一種唾液直接檢測裝置制造方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種唾液直接檢測裝置，包括檢測盒、唾液過濾層和免疫層析檢測條，所述唾液過濾層采用多孔性材料并經(jīng)過化學(xué)處理，唾液過濾層與免疫層析檢測條相疊連接，并置于檢測盒內(nèi)；檢測盒由底蓋和頂蓋組成，檢測盒位于唾液過濾層一端的頂蓋上設(shè)置多個小孔。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的唾液直接檢測裝置解決了唾液因粘稠取樣困難的問題，唾液無須取出后再加緩沖液處理后檢測，操作簡便、快捷；檢測盒頂蓋的多孔結(jié)構(gòu)，便于輾轉(zhuǎn)于口腔，刺激口中唾液腺，促進唾液的分泌與收集，可用來檢測艾滋病毒和毒品。
【專利說明】—種唾液直接檢測裝置
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種唾液檢測裝置，特別是一種自口腔中直接檢測艾滋病毒或毒品的直檢裝置，屬于生物領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002]毒品對社會以及人的身心都有很大危害，而毒品犯罪也是當(dāng)今國際社會的一大公害。其包括母體大麻，大麻(THC)，安非他命(AMP)，甲醛安非他命(M-AMP)，可卡因(C0C)，嗎啡因(M0R)，苯雙氮嗪(BENZ)，天使粉(PCP)，巴比妥(Barb)，二甲基亞硝胺NDMA，尼古丁Cotinin (Nicotine),輕考酮 Oxycodone (0ΧΥ),美沙酮 Methadone (MTD),三醋酸纖維素TCA 等。
[0003]目前市場以檢測尿液和血液為主，但存在著取樣復(fù)雜、樣品骯臟、侵犯隱私、樣品保真性的懷疑等問題，因此一種直接檢測唾液中毒品便顯得十分重要。唾液檢測毒品的優(yōu)點包括:1.取樣方便、干凈、衛(wèi)生，樣品不具傳染性，檢測快速，樣品真實性高；2.檢測裝置簡便，相比組織、毛發(fā)樣本檢測需要用到ELISA、GC-MS、HPLC等大型儀器成本較低，且適合現(xiàn)場檢測；3.根據(jù)藥代動力學(xué)原理，唾液檢測到的大部分是藥物本身，相比尿液檢測的是藥物的代謝產(chǎn)物更為優(yōu)越；4.可節(jié)省大量人力和物力。因此，這種快速的、非侵入性的檢測手段將受到廣泛應(yīng)用。
[0004]直接從唾液中檢測微量毒品和傳染性病毒一直是國際上難題之一，毒品檢測主要對象大麻(THC)有兩種化學(xué)結(jié)構(gòu):一為口服后滯留在口腔中的原型(或稱母體)大麻Δ -9-THC (分子式為C21H3tlO2,半衰期25-36小時)。食服大麻后，20-30分鐘含量在口腔中迅速下降，并降至20ng/ml并維持4_8小時，此時服用者反應(yīng)會相對遲鈍。國際上將20ng/ml Δ -9-THC作為檢查的臨界值。Λ -9-THC經(jīng)人體內(nèi)代謝便改變化學(xué)結(jié)構(gòu)為代謝型ll-nor-9-Carboxy-THC (分子式為C21H28O4,半衰期5.2-6.2天)，而尿液檢測是檢測后者。
[0005]同樣的，艾滋病毒的檢測一般的需采集血樣。具有血樣檢測靈敏度的非人體侵入型唾液檢測，為市場青睞。美國已有獲專利的艾滋病毒的唾液檢測產(chǎn)品。這種測試需要收集從嘴里的唾液測試設(shè)備，然后插入設(shè)備到特定的化學(xué)緩沖讓唾液解散并執(zhí)行測試。測試套件包含一個小瓶的化學(xué)緩沖。測試程序?qū)嶋H上是兩個步驟。
[0006]其次，相關(guān)的唾液檢測裝置，相當(dāng)大部分的唾液根本不能從免疫層析條上流過。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]本發(fā)明的目的在于提供一種唾液直接檢測裝置。
[0008]本發(fā)明的一種唾液直接檢測裝置，包括檢測盒、唾液過濾層和免疫層析檢測條，所述唾液過濾層采用多孔性材料并經(jīng)過化學(xué)處理，唾液過濾層與免疫層析檢測條相疊連接，并置于檢測盒內(nèi)；檢測盒由底蓋和頂蓋組成，檢測盒位于唾液過濾層一端的頂蓋上設(shè)置多個小孔。
[0009]所述免疫層析檢測條依次由樣品吸收區(qū)、固相標(biāo)記抗體區(qū)、檢測區(qū)Τ、對照區(qū)C和吸水區(qū)組成，唾液經(jīng)過濾后進入免疫層析檢測條的樣品吸收區(qū)。
[0010]所述的化學(xué)處理可以采用0.lwt%的吐溫-20和pH值為7.2磷酸緩沖液配成的溶液，或洗滌劑配制成的溶液處理、干燥。
[0011]所述的唾液過濾層優(yōu)先采用玻璃纖維、聚乙酯、尼龍或塑料泡沫。
[0012]所述的檢測盒的底座采用塑料或其它材料。
[0013]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的唾液直接檢測裝置解決了唾液因粘稠取樣困難的問題，唾液無須取出后再加緩沖液處理后檢測，操作簡便、快捷；檢測盒頂蓋的多孔結(jié)構(gòu)，便于輾轉(zhuǎn)于口腔，刺激口中唾液腺，促進唾液的分泌與收集，可用來檢測艾滋病毒和毒品。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0014]圖1是本發(fā)明免疫層析檢測條圖。
[0015]圖2是本發(fā)明唾液直檢裝置圖。
【具體實施方式】
[0016]材料來源及其層析條成份組成:
[0017]1.美國司泰普公司(STAPLES, SAN DIEGO, CA)生產(chǎn)的IOmil PVC塑料殼，涂以雙面粘膠；
[0018]2.美國渥特明公司(WHATMAN, FAIRFIELD, NJ)生產(chǎn)的硝基纖維膜；
[0019]3.美國渥特明公司(WHATMAN, FAIRFIELD, NJ)生產(chǎn)的吸水紙片；
[0020]4.美國泊樂-吉樂明公司(PALL-GELMAN，ANN ARBOR, MD生產(chǎn)的玻璃纖維紙；
[0021]5.HIV 基因蛋白 gp-41-120, gp-36, p-24, (JAJ International, San Diego, CA.)
[0022]6.毒品單克隆抗體和毒品蛋白載體(ARISTA BIOLOGY Inc.,Allentown, PA)
[0023]7.吐溫-20，牛血清白蛋白。
[0024]唾液過濾層12的制備:在多孔性材料上(玻璃纖維、聚乙酯、尼龍或塑料泡沫)采用化學(xué)(如采用0.lwt%的吐溫-20和pH值為7.2磷酸緩沖液配成的溶液，或洗滌劑配制成的溶液)處理、干燥后使用。
[0025]免疫層析檢測條13 的制備方法(見 ZL 00118669.8，ZL98122892.5, ZL03142460.0):
[0026]1.標(biāo)記抗原的制備:將所需抗原加入所需量膠體金溶液，攪拌十分鐘后，加入1/10體積的l-2wt%牛血清白蛋白液作穩(wěn)定劑，高速離心，取得紅色沉淀物，即標(biāo)記抗體；
[0027]2.將上述沉淀物溶解于緩沖劑中，鋪于玻璃紙上，真空抽干；
[0028]3.包被抗原制備:將與標(biāo)記抗原相對應(yīng)的另一抗原溶液用噴霧方法劃線于硝基纖維膜上，于37攝氏度烘干20分鐘；
[0029]4.裝配:將上述各組分貼在有膠面的塑料薄板上，上下兩端再貼上吸水紙，切割成條，將制作好的唾液過濾層12與免疫層析檢測條13相疊后，再裝入塑料制成的檢測盒11之中，檢測盒11位于唾液過濾層12 —端的頂蓋上設(shè)置多個小孔，可方便唾液從檢測盒11頂蓋進入唾液過濾層12中。
[0030]工作原理
[0031]艾滋病毒免疫層析檢測條13工作原理:待測唾液經(jīng)過唾液過濾層加入免疫層析檢測條第I區(qū)，液體基于毛細管現(xiàn)象上升。溶介第2區(qū)的標(biāo)記抗原體。如待測唾液中有HIV抗體成分，形成標(biāo)記抗原抗體復(fù)合物，標(biāo)記抗原抗體復(fù)合物隨液體上升至試驗區(qū)(T)，形成“標(biāo)記抗原-HIV抗體-抗原”復(fù)合物而形成一條沉淀線，如使用金標(biāo)抗原則形成一條玫瑰色帶，液體繼續(xù)上升至對照區(qū)(C)，又形成一條沉淀線。兩條沉淀線即顯示唾液中有HIV抗體的存在。檢測結(jié)果艾滋病毒感染為陽性。如唾液中無HIV抗體的存在，則試驗區(qū)(T)沒有沉淀線出現(xiàn)。檢測結(jié)果為陰性。
[0032]毒品免疫層析檢測條13工作原理:待測唾液經(jīng)過濾后進入免疫層析檢測條13的第I區(qū)，液體基于毛細管現(xiàn)象上升，并溶解第2區(qū)的標(biāo)記抗毒品抗體。如待測唾液中無毒品成分，標(biāo)記抗體隨液體上升至第3區(qū)，形成“標(biāo)記抗體-毒品載體蛋白”復(fù)合物而形成一條沉淀線，如使用金標(biāo)記物則形成一條玫瑰色帶，液體繼續(xù)上升至第4區(qū)，又形成“標(biāo)記抗體-抗抗體復(fù)合沉淀線”顯示兩條沉淀線結(jié)果即顯示唾液中無毒品的存在。如唾液中有毒品存在并其濃度在檢測臨界值以上，則毒品本身會競爭中和掉標(biāo)記抗體，從而予特定時間，如5-10分鐘在第3區(qū)不出現(xiàn)任何沉淀線，而顯示唾液中毒品濃度在臨界值以上，檢測結(jié)果為陽性。
[0033]唾液過濾層12的工作原理為:唾液經(jīng)過濾其中液體活性成分進入艾滋病毒或毒品免疫層析檢測條13，而唾液中粘稠物和細粒則滯留在唾液過濾層12中。
[0034]實例一艾滋病毒唾液直接檢測裝置
[0035]本實例使用同類型血清用免疫層析檢測條，加上唾液過濾層或不加唾液過濾層對血清樣品和唾液樣品分別進行檢測。
[0036]應(yīng)用免疫層析檢測條:HIV-1抗體，HIV-1I抗體，P-24抗體，檢測結(jié)果如表1所
/示[0037]表1加上唾液過濾層或不加唾液過濾層對血清樣品和唾液樣品的檢測結(jié)果
檢測項目不加唾液過濾層加唾液過濾層
【權(quán)利要求】
1.一種唾液直接檢測裝置，其特征在于所述裝置包括檢測盒(11 )、唾液過濾層(12 )和免疫層析檢測條(13)，所述唾液過濾層(12)采用多孔性材料并經(jīng)過化學(xué)處理，所述唾液過濾層(12)與所述免疫層析檢測條(13)相疊連接，并置于所述檢測盒(11)內(nèi)；所述檢測盒(11)由底蓋和頂蓋組成，所述檢測盒(11)位于所述唾液過濾層(12)—端的頂蓋上設(shè)置多個小孔。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的唾液直接檢測裝置，其特征在于所述的免疫層析檢測條(13)依次由樣品吸收區(qū)、固相標(biāo)記抗體區(qū)、檢測區(qū)T、對照區(qū)C和吸水區(qū)組成，唾液經(jīng)過濾后進入免疫層析檢測條(13)的樣品吸收區(qū)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的唾液直接檢測裝置，其特征在于所述的化學(xué)處理是采用0.lwt%的吐溫-20和pH值為7.2磷酸緩沖液配制成的溶液處理、干燥。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的唾液直接檢測裝置，其特征在于所述的化學(xué)處理是采用洗滌劑配制成的溶液處理、干燥。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的唾液直接檢測裝置，其特征在于所述的唾液過濾層(12)優(yōu)選采用玻璃纖維、聚乙酯、尼龍或塑料泡沫。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的唾液直接檢測裝置，其特征在于所述的檢測盒(11)的底蓋采用塑料。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的唾液直接檢測裝置，其特征在于所述檢測裝置用于艾滋病毒或毒品的檢測。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的唾液直接檢測裝置，其特征在于在所述的檢測盒(11)內(nèi)放置多條免疫層析檢測條(13)。
【文檔編號】G01N33/577GK103823059SQ201210468107
【公開日】2014年5月28日 申請日期:2012年11月19日 優(yōu)先權(quán)日:2012年11月19日
【發(fā)明者】惟釗·盧, 詹姆斯·儆翊·盧, 胡成龍 申請人:南京路始生物科技有限公司