專利名稱：一種抗體及其應(yīng)用、制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及人白介素-23受體胞外區(qū)結(jié)構(gòu)域(hIL-23R-CHR)的特異性單克隆抗體及其用途，本發(fā)明還涉及產(chǎn)生上述單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞株9H3保藏號(hào)=CCTCCC201240。
背景技術(shù)：
免疫系統(tǒng)的功能在于保護(hù)個(gè)體免受細(xì)菌、多細(xì)胞有機(jī)體和病毒等感染原及癌癥的損害。這種系統(tǒng)包括若干類型的淋巴細(xì)胞和骨髓細(xì)胞單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、樹(shù)突狀細(xì)胞(DC)、嗜酸性粒細(xì)胞、T細(xì)胞、B細(xì)胞及中性粒細(xì)胞。這些淋巴細(xì)胞和髓系細(xì)胞通常產(chǎn)生稱為細(xì)胞因子的信號(hào)蛋白(肽)。免疫反應(yīng)包括炎癥，即，免疫細(xì)胞在全身或在身體特定部位積聚。當(dāng)感染原或外來(lái)物質(zhì)入侵時(shí)，刺激免疫細(xì)胞分泌細(xì)胞因子，細(xì)胞因子繼而調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞的增殖、發(fā)育、分化或遷移。當(dāng)免疫反應(yīng)涉及過(guò)量的炎癥因子時(shí)，它可能產(chǎn)生病理后果。hIL-23 與 hIL_23R 的關(guān)系人白介素-12(hIL_12)是由p35和p40兩個(gè)亞基組成的異二聚體細(xì)胞因子，主要由單核巨噬細(xì)胞(ΜΦ)和樹(shù)突狀細(xì)胞(DC)產(chǎn)生。hIL-12具有促進(jìn)分化的CD4+T輔助細(xì)胞I(Thl)增殖，促進(jìn)細(xì)胞毒性T細(xì)胞(CTL)的形成，提高NK細(xì)胞的細(xì)胞毒性，誘導(dǎo)T細(xì)胞和NK細(xì)胞產(chǎn)生INF-Y、TNF-a和IL-6等細(xì)胞因子，這些免疫細(xì)胞因子的過(guò)表達(dá)跟銀屑病、克羅恩病(CD)、炎癥性腸病(IBD)和風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)等自身免疫疾病密切相關(guān)。而人白介素23 (hIL-23)則是近期發(fā)現(xiàn)的類似于hIL-12的促炎癥細(xì)胞因子，屬于IL-12家族，由單獨(dú)的pl9亞單位和hIL-12的p40亞單位組成。hIL_23主要由活化的DCs、ΜΦ以及記憶性T細(xì)胞和NK細(xì)胞分泌。hIL-23在ThO向Thl7細(xì)胞分化的起始及維持Thl7分化、發(fā)育中起關(guān)鍵性作用。hIL-23能促進(jìn)T細(xì)胞尤其是CD4+T細(xì)胞增殖，促進(jìn)T細(xì)胞、抗原遞呈細(xì)胞(APC)產(chǎn)生IFN- Y與IL-12，并對(duì)DC的共刺激功能起調(diào)節(jié)作用。近來(lái)的研究揭示hIL_23在銀屑病、⑶、IBD和RA等自身免疫性疾病發(fā)病機(jī)制中較hIL-12處于更重要的地位。因此，hIL_23和hIL-12拮抗劑研究與開(kāi)發(fā)已成為相關(guān)疾病新藥創(chuàng)制的焦點(diǎn)。hIL-23的受體是由hIL_12 0 I與hIL_23R共同組成的受體復(fù)合物。除了 hIL_12R的共有亞基hIL-12Ri3 1，pl9亞基特異性受體hIL_23R是造血因子受體超家族的一個(gè)新成員。hIL-23R包含一個(gè)細(xì)胞外區(qū)域、一個(gè)單跨膜區(qū)域和一個(gè)有252個(gè)氨基酸的胞質(zhì)區(qū)域。其胞外區(qū)不同于其他造血因子受體超家族成員的三個(gè)膜纖維蛋白連接，而是由一個(gè)信號(hào)序列、一個(gè)N端免疫球蛋白樣結(jié)構(gòu)域和2個(gè)細(xì)胞因子受體區(qū)域組成。hIL-23與hIL-12共用Jak-stat 信號(hào)分子，如 Jak2、Tyk2、STATl、STAT3、STAT4 和 STAT5，而 hIL_23R 主要是運(yùn)用Jak2和STAT3信號(hào)分子。hIL-23R 與 IL-17 的關(guān)系IL-17通常指的是IL-17A，屬于IL-17家族，主要由Thl7產(chǎn)生。Thl7是最近研究發(fā)現(xiàn)的一類不同于Thl和Th2的⑶4+T細(xì)胞亞群。目前Thl7的調(diào)控機(jī)制仍不十分清楚，對(duì)于Thl7分化過(guò)程的研究提出兩種模型一種認(rèn)為，Thl和Thl7的早期分化階段是一致的，后期分化不同是由于hIL-12和hIL-23選擇性的作用于同時(shí)表達(dá)hIL_12R/hIL_23R的“前Thl細(xì)胞”;另一個(gè)模型認(rèn)為，Thl和Thl7代表的是完全不同的細(xì)胞系，從一開(kāi)始的分化過(guò)程就不同。后來(lái)證實(shí)的確存在與Thl無(wú)關(guān)的Thl7分化途徑。TGF-β和IL-6是Thl7分化的啟動(dòng)者，hIL-23是Thl7的活化和維持者。hIL-23在Thl7細(xì)胞分化過(guò)程中具體的作用機(jī)制被認(rèn)為與STAT-3有關(guān)，因?yàn)閔IL-23可以介導(dǎo)STAT-3的磷酸化過(guò)程，使STAT-3激活從而促進(jìn)IL-17的分泌。故hIL-23R對(duì)Thl7細(xì)胞亞群來(lái)說(shuō)是一個(gè)關(guān)鍵的作用因子。hIL23/hIL23R_Thl7/IL17軸在自身免疫性疾病中的致病性也已被證實(shí)。減少被鼠白介素-23(mIL-23)刺激的IL-17的產(chǎn)生就可以減少EAE在小鼠模型中的發(fā)生，同時(shí)運(yùn)用IL-17的抗體可以提供部分的保護(hù)作用。更進(jìn)一步的研究表明，重組基因mIL-23pl9能夠加劇小鼠的結(jié)腸炎，相反抗mIL-23pl9抗體的治療就能夠改善EAE。因此Thl7細(xì)胞在炎癥免疫性疾病中具有重要作用，可以作為一個(gè)新的藥物作用靶分子。hIL_23R與自身免疫性疾病的關(guān)系研究表明，hIL_23R與由hIL-23/IL_17通路引起的炎癥免疫性疾病密切相關(guān)。銀屑病是一個(gè)常見(jiàn)的、慢性的T細(xì)胞介導(dǎo)的炎癥性皮膚疾病。研究發(fā)現(xiàn)銀屑病患者在皮膚損害處hIL-23pl9和p40mRNA的水平顯著增高。Ann Begovich等人的相關(guān)研究亦證實(shí)hIL-23R遺傳變異體與銀屑病緊密相關(guān)。另外，mIL-23高表達(dá)的轉(zhuǎn)基因小鼠模型進(jìn)一步證實(shí)hIL-23/hIL-23R通路在銀屑病病理學(xué)形成過(guò)程中發(fā)揮中軸作用。上述研究結(jié)果提示hIL-23/hIL-23R通路可能是銀屑病一個(gè)重要的干預(yù)治療靶向。強(qiáng)直性脊柱炎(AS)是最常見(jiàn)的炎癥性關(guān)節(jié)炎之一。研究發(fā)現(xiàn)在hIL_23R基因上多個(gè)SNP與AS密切相關(guān)。Fraser Cummings JR等研究亦發(fā)現(xiàn)IL-23R基因上多個(gè)SNPs均跟克羅恩氏病顯著相關(guān)。而B(niǎo)uing等人則進(jìn)一步驗(yàn)證位于hIL-23R上的SNPrsl 1209026 (Arg381Gln)對(duì)于炎癥性腸病來(lái)說(shuō)是一個(gè)保護(hù)性的標(biāo)志。這些研究結(jié)果表明hIL-23R/Thl7通路可能參與AS進(jìn)程。近來(lái)研究中，通過(guò)P40敲除小鼠證明阻斷hIL-23和hIL_12可以有效治療許多的炎性及自身免疫性疾病。但是當(dāng)通過(guò)P40亞基阻斷hIL-12時(shí)會(huì)增加機(jī)體對(duì)微生物感染的敏感性。hIL-23pl9/hIL_23R在自身免疫性疾病的發(fā)病以及抗腫瘤、抗感染和移植排斥等方面發(fā)揮積極的作用。人白介素-23受體胞外區(qū)結(jié)構(gòu)域(hIL-23R-CHR，GenBank CAH70406. I其中第124-313位氨基酸為目的序列)屬于人白介素-23受體(hIL_23R)胞外區(qū)，是與hIL-23結(jié)合的有效功能區(qū)(Parham C，Chirica M，Timans J等(2002) JImmunol 168 (11) :5699-5708)。阻斷 hIL_23R_CHR 對(duì)于阻斷 hIL_23pl9/hIL_23R，治療關(guān)節(jié)炎、炎性腸病、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、銀屑病、多發(fā)性硬化或哮喘都有重要的意義，有望成為hIL-23/IL-17介導(dǎo)的炎性及自身免疫性疾病治療的有效靶點(diǎn)。本發(fā)明單克隆抗體是針對(duì)hIL-23R-CHR，可以封閉天然的hIL_23R的功能，進(jìn)而可以防治由hIL23/hIL23R_Thl7/IL17軸介導(dǎo)的炎性及自身免疫性疾病。

發(fā)明內(nèi)容
一種抗體，其特征在于其包括氨基酸序列具有SEQ ID NO :7_12中任意一種以上所示的序列或其變異體、同源物或衍生物。
所述的抗體包括重鏈可變結(jié)構(gòu)域Vh和輕鏈可變結(jié)構(gòu)域 '，其中c)重鏈可變結(jié)構(gòu)域Vh依次包含高變區(qū)⑶RH1、⑶RH2和⑶RH3，所述⑶RHl的氨基酸序列為SEQ ID NO 7 ;所述CDRH2的氨基酸序列為SEQ ID NO 8 ;所述CDRH3的氨基酸序列為 SEQ ID NO 9 ；d)輕鏈可變結(jié)構(gòu)域Vl依次包含高變區(qū)⑶RL1、⑶RL2和⑶RL3，所述⑶RLl的氨基酸序列為SEQ ID NO 10 ;所述CDRL2的氨基酸序列為SEQ ID NO 1 ;所述CDRL3的氨基酸序列為 SEQ ID NO 12o所述的抗體為小鼠雜交瘤細(xì)胞株9Η3保藏號(hào)為CCTCC NO C201240產(chǎn)生單克隆抗體，其抗體氨基酸序列為SEQ ID NO 130上述任意一種抗體在治療由hIL-23介導(dǎo)的炎性或免疫性疾病藥物中的應(yīng)用。所述的免疫性疾病為關(guān)節(jié)炎、炎性腸病、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、銀屑病、多發(fā)性硬化或哮喘。所述的關(guān)節(jié)炎是類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。所述的炎性腸病是克羅恩氏病或潰瘍性結(jié)腸炎。上述的抗體用于hIL_23R的檢測(cè)方法，其特征在于檢測(cè)方法中應(yīng)用標(biāo)記物結(jié)合的單克隆抗體，其中標(biāo)記物包括酶標(biāo)記物、突光標(biāo)記物、膠體金標(biāo)記物或放射性標(biāo)記物。保藏信息雜交瘤細(xì)胞株9H3，保藏單位為中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏地址為中國(guó)武漢武漢大學(xué)，保藏編號(hào)=CCTCC NO :C201240，保藏時(shí)間為2012年3月29日。注本發(fā)明涉及雜交瘤細(xì)胞株9H3，系細(xì)胞株，無(wú)分類名和拉丁名。有益效果本發(fā)明獲得一株穩(wěn)定分泌抗hIL-23R_CHR特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞株9H3 (保藏編號(hào)CCTCC C201240)，其分泌的單克隆抗體明顯抑制Thl7分化免疫排斥模型中IL-17A的分泌，并體內(nèi)實(shí)驗(yàn)顯示該單抗可以有效改善EAE小鼠、膠原誘發(fā)關(guān)節(jié)炎(CIA)小鼠及IBD樣HLA-B27大鼠癥狀的嚴(yán)重程度。體內(nèi)體外實(shí)驗(yàn)顯示，該單抗是治療hIL23/hIL23R-Thl7/IL17軸介導(dǎo)的炎性及自身免疫性疾病的潛在藥物。


圖I為單抗9H3SDS-PAGE分析。其中，泳道I為辛酸-硫酸銨沉淀單克隆抗體，泳道2為S印horose-200柱純化單克隆抗體。圖2為單抗9H3Western的結(jié)果。圖3為單抗9H3酶結(jié)合物S印hadex G200柱(2. 6cmX 100cm)層析洗脫曲線。圖4為單抗9H3細(xì)胞ELISA的結(jié)果。圖5為hIL-23刺激對(duì)脾淋巴細(xì)胞IL-17A分泌的影響。圖6為單抗9H3對(duì)hIL_23刺激脾淋巴細(xì)胞IL-17A分泌的影響。圖7為單抗9H3組與對(duì)照組EAE小鼠臨床評(píng)分。圖8為單抗9H3組與對(duì)照組HLA-B27大鼠臨床評(píng)分。圖9為單抗9H3組與對(duì)照組CIA小鼠臨床評(píng)分。圖10為單抗可變結(jié)構(gòu)域測(cè)序報(bào)告。其中，第47-379位為單抗9H3重鏈可變結(jié)構(gòu)域核苷酸序列；第425-757位為單抗9H3輕鏈可變結(jié)構(gòu)域核苷酸序列。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合具體實(shí)施方式
，進(jìn)一步闡述本發(fā)明，這些實(shí)施例僅用于說(shuō)明本發(fā)明而不是對(duì)本發(fā)明的限制，在本發(fā)明的構(gòu)思前提下對(duì)本發(fā)明制備單克隆抗體及其制備方法的簡(jiǎn)單改造，都屬于本發(fā)明要求保護(hù)的范圍。下述實(shí)施例中所使用的實(shí)驗(yàn)方法如無(wú)特殊說(shuō)明，均為常規(guī)方法。下述實(shí)施例中所用的材料、試劑等，如無(wú)特殊說(shuō)明，均可從商業(yè)途徑得到。實(shí)施例I、動(dòng)物免疫h(yuǎn)IL-23R-CHR蛋白(抗原制備方法及鑒定參照發(fā)明專利重組質(zhì)粒pET32a-hIL-23R-CHR及其構(gòu)建表達(dá)，專利申請(qǐng)?zhí)柼?hào):201110096271. 8，申請(qǐng)日期2011. 04. 18 ;核酸序列為SEQ ID NO 1 ;氨基酸序列為SEQ ID NO :2)，溶于生理鹽水，與弗氏完全佐劑等體積混合，經(jīng)充分乳化后，接種于BALB/c小鼠(揚(yáng)州大學(xué)比較醫(yī)學(xué)中心提供，SCXK (蘇)2007-0001)腹腔，10 μ ghIL_23R_CHR蛋白/200 μ L/只；于基礎(chǔ)免疫后，間隔兩周采用相同的抗原劑量與等體積弗氏不完全佐劑混合，進(jìn)行加強(qiáng)免疫；于第二次加強(qiáng)免疫后一周，以間接ELISA法測(cè)定免疫小鼠抗血清效價(jià)。以正常鼠血清為陰性對(duì)照，以(測(cè)定孔A值-空白值)/(陰性對(duì)照孔A值-空白值)>2. I為判定標(biāo)準(zhǔn)，進(jìn)行測(cè)定。小鼠抗血清終點(diǎn)效價(jià)均為I : 12，8000以上。選擇血清hIL-23R_CHR特異性抗體效價(jià)最高的小鼠用于細(xì)胞融合，并于融合前3天，腹腔接種20 μ ghIL-23R-CHR蛋白進(jìn)行沖擊免疫。實(shí)施例2、單克隆抗體的制備I.細(xì)胞融合細(xì)胞融合采用聚乙二醇法無(wú)菌操作取如實(shí)施例I所述免疫的小鼠脾臟，制成細(xì)胞懸液，離心，細(xì)胞計(jì)數(shù)；將I X IO8脾細(xì)胞與2X107SP2/0細(xì)胞混合，IOOOrpm離心IOmin,棄上清液，將離心管置于37°C水浴中；取Iml預(yù)熱至40°C的50% PEG緩慢滴加到細(xì)胞沉淀上，以基礎(chǔ)培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞；IOOOrpm離心lOmin，棄上清液，加HAT培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，分裝于96孔細(xì)胞培養(yǎng)板，將培養(yǎng)板置于37°C、5%的CO2濕潤(rùn)細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，5天后用新鮮HAT換出培養(yǎng)板孔中1/2培養(yǎng)基，10天后用HT培養(yǎng)基換出HAT。2.融合細(xì)胞的篩選及克隆化培養(yǎng)采用有限稀釋法克隆化雜交瘤細(xì)胞以hIL-23R_CHR蛋白作為篩選包被抗原，山羊抗小鼠IgM-HRP/IgG-HRP作為檢測(cè)抗體。陽(yáng)性孔雜交瘤細(xì)胞經(jīng)亞克隆一篩選一亞克隆一篩選一亞克隆一擴(kuò)大培養(yǎng)。具體的，用小鼠脾細(xì)胞與SP2/0細(xì)胞融合后，接種于96孔細(xì)胞板HAT選擇性培養(yǎng)基上。經(jīng)三次亞克隆，建立了穩(wěn)定分泌的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞株，命名為9H3，所分泌的單克隆抗體命名為9H3。本發(fā)明人于2012年3月29日將所述雜交瘤細(xì)胞株保藏于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心(CCTCC，武漢，武漢大學(xué))，其保藏號(hào)分別為CCTCC NO :C201240。3.單克隆抗體的生產(chǎn)及純化取10周齡雌性BALB/c小鼠，每只小鼠腹腔注射O. 5ml降植烷；一周后接種如上所述處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的雜交瘤細(xì)胞5 X IO5個(gè)/只；7-10天后采集腹水,5000rpm離心15min,收集上清液；腹水經(jīng)二氧化硅預(yù)處理后，以辛酸-硫酸銨沉淀法沉淀免疫球蛋白，最后通過(guò)Sephorose-200柱層析，獲得純化單抗，采用SDS-PAGE鑒定單抗純度。結(jié)果見(jiàn)附圖1，說(shuō)明該純化方法對(duì)腹水中單抗的純化效果很好。該單克隆抗體送至南京思普金生物科技有限公司測(cè)序，結(jié)果見(jiàn)圖10.該單克隆抗體命名為單克隆抗體9H3，其氨基酸序列為SEQ ID NO 13 ；其中該單抗重鏈可變結(jié)構(gòu)域Vh核苷酸序列為SEQ ID NO :3，氨基酸序列為SEQ ID N0:4，重鏈可變結(jié)構(gòu)域Vh依次包含高變區(qū)⑶RH1、⑶RH2和⑶RH3，所述⑶RHl的氨基酸序列為SEQID NO 7 ;所述CDRH2的氨基酸序列為SEQ ID NO 8 ;所述CDRH3的氨基酸序列SEQ ID NO 9。輕鏈可變結(jié)構(gòu)域'核苷酸序列為SEQ ID NO :5，氨基酸序列為SEQ ID NO :6，輕鏈可變結(jié)構(gòu)域\依次包含高變區(qū)CDRL1、CDRL2和CDRL3，所述CDRLl的氨基酸序列為SEQ ID NO 10 ;所述CDRL2的氨基酸序列為SEQ ID NO 11 ;所述CDRL3的氨基酸序列SEQ IDNO :12。實(shí)施例3、單克隆抗體的特性鑒定I.抗體亞類的鑒定采用小鼠單克隆抗體獨(dú)特型分型試劑盒(IS02-1KT, sigma-aIdrich)鑒定單克隆抗體的亞類。結(jié)果雜交瘤細(xì)胞株9H3CCTCC C201240分泌的單克隆抗體的重鏈為IgG1，輕鏈為Kappa型。2.單克隆抗體親和力測(cè)定采用間接ELISA法測(cè)定單抗親和常數(shù)。測(cè)定實(shí)施例2中所獲得純化的單抗蛋白濃度，取一定濃度的純化被檢單抗，按間接ELISA法測(cè)定。結(jié)果9H3的親和常數(shù)為I. 03 X IO9 · 親和力較高。3. Western雜交檢測(cè)抗體特異性hIL-23R-CHR 與 5XSDS 上樣緩沖液混勻，100°C煮沸 3_5min，進(jìn)行 SDS-PAGE 電泳。電泳后取下膠，裁剪合適的PVDF膜和濾紙。常溫轉(zhuǎn)膜1.5h。轉(zhuǎn)膜后用3% BSA封閉2h。用純化的單克隆抗體孵育過(guò)夜。次日用O. 05% Tween-TBS清洗，加HRP標(biāo)記的山羊抗小鼠二抗，隨后用ECL顯色。如圖2所示，單克隆抗體9H3與hIL-23R_CHR蛋白呈特異性顯色。實(shí)施例4、酶標(biāo)抗體的制備參照劉秀梵主編，單克隆抗體在農(nóng)業(yè)上的應(yīng)用，第一版，安徽科學(xué)技術(shù)出版社，1994,61-62中所述方法，對(duì)腹水單抗9H3進(jìn)行辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記；將標(biāo)記物經(jīng)Sephadex G200凝膠層析純化,分部收集,合并第一峰。Sephadex G200凝膠層析結(jié)果見(jiàn)圖3，酶標(biāo)單抗質(zhì)量鑒定結(jié)果見(jiàn)表I。表I單抗9H3的辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記物(9H3-HRP)的質(zhì)量鑒定
權(quán)利要求
1.一種抗體，其特征在于其包括氨基酸序列具有SEQ ID NO :7-12中任意一種以上所示的序列或其變異體、同源物或衍生物。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的抗體，其特征在于所述的抗體包括重鏈可變結(jié)構(gòu)域Vh和輕鏈可變結(jié)構(gòu)域'，其中 a)重鏈可變結(jié)構(gòu)域Vh依次包含高變區(qū)⑶RH1XDRH2和⑶RH3，所述⑶RHl的氨基酸序列為SEQ ID NO 7 ;所述CDRH2的氨基酸序列為SEQ ID NO 8 ;所述CDRH3的氨基酸序列為SEQ ID NO 9 ； b)輕鏈可變結(jié)構(gòu)域Vl依次包含高變區(qū)⑶RL1XDRL2和⑶RL3，所述⑶RLl的氨基酸序列為SEQ ID NO 10 ;所述0)1^2的氨基酸序列為SEQ ID NO 11 ;所述0)1^3的氨基酸序列為 SEQ ID NO 12o
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的抗體，其特征在于所述的抗體為小鼠雜交瘤細(xì)胞株9Η3保藏號(hào)為CCTCC NO C201240產(chǎn)生單克隆抗體，其抗體氨基酸序列為SEQ ID NO :13。
4.一種制備權(quán)利要求1-3任意一種抗體在治療由hIL-23介導(dǎo)的炎性或免疫性疾病藥物中的應(yīng)用。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征所述的免疫性疾病為關(guān)節(jié)炎、炎性腸病、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、銀屑病、多發(fā)性硬化或哮喘。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于所述的關(guān)節(jié)炎是類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于所述的炎性腸病是克羅恩氏病或潰瘍性結(jié)腸炎。
8.根據(jù)權(quán)利要求1-3所述的抗體用于hIL-23R的檢測(cè)方法，其特征在于檢測(cè)方法中應(yīng)用標(biāo)記物結(jié)合的單克隆抗體，其中標(biāo)記物包括酶標(biāo)記物、突光標(biāo)記物、膠體金標(biāo)記物或放射性標(biāo)記物。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種人白介素-23受體胞外區(qū)結(jié)構(gòu)域(hIL-23R-CHR)特異性單克隆抗體。本發(fā)明還涉及產(chǎn)生單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞株(保藏號(hào)CCTCC NOC201240)和單克隆抗體的制備方法。本發(fā)明另外還涉及hIL-23R-CHR單克隆抗體在治療炎性及免疫性疾病中的用途，所述炎性及免疫性疾病的特征是存在升高水平的hIL-17。
文檔編號(hào)G01N33/577GK102924599SQ20121034780
公開(kāi)日2013年2月13日 申請(qǐng)日期2012年9月19日 優(yōu)先權(quán)日2012年4月19日
發(fā)明者高向東, 趙虎, 賈國(guó)棟, 姚文兵, 郭薇 申請(qǐng)人:中國(guó)藥科大學(xué)