專(zhuān)利名稱(chēng)：定性半定量?jī)捎脵z測(cè)女性排卵激素試紙及比色卡的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及本發(fā)明涉及一種半定量檢測(cè)女性排卵激素水平的試紙及使用該試紙檢測(cè)排卵，確定排卵日期或檢測(cè)激素性不孕的方法。
背景技術(shù)：
促黃體生成素(LH)由腺垂體嗜堿粒細(xì)胞分泌。在女性(LH)協(xié)同F(xiàn)SH (促卵泡激素)共同作用維持卵巢的月經(jīng)周期，導(dǎo)致排卵與黃體形成。LH的產(chǎn)生受下丘腦促性腺釋放激素的控制，同時(shí)受卵巢的正、負(fù)反饋調(diào)控。促使排卵在FSH協(xié)同作用下，形成黃體并分泌孕激素，可以預(yù)測(cè)排卵。當(dāng)卵泡成熟時(shí)，分泌大量雌激素，使垂體釋放大量促黃體生成素，形成促黃體生成素高峰，大量的促黃體生成素能使成熟的卵泡破裂、排卵。在月經(jīng)周期LH的釋放高峰與卵巢排卵有著密切關(guān)系，LH高峰一經(jīng)出現(xiàn)，預(yù)示1-2 天內(nèi)卵巢排卵，因此可以在月經(jīng)周期中監(jiān)測(cè)血清或尿液中LH峰值，以確定最佳受孕時(shí)間， 或需要采取避孕措施的時(shí)間。該檢測(cè)結(jié)果為大于25毫國(guó)際單位/毫升(MIU/ML)表示。本發(fā)明可提供與生育受孕有緊密相關(guān)的可靠信息，使用者在需要給出生理周期內(nèi)生育期起始的充分的預(yù)測(cè)資料，從而預(yù)測(cè)夫妻生活能否妊娠或是否需要采取避孕措施。或檢測(cè)女性的激素水平能否達(dá)到妊娠水平。如果激素水平過(guò)低，如低于5 miu/ml，則說(shuō)明女性有由于激素水平過(guò)低而患有不孕癥。目前國(guó)內(nèi)外醫(yī)院利用膠體金免疫層析試紙檢測(cè)促黃體生成激素水平，主要利用膠體金定性檢測(cè)為主。檢測(cè)結(jié)果只能判斷激素水平的有無(wú)，高低，而不能判斷激素水平的具體含量，而具體臨床實(shí)踐的檢驗(yàn)上，確定激素水平的具體含量更具有參考價(jià)值。目前國(guó)內(nèi)外醫(yī)院都是用LH放免試劑盒，LH酶免試劑盒和定性膠體金試紙，這有的需要醫(yī)院專(zhuān)業(yè)人員，專(zhuān)業(yè)設(shè)備才能檢測(cè)，而且需要的時(shí)間比較長(zhǎng)也很復(fù)雜，不能用于家庭自測(cè)，有的只能定性，不能起到指導(dǎo)性作用。昆明云大的CN00112779. 9專(zhuān)利披露了一種不孕癥檢測(cè)試紙及其檢測(cè)方法，其在硝酸纖維膜上只有一條抗體線，沒(méi)有質(zhì)控線，在實(shí)際操作時(shí)，容易因?yàn)樵嚰垪l的失效而誤判不孕或激素水平低下。甘肅蘭州大學(xué)的CN200610200333的專(zhuān)利披露了一種膠體金半定量法的快速免疫診斷試紙條，檢測(cè)線與定量線左右排列，在同一水平線上，中間又加一條窄的線縫，不便于批量化生產(chǎn)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是克服上述技術(shù)的缺點(diǎn)，提供一種女性在家中就能自行完成檢測(cè)是否排卵，以及可以自我檢測(cè)具體排卵LH激素水平的定性半定量?jī)捎脵z測(cè)試紙。為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明定性半定量?jī)捎脵z測(cè)女性排卵的試紙，主要由PVC 或PS材質(zhì)的底板，硝酸纖維素膜，吸水墊，聚酯膜，玻璃纖維膜相互交疊連接而成，其特征在于，所述底板的中部粘硝酸纖維膜，硝酸纖維膜上劃有兩條抗體線，一條為一抗LH單克隆抗體包被的檢測(cè)線，另一條為羊抗鼠IgG抗體包被的質(zhì)控線；在硝酸纖維膜的上部邊沿位置粘吸水墊，硝酸纖維膜下部邊沿位置粘結(jié)合了標(biāo)記膠體金或彩色乳膠的另一抗LH單克隆抗體的結(jié)合墊，結(jié)合墊的下部邊沿位置粘樣品墊。所述硝酸纖維膜與上部的吸水墊，硝酸纖維膜與下端的結(jié)合墊，結(jié)合墊與下部的樣品墊之間交接的部分相互重疊l--4mm。所述膠體金或彩色乳膠標(biāo)記抗LH單克隆抗體的金顆粒或乳膠大小在 20nm—120nm 之間。作為優(yōu)選方案，對(duì)質(zhì)控線中羊抗鼠IgG抗體濃度，檢測(cè)線中抗LH單克隆抗體濃度， 金標(biāo)LH單克隆抗體濃度，進(jìn)行調(diào)整，使在檢測(cè)樣品時(shí)，樣品中LH激素濃度為25 Miu/ml時(shí)， 質(zhì)控線和檢測(cè)線紅顏色深淺相同。樣品中LH激素濃度低于25miu/ml時(shí)，檢測(cè)線的紅色淺于質(zhì)控線的紅色，樣品中LH激素濃度高于25MIU/ml時(shí)，檢測(cè)線的紅色深于質(zhì)控線的紅色。 當(dāng)樣品中激素濃度低于5miu/ml時(shí)，質(zhì)控線紅色，而檢測(cè)線無(wú)色。一種與定性半定量?jī)捎脵z測(cè)女性排卵的試紙配合使用的比色卡，比色卡中含有多種紅色梯度的紅色塊，每種深淺的紅色塊，對(duì)應(yīng)用排卵試紙檢測(cè)不同濃度LH抗原檢測(cè)所顯示的紅色。通過(guò)對(duì)照比色卡，可以找出檢測(cè)樣品中的LH的濃度。本發(fā)明的檢測(cè)原理為將尿液或血液滴4-5滴到樣品墊上，或把樣品墊的下端浸到尿液或血液中，尿液或血液中的LH抗原通過(guò)樣品墊的毛細(xì)作用，向硝酸纖維膜方向移動(dòng)，經(jīng)過(guò)金標(biāo)結(jié)合墊時(shí)，與金標(biāo)結(jié)合墊上的抗LH單克隆抗體特異性結(jié)合，并使結(jié)合物一起向硝酸纖維膜移動(dòng)，當(dāng)?shù)竭_(dá)硝酸纖維膜上包被有抗LH單克隆抗體的檢測(cè)線時(shí)，發(fā)生雙抗夾心特異性結(jié)合，樣品中的抗原和金標(biāo)的抗LH單克隆抗體被包被在硝酸纖維膜的抗LH單克隆抗體固定，從而使檢測(cè)線顯示膠體金的紅色，其檢測(cè)線的紅色深淺與樣品中的LH抗原濃度程正比。未被檢測(cè)線固定的金標(biāo)LH單抗和LH激素抗原結(jié)合物或金標(biāo)LH單抗繼續(xù)沿硝酸纖維膜上移，達(dá)到質(zhì)控線時(shí)，金標(biāo)LH單抗將被質(zhì)控線上的羊抗鼠IgG抗體結(jié)合固定，從而使質(zhì)控線，顯示紅色，無(wú)論樣品中是否含有LH抗原，質(zhì)控線始終顯色，如果質(zhì)控線不顯色， 說(shuō)明試紙條無(wú)效。本發(fā)明采用膠體金免疫層析一步法，既可定性又可半定量檢測(cè)女性尿液或血液中 LH促黃體生產(chǎn)激素含量，女性在家中使用本發(fā)明的試紙，就可知道體內(nèi)LH激素分泌情況， 可預(yù)知自己排卵日期。從而決定受孕時(shí)機(jī)或選擇是否需要采取避孕措施。不孕女性也可通過(guò)本發(fā)明的試紙條，檢測(cè)了解自己是否患有激素性不孕癥。


下面結(jié)合附圖和具體實(shí)施方式
對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案作進(jìn)一步具體說(shuō)明。圖1為定性半定量?jī)捎脵z測(cè)女性排卵激素試紙的主視圖。圖2為定性半定量?jī)捎脵z測(cè)女性排卵激素試紙的側(cè)視圖。圖3為配合定性半定量?jī)捎脵z測(cè)女性排卵激素試紙使用的比色卡主視圖。
具體實(shí)施例方式結(jié)合圖1、2所示，定性半定量?jī)捎脵z測(cè)女性排卵激素試紙主要由玻璃纖維膜材質(zhì)的樣品墊01，聚酯膜或玻璃纖維膜材質(zhì)的結(jié)合墊02，吸水墊06，底板07，硝酸纖維膜04五部分組成，硝酸纖維膜04上分別劃有兩條平行的抗體捕獲線，靠近結(jié)合墊的一條抗LH單克隆抗體，作為檢測(cè)線03，另一條含有經(jīng)確定了濃度的羊抗鼠IgG抗體，作為標(biāo)準(zhǔn)濃度顯色對(duì)照線05，也稱(chēng)為質(zhì)控線，兩條線相距4-7mm ；結(jié)合墊02上噴有膠體金或彩色乳膠標(biāo)記的另一抗LH單克隆抗體。硝酸纖維膜04與上部的吸水墊06，硝酸纖維膜04與下端的結(jié)合墊 02，結(jié)合墊02與下部的樣品墊06之間分別部分重疊交接，重疊寬度分別為l-4mm。所用的膠體金或彩色乳膠標(biāo)記的另一抗LH單克隆抗體的金顆?；蛉槟z大小在20nm--120nm之間。對(duì)質(zhì)控線中羊抗鼠IgG抗體濃度，檢測(cè)線中抗LH單克隆抗體濃度，金標(biāo)LH單克隆抗體濃度，進(jìn)行調(diào)整，使在檢測(cè)樣品時(shí)，樣品中LH激素濃度為25 Miu/ml時(shí)，質(zhì)控線和檢測(cè)線紅顏色深淺相同。樣品中LH激素濃度低于25miu/ml時(shí)，檢測(cè)線的紅色淺于質(zhì)控線的紅色，樣品中LH激素濃度高于25MIU/ml時(shí)，檢測(cè)線的紅色深于質(zhì)控線的紅色。當(dāng)樣品中激素濃度低于5miu/ml時(shí)，質(zhì)控線紅色，而檢測(cè)線無(wú)色。本發(fā)明的使用方法為選定開(kāi)始檢測(cè)的時(shí)間，第一次檢測(cè)選擇女性月經(jīng)后1周開(kāi)始。在每天相對(duì)固定的時(shí)間，如早晨等，取一條試紙，把尿液或血液滴4-5滴到樣品墊上，或把樣品墊的下端浸到尿液或血液中，在5分鐘內(nèi)，質(zhì)控線應(yīng)顯示紅色；如果質(zhì)控線不顯色， 說(shuō)明本條試紙為無(wú)效。觀察檢測(cè)線，并將檢測(cè)線的顏色與質(zhì)控線對(duì)比，檢測(cè)線的紅色深淺與樣品中的LH抗原濃度程正比。對(duì)照色卡，記錄每天檢測(cè)的結(jié)果。連續(xù)檢測(cè)10天為一個(gè)檢測(cè)周期。如果在一個(gè)周期內(nèi)的某次檢測(cè)中，檢測(cè)線紅色突然加深，并超過(guò)質(zhì)控線，則說(shuō)明女性兩天內(nèi)即將排卵。這兩天將是受孕最好時(shí)機(jī)，如果不想受孕，則需要采取相應(yīng)的避孕措施。如果女性在一個(gè)檢測(cè)周期內(nèi)，檢測(cè)線紅色一直低于色卡lOmiu/ml的色值，則說(shuō)明被檢測(cè)者體內(nèi)LH激素水平過(guò)低，可能患有腦垂體機(jī)能減退導(dǎo)致的不孕癥。如果一個(gè)檢測(cè)周期內(nèi)，檢測(cè)線紅色一直低于質(zhì)控線的紅色，則說(shuō)明被檢測(cè)者體內(nèi) LH激素水平低于25miu/ml，可能患有因不能正常排卵而導(dǎo)致的不孕癥。如果在一個(gè)檢測(cè)周期內(nèi)，檢測(cè)線紅色一直高于質(zhì)控線紅色，并大于色卡60miu/ml 色值，則說(shuō)明被檢測(cè)者體內(nèi)LH激素水平過(guò)高，激素分泌異常，可能患有某種急需救治的疾病。本發(fā)明制備的定性半定量?jī)捎脵z測(cè)女性排卵的試紙和與ELISA試劑盒，對(duì)選取 200份武漢市內(nèi)六家醫(yī)院的確診的孕婦晨尿樣本和50陰性尿樣本進(jìn)行了檢測(cè)，結(jié)果如下
定性半定量?jī)捎脵z測(cè)女性排卵的試紙 200份陽(yáng)性，50陰性。ELISA試劑盒200份陽(yáng)性，50份陰性。定性半定量?jī)捎脵z測(cè)女性排卵的試紙檢測(cè)結(jié)果與ELISA試劑盒檢測(cè)結(jié)果總符合率為100%。最后所應(yīng)說(shuō)明的是，以上具體實(shí)施方式
僅用以說(shuō)明本發(fā)明的技術(shù)方案而非限制， 盡管參照較佳實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行了詳細(xì)說(shuō)明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可以對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的精神和范圍，其均應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的權(quán)利要求范圍當(dāng)中。
權(quán)利要求
1.一種定性半定量?jī)捎脵z測(cè)女性排卵激素試紙，主要由底板，硝酸纖維素膜，吸水墊， 聚酯膜，玻璃纖維膜相互交疊連接而成，其特征在于，所述底板的中部粘硝酸纖維膜，硝酸纖維膜上劃有兩條抗體線，一條為一抗LH單克隆抗體包被的檢測(cè)線，另一條為羊抗鼠IgG 單克隆抗體包被的質(zhì)控線；在硝酸纖維膜的上部邊沿位置粘吸水墊，硝酸纖維膜下部邊沿位置粘結(jié)合了標(biāo)記膠體金或彩色乳膠的另一抗LH單克隆抗體的結(jié)合墊，結(jié)合墊的下部邊沿位置粘樣品墊。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的定性半定量?jī)捎脵z測(cè)女性排卵激素試紙，其特征在于，所述硝酸纖維膜與上部的吸水墊，硝酸纖維膜與下端的結(jié)合墊，結(jié)合墊與下部的樣品墊之間交接的部分相互重疊l-4mm。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的定性半定量?jī)捎脵z測(cè)女性排卵激素試紙，其特征在于，所述膠體金或彩色乳膠標(biāo)記抗LH單克隆抗體的金顆?；蛉槟z大小在20nm--120nm之間。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的定性半定量?jī)捎脵z測(cè)女性排卵激素試紙，其特征在于，對(duì)質(zhì)控線中的羊抗鼠IgG抗體濃度、檢測(cè)線中抗LH單克隆抗體濃度以及金標(biāo)LH單克隆抗體濃度進(jìn)行調(diào)整，使在檢測(cè)樣品時(shí)，樣品中LH激素濃度為25 Miu/ml時(shí)，質(zhì)控線和檢測(cè)線紅顏色深淺相同；當(dāng)樣品中LH激素濃度低于25miu/ml時(shí)，檢測(cè)線的紅色淺于質(zhì)控線的紅色，樣品中LH激素濃度高于25MIU/ml時(shí)，檢測(cè)線的紅色深于質(zhì)控線的紅色；當(dāng)樣品中激素濃度低于 5miu/ml時(shí)，質(zhì)控線紅色，而檢測(cè)線無(wú)色。
5.一種配合權(quán)利要求4所述的定性半定量?jī)捎脵z測(cè)女性排卵激素試紙檢測(cè)使用的比色卡，其特征在于，所述比色卡中含有多種紅色梯度的紅色塊，每種深淺的紅色塊，對(duì)應(yīng)用排卵試紙檢測(cè)不同濃度LH抗原檢測(cè)所顯示的紅色。
全文摘要
本發(fā)明披露了一種定性半定量?jī)捎脵z測(cè)女性排卵的試紙，主要由底板，硝酸纖維素膜，吸水墊，聚酯膜，玻璃纖維膜相互交疊連接而成，底板的中部粘硝酸纖維膜，硝酸纖維膜上劃有兩條抗體線，一條為第一抗LH單克隆抗體包被的檢測(cè)線，另一條為羊抗鼠IgG單克隆抗體包被的質(zhì)控線；在硝酸纖維膜的上部邊沿位置粘吸水墊，硝酸纖維膜下部邊沿位置粘結(jié)合了標(biāo)記膠體金或彩色乳膠的另一抗LH單克隆抗體的結(jié)合墊，結(jié)合墊的下部邊沿位置粘樣品墊。女性在家中使用本發(fā)明的試紙，能夠定性和半定量檢測(cè)女性尿液或血液中LH促黃體生產(chǎn)激素含量，預(yù)知自己排卵日期，或了解自己是否患有激素性不孕癥。
文檔編號(hào)G01N33/74GK102183663SQ201110072240
公開(kāi)日2011年9月14日 申請(qǐng)日期2011年3月24日 優(yōu)先權(quán)日2011年3月24日
發(fā)明者周軍, 王健斌, 龔貽洲 申請(qǐng)人:武漢璟泓萬(wàn)方堂醫(yī)藥科技有限公司