專(zhuān)利名稱(chēng)：一種治療腎陽(yáng)虛的中藥組合物的檢測(cè)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種中藥組合物的檢測(cè)方法，特別是涉及一種治療腎陽(yáng)虛的中藥組合物的檢測(cè)方法。
背景技術(shù)：
腎藏精，腎虛以腎精不足為主要癥狀。一般癥狀有精神疲乏、頭昏、耳鳴、健忘、腰、 遺精、陽(yáng)痿等，臨床表現(xiàn)可偏于腎陰虛，或腎陽(yáng)虛。虧的意思是不足，以腎來(lái)說(shuō)可以是功能作用的不足，就是腎陽(yáng)虛。如果是基礎(chǔ)物質(zhì)的不足就是腎陰虛。一般來(lái)說(shuō)，功能作用的不足， 也會(huì)導(dǎo)致基礎(chǔ)物質(zhì)的減少，陰陽(yáng)兩者可以互相轉(zhuǎn)化。腎功能的減退，男女皆有，并不獨(dú)厚于男性，只是男性受到以訛傳訛的錯(cuò)誤觀念，或是與身俱來(lái)的自然壓力，所導(dǎo)致的腎虧癥多一些。對(duì)于腎虛本來(lái)就是一種中醫(yī)學(xué)的概念，祖國(guó)醫(yī)學(xué)對(duì)于腎虛有好多好多治療方法， 和有效的藥物，方劑也好一些成藥也好，都非常有效。一般說(shuō)腎陰虛治療法則是滋陰補(bǔ)腎。 而腎陽(yáng)虛，當(dāng)然就是補(bǔ)腎助陽(yáng)，通過(guò)補(bǔ)充腎陰的方法，讓腎精充足之后，它的偏盛偏衰就能夠得以糾正了。腎陽(yáng)虛補(bǔ)充腎氣的一些藥物，來(lái)調(diào)整。我們臨床上一些常用的方劑右龜丸、 右龜引是治療腎陽(yáng)虛的。在治療時(shí)一定要注意，補(bǔ)腎陽(yáng)必須補(bǔ)腎陰，這是中醫(yī)治療腎虛的法則。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的在于提供一種治療腎陽(yáng)虛的中藥組合物；本發(fā)明目的還在于提供一種治療腎陽(yáng)虛的中藥組合物制備方法；本發(fā)明目的還在于提供一種治療腎陽(yáng)虛的中藥組合物的質(zhì)量控制方法。本發(fā)明目的是通過(guò)如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的本發(fā)明目的所述的一種治療腎陽(yáng)虛的中藥組合物可由如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)
人參70-180重量份紫河車(chē)100-200重量份
制何首烏 30-100重量份枸杞子 10-70重量份冬蟲(chóng)夏草 10-30重量份淫羊藿(炙)30-110重量份黃精 10-70重量份三七10-50重量份
峰花粉10-70重量份甘草 10-70重量份蜂王漿(凍干粉)5-25重量份。本發(fā)明所述的治療腎陽(yáng)虛的中藥組合物可由如下重量比的原料藥制成的紅參70-18 O重量份黃芪 7G-18 G重量份鹿萆 10-60重量份
制何首烏 30-100重量份枸杞子10-70重量份冬蟲(chóng)夏草10-30重量份淫羊藿(炙)3G-110重量份黃精10-70重量份丹參 30-100重量份蜂花粉10-70重量份甘草 10-70重量份蜂王漿(凍干粉)5-25重量份。本發(fā)明所述的治療腎陽(yáng)虛的中藥組合物優(yōu)選如下重量比的原料藥制成的
紅參 70-90重量份黃芪 120-180重量份鹿茸 50-60重量份制何首烏70-100重量份枸杞子50-70重量份冬蟲(chóng)夏草 10-15重量份淫羊藿(炙)90-110重量份黃精50-70重量份丹參 80-100重量份蜂花粉40-70重量份甘草 10-15重量份蜂王漿(凍干粉)5-10重量份。本發(fā)明所述的治療腎陽(yáng)虛的中藥組合物優(yōu)選如下重量比的原料藥制成的
紅參75重量份黃芪 130重量份鹿茸 55重量份
制何首烏 75重量份枸杞子 60重量份冬蟲(chóng)夏草 13重量份
淫羊藿(炙)95重量份黃精60重量份丹參 90重量份
蜂花粉60重量份甘草 12重量份蜂王漿(凍干粉)8重量份。本發(fā)明所述的治療腎陽(yáng)虛的中藥組合物優(yōu)選如下重量比的原料藥制成的
紅參 85重量份黃芪 160重量份鹿茸 58重量份
制何首烏 85重量份枸杞子 65重量份冬蟲(chóng)夏草 14重量份淫羊藿(支)IGG重量份黃精 60重量份丹參 85重量份峰花粉 65重量份甘草 15重量份蜂王漿(凍干粉)7重量份。本發(fā)明所述的中藥組合物膠囊制劑的制備方法為選取原料藥
人參70-180重量份紫河車(chē) IOO-2OQ重量份
制何首烏 30-100重量份枸杞子 10-70重量份
冬蟲(chóng)夏草 10-30重量份淫羊藿(炙)30-110重量份
黃精 10-70重量份三七10-50重量份
蜂花粉10-70重量份甘草 10-70重量份蜂王漿(凍干粉)5-25重量份。除蜂花粉、蜂王漿凍干粉外，將人參、紫河車(chē)、冬蟲(chóng)夏草粉碎成細(xì)粉，其余六味， 加9-11倍量水煎煮2-3次，每次1-3小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至相對(duì)密度為 1. 20-1. 25(55-65°C )的清膏，減壓干燥成干浸膏，粉碎成細(xì)粉，與上述蜂花粉、蜂王漿凍干粉及紅參等細(xì)粉混勻過(guò)篩，裝入膠囊，即得。本發(fā)明所述的中藥組合物膠囊制劑的制備方法為選取原料藥
紅參 70-180重量份黃芪 70-180重量份鹿茸 10-60重量份制何首烏 30-100重量份枸杞子10-70重量份冬蟲(chóng)夏草10-30重量份淫羊藿(炙)30-110重量份黃精10-70重量份丹參30-100重量份
蜂花粉10-7G重量份甘草 10-70重量份蜂王漿(凍干粉)5-25重量份。除蜂花粉、蜂王漿凍干粉外，將紅參、鹿茸、冬蟲(chóng)夏草粉碎成細(xì)粉，其余黃芪等七味，加9-11倍量水煎煮2-3次，每次1-3小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至相對(duì)密度為 1. 20-1. 25(55-65°C )的清膏，減壓干燥成干浸膏，粉碎成細(xì)粉，與上述蜂花粉、蜂王漿凍干粉及紅參等細(xì)粉混勻過(guò)篩，裝入膠囊，即得。本發(fā)明所述的中藥組合物膠囊制劑的制備方法優(yōu)選為選取原料藥
紅參 70-90重量份黃芪 12G-18G重量份鹿茸 50-60重量份制何首烏 70-100重量份枸杞子50-70重量份冬蟲(chóng)夏草 10-15重量份淫羊藿(炙)90-110重量份黃精 50-70重量份丹參 80-100重量份蜂花粉40-70重量份甘草 10-15重量份蜂王漿(凍干粉)5-1G重量份。除蜂花粉、蜂王漿凍干粉外，將紅參、鹿茸、冬蟲(chóng)夏草粉碎成細(xì)粉，其余黃芪等七味，加10倍量水煎煮二次，每次2小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至相對(duì)密度為 1.20-1. 25 (600C )的清膏，減壓干燥成干浸膏，粉碎成細(xì)粉，與上述蜂花粉、蜂王漿凍干粉及紅參等細(xì)粉混勻過(guò)篩，裝入膠囊，即得。本發(fā)明藥物組合物質(zhì)量控制方法包括如下鑒別方法和/或含量測(cè)定中的一種或幾種鑒別(1)取人參皂苷詘、Re、Rg及黃芪甲苷對(duì)照品，加甲醇制成每Iml各含Img的混合溶液，作為對(duì)照品溶液；供試品溶液制備取本發(fā)明組合物膠囊劑裝量差異項(xiàng)下的內(nèi)容物，混勻，取約1. 5g，精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，稱(chēng)定重量，置水浴上加熱回流提取1-3小時(shí)，取出，放冷，再稱(chēng)定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)， 精密量取濾液25ml，置蒸發(fā)皿中，蒸干，殘?jiān)铀?5ml使溶液解，并移至分液漏斗中，加氯仿振搖提取1-3次，每次15ml，棄去氯仿液，水液用水飽和的正丁醇振搖提取3-5次，每次 20ml，合并正丁醇液，加氨試液30ml洗滌，棄去洗滌液，正丁醇液置于水浴上蒸干，殘?jiān)蛹状剂渴谷芙猓徊⒍哭D(zhuǎn)移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，用微孔濾膜(0. 45 μ m)濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液10 μ 1、上述對(duì)照品溶液5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-甲醇-水(11-15 6-9 1-3) 10°C以下放置的下層溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以9-11%硫酸乙醇溶液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰，分別置日光及紫外光燈(365nm)下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯示相同顏色的斑點(diǎn)或熒光斑點(diǎn)；(2)取淫羊藿苷對(duì)照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作為對(duì)照品溶液；
供試品溶液的制備，取本發(fā)明組合物膠囊劑裝量差異項(xiàng)下的內(nèi)容物，混勻，取約 1. 5g，精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，稱(chēng)定重量，置水浴上加熱回流提取1-2小時(shí)，取出，放冷，再稱(chēng)定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，精密量取濾液 25ml，置蒸發(fā)皿中，蒸干，殘?jiān)铀?5ml使溶液解，并移至分液漏斗中，加氯仿振搖提取2_3 次，每次15ml，棄去氯仿液，水液用水飽和的正丁醇振搖提取3-5次，每次20ml，合并正丁醇液，加氨試液30ml洗滌，棄去洗滌液，正丁醇液置于水浴上蒸干，殘?jiān)蛹状剂渴谷芙猓徊⒍哭D(zhuǎn)移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，用微孔濾膜(0. 45 μ m)濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得； 照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液及上述對(duì)照品溶液各5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以醋酸乙酯-丁酮-甲酸-水(9-11 1-2 1-2 1-2)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以三氯化鋁試液，在105 □ C加熱數(shù)分鐘，置紫外光燈(365nm)下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；(3)取本發(fā)明組合物膠囊劑內(nèi)容物5g，加甲醇50m ；，置水浴上加熱回流1_2小時(shí)， 取出，放冷，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶液，用氯仿振搖提取2-3次，每次15ml，合并氯仿液，蒸干，殘?jiān)蛹状糏ml使溶解，作為供試品溶液；另取枸杞子對(duì)照藥材lg，加水煎煮10-20分鐘，濾過(guò)，濾液同法制成對(duì)照藥材溶液，照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5μ1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿一醋酸乙酯一甲醇(3-5 2-4 0.2-0.5) 為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。含量測(cè)定照高效液相色譜法測(cè)定，色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-水07-31 69-74)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為203nm ；柱溫38-42 □ C。理論板數(shù)按人參皂苷Rb1峰計(jì)算應(yīng)不低于2500。對(duì)照品溶液的制備，精密稱(chēng)取人參皂苷Rb1對(duì)照品7. 5mg，置25ml量瓶中，加甲醇使溶液，并稀釋至刻度，搖勻，即得(每Iml中含人參皂苷Rb1O. ;3mg)。供試品溶液的制備，取本發(fā)明組合物膠囊劑裝量差異項(xiàng)下的內(nèi)容物，混勻，取約 1. 5g，精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，稱(chēng)定重量，置水浴上加熱回流提取1-2小時(shí)，取出，放冷，再稱(chēng)定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，精密量取濾液 25ml，置蒸發(fā)皿中，蒸干，殘?jiān)铀?5ml使溶液解，并移至分液漏斗中，加氯仿振搖提取2_3 次，每次15ml，棄去氯仿液，水液用水飽和的正丁醇振搖提取3-5次，每次20ml，合并正丁醇液，加氨試液30ml洗滌，棄去洗滌液，正丁醇液置于水浴上蒸干，殘?jiān)蛹状剂渴谷芙?。并定量轉(zhuǎn)移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，用微孔濾膜(0. 45 μ m)濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。測(cè)定法，分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μ 1，注入液相色譜議，測(cè)定， 即得。本發(fā)明組合物膠囊劑每粒含人參皂苷I^b1 (C54H92O23)，不得少于0. 40mg。本發(fā)明藥物組合物質(zhì)量控制方法優(yōu)選如下鑒別方法和/或含量測(cè)定中的一種或幾種鑒別A、取人參皂苷Rb、Re、Rg及黃芪甲苷對(duì)照品，加甲醇制成每Iml各含Img的混合溶液，作為對(duì)照品溶液；供試品溶液制備取本發(fā)明組合物膠囊劑裝量差異項(xiàng)下的內(nèi)容物， 混勻，取約1. 5g，精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，稱(chēng)定重量，置水浴上加熱回流提取1.5小時(shí)，取出，放冷，再稱(chēng)定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，精密量取濾液25ml，置蒸發(fā)皿中，蒸干，殘?jiān)铀?5ml使溶液解，并移至分液漏斗中，加氯仿振搖提取2次，每次15ml，棄去氯仿液，水液用水飽和的正丁醇振搖提取4次，每次20ml，合并正丁醇液，加氨試液30ml洗滌，棄去洗滌液，正丁醇液置于水浴上蒸干，殘?jiān)蛹状剂渴谷芙?；并定量轉(zhuǎn)移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，用微孔濾膜(0.45μπι)濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液10 μ 1、上述對(duì)照品溶液5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-甲醇-水(13 7 2) 10°C以下放置的下層溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰，分別置日光及紫外光燈 (365nm)下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯示相同顏色的斑點(diǎn)或熒光斑點(diǎn)；B、取淫羊藿苷對(duì)照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作為對(duì)照品溶液；供試品溶液的制備，取本發(fā)明組合物膠囊劑裝量差異項(xiàng)下的內(nèi)容物，混勻，取約 1. 5g，精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，稱(chēng)定重量，置水浴上加熱回流提取1. 5小時(shí)，取出，放冷，再稱(chēng)定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，精密量取濾液 25ml，置蒸發(fā)皿中，蒸干，殘?jiān)铀?5ml使溶液解，并移至分液漏斗中，加氯仿振搖提取2 次，每次15ml，棄去氯仿液，水液用水飽和的正丁醇振搖提取4次，每次20ml，合并正丁醇液，加氨試液30ml洗滌，棄去洗滌液，正丁醇液置于水浴上蒸干，殘?jiān)蛹状剂渴谷芙?；并定量轉(zhuǎn)移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，用微孔濾膜(0. 45 μ m)濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得； 照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液及上述對(duì)照品溶液各5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以醋酸乙酯-丁酮-甲酸-水(10 1 1 1)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以三氯化鋁試液，在105 □ C加熱數(shù)分鐘，置紫外光燈(365nm)下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；C、取本發(fā)明組合物膠囊劑內(nèi)容物5g，加甲醇50m ；，置水浴上加熱回流1小時(shí)，取出，放冷，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶液，用氯仿振搖提取2次，每次15ml，合并氯仿液，蒸干，殘?jiān)蛹状糏ml使溶解，作為供試品溶液；另取枸杞子對(duì)照藥材lg，加水煎煮15 分鐘，濾過(guò)，濾液同法制成對(duì)照藥材溶液，照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿一醋酸乙酯一甲醇G 2 0.3)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；含量測(cè)定照高效液相色譜法測(cè)定，色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-水09 71)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為203nm ；柱溫40 □ C ；理論板數(shù)按人參皂苷Rb1峰計(jì)算應(yīng)不低于2500 ；對(duì)照品溶液的制備，精密稱(chēng)取人參皂苷Rb1對(duì)照品7. 5mg，置25ml量瓶中，加甲醇使溶液，并稀釋至刻度，搖勻，即得(每Iml中含人參皂苷Rb1OJmg)；供試品溶液的制備，取本發(fā)明組合物膠囊劑裝量差異項(xiàng)下的內(nèi)容物，混勻，取約 1. 5g，精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，稱(chēng)定重量，置水浴上加熱回流提取1.5小時(shí)，取出，放冷，再稱(chēng)定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，精密量取濾液25ml，置蒸發(fā)皿中，蒸干，殘?jiān)铀?5ml使溶液解，并移至分液漏斗中，加氯仿振搖提取 2次，每次15ml，棄去氯仿液，水液用水飽和的正丁醇振搖提取4次，每次20ml，合并正丁醇液，加氨試液30ml洗滌，棄去洗滌液，正丁醇液置于水浴上蒸干，殘?jiān)蛹状剂渴谷芙猓?并定量轉(zhuǎn)移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，用微孔濾膜(0.45μπι)濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得；測(cè)定法，分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μ 1，注入液相色譜議，測(cè)定， 即得；本發(fā)明組合物膠囊劑每粒含人參皂苷I^b1 (C54H92O23)，不得少于0. 40mg。本發(fā)明組合物具有很好的藥效，具有益氣填精，補(bǔ)腎助陽(yáng)，作用，對(duì)氣虛精虧，腎陽(yáng)不足引起的神疲乏力，失眠頭暈，，腰膝酸軟，畏寒肢冷，食欲不振，心悸氣短等癥有很好的效果。相比現(xiàn)有制劑也表現(xiàn)出出眾的藥效，并且本發(fā)明所述的范圍在可以實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的藥理效果同時(shí)，經(jīng)過(guò)篩選，意外的發(fā)現(xiàn)，在組合物的某些范圍內(nèi)，有著更為突出的藥效。本發(fā)明所提供的中藥組合物的質(zhì)量控制方法，是通過(guò)大量具體創(chuàng)造性試驗(yàn)篩選后得到，鑒別方法中通過(guò)對(duì)樣品處理方法的篩選，展開(kāi)劑的選擇，使得鑒別專(zhuān)屬性很好，而且方法經(jīng)濟(jì)適用、結(jié)果快速，并且對(duì)不同的薄層板都能應(yīng)用。含量測(cè)定方法中通過(guò)對(duì)樣品、供試品處理方法的篩選，展開(kāi)劑的選擇，使得含量測(cè)定方法可以很有效的對(duì)產(chǎn)品進(jìn)行質(zhì)量控制，并且用該方法測(cè)定的產(chǎn)品要相比其他方法測(cè)定的產(chǎn)品在藥理效果上表現(xiàn)的更為穩(wěn)定。
具體實(shí)施例方式下述實(shí)驗(yàn)例和實(shí)施例用于進(jìn)一步說(shuō)明但不限于本發(fā)明。實(shí)驗(yàn)例1實(shí)驗(yàn)藥物為實(shí)施例2制劑，與現(xiàn)有類(lèi)似作用的中成藥右歸丸相比較，按照下述實(shí)驗(yàn)方法，在神疲乏力，失眠頭暈，腰膝酸軟，畏寒肢冷，食欲不振，心悸氣短等癥方面都有更好的效果。實(shí)驗(yàn)例2組方I
紅參75g黃芪 130g鹿茸 55 g制何首烏75g枸杞子 6 Og冬蟲(chóng)夏草 13g淫羊藿(炙)95g黃精 6 Og丹參 90g蜂花粉60g甘草 12g蜂王漿(凍干粉)8g組方II
紅參85g黃芪160g鹿茸58 g制何首烏85g枸杞子65g冬蟲(chóng)夏草14g淫羊藿(炙)IOOg黃精60g丹參85g蜂花粉65g甘草15g蜂王漿(凍干粉)7g對(duì)照組紅參108g
制何首烏 60g 淫羊藿(炙”2g 蜂花粉 24g
§ § § §
8 6 6 8
03 3 2
1
子
芪杞精草黃枸資甘
鹿萆36g
冬蟲(chóng)夏草20g
丹參60g
蜂王漿(凍干粉)12g按照藥物組I、藥物組II與對(duì)照組的處方比例稱(chēng)取原料藥材，按照上述實(shí)施例1工藝制備，比較治療陽(yáng)痿作用，結(jié)果見(jiàn)下表。本發(fā)明藥物對(duì)去勢(shì)大鼠生殖器官重量的影響(X ±SD)
權(quán)利要求
1. 一種治療腎陽(yáng)虛藥物組合物的檢測(cè)方法，其特征在于該方法包括如下鑒別方法和/ 或含量測(cè)定中的一種或幾種所述藥物組合物的原料藥組成為 紅參75重量份黃芪 130重量份鹿茸 55重量份制何首烏 75重量份枸杞子 60重量份冬蟲(chóng)夏草 13重量份淫羊藿(炙)95重量份黃精60重量份丹參 90重量份蜂花粉60重量份甘草 12重量份蜂王漿(凍干粉)8重量份；A、取人參皂苷Rb、Re、Rg及黃芪甲苷對(duì)照品，加甲醇制成每Iml各含Img的混合溶液， 作為對(duì)照品溶液；供試品溶液制備取本發(fā)明組合物膠囊劑裝量差異項(xiàng)下的內(nèi)容物，混勻， 取約1. 5g，精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，稱(chēng)定重量，置水浴上加熱回流提取1-3小時(shí)，取出，放冷，再稱(chēng)定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，精密量取濾液25ml，置蒸發(fā)皿中，蒸干，殘?jiān)铀?5ml使溶液解，并移至分液漏斗中，加氯仿振搖提取1-3次，每次15ml，棄去氯仿液，水液用水飽和的正丁醇振搖提取3-5次，每次20ml，合并正丁醇液，加氨試液30ml洗滌，棄去洗滌液，正丁醇液置于水浴上蒸干，殘?jiān)蛹状剂渴谷芙?；并定量轉(zhuǎn)移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，用微孔濾膜(0. 45 μ m)濾過(guò)，取續(xù)濾液， 即得；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液10 μ 1、上述對(duì)照品溶液5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠 G薄層板上，以氯仿-甲醇-水(11-15 6-9 1-3) 10°C以下放置的下層溶液為展開(kāi)劑， 展開(kāi)，取出，晾干，噴以9-11 %硫酸乙醇溶液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰，分別置日光及紫外光燈(365nm)下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯示相同顏色的斑點(diǎn)或熒光斑點(diǎn)；B、取淫羊藿苷對(duì)照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作為對(duì)照品溶液；供試品溶液的制備，取本發(fā)明組合物膠囊劑裝量差異項(xiàng)下的內(nèi)容物，混勻，取約1. 5g， 精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，稱(chēng)定重量，置水浴上加熱回流提取1-2小時(shí)，取出，放冷，再稱(chēng)定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，精密量取濾液 25ml，置蒸發(fā)皿中，蒸干，殘?jiān)铀?5ml使溶液解，并移至分液漏斗中，加氯仿振搖提取2_3 次，每次15ml，棄去氯仿液，水液用水飽和的正丁醇振搖提取3-5次，每次20ml，合并正丁醇液，加氨試液30ml洗滌，棄去洗滌液，正丁醇液置于水浴上蒸干，殘?jiān)蛹状剂渴谷芙猓徊⒍哭D(zhuǎn)移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，用微孔濾膜(0. 45 μ m)濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得； 照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液及上述對(duì)照品溶液各5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以醋酸乙酯-丁酮-甲酸-水(9-11 1-2 1-2 1-2)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以三氯化鋁試液，在105 □ C加熱數(shù)分鐘，置紫外光燈(365nm)下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；C、取本發(fā)明組合物膠囊劑內(nèi)容物5g，加甲醇50m；，置水浴上加熱回流1-2小時(shí)，取出，放冷，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶液，用氯仿振搖提取2-3次，每次15ml，合并氯仿液，蒸干，殘?jiān)蛹状糏ml使溶解，作為供試品溶液；另取枸杞子對(duì)照藥材lg，加水煎煮 10-20分鐘，濾過(guò)，濾液同法制成對(duì)照藥材溶液，照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各 5μ1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿一醋酸乙酯一甲醇(3-5 2-4 0.2-0. 5)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；含量測(cè)定照高效液相色譜法測(cè)定，色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-水07-31 69-74)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為203nm ；柱溫38-42 □ C ；理論板數(shù)按人參皂苷Rb1峰計(jì)算應(yīng)不低于2500 ；對(duì)照品溶液的制備，精密稱(chēng)取人參皂苷Rb1對(duì)照品7. 5mg，置25ml量瓶中，加甲醇使溶液，并稀釋至刻度，搖勻，即得(每Iml中含人參皂苷Rb1OJmg)；供試品溶液的制備，取本發(fā)明組合物膠囊劑裝量差異項(xiàng)下的內(nèi)容物，混勻，取約1. 5g， 精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，稱(chēng)定重量，置水浴上加熱回流提取1-2小時(shí)，取出，放冷，再稱(chēng)定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，精密量取濾液 25ml，置蒸發(fā)皿中，蒸干，殘?jiān)铀?5ml使溶液解，并移至分液漏斗中，加氯仿振搖提取2_3 次，每次15ml，棄去氯仿液，水液用水飽和的正丁醇振搖提取3-5次，每次20ml，合并正丁醇液，加氨試液30ml洗滌，棄去洗滌液，正丁醇液置于水浴上蒸干，殘?jiān)蛹状剂渴谷芙猓?并定量轉(zhuǎn)移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，用微孔濾膜(0.45μπι)濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得；測(cè)定法，分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μ 1，注入液相色譜議，測(cè)定，即得；本發(fā)明組合物膠囊劑每粒含人參皂苷I^b1 (C54H92O23)，不得少于0. 40mg。
2.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物的檢測(cè)方法，其特征在于該藥物組合物的原料藥組成為紅參 85重量份黃芪 160重量份鹿茸 58重量份制何首烏 85重量份枸杞子 65重量份冬蟲(chóng)夏草 14重量份淫羊藿(炙)100重量份黃精 60重量份丹參 85重量份峰花粉 65重量份甘草 15重量份蜂王漿(凍干粉)7重量份。
3.如權(quán)利要求1或2所述的藥物組合物的檢測(cè)方法，其特征在于該方法包括如下鑒別方法和/或含量測(cè)定中的一種或幾種鑒別A、取人參皂苷Rb、Re、Rg及黃芪甲苷對(duì)照品，加甲醇制成每Iml各含Img的混合溶液， 作為對(duì)照品溶液；供試品溶液制備取本發(fā)明組合物膠囊劑裝量差異項(xiàng)下的內(nèi)容物，混勻， 取約1. 5g，精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，稱(chēng)定重量，置水浴上加熱回流提取1. 5小時(shí)，取出，放冷，再稱(chēng)定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，精密量取濾液25ml，置蒸發(fā)皿中，蒸干，殘?jiān)铀?5ml使溶液解，并移至分液漏斗中，加氯仿振搖提取2次，每次15ml，棄去氯仿液，水液用水飽和的正丁醇振搖提取4次，每次20ml，合并正丁醇液，加氨試液30ml洗滌，棄去洗滌液，正丁醇液置于水浴上蒸干，殘?jiān)蛹状剂渴谷芙猓?并定量轉(zhuǎn)移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，用微孔濾膜(0.45μπι)濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液10 μ 1、上述對(duì)照品溶液5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-甲醇-水(13 7 2) 10°C以下放置的下層溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰，分別置日光及紫外光燈 (365nm)下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯示相同顏色的斑點(diǎn)或熒光斑點(diǎn)；B、取淫羊藿苷對(duì)照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作為對(duì)照品溶液；供試品溶液的制備，取本發(fā)明組合物膠囊劑裝量差異項(xiàng)下的內(nèi)容物，混勻，取約1. 5g， 精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，稱(chēng)定重量，置水浴上加熱回流提取1. 5小時(shí)，取出，放冷，再稱(chēng)定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，精密量取濾液 25ml，置蒸發(fā)皿中，蒸干，殘?jiān)铀?5ml使溶液解，并移至分液漏斗中，加氯仿振搖提取2 次，每次15ml，棄去氯仿液，水液用水飽和的正丁醇振搖提取4次，每次20ml，合并正丁醇液，加氨試液30ml洗滌，棄去洗滌液，正丁醇液置于水浴上蒸干，殘?jiān)蛹状剂渴谷芙猓徊⒍哭D(zhuǎn)移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，用微孔濾膜(0. 45 μ m)濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得； 照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液及上述對(duì)照品溶液各5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以醋酸乙酯-丁酮-甲酸-水(10 1 1 1)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以三氯化鋁試液，在105 □ C加熱數(shù)分鐘，置紫外光燈(365nm)下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；C、取本發(fā)明組合物膠囊劑內(nèi)容物5g，加甲醇50m；，置水浴上加熱回流1小時(shí)，取出，放冷，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶液，用氯仿振搖提取2次，每次15ml，合并氯仿液，蒸干，殘?jiān)蛹状糏ml使溶解，作為供試品溶液；另取枸杞子對(duì)照藥材lg，加水煎煮15分鐘， 濾過(guò)，濾液同法制成對(duì)照藥材溶液，照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿一醋酸乙酯一甲醇G 2 0.3)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；含量測(cè)定照高效液相色譜法測(cè)定，色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-水09 71)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為203nm ；柱溫40 □ C ；理論板數(shù)按人參皂苷Rb1峰計(jì)算應(yīng)不低于2500 ；對(duì)照品溶液的制備，精密稱(chēng)取人參皂苷Rb1對(duì)照品7. 5mg，置25ml量瓶中，加甲醇使溶液，并稀釋至刻度，搖勻，即得(每Iml中含人參皂苷Rb1OJmg)；供試品溶液的制備，取本發(fā)明組合物膠囊劑裝量差異項(xiàng)下的內(nèi)容物，混勻，取約1. 5g， 精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，稱(chēng)定重量，置水浴上加熱回流提取1. 5小時(shí)，取出，放冷，再稱(chēng)定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，精密量取濾液 25ml，置蒸發(fā)皿中，蒸干，殘?jiān)铀?5ml使溶液解，并移至分液漏斗中，加氯仿振搖提取2 次，每次15ml，棄去氯仿液，水液用水飽和的正丁醇振搖提取4次，每次20ml，合并正丁醇液，加氨試液30ml洗滌，棄去洗滌液，正丁醇液置于水浴上蒸干，殘?jiān)蛹状剂渴谷芙?；并定量轉(zhuǎn)移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，用微孔濾膜(0.45μπι)濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得；測(cè)定法，分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10 μ 1，注入液相色譜議，測(cè)定，即得；本發(fā)明組合物膠囊劑每粒含人參皂苷I^b1 (C54H92O23)，不得少于0. 40mg。
4. 一種藥物組合物的檢測(cè)方法，其特征在于該方法包括如下步驟選取如下藥物制成膠囊劑紅參 108g黃芪108g鹿茸36g制何首烏 6 Og枸杞子36g冬蟲(chóng)夏草20g淫羊藿(炙)72g黃精36g丹參60g蜂花粉 24g甘草28g蜂王漿(凍干粉)Ug;除蜂花粉、蜂王漿凍干粉外，將紅參、另■駕、冬蟲(chóng)3I草粉碎成細(xì)粉，其余I營(yíng)芪等七味，加10倍量水煎煮二次，每次2小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至相對(duì)密度為1. 20-1. 25 (600C ) 的清膏，減壓干燥成干浸膏，粉碎成細(xì)粉，與上述蜂花粉、蜂王漿凍干粉及紅參等細(xì)粉混勻過(guò)篩，裝入膠囊，制成1000粒，即得；鑒別A、取本品，置顯微鏡下觀察；草酸鈣簇晶直徑20-68μ m,棱角銳尖；未骨化的骨組織淡灰色或近無(wú)色，邊緣及表面均不整齊，具有不規(guī)則的塊狀突起物，其間隱約可見(jiàn)條狀紋理， 菌絲細(xì)長(zhǎng)，無(wú)色，不分枝或分枝，密集交叉成團(tuán)或斷裂成節(jié)；B、取人參皂苷Rb、Re、Rg及黃芪甲苷對(duì)照品，加甲醇制成每Iml各含Img的混合溶液， 作為對(duì)照品溶液；供試品溶液制備取本品裝量差異項(xiàng)下的內(nèi)容物，混勻，取約1.5g，精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，稱(chēng)定重量，置水浴上加熱回流提取1.5 小時(shí)，取出，放冷，再稱(chēng)定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，精密量取濾液25ml，置蒸發(fā)皿中，蒸干，殘?jiān)铀?5ml使溶液解，并移至分液漏斗中，加氯仿振搖提取2次，每次 15ml，棄去氯仿液，水液用水飽和的正丁醇振搖提取4次，每次20ml，合并正丁醇液，加氨試液30ml洗滌，棄去洗滌液，正丁醇液置于水浴上蒸干，殘?jiān)蛹状剂渴谷芙?；并定量轉(zhuǎn)移至 5ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，用微孔濾膜(0.45μπι)濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液10 μ 1、上述對(duì)照品溶液5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-甲醇-水(13 7 2) 10°C以下放置的下層溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰，分別置日光及紫外光燈 (365nm)下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯示相同顏色的斑點(diǎn)或熒光斑點(diǎn)；C、取淫羊藿苷對(duì)照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作為對(duì)照品溶液；供試品溶液的制備，取本品裝量差異項(xiàng)下的內(nèi)容物，混勻，取約1.5g，精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，稱(chēng)定重量，置水浴上加熱回流提取1.5小時(shí)，取出， 放冷，再稱(chēng)定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，精密量取濾液25ml，置蒸發(fā)皿中，蒸干，殘?jiān)铀?5ml使溶液解，并移至分液漏斗中，加氯仿振搖提取2次，每次15ml，棄去氯仿液，水液用水飽和的正丁醇振搖提取4次，每次20ml，合并正丁醇液，加氨試液30ml洗滌， 棄去洗滌液，正丁醇液置于水浴上蒸干，殘?jiān)蛹状剂渴谷芙?；并定量轉(zhuǎn)移至5ml量瓶中， 加甲醇至刻度，搖勻，用微孔濾膜(0.45μπι)濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液及上述對(duì)照品溶液各5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以醋酸乙酯-丁酮-甲酸-水(10 1 1 1)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以三氯化鋁試液，在105 DC 加熱數(shù)分鐘，置紫外光燈(365nm)下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上， 顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；D、取本品內(nèi)容物5g，加甲醇50m ；，置水浴上加熱回流1小時(shí)，取出，放冷，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶液，用氯仿振搖提取2次，每次15ml，合并氯仿液，蒸干，殘?jiān)蛹状糏ml使溶解，作為供試品溶液；另取枸杞子對(duì)照藥材lg，加水煎煮15分鐘，濾過(guò)，濾液同法制成對(duì)照藥材溶液，照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G 薄層板上，以氯仿一醋酸乙酯一甲醇G 2 0. 3)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；含量測(cè)定照高效液相色譜法測(cè)定，色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-水09 71)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為203nm ；柱溫40 □ C ；理論板數(shù)按人參皂苷Rb1峰計(jì)算應(yīng)不低于2500 ；對(duì)照品溶液的制備，精密稱(chēng)取人參皂苷Rb1對(duì)照品7. 5mg，置25ml量瓶中，加甲醇使溶液，并稀釋至刻度，搖勻，即得(每Iml中含人參皂苷Rb1OJmg)；供試品溶液的制備，取本品裝量差異項(xiàng)下的內(nèi)容物，混勻，取約1.5g，精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，稱(chēng)定重量，置水浴上加熱回流提取1.5小時(shí)，取出， 放冷，再稱(chēng)定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，精密量取濾液25ml，置蒸發(fā)皿中，蒸干，殘?jiān)铀?5ml使溶液解，并移至分液漏斗中，加氯仿振搖提取2次，每次15ml，棄去氯仿液，水液用水飽和的正丁醇振搖提取4次，每次20ml，合并正丁醇液，加氨試液30ml洗滌，棄去洗滌液，正丁醇液置于水浴上蒸干，殘?jiān)蛹状剂渴谷芙猓徊⒍哭D(zhuǎn)移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，用微孔濾膜(0.45μπι)濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得；測(cè)定法，分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10 μ 1，注入液相色譜議，測(cè)定，即得；本品每粒含人參皂苷1 (C54H92O23)，不得少于0. 40mg。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種治療腎陽(yáng)虛的中藥組合物及其制備方法和質(zhì)量控制方法。本發(fā)明的藥物組合物原料藥組成為除蜂花粉、蜂王漿凍干粉外，將人參、紫河車(chē)、冬蟲(chóng)夏草粉碎成細(xì)粉，其余六味，加9-11倍量水煎煮2-3次，每次1-3小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至相對(duì)密度為1.20-1.25(55-65℃)的清膏，減壓干燥成干浸膏，粉碎成細(xì)粉，與上述蜂花粉、蜂王漿凍干粉及紅參等細(xì)粉混勻過(guò)篩，裝入膠囊，即得。本發(fā)明采用高效液相色譜法對(duì)人參皂苷Rb1進(jìn)行含量測(cè)定。本發(fā)明組合物具有很好的藥效，對(duì)氣虛精虧，腎陽(yáng)不足引起的神疲乏力，失眠頭暈，，腰膝酸軟，畏寒肢冷，食欲不振，心悸氣短等癥有很好的效果。
文檔編號(hào)G01N30/02GK102297925SQ201110191840
公開(kāi)日2011年12月28日 申請(qǐng)日期2007年2月1日 優(yōu)先權(quán)日2007年2月1日
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