專利名稱：生物體試樣前處理方法以及裝置的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及進(jìn)行用于實(shí)施檢測(cè)體的溶血處理、除蛋白質(zhì)處理、固相提取處理的前處理的生物體試樣前處理方法以及裝置。
背景技術(shù)：
例如，在從含有多成分的血液試樣的目標(biāo)成分提取中，存在以目標(biāo)成分的尺寸、重量、形狀之類的物理性質(zhì)、溶解性、親和性之類的生化性質(zhì)為指標(biāo)的各種技術(shù)。特別關(guān)于血液之類的生物體試樣中的微量成分的提取，利用色譜法的分離技術(shù)正在發(fā)達(dá)，進(jìn)行適于目標(biāo)成分的填充劑的開發(fā)、方法的最佳化。即便在使用這樣的高度分離技術(shù)的情況下，為了從由各種細(xì)胞、示出不同的諸性質(zhì)的多成分構(gòu)成的血液高效提取出目標(biāo)微量成分，用于得到可以提取的狀態(tài)的試樣制備、粗精制成為必須。作為對(duì)血液中的微量成分進(jìn)行測(cè)定的臨床檢查事例，可以舉出血中治療藥物監(jiān)控(Therapeutic Drug Monitoring, TDM)。TDM是通過用于示出藥效的治療范圍窄的藥劑等，經(jīng)時(shí)地確認(rèn)用藥后的患者血液中的藥劑濃度，對(duì)每個(gè)患者實(shí)踐合適的用藥計(jì)劃所必要的檢查。作為TDM的對(duì)象藥劑，可以舉出抗癲癇藥、抗生素、免疫抑制劑、心律不齊治療藥、精神科藥物等。大多數(shù)藥劑分布于血清中，但對(duì)例如臟器移植患者等使用的免疫抑制劑具有高脂溶性，具有血細(xì)胞移行性，因此在對(duì)其血中濃度進(jìn)行測(cè)定的情況下，需要對(duì)使其溶血而取出血細(xì)胞內(nèi)容物后吸附于蛋白質(zhì)等的藥劑進(jìn)行提取的前處理。作為溶血方法，可以應(yīng)用化學(xué)的、物理的、生物學(xué)的原理而加以實(shí)施。例如，作為化學(xué)的溶血方法，可以舉出利用各種溶劑、表面活性劑溶解構(gòu)成細(xì)胞膜的脂質(zhì)或使其受損而引起溶血。另外，作為物理學(xué)的方法，可以舉出壓力、離心力、攪拌、凍結(jié)溶解、低滲化等。作為生物學(xué)的方法，可以舉出對(duì)血細(xì)胞的抗體、補(bǔ)體結(jié)合導(dǎo)致的膜貫通蛋白質(zhì)復(fù)合體形成、病原性細(xì)菌所產(chǎn)生的溶血素(hemolysin)引起的在血細(xì)胞細(xì)胞膜的孔形成等。另一方面，作為對(duì)在血液中的蛋白質(zhì)吸附的目標(biāo)成分進(jìn)行回收的方法，可以舉出除蛋白質(zhì)處理或者液/液提取。通過向溶血處理后的樣品中添加有機(jī)溶劑，將目標(biāo)成分提取到有機(jī)溶劑側(cè)，使蛋白質(zhì)變性，通常進(jìn)行離心分離，由此將凝集蛋白質(zhì)和上清分離，然后，對(duì)上清成分進(jìn)行回收。除蛋白質(zhì)處理是通過使血中大量含有的各種各樣的蛋白質(zhì)凝集而由此除去的工序,通過實(shí)施這樣的處理,開始成為將源自全血的試樣與血清或者血漿檢測(cè)體同樣處理的狀態(tài)。有機(jī)溶劑如前所述也具有溶血效果，因此也有直接添加到血液中進(jìn)行溶血、液/液提取、除蛋白質(zhì)的方法。另外，此時(shí)為了補(bǔ)充除蛋白質(zhì)效果，也有添加前述的硫酸鋅的方法。通過對(duì)全血檢測(cè)體實(shí)施如上所述的處理，由此能以溶液狀態(tài)回收血細(xì)胞移行性的藥劑，因此，例如可以提供給固相提取處理、液相色譜分離等之類的精制操作以供于試驗(yàn)。通常，在液/液提取后的回收上清干涸之后，用合適容量的溶解液進(jìn)行再溶解，由此進(jìn)行液量的減少和目標(biāo)成分的濃縮。然后，例如，通過將再溶解物提供給液相色譜質(zhì)譜分析計(jì)(LiquidChromatograph Mass Spectrometer,LCMS)等以供于試驗(yàn)，進(jìn)行濃縮后的目標(biāo)成分的分離精制和檢測(cè)，實(shí)施目標(biāo)成分的鑒定、定量解析。作為固相提取的公知技術(shù)，有專利文獻(xiàn)I中記載的技術(shù)。該專利文獻(xiàn)I中記載的技術(shù)，例如是向注射器狀的容器中填充固相提取劑且為了保持該填充劑而用過濾器(過濾芯)夾持填充劑的上游和下游的結(jié)構(gòu)的固相提取柱。現(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn)專利文獻(xiàn)專利文獻(xiàn)I :日本專利第4062637號(hào)公報(bào)血液等生物體試樣中所含的目標(biāo)成分是微量的，在前處理中，需要極力避免其消耗。但是,在以往的技術(shù)中，關(guān)于生物體試樣,暫時(shí)回收反應(yīng)產(chǎn)物的過濾處理后的試樣,收納于容器等中，使用其他容器等進(jìn)行固相提取處理。為此，在上述一次回收時(shí)，有可能發(fā)生試樣的損耗、與其他試樣等的污染。另外，需要一次回收用的容器、尖頭等，用于此的成本、清洗等成為必要。進(jìn)而，試樣的反應(yīng)如上所述需要復(fù)雜的處理，需要工夫、時(shí)間。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于，實(shí)現(xiàn)可以在不對(duì)反應(yīng)處理后的過濾液進(jìn)行一次回收的情況下能將其提供給固相提取處理的生物體試樣前處理方法以及裝置。用于解決課題的手段
為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明以如下所示而構(gòu)成。本發(fā)明的生物體試樣前處理方法以及裝置，向在過濾器材中收納的過濾構(gòu)件供給生物體試樣和除蛋白質(zhì)試劑，將上述過濾構(gòu)件的過濾液提供給收納固相提取劑的固相提取器材的上述固相提取劑，從上述固相提取劑所含的上述過濾液提取生物體試樣的固相。發(fā)明的效果實(shí)現(xiàn)可以在不對(duì)反應(yīng)處理后的過濾液進(jìn)行一次回收的情況下將其提供給固相提取處理的試樣處理方法以及裝置。


圖I是對(duì)本發(fā)明的實(shí)施例I中的試樣前處理方法的前處理流程進(jìn)行說明的圖。圖2是表示免疫抑制劑的甲醇溶解性的曲線圖。圖3是作為本發(fā)明的實(shí)施例2的懸浮方式的試樣前處理裝置的說明圖。圖4是表示作為本發(fā)明的實(shí)施例3的注射器方式的試樣前處理裝置的圖。圖5是有關(guān)使用作為本發(fā)明的實(shí)施例3的試樣前處理器材進(jìn)行試樣制備時(shí)的操作法的說明圖。圖6是作為本發(fā)明的實(shí)施例4的試樣前處理裝置的說明圖。圖7是有關(guān)使用作為本發(fā)明的實(shí)施例4的試樣前處理器材進(jìn)行試樣制備時(shí)的操作法的說明圖。
圖8是作為本發(fā)明的實(shí)施例5的試樣前處理裝置的說明圖。圖9是作為本發(fā)明的實(shí)施例6的試樣前處理裝置的說明圖。圖IOA是作為本發(fā)明的實(shí)施例7的試樣前處理裝置的說明圖。圖IOB是作為本發(fā)明的實(shí)施例7的試樣前處理裝置的說明圖。圖IOC是作為本發(fā)明的實(shí)施例7的試樣前處理裝置的說明圖。圖IIA是本發(fā)明的實(shí)施例7的變形例的說明圖。圖IIB是本發(fā)明的實(shí)施例7的變形例的說明圖。圖12是作為本發(fā)明的實(shí)施例7的試樣前處理裝置的動(dòng)作說明圖。圖13是作為本發(fā)明的實(shí)施例8的板式的試樣前處理裝置的說明圖。圖14是作為本發(fā)明的實(shí)施例9的試樣前處理裝置的說明圖。
具體實(shí)施例方式參照附圖對(duì)本發(fā)明的實(shí)施例進(jìn)行說明。實(shí)施例I圖I是對(duì)本發(fā)明的實(shí)施例I中的試樣前處理方法的前處理流程進(jìn)行說明的圖。圖I的前處理流程103是本發(fā)明的實(shí)施例I中的前處理流程，將全血處理和固相提取處理一并加以處理。圖I示出為了與本發(fā)明的前處理進(jìn)行比較而分開進(jìn)行全血處理(處理流程101)和固相提取處理(處理流程102)的流程。(樣品制備工序以及免疫抑制劑的溶解性)在處理流程101中，向過濾器材分注全血檢測(cè)體，進(jìn)而對(duì)溶血處理液(硫酸鋅水溶液等)進(jìn)行了分注后，進(jìn)行攪拌。然后，對(duì)除蛋白質(zhì)液(甲醇等)進(jìn)行分注，進(jìn)行了攪拌之后，過濾(或者離心分離)。此時(shí)，例如，在像免疫抑制劑那樣疏水性高、具有血細(xì)胞移行性的藥劑的情況下，為了從患者檢測(cè)體提取目標(biāo)成分，需要在一開始使其溶血。溶血例如通過對(duì)全血試樣添加H2O而使其低滲化,通過使血細(xì)胞爆裂而進(jìn)行。另外，為了除去全血中作為夾雜成分的蛋白質(zhì),利用有機(jī)溶劑引起蛋白質(zhì)變性,使其凝集，通過離心分離或者過濾對(duì)上清進(jìn)行回收。關(guān)于該除蛋白質(zhì)處理，即便檢測(cè)體不是全血(例如，血清、血漿、尿、體液等)，也可以期待凈化效果。接著，在處理流程102中，向固相提取劑中添加有機(jī)溶劑，施加壓力，添加水，施加壓力，由此對(duì)固相提取劑進(jìn)行狀態(tài)調(diào)節(jié)，向該固相提取劑添加前述的臨時(shí)回收后的濾液(上清)，添加了內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)后,進(jìn)行攪拌。此外,進(jìn)行壓力施加一清洗液添加一壓力施加—洗脫液(甲醇等)添加一壓力施加，使得目標(biāo)成分被吸附，利用清洗除去非特異性吸附的成分之后，對(duì)目標(biāo)成分進(jìn)行洗脫回收，由此試樣制備結(jié)束。在本發(fā)明的實(shí)施例I中，其特征在于，不對(duì)溶血以及除蛋白質(zhì)處理后的濾液進(jìn)行臨時(shí)的回收，直接將其提供給固相提取劑供于試驗(yàn)，由此進(jìn)行目標(biāo)成分向固相提取劑的吸附處理(處理流程103)。在本發(fā)明的實(shí)施例I的試樣前處理方法中使用的前處理裝置，過濾器材和作為固相提取器的柱成為一體。為此，首先，前處理裝置(固相提取藥筒)進(jìn)行與處理流程102中的狀態(tài)調(diào)節(jié)相同的狀態(tài)調(diào)節(jié)，然后，從與處理流程101相同的全血檢測(cè)體分注進(jìn)行過濾(其中，通過施加壓力的過濾)，在不進(jìn)行濾液的臨時(shí)回收的情況下，從與處理流程102相同的內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)添加進(jìn)行洗脫液添加、施加壓力，對(duì)固相進(jìn)行提取。此時(shí)，濾液的組成需要與目標(biāo)成分向固相提取劑的吸附條件相適應(yīng)。為了對(duì)其進(jìn)行詳細(xì)說明，作為一例，對(duì)免疫抑制劑的甲醇溶解性進(jìn)行說明。例如，他克莫司、西羅莫司(雷帕霉素)、依維莫司、環(huán)孢霉素之類的免疫抑制劑，具有疏水性高、難以溶于水系的溶液的性質(zhì)。在對(duì)這些藥劑的甲醇溶解性進(jìn)行了研究，結(jié)果認(rèn)為如果不是存在50%以上的甲醇的情況下就不能穩(wěn)定地溶解的傾向。作為事例，圖2示出依維莫司(201)以及環(huán)孢霉素(202)的數(shù)據(jù)。這表示在以這些藥劑為提取對(duì)象的情況下，有必要注意除蛋白質(zhì)處理時(shí)以及向固相提取劑供給試樣以供于試驗(yàn)時(shí)的有機(jī)溶劑的最終濃度，至少使用甲醇的情況下優(yōu)選50%以上。在像這樣的免疫抑制劑那樣疏水性高的藥劑的情況下，通過將除蛋白質(zhì)時(shí)的甲醇最終濃度設(shè)定成50%，不僅僅是由蛋白質(zhì)變性造成的凝集物形成，還因?yàn)槿苎幚矶苁谷〕龅窖?xì)胞外的免疫抑制劑溶于上清側(cè)，且也可以直接向固相提取劑進(jìn)行吸附處理。由此，可以將由除蛋白質(zhì)處理得到的濾液直接提供給固相提取劑以供于試驗(yàn)。另一方面，在親水性高的藥劑的情況下，如果除蛋白質(zhì)時(shí)的甲醇最終濃度達(dá)到50%，即便將其濾液直接提供給固相提取劑以供于試驗(yàn)，也不能使目標(biāo)成分吸附。此時(shí)，向蛋白質(zhì)變性后的凝集物懸浮液中添加必要量的H2O等，使甲醇濃度下降之后進(jìn)行過濾處理，將其濾液直接提供給固相提取劑以供于試驗(yàn)，由此也可以使目標(biāo)成分吸附于固相提取劑。關(guān)于后述的各實(shí)施例，不進(jìn)行前述的除蛋白質(zhì)時(shí)的濾液的臨時(shí)回收而直接提供給固相提取劑以供于試驗(yàn)由此使目標(biāo)成分吸附的方法，任何的器材構(gòu)成都可以使用。在作為評(píng)價(jià)用的試樣沒有患者全血檢測(cè)體的情況下，可以制備模擬的患者全血檢測(cè)體加以使用。關(guān)于模擬患者全血檢測(cè)體，可以對(duì)從健康人采的全血檢測(cè)體將例如用50%甲醇溶解的免疫抑制劑標(biāo)本以最終濃度成為各免疫抑制劑的治療范圍濃度左右的方式添加而制備。進(jìn)而，邊將所制備的模擬患者全血檢測(cè)體在37°C緩慢顛倒混合，邊孵育30min，由此也可以再現(xiàn)各免疫抑制劑的血細(xì)胞移行。如上所示，根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例1，構(gòu)成為在不對(duì)反應(yīng)處理后的過濾液進(jìn)行一次回收的情況下將全血處理和固相提取處理一并進(jìn)行，所以可以抑制在一次回收時(shí)發(fā)生的生物體試樣的損耗、及與其他生物體試樣等的污染。另外，不需要一次回收用的容器、尖頭等，可以省略為此的成本、清洗等。實(shí)施例2接著，對(duì)作為本發(fā)明的實(shí)施例2的生物體試樣前處理裝置進(jìn)行說明。該實(shí)施例2成為懸浮方式的器材構(gòu)成。圖3是作為本發(fā)明的實(shí)施例2的懸浮方式的試樣前處理裝置的說明圖。如圖3的(C)所示，試樣前處理器材301其特征在于，通過將過濾器材302插入固相提取器材303而一體化。本試樣前處理器材301的特征在于，在上游側(cè)配置過濾器材302，在下游側(cè)配置固相提取器材303，在不對(duì)來(lái)自過濾器材302的濾液進(jìn)行臨時(shí)回收的情況下直接將其提供給固相提取器材303以供于試驗(yàn)。
過濾器材302由過濾儲(chǔ)器304和過濾部305構(gòu)成。另外，固相提取器材303是杯狀，添加固相提取劑308而使用。過濾器材302中的過濾儲(chǔ)器304的原材料不具體限制，可以使用通常在生物體試樣的前處理等中使用的樹脂、金屬等。其中，為了滿足添加的試劑部分的容量，優(yōu)選至少具有供于試驗(yàn)的樣品量的8倍以上的容許容量。這是因?yàn)椋缭跒榱颂崛∶庖咭种苿┒褂萌?0μ I作為樣品的情況下，溶血處理中使用的硫酸鋅溶液的容量為150 μ 1，除蛋白質(zhì)處理中使用的甲醇的容量為200 μ I,所以此時(shí)的反應(yīng)溶液的總量為400 μ I,相當(dāng)于樣品量的8倍量。另外，過濾器材302中的過濾部305的原材料，只要具有過濾功能就沒有限制，可以應(yīng)用通常在生物體試樣的前處理等中使用的材料。因在過濾器材302內(nèi)的反應(yīng)而生成的凝集物量，在很大程度上依賴于檢測(cè)體的種類、來(lái)源、量等，但為了避免過濾部305的堵塞，優(yōu)選過濾部上游側(cè)底面積311大。另外，關(guān)于過濾部305的孔尺寸，為了捕捉生物體試樣中的夾雜微細(xì)成分，優(yōu)選為φ2.0μη 以下。固相提取器材303的原材料不具體限制，可以使用通常在生物體試樣的前處理等中使用的樹脂、金屬等。其中，為了滿足添加的試劑部分的容量，優(yōu)選至少具有與供于試驗(yàn)的除蛋白質(zhì)處理完的樣品量相等或其以上的容許容量。另外，在固相提取器材303中填充的固相提取劑308，應(yīng)用具有適于對(duì)象成分的提取的性能的提取劑。例如，可以應(yīng)用硅膠、聚合物、樹脂制的珠等。以下示出使用上述的試樣前處理器材301進(jìn)行試樣制備時(shí)的操作法。針對(duì)固相提取劑308的狀態(tài)調(diào)節(jié)、目標(biāo)成分的吸附、夾雜成分的除去、目標(biāo)成分的洗脫回收中使用的各試劑，按照固相提取劑308的特性選擇合適的試劑。為了方便起見，在本實(shí)施例示出使用了反相模式的固相提取劑308時(shí)的事例。在圖3的(A)、⑶中，向杯狀的固相提取器材303中添加必要量的固相提取劑308，最開始進(jìn)行其狀態(tài)調(diào)節(jié)。首先，為了使固相提取劑308的官能團(tuán)活化，例如添加甲醇等有機(jī)溶劑，充分?jǐn)嚢韬?，進(jìn)行離心分離，廢棄上清(圖3的(A))。接著，為了平衡化固相提取劑308，例如添加緩沖液等水系溶液，充分?jǐn)嚢韬?，離心分離，廢棄上清(圖3的(B))。綜上，固相提取劑308的狀態(tài)調(diào)節(jié)完成。接著，如圖3的(C)所示，在固相提取器材303的開口部安裝過濾器材302，向過濾儲(chǔ)器304內(nèi)添加試樣。此時(shí)，例如在以質(zhì)譜分析等對(duì)提取成分進(jìn)行測(cè)定的情況下，也添加內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，充分?jǐn)嚢?。接著，如圖3的⑶所示，在試樣為全血且有必要取出血細(xì)胞內(nèi)成分的情況下，添加必要量的溶血溶液，充分?jǐn)嚢?，由此破壞血?xì)胞。接著，如圖3的(E)所示，添加必要量的蛋白質(zhì)變性溶液，充分?jǐn)嚢?。由此，試樣中的蛋白質(zhì)發(fā)生變性，形成凝集物。接著，如圖3的(F)所示，對(duì)試樣前處理器材303施以離心分離，由此使凝集物殘留于過濾器材302側(cè)，在不進(jìn)行濾液回收的情況下，經(jīng)由玻璃過濾器、樹脂制過濾器等過濾部305直接將濾液提供給固相提取劑以供于試驗(yàn)。通過該操作，在固相提取劑308上吸附目標(biāo)成分。
接著，廢棄過濾器材302，充分?jǐn)嚢韫滔嗵崛∑鞑?03內(nèi)的固相提取劑308，離心分離后，廢棄上清。通過該操作，除去未在固相提取劑308上吸附的夾雜成分。接著，如圖3的(G)所示，向固相提取器材303內(nèi)添加必要量的清洗液，充分?jǐn)嚢韬箅x心分離，廢棄上清。通過該操作，除去在固相提取劑308上非特異性吸附的夾雜成分。接著，如圖3的⑶所示，在固相提取器材303內(nèi)添加必要量的洗脫液，充分?jǐn)嚢韬箅x心分離，廢棄上清。通過該操作，對(duì)在固相提取劑308上特異性吸附的目標(biāo)成分進(jìn)行洗脫回收。例如，在固相提取劑308為磁性體的情況下，可以不利用如前所述的離心分離，而是通過使磁鐵等接近固相提取器材303表面，由此將固相提取劑308和上清分離。如上所述，根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例2，構(gòu)成為在不將反應(yīng)處理后的過濾液一次回收的情況下將全血處理和固相提取處理一并進(jìn)行，所以可以利用簡(jiǎn)單的構(gòu)成進(jìn)行反應(yīng)處理，并且可以抑制一次回收時(shí)發(fā)生的試樣的損耗、與其他試樣等的污染。另外，不需要一次回收用的容器、尖頭等，可以省略為此的成本、清洗等。實(shí)施例3接著對(duì)作為本發(fā)明的實(shí)施例3的試樣前處理裝置進(jìn)行說明。該實(shí)施例2成為注射器方式(不能裝卸)的器材構(gòu)成。圖4是表示作為本發(fā)明的實(shí)施例3的注射器方式(不能裝卸)的試樣前處理裝置(試樣前處理器材)401的結(jié)構(gòu)的圖。在圖4中，試樣前處理器材401成為不能裝卸以便過濾器材402和固相提取器材403彼此不能分離的結(jié)構(gòu)。關(guān)于試樣前處理器材401，在上游側(cè)配置過濾器材402，在下游側(cè)配置固相提取器材403，在不將來(lái)自過濾器材402的濾液臨時(shí)回收的情況下而將其直接提供給固相提取器材403以供于試驗(yàn)。過濾器材402由過濾儲(chǔ)器404和過濾部405構(gòu)成。另外，固相提取器材403由固相提取儲(chǔ)器406、固相提取劑408以及將固相提取劑408保持在固相提取器材403內(nèi)的上游側(cè)過濾芯407和下游側(cè)過濾芯409構(gòu)成。過濾器材402中的過濾儲(chǔ)器404的原材料不具體限制，可以使用通常在生物體試樣的前處理等中使用的樹脂、金屬等。其中，為了滿足添加的試劑部分的容量，優(yōu)選至少具有供于試驗(yàn)的樣品量的8倍以上的容許容量。這是因?yàn)?，在例如為了進(jìn)行免疫抑制劑提取而使用全血50 μ I作為樣品的情況下，溶血處理中使用的硫酸鋅溶液的容量為150 μ 1，除蛋白質(zhì)處理中使用的甲醇的容量為200 μ I,所以此時(shí)的反應(yīng)溶液的總量為400 μ I,相當(dāng)于樣品量的8倍量。另外，過濾器材402中的過濾部405的原材料，只要具有過濾功能就沒有限制，可以應(yīng)用通常在生物體試樣的前處理等中使用的材料。因在過濾器材402內(nèi)的反應(yīng)而生成的凝集物量，在很大程度上依賴于檢測(cè)體的種類、來(lái)源、量等，但為了避免過濾部405的堵塞，優(yōu)選與固相提取器材403中的上游側(cè)過濾芯底面積413相比，優(yōu)選過濾部上游側(cè)底面積411更大。另外，關(guān)于過濾部405的孔尺寸，為了捕捉生物體試樣中的夾雜微細(xì)成分，優(yōu)選為φ2.Ομιτι 以下。
固相提取器材403中的固相提取儲(chǔ)器406的原材料不具體限制，可以使用通常在生物體試樣的前處理等中使用的樹脂、金屬等。其中，為了滿足添加的試劑部分的容量，優(yōu)選至少具有與供于試驗(yàn)的除蛋白質(zhì)處理完的樣品量相等或其以上的容許容量。另外，固相提取器材403中的固相提取劑408的填充部的結(jié)構(gòu)，在很大程度上依賴于所填充的固相提取劑408的性能、規(guī)格，但為了確保微容量試樣中的微量成分的提取效率，優(yōu)選與上游側(cè)過濾芯底面413的直徑相等或其以上的填充高度414。其中，上游側(cè)過濾芯底面積413和下游側(cè)過濾芯底面積415的大小并非必須相同，固相提取劑408的填充形狀可以是例如細(xì)管狀(圓柱狀)，也可以是圓錐狀。另外，填充的固相提取劑408應(yīng)用具有與對(duì)象成分的提取相對(duì)應(yīng)的性能的提取劑。圖5是有關(guān)使用試樣前處理器材401進(jìn)行試樣制備時(shí)的操作法的說明圖。針對(duì)固相提取劑508的狀態(tài)調(diào)節(jié)、目標(biāo)成分的吸附、夾雜成分的除去、目標(biāo)成分的洗脫回收中使用的各試劑，按照固相提取劑508的特性選擇合適的試劑。為了方便起見，本實(shí)施例3中示出使用了反相模式的固相提取劑508時(shí)的事例。在圖5的㈧中，首先，向過濾器材502中添加例如甲醇等有機(jī)溶劑，施加壓力，通過向試樣前處理器材501的上端開口部的加壓或者從下端開口部的吸引，經(jīng)由過濾部505向固相提取劑508通液體，廢棄從固相提取器材503的下端排出的液體。通過該操作，使固相提取劑508的官能團(tuán)活化。接著，在圖5的(B)中，向過濾器材502中添加例如緩沖液等水系溶液，施加壓力，利用向試樣前處理器材501的上端開口部的加壓或者從下端開口部的吸引，經(jīng)由過濾部505向固相提取劑508通液體，廢棄從固相提取器材503的下端排出的液體。通過該操作，使活化的固相提取劑508平衡化，由此固相提取劑508的狀態(tài)調(diào)節(jié)完成。接著，如圖5的(C)所示，向過濾器材502中添加試樣。此時(shí),例如,在用質(zhì)譜分析等對(duì)提取成分進(jìn)行測(cè)定的情況下，也添加內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，充分?jǐn)嚢?。接著，如圖5的(D)所示，在試樣為全血而需要取出血細(xì)胞內(nèi)成分的情況下，添加必要量的溶血溶液，充分?jǐn)嚢?。通過該操作破壞血細(xì)胞。接著，如圖5的(E)所示，向過濾器材502中添加必要量的蛋白質(zhì)變性溶液，充分?jǐn)嚢琛Ｍㄟ^該操作，試樣中的蛋白質(zhì)發(fā)生變性，形成凝集物。接著，如圖5的(F)所示，向試樣前處理器材501施加壓力，利用向試樣前處理器材501的上端開口部的加壓或者從下端開口部的吸引，將凝集物殘留于過濾器材502側(cè)，在不回收濾液的情況下經(jīng)由過濾部505直接將濾液提供給固相提取劑508以供于試驗(yàn)。廢棄從固相提取器材503的下端排出的液體。通過該操作，在固相提取劑508有目標(biāo)成分吸附，同時(shí)除去未吸附于固相提取劑508的夾雜成分。接著，如圖5的(G)所示，向過濾器材502內(nèi)添加必要量的清洗液，向試樣前處理器材501施加壓力，利用向試樣前處理器材501的上端開口部的加壓或者從下端開口部的吸引，經(jīng)由過濾部505向固相提取劑508通液體，廢棄從固相提取器材503的下端排出的液體。通過該操作，除去在固相提取劑508上非特異性吸附的夾雜成分。接著，如圖5的⑶所示，向過濾器材502內(nèi)添加必要量的洗脫液，向試樣前處理器材501施加壓力，利用向試樣前處理器材501的上端開口部的加壓或者從下端開口部的吸引，經(jīng)由過濾部505向固相提取劑508通液體，回收從固相提取器材503的下端排出的液體。通過該操作，對(duì)在固相提取劑508上特異性吸附的目標(biāo)成分進(jìn)行洗脫回收。在本發(fā)明的實(shí)施例3中，也可以得到與實(shí)施例2相同的效果。實(shí)施例4接著，對(duì)作為本發(fā)明的實(shí)施例4的試樣前處理裝置進(jìn)行說明。該實(shí)施例4成為注射器方式(可以裝卸)的器材構(gòu)成。圖6是作為本發(fā)明的實(shí)施例4的試樣前處理裝置(器材)601的說明圖。圖6的(A)示出簡(jiǎn)要構(gòu)成，圖6的(B)示出試樣前處理器材601的簡(jiǎn)要截面。對(duì)過濾器材602和固相提取器材603具有可通過魯爾接口(Luer-Lok)方式等的連結(jié)機(jī)構(gòu)616裝卸的結(jié)構(gòu)且被連結(jié)的試樣前處理器材601的結(jié)構(gòu)進(jìn)行說明。在圖6中，關(guān)于本發(fā)明的試樣前處理器材601，在上游側(cè)配置過濾器材602，在下游側(cè)配置固相提取器材603，在不將過濾器材602的濾液臨時(shí)回收的情況下直接將其提供給固相提取器材603以供于試驗(yàn)。過濾器材602具備過濾儲(chǔ)器604和過濾部605。另外，固相提取器材603具備固相提取儲(chǔ)器606、固相提取劑608以及將固相提取劑608保持在固相提取器材603內(nèi)的上游側(cè)過濾芯607和下游側(cè)過濾芯609。過濾器材602中的過濾儲(chǔ)器604的原材料不具體限制，可以使用通常在生物體試樣的前處理等中使用的樹脂、金屬等。其中，為了滿足添加的試劑部分的容量，優(yōu)選至少具有供于試驗(yàn)的樣品量的8倍以上的容許容量。這是因?yàn)?，例如在為了進(jìn)行免疫抑制劑提取而使用全血50μ I作為樣品的情況下，溶血處理中使用的硫酸鋅溶液的容量為150 μ 1，除蛋白質(zhì)處理中使用的甲醇的容量為200 μ I,因此此時(shí)的反應(yīng)溶液的總量為400 μ I,相當(dāng)于樣品量的8倍量。另外，過濾器材602中的過濾部605的原材料，只要具有過濾功能就沒有限制，可以應(yīng)用通常在生物體試樣的前處理等中使用的材料。因在過濾器材602內(nèi)的反應(yīng)而生成的凝集物量，在很大程度上依賴于檢測(cè)體的種類、來(lái)源、量等，但為了避免過濾部605的堵塞，與固相提取器材603中的上游側(cè)過濾芯底面積613相比，優(yōu)選過濾部上游側(cè)底面積611更大。另外，關(guān)于過濾部605的孔尺寸，為了捕捉生物體試樣中的夾雜微細(xì)成分，優(yōu)選為φ2.0μηι 以下。固相提取器材603中的固相提取儲(chǔ)器606的原材料不具體限制，可以使用通常在生物體試樣的前處理等中使用的樹脂、金屬等。其中，為了滿足添加的試劑部分的容量，優(yōu)選至少具有與供于試驗(yàn)的除蛋白質(zhì)處理完樣品量相等或其以上的容許容量。另外，固相提取器材603中的固相提取劑608的填充部的結(jié)構(gòu)，在很大程度上依賴于所填充的固相提取劑608的性能、規(guī)格，但為了確保微容量試樣中的微量成分的提取效率，優(yōu)選為與上游側(cè)過濾芯底面613的直徑相等或其以上的填充高度614。其中，上游側(cè)過濾芯底面積613和下游側(cè)過濾芯底面積615的大小并非必須相同，固相提取劑608的填充形狀，例如可以為細(xì)管狀(圓柱狀)，也可以為圓錐狀。另外，填充的固相提取劑608應(yīng)用具有與對(duì)象成分的提取相對(duì)應(yīng)的性能的提取劑。在過濾器材602的下端區(qū)域和固相提取器材603的上端區(qū)域，為了兩器材彼此的裝卸，例如具有魯爾接口等螺紋狀的結(jié)構(gòu)616?；蛘?，也可以形成為通過可以向固相提取儲(chǔ)器606上部插入過濾器材602或者向過濾器材602下部插入固相提取器材603的結(jié)構(gòu)加以連結(jié)的結(jié)構(gòu)。關(guān)于使用試樣前處理器材601進(jìn)行試樣制備時(shí)的操作法，參照?qǐng)D7加以說明。針對(duì)固相提取劑708的狀態(tài)調(diào)節(jié)、目標(biāo)成分的吸附、夾雜成分的除去、目標(biāo)成分的洗脫回收中使用的各試劑，按照固相提取劑708的特性選擇合適的試劑。為了方便起見，本實(shí)施例中示出使用了反相模式的固相提取劑708時(shí)的事例。如圖7的㈧所示，首先，向過濾器材702中添加例如甲醇等有機(jī)溶劑，施加壓力，利用向試樣前處理器材701的上端開口部的加壓或者從下端開口部的吸引，經(jīng)由過濾部705向固相提取劑708通液體，廢棄從固相提取器材703的下端排出的液體。通過該操作，使固相提取劑708的官能團(tuán)活化。接著，如圖7的⑶所示，向過濾器材702中添加例如緩沖液等水系溶液，施加壓力，利用向試樣前處理器材701的上端開口部的加壓或者從下端開口部的吸引，經(jīng)由過濾部705向固相提取劑708通液體，廢棄從固相提取器材703的下端排出的液體。通過該操作，使活化的固相提取劑708平衡化，由此固相提取劑708的狀態(tài)調(diào)節(jié)完成。接著，如圖7的(C)所示，向過濾器材702中添加試樣。此時(shí)，例如，在用質(zhì)譜分析等對(duì)提取成分進(jìn)行測(cè)定的情況下，也添加內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，充分?jǐn)嚢?。接著，如圖7的(D)所示，在試樣為全血而需要取出血細(xì)胞內(nèi)成分的情況下，添加必要量的溶血溶液，充分?jǐn)嚢琛Ｍㄟ^該操作破壞血細(xì)胞。接著，如圖7的(E)所示，向過濾器材702中添加必要量的蛋白質(zhì)變性溶液，充分?jǐn)嚢琛Ｍㄟ^該操作，試樣中的蛋白質(zhì)發(fā)生變性，形成凝集物。接著，如圖7的(F)所示，通過向試樣前處理器材701的壓力施加，利用向試樣前處理器材701的上端開口部的加壓或者從下端開口部的吸引，將凝集物殘留于過濾器材702側(cè)，在不回收濾液的情況下經(jīng)由過濾部705直接將濾液提供給固相提取劑708以供于試驗(yàn)。廢棄從固相提取器材703的下端排出的液體。通過該操作，在固相提取劑708有目標(biāo)成分吸附，同時(shí)除去未吸附于固相提取劑708的夾雜成分。接著，從固相提取器材(703)卸下過濾器材(702)，廢棄過濾器材(702)。接著，如圖7的(G)所示，向固相提取器材703內(nèi)添加必要量的清洗液，通過向試樣前處理器材701的壓力施加，利用向試樣前處理器材701的上端開口部的加壓或者從下端開口部的吸弓丨，向固相提取劑708通液體，廢棄從固相提取器材703的下端排出的液體。通過該操作，除去在固相提取劑708上非特異性吸附的夾雜成分。接著，如圖7的⑶所示，向固相提取器材703內(nèi)添加必要量的洗脫液，通過向試樣前處理器材701的壓力施加，利用向試樣前處理器材701的上端開口部的加壓或者從下端開口部的吸引，向固相提取劑708通液體，回收從固相提取器材703的下端排出的液體。通過該操作，對(duì)在固相提取劑708上特異性吸附的目標(biāo)成分進(jìn)行洗脫回收。本發(fā)明的實(shí)施例4中，也可以得到與實(shí)施例2相同的效果。實(shí)施例5接著，對(duì)作為本發(fā)明的實(shí)施例5的試樣前處理裝置進(jìn)行說明。該實(shí)施例4成為注射器方式(兼用過濾芯)的器材構(gòu)成。圖8是作為本發(fā)明的實(shí)施例5的試樣前處理裝置(器材)801的說明圖。對(duì)具有過濾器材802和固相提取器材803被連結(jié)且過濾部805兼用作保持固相提取劑808的上游側(cè)過濾芯的結(jié)構(gòu)的試樣前處理器材801進(jìn)行說明。在本發(fā)明的實(shí)施例5的情況下，過濾器材802和固相提取器材803采用以不彼此分離的方式接合的結(jié)構(gòu)，因此不具有裝卸兩器材的功能。在圖8中，關(guān)于試樣前處理器材801，在上游側(cè)配置過濾器材802，在下游側(cè)配置固 相提取器材803，可以在不將過濾器材802的濾液臨時(shí)回收的情況下直接將其提供給固相提取器材803以供于試驗(yàn)。詳細(xì)而言，過濾器材802具備過濾儲(chǔ)器804和過濾部805。另外，固相提取器材803不具有固相提取儲(chǔ)器，由固相提取劑808以及將固相提取劑808保持在固相提取器材803內(nèi)的下游側(cè)過濾芯809構(gòu)成,上游側(cè)過濾芯如前所述成為由過濾部805代用的結(jié)構(gòu)。過濾器材802中的過濾儲(chǔ)器804的原材料不具體限制，可以使用通常在生物體試樣的前處理等中使用的樹脂、金屬等。其中，為了滿足添加的試劑部分的容量，優(yōu)選至少具有供于試驗(yàn)的樣品量的8倍以上的容許容量。這是因?yàn)?，例如在為了進(jìn)行免疫抑制劑提取而使用全血50 μ I作為樣品的情況下，溶血處理中使用的硫酸鋅溶液的容量為150 μ 1，除蛋白質(zhì)處理中使用的甲醇的容量為200 μ I,所以此時(shí)的反應(yīng)溶液的總量為400 μ I,相當(dāng)于樣品量的8倍量。另外，過濾器材802中的過濾部805的原材料，只要具有過濾功能就沒有限制，可以應(yīng)用通常在生物體試樣的前處理等中使用的材料。因在過濾器材802內(nèi)的反應(yīng)而生成的凝集物量，在很大程度上依賴于檢測(cè)體的種類、來(lái)源、量等，但為了避免過濾部805的堵塞，與在固相提取器材803中填充的固相提取劑808的上游側(cè)底面813相比，優(yōu)選過濾部上游側(cè)底面積811更大。因此，優(yōu)選過濾部805的過濾部上游側(cè)底面811和過濾部下游側(cè)底面812的大小不同，并且過濾部下游側(cè)底面812覆蓋固相提取劑808的上游側(cè)底面813。另外，關(guān)于過濾部805的孔尺寸，為了捕捉生物體試樣中的夾雜微細(xì)成分，優(yōu)選為φ2.0μηι以下。另外，固相提取器材803的原材料不具體限制，可以使用通常在生物體試樣的前處理等中使用的樹脂、金屬等。另外，固相提取器材803中的固相提取劑808填充部的結(jié)構(gòu)，在很大程度上依賴于所填充的固相提取劑808的性能、規(guī)格，但為了確保微容量試樣中的微量成分的提取效率，優(yōu)選為與固相提取劑808的上游側(cè)底面813的直徑相等或其以上的填充高度814。其中，固相提取劑808的上游側(cè)底面積813和下游側(cè)過濾芯底面積815的大小并非必須相同，固相提取劑808的填充形狀，例如可以為細(xì)管狀(圓柱狀)，也可以為圓錐狀。另外，填充的固相提取劑808應(yīng)用具有與對(duì)象成分的提取相對(duì)應(yīng)的性能的提取劑。關(guān)于使用上述試樣前處理器材801進(jìn)行試樣制備時(shí)的操作法，與實(shí)施例3相同。在本發(fā)明的實(shí)施例5中，也可以得到與實(shí)施例2相同的效果。實(shí)施例6接著，對(duì)作為本發(fā)明的實(shí)施例6的試樣前處理裝置進(jìn)行說明。該實(shí)施例6成為注射器方式(預(yù)填充)的器材構(gòu)成。圖9是作為本發(fā)明的實(shí)施例6的試樣前處理裝置(器材)901的說明圖。是過濾器材902和固相提取器材903被連結(jié)的試樣前處理器材901，是固相提取劑908被預(yù)先狀態(tài)調(diào)節(jié)完的狀態(tài)。另外，是在填充于試樣前處理器材901的狀態(tài)調(diào)節(jié)完的固相提取劑908中添加了用于測(cè)定目標(biāo)成分的內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的、目標(biāo)成分測(cè)定專用的試樣前處理器材901。試樣前處理器材901的結(jié)構(gòu)以及特征，與前述的實(shí)施例I 3示出的結(jié)構(gòu)以及特征相同，但固相提取劑908已被狀態(tài)調(diào)節(jié)完，因此，該固相提取劑908的周圍被平衡化中使用的溶液充滿，并且試樣前處理器材901的上端和下端的開口部通過帽911、912被蓋嚴(yán)。另外，在目標(biāo)成分測(cè)定專用的試樣前處理器材901的情況下，向填充于試樣前處理器材901的狀態(tài)調(diào)節(jié)完固相提取劑908的漿液中，添加必要量的用于測(cè)定目標(biāo)成分的內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，充分懸浮后，填充到試樣前處理器材901中，其周圍被平衡化用的溶液充滿，并且試樣前處理器材901的上端和下端的開口部通過帽911、912被蓋嚴(yán)。或者，可以成為相對(duì)于填充于試樣前處理器材901中的狀態(tài)調(diào)節(jié)完固相提取劑908、或者填充后充滿其周圍的平衡化用的溶液，添加必要量的用于測(cè)定目標(biāo)成分的內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的構(gòu)成。此外，試樣前處理器材901的上端和下端的開口部通過帽911、912被蓋嚴(yán)。關(guān)于使用上述試樣前處理器材901進(jìn)行試樣制備時(shí)的操作法，示于以下。針對(duì)固相提取劑908的狀態(tài)調(diào)節(jié)、目標(biāo)成分的吸附、夾雜成分的除去、目標(biāo)成分的洗脫回收中使用的各試劑，按照固相提取劑908的特性選擇合適的試劑。為了方便起見，本實(shí)施例中示出使用了反相模式的固相提取劑908時(shí)的事例。最初，卸下將試樣前處理器材901的上端和下端蓋嚴(yán)的帽911、912。接著，對(duì)于試樣前處理器材901，利用壓力施加等使浸潤(rùn)固相提取劑908的平衡化溶液通液，成為必要量的內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)吸附于固相提取劑908的狀態(tài)。接著，向過濾器材902中添加試樣。在試樣為全血的情況下，接著，向過濾器材902中添加必要量的溶血溶液，與試樣充分?jǐn)嚢?。接著，向過濾器材902中添加必要量的蛋白質(zhì)變性溶液，與樣品充分?jǐn)嚢?。接著，?duì)于試樣前處理器材901，通過壓力施加等，用過濾部905對(duì)過濾器材902內(nèi)的樣品進(jìn)行過濾，并且在不對(duì)得到的濾液進(jìn)行回收的情況下，經(jīng)由過濾部905將濾液直接提供給固相提取劑908以供于試驗(yàn)，通過通液，由此使目標(biāo)成分吸附于固相提取劑908。接著，對(duì)試樣前處理器材901添加必要量的清洗液。接著，對(duì)試樣前處理器材901，通過壓力施加等使清洗液向固相提取劑908通液，由此除去在固相提取劑908上非特異性吸附的夾雜成分。接著，對(duì)試樣前處理器材901添加必要量的洗脫液。接著，對(duì)試樣前處理器材901，通過壓力施加等使洗脫液向固相提取劑908通液，由此對(duì)在固相提取劑908上特異性吸附的目標(biāo)成分進(jìn)行洗脫回收。在如前所述的漿液的情況下，可以添加必要量的疊氮化鈉等防腐劑而提供。在本發(fā)明的實(shí)施例6中，也可以得到與實(shí)施例2相同的效果。實(shí)施例7接著，對(duì)作為本發(fā)明的實(shí)施例7的試樣前處理裝置進(jìn)行說明。該實(shí)施例7成為尖頭方式的器材構(gòu)成。圖10A、圖10B、圖IOC是本發(fā)明的實(shí)施例7的試樣前處理裝置(器材)1001的說明圖。圖IOA示出試樣前處置器材1001的構(gòu)成，圖IOB示出試樣、試劑的分注、攪拌的說明，圖IOC示出基于吸引吐出的狀態(tài)調(diào)節(jié)、吸附、清洗、洗脫。
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是過濾器材1002和固相提取器材1003通過不能裝卸以便彼此不能分離的樣式連結(jié)的試樣前處理器材1001，在過濾器材1002上端的開口部可以安裝分注器(移液管)。關(guān)于試樣前處理器材1001，在上游側(cè)配置過濾器材1002，在下游側(cè)配置固相提取器材1003，在不將來(lái)自過濾器材1002的濾液臨時(shí)回收的情況下直接將其提供給固相提取器材1003以供于試驗(yàn)。過濾器材1002具備過濾儲(chǔ)器1004和過濾部1005。另外，固相提取器材1003具備固相提取儲(chǔ)器1006、固相提取劑1008以及將固相提取劑1008保持在固相提取器材1003內(nèi)的上游側(cè)過濾芯1007和下游側(cè)過濾芯1009。過濾器材1002中的過濾儲(chǔ)器1004的原材料不具體限制，可以使用通常在生物體試樣的前處理等中使用的樹脂、金屬等。其中，為了滿足添加的試劑部分的容量，優(yōu)選至少具有供于試驗(yàn)的樣品量的8倍以上的容許容量。這是因?yàn)?，例如在為了進(jìn)行免疫抑制劑提取而使用全血50μ I作為樣品的情況下，溶血處理中使用的硫酸鋅溶液的容量為150 μ 1，除蛋白質(zhì)處理中使用的甲醇的容量為200 μ I,所以此時(shí)的反應(yīng)溶液的總量為400 μ I,相當(dāng)于樣品量的8倍量。另外，過濾器材1002中的過濾部1005的原材料，只要具有過濾功能就沒有限制，可以應(yīng)用通常在生物體試樣的前處理等中使用的材料。因在過濾器材1002內(nèi)的反應(yīng)而生成的凝集物量，在很大程度上依賴于檢測(cè)體的種類、來(lái)源、量等，但為了避免過濾部1005的堵塞，與固相提取器材1003中的上游側(cè)過濾芯底面積1013相比，優(yōu)選過濾部上游側(cè)底面積1011更大。另外，關(guān)于過濾部1005的孔尺寸，為了捕捉生物體試樣中的夾雜微細(xì)成分，優(yōu)選為φ2.0μπι以下。固相提取器材1003中的固相提取儲(chǔ)器1006的原材料不具體限制，可以使用通常在生物體試樣的前處理等中使用的樹脂、金屬等。其中，為了滿足添加的試劑部分的容量，優(yōu)選至少具有與供于試驗(yàn)的除蛋白質(zhì)處理完樣品量相等或其以上的容許容量。另外，固相提取器材1003中的固相提取劑1008的填充部的結(jié)構(gòu)，在很大程度上依賴于所填充的固相提取劑1008的性能、規(guī)格，但為了確保微容量試樣中的微量成分的提取效率，優(yōu)選與上游側(cè)過濾芯底面1013的直徑相等或其以上的填充高度1014。其中，上游側(cè)過濾芯底面積1013和下游側(cè)過濾芯底面積1015的大小并非必須相同，固相提取劑1008的填充形狀，例如可以為細(xì)管狀(圓柱狀)，也可以為圓錐狀。另外，填充的固相提取劑IOOg應(yīng)用具有與對(duì)象成分的提取相對(duì)應(yīng)的性能的提取劑。關(guān)于過濾器材1002的結(jié)構(gòu)，例如，如圖11Α、圖IlB所示，使其為過濾儲(chǔ)器1104膨脹后的形狀，由此可以具有使試樣和各種試劑的混合容易進(jìn)行振蕩攪拌的構(gòu)造。本發(fā)明的實(shí)施例7的試樣前處理器材1001，其特征在于，可以在過濾器材1002上端的開口部安裝分注器(移液管)，可以在利用吐出操作進(jìn)行經(jīng)由過濾部1005的過濾的同時(shí)，在不進(jìn)行濾液的臨時(shí)回收的情況下，使固相提取劑1008直接吸附目標(biāo)成分。另外，關(guān)于隨后的固相提取處理中的清洗工序，其特征在于，在貯留于容器的清洗液中浸潰固相提取器材1003的下端開口部，通過在過濾器材1002的上端開口部安裝的分注器(移液管)的移液操作，針對(duì)填充到固相提取器材1003的下端的固相提取劑1008進(jìn)行清洗液的吸引吐出，將在固相提取劑1008上非特異性吸附的夾雜成分清洗除去。進(jìn)而，關(guān)于洗脫工序，可以將前述的清洗液變更為必要量的洗脫液，通過同樣的吸引吐出操作，對(duì)在固相提取劑1008上特異性吸附的目標(biāo)成分進(jìn)行洗脫回收?；蛘?，可以通過吸引必要量的洗脫液后向另外設(shè)置的回收容器吐出，由此對(duì)在固相提取劑1008上特異性吸附的目標(biāo)成分進(jìn)行洗脫回收。 關(guān)于使用上述試樣前處理器材1001進(jìn)行試樣制備時(shí)的操作法，參照?qǐng)D12進(jìn)行說明。針對(duì)固相提取劑1208的狀態(tài)調(diào)節(jié)、目標(biāo)成分的吸附、夾雜成分的除去、目標(biāo)成分的洗脫回收中使用的各試劑，按照固相提取劑1208的特性選擇合適的試劑。為了方便起見，本實(shí)施例中示出使用了反相模式的固相提取劑1208時(shí)的事例。如圖12的(A)所示，首先，在貯留于容器的例如甲醇等的有機(jī)溶劑中浸潰固相提取器材1203的下端開口部，通過在過濾器材1202的上端開口部安裝的分注器(移液管)的移液操作，相對(duì)于在固相提取器材1203下端填充的固相提取劑1208進(jìn)行有機(jī)溶劑的吸引吐出。通過該操作，使固相提取劑1208的官能團(tuán)活化。接著，如圖12的(B)所示，與圖12的(A)相同，在貯留于容器的水系溶液中浸潰固相提取器材1203的下端開口部，通過在過濾器材1202的上端開口部安裝的分注器(移液管)的移液操作，相對(duì)于在固相提取器材1203下端填充的固相提取劑1208進(jìn)行水系溶液的吸引吐出。通過該操作，使活化的固相提取劑1208平衡化，由此固相提取劑1208的狀態(tài)調(diào)節(jié)完成。接著，如圖12的(C)所示，向過濾器材1202中添加試樣。此時(shí),例如在用質(zhì)譜分析等對(duì)提取成分進(jìn)行測(cè)定的情況下，也添加內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，充分?jǐn)嚢?。接著，如圖12的⑶所示,在試樣為全血而需要取出血細(xì)胞內(nèi)成分的情況下,添加必要量的溶血溶液，充分?jǐn)嚢?。通過該操作破壞血細(xì)胞。接著，如圖12的(E)所示，向過濾器材1202中添加必要量的蛋白質(zhì)變性溶液，充分?jǐn)嚢?。通過該操作，試樣中的蛋白質(zhì)發(fā)生變性，形成凝集物。接著，如圖12的(F)所示，在過濾器材1202上端的開口部安裝分注器(移液管)，通過吐出操作，將凝集物殘留于過濾器材1202側(cè)，在不回收濾液的情況下，經(jīng)由過濾部1205直接將濾液提供給固相提取劑1208以供于試驗(yàn)。廢棄從固相提取器材1203的下端排出的液體。通過該操作，固相提取劑1208有目標(biāo)成分吸附，同時(shí)除去未吸附于固相提取劑1208的夾雜成分。接著，如圖12的(G)所示，在貯留于容器的清洗液中浸潰固相提取器材1203的下端開口部，通過在過濾器材1202的上端開口部安裝的分注器(移液管)的移液操作，相對(duì)于在固相提取器材1203的下端填充的固相提取劑1208進(jìn)行清洗液的吸引吐出。通過該操作，除去在固相提取劑1208上非特異性吸附的夾雜成分。接著，如圖12的(H)所示，相對(duì)于貯留于容器的必要量的洗脫液浸潰固相提取器材1203的下端開口部，通過在過濾器材1202的上端開口部安裝的分注器(移液管)的移液操作，相對(duì)于在固相提取器材1203的下端填充的固相提取劑1208進(jìn)行洗脫液的吸引吐出。通過該操作，對(duì)在固相提取劑1208上特異性吸附的目標(biāo)成分進(jìn)行洗脫回收?；蛘撸梢詫?duì)貯留于容器的洗脫液浸潰固相提取器材1203的下端開口部，通過在過濾器材1202的上端開口部安裝的分注器(移液管)的移液操作，相對(duì)于在固相提取器材1203的下端填充的固相提取劑1208吸引必要量的洗脫液，向另外設(shè)置的回收容器吐出，由此對(duì)在固相提取劑1208上特異性吸附的目標(biāo)成分進(jìn)行洗脫回收。在本發(fā)明的實(shí)施例7中，也可以得到與實(shí)施例2相同的效果。
實(shí)施例8接著，對(duì)作為本發(fā)明的實(shí)施例8的試樣前處理裝置進(jìn)行說明。該實(shí)施例8成為排列有多個(gè)試樣前處理裝置(器材)的板式的構(gòu)成。圖13是作為本發(fā)明的實(shí)施例8的板式的試樣前處理裝置(器材)1301的說明圖。板式的試樣前處理器材1301,具有對(duì)于實(shí)施例I 5中不出的各種試樣前處理器材各自配置成多個(gè)陣列狀的結(jié)構(gòu)。也就是說，過濾器材1302成為板狀，多個(gè)具有過濾儲(chǔ)器1304的過濾部1305排列固定于過濾器材1302。此外，固相提取器材1303也成為板狀，多個(gè)由下游側(cè)過濾芯1309和固相提取填充劑1308和固相提取儲(chǔ)器1306形成為一體的構(gòu)件排列固定于固相提取器材1303。過濾器材1302和固相提取器材1303相互連結(jié)，過濾儲(chǔ)器1304、過濾部1305、下游側(cè)過濾芯1309、固相提取填充劑1308、和固相提取儲(chǔ)器1306成為一體，形成試樣前處理器材 1301。此時(shí)的試樣前處理器材1301的操作法，以實(shí)施例I 5中各自描述的處理工序?yàn)榛鶞?zhǔn)進(jìn)行，但相當(dāng)于凹孔的多個(gè)器材被并行處理。有關(guān)使用試樣前處理器材1301進(jìn)行試樣制備時(shí)的操作法，與實(shí)施例3 7相同，將多個(gè)試樣前處理器材1301 —并處理。在本發(fā)明的實(shí)施例8中，也可以得到與實(shí)施例2相同的效果，除此之外，關(guān)于多個(gè)前處理器材可以一并處理。實(shí)施例9接著，對(duì)作為本發(fā)明的實(shí)施例9的試樣前處理裝置進(jìn)行說明。該實(shí)施例9成為閥門開關(guān)方式的器材構(gòu)成。圖14是作為本發(fā)明的實(shí)施例9的試樣前處理裝置(器材)1401的說明圖。本發(fā)明的實(shí)施例9的試樣前處理器材1401，成為通過使用了閥門開關(guān)機(jī)構(gòu)的流路切換對(duì)試樣以及試劑向固相提取劑1408的添加和壓力施加工序進(jìn)行控制的構(gòu)成。在圖14中，作為試樣前處理器材的構(gòu)成，過濾器材1402、固相提取器材1403、試劑提供用泵1421、回收容器1424或者檢測(cè)器1424，經(jīng)由閥1422、1423分別通過配管被連結(jié)。即，是在固相提取器材1403的上游側(cè)設(shè)置閥1422，在該閥1422連結(jié)了過濾器材1402和試劑提供用泵1421的結(jié)構(gòu)。另一方面，固相提取器材1403的下游側(cè)也具有可以進(jìn)行廢液廢棄和洗脫液回收的切換的結(jié)構(gòu)，為了方便起見，在附圖上用閥1423示出。關(guān)于使用試樣前處理器材1401進(jìn)行試樣制備時(shí)的操作法，示于以下。針對(duì)固相提取劑1408的狀態(tài)調(diào)節(jié)、目標(biāo)成分的吸附、夾雜成分的除去、目標(biāo)成分的洗脫回收中使用的各試劑，按照固相提取劑1408的特性選擇合適的試劑。為了方便起見，本實(shí)施例9中示出使用了反相模式的固相提取劑1408時(shí)的事例。首先，通過泵1421，使例如甲醇等有機(jī)溶劑向固相提取器材1403的固相提取劑1408通液，廢棄從固相提取器材1403的下游配管排出的液體。此時(shí)，上游側(cè)閥1422開放從泵1421向固相提取器材1403的流路，下游側(cè)閥1423開放從固相提取器材1403向廢液的流路。通過該操作，使固相提取劑1408的官能團(tuán)活化。接著，通過泵1421，使例如緩沖液等水系溶液向固相提取器材1403的固相提取劑1408通液，廢棄從固相提取器材1403的下游配管排出的液體。此時(shí)，上游側(cè)閥1422開放從泵1421向固相提取器材1403的流路，下游側(cè)閥1423開放從固相提取器材1403向廢液的流路。通過該操作，使活化的固相提取劑1408平衡化，由此固相提取劑1408的狀態(tài)調(diào)節(jié)完成。接著，向過濾器材1402中添加試樣。此時(shí)，例如在用質(zhì)譜分析等對(duì)提取成分進(jìn)行測(cè)定的情況下，也添加內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，充分?jǐn)嚢琛４藭r(shí)，上游側(cè)閥1422以及下游側(cè)閥1423不通液體。接著，在試樣為全血而需要取出血細(xì)胞內(nèi)成分的情況下，添加必要量的溶血溶液，充分?jǐn)嚢?。通過該操作破壞血細(xì)胞。此時(shí)，上游側(cè)閥1422以及下游側(cè)閥1423不通液體。接著，向過濾器材1402中添加必要量的蛋白質(zhì)變性溶液，充分?jǐn)嚢琛Ｍㄟ^該操作，試樣中的蛋白質(zhì)發(fā)生變性，形成凝集物。此時(shí)，上游側(cè)閥1422以及下游側(cè)閥1423不通液體。接著，向過濾器材1402施加壓力，利用向過濾器材1402的上端開口部的加壓或者從下端側(cè)的吸引，將凝集物殘留于過濾器材1402側(cè)，在不回收濾液的情況下經(jīng)由過濾部1405直接將濾液提供給固相提取劑1408以供于試驗(yàn)。廢棄從固相提取器材1403的下端排出的液體。此時(shí)，上游側(cè)閥1422開放從過濾器材1402向固相提取器材1403的流路，下游側(cè)閥1423開放從固相提取器材1403向廢液的流路。通過該操作，在固相提取劑1408有目標(biāo)成分吸附，同時(shí)除去未吸附于固相提取劑1408的夾雜成分。接著，通過泵1421，使清洗液向固相提取器材1403的固相提取劑1408通液，廢棄從固相提取器材1403的下游配管排出的液體。此時(shí)，上游側(cè)閥1422開放從泵1421向固相提取器材1403的流路，下游側(cè)閥1423開放從固相提取器材1403向廢液的流路。通過該操作，除去在固相提取劑1408上非特異性吸附的夾雜成分。接著，通過泵1421，使洗脫液向固相提取器材1403的固相提取劑1408通液，用回收容器1424回收從固相提取器材1403的下游配管排出的液體或?qū)⑵涮峁┙o檢測(cè)器1424以供于試驗(yàn)。此時(shí)，上游側(cè)閥1422開放從泵1421向固相提取器材1403的流路，下游側(cè)閥1423開放從固相提取器材1403向回收容器1424或者檢測(cè)器1424的流路。通過該操作，對(duì)在固相提取劑1408上特異性吸附的目標(biāo)成分進(jìn)行洗脫回收。需要說明的是，將圖14的提取劑活化處理記為(a)，將提取劑平滑化處理記為(b)，將試樣以及內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)添加處理記為(C)，將溶血處理記為(d)，將蛋白質(zhì)變性處理記為(e)，將過濾器分離以及向固相提取劑的樣品裝入處理記為(f)，將煩雜物清洗處理記為(g)，將目標(biāo)成分洗脫處理記為(h)，關(guān)于各處理中使用的試樣、溶液、物質(zhì)、機(jī)構(gòu)，附上相應(yīng)的處理(a) (h)。另外，在圖14中，關(guān)于閥1422、1423的動(dòng)作，用圓形符號(hào)橫向列舉向箭頭方向所示的部分通液的處理，用X形符號(hào)橫向列舉不向箭頭方向所示的部分通液的處理。實(shí)施例10接著，對(duì)作為本發(fā)明的實(shí)施例10的試樣前處理方法以及裝置進(jìn)行說明。該實(shí)施例10是使用內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)添加完的固相提取劑的方法以及裝置。實(shí)施例10中的試樣前處理器材，其特征在于，不像前述的各實(shí)施例所示的器材構(gòu)成那樣，將固相提取劑預(yù)先填充到固相提取器材中，而是分開提供。即，是在固相提取器材的下端開口部附近預(yù)先裝填有下游側(cè)過濾芯的狀態(tài)，通過向其中填充固相提取劑而用于試樣制備。上游側(cè)過濾芯可以在向固相提取器材填充完固相提取劑之后，根據(jù)需要加以裝填。此時(shí)的固相提取劑，可以是干燥狀態(tài)，也可以是漿液狀。在固相提取劑以漿液狀提供的情況下，固相提取劑可以不被狀態(tài)調(diào)節(jié)，也可以是狀態(tài)調(diào)節(jié)完。在固相提取劑以狀態(tài)調(diào)節(jié)完的漿液狀被提供的情況下，可以是該漿液中未添加內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的狀態(tài)，也可以是預(yù)先添加的狀態(tài)。可以與如上所述的和固相提取器材分開提供的固相提取劑的狀態(tài)相對(duì)應(yīng)地省略狀態(tài)調(diào)節(jié)工序。另外，在向狀態(tài)調(diào)節(jié)完的固相提取劑中預(yù)先添加必要量的目標(biāo)成分測(cè)定用的內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的情況下，可以作為其目標(biāo)成分測(cè)定專用的試劑盒加以提供。此時(shí)，在向固相提取器材中填充上述固相提取劑后，可以在沒有狀態(tài)調(diào)節(jié)工序的情況下從試樣添加工序開始操作，在沒有內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的添加工序的情況下將最終的洗脫物直接供于測(cè)定。在如前所述的漿液的情況下，可以添加必要量的疊氮化鈉等防腐劑而提供。如上所示，根據(jù)本發(fā)明，提供向狀態(tài)調(diào)節(jié)完的填充劑漿液中在可以吸附的條件下預(yù)先添加必要量的內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)得到的制劑，作為特定的測(cè)定目的用的固相提取劑。此外，其特征在于，在I個(gè)試樣前處理器材內(nèi)，進(jìn)行溶血以及除蛋白質(zhì)處理，并且在對(duì)其反應(yīng)產(chǎn)物進(jìn)行過濾后，對(duì)濾液中的目標(biāo)成分進(jìn)行固相提取，上述處理可以在不臨時(shí)回收中途生成的產(chǎn)物的情況下一并處理?；蛘?，將添加內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)完的固相提取劑填充到固相提取器材中，作為密閉成溶劑不蒸發(fā)的預(yù)填充器材加以提供。此時(shí)，可以在固相提取劑的上游側(cè)配置用于除蛋白質(zhì)目的的過濾器材。另外，可以提供具有將具有對(duì)反應(yīng)產(chǎn)物進(jìn)行過濾處理的機(jī)構(gòu)的反應(yīng)容器(過濾器材)和固相提取器材連結(jié)且在不將濾液臨時(shí)回收的情況下而直接將其提供給固相提取劑以供于試驗(yàn)的結(jié)構(gòu)的前處理方法及其器材(試劑盒)。可以將血液之類的夾雜成分多的生物體試樣不經(jīng)前處理而直接將其提供給上述器材以供于試驗(yàn)，可以將由上述器材處理過而得到的提取物直接提供給MS等分析裝置以供于試驗(yàn)。這表示通過濾液的臨時(shí)回收工序的省略實(shí)現(xiàn)工序以及TAT的縮短化。另外，可以實(shí)現(xiàn)濾液的臨時(shí)回收以及將臨時(shí)回收后的濾液向固相提取單元的供給以供于試驗(yàn)涉及的工序的省略，可以通過上述前處理用器材(試劑盒)實(shí)現(xiàn)操作的簡(jiǎn)單化以及低成本化。進(jìn)而，通過臨時(shí)回收工序的省略，臨時(shí)回收用的容器變得沒有必要，可以削減消耗品數(shù)量及其成本，并且可以避免臨時(shí)回收工序中發(fā)生的樣品損耗以及轉(zhuǎn)移(carryover)。另外，通過提供預(yù)先將狀態(tài)調(diào)節(jié)完的固相提取劑填充到固相提取器材內(nèi)，以浸潤(rùn)有固相提取劑的溶液不蒸發(fā)的方式蓋嚴(yán)的預(yù)填充器材，由此可以實(shí)現(xiàn)試樣前處理中的工序數(shù)以及 TAT(Turn-Around-Time)的縮短化。進(jìn)而，相對(duì)于在上述預(yù)填充器材中填充完的固相提取劑，預(yù)先添加必要量的測(cè)定對(duì)象成分的內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，由此可以將上述預(yù)填充器材作為測(cè)定對(duì)象成分專用的試樣前處理器材加以提供，使用者可以在不用準(zhǔn)備內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的情況下進(jìn)行試樣前處理，并且即便省略了內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的添加工序，也可以進(jìn)行例如基于質(zhì)譜分析等的提取成分的測(cè)定。這樣的預(yù)先添加了必要量的內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的狀態(tài)調(diào)節(jié)完的固相提取劑，不僅可以作為預(yù)填充器材加以提供，通過作為固相提取器材填充前的漿液與未填充的固相提取器材一起加以提供，由此也可以作為測(cè)定對(duì)象成分專用的試樣前處理試劑盒加以提供，使用者能夠結(jié)合測(cè)定對(duì)象成分的提取量對(duì)漿液量進(jìn)行適當(dāng)調(diào)節(jié)，并且可以在不用準(zhǔn)備內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的情況下進(jìn)行試樣前處理，即便省略內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的添加工序，也可以進(jìn)行例如基于質(zhì)譜分析等的提取成分的測(cè)定。需要說明的是，本發(fā)明不僅可以用于臨床檢查領(lǐng)域，還可以在目標(biāo)成分檢測(cè)中需要從夾雜成分的精制的分析領(lǐng)域廣泛應(yīng)用。例如，可以實(shí)現(xiàn)向環(huán)境、食品、醫(yī)用、公安(反恐怖對(duì)策/違法藥物)等領(lǐng)域中的實(shí)用及可以用于為此的基礎(chǔ)/應(yīng)用研究。符號(hào)的說明10L···全血處理工序(溶血處理以及除蛋白質(zhì)處理)、102…固相提取處理工序、103…基于本發(fā)明的全血以及固相提取一并處理工序、301…試樣前處理器材、302…過濾器材、303…固相提取器材、304…過濾儲(chǔ)器、305…過濾部、308…固相提取劑、311…過濾部上游側(cè)底面、401…試樣前處理器材、402…過濾器材、403…固相提取器材、404…過濾儲(chǔ)器、405…過濾部、406…固相提取儲(chǔ)器、407…上游側(cè)過濾芯、408…固相提取劑、409…下游側(cè)過濾芯、411…過濾部上游側(cè)底面、413…上游側(cè)過濾芯底面、414…填充高度、415…下游側(cè)過濾芯底面、501…試樣前處理器材、502…過濾器材、503…固相提取器材、505…過濾部、508…固相提取劑、601…試樣前處理器材、602…過濾器材、603…固相提取器材、604…過濾儲(chǔ)器、605…過濾部、606…固相提取儲(chǔ)器、607…上游側(cè)過濾芯、608…固相提取劑、609…下游側(cè)過濾芯、611…過濾部上游側(cè)底面、613…上游側(cè)過濾芯底面、614…填充高度、615…下游側(cè)過濾芯底面、616…魯爾接口等螺紋狀結(jié)構(gòu)、701…試樣前處理器材、702…過濾器材、703…固相提取器材、705…過濾部、708…固相提取劑、801…試樣前處理器材、802…過濾器材、803…固相提取器材、804…過濾儲(chǔ)器、805…過濾部、808…固相提取劑、809…下游側(cè)過濾芯、811…過濾部上游側(cè)底面、812…過濾部下游側(cè)底面、813…填充時(shí)的固相提取劑上游側(cè)底面、814···填充高度、815···下游側(cè)過濾芯底面、901···試樣前處理器材、902···過濾器材、903…固相提取器材、905…過濾部、908…固相提取填充劑、911…上游側(cè)帽、912…下游側(cè)帽、1001···試樣前處理器材、1002…過濾器材、1003…固相提取器材、1004…過濾儲(chǔ)器、1005…過濾部、1006…固相提取儲(chǔ)器、1007…上游側(cè)過濾芯、1008...固相提取劑、1009…下游側(cè)過濾芯、1011···過濾部上游側(cè)底面、1013···上游側(cè)過濾芯底面、1014···填充高度、1015…下游側(cè)過濾芯底面、1101···試樣前處理器材、1102…過濾器材、1103…固相提取器材、1104…過濾儲(chǔ)器、1105…過濾部、1106…固相提取儲(chǔ)器、1107…上游側(cè)過濾芯、1108...固相提取劑、1109…下游側(cè)過濾芯、1202…過濾器材、1203…固相提取器材、1205…過濾部、1208···固相提取劑、1301···試樣前處理器材、1302…過濾器材、1303…固相提取器材、1304…過濾儲(chǔ)器、1305…過濾部、1306…固相提取儲(chǔ)器、1308…固相提取劑、1309...下游側(cè)過濾芯、1401···試樣前處理器材、1402…過濾器材、1403…固相提取器材、1405…過濾部、1408…固相提取劑、1421…泵、1422...上游側(cè)閥、1423…下游側(cè)閥、1424…回收容器或者檢測(cè)器。
權(quán)利要求
1.一種生物體試樣前處理方法，其特征在于，向在過濾器材中收納的過濾構(gòu)件供給生物體試樣和除蛋白質(zhì)試劑，將上述過濾構(gòu)件的過濾液提供給收納固相提取劑的固相提取器材的上述固相提取劑，從上述固相提取劑所含的上述過濾液提取生物體試樣的固相。
2.如權(quán)利要求I所述的生物體試樣前處理方法，其特征在于，上述固相提取器材為容器，上述過濾器材插入到上述固相提取器材內(nèi)，在向上述過濾構(gòu)件供給了生物體試樣和除蛋白質(zhì)試劑之后，通過離心分離處理使濾液從過濾構(gòu)件向固相提取劑移行，以懸浮方式進(jìn)行移行到固相提取劑的生物體試樣的固相提取處理。
3.如權(quán)利要求I所述的生物體試樣前處理方法，其特征在于，上述過濾器材以及固相提取器材為筒狀，所述過濾器材以及固相提取器材相互連結(jié)，通過對(duì)上述過濾器材內(nèi)的壓力控制從過濾構(gòu)件向上述固相提取劑供給濾液。
4.如權(quán)利要求I所述的生物體試樣前處理方法，其特征在于，上述過濾器材以及固相提取器材為筒狀，所述過濾器材以及固相提取器材相互連結(jié)，利用分注器從過濾器材的開口部供給生物體試樣和除蛋白質(zhì)試劑，使濾液從過濾構(gòu)件向固相提取劑移行，經(jīng)由在上述固相提取器材上形成的排出口，將固相提取試劑在分注器的作用下向上述固相提取劑供給，從上述固相提取劑所含的上述過濾液提取生物體試樣的固相。
5.如權(quán)利要求I所述的生物體試樣前處理方法，其特征在于，根據(jù)提取對(duì)象成分的溶解度設(shè)定在過濾器材內(nèi)使試樣和除蛋白質(zhì)試劑發(fā)生反應(yīng)時(shí)的溶劑組成。
6.如權(quán)利要求5所述的生物體試樣前處理方法，其特征在于，在提取對(duì)象成分是疏水性高的藥劑的情況下，在過濾器材內(nèi)使試樣和除蛋白質(zhì)試劑發(fā)生反應(yīng)時(shí)的溶劑組成以甲醇的最終濃度計(jì)為50%以上。
7.如權(quán)利要求6所述的生物體試樣前處理方法，其特征在于，在提取對(duì)象成分是具有血細(xì)胞移行性的藥劑的情況下，在過濾器材內(nèi)使試樣和溶血試劑發(fā)生反應(yīng)后與蛋白質(zhì)變性試劑反應(yīng)，將經(jīng)由過濾器材的過濾構(gòu)件的濾液提供給上述固相提取劑。
8.如權(quán)利要求I所述的生物體試樣前處理方法，其特征在于，為了使提取對(duì)象成分向固相提取劑吸附的吸附性能最佳化，在過濾器材內(nèi)使試樣和除蛋白質(zhì)試劑發(fā)生反應(yīng)后，稀釋其反應(yīng)溶液，將經(jīng)由過濾器材的過濾構(gòu)件的濾液提供給固相提取劑。
9.一種生物體試樣前處理裝置，其特征在于，具有被提供生物體試樣且具有用于進(jìn)行過濾的過濾構(gòu)件的過濾器材；和與上述過濾器材連結(jié)且具有固相提取劑的固相提取器材，所述固相提取劑被提供經(jīng)上述過濾構(gòu)件過濾的生物體試樣。
10.如權(quán)利要求9所述的生物體試樣前處理裝置，其特征在于，上述過濾器材以不能裝卸的狀態(tài)與固相提取器材連結(jié)。
11.如權(quán)利要求9所述的生物體試樣前處理裝置，其特征在于，上述過濾器材以能夠裝卸的方式與固相提取器材連結(jié)。
12.如權(quán)利要求9所述的生物體試樣前處理裝置，其特征在于，上述固相提取器材具有上游側(cè)過濾芯，上述過濾器材的過濾構(gòu)件兼用作上述固相提取器材的上游側(cè)過濾芯。
13.如權(quán)利要求9所述的生物體試樣前處理裝置，其特征在于，上述固相提取器材具有上游側(cè)過濾芯，上述過濾器材的過濾構(gòu)件的面積具有固相提取器材的上游側(cè)過濾芯以上的面積。
14.如權(quán)利要求13所述的生物體試樣前處理裝置，其特征在于，上述固相提取器材的固相提取劑的填充高度在上游側(cè)過濾芯的直徑以上。
15.如權(quán)利要求9所述的生物體試樣前處理裝置，其特征在于，上述過濾器材的上游側(cè)開口部是試樣、除蛋白質(zhì)試劑、定量試劑的注入口，并且用于安裝分注器。
16.如權(quán)利要求9所述的生物體試樣前處理裝置，其特征在于，固相提取劑是狀態(tài)調(diào)節(jié)完的漿液。
17.如權(quán)利要求16所述的生物體試樣前處理裝置，其特征在于，在上述狀態(tài)調(diào)節(jié)完的漿液中添加有測(cè)定對(duì)象成分用的內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。
18.如權(quán)利要求17所述的生物體試樣前處理裝置，其特征在于，添加了測(cè)定對(duì)象成分用的內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的狀態(tài)調(diào)節(jié)完的固相提取劑填充到固相提取器材內(nèi)，按照不使浸有固相提取劑的溶劑蒸發(fā)的方式將固相提取器材密閉。
全文摘要
本發(fā)明實(shí)現(xiàn)在不對(duì)反應(yīng)處理后的過濾液進(jìn)行一次回收的情況下能提供給固相提取處理的試樣處理裝置。向固相提取器材(303)中添加必要量的固相提取劑(308)而進(jìn)行狀態(tài)調(diào)節(jié)。向固相提取劑(308)中添加水系溶液并廢棄上清。在固相提取器材(303)的開口部安裝過濾器材(302)，向過濾儲(chǔ)器(304)內(nèi)添加試樣。添加溶血溶液并充分?jǐn)嚢?，破壞血?xì)胞。添加蛋白質(zhì)變性溶液，充分?jǐn)嚢瑁乖嚇又械牡鞍踪|(zhì)變性而形成凝集物。進(jìn)行離心分離而使凝集物殘留于過濾器材(302)側(cè)，在不回收濾液的情況下經(jīng)由過濾部(305)將濾液提供給固相提取劑以供于試驗(yàn)。向固相提取器材(303)內(nèi)添加必要量的清洗液，攪拌后離心分離，廢棄上清。向固相提取器材(303)內(nèi)添加必要量的洗脫液，充分?jǐn)嚢韬筮M(jìn)行離心分離，廢棄上清。
文檔編號(hào)G01N1/28GK102939524SQ201180029149
公開日2013年2月20日 申請(qǐng)日期2011年6月10日 優(yōu)先權(quán)日2010年6月15日
發(fā)明者神田勝弘, 野上真, 伊藤伸也, 和氣泉 申請(qǐng)人:株式會(huì)社日立高新技術(shù)