一種示差分光光度測定方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種示差分光光度測定方法，包括：（1）將試劑空白移入比色皿中，作為參比，于分光光度計選定波長處調(diào)透光率為100%，測得中性濾光片的吸光度值A(chǔ)，再以中性濾光片為參比調(diào)分光光度計的透光率為100%，依次分別將樣品和工作標(biāo)準(zhǔn)溶液的顯色溶液移入比色皿中，測得吸光度值B，A+B即為樣品和工作標(biāo)準(zhǔn)顯色溶液的最終吸光度值；（2）以工作標(biāo)準(zhǔn)溶液待測組分含量為橫坐標(biāo)，吸光度值（A+B）為縱標(biāo)繪制工作曲線；（3）根據(jù)樣品的最終吸光度值（A+B），在工作曲線上查得待測組分的含量；（4）按下式計算待測組分的含量，結(jié)果以百分數(shù)表示：。本發(fā)明使參比的準(zhǔn)確性不受操作者技能水平和玻璃量器精度的影響，提高了分析結(jié)果的準(zhǔn)確度。
【專利說明】一種不差分光光度測定方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于測試分析【技術(shù)領(lǐng)域】，涉及到一種示差分光光度法(又稱差示分光光度法)的分析檢測方法，特別是樣品中高含量待測組分的分光光度測定方法。
【背景技術(shù)】
[0002]分光光度法中，當(dāng)樣品中被測組分濃度過大時，采用濃度比樣品稍低的標(biāo)準(zhǔn)溶液代替空白來調(diào)節(jié)分光光度計的100%透光率，以提高分光光度法的精密度、準(zhǔn)確度，方法要求作為參比的標(biāo)準(zhǔn)溶液必須準(zhǔn)確可靠，才能保證分析結(jié)果的可靠性，而參比溶液的準(zhǔn)確性主要受到操作者技能水平和玻璃量器精度的影響，由于操作者的水平高低不同，玻璃量器也存在一定的正負偏差，這直接影響到示差分光光度法分析結(jié)果的準(zhǔn)確性，且這種方法應(yīng)用時每次必須同步進行參比標(biāo)準(zhǔn)溶液與樣品溶液的分析，也相應(yīng)增加了工作量和試劑用量。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]為解決上述問題，本發(fā)明提供一種有固定吸光度的濾光片作為參比，進行示差分光光度法測定待測組分的方法。
[0004]本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)的:
一種示差分光光度測定方法，其特征在于，所述測定方法包括:
(1)將試劑空白移入比色皿中，作為參比，于分光光度計選定波長處調(diào)透光率為100%，測得中性濾光片的吸光度值A(chǔ)，再以中性濾光片為參比調(diào)分光光度計的透光率為100%，依次分別將樣品和工作標(biāo)準(zhǔn)溶液的顯色溶液移入比色皿中，測得吸光度值B，A+B即為樣品和工作標(biāo)準(zhǔn)顯色溶液的最終吸光度值；
(2)以工作標(biāo)準(zhǔn)溶液待測組分含量為橫坐標(biāo)，吸光度值(A+B)為縱坐標(biāo)繪制工作曲線；
(3)根據(jù)樣品的最終吸光度值(A+B)，在工作曲線上查得待測組分的含量；
(4)分析結(jié)果的計算:
按下式計算待測組分的含量，結(jié)果以百分數(shù)表示:
式中m——由樣品吸光度值(A+B)在工作曲線上查得的待測組分含量，單位為mg;其中J為以試劑空白為參比，測得的選定中性濾光片的吸光度值;沒為以選定中性濾光片為參比，測得待測溶液的吸光度值A(chǔ)——分取溶液的體積，單位為mL -,V0——溶液的總體積，單位為mL.Jn0-試樣量,單位為g。
[0005]根據(jù)上述的示差分光光度測定方法，其特征在于，所述選定的中性濾光片的吸光度值為10%、20%或40%。
[0006]本發(fā)明的有益效果:本發(fā)明的方法，以具有固定吸光度值的濾光片作為參比，進行示差分光光度法的測定，使參比的準(zhǔn)確性不再受操作者技能水平和玻璃量器精度的影響，提高了分析結(jié)果的準(zhǔn)確度，簡化了操作流程，減少了試劑用量?！揪唧w實施方式】
[0007]—種新的示差分光光度測定方法，其特征是由于透光率不同的中性濾光片的吸光度值是相對穩(wěn)定不變的值，依據(jù)示差分光光度法中作為參比的標(biāo)準(zhǔn)溶液吸光度的大小，從透光率標(biāo)稱值不同的中性濾光片中選擇吸光度與之相接近的濾光片，代替該標(biāo)準(zhǔn)溶液作為參比，調(diào)節(jié)分光光度計的透光率為100% (即:吸光度為0.000)后，測定工作標(biāo)準(zhǔn)溶液和樣品溶液的吸光度值。
[0008]本發(fā)明所使用的儀器是分光光度計，該儀器對有一定吸光度的參比物質(zhì)，能夠調(diào)節(jié)其透光率為100%。
[0009]本發(fā)明所使用的參比物質(zhì)是透光率的標(biāo)稱值分別為10%、20%、40%的光譜中性濾光片。
[0010]本發(fā)明所需要的試劑:按待測組分示差分光光度法的方法要求，配制標(biāo)準(zhǔn)溶液和試劑，制備樣品溶液；再按待測組分示差分光光度法的方法要求，準(zhǔn)備試劑空白、樣品顯色溶液和工作標(biāo)準(zhǔn)顯色溶液。
[0011]測定:
I)將試劑空白移入比色皿中，作為參比，于分光光度計選定波長處調(diào)透光率為100%，測得中性濾光片的吸光度值A(chǔ)，再以中性濾光片為參比調(diào)分光光度計的透光率為100%，依次分別將樣品和工作標(biāo)準(zhǔn)溶液的顯色溶液移入比色皿中，測得吸光度值B，A+B即為樣品和工作標(biāo)準(zhǔn)顯色溶液的最終吸 光度值。
[0012]2)以工作標(biāo)準(zhǔn)溶液待測組分含量為橫坐標(biāo)，吸光度值A(chǔ)+B為縱坐標(biāo)繪制工作曲線。
[0013]3)根據(jù)樣品的最終吸光度值A(chǔ)+B，在工作曲線上查得待測組分的含量。
[0014]4)分析結(jié)果的計算
按下式計算待測組分的含量，結(jié)果以百分數(shù)表示:
【權(quán)利要求】
1.一種示差分光光度測定方法，其特征在于，所述測定方法包括: (1)將試劑空白移入比色皿中，作為參比，于分光光度計選定波長處調(diào)透光率為100%，測得中性濾光片的吸光度值A(chǔ)，再以中性濾光片為參比調(diào)分光光度計的透光率為100%，依次分別將樣品和工作標(biāo)準(zhǔn)溶液的顯色溶液移入比色皿中，測得吸光度值B，A+B即為樣品和工作標(biāo)準(zhǔn)顯色溶液的最終吸光度值； (2)以工作標(biāo)準(zhǔn)溶液待測組分含量為橫坐標(biāo)，吸光度值(A+B)為縱坐標(biāo)繪制工作曲線； (3)根據(jù)樣品的最終吸光度值(A+B)，在工作曲線上查得待測組分的含量； (4)分析結(jié)果的計算: 按下式計算待測組分的含量，結(jié)果以百分數(shù)表示
2.根據(jù)權(quán)利要求所述的示差分光光度測定方法，其特征在于，所述選定的中性濾光片的吸光度值為10%、20%或40%。
【文檔編號】G01N21/31GK103743682SQ201310680325
【公開日】2014年4月23日 申請日期:2013年12月13日 優(yōu)先權(quán)日:2013年12月13日
【發(fā)明者】喻生潔, 文占杰, 朱國忠, 呂慶成, 曾玲玲, 樊新愛, 潘梅榮 申請人:金川集團股份有限公司