利用子宮骨片鑒定雌性野亞麻蠅的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種利用子宮骨片鑒定雌性野亞麻蠅的方法。雌性野亞麻蠅的子宮骨片的形狀如下：形似不規(guī)則的花瓶的平面，上窄下寬，從窄的一端至寬的一端，兩側(cè)的弧線先往內(nèi)延伸，形成頸的結(jié)構(gòu)；再往外延伸，最后往內(nèi)收，形成肚的結(jié)構(gòu)。本發(fā)明通過(guò)解剖待檢標(biāo)本，獲得子宮骨片；將待檢標(biāo)本的子宮骨片與雌性野亞麻蠅的子宮骨片對(duì)比，形狀基本相同，即表示待檢標(biāo)本為雌性野亞麻蠅；形狀不同，即表示待檢標(biāo)本不是雌性野亞麻蠅。本發(fā)明發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，子宮骨片具有種的特異性，能用于鑒定待檢標(biāo)本是否為雌性野亞麻蠅。利用子宮骨片鑒定雌性野亞麻蠅的方法簡(jiǎn)單，用時(shí)短，且準(zhǔn)確性高。該方法特別適合在法醫(yī)鑒定領(lǐng)域和/或檢驗(yàn)檢疫領(lǐng)域中進(jìn)行應(yīng)用。
【專利說(shuō)明】利用子宮骨片鑒定雌性野亞麻蠅的方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于昆蟲鑒定領(lǐng)域，特別涉及一種利用子宮骨片鑒定雌性野亞麻蠅的方法。

【背景技術(shù)】
[0002]麻蠅種類繁多，分布全世界，全世界已知種大概有2500種，可以攜帶多種病原體，是重要的媒介生物之一。
[0003]麻蠅的準(zhǔn)確種類鑒定對(duì)進(jìn)一步采取適合的防疫措施，防止疾病的傳播有非常重要的意義。由于有些麻蠅是食尸性的，因此還是重要的法醫(yī)昆蟲，可以根據(jù)尸體上麻蠅的發(fā)育狀態(tài)，推斷死亡時(shí)間和是否是第一作案現(xiàn)場(chǎng)。但現(xiàn)在國(guó)際上通用的麻蠅種類鑒定是根據(jù)雄性麻蠅的尾器的形態(tài)進(jìn)行鑒定的，不同種類的雌性麻蠅由于外部形態(tài)差別很小，且具有趨同性，因此很難根據(jù)外部形態(tài)，鑒定雌性麻蠅的種類。但在自然界中，往往雌性麻蠅多于雄性麻蠅，雌性麻蠅產(chǎn)卵，孵化成幼蟲即-蛆，從這種意義上，雌性麻蠅的種類鑒定更為重要，因此急需一種有效的雌性麻蠅種類的鑒定方法。
[0004]野亞麻蜆(Parasacrophaga similis)是一種常見(jiàn)的、重要的的醫(yī)學(xué)媒介生物,在中國(guó)大部分地區(qū)也有分布，常滋生于人糞和動(dòng)物尸體上，攜帶和傳播多種致病微生物，是重要的檢疫對(duì)象。但在檢疫過(guò)程中截獲的標(biāo)本往往是雌蟲，通常無(wú)法得到準(zhǔn)確的鑒定。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的缺點(diǎn)與不足，提供一種利用子宮骨片鑒定雌性野亞麻蠅的方法。
[0006]本發(fā)明的目的通過(guò)下述技術(shù)方案實(shí)現(xiàn):一種利用子宮骨片鑒定雌性野亞麻蠅的方法，包括如下步驟:
[0007](I)解剖待檢標(biāo)本，獲得子宮骨片；
[0008](2)將待檢標(biāo)本的子宮骨片與雌性野亞麻蠅的子宮骨片比較；
[0009](3)待檢標(biāo)本的子宮骨片與雌性野亞麻蠅的子宮骨片形狀基本相同，即表示待檢標(biāo)本為雌性野亞麻蠅；待檢標(biāo)本的子宮骨片與雌性野亞麻蠅的子宮骨片形狀不同，即表示待檢標(biāo)本不是雌性野亞麻蠅。
[0010]所述的雌性野亞麻蠅的子宮骨片的形狀如圖1所示，具體描述如下:形似不規(guī)則的花瓶的平面，上窄下寬，從窄的一端至寬的一端，兩側(cè)的弧線先往內(nèi)延伸，形成頸的結(jié)構(gòu)；再往外延伸，最后往內(nèi)收，形成肚的結(jié)構(gòu)。
[0011]本發(fā)明相對(duì)于現(xiàn)有技術(shù)具有如下的優(yōu)點(diǎn)及效果:
[0012](I)本發(fā)明發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，子宮骨片的形態(tài)結(jié)構(gòu)在種內(nèi)不同個(gè)體間的結(jié)構(gòu)是穩(wěn)定的，在不同的種間差異性大，從而提供了通過(guò)子宮骨片鑒定雌性麻蠅的方法。
[0013](2)本發(fā)明發(fā)明人首次分離得到雌性野亞麻蠅的子宮骨片，并確定其形態(tài)。
[0014](3)本發(fā)明提供的方法操作簡(jiǎn)單，用時(shí)短，且準(zhǔn)確性高。

【專利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0015]圖1是雌性野亞麻蠅的子宮骨片照片圖。
[0016]圖2是雌性白頭亞麻蠅的子宮骨片照片圖。
[0017]圖3是雌性多突亞麻蠅的子宮骨片照片圖。
[0018]圖4是雌性緋角亞麻蠅的子宮骨片照片圖。
[0019]圖5是雌性醬亞麻蠅的子宮骨片照片圖。
[0020]圖6是雌性短角亞麻蠅的子宮骨片照片圖。

【具體實(shí)施方式】
[0021]下面結(jié)合實(shí)施例及附圖對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的描述，但本發(fā)明的實(shí)施方式不限于此。
[0022]實(shí)施例1
[0023](I)野外采集得到正在交配的雌雄性麻蠅；
[0024](2)利用雄蟲的尾器和外部特征對(duì)雄蟲進(jìn)行鑒定，從而判斷所配對(duì)的雌性麻蠅的種類。
[0025](3)利用DNA條形碼技術(shù)，比對(duì)配對(duì)雌雄性配對(duì)麻蠅的DNA條形碼序列是否一致，從而判斷雌性麻蠅與配對(duì)雄性種類是否一致。具體步驟如下:取麻蠅的一條腿，用動(dòng)物組織基因組DNA提取試劑盒(TIANGEN ;編號(hào):DP304)中的裂解液浸泡5個(gè)小時(shí)以上，用動(dòng)物組織基因組DNA提取試劑盒提取基因組DNA。以LC01490和HC02198為引物，經(jīng)PCR，反應(yīng)體系為:5倍Phus1n HF緩沖液10 μ 1，1mM dNTPsl μ 1，正反向引物(濃度為1pmoI/L)各
Iμ I, Phus1n超保真DNA聚合酶0.5 μ 1，基因組DNA2y 1，用ddH20補(bǔ)足50 μ I ;PCR的條件為:94°C變性 5min ；94°C 40S、54°C 40S、72°C lmin，29 個(gè)循環(huán)；72°C延伸 1min ;使用質(zhì)量體積比I %的瓊脂糖凝膠電泳對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行分離，對(duì)目的條帶(700bp左右)進(jìn)行切膠，使用瓊脂糖凝膠DNA回收純化試劑盒進(jìn)行純化，將目的基因克隆到質(zhì)粒pGMT (TIANGEN ;編號(hào):VT202,按說(shuō)明書操作)，經(jīng)轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5 α感受態(tài)細(xì)胞，將轉(zhuǎn)化液涂布含100 μ g/ml氨芐青霉素的LB平板上，通過(guò)引物L(fēng)C01490和HC02198對(duì)菌落進(jìn)行PCR，篩選得到陽(yáng)性克隆，送測(cè)序經(jīng)鑒定。
[0026]1X01490:5' -GGTCAACAAATCATAAAGATATTGG-3'；
[0027]HC02198:5/ -TAAACTTCAGGGTGACCAAAAAATCA-3'。
[0028]采集得到如下種類的雌性麻蠅，如表I所示:
[0029]表I
[0030]

【權(quán)利要求】
1.一種利用子宮骨片鑒定雌性野亞麻蠅的方法，其特征在于包括如下步驟: (1)解剖待檢標(biāo)本，獲得子宮骨片； (2)將待檢標(biāo)本的子宮骨片與雌性野亞麻蠅的子宮骨片比較； (3)待檢標(biāo)本的子宮骨片與雌性野亞麻蠅的子宮骨片形狀基本相同，即表示待檢標(biāo)本為雌性野亞麻蠅；待檢標(biāo)本的子宮骨片與雌性野亞麻蠅的子宮骨片形狀不同，即表示待檢標(biāo)本不是雌性野亞麻蠅。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用子宮骨片鑒定雌性野亞麻蠅的方法，其特征在于:所述雌性野亞麻蠅的子宮骨片的形狀如圖1所示。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的利用子宮骨片鑒定雌性野亞麻蠅的方法，其特征在于:所述雌性野亞麻蠅的子宮骨片的形狀似不規(guī)則的花瓶的平面。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的利用子宮骨片鑒定雌性野亞麻蠅的方法，其特征在于:所述雌性野亞麻蠅的子宮骨片的形狀:上窄下寬，從窄的一端至寬的一端，兩側(cè)的弧線先往內(nèi)延伸，形成頸的結(jié)構(gòu)；再往外延伸，最后往內(nèi)收，形成肚的結(jié)構(gòu)。
【文檔編號(hào)】G01N33/48GK104133055SQ201410331462
【公開(kāi)日】2014年11月5日 申請(qǐng)日期:2014年7月4日 優(yōu)先權(quán)日:2014年7月4日
【發(fā)明者】岳巧云, 汪小東, 邱德義, 魏曉雅, 胡佳, 陳健, 劉德星 申請(qǐng)人:岳巧云