多索茶堿注射液有關(guān)物質(zhì)測定方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種多索茶堿注射劑的有關(guān)物質(zhì)的測定方法，所述方法采用高效液相色譜法進(jìn)行測定，本發(fā)明的有益效果在于：提供了一種耐用性好、操作簡便快捷、系統(tǒng)適用性高的利用高效液相色譜法可以有效控制多索茶堿注射液的有關(guān)物質(zhì)的方法，該方法采用至少含有茶堿、茶堿乙醇、茶堿乙醛在內(nèi)的三種對照品用于有關(guān)物質(zhì)的測定，同時本發(fā)明又提供了雜質(zhì)A”、雜質(zhì)B、雜質(zhì)C、雜質(zhì)D、雜質(zhì)E、雜質(zhì)G、雜質(zhì)咖啡因、三甲基黃嘌呤、雜質(zhì)C’、雜質(zhì)D’、雜質(zhì)E’、雜質(zhì)2和茶堿乙酸等用于多索茶堿有關(guān)物質(zhì)測定的雜質(zhì)對照品，可以控制由于不同合成路線、制劑制備過程和貯存過程帶來的有關(guān)物質(zhì)。本發(fā)明還提供了分離和合成包括雜質(zhì)A、雜質(zhì)A”、雜質(zhì)B、雜質(zhì)C、雜質(zhì)D、雜質(zhì)E、雜質(zhì)G等在內(nèi)用于多索茶堿注射液有關(guān)物質(zhì)測定的對照品的合成方法。
【專利說明】多索茶堿注射液有關(guān)物質(zhì)測定方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于注射液的有關(guān)物質(zhì)測定領(lǐng)域，主要涉及一種多索茶堿注射劑的有關(guān)物質(zhì)的測定方法。
【背景技術(shù)】
[0002]多索茶堿注射液(10ml: 0.2g、IOml:0.lmg,20ml:0.3mg)是以多索茶堿為原料的小
容量注射液。作為直接給予人體靜脈給藥的劑型，由于其存在較高的不良反應(yīng)發(fā)生率等安全性問題，因此注射劑的安全性問題是廣大醫(yī)患人群和監(jiān)管部門非常重視的重大問題。在影響注射劑的安全性問題的因素中，有關(guān)物質(zhì)的確認(rèn)和控制是至關(guān)重要的，因此良好的有關(guān)物質(zhì)控制和檢測方法，能夠從根本上解決注射液的安全性問題。多索茶堿注射液的現(xiàn)有的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中，只有規(guī)格10ml:0.2g的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定了有關(guān)物質(zhì)檢測，且無單一雜質(zhì)的限度要求，只規(guī)定總雜不得過0.8%，更沒有雜質(zhì)對照品的參與。在本領(lǐng)域中，研究注射液的有關(guān)物質(zhì)時所用原料藥的有關(guān)物質(zhì)概況、制劑處方工藝、降解途徑研究結(jié)果等因素都會對有關(guān)物質(zhì)有影響，因此明確各有關(guān)物質(zhì)的結(jié)構(gòu)與溯源是比較困難的，現(xiàn)有技術(shù)的方法無法定性和定量多索茶堿注射液中的有關(guān)物質(zhì)，雖然多索茶堿注射液已經(jīng)上市多年，但是上述問題仍然沒有得到解決。
[0003]另外，多索茶堿的合成路線較多，因此不同生產(chǎn)路線、儲存條件和制劑工藝所帶來的有關(guān)物質(zhì)也不完全相同。因此，如何分離和確定不同合成路線的有關(guān)物質(zhì)，用理想的檢測方法來控制，一直是現(xiàn)有技術(shù)中存在的問題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明首先提供了一種耐用性好、操作簡便快捷的、系統(tǒng)適用性高的利用高效液相色譜法有效控制多索茶堿注射液的有關(guān)物質(zhì)的方法。本發(fā)明還提供了分離和合成用于多索茶堿注射液有關(guān)物質(zhì)測定的對照品的方法。
[0005]本發(fā)明的一種多索茶堿注射液有關(guān)物質(zhì)測定方法，所述方法采用高效液相色譜法(HPLC)進(jìn)行測定，所述方法是在如下色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗條件進(jìn)行，并包括如下步驟:
[0006]色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗條件:填充劑包括十八烷基硅烷鍵合硅膠；流動相包括乙腈、甲醇、磷酸鹽緩沖液中的一種或幾種；檢測波長240-295nm ;理論板數(shù)按多索茶堿峰計算不低于1000 ；
[0007]供試品溶液配制步驟:取所述多索茶堿用水稀釋，作為供試品溶液；
[0008]對照溶液配制步驟:取所述供試品溶液用水稀釋，作為對照溶液；
[0009]對照品配制步驟:取若干種對照品分別用水溶解并定量稀釋制成對照品溶液，作為對照品溶液，所述對照品至少包括茶堿、雜質(zhì)A、雜質(zhì)B，所述雜質(zhì)A為茶堿乙醇，所述雜質(zhì)B為茶堿乙醛；
[0010]檢測步驟:將所述對照品溶液、對照溶液、供試品溶液分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖；
[0011]判斷步驟:供試品溶液的色譜圖中與對照品保留時間相一致的色譜峰，按外標(biāo)法以峰面積計算，均不得過0.2% ;其他未知雜質(zhì)峰，其峰面積總和不得大于對照溶液主峰面積的0.4倍，雜質(zhì)總和不得過0.7%。
[0012]本發(fā)明優(yōu)選的用于多索茶堿注射液有關(guān)物質(zhì)測定的色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗條件為:用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以體積比為12:88的乙腈和磷酸鹽緩沖液，所述磷酸鹽緩沖液PH值為5.8 ;檢測波長為273nm ;理論板數(shù)按多索茶堿峰計算不低于2000。
[0013]采用上述的色譜條件與系統(tǒng)適用性方法，多索茶堿注射液有關(guān)物質(zhì)測定方法為:
[0014]取所述多索茶堿注射液，用水稀釋制成每Iml中含多索茶堿0.01-5mg的溶液，作為供試品溶液；精密量取0.5-5ml，置10-250ml量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，作為對照溶液；另取茶喊對照品、雜質(zhì)A對照品、雜質(zhì)B對照品、用水溶解并定量稀釋制成每Iml中含茶堿、雜質(zhì)A、雜質(zhì)B各0.1-5 μ g的溶液，作為對照品溶液；照含量測定項下的色譜條件，取對照品溶液進(jìn)樣1_50μ 1，各色譜峰之間的分離度均就符合要求，且連續(xù)進(jìn)樣6針，其相對標(biāo)準(zhǔn)偏差不得過2.0% ;另取對照溶液1-50 μ 1，注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測靈敏度，使主成分色譜峰的峰高約為滿量程的10-30% ;再精密量取供試品溶液1-50 μ 1，注入液相色譜儀，記錄色譜圖至主成分峰保留時間的2倍；供試品溶液的色譜圖中與茶堿對照品、雜質(zhì)A對照品、雜質(zhì)B對照品保留時間相一致的色譜峰，按外標(biāo)法以峰面積計算，均不得過0.1% ;其他未知雜質(zhì)峰，其峰面積總和不得大于對照溶液主峰面積的0.2倍，雜質(zhì)總和不得過0.5%。
[0015]進(jìn)一步優(yōu)選的多索茶堿注射液有關(guān)物質(zhì)測定方法，所述測定方法為:
[0016]取所述多索茶堿注射液，用水稀釋制成每Iml中基本上含多索茶堿1.0mg或1.2mg的溶液，作為供試品溶液；精密量取1ml，置200ml量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，作為對照溶液；另取氽喊對照品、雜質(zhì)A對照品、雜質(zhì)B對照品、用水溶解并定量稀釋制成每Iml中基本上含茶堿、雜質(zhì)A、雜質(zhì)B各0.5 μ g的溶液，作為對照品溶液；照含量測定項下的色譜條件，取對照品溶液進(jìn)樣10μ 1，各色譜峰之間的分離度均就符合要求，且連續(xù)進(jìn)樣6針，其相對標(biāo)準(zhǔn)偏差不得過2.0% ;另取對照溶液10 μ 1，注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測靈敏度，使主成分色譜峰的峰高約為滿量程的20% ;再精密量取供試品溶液10 μ 1，注入液相色譜儀，記錄色譜圖至主成分峰保留時間的2倍；供試品溶液的色譜圖中與茶堿對照品、雜質(zhì)A對照品、雜質(zhì)B對照品保留時間相一致的色譜峰，按外標(biāo)法以峰面積計算，均不得過0.1% ;其他未知雜質(zhì)峰，其峰面積總和不得大于對照溶液主峰面積的0.2倍(0.1%)，雜質(zhì)總和不得過(0.5%)ο
[0017]本發(fā)明的“基本上含”與本領(lǐng)域的“約含”的術(shù)語概念相同，一方面應(yīng)理解為溶液中含有相應(yīng)的溶質(zhì)的數(shù)量是以實際稱量數(shù)為準(zhǔn)的，并且該稱量數(shù)應(yīng)符合有效數(shù)字保留位數(shù)的要求，另一方面，由于測量工具精度范圍限制，必然存在測量誤差，因而不可能正好稱量或量取整數(shù)。比如，制備“用水稀釋制成每Iml中基本上含多索茶堿1.0mg的溶液”，制備Iml含有0.90mg-l.1Omg的多索茶堿都是可以的，而且符合本發(fā)明的檢測要求。
[0018]本發(fā)明的多索茶堿注射液有關(guān)物質(zhì)測定方法，所述對照品還包括雜質(zhì)A”、雜質(zhì)C、雜質(zhì)D、雜質(zhì)E和雜質(zhì)G中的一種或若干種，各雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)式如下:
[0019][0020]
【權(quán)利要求】
1.一種多索茶堿注射液有關(guān)物質(zhì)測定方法，所述方法采用高效液相色譜法進(jìn)行測定，其特征在于，所述方法是在如下色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗條件進(jìn)行，并包括如下步驟: 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗條件:填充劑包括十八烷基硅烷鍵合硅膠；流動相包括乙腈、甲醇、磷酸鹽緩沖液中的一種或幾種；檢測波長240-295nm ;理論板數(shù)按多索茶堿峰計算不低于1000 ； 供試品溶液配制步驟:取所述多索茶堿用水稀釋，作為供試品溶液； 對照溶液配制步驟:取所述供試品溶液用水稀釋，作為對照溶液； 對照品配制步驟:取若干種對照品分別用水溶解并定量稀釋制成對照品溶液，作為對照品溶液，所述對照品至少包括茶堿、雜質(zhì)A、雜質(zhì)B，所述雜質(zhì)A為茶堿乙醇，所述雜質(zhì)B為茶堿乙醛； 檢測步驟:將所述對照品溶液、對照溶液、供試品溶液分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖； 判斷步驟:供試品溶液的色譜圖中與對照品保留時間相一致的色譜峰，按外標(biāo)法以峰面積計算，均不得過0.2% ;其他未知雜質(zhì)峰，其峰面積總和不得大于對照溶液主峰面積的0.4倍，雜質(zhì)總和不得過0.7%。
2.如權(quán)利要求1所述的多索茶堿注射液有關(guān)物質(zhì)測定方法，其特征在于，所述色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗條件為:用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以體積比為12:88的乙腈和磷酸鹽緩沖液，所述磷酸鹽緩沖液PH值為5.8 ;檢測波長為273nm ;理論板數(shù)按多索茶堿峰計算不低于2000。
3.如權(quán)利要求2所述的多索茶堿注射液有關(guān)物質(zhì)測定方法，其特征在于，所述測定方法為: 取所述多索茶堿注射液，用水稀釋制成每Iml中含多索茶堿0.01-5mg的溶液，作為供試品溶液；精密量取0.5-5ml，置10-250ml量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，作為對照溶液；另取茶喊對照品、雜質(zhì)A對照品、雜質(zhì)B對照品、用水溶解并定量稀釋制成每Iml中含茶喊、雜質(zhì)A、雜質(zhì)B各0.1-5 μ g的溶液，作為對照品溶液；照含量測定項下的色譜條件，取對照品溶液進(jìn)樣1-50 μ 1，各色譜峰之間的分離度均就符合要求，且連續(xù)進(jìn)樣6針，其相對標(biāo)準(zhǔn)偏差不得過2.0% ;另取對照溶液1-50 μ 1，注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測靈敏度，使主成分色譜峰的峰高約為滿量程的10-30% ;再精密量取供試品溶液1-50 μ 1，注入液相色譜儀，記錄色譜圖至主成分峰保留時間的2倍；供試品溶液的色譜圖中與茶堿對照品、雜質(zhì)A對照品、雜質(zhì)B對照品保留時間相一致的色譜峰，按外標(biāo)法以峰面積計算，均不得過0.1% ;其他未知雜質(zhì)峰，其峰面積總和不得大于對照溶液主峰面積的0.2倍，雜質(zhì)總和不得過0.5%。
4.如權(quán)利要求3所述的多索茶堿注射液有關(guān)物質(zhì)測定方法，其特征在于，所述測定方法為: 取所述多索茶堿注射液，用水稀釋制成每Iml中基本上含多索茶堿1.0mg或1.2mg的溶液，作為供試品溶液；精密量取1ml，置200ml量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，作為對照溶液；另取茶喊對照品、雜質(zhì)A對照品、雜質(zhì)B對照品、用水溶解并定量稀釋制成每Iml中基本上含茶堿、雜質(zhì)A、雜質(zhì)B各0.5μ g的溶液，作為對照品溶液；照含量測定項下的色譜條件，取對照品溶液進(jìn)樣10μ 1，各色譜峰之間的分離度均就符合要求，且連續(xù)進(jìn)樣6針，其相對標(biāo)準(zhǔn)偏差不得過2.0% ;另取對照溶液10 μ 1，注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測靈敏度，使主成分色譜峰的峰高約為滿量程的20% ;再精密量取供試品溶液10 μ 1，注入液相色譜儀，記錄色譜圖至主成分峰保留時間的2倍；供試品溶液的色譜圖中與茶堿對照品、雜質(zhì)A對照品、雜質(zhì)B對照品保留時間相一致的色譜峰，按外標(biāo)法以峰面積計算，均不得過0.1% ;其他未知雜質(zhì)峰，其峰面積總和不得大于對照溶液主峰面積的0.2倍(0.1%)，雜質(zhì)總和不得過(0.5%)ο
5.如權(quán)利要求1所述的多索茶堿注射液有關(guān)物質(zhì)測定方法，其特征在于，所述對照品還包括雜質(zhì)Α”、雜質(zhì)C、雜質(zhì)D、雜質(zhì)E和雜質(zhì)G中的一種或若干種，各雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)式如下:
6.如權(quán)利要求1所述的多索茶堿注射液有關(guān)物質(zhì)測定方法，其特征在于，所述對照品還包括雜質(zhì)咖啡因、三甲基黃嘌呤、雜質(zhì)C’、雜質(zhì)D’、雜質(zhì)E’、雜質(zhì)2和茶堿乙酸中的一種或若干種: 部分雜質(zhì)的化學(xué)名如下: 雜質(zhì)C’:N-(6-氨基-1，3- 二甲基-2，4- 二氧代-1，2，3，4-四氫嘧啶_5_基)甲酰胺、 雜質(zhì)D’:N-甲基-5-(甲基氨基)-1H-咪唑-4-甲酰胺、 雜質(zhì) E’:1，3- 二甲基-7，9- 二氫-1H-嘌呤-2，6，8(3H)-三酮、 雜質(zhì)2:1，3- 二甲基-2，6-酮-7-乙醒-1, 2, 3, 6-四氫批P定。
7.一種可以用如權(quán)利要求1-5所述的任意方法測定有關(guān)物質(zhì)的多索茶堿注射液，其特征在于，制備所述多索茶堿注射液所用的多索茶堿按如下合成路線發(fā)生如下反應(yīng):
8.如權(quán)利要求7所述多索茶堿注射液的有關(guān)物質(zhì)，其特征在于，所述有關(guān)物質(zhì)包括雜質(zhì)A”、雜質(zhì)B、雜質(zhì)C、雜質(zhì)D、雜質(zhì)E、雜質(zhì)A、雜質(zhì)G、茶堿。
9.如權(quán)利要求8所述的有關(guān)物質(zhì)的合成方法，其特征在于，所述雜質(zhì)A”按如下合成路線發(fā)生如下反應(yīng):
10.如權(quán)利要求8所述的有關(guān)物質(zhì)的合成方法，其特征在于，所述雜質(zhì)B按如下合成路線發(fā)生如下反應(yīng):
11.如權(quán)利要求8所述的有關(guān)物質(zhì)的合成方法，其特征在于，所述雜質(zhì)C按如下合成路線發(fā)生如下反應(yīng):
12.如權(quán)利要求7所述的有關(guān)物質(zhì)的合成方法，其特征在于，所述雜質(zhì)D按如下合成路線發(fā)生如下反應(yīng):
13.如權(quán)利要求8所述的有關(guān)物質(zhì)的合成方法，其特征在于，所述雜質(zhì)E的合成方法為:
14.如權(quán)利要求8所述的有關(guān)物質(zhì)的合成方法，其特征在于，所述雜質(zhì)A按如下合成路線發(fā)生如下反應(yīng):
15.如權(quán)利要求8所述的有關(guān)物質(zhì)的合成方法，其特征在于，所述雜質(zhì)G按如下合成路線發(fā)生如下反應(yīng):
16.一種可以用如權(quán)利要求1-5所述的任意方法測定有關(guān)物質(zhì)的多索茶堿注射液，其特征在于，所述注射液中含有氯化鈉作為滲透壓調(diào)節(jié)劑。
【文檔編號】G01N30/02GK103837612SQ201310533945
【公開日】2014年6月4日 申請日期:2013年11月3日 優(yōu)先權(quán)日:2013年11月3日
【發(fā)明者】吳光彥 申請人:黑龍江福和華星制藥集團(tuán)股份有限公司