屋塵螨過(guò)敏原特異性IgE抗體定量檢測(cè)試劑盒的制作方法
【專(zhuān)利摘要】本實(shí)用新型涉及一種屋塵螨過(guò)敏原特異性IgE抗體定量檢測(cè)試劑盒，其特征在于：它包括磁微粒標(biāo)記的抗人IgE抗體試劑管（1）、生物素標(biāo)記的屋塵螨過(guò)敏原試劑管（2）、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的鏈霉親和素試劑管（3）、含有吐溫的磷酸鹽緩沖液濃縮清洗試劑管（4）、底物液一魯米諾試劑管（5）、底物液二過(guò)氧化物試劑管（6）和6瓶含人IgE抗體的校準(zhǔn)品試劑管（7）。其將極大提高過(guò)敏原檢測(cè)的靈敏度和準(zhǔn)確性。
【專(zhuān)利說(shuō)明】屋塵螨過(guò)敏原特異性IgE抗體定量檢測(cè)試劑盒

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本實(shí)用新型涉及一種屋塵螨過(guò)敏原特異性IgE抗體定量檢測(cè)試劑盒。

【背景技術(shù)】
[0002]塵螨是誘發(fā)過(guò)敏性哮喘、過(guò)敏性鼻炎和濕疹過(guò)敏性結(jié)膜炎等過(guò)敏性疾病的重要變應(yīng)原。近年研究證實(shí)塵螨與過(guò)敏性疾病關(guān)系密切，根據(jù)美國(guó)、新西蘭和澳大利亞等許多國(guó)家的調(diào)查相繼證實(shí)了塵螨是許多國(guó)家重要的過(guò)敏原之一。目前全球已有幾百項(xiàng)研究證實(shí)了塵螨與哮喘等過(guò)敏性疾病之間的密切關(guān)系。
[0003]塵螨過(guò)敏的診斷主要依賴(lài)免疫學(xué)檢測(cè)。目前臨床上有許多體內(nèi)和體外的免疫學(xué)檢測(cè)方法，包括塵螨變應(yīng)原皮膚試驗(yàn)、血清塵螨特異性IgE測(cè)定、塵螨支氣管或鼻腔激發(fā)試驗(yàn)、肥大細(xì)胞脫顆粒試驗(yàn)、嗜酸性粒細(xì)胞陽(yáng)離子蛋白水平測(cè)定等。塵螨過(guò)敏患者的血清特異性抗體水平增高?？赏ㄟ^(guò)ELISA或RAST方法檢測(cè)塵螨特異性抗體。有臨床意義的指標(biāo)包括特異性IgE、IgG和IgA抗體。檢測(cè)特異性抗體水平可以幫助確診塵螨過(guò)敏及其過(guò)敏程度，同時(shí)可作為臨床療效評(píng)價(jià)的指標(biāo)。
[0004]目前臨床多采用的ELISA方法，由于其局限性，檢測(cè)靈敏度和準(zhǔn)確性遠(yuǎn)不如化學(xué)發(fā)光的方法，而且我們克服了 ELISA的非均相反應(yīng)所帶來(lái)的本底高特異性不好的缺點(diǎn)。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本實(shí)用新型的目的在于克服上述不足，提供一種屋塵螨過(guò)敏原特異性IgE抗體定量檢測(cè)試劑盒，其將極大提高過(guò)敏原檢測(cè)的靈敏度和準(zhǔn)確性。
[0006]本實(shí)用新型的目的是這樣實(shí)現(xiàn)的:
[0007]一種屋塵螨過(guò)敏原特異性IgE抗體定量檢測(cè)試劑盒，它包括外包裝盒，所述外包裝盒內(nèi)設(shè)置泡沫墊和說(shuō)明書(shū)，所述泡沫墊上放置有磁微粒標(biāo)記的抗人IgE抗體試劑管、生物素標(biāo)記的屋塵螨過(guò)敏原試劑管、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的鏈霉親和素試劑管、含有吐溫的磷酸鹽緩沖液濃縮清洗試劑管、底物液一魯米諾試劑管、底物液二過(guò)氧化物試劑管和6瓶含人IgE抗體的校準(zhǔn)品試劑管，所述6瓶含人IgE抗體的校準(zhǔn)品試劑管含量分別為0.35、0.7,3.5,17.5、50、100IU/ml。
[0008]本實(shí)用新型所采用的反應(yīng)容器為常見(jiàn)的化學(xué)發(fā)光反應(yīng)平底試管。
[0009]本實(shí)用新型的所設(shè)計(jì)的檢測(cè)方法為磁微粒化學(xué)發(fā)光檢測(cè)方法，采用捕獲法來(lái)實(shí)現(xiàn)對(duì)屋塵螨過(guò)敏原特異性IgE抗體的定量測(cè)定。
[0010]本實(shí)用新型的核心內(nèi)容如下:
[0011](I)、加50 μ I磁微粒標(biāo)記的抗人IgE抗體試劑至化學(xué)發(fā)光反應(yīng)管底；
[0012](2)、再加50 μ I標(biāo)準(zhǔn)品、待檢血清分別至化學(xué)發(fā)光反應(yīng)管底；
[0013](3)、用多管均勻混合器輕輕振蕩化學(xué)發(fā)光反應(yīng)管30s后，置37°C恒溫箱反應(yīng)15分鐘；
[0014](4)、從恒溫箱取出反應(yīng)管放至磁分離器上，確保每個(gè)化學(xué)發(fā)光反應(yīng)管底都與分離器表面接觸，沉淀2-3分鐘；緩慢的倒轉(zhuǎn)分離器倒出上清液，用力在吸水紙上將化學(xué)發(fā)光反應(yīng)管內(nèi)的液體拍干，以除去粘在反應(yīng)管中的液滴；
[0015](5)、清洗濃縮液用純化水稀釋40倍后，加300-500 μ I稀釋后的清洗液至每一化學(xué)發(fā)光反應(yīng)管中，置多管均勻混合器上輕輕振蕩混勻30s ；
[0016](6)、重復(fù)步驟(4)、(5)、(4) 一遍；
[0017](7)、加50 μ I生物素標(biāo)記的屋塵螨過(guò)敏原試劑至化學(xué)發(fā)光反應(yīng)管底；
[0018](8)、再加50 μ I辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的鏈霉親和素至化學(xué)發(fā)光反應(yīng)管底；
[0019](9)、用多管均勻混合器輕輕振蕩化學(xué)發(fā)光反應(yīng)管30s后，置37°C恒溫箱反應(yīng)15分鐘；
[0020](10)、重復(fù)步驟(4)、(5)、(6)—遍；
[0021](11)、加50 μ I底物液I魯米諾試劑至化學(xué)發(fā)光反應(yīng)管底，再加50 μ I底物液II過(guò)氧化物試劑至化學(xué)發(fā)光反應(yīng)管底，手動(dòng)輕輕混勻(或放置在多管均勻混合器上輕輕震蕩5-lOs)，使用準(zhǔn)備好的化學(xué)發(fā)光檢測(cè)儀進(jìn)行檢測(cè)；
[0022](12)、根據(jù)校準(zhǔn)品采用四參數(shù)擬合方式擬合一條曲線，通過(guò)曲線計(jì)算待檢樣本所含的過(guò)敏原特異性IgE抗體的濃度。
[0023]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本實(shí)用新型的有益效果是:
[0024]本實(shí)用新型用于檢測(cè)人體內(nèi)含有的屋塵螨過(guò)敏原特異性IgE抗體的含量，以此來(lái)確定個(gè)體是否對(duì)屋塵螨過(guò)敏原產(chǎn)生免疫反應(yīng)，是診斷引起過(guò)敏性哮喘、過(guò)敏性鼻炎、濕疹過(guò)敏性結(jié)膜炎的重要參考指標(biāo)，對(duì)于改善生活環(huán)境、生活質(zhì)量有很重要的參考價(jià)值。所采用的磁微?；瘜W(xué)發(fā)光免疫分析法，具有操作方便、靈敏度高、準(zhǔn)確性好、快速和無(wú)污染的特點(diǎn)。

【專(zhuān)利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0025]圖1為本實(shí)用新型結(jié)構(gòu)示意圖。
[0026]圖2為圖1的內(nèi)部俯視圖。
[0027]其中:磁微粒標(biāo)記的抗人IgE抗體試劑管1、生物素標(biāo)記的屋塵螨過(guò)敏原試劑管2、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的鏈霉親和素試劑管3、含有吐溫的磷酸鹽緩沖液濃縮清洗試劑管4、底物液一魯米諾試劑管5、底物液二過(guò)氧化物試劑管6、含人IgE抗體的校準(zhǔn)品試劑管7、外包裝盒8、泡沫墊9、說(shuō)明書(shū)10。

【具體實(shí)施方式】
[0028]實(shí)施例1
[0029]參見(jiàn)圖1和2，本實(shí)用新型涉及的一種屋塵螨過(guò)敏原特異性IgE抗體定量檢測(cè)試劑盒，它包括外包裝盒8，所述外包裝盒8內(nèi)設(shè)置泡沫墊9和說(shuō)明書(shū)10，所述泡沫墊9上放置有磁微粒標(biāo)記的抗人IgE抗體試劑管1、生物素標(biāo)記的屋塵螨過(guò)敏原試劑管2、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的鏈霉親和素試劑管3、含有吐溫的磷酸鹽緩沖液濃縮清洗試劑管4、底物液一魯米諾試劑管5、底物液二過(guò)氧化物試劑管6和6瓶含人IgE抗體的校準(zhǔn)品試劑管7，所述6瓶含人IgE抗體的校準(zhǔn)品試劑管7含量分別為0.35,0.7,3.5、17.5、50、100IU/ml。
【權(quán)利要求】
1.一種屋塵螨過(guò)敏原特異性IgE抗體定量檢測(cè)試劑盒，它包括外包裝盒(8)，所述外包裝盒(8)內(nèi)設(shè)置泡沫墊(9)和說(shuō)明書(shū)(10)，其特征在于:所述泡沫墊(9)上放置有磁微粒標(biāo)記的抗人IgE抗體試劑管(I)、生物素標(biāo)記的屋塵螨過(guò)敏原試劑管(2)、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的鏈霉親和素試劑管(3)、含有吐溫的磷酸鹽緩沖液濃縮清洗試劑管(4)、底物液一魯米諾試劑管(5)、底物液二過(guò)氧化物試劑管(6)和6瓶含人IgE抗體的校準(zhǔn)品試劑管(7)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種屋塵螨過(guò)敏原特異性IgE抗體定量檢測(cè)試劑盒，其特征在于:所述6瓶含人IgE抗體的校準(zhǔn)品試劑管(7)含量分別為0.35,0.7,3.5、17.5、50、100IU/ml。
【文檔編號(hào)】G01N21/76GK204086275SQ201420455788
【公開(kāi)日】2015年1月7日 申請(qǐng)日期:2014年8月13日 優(yōu)先權(quán)日:2014年8月13日
【發(fā)明者】葉興旺, 奚偉紅 申請(qǐng)人:江蘇福隆生物技術(shù)有限公司