血清乙醇含量測定試劑盒的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種血清乙醇測定試劑盒，包括配合使用的R1和R2兩種獨立液態(tài)試劑，R1試劑各成分濃度為：煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD）18～22g/L，其余為純化水；R2試劑各成分濃度為：己二酸二酰肼（ADH）35.5～41.5mg/L，Tris-HCL緩沖液11.9～12.3g/L，其余為純化水。本發(fā)明能適合臨床實驗室對血清乙醇含量測定的需要。
【專利說明】血清乙醇含量測定試劑盒
【技術(shù)領域】
[0001]本發(fā)明屬于血清檢測試劑【技術(shù)領域】，尤其與一種用于血清中乙醇含量測定的試劑
盒有關(guān)。
【背景技術(shù)】
[0002]血清乙醇的定量測定對診斷和鑒別診斷急患疾病，搶救乙醇中毒十分重要，對處理交通肇事和法醫(yī)鑒定是重要的科學依據(jù)，所以目前臨床實驗室普遍開展對血清乙醇含量的測定工作。乙醇含量的測定方法較多，有物理方法如氣象色譜法、密度瓶法等等，化學方法如重鉻酸鉀比色法、乙醇氧化酶法等等，各種方法各有利弊。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明目的就是要適應臨床實驗室對血清乙醇含量測定的需要，提供一種用于血清乙醇含量的測定試劑盒。
[0004]為此，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案:血清乙醇含量測定試劑盒，包括配合使用的Rl和R2兩種獨立液態(tài)試劑，其特征是:所述的Rl試劑各成分濃度為:煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD) 18?22g/L，其余為純化水；所述的R2試劑各成分濃度為:己二酸二酰肼(ADH)35.5 ?41.5mg/L，Tris-HCL 緩沖液 11.9 ?12.3g/L，其余為純化水。
[0005]優(yōu)選的，所述的Rl試劑各成分濃度為:煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD) 20g/L，其余為純化水；所述的R2試劑各成分濃度為:己二酸二酰肼(ADH) 38.5mg/L, Tris-HCL緩沖液
12.lg/L，其余為純化水。
[0006]本發(fā)明是使用乳酸氧化酶法測定血清乙醇含量，根據(jù)“乙醇+NAD乙醇脫氫
乙醛+NADH”這個反應原理，在波長340nm處測定NADH每分鐘吸光度的變化率，計算其含量。測定時，選用兩根試管分別作為標準管和樣品管，標準管中加入20微升已知乙醇濃度的校準液，樣品管中加入20微升待測標本，然后在標準管和樣品管中各加入本發(fā)明所述的Rl試劑200微升混勻，在溫度37°C下孵育5分鐘后，再在標準管和樣品管中各加入本發(fā)明所述的R2試劑50微升混勻，在溫度37 °C下延遲半分鐘，使用全自動生化分析儀在主波長340nm時測定各管的吸光度A，血清乙醇含量(ALC濃度)就可以通過下述公式計算而得:ALC濃度(nmol/L)=(樣品管吸光度Au/標準管吸光度)X校準液乙醇溶度。
[0007]使用本發(fā)明可以達到以下有益效果:能夠使用全自動生化分析儀直接測定血清乙醇含量，適合臨床實驗室對乙醇含量測定的需要。
【具體實施方式】
[0008]下面結(jié)合實施例對本發(fā)明進行進行詳細描述。
[0009]實施例一:
本發(fā)明試劑盒包括配合使用的Rl和R2兩種獨立液態(tài)試劑，Rl試劑各成分濃度為:煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD) 18g/L，其余為純化水；R2試劑各成分濃度為:己二酸二酰肼(ADH) 35.5mg/L, Tris-HCL 緩沖液 11.9g/L，其余為純化水。
[0010]使用羅氏P800全自動生化分析儀，測定方法采用速率法，主波長采用340nm，輔助波長405 nm，定標模式采用線性，反應方向正向上升，選用兩根試管分別作為標準管和樣品管，標準管中加入20微升校準液，樣品管中加入20微升待測標本，然后在標準管和樣品管中各加入Rl試劑200微升混勻，在溫度37°C下孵育5分鐘，然后再在標準管和樣品管中各加入本發(fā)明所述的R2試劑50微升混勻，在溫度37°C下延遲半分鐘，在羅氏P800全自動生化分析儀測定各管的吸光度A，通過下述公式自動計算出血清乙醇含量:血清乙醇含量(ALC濃度)就可以通過下述公式計算而得:ALC濃度(nmol/L)=(樣品管吸光度Au/標準管吸光度)X校準液乙醇溶度。
[0011]實施例二:
本發(fā)明試劑盒包括配合使用的Rl和R2兩種獨立液態(tài)試劑，Rl試劑各成分濃度為:煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD) 20g/L，其余為純化水；R2試劑各成分濃度為:己二酸二酰肼(ADH) 38.5mg/L, Tris-HCL 緩沖液 12.lg/L，其余為純化水。
[0012]使用羅氏P800全自動生化分析儀，測定方法采用速率法，主波長采用340nm，輔助波長405 nm，定標模式采用線性，反應方向正向上升，選用兩根試管分別作為標準管和樣品管，標準管中加入20微升校準液，樣品管中加入20微升待測標本，然后在標準管和樣品管中各加入Rl試劑200微升混勻，在溫度37°C下孵育5分鐘，然后再在標準管和樣品管中各加入本發(fā)明所述的R2試劑50微升混勻，在溫度37°C下延遲半分鐘，在羅氏P800全自動生化分析儀測定各管的吸光度A，通過下述公式自動計算出血清乙醇含量:血清乙醇含量(ALC濃度)就可以通過下述公式計算而得:ALC濃度(nmol/L)=(樣品管吸光度Au/標準管吸光度)X校準液乙醇溶度。
[0013]實施例三:
本發(fā)明試劑盒包括配合使用的Rl和R2兩種獨立液態(tài)試劑，Rl試劑各成分濃度為:煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD) 22g/L，其余為純化水；R2試劑各成分濃度為:己二酸二酰肼(ADH) 41.5mg/L, Tris-HCL 緩沖液 12.3g/L，其余為純化水。
[0014]使用羅氏P800全自動生化分析儀，測定方法采用速率法，主波長采用340nm，輔助波長405 nm，定標模式采用線性，反應方向正向上升，選用兩根試管分別作為標準管和樣品管，標準管中加入20微升校準液，樣品管中加入20微升待測標本，然后在標準管和樣品管中各加入Rl試劑200微升混勻，在溫度37°C下孵育5分鐘，然后再在標準管和樣品管中各加入本發(fā)明所述的R2試劑50微升混勻，在溫度37°C下延遲半分鐘，在羅氏P800全自動生化分析儀測定各管的吸光度A，通過下述公式自動計算出血清乙醇含量:血清乙醇含量(ALC濃度)就可以通過下述公式計算而得:ALC濃度(nmol/L)=(樣品管吸光度Au/標準管吸光度)X校準液乙醇溶度。
【權(quán)利要求】
1.血清乙醇含量測定試劑盒，包括配合使用的Rl和R2兩種獨立液態(tài)試劑，其特征在于:所述的Rl試劑各成分濃度為:煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD) 18?22g/L，其余為純化水；所述的R2試劑各成分濃度為:己二酸二酰肼(ADH) 35.5?41.5mg/L, Tris-HCL緩沖液11.9?12.3g/L，其余為純化水。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的血清乙醇含量測定試劑盒，其特征在于:所述的Rl試劑各成分濃度為:煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD) 20g/L，其余為純化水；所述的R2試劑各成分濃度為:己二酸二酰肼(ADH) 38.5mg/L, Tris-HCL緩沖液12.lg/L，其余為純化水。
【文檔編號】G01N21/31GK103592238SQ201310464606
【公開日】2014年2月19日 申請日期:2013年10月8日 優(yōu)先權(quán)日:2013年10月8日
【發(fā)明者】石麗萍, 夏春偉 申請人:紹興圣康生物科技有限公司