采用近紅外光譜快速測定麥冬中多指標(biāo)性成分含量的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種麥冬中多指標(biāo)性成分含量的測定方法，本發(fā)明采用近紅外光譜儀掃描，采集原始近紅外光譜數(shù)據(jù)，采用TQAnalyst光譜分析軟件，對原始近紅外光譜數(shù)據(jù)進(jìn)行預(yù)處理，得出麥冬的指標(biāo)性成分的含測的近紅外光譜數(shù)據(jù)；并采用分光光度法測定校正集中麥冬的指標(biāo)性成分的含量，然后與校正樣品集中麥冬的指標(biāo)性成分含測的特征光譜信息相結(jié)合，采用偏最小二乘法分別建立麥冬的指標(biāo)性成分含測的校正模型，再將驗證樣品集特征光譜代入校正模型中，得NIR預(yù)測值，與用傳統(tǒng)方法測定的驗證樣品集成分的含量對照，對校正模型驗證，建立麥冬多指標(biāo)性成分定量模型，本發(fā)明具有分析時間短、速度快、分析結(jié)果準(zhǔn)確等優(yōu)點，具有重要的意義。
【專利說明】采用近紅外光譜快速測定麥冬中多指標(biāo)性成分含量的方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種麥冬的質(zhì)量檢測方法，具體涉及一種采用近紅外光譜快速測定麥 冬中多指標(biāo)性成分含量的方法。

【背景技術(shù)】
[0002] 麥冬為百合科沿階草屬植物麥冬[Ophiopogon japonicus (Thunb. )Ker_Gawl]的 干燥塊根，為常用滋陰中藥，首載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，具有養(yǎng)陰生津、潤肺清心之功效，主治肺 燥干咳、津傷口渴等癥。其主要成分為留體皂甙、多糖、高異黃酮、氨基酸及脂等，其中麥冬 皂苷、黃酮和多糖為麥冬的主要藥用活性成分，具有抗心肌缺血、抗缺氧、免疫活性、降低血 糖、平喘和抗過敏等藥理作用。目前國內(nèi)流通的商品大多為栽培品種，主產(chǎn)于四川綿陽和浙 江慈溪，分別稱為川麥冬和杭麥冬，另外產(chǎn)于湖北襄陽的湖北麥冬產(chǎn)銷量也很大，在福建也 有少量短葶山麥冬分布。不同品質(zhì)的麥冬品種在外觀上差別細(xì)微，而其內(nèi)在質(zhì)量卻往往差 異比較明顯，其活性成分隨著產(chǎn)地、氣候、栽培條件、采收時期不同往往會有較大的差異。
[0003] 目前，麥冬總皂苷、總黃酮、總多糖的測定往往采用紫外-可見分光光度計比色法 測定，其分析過程十分繁瑣，樣品要經(jīng)過一系列的提取、萃取、離心等的前處理，費時費力， 同時樣品前處理過程往往會導(dǎo)致所分析指標(biāo)成分的損失，使得最終結(jié)果的精確性受到影 響，測試過的樣品也因為化學(xué)污染無法繼續(xù)使用。為了在生產(chǎn)和研究過程中進(jìn)行快速實時 分析，研究中藥有效成分含量快速測定的方法對提升中藥等天然藥物質(zhì)量控制水平具有很 重要的意義。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 發(fā)明目的：本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)中檢測麥冬活性成分的不足，提供一 種采用近紅外光譜技術(shù)快速同時測定麥冬中總皂苷、總黃酮、總多糖含量的方法，本發(fā)明提 供的方法，可有效解決傳統(tǒng)中藥定量分析方法的繁瑣、生產(chǎn)成本高、效率低、原料浪費過多， 化學(xué)污染嚴(yán)重的問題。
[0005] 技術(shù)方案：為了實現(xiàn)以上目的，本發(fā)明所采取的技術(shù)方案為：
[0006] -種采用近紅外光譜快速測定麥冬中多指標(biāo)性成分含量的方法，包括：（1)采用 近紅外光譜快速測定麥冬中總皂苷含量的方法；(2)采用近紅外光譜快速測定麥冬中總黃 酮含量的方法；(3)采用近紅外光譜快速測定麥冬中總多糖含量的方法。
[0007] 采用近紅外光譜快速測定麥冬中總皂苷含量的方法，包括以下步驟：
[0008] (1)校正模型的建立：
[0009] 收集具有代表性的麥冬樣品90?100份，選擇40?70份的麥冬樣品處理后作為 校正樣品集，余下的作為驗證樣品集，將校正樣品集中的麥冬樣品分別采用近紅外光譜儀 進(jìn)行掃描，采集校正樣品集原始近紅外光譜數(shù)據(jù)，然后采用TQ Analyst光譜分析軟件，對 校正樣品集原始近紅外光譜數(shù)據(jù)進(jìn)行預(yù)處理，并對近紅外光譜掃描波段進(jìn)行選擇，得出校 正樣品集中麥冬總皂苷含測的近紅外光譜數(shù)據(jù)；然后采用紫外可見分光光度法測定校正集 中麥冬的總皂苷含量，將紫外可見分光光度法測得的麥冬總皂苷含量數(shù)據(jù)與校正樣品集中 麥冬總皂苷含測的特征光譜信息相結(jié)合，采用偏最小二乘法建立麥冬總皂苷含測的校正模 型；
[0010] ⑵校正模型的驗證與優(yōu)化：
[0011] 將驗證樣品集中的樣品經(jīng)過處理后分別通過近紅外光譜儀掃描，得到驗證樣品集 原始光譜數(shù)據(jù)，采用與校正樣品集相同的方法進(jìn)行預(yù)處理和波段選擇后，輸入校正模型中， 得出驗證樣品集NIR預(yù)測值，并與紫外可見分光光度法測定的驗證樣品集中麥冬總皂苷的 含量對照，根據(jù)模型的相關(guān)系數(shù)R、校正誤差均方根、預(yù)測誤差均方根指標(biāo)對校正模型進(jìn)行 優(yōu)化驗證，得到最佳校正模型；
[0012] (3)待測麥冬樣品中總皂苷的含量測定：
[0013] 將待測的麥冬樣品處理后，采用近紅外光譜儀進(jìn)行掃描，采集得到待測麥冬樣品 的近紅外圖譜數(shù)據(jù)，然后采用TQ Analyst光譜分析軟件，對待測麥冬樣品的近紅外圖譜數(shù) 據(jù)進(jìn)行預(yù)處理，并對近紅外光譜掃描波段進(jìn)行選擇，然后將預(yù)處理數(shù)據(jù)代入到步驟（2)得 到的麥冬總皂苷含測的校正模型中，即得到該麥冬樣品的總皂苷的含量值。
[0014] 作為優(yōu)選方案，以上所述的采用近紅外光譜快速測定麥冬中總皂苷含量的方法， 步驟（1)、步驟（2)和步驟（3)所述的麥冬處理方法為：取麥冬低溫冷凍保存48?72h后 粉碎得粗粉，于50?60°C干燥24?48h后繼續(xù)粉碎成細(xì)粉，過80目藥篩。
[0015] 作為優(yōu)選方案，以上所述的采用近紅外光譜快速測定麥冬中總皂苷含量的方法， 步驟（1)、步驟（2)和步驟（3)采集麥冬的近紅外光譜數(shù)據(jù)方法為：取麥冬藥材細(xì)粉放 入石英杯中，混合均勻，以空氣為參比，扣除背景采集光譜圖，采用積分球漫反射，在分辨 率McnT 1，掃描次數(shù)：128次，波數(shù)范圍：4000?lOOOOcnT1，增益2x的條件下掃描得到。
[0016] 作為優(yōu)選方案，以上所述的采用近紅外光譜快速測定麥冬中總皂苷含量的方 法，步驟（1)、步驟（2)和步驟（3)所述的近紅外圖譜數(shù)據(jù)預(yù)處理方法為：采用多元散射 校正MSC+SG平滑的光譜預(yù)處理方法對近紅外圖譜數(shù)據(jù)進(jìn)行預(yù)處理，波段選擇是5600? 6900cm ^
[0017] 作為優(yōu)選方案，以上所述的采用近紅外光譜快速測定麥冬中總皂苷含量的方法， 步驟（1)和步驟（2)中采用紫外可見分光光度法測定校正集和驗證集中麥冬總皂苷含量的 方法如下：
[0018] ①麥冬中總皂苷的提取
[0019] 取麥冬藥材粉末約250mg，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇30ml，稱定 重量，超聲提取lh，放冷，用甲醇補(bǔ)足失重，離心，精密吸取上清液15ml，回收溶劑至干，殘 渣加水10ml使溶解，用水飽和的正丁醇萃取3次，每次5ml，合并正丁醇萃取液，蒸干溶劑， 殘渣用80%體積甲醇溶解，轉(zhuǎn)移至20ml量瓶中，加80%體積甲醇至刻度，搖勻，作為麥冬總 皂苷供試液；
[0020] ②標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備
[0021] 精密稱取魯斯可皂苷元對照品5. Omg，置50ml容量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻 度，搖勻，即得濃度為l〇〇ug/ml的魯斯可皂苷元對照品溶液；
[0022] ③標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制
[0023] 分別精密吸取②所述的魯斯可皂苷元對照品溶液0. 5、1. 0、1. 5、2. 0、2. 5、3. 0ml， 分別置具塞錐形瓶中，水浴揮去甲醇，加入高氯酸l〇ml，搖勻，70°C保溫15min，冷卻至室 溫，以高氯酸為空白對照，在最大吸收波長397nm處測定吸光度A，以吸光度A對濃度C 回歸，計算得標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為：C = 417. 59A-12. 148, R2 = 0.9993,魯斯可皂苷元在 50. 4?302. 4ug范圍內(nèi)線性良好；
[0024] ④麥冬中總皂苷含量的測定
[0025] ?、冫湺傇碥展┰囈簂ml，按③所述方法比色測定吸光度，并計算麥冬中總皂苷 百分含量，計算公式如下：

【權(quán)利要求】
1. 一種采用近紅外光譜快速測定麥冬中多指標(biāo)性成分含量的方法，其特征在于，包括： (1)采用近紅外光譜快速測定麥冬中總皂苷含量的方法；（2)采用近紅外光譜快速測定麥 冬中總黃酮含量的方法；(3)采用近紅外光譜快速測定麥冬中總多糖含量的方法。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的采用近紅外光譜快速測定麥冬中總皂苷含量的方法，其特征 在于，包括以下步驟： (1) 校正模型的建立： 收集具有代表性的麥冬樣品90?100份，選擇40?70份的麥冬樣品處理后作為校正 樣品集，余下的作為驗證樣品集，將校正樣品集中的麥冬樣品分別采用近紅外光譜儀進(jìn)行 掃描，采集校正樣品集原始近紅外光譜數(shù)據(jù)，然后采用TQ Analyst光譜分析軟件，對校正樣 品集原始近紅外光譜數(shù)據(jù)進(jìn)行預(yù)處理，并對近紅外光譜掃描波段進(jìn)行選擇，得出校正樣品 集中麥冬總皂苷含測的近紅外光譜數(shù)據(jù)；然后采用紫外可見分光光度法測定校正集中麥冬 的總皂苷含量，將紫外可見分光光度法測得的麥冬總皂苷含量數(shù)據(jù)與校正樣品集中麥冬總 皂苷含測的特征光譜信息相結(jié)合，采用偏最小二乘法建立麥冬總皂苷含測的校正模型； (2) 校正模型的驗證與優(yōu)化： 將驗證樣品集中的樣品經(jīng)過處理后分別通過近紅外光譜儀掃描，得到驗證樣品集原始 光譜數(shù)據(jù)，采用與校正樣品集相同的方法進(jìn)行預(yù)處理和波段選擇后，輸入校正模型中，得出 驗證樣品集NIR預(yù)測值，并與紫外可見分光光度法測定的驗證樣品集中麥冬總皂苷的含量 對照，根據(jù)模型的相關(guān)系數(shù)R、校正誤差均方根、預(yù)測誤差均方根指標(biāo)對校正模型進(jìn)行優(yōu)化 驗證，得到最佳校正模型； (3) 待測麥冬樣品中總皂苷的含量測定： 將待測的麥冬樣品處理后，采用近紅外光譜儀進(jìn)行掃描，采集得到待測麥冬樣品的近 紅外圖譜數(shù)據(jù)，然后采用TQ Analyst光譜分析軟件，對待測麥冬樣品的近紅外圖譜數(shù)據(jù)進(jìn) 行預(yù)處理，并對近紅外光譜掃描波段進(jìn)行選擇，然后將預(yù)處理數(shù)據(jù)代入到步驟（2)得到的 麥冬總皂苷含測的校正模型中，即得到該麥冬樣品的總皂苷的含量值。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的采用近紅外光譜快速測定麥冬中總皂苷含量的方法，其特征 在于，步驟（1)、步驟（2)和步驟（3)所述的麥冬處理方法為：取麥冬低溫冷凍保存48?72h 后粉碎得粗粉，于50?60°C干燥24?48h后繼續(xù)粉碎成細(xì)粉，過80目藥篩。
4. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的采用近紅外光譜快速測定麥冬中總皂苷含量的方法，其特征 在于，步驟（1)、步驟（2)和步驟（3)采集麥冬的近紅外光譜數(shù)據(jù)方法為：取麥冬藥材細(xì)粉 放入石英杯中，混合均勻，以空氣為參比，扣除背景采集光譜圖，采用積分球漫反射，在分辨 率McnT 1，掃描次數(shù)：128次，波數(shù)范圍：4000?lOOOOcnT1，增益2x的條件下掃描得到。
5. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的采用近紅外光譜快速測定麥冬中總皂苷含量的方法，其特征 在于，麥冬總皂苷近紅外圖譜數(shù)據(jù)預(yù)處理方法為：采用多元散射校正MSC+SG平滑的光譜預(yù) 處理方法對近紅外圖譜數(shù)據(jù)進(jìn)行預(yù)處理，波段選擇是5600?6900CHT 1。
6. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的采用近紅外光譜快速測定麥冬中總皂苷含量的方法，其特征 在于，步驟（1)和步驟（2)中采用紫外可見分光光度法測定校正集和驗證集中麥冬的總皂 苷含量的方法如下： ①麥冬中總皂苷的提取 取麥冬藥材粉末約250mg，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇30ml，稱定重量， 超聲提取lh，放冷，用甲醇補(bǔ)足失重，離心，精密吸取上清液15ml，回收溶劑至干，殘渣加水 l〇ml使溶解，用水飽和的正丁醇萃取3次，每次5ml，合并正丁醇萃取液，蒸干溶劑，殘渣用 80%體積甲醇溶解，轉(zhuǎn)移至20ml量瓶中，加80%體積甲醇至刻度，搖勻，作為麥冬總皂苷供 試液； ② 標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備 精密稱取魯斯可皂苷元對照品5. Omg，置50ml容量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，搖 勻，即得濃度為l〇〇ug/ml的魯斯可皂苷元對照品溶液； ③ 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制 分別精密吸取②所述的魯斯可皂苷元對照品溶液〇. 5、1. 0、1. 5、2. 0、2. 5、3. 0ml，分別 置具塞錐形瓶中，水浴揮去甲醇，加入高氯酸l〇ml，搖勻，70°C保溫15min，冷卻至室溫，以 高氯酸為空白對照，在最大吸收波長397nm處測定吸光度A，以吸光度A對濃度C回歸，計 算得標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為：C = 417. 59A-12. 148,，R2 = 0.9993,魯斯可皂苷元在50. 4? 302. 4ug范圍內(nèi)線性良好； ④ 麥冬中總皂苷含量的測定 取①麥冬總皂苷供試液lml，按③所述方法比色測定吸光度，并計算麥冬中總皂苷百分 含量，計算公式如下：
其中P為麥冬中總皂苷的百分含量，A為樣品供試液測得的吸光度，W為樣品稱樣量。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的采用近紅外光譜快速測定麥冬中總黃酮含量的方法，其特征 在于，包括以下步驟： (1) 校正模型的建立： 收集具有代表性的麥冬樣品90?100份，選擇40?70份的麥冬樣品處理后作為校正 樣品集，余下的作為驗證樣品集，將校正樣品集中的麥冬樣品分別采用近紅外光譜儀進(jìn)行 掃描，采集校正樣品集原始近紅外光譜數(shù)據(jù)，然后采用TQ Analyst光譜分析軟件，對校正樣 品集原始近紅外光譜數(shù)據(jù)進(jìn)行預(yù)處理，并對近紅外光譜掃描波段進(jìn)行選擇，得出校正樣品 集中麥冬總黃酮含測的近紅外光譜數(shù)據(jù)；然后采用紫外可見分光光度法測定校正集中麥冬 的總黃酮含量，將紫外可見分光光度法測得的麥冬總黃酮含量數(shù)據(jù)與校正樣品集中麥冬總 黃酮含測的特征光譜信息相結(jié)合，采用偏最小二乘法建立麥冬總黃酮含測的校正模型； (2) 校正模型的驗證與優(yōu)化： 將驗證樣品集中的樣品經(jīng)過處理后分別通過近紅外光譜儀掃描，得到驗證樣品集原始 光譜數(shù)據(jù)，采用與校正樣品集相同的方法進(jìn)行預(yù)處理和波段選擇后，輸入校正模型中，得出 驗證樣品集NIR預(yù)測值，并與紫外可見分光光度法測定的驗證樣品集中麥冬總黃酮的含量 對照，根據(jù)模型的相關(guān)系數(shù)R、校正誤差均方根、預(yù)測誤差均方根指標(biāo)對校正模型進(jìn)行優(yōu)化 驗證，得到最佳校正模型； (3) 待測麥冬樣品中總黃酮的含量測定： 將待測的麥冬樣品處理后，采用近紅外光譜儀進(jìn)行掃描，采集得到待測麥冬樣品的近 紅外圖譜數(shù)據(jù)，然后采用TQ Analyst光譜分析軟件，對待測麥冬樣品的近紅外圖譜數(shù)據(jù)進(jìn) 行預(yù)處理，并對近紅外光譜掃描波段進(jìn)行選擇，然后將預(yù)處理數(shù)據(jù)代入到步驟（2)得到的 麥冬總黃酮含測的校正模型中，即得到該麥冬樣品的總黃酮的含量值。
8. 根據(jù)權(quán)利要求7所述的采用近紅外光譜快速測定麥冬中總黃酮含量的方法，其特征 在于，步驟（1)、步驟（2)和步驟（3)所述的麥冬處理方法為：取麥冬低溫冷凍保存48?72h 后粉碎得粗粉，于50?60°C干燥24?48h后繼續(xù)粉碎成細(xì)粉，過80目藥篩。
9. 根據(jù)權(quán)利要求7所述的采用近紅外光譜快速測定麥冬中總黃酮含量的方法，其特征 在于，步驟（1)、步驟（2)和步驟（3)采集麥冬的近紅外光譜數(shù)據(jù)方法為：取麥冬藥材細(xì)粉 放入石英杯中，混合均勻，以空氣為參比，扣除背景采集光譜圖，采用積分球漫反射，在分辨 率McnT 1，掃描次數(shù)：128次，波數(shù)范圍：4000?lOOOOcnT1，增益2x的條件下掃描得到。
10. 根據(jù)權(quán)利要求7所述的采用近紅外光譜快速測定麥冬中總黃酮含量的方法，其特 征在于，麥冬總黃酮近紅外圖譜數(shù)據(jù)預(yù)處理方法為：采用多元散射校正MSC+二階導(dǎo)數(shù)+ND 平滑的光譜預(yù)處理方法對近紅外圖譜數(shù)據(jù)進(jìn)行預(yù)處理，波段選擇是4600?7500CHT1。
11. 根據(jù)權(quán)利要求7所述的采用近紅外光譜快速測定麥冬中總黃酮含量的方法，其特 征在于，步驟（1)和步驟（2)中采用紫外可見分光光度法測定校正集和驗證集中麥冬的總 黃酮含量的方法如下： ① 麥冬中總黃酮的提取 取麥冬粉末約500mg，精密稱定，加入10ml石油醚超聲脫脂15?30min，4000? 6000rpm離心15?30min，棄去石油醚液，藥漁揮去石油醚，加入20ml體積濃度70%乙醇， 稱定重量，超聲提取1?2h，冷卻后用70 %體積濃度乙醇補(bǔ)足失重，提取液4000rpm離心 15?30min，棄去沉淀，取上清液作為麥冬總黃酮供試液； ② 標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備 精密稱取蘆丁對照品約4. 99mg，置100ml量瓶中，用70%體積濃度乙醇稀釋至刻度，搖 勻，得到濃度為49. 9ug/ml蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液； ③ 顯色試劑的配置 0. lmol/L三氯化鋁溶液：精密稱取無水A1C131. 34g，置100ml量瓶中，加無水乙醇溶解 并定容； lmol/L醋酸鈉溶液：精密稱取醋酸鈉8. 21g，置100ml量瓶中，加蒸餾水溶解并定容； ④ 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制 分別精確吸取49. 9ug/ml的蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液1. 00、2. 00、4. 00、6. 00、8. 00、10. 00ml分別 置于20ml的容量瓶中，各加入0· lmol/LAlCl3溶液4ml、lmol/L醋酸鈉溶液6ml，加70% 乙醇稀釋至刻度，搖勻，室溫放置30min，以相應(yīng)試劑為空白，于最大吸收波長420nm處測定 吸收值A(chǔ)，以吸光度A對濃度C回歸，計算標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為C = 596. 84A-10. 591，R2 = 0. 9998,蘆丁在49. 9?499ug范圍內(nèi)線性良好； ⑤ 麥冬中總黃酮含量的測定 ?、俚玫降柠湺傸S酮供試液l〇ml，按上述④所述的方法顯色并測定吸光度，并計算 麥冬中總黃酮百分含量，計算公式如下：
其中P為麥冬中總黃酮的百分含量，A為樣品供試液測得的吸光度，W為樣品稱樣量。
12.根據(jù)權(quán)利要求1所述的采用近紅外光譜快速測定麥冬中總多糖含量的方法，其特 征在于，包括以下步驟： (1) 校正模型的建立： 收集具有代表性的麥冬樣品90?100份，選擇40?70份的麥冬樣品處理后作為校正 樣品集，余下的作為驗證樣品集，將校正樣品集中的麥冬樣品分別采用近紅外光譜儀進(jìn)行 掃描，采集校正樣品集原始近紅外光譜數(shù)據(jù)，然后采用TQ Analyst光譜分析軟件，對校正樣 品集原始近紅外光譜數(shù)據(jù)進(jìn)行預(yù)處理，并對近紅外光譜掃描波段進(jìn)行選擇，得出校正樣品 集中麥冬總多糖含測的近紅外光譜數(shù)據(jù)；然后采用紫外可見分光光度法測定校正集中麥冬 的總多糖含量，將紫外可見分光光度法測得的麥冬總多糖含量數(shù)據(jù)與校正樣品集中麥冬總 多糖含測的特征光譜信息相結(jié)合，采用偏最小二乘法建立麥冬總多糖含測的校正模型； (2) 校正模型的驗證與優(yōu)化： 將驗證樣品集中的樣品經(jīng)過處理后分別通過近紅外光譜儀掃描，得到驗證樣品集原始 光譜數(shù)據(jù)，采用與校正樣品集相同的方法進(jìn)行預(yù)處理和波段選擇后，輸入校正模型中，得出 驗證樣品集NIR預(yù)測值，并與紫外可見分光光度法測定的驗證樣品集中麥冬總多糖的含量 對照，根據(jù)模型的相關(guān)系數(shù)R、校正誤差均方根、預(yù)測誤差均方根指標(biāo)對校正模型進(jìn)行優(yōu)化 驗證，得到最佳校正模型； (3) 待測麥冬樣品中總多糖的含量測定： 將待測的麥冬樣品處理后，采用近紅外光譜儀進(jìn)行掃描，采集得到待測麥冬樣品的近 紅外圖譜數(shù)據(jù)，然后采用TQ Analyst光譜分析軟件，對待測麥冬樣品的近紅外圖譜數(shù)據(jù)進(jìn) 行預(yù)處理，并對近紅外光譜掃描波段進(jìn)行選擇，然后將預(yù)處理數(shù)據(jù)代入到步驟（2)得到的 麥冬總多糖含測的校正模型中，即得到該麥冬樣品的總多糖的含量值。
13. 根據(jù)權(quán)利要求12所述的采用近紅外光譜快速測定麥冬中總多糖含量的方法，其特 征在于，步驟（1)、步驟（2)和步驟（3)所述的麥冬處理方法為：取麥冬低溫冷凍保存48? 72h后粉碎得粗粉，于50?60°C干燥24?48h后繼續(xù)粉碎成細(xì)粉，過80目藥篩。
14. 根據(jù)權(quán)利要求12所述的采用近紅外光譜快速測定麥冬中總多糖含量的方法，其特 征在于，步驟（1)、步驟（2)和步驟（3)采集麥冬的近紅外光譜數(shù)據(jù)方法為：取麥冬藥材細(xì) 粉放入石英杯中，混合均勻，以空氣為參比，扣除背景采集光譜圖，采用積分球漫反射，在分 辨率McnT 1，掃描次數(shù)：128次，波數(shù)范圍：4000?lOOOOcnT1，增益2x的條件下掃描得到。
15. 根據(jù)權(quán)利要求12所述的采用近紅外光譜快速測定麥冬中總多糖含量的方法，其特 征在于，麥冬總多糖近紅外圖譜數(shù)據(jù)預(yù)處理方法為：采用標(biāo)準(zhǔn)正態(tài)變量轉(zhuǎn)換SNV+ -階導(dǎo)數(shù) 的光譜預(yù)處理方法對近紅外圖譜數(shù)據(jù)進(jìn)行預(yù)處理，波段選擇是4800?7000CHT1。
16. 根據(jù)權(quán)利要求12所述的采用近紅外光譜快速測定麥冬中總多糖含量的方法，其特 征在于，步驟（1)和步驟（2)中采用紫外可見分光光度法測定校正集和驗證集中麥冬的總 多糖含量的方法如下： ①麥冬中多糖的提取 取麥冬藥材粉末約200mg，精密稱定，加入10?30ml石油醚超聲脫脂15?30min， 4000?6000rpm離心15?30min，棄去上清液，沉淀加10ml80 %乙醇超聲15?30min， 4000?6000rpm離心15?30min，棄去上清液，沉淀加20ml蒸饋水，稱定重量，超聲提取 40?60min，放冷，加蒸饋水補(bǔ)足失重，4000?6000rpm離心15?30min，精密吸取lml上 清液，置25ml容量瓶中，用蒸餾水稀釋至刻度，作為麥冬多糖供試液； ② 標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備 精密稱取P2〇5干燥過夜的無水D-葡萄糖約25. 07mg，置50ml容量瓶中，加蒸餾水溶解， 并稀釋至刻度，得到濃度為501. 4ug/ml葡萄糖對照品母液； 然后分別精密吸取1. 〇、2. 0、3. 0、4. 0、6. 0、8. 0葡萄糖對照品母液至25ml容量瓶中，力口 蒸餾水稀釋至刻度，搖勻，得到一系列濃度梯度的葡萄糖對照品溶液； ③ 5 %苯酚溶液配制 稱取苯酚50. 0g，加錯片0. lg和碳酸氫鈉0. 05g，蒸饋，取178°C饋分時的苯酚5g，加水 100ml溶解，配制成質(zhì)量濃度為5 %苯酚溶液，棕色瓶避光保存； ④ 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制 分別精密吸取不同濃度的葡萄糖對照品溶液lml至具塞錐形瓶中，分別加入5%苯酚 溶液2ml，搖勻后，分別迅速加入濃硫酸10ml，混勻2min后室溫下放置30min，以相應(yīng)試劑作 為空白對照，在波長488nm處分別測定吸光度A，以吸光度A對濃度C回歸，計算標(biāo)準(zhǔn)曲線回 歸方程為 C = 162. 24A-3. 7706，R2 = 0· 9981，D-葡萄糖在 20. 056 ?160. 448ug/ml 范圍內(nèi) 線性良好； ⑤ 麥冬中多糖含量的測定 精密吸?、俚玫降柠湺嗵枪┰囈簂ml，按上述④方法比色測定吸光度，并計算麥冬中 總多糖百分含量，計算公式如下：
其中P為麥冬中總多糖的百分含量，A為樣品供試液測得的吸光度，W為樣品稱樣量。
【文檔編號】G01N1/28GK104048941SQ201410290572
【公開日】2014年9月17日 申請日期:2014年6月25日 優(yōu)先權(quán)日:2014年6月25日
【發(fā)明者】王歡, 顧治平, 王恒斌, 陳力建 申請人:常熟雷允上制藥有限公司