L·肯尼, P·牛頓貝克, D·布洛德赫斯特 申請人:愛爾蘭國立科克大學(xué)