專利名稱：一種用于濾紙干血片的蛋白洗脫液的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種用于濾紙干血片的蛋白洗脫液。
背景技術(shù)：
新生兒疾病篩查的普及和推廣使ー些危害兒童生命、導(dǎo)致兒童體格及智能發(fā)育障 礙的先天性遺傳代謝疾病能夠得以早期診斷，并且可以在新生兒臨床癥狀未出現(xiàn)之前或癥狀不明顯時就能給予及時治療，避免或降低患兒機體各器官受到的不可逆損傷產(chǎn)生。目前，已有化學(xué)發(fā)光免疫檢測、時間分辨熒光免疫檢測、酶聯(lián)免疫吸附、放射免疫分析等多項以免疫檢測為基礎(chǔ)的檢測方法被應(yīng)用在新生兒疾病篩查上。但由于新生兒采血的特殊性，新生兒疾病篩查都是對其足跟血滴在S&S903濾紙上形成的濾紙干血片中的標(biāo)志物進行檢測，因此需要將標(biāo)志物重新從濾紙干血片上溶解到特定溶液中，再進行相關(guān)分析檢測，比如新生兒先天性甲狀腺功能減低癥的篩查，需要從濾紙干血片上將促甲狀腺激素(TSH)溶解出來，再進行免疫檢測。目前，新生兒疾病篩查試劑盒一般用Tirs-HCl緩沖液作為濾紙干血片的蛋白洗脫液，將濾紙血片上蛋白洗脫下來以后，再進行免疫檢測，不僅蛋白溶出率低，降低了免疫檢測的靈敏度，而且干擾物質(zhì)的存在，又降低了檢測的準(zhǔn)確性。此外，Tris-HCl洗脫濾紙干血片需要時間也較長，一般要多次洗板，増加了檢測時間。因此，用于濾紙干血片的高效蛋白洗脫液已經(jīng)成為了提高用于新生兒疾病篩查的免疫檢測試劑的靈敏度、準(zhǔn)確性、檢測速度的關(guān)鍵因素。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種用于濾紙干血片的蛋白洗脫組合物及蛋白洗脫液。本發(fā)明所述蛋白洗脫組合物，由NP40、(2-羥丙基)-β_環(huán)糊精、(羥丙基)甲基纖維素和小牛血清組成。由所述蛋白洗脫組合物配制的蛋白高效洗脫液，包含表面活性剤、穩(wěn)定劑、輔助穩(wěn)定劑，所述表面活性劑為10%。-65%。的ΝΡ40，所述穩(wěn)定劑為O. 1%0 _1%0的(2-羥丙基)-β-環(huán)糊精，所述輔助穩(wěn)定劑為0.1%。-1%。的(羥丙基)甲基纖維素。ΝΡ40是ー種溫和的非離子表面活性剤，一般由超過97%的聚_(氧代_1，2_こニ亞甲基)-α -壬基苯基-ω-羥基，少于1%的支鏈ニ壬基苯基聚氧こ烯醚，小于3%的聚こニ醇構(gòu)成。在生物醫(yī)學(xué)上，常備用在細胞裂解液中，用于破壞細胞膜。1%濃度ΝΡ40的基本可以破壞掉胞膜，并且結(jié)合特定的緩沖液就可以獲得胞漿蛋白。(2-羥丙基)-β -環(huán)糊精是β -環(huán)狀糊精的一種羥烷基化衍生物，其結(jié)構(gòu)式如下
權(quán)利要求
1.一種蛋白洗脫組合物，由NP40、(2-羥丙基)-0-環(huán)糊精、(羥丙基)甲基纖維素和小牛血清組成。
2.一種蛋白洗脫液，包含表面活性劑、穩(wěn)定劑、輔助穩(wěn)定劑和緩沖液，所述表面活性劑為NP40，其工作濃度為10%。-65%。，所述穩(wěn)定劑為(2-羥丙基)-0-環(huán)糊精，其工作濃度為0.1%。_1%。，所述輔助穩(wěn)定劑為(羥丙基)甲基纖維素，其工作濃度為0. 1%。_1%。，所述緩沖液為小牛血清。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的蛋白洗脫液，其特征在于所述表面活性劑為50%。的NP40。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述的蛋白洗脫液，其特征在于所述穩(wěn)定劑是1%。的(2-羥丙基)-3 -環(huán)糊精。
5.根據(jù)權(quán)利要求I所述的蛋白洗脫液，其特征在于所述輔助穩(wěn)定劑是指1%。的(羥丙基)甲基纖維素。
6.根據(jù)權(quán)利要求I所述的蛋白洗脫液，其特征在于還包含防腐劑。
7.根據(jù)權(quán)利要求5.所述的蛋白洗脫液，其特征在于所述防腐劑為1%。的Proclin-300。
8.權(quán)利要求2-7任一項所述蛋白洗脫液在制備新生兒疾病篩查試劑中的應(yīng)用。
9.權(quán)利要求I所述蛋白洗脫組合物在制備新生兒疾病篩查試劑中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種高效蛋白洗脫液，該洗脫液包含表面活性劑、穩(wěn)定劑、輔助穩(wěn)定劑和緩沖液。作為優(yōu)選，本發(fā)明所述蛋白洗脫液還包含防腐劑。本發(fā)明所述蛋白洗脫液能有效洗脫濾紙干血片上的蛋白，并能顯著降低全血中其他物質(zhì)對免疫檢測的干擾，而且具有針對性強、成本低、易于配置的特點，在以蛋白為檢測標(biāo)志物，采用免疫檢測技術(shù)的新生兒疾病篩查上具有廣泛應(yīng)用前景。
文檔編號G01N33/531GK102680678SQ201210189829
公開日2012年9月19日 申請日期2012年6月8日 優(yōu)先權(quán)日2012年6月8日
發(fā)明者劉賓, 吳曉東, 孫旭東, 張鑫, 李鵬翀, 楊曉林 申請人:北京源德生物醫(yī)學(xué)工程有限公司