發(fā)現含氟化合物的方法與流程
相關申請的交叉引用
本申請要求2014年12月21日提交的美國臨時申請第62/095,055號的權益和優(yōu)先權，其全部內容通過引用的方式整體并入本文。
背景技術：
藥物發(fā)現通常是開始于與醫(yī)學狀況產生因果聯系的生物靶標或方法。生物靶標可以包括，例如：蛋白質、肽、核苷酸、核酸、碳水化合物、上述的組合、膜、細胞和/或組織。然后使用生物測定法來鑒定可影響靶標或方法的化合物或化合物(“先導化合物”)的集合。
通常情況下，這些先導化合物是隨后進行改性。這些改性可以進行來研究生物測定法中改性與活性之間的關系(結構-活性關系或“sar”)、測試某些作用機制或探索化學和/或生物直覺知識。先導化合物可以基于sar或其他方法進行改進，從而例如調節(jié)與靶標的親合力、增加活性、提高代謝穩(wěn)定性、增加溶解度、提高細胞膜通透性等。最終確定臨床候選藥物。
藥物化學家經常使用的一種改性是氟化。雖然氟在地殼中是第13豐富的元素，但是，氟在天然有機化合物中的存在極其罕見。這可能是由于氟的高電負性和氟離子的低氧化電位。然而，自二十世紀五十年代以來的研究所證明的是，氟可以產生有利的且有時是令人驚奇的治療效果。因此，與自然界形成碳-氟鍵的非常有限的生物合成能力相比，化學家已經開發(fā)出了越來越大的氟化反應集合?，F有的藥物先導結構氟化方法可以是基于有機合成反應，其主要目標是產生具有高產率的期望的單一合成產物。因此，結構改性的設計常常局限于可以以高產率生成期望的單一產物的結構位置處的已知氟化反應。因此，高選擇性的反應優(yōu)選用于一次合成期望的化合物。對于給定的藥物先導化合物，通常只有少數結構位置可用于傳統改性。
也有方法可用于在相同反應中進行一次以上的結構改性。為了在單個反應步驟中制備多個產物，可以實施分步合成技術。該技術已被用于藥物發(fā)現研究中。在分步合成方法中，進行多個平行的反應，對各反應的期望的單一產物進行純化并在下一個反應步驟中一起加以混合以產生多種產物。
雖然分步合成技術可以在單個反應步驟中制備多種產物，但是該技術的局限性在于僅能在多個原料中的每一個可高產率地生產期望的單一產物的結構位置處進行改性。
已經使用氟氣的非選擇性氟化來改進藥物發(fā)現方法。美國專利第8,815,781號教導使多奈哌齊(donepezil)以及其他化合物與氟氣反應，用ache酶篩選反應混合物，并鑒定具有改進性質的化合物。然而，用氟氣進行直接氟化是有缺陷的。其中，例如，這種反應中的氟化試劑通常是危險的，并且直接氟化通常需要大量的原料。因此，需要能夠更完全地改性用于發(fā)現具有期望藥物性質的含氟化合物的藥物先導結構的方法。
技術實現要素：
本發(fā)明通常涉及用于藥物發(fā)現的方法。本發(fā)明的一個方面涉及提供底物。本發(fā)明的一個方面涉及用電化學氟化(ecf)來改性底物。本發(fā)明的一個方面涉及篩選電化學氟化的反應混合物。本發(fā)明的一個方面涉及鑒定反應混合物中的氟化化合物。本發(fā)明的一個方面涉及提供底物、用電化學氟化來改性底物、篩選電化學氟化的反應混合物以及鑒定反應混合物中的氟化化合物。
例如，本發(fā)明的一個方面涉及鑒定化合物的方法，其包括提供底物；用電化學氟化改性底物來獲得反應混合物；用生物靶標篩選反應混合物。
在各實施方案中，底物是小分子。在某些實施方案中，底物是治療劑。例如，底物可以是批準的治療劑，臨床試驗中的治療劑，臨床前研究中的治療劑或已經從市場召回的治療劑。在具體實施方案中，底物是索拉非尼(sorafenib)、羅格列酮(rosiglitazone)、厄洛替尼(erlotinib)、美他沙酮(metaxalone)、pik-293、wp1066、r406、替米沙坦(telmisartan)、xl147、cgi1746、瑞戈非尼(regorafenib)、alisertib、阿西替尼(axitinib)、zstk474、托法替尼(tofacitinib)、jnj-38877605、bez235、cal-101、魯索利替尼(ruxolitinib)、df-04691502、bkm120、達拉非尼(dabrafenib)、vx-702、依魯替尼(ibrutinib(pci-32765))、cudc-101、曲美替尼(trametinib)、pf-04691502、ic-87114、卡博替尼(cabozantinib)、司美替尼(selumetinib)、pki402、avl-292、pik294、gdc-0994、奧氮平(olanzapine)、樂伐替尼(lenvatinib)、帕唑帕尼(pazopanib)、ph-797804、sotrastaurin、西地尼布(cediranib)、利奈唑胺(linezolid)、tg100-115、布立尼布(brivanib(bms-540215))、ly294002、或司美替尼(selumetinib(azd6244))。
在各實施方案中，該方法包括制備反應溶液。在一些實施方案中，反應溶液包括底物。在一些實施方案中，反應溶液包括氟化源。
在某些實施方案中，氟化源包括氟化氫。例如，氟化氫是基本無水的。在一些實施方案中，氟化源包括氟化物鹽。在一些實施方案中，氟化源包括氟化物化合物。例如氟化源是無水氟化氫、氟(f2)、lif、kf、naf、csf、agf2、cuf2、fclo3、sf4、xef2、acof、(phso2)2nf、et2nsf3、et3n·(hf)2-5、et4nf·(hf)2-5、et4n·bf4、(phso2)2nf(nfsi)、n-氟鄰苯二磺酰亞胺(nfobs)、et2nsf3(dast)、(meoch2ch2)2nsf3
在各實施方案中，反應溶液包括相轉移添加劑。在各實施方案中，反應溶液包括電解相。在各實施方案中，反應溶液包括含氟化合物相。在各實施方案中，反應溶液包括溶劑。例如，溶劑可以是乙腈、二氯甲烷、1，2-二甲氧基乙烷或硝基甲烷。
在各實施方案中，電化學氟化在陰極和陽極的存在下進行。在一些實施方案中，陰極由包括ni、fe、cu、pt、其合金或c的材料制成。在一些實施方案中，陽極由包括al、co、cr、cu、mg、ti、zn、zr、fe、co、ni、pt或其合金的材料制成。在某些實施方案中，陰極由包括ni或pt的材料制成。在某些實施方案中，陽極由包含ni或pt的材料制成。
在各實施方案中，電化學氟化在約25℃下進行。在各實施方案中，電化學氟化在大氣壓下進行。在各實施方案中，電化學氟化采用循環(huán)電流進行。在各實施方案中，電化學氟化采用恒定電流進行。
在各實施方案中，進行電化學氟化直到達到至少5％的轉化率。例如，轉換率可以為至少50％。在各實施方案中，進行電化學氟化直到達到不超過10％的轉化率。例如，轉換率可以不超過5％。
在各實施方案中，進行電化學氟化，直到檢測到產物。在各實施方案中，調整本發(fā)明的ecf條件，使得產生單氟化化合物(即，每一個化合物僅具有一個碳鍵合的氫被氟取代)。在一些實施方案中，ecf產生一種單氟化化合物。在一些實施方案中，ecf產生兩種單氟化化合物。在一些實施方案中，ecf產生三種或更多種單氟化化合物。
在各實施方案中，在檢測到其它產物之前進行電化學氟化。在一些實施方案中，其它產物包括單氟化化合物。在一些實施方案中，其它產物包括二氟化化合物。在一些實施方案中，其它產物包括多氟化化合物。在某些實施方案中，其它產物包括單氟化化合物，二氟化化合物或多氟化化合物的衍生物。
在各實施方案中，本發(fā)明的方法包括將電化學氟化的反應混合物與生物靶標接觸。例如，生物靶標可以是蛋白質。在一些實施方案中，蛋白質是激酶、蛋白酶、肽酶、核激素受體、蛋白質復合物、g蛋白偶聯受體(gpcr)，蛋白質-蛋白質相互作用靶標或轉錄因子。
在各實施方案中，本發(fā)明的方法包括將本發(fā)明的電化學氟化的反應混合物用自動配體識別系統(alis)、speedscreen、前沿親和層析、親和捕獲、親和毛細管電泳、超濾或脈沖超濾進行篩選。在一些實施方案中，該方法包括用前沿親和層析、親和毛細管電泳或超濾來篩選反應混合物。在某些實施例中，在篩選中使用minispintm柱。在一些實施方案中，該方法包括用質譜法(ms)檢測組分。例如，可以使用ms來鑒定反應混合物中期望的組分。在某些實施方案中，期望的組分具有從底物改進的性能。在某些實施方案中，期望的組分與底物具有不同但有用的性質。
在各實施方案中，該方法包括確認期望的組分的生物活性。
本發(fā)明的另一方面涉及通過本發(fā)明所述的方法鑒定的化合物。本發(fā)明的又另一方面涉及可以用于本發(fā)明所述的方法中的系統。
附圖說明
以下附圖構成本發(fā)明的一部分，并且包括在本發(fā)明內以進一步說明本發(fā)明的的某些方面。結合一個或多個附圖，通過對本文所提出的具體實施方案的詳細描述可以更好地理解本發(fā)明。
圖1a和1b示出了兩個示例性ecf池。
圖2a至圖2d示出了在反應開始前，實施例1的示例性反應混合物的示例性lc-ms色譜圖。
圖3a至圖3d示出了在反應開始后約10小時，實施例1的示例性反應混合物的示例性lc-ms色譜圖。
圖4a至圖4d示出了在反應開始前，實施例2的示例性反應混合物的示例性lc-ms色譜圖。
圖5a至圖5d示出了在反應開始后約22小時，實施例2的示例性反應混合物的示例性lc-ms色譜圖。
圖6a至圖6d示出了在反應開始前，實施例3的示例性反應混合物的示例性lc-ms色譜圖。
圖7a至圖7d示出了在反應開始后約10小時，實施例3的示例性反應混合物的示例性lc-ms色譜圖。
圖8a至圖8b示出了根據實施例4的用pbs溶液進行處理的實施例3的示例性反應混合物的示例性lc-ms色譜圖。
圖9a至圖9b示出了根據實施例4的用pbs溶液處理的實施例3的示例性反應混合物的混合物用旋轉柱處理后，旋轉柱的示例性洗脫液的示例性lc-ms色譜圖。
圖10a至圖10b示出了根據實施例4的用vegfr-2溶液處理的實施例3的示例性反應混合物的混合物用旋轉柱處理后，旋轉柱的示例性洗脫液的示例性lc-ms色譜圖。
具體實施方式
在本發(fā)明中，當認為元素或組分包括在所列元素或組分列表中和/或從列表中選擇時，應當理解，元素或組分可以是所述元素中的任何一個或者可以選自由兩個或多個所述元素或組分組成的組。此外，應當理解，本文描述的組合物，裝置或方法的元素和/或特征可以以不脫離本發(fā)明的精神和范圍的各種方式組合，無論是顯式的還是隱含的。
除非本文另有說明或明顯與上下文相矛盾，在本公開的上下文中(特別是在所附權利要求的上下文中)使用術語“一”、“一個”和“該(所述)”以及相似的引用涵蓋單數和復數。除非本文另有說明或明顯與上下文相矛盾，本文所述的所有方法可以以任何合適的順序進行。本文提供的任何和所有示例或示例性語言(例如，優(yōu)選，優(yōu)選地)旨在進一步說明本發(fā)明的內容，并不對權利要求的范圍構成限制。說明書中的任何語言不應被解釋為表示任何未被要求保護的元素對于本發(fā)明的實踐是必需的。
這里使用的短語“和/或”應當被理解為是指所連接的元素中的“一個或兩個”，即在某些情況下元素共同存在，在其它情況下元素單獨存在。除了明確指出相反的情況外，在“和/或”條款特別標識的元素之外，可選地存在其他元素，無論是與特定識別的那些元素相關或不相關。因此，作為非限制性示例，當與諸如“包括”的開放式語言結合使用時，在一個實施方案中，對“a和/或b”的引用可以指不含b的a(任選地包括b以外的元素)；在另一個實施方案中，可以指不含a的b(任選地包括除a以外的元素)；在另一個實施方案中，可以指a和b(任選地包括其它元素)。
本文所使用的“或”應當理解為具有如本文所定義的“和/或”相同的含義。例如，當分離列表中的項目時，“或”或“和/或”將被解釋為是包括性的，即，包括大量的元素或元素的列表中的至少一個，但也包括多于一個，以及任選地包括其他未列出的項。只有明確指出相反的條款，例如|“只有一個”或“確切的一個”，或者在權利要求中使用“由...組成”時，指包括大量的元素或元素的列表中的確切的一個元素。一般來說，在排他性條款之前，本文中使用的術語“或”只能解釋為表示排他的替代方案(即“一個或另一個，但不是兩個”)，例如“任一”，“一個”，“只有一個”或“確切的一個”。在權利要求中使用“主要包括”時，應具有專利法領域所使用的通常含義。
本文所使用的，關于一個或多個元素的列表的短語“至少一個”應理解為從元素列表中的任何一個或多個元素中選擇的至少一個元素，但不是必需包括元素列表中具體列出的每個元素中的至少一個元素，而不排除元素列表中元素的任何組合。除了在短語“至少一個”所指的元素列表中特定標識的元素之外，該定義允許任選地存在其他元素，無論與特定標識的元素相關或不相關。因此，作為非限制性實例，在一個實施方案中，“a和b中的至少一個”(或等同地，“a或b中的至少一個”或等同地“a和/或b中的至少一個”)可以指至少一個，任選地包括多于一個a，沒有b的存在(且任選地包括除b之外的元素)；在另一個實施方案中，可以指至少一個，任選地包括多于一個b，沒有a的存在(并且任選地包括除a之外的元素)；在另一個實施方案中，可以指至少一個，任選地包括多于一個的a和至少一個，任選地包括多于一個b(并且任選地包括其它元素)；等等。
除非另有明確說明，使用的術語“包括”，“包含”“含有”“具有”“有”應被普遍理解為開放式，非限制性的。
除非另有特別說明，本文中使用的單數包括復數(反之亦然)。此外，如果在量化值之前使用術語“約”，除非另有具體說明，本發(fā)明還包括具體的定量值本身。除非另有說明或推斷，本文所用的術語“約”是指在標稱值基礎上變化±10％。
本文中的所有數值范圍包括數值范圍內的所有數值和所有數值范圍。作為非限制性實例，(c1-c6)烷基還包括c1、c2、c3、c4、c5、c6、(c1-c2)、(c1-c3)、(c1-c4)、(c1-c3)、(c3-c5)、(c2-c3)、(c2-c4)、(c2-c5)、(c4-c6)和(c5-c6)烷基。
此外，盡管本公開列出的廣泛的數值范圍和參數是上述討論的近似值，但在實施例部分列出的數值是盡可能精確的。然而，應當理解，這些數值固有地包含由測量設備和/或測量技術產生的某些誤差。
應當理解，只要本發(fā)明是可操作的，步驟的順序或執(zhí)行某些操作的順序是無關緊要的。此外，可以同時進行兩個或多個步驟或操作。
本文所用的術語“治療劑”是指可以用來在診斷、治愈、緩解、治療或預防疾病中提供藥理活性或其它直接作用或者用來影響人體的結構或任何功能的任何藥劑。在某些實施方案中，術語“治療劑”包括本文提供的化合物。在某些實施方案中，治療劑是已知可用于或已經用于或正在用于治療或預防病癥或其一種或多種癥狀的藥劑。
術語“批準的”在與治療劑一起使用時是指將治療劑上市的申請已經提交給美國食品藥品監(jiān)督管理局(fda)或等同政府機構，并且該申請已經被fda或其等同政府機構評估并批準。
術語“臨床試驗”與治療劑一起使用時是指前瞻性地給予人類參與者或一組人一個或多個與健康有關的干預措施，以評估治療劑對健康結果的影響的任何研究。任何使用人以外的受試者來評價治療劑效果的研究都是臨床前研究。
本文所用的術語“小分子”通常是指分子量小于2,000g/mol、小于1,500g/mol、小于1,000g/mol、小于800g/mol或小于500g/mol的有機分子。
本文所用的術語“分子量”通常是指材料分子的質量或平均質量。
使用不在兩個字母或符號之間的破折號(“-”)表示取代基的連接點。例如，-conh2通過碳原子(c)連接。
術語“烷烴”是指飽和脂肪烴化合物，包括主鏈中具有30個或更少碳原子(例如，直鏈為c1-c30，支鏈為c3-c30)的直鏈烷烴、支鏈烷烴、環(huán)烷烴、烷基取代的環(huán)烷烴和環(huán)烷基取代的烷烴。在一些實施方案中，烷烴在其主鏈中具有20個或更少、12個或更少或7個或更少的碳原子。
術語“烯烴”和“炔烴”是指與上述烷基在長度和可能取代上類似的不飽和脂肪族化合物，但分別包括至少一個雙鍵或三鍵。
術語“芳基”是指c5-c20元芳基、雜環(huán)、稠合芳基、稠合雜環(huán)、雙芳基或雙雜環(huán)化合物。
術語“烷基”是指飽和脂肪基團的基，包括直鏈烷基、支鏈烷基、環(huán)烷基(脂環(huán)基)、烷基取代的環(huán)烷基和環(huán)烷基取代的烷基。
在一些實施方案中，直鏈或支鏈烷基在其主鏈中具有30個或更少的碳原子(例如，直鏈為c1-c30，支鏈為c3-c30)、20個或更少、12個或更少或7個或更少的碳原子。同樣，在一些實施方案中，環(huán)烷基在其環(huán)結構中具有3-10個碳原子，例如，在環(huán)結構中有5、6或7個碳。在整個說明書、實施例和權利要求書中使用的術語“烷基”(或“低級烷基”)旨在包括“未取代的烷基”和“取代的烷基”，后者是指具有一個或多個取代基的烷基部分，如那些在烴主鏈的一個或多個碳上取代氫。這樣的取代基包括但不限于鹵素、羥基、羰基(如羧基、烷氧基羰基、甲?；蝓；?、硫代羰基(如硫酯、硫代乙酸酯或硫代甲酸酯)、烷氧基、磷?；?、磷酸酯、膦酸酯、次膦酸酯、氨基、酰胺基、脒、亞胺、氰基、硝基、疊氮基、巰基、烷硫基、硫酸酯、磺酸酯、氨磺酰基、亞磺酰氨基、磺?；?、雜環(huán)基、芳烷基、芳基或雜芳基部分。
除非對碳原子數量另有說明，否則本文所用的“低級烷基”是指如上定義的烷基，但在其主鏈結構中具有1至10個碳原子，或1至6個碳原子。同樣，“低級烯基”和“低級炔基”具有相似的鏈長。在本發(fā)明中，優(yōu)選的烷基是低級烷基。在一些實施方案中，本文稱為烷基的取代基是低級烷基。
本領域技術人員可以理解，如果合適，在烴鏈上取代的部分本身可以被一個或多個取代基取代，每個取代基在本文中討論。例如，取代烷基的取代基可以包括鹵素、羥基、硝基、硫醇、氨基、疊氮基、亞胺基、酰胺基、磷?；?包括膦酸酯和次膦酸酯)、磺酰基(包括硫酸酯、亞磺酰胺基、磺酰胺基和磺酸酯)和甲硅烷基、以及醚、烷硫基、羰基(包括酮、醛、羧酸酯和酯)、-cf3、-cn等。環(huán)烷基可以以相同的方式被取代。
本文所用的術語“雜烷基”是指含有至少一個雜原子的直鏈或支鏈或環(huán)狀含碳基團或其組合。合適的雜原子包括但不限于o、n、si、p、se、b和s，其中磷原子和硫原子任選被氧化，并且氮雜原子任選被季銨化。雜烷基可以被一個或多個取代基取代，每個取代基在本文中討論。
術語“烷硫基”是指具有連接到其上的硫基的如上所定義的烷基。在一些實施方案中，“烷硫基”部分由-s-烷基、-s-烯基和-s-炔基中的一個表示。代表性的烷硫基包括甲硫基和乙硫基。術語“烷硫基”還包括環(huán)烷基、烯基和環(huán)烯基以及炔基?！胺剂蚧笔侵阜蓟螂s芳基。烷硫基可以被一個或多個取代基取代，其中每個取代基在本文中討論。
術語“烯基”和“炔基”是指與上述烷基在長度和可能取代上類似的不飽和脂肪族基團，但分別包括至少一個雙鍵或三鍵。
本文所用的術語“烷氧基”是指具有與其連接的氧基團的如上所定義的烷基。代表性的烷氧基包括甲氧基、乙氧基、丙氧基和叔丁氧基?！懊选笔怯裳豕矁r連接的兩種烴。因此，使烷基成醚的烷基取代基是或類似于烷氧基，例如可以由-o-烷基、-o-烯基和-o-炔基之一表示。芳氧基可以由-o-芳基或o-雜芳基表示，其中芳基和雜芳基如下所定義。烷氧基和芳氧基可以被一個或多個取代基取代，其中每個取代基在本文中討論。術語“胺”和“氨基”是本領域公知的，并且是指未取代的和取代的胺，例如可以是由以下通式表示的部分：
其中r9、r10和r10′獨立地表示氫、烷基、烯基、-(ch2)m-r8或r9和r10與它們所連接的n原子一起形成一個在環(huán)結構中具有4至8個原子的雜環(huán)；r8表示芳基、環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)或多環(huán)；m為0或1-8的整數。在一些實施方案中，r9或r10中只有一個可以是羰基，例如r9、r10和氮一起不形成酰亞胺。在其它實施方案中，術語“胺”不包括酰胺，例如，其中r9和r10中的一個表示羰基。在另外的實施方案中，r9和r10(和任選的r10′)各自獨立地表示氫，烷基或環(huán)烷基、烯基或環(huán)烯基或炔基。因此，如本文所用的術語“烷基胺”是指具有與其連接的取代的(被一個或多個取代基取代，每個取代基在本文中討論)或未取代的烷基的如上定義的胺基，即，r9和r10中的至少一個是烷基。
術語“酰胺基”是本領域公知的氨基取代的羰基，并且包括可以由以下通式表示的部分：
其中r9和r10如本文所定義。
本文所用的“芳基”是指c5-c10-元芳基、雜環(huán)、稠合芳基、稠合雜環(huán)、雙芳基或雙雜環(huán)。廣義上，本文所用的“芳基”包括具有0至4個雜原子的5-、6-、7-、8-、9-和10-元單環(huán)芳基，例如苯、吡咯、呋喃、噻吩、咪唑、惡唑、噻唑、三唑、吡唑、吡啶、吡嗪、噠嗪、嘧啶等。在環(huán)結構中具有雜原子的那些芳基也可以被稱為“芳基雜環(huán)”，“雜芳基化合物”或“雜芳基”。芳環(huán)可以在一個或多個環(huán)位置被一個或多個具有一個或多個取代基的取代基取代，每個取代基在本文中討論。例如，一個或多個取代基可以包括但不限于鹵素、疊氮化物、烷基、芳烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、羥基、烷氧基、氨基(或季銨化的氨基)、硝基、巰基、亞氨基、酰胺基、膦酸酯、次膦酸鹽、羰基、羧基、甲硅烷基、醚、烷硫基、磺?；?、亞磺酰氨基、酮、醛、酯、雜環(huán)基、芳基或雜芳基部分、-cf3、-cn；及其組合。
術語“芳基”還包括具有兩個或更多個環(huán)的多環(huán)，其中兩個或更多個碳為兩個相鄰環(huán)共同(即“稠環(huán)”)，其中至少一個環(huán)是芳族的，例如另一個環(huán)或多個環(huán)可以是環(huán)烷基、環(huán)烯基、環(huán)炔基、芳基和/或雜環(huán)。雜環(huán)的實例包括但不限于苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并噻吩基、苯并惡唑基、苯并惡唑啉基、苯并噻唑基、苯并三唑基、苯并四唑基、苯并異惡唑基、苯并異噻唑基、苯并咪唑啉基、咔唑基、4ah-咔唑基、咔啉基、苯并二氫吡喃基、苯并吡喃基、噌啉基、十氫喹啉基、2h，6h-1，2，5-二噻嗪基、二氫呋喃并[2，3-b]四氫呋喃基、呋喃基、呋咱基、咪唑烷基、咪唑啉基、咪唑基、1h-吲唑基、吲哚啉基、二氫吲哚基、吲嗪基、吲哚基、3h-吲哚基、靛紅?；惐讲⑦秽?、異苯并二氫吡喃基、異吲唑基、異吲哚啉基、異吲哚基、異喹啉基、異噻唑基、異惡唑基、亞甲二氧基苯基、嗎啉基、萘啶啶基、八氫異喹啉基、惡二唑基、1，2，3-惡二唑基、1，2，4-惡二唑基、1，2，5-惡二唑基、1，3，4-惡二唑基、惡唑烷基、惡唑基、羥吲哚基、嘧啶基、菲啶基、鄰二氮雜菲基、吩嗪基、吩噻嗪基、吩噻惡基、吩惡嗪基、酞嗪基、哌嗪基、哌啶酮基、4-哌啶酮基、胡椒基、蝶啶基、嘌呤基、吡喃基、吡嗪基、吡唑烷基、吡唑啉基、吡唑基、噠嗪基、吡啶并惡唑基、吡啶并咪唑基、吡啶并噻唑基、吡啶基、吡啶基、嘧啶基、吡咯烷基、吡咯啉基、2h-吡咯基、吡咯基、喹唑啉基、喹啉基、4h-喹啉基、喹喔啉基、奎寧環(huán)基、四氫呋喃基、四氫異喹啉基、四氫喹啉基、四唑基、6h-1，2，5-噻二嗪基、1，2，3-噻二唑基、1，2，4-噻二唑基、1，2，5-噻二唑基、1，3，4-噻二唑基、噻嗯基、噻唑基、噻吩基、噻吩并噻唑基、噻吩并惡唑基、噻吩并咪唑基、苯硫基和夾氧(雜)蒽基。一個或多個環(huán)可被如上定義的“芳基”取代。
本文所用的術語“芳烷基”是指被芳基(例如芳基或雜芳基)取代的烷基。
本文所用的術語“碳環(huán)”是指芳環(huán)或非芳族環(huán)，其中環(huán)的每個原子都是碳。
本文所用的“雜環(huán)”或“雜環(huán)的”是指包含3-10個環(huán)原子，優(yōu)選5-6個環(huán)原子的單環(huán)或雙環(huán)的通過環(huán)碳或氮連接的環(huán)基，其由碳和一至四個各自選自非過氧化物氧、硫和n(y)的雜原子組成，其中y不存在或為h、o、(c1-c10)烷基、苯基或芐基，并且任選地含有1-3個雙鍵并且任選地被一個或多個取代基取代，其中每個取代基在本文中討論。雜環(huán)的實例包括但不限于苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并噻吩基、苯并惡唑基、苯并惡唑啉基、苯并噻唑基、苯并三唑基、苯并四唑基、苯并異惡唑基、苯并異噻唑基、苯并咪唑啉基、咔唑基、4ah-咔唑基、咔啉基、苯并二氫吡喃基、苯并吡喃基、噌啉基、十氫喹啉基、2h，6h-1，2，5-二噻嗪基、二氫呋喃并[2，3-b]四氫呋喃基、呋喃基、呋咱基、咪唑烷基、咪唑啉基、咪唑基、1h-吲唑基、吲哚啉基、二氫吲哚基、吲嗪基、吲哚基、3h-吲哚基、靛紅?；?、異苯并呋喃基、異苯并二氫吡喃基、異吲唑基、異吲哚啉基、異吲哚基、異喹啉基、異噻唑基、異惡唑基、亞甲二氧基苯基、嗎啉基、萘啶啶基、八氫異喹啉基、惡二唑基、1，2，3-惡二唑基、1，2，4-惡二唑基、1，2，5-惡二唑基、1，3，4-惡二唑基、惡唑烷基、惡唑基、羥吲哚基、嘧啶基、菲啶基、鄰二氮雜菲基、吩嗪基、吩噻嗪基、吩噻惡基、吩惡嗪基、酞嗪基、哌嗪基、哌啶酮基、4-哌啶酮基、胡椒基、蝶啶基、嘌呤基、吡喃基、吡嗪基、吡唑烷基、吡唑啉基、吡唑基、噠嗪基、吡啶并惡唑基、吡啶并咪唑基、吡啶并噻唑基、吡啶基、吡啶基、嘧啶基、吡咯烷基、吡咯啉基、2h-吡咯基、吡咯基、喹唑啉基、喹啉基、4h-喹啉基、喹喔啉基、奎寧環(huán)基、四氫呋喃基、四氫異喹啉基、四氫喹啉基、四唑基、6h-1，2，5-噻二嗪基、1，2，3-噻二唑基、1，2，4-噻二唑基、1，2，5-噻二唑基、1，3，4-噻二唑基、噻嗯基、噻唑基、噻吩基、噻吩并噻唑基、噻吩并惡唑基、噻吩并咪唑基、苯硫基和夾氧(雜)蒽基。雜環(huán)基可以任選地在一個或多個位置被一個或多個取代基取代，每個取代基在本文討論，包括，例如，鹵素、烷基、芳烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、羥基、氨基、硝基、巰基、亞氨基、酰胺基、磷酸酯、膦酸酯、次膦酸酯、羰基、羧基、甲硅烷基、醚、烷硫基、磺酰基、酮、醛、酯、雜環(huán)基、芳基或雜芳基部分、-cf3和-cn。
術語“羰基”是本領域公知的，并且包括可以由以下通式表示的部分：
其中x是鍵或代表氧或硫，r11表示氫、烷基、環(huán)烷基、烯基、環(huán)烯基或炔基，r′11表示氫、烷基、環(huán)烷基、烯基、環(huán)烯基或炔基。當x是氧，r11或r′11不是氫時，該式表示“酯”。當x是氧，r11如上定義時，該部分在本文中稱為羧基，特別是當r11為氫時，該式表示“羧酸”。當x為氧，r′11為氫時，該式表示“甲酸酯”。
通常，上式的氧原子被硫代替時，該式表示“硫代羰基”。當x是硫，r11或r′11不是氫時，該式表示“硫酯”。當x是硫，r11是氫，該式表示“硫代羧酸”。當x為硫，r′11為氫，該式表示“硫代甲酸酯”。另一方面，當x為鍵，r11為氫時，上述式為“酮”基。當x為鍵，r11為氫，上式為“醛”基。
本文所用的術語“雜原子”是指除碳或氫之外的任何元素的原子。雜原子的實例是硼、氮、氧、磷、硫和硒。其他雜原子包括硅和砷。
本文所用的術語“硝基”是指-no2；術語“鹵素”表示-f、-cl、-br或-i；術語“巰基”是指-sh；術語“羥基”是指-oh；術語“磺酰基”是指so2-。
本文所用的“氟化”是指至少一個碳鍵合的氫被氟(-f)取代的化合物，可以包括全氟化化合物。
本文所用的“全氟化”化合物是指基本上所有碳鍵合的氫被氟(-f)取代的化合物，盡管通常在全氟化組合物中仍存在一些殘留的氫化物。
本文所用的術語“取代的”是指本文所述化合物的所有允許的取代基。在最廣泛的意義上，允許的取代基包括有機化合物的無環(huán)和環(huán)狀、支鏈和非支鏈、碳環(huán)和雜環(huán)、芳族和非芳族取代基。示例性取代基包括但不限于鹵素、羥基或含有任何數量的碳原子，優(yōu)選1-14個碳原子的其它任何有機基團，并且任選地包括一個或多個雜原子如氧、硫或氮，為直鏈、支鏈或環(huán)狀結構形式。代表性的取代基包括烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、苯基、取代的苯基、芳基、取代的芳基、雜芳基、取代的雜芳基、鹵素、羥基、烷氧基、取代的烷氧基、苯氧基、取代的苯氧基、芳氧基、取代的芳氧基、烷硫基、取代的烷硫基、苯硫基、取代的苯硫基、芳硫基、取代的芳硫基、氰基、異氰基、取代的異氰基、羰基、取代的羰基、羧基、取代的羧基、氨基、取代的氨基、酰胺基、取代的酰胺基、磺?；?、取代的磺?；?、磺酸、磷?；⑷〈牧柞；?、膦酰基、取代的膦酰基、聚芳基、取代的聚芳基、c3-c20環(huán)、取代的c3-c20環(huán)、雜環(huán)、取代的雜環(huán)、氨基酸、肽和多肽。
諸如氮的雜原子可以具有氫取代基和/或符合雜原子價態(tài)的本文所述的有機化合物的任何允許的取代基。應當了解，“取代”或“被取代”包括隱含條件，即取代符合取代的原子和取代基的允許價態(tài)從而生成穩(wěn)定的化合物，即不會，例如，通過重排、環(huán)化、消除等自發(fā)進行轉化的化合物。
對于合適的有機化合物，允許的取代基可以是一個或多個，相同或不同的。諸如氮的雜原子可以具有氫取代基和/或符合雜原子價態(tài)的本文所述的有機化合物的任何允許的取代基。
在各種實施方案中，取代基是烷氧基、芳氧基、烷基、烯基、炔基、酰胺、氨基、芳基、芳烷基、氨基甲酸酯、羧基、氰基、環(huán)烷基、酯、醚、甲酰基、鹵素、鹵代烷基、雜芳基、雜環(huán)基、羥基、酮、硝基、磷酸酯、硫化物、亞磺酰基、磺?；?、磺酸、磺酰胺或硫酮，每一個取代基任選地被一個或多個合適的取代基取代。在一些實施方案中，取代基是烷氧基、芳氧基、烷基、烯基、炔基、酰胺、氨基、芳基、芳烷基、氨基甲酸酯、羧基、環(huán)烷基、酯、醚、甲酰基、鹵代烷基、雜芳基、雜環(huán)基、酮、磷酸酯、硫化物、亞磺?；?、磺酰基、磺酸、磺酰胺或硫酮、其中烷氧基、芳氧基、烷基、烯基、炔基、酰胺、氨基、芳基、芳烷基、氨基甲酸酯、羧基、環(huán)烷基、酯、醚、甲?；?、鹵代烷基、雜芳基、雜環(huán)基、酮、磷酸鹽、硫化物、亞磺?；⒒酋；?、磺酸、磺酰胺和硫酮中的每一個可以進一步被一個或多個合適的取代基取代。
取代基的實例包括但不限于鹵素、疊氮化物、烷基、芳烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、羥基、烷氧基、氨基、硝基、巰基、亞氨基、酰胺基、膦酸酯、次膦酸酯、羰基、羧基、甲硅烷基、醚、烷硫基、磺?；喕酋０被?、酮、醛、硫酮、酯、雜環(huán)基、-cn、芳基、芳氧基、全鹵代烷氧基、芳烷氧基、雜芳基、雜芳氧基、雜芳烷基、雜芳烷氧基、疊氮基、烷硫基、氧代、?；榛?、羧基酯、甲酰氨基、酰氧基、氨基烷基、烷氨基芳基、烷芳基、烷氨基烷基、烷氧基芳基、芳基氨基、芳烷基氨基、烷基磺?；?、甲酰胺基烷芳基、甲酰胺基芳基、羥烷基、鹵代烷基、烷氨基烷羧基、氨基羰基酰胺烷基、氰基、烷氧基烷基、全鹵代烷基、芳烷氧基烷基等。在一些實施方案中，取代基選自氰基、鹵素、羥基和硝基。
“西蒙斯(simons)法”或“西蒙斯電化學氟化法”是將溶解或分散在液體、無水、氟化氫(hf)中的底物氟化的方法。西蒙斯電化學氟化可以基本上如下進行：將底物和任選的導電性添加劑分散或溶解在無水氟化氫中以形成“反應溶液”。本文所用的術語“反應溶液”包括任何氣態(tài)物質、液體物質和固體物質的均相或非均相混合物。將一個或多個陽極和一個或多個陰極放置在反應溶液中，在陽極和陰極之間產生電位(電壓)，使得電流在陰極和陽極之間通過反應溶液流動，從而進行氟化，即在陽極用碳鍵合的氟取代一個或多個碳鍵合的氫，在陰極進行還原反應(主要是析氫)。
本文所用的“電流”是指短語的常規(guī)含義中的電流，電子的流動，還指帶正電荷或帶負電荷的化學物質(離子)的流動；雖然不希望受理論束縛，但是認為在該過程中流過反應溶液的電流明顯地是通過反應溶液的這種離子化學物質的流動。
當與電氣參數(例如，電流、電流密度、電壓、功率等)一起使用時，術語“中斷”描述了該參數值通過規(guī)律、重復或循環(huán)的周期性變化。
在電流循環(huán)、電壓循環(huán)或功率循環(huán)等中的術語“循環(huán)”是指通過參數變化的不同水平進行單次、完全實施。作為示例，電流循環(huán)描述了通過氟化池的各種電流水平的單次實施，從起始電流水平開始(作為循環(huán)的任意選定點)，在一個或多個其他電流水平下繼續(xù)運行，并返回到初始電流水平的起始點。
術語“電流密度”定義為在陽極的活性位置處測量的通過反應溶液的電流(以安培為單位)除以陽極的面積。
當與電化學氟化一起使用時，術語“轉換率”是指在電化學氟化中消耗的底物的量。例如，轉化率可以由給定時間下反應溶液中底物剩余量的百分比(％)表示。
一方面，本發(fā)明涉及一種提供底物、通過電化學氟化改性底物、篩選電化學氟化的反應混合物并鑒定反應混合物中的氟化化合物的方法。該方法可以根據與通常稱為“西蒙斯”電化學氟化的電化學氟化方法相類似的方法來實施。
西蒙斯方法是眾所周知的，也是眾多技術出版物的主題。描述西蒙斯方法的早期專利是美國專利第2,519,983號(西蒙斯)，其中包括西蒙斯池及其附件的附圖。適用于實踐西蒙斯方法的實驗室和中試級電化學氟化池的描述和照片出現在j.h.simons編輯的，1950年由紐約academicpress，inc.出版的“氟化學”第一卷第416-418頁。美國專利第5,322,597號(childs等人)和5,387,323(minday等人)均描述了西蒙斯方法和西蒙斯池。此外，alsmeyer等人，electrochemicalfluorinationanditsapplications，organofluorinechemistry：principlesandcommercialapplicationschapter5，pp.121-43(1994)；s.nagaseinfluorinechem.rev.，1(1)77-106(1967)；j.burdonandj.c.tatlow，theelectrochemicalprocessforthesynthesisoffluoro-organiccompounds.advancesinfluorinechemistry，editedbym.stacey等人，(1960)中也描述了由西蒙斯方法進行的電化學氟化。
在各實施方案中，該方法包括提供底物。底物可以是包含碳鍵合的氫的任何化合物或組合物。在各實施方案中，將底物與氟化氫(任選地在導電性添加劑的存在下)組合來制備可以通過電流以引起底物氟化的反應溶液。在一些實施方案中，底物包括有機化合物。例如，有機化合物可以是小分子或大分子。
在一些實施方案中，底物包括任選被至少一個本文所述的取代基取代的烴。例如，底物可以是未取代的烴化合物或被一個、二個、三個、四個、五個、六個、七個、七個、九個或十個允許的取代基取代的烴化合物，每個取代基各自獨立地在本文描述。在某些實施方案中，底物是烷烴、烯烴、炔烴或芳基化合物，其各自任選地被一個、二個、三個、四個、五個、七個、七個、八個、九個或十個允許的取代基取代，每個取代基獨立地在本文描述。
在某些實施方案中，底物是治療劑。在具體實施方案中，底物是批準的治療劑。在具體實施方案中，底物是臨床試驗中的治療劑。在具體實施方案中，底物是臨床前試驗中的治療劑。在具體實施方案中，底物是已經從市場上召回的治療劑。在各實施方案中，底物是索拉非尼、羅格列酮、厄洛替尼、美他沙酮、pik-293、wp1066、r406、替米沙坦、xl147、cgi1746、瑞戈非尼、alisertib、阿西替尼、zstk474、托法替尼、jnj-38877605、bez235、cal-101、魯索利替尼、df-04691502、bkm120、達拉非尼、vx-702、依魯替尼(pci-32765)、cudc-101、曲美替尼、pf-04691502、ic-87114、卡博替尼、司美替尼、pki402、avl-292、pik294、gdc-0994、奧氮平、樂伐替尼、帕唑帕尼、ph-797804、sotrastaurin、西地尼布、利奈唑胺、tg100-115、布立尼布(bms-540215)、ly294002、或司美替尼(azd6244))。不意圖限制所附權利要求的范圍，羅格列酮、替米沙坦和索拉非尼在本文中作為三個示例性底物包括在本文中。在各實施方案中，本發(fā)明的方法包括提供單個底物。在各實施方案中，該方法包括提供兩個或更多個底物。為了便于說明而不希望限制本發(fā)明的范圍，本文的描述使用一個底物。具有本領域普通技能的人知道本發(fā)明同樣適用于兩個或多個底物。
在各實施方案中，本發(fā)明的方法包括通過電化學氟化改性本文描述的底物。該改性可包括制備反應溶液。
在各實施方案中，反應溶液包括氟化源和底物。氟化源一般是能夠在電化學反應原位產生氟物質的任何試劑，例如氟離子(f-)。例如，氟化源可以是氟化氫、氟化物鹽、氟化化合物(例如有機氟化物)、氟化物配合物或其混合物。在一些實施方案中，氟化源包括氟化氫。在某些實施方案中，氟化氫是基本無水的，意味著其含有至多僅少量的水，包括小于約1重量％(wt％)的水。
在一些實施方案中，氟化源包括氟化物鹽。在某些實施方案中，氟化源包括作為反離子的有機陽離子。在具體實施方案中，氟化源中的有機陽離子由胺或含氮雜芳族化合物獲得。例如，可以從直鏈、支鏈或環(huán)狀胺獲得有機陽離子。特別地，有機陽離子由烷基胺(例如三乙胺(et3n)、1，4-二氮鎓雙環(huán)[2，2，2]辛烷)、芳基胺或雜芳族化合物(例如吡啶)獲得，其中烷基、芳基和雜芳族化合物中的每一個任選地被一個或多個取代基取代，每個取代基獨立地在本文中進行描述。在某些實施方案中，氟化源包括作為反離子的無機陽離子。這些有機鹽中的陰離子可以是氟離子(f-)或四氟硼酸根離子(bf4-)。
在一些實施方案中，氟化源包括氟化化合物。例如，氟化化合物可以是有機氟化物。在某些實施方案中，氟化化合物包括通常用于氟化反應的化合物。例如，氟化化合物可以是(phso2)2nf(nfsi)、n-氟鄰苯二磺酰亞胺(nfobs)、et2nsf3(dast)、(meoch2ch2)2nsf3
在一些實施方案中，氟化源包括氟化物配合物。氟化物配合物可以由氟化氫或氟化物鹽制備。在一些實施例中，氟化物源包括氟化氫和氟化物配合物。在一些實施方案中，氟化源包括氟化物鹽和氟化物配合物。在具體實施方案中，氟化源包括氟化物鹽和氟化物配合物。
在各實施方案中，氟化物是氟化氫、氟(f2)、lif、kf、naf、csf、agf2、cuf2、fclo3、sf4、xef2、acof、(phso2)2nf、et2nsf3、et3n·(hf)2-5、et4nf·(hf)2-5、et4n·bf4、(phso2)2nf(nfsi)、n-氟鄰苯二磺酰亞胺(nfobs)、et2nsf3(dast)、(meoch2ch2)2nsf3
在各實施方案中，反應混合物包括相轉移添加劑。例如，相轉移添加劑可包括醚、季銨鹽或季鏻鹽。在一些實施方案中，反應混合物包括冠醚。在一些實施方案中，反應混合物包括聚醚。在某些實施方案中，反應混合物包括二甲氧基乙烷(dme)。在一些實施方案中，反應混合物包括聚乙二醇。在某些實施方案中，反應混合物包括二甘醇、三甘醇、四甘醇、五甘醇、六甘醇、peg200、peg300或peg400。在具體實施方案中，反應混合物包括三甘醇、四甘醇或peg200。
在各實施方案中，反應混合物包括電解質相。例如，電解質相包括氟化氫和一定量的底物。在一些實施方案中，底物可溶于或分散在液體氟化氫中。底物可以是液體、固體或氣態(tài)蒸汽形式，并且可以根據其物理狀態(tài)適當地引入到氟化氫中。因此，在一些實施例中，氣態(tài)底物是通過氟化氫使底物鼓泡或者在壓力下將底物加入到池中來引入。在一些實施方案中，將固體或液體底物溶解或分散在氟化氫中。在一些實施方案中，將底物作為溶解在含氟化合物相中的溶質來引入池中，如本文進一步詳細描述的那樣。
雖然不希望受任何特定理論的束縛，但是認為含氟化合物相作為在無水氟化氫電解質中溶解度相對較差但在含氟化合物相中溶解度卻高得多的底物的“存儲器”。超過可溶解在氟化氫相中的底物的量將被含氟化合物相溶解，從而防止底物在池中分別積聚而形成底物相。
在各實施方案中，含氟化合物相包括使底物相對于電解質相(hf)具有相對更高的溶解度的任何含氟化合物材料，由此能夠溶解不能被hf相溶解的底物，從而防止形成分離的底物相。例如，含氟化合物相可以包括電化學氟化產物。
在各實施方案中，本發(fā)明中的含氟化合物相是全氟化合物。例如，含氟化合物相可包括全氟烷烴、五氟硫烷基取代的全氟烷烴、全氟環(huán)烷烴、全氟胺、全氟醚、全氟聚醚、全氟氨基醚、全氟烷基磺酰氟、或全氟羧酸氟化物。在一些實施方案中，含氟化合物相包括全氟烷烴。在一些實施方案中，該類化合物對于每兩個碳原子可以含有一些氫或氯，例如優(yōu)選小于一個氫原子或氯原子，但優(yōu)選基本上完全氟化。在某些實施方案中，含氟化合物相包括全氟丁烷、全氟異丁烷、全氟戊烷、全氟異戊烷、全氟己烷、全氟甲基戊烷、全氟庚烷、全氟甲基己烷、全氟二甲基戊烷、全氟辛烷、全氟異辛烷、全氟壬烷、全氟癸烷、1-五氟硫烷基全氟丁烷、1-五氟硫烷基全氟戊烷、1-五氟硫烷基全氟己烷、全氟環(huán)丁烷、全氟(1，2-二甲基環(huán)丁烷)、全氟環(huán)戊烷、全氟環(huán)己烷、全氟三甲基胺、全氟三乙胺、全氟三丙胺、全氟甲基二乙胺、全氟三丁胺、全氟三戊胺、全氟丙基四氫呋喃、全氟丁基四氫呋喃、全氟聚(四氫呋喃)、全氟(n-甲基嗎啉)、全氟(n-乙基嗎啉)、全氟(n-丙基嗎啉)、全氟丙磺酰氟、全氟丁烷磺酰氟、全氟戊烷磺酰氟、全氟己烷磺酰氟、全氟庚烷磺酰氟、全氟辛烷磺酰氟、全氟己酰氟、全氟辛酰氟或全氟癸酰氟。
在各實施方案中，將含氟化合物相作為單獨進料或連續(xù)進料引入本文所述的ecf池。在一些實施方案中，將含氟化合物相作為單獨進料引入。
在各實施方案中，hf與底物的比率在約1∶1至約5,000∶1的范圍內。在一些實施方案中，hf與底物的比例為約75∶25至約2,000∶1。在某些實施方案中，hf與底物的比例為約90∶1至約2,000∶1。在某些實施方案中，hf與底物的比例為約100∶1至約1,500∶1。在某些實施方案中，hf與底物的比例為約100∶1至約1,000∶1。在某些實施方案中，hf與底物的比例為約100∶1至約800∶1。在某些實施方案中，hf與底物的比例為約100∶1至約600∶1。在某些實施方案中，hf與底物的比例為約100∶1至約400∶1。
在各實施方案中，反應溶液包括電解組分。不希望受到任何具體理論的束縛，電解組分有助于電流通過反應溶液。例如，電解組分可以包括有機化合物或無機化合物。在一些實施方案中，電解組分包括硫醇、酯、酸酐、二硫化物或離子鹽。在某些實施方案中，電解組分包括丁基硫醇、甲基硫醇、二甲基二硫醚或氟化物鹽。在具體實施方案中，電解組分包括氟化鉀或氟化鋰。根據本發(fā)明，其它有用的導電化合物也可用于電化學氟化。
在各實施方案中，將電解組分以使反應溶液充分導電來進行底物的氟化的任何量加入到反應溶液中。例如，只要達到反應溶液的電導率的可用量，優(yōu)選電解組分的最小量。在一些實施方案中，電解組分的量小于底物量的20重量％。在某些實施方案中，電解組分的量小于底物量的約10重量％。在具體實施方案中，電解組分的量小于底物量的約5重量％。
在各實施方案中，反應溶液包括溶劑。例如，溶劑可以是能夠溶解底物但對氟化是基本惰性的任何溶劑。在一些實施方案中，溶劑包括乙腈、硝基甲烷、醚或鹵代溶劑。在某些實施方案中，溶劑包括乙腈。在某些實施方案中，溶劑包括1，2-二甲氧基乙烷。在某些實施方案中，溶劑包括二氯甲烷。在某些實施方案中，溶劑包含硝基甲烷。在某些實施方案中，溶劑包含氟化溶劑。
通常，電化學氟化在使得底物氟化可用程度的任何溫度下進行。在各實施方案中，電化學氟化在約-20℃至約80℃的溫度下進行。在一些實施方案中，電化學氟化在約20℃至約65℃的溫度下進行。在某些實施方案中，電化學氟化在約20℃至約40℃下進行。在某些實施方案中，電化學氟化在約20℃至約30℃下進行。在某些實施方案中，電化學氟化在約20℃至約25℃。在某些實施方案中，電化學氟化在約20℃至約23℃(有時稱為“環(huán)境溫度”)下進行。在具體實施方案中，電化學氟化在約20℃下進行。在具體實施方案中，電化學氟化在約21℃下進行。在具體實施方案中，電化學氟化在約22℃下進行。在具體實施方案中，電化學氟化在約23℃下進行。在具體實施方案中，電化學氟化在約24℃下進行。在具體實施方案中，電化學氟化在約25℃下進行。在具體實施方案中，電化學氟化在約30℃下進行。在具體實施方案中，電化學氟化在約35℃下進行。
在各實施方案中，電化學氟化在約環(huán)境壓力(大氣壓)至約65psig(4.48×105pa)的壓力下進行。在一些實施方案中，電化學氟化在約5至約45psig(約0.34×105至3.10×105pa)的壓力下進行。在一些實施例中，電化學氟化在這些范圍之外的壓力下進行。
通過反應溶液的電力可以是使得底物氟化的任何量，如由包括電流、電壓和電功率的參數所描述的。在各種實施方案中，電化學氟化的電流至少在反應的某一時間內是基本恒定的。在一些實施方案中，對于至少一半的反應，電化學氟化的電流是基本恒定的。
在各實施例中，電化學氟化的電流被中斷。例如，電化學氟化的電流是周期性的。在一些實施方案中，電化學氟化的電流是循環(huán)的。在某些實施方案中，電化學氟化的電流是方波、基本方波、正弦波或其它周期循環(huán)。在具體實施方案中，電化學氟化的電流是方波或基本方波。在各種實施例中，電化學氟化的電壓在反應的至少一定時間內是基本恒定的。在各實施方案中，對于至少一半的反應，電化學氟化的電壓是基本恒定的。
在各實施例中，電化學氟化的電壓被中斷。例如，電化學氟化的電壓是周期性的。在一些實施方案中，電化學氟化的電壓是循環(huán)的。在某些實施方案中，電化學氟化的電壓為方波、基本方波、正弦波或其它周期循環(huán)。在具體實施方案中，電化學氟化的電壓是方波或基本方波。
在各實施方案中，電化學氟化的電功率在反應的至少一定時間內是基本恒定的。在各實施方案中，對于至少一半的反應，電化學氟化的電功率是基本恒定的。在各實施方案中，電化學氟化的電功率被中斷。例如，電化學氟化的電功率是周期性的。在一些實施方案中，電化學氟化的電功率是循環(huán)的。在某些實施方案中，電化學氟化的電功率為方波、基本方波、正弦波或其它周期循環(huán)。在具體實施方案中，電化學氟化的電功率是方波或基本方波。
可以通過任何已知和可用的控制電化學氟化池中的電的方法來影響周期性電流循環(huán)。由于電化學氟化池中的池電阻相對恒定，因此，可以通過控制整個反應溶液上的電壓、流過反應溶液的功率或流過反應溶液的電流中最方便的任何一個來周期性循環(huán)電流。通常，最容易控制的電氣參數是施加在氟化池上的電壓。因此，盡管本發(fā)明考慮了在電化學氟化池中提供循環(huán)電流的所有可能的方法，但也會通過控制施加在反應溶液上的電壓以提供(給定相對穩(wěn)定的池電阻)流過反應溶液的周期性循環(huán)的電流以及類似地周期性循環(huán)的電功率的方式來描述說明書的各部分內容。
在各實施方案中，流過電化學氟化的電力包括第一電流密度。在一些實施方案中，電化學氟化的第一電流密度為約1至約400ma/cm2。在某些實施方案中，電化學氟化的第一電流密度為約100至約200ma/cm2。在某些實施方案中，電化學氟化的第一電流密度為約10至約100ma/cm2。在某些實施方案中，電化學氟化的第一電流密度為約1至約10ma/cm2。在具體實施方案中，電化學氟化的第一電流密度為約1、約2、約3、約4、約5、約6、約7、約8、約9、約10、約11、約12、約13、約14、約15、約16、約17、約18、約19、約20、約21、約22、約23、約24、約25、約26、約27、約28、約29或約30ma/cm2。在具體實施方案中，電化學氟化的第一電流密度為約100、約105、約110、約115、約120、約125、約130、約135、約140、約145、約150、約155、約160、約165、約170、約175、約180、約185、約190、約195或約200ma/cm2。
在各種實施方案中，流過電化學氟化的電力包括第二電流密度。在一些實施方案中，電化學氟化的第二電流密度基本為零。例如，電化學氟化的第二電流密度在約0至約2ma/cm2的范圍內。
在各實施方案中，流過電化學氟化的電力包括第一電壓。在各種實施方案中，流過電化學氟化的電力包括第二電壓。在一些實施方案中，第一電壓在約4.2至約9伏(v)的范圍內。在某些實施方案中，第一電壓在約4.5至約6v的范圍內。在各種實施方案中，第二電壓是能夠使基本上沒有電流流過反應溶液的任何電壓。在各種實施方案中，第一電壓是基本恒定的。在各實施例中，第一電壓在整個脈沖循環(huán)內變化。
一般來說，可以通過任何用于提供通過反應溶液的周期性中斷的電流的控制手段來控制流過電化學氟化的電流。許多這樣的控制手段被本領域技術人員理解為電和電化學氟化。在各實施方案中，通過將陽極和陰極連接到包括具有兩個預定電壓設定點的循環(huán)計時器的電源來周期性地中斷(即，減小)施加到反應溶液的電壓，一個設定點對應于升高的電壓，另一個設定點對應于降低的電壓。在各實施方案中，定時器以預選的定時間隔在這兩個設定點之間循環(huán)。在一些實施方案中，通過使用可編程邏輯控制器(plc)控制電源上的電流來實現通過反應溶液的周期性循環(huán)電流。
在各實施方案中，流過電化學氟化的電流的循環(huán)為0.4、1.5、3、10、30、150或300秒。
在各實施方案中，電化學氟化需要約0.1小時至約50小時。例如，本發(fā)明的電化學氟化需要約0.1、約0.2、約0.3、約0.4、約0.5、約0.6、約0.7、約0.8、約0.9、約1、約2、約3、約4、約6、約7、約8、約10、約11、約12、約13、約14、約15、約16、約17、約18、約19、約20、約21、約22、約23、或約24小時。在一些實施方案中，電化學氟化需要約0.2小時。在一些實施方案中，電化學氟化需要約0.4小時。在一些實施方案中，電化學氟化需要約0.5小時。在一些實施方案中，電化學氟化需要約1小時。在一些實施方案中，電化學氟化需要約5小時。在一些實施方案中，電化學氟化需要約10小時。在一些實施方案中，電化學氟化需要約20小時。在一些實施方案中，電化學氟化需要約22小時。
在各實施方案中，進行電化學氟化，直到達到一定的轉化率。在一些實施方案中，轉化率為至少5％。在一些實施方案中，轉化率為至少10％。在一些實施方案中，轉化率為至少20％。
在各實施方案中，進行電化學氟化直到產物生成。如本文詳細討論的，通過使用可以是lc-ms的分析方法來監(jiān)測電化學氟化。例如，本發(fā)明中的質譜可以用作檢測器，并且檢測質量可以設置在底物質量(mw)和底物質量加上18(mw+18)。在一些實施方案中，進行電化學氟化，直到檢測到產物。
本發(fā)明的一個方面是通過使用本文所述的方法獲得的單氟化化合物。不希望受任何特定理論的束縛，ecf可以產生其中一個或多個連接到碳上的氫被一個或多個氟原子取代的化合物；并且不希望受任何特定理論的束縛，ecf可以產生其中氟取代是不可預測的化合物。然而，在各實施方案中，調整本發(fā)明的ecf的條件，使得生成單氟化化合物(即每個化合物僅具有一個被氟取代的碳結合的氫)。在一些實施方案中，ecf產生一種單氟化化合物。在一些實施方案中，ecf產生兩種單氟化化合物。在一些實施方案中，ecf產生三種或更多種單氟化化合物。
在各實施方案中，在檢測到其它產物之前進行電化學氟化。在一些實施方案中，其它產物包括單氟化化合物。在一些實施方案中，其它產物包括二氟化化合物。在一些實施方案中，其它產物包括多氟化化合物。在某些實施方案中，其它產物包括單氟化化合物、二氟化化合物或多氟化化合物的衍生物。
如本文所討論的，在某些實施方案中，使得電化學氟化進行約5小時。在某些實施方案中，使得電化學氟化進行約10小時。在某些實施方案中，使得電化學氟化進行約20小時。在某些實施方案中，使得電化學氟化進行約25小時。
可以進行電化學氟化的電化學氟化池(本文中也稱為“池”、“氟化池”或“ecf池”)可以是電化學氟化技術中已知的任何常規(guī)的電化學氟化池。一般來說，一個合適的氟化池可以由包括池體和電極的組件構成，池體包括能夠容納反應溶液的反應容器，而電極可以浸沒到反應溶液中以使電流通過反應溶液。例如，美國專利第2,519,983號、第741,399號和第785,492號描述了實踐中可用于本發(fā)明的電化學氟化池。不希望受以下實施例的束縛，圖1a和圖1b示出了兩個示例性的ecf池。在圖1a中，ecf池包括立方體反應容器。在圖1b中，ecf池包括圓柱形反應容器。在其它各實施方案中，ecf池包括其他形狀的反應容器，只要電化學氟化可以進行即可。
在各實施方案中，本發(fā)明的反應容器構造來容納任何體積的反應溶液。在一些實施方案中，反應容器的有效體積為約0.5ml、約1ml、約2ml、約5ml、約10ml或約15ml。在某些實施方案中，反應容器的有效體積為約1ml。
在各實施方案中，本發(fā)明的ecf池由
其他有用的電化學氟化池包括電化學氟化技術中通常已知的流動池。流動池包括使用強制循環(huán)使反應溶液在陽極和陰極的表面上流動的一組(每個之一)，一堆或一系列陽極和陰極。這些類型的流動池通常被稱為單極流動池(具有單個陽極和單個陰極，任選地以多于單個板的形式，如常規(guī)電化學氟化池)，以及雙極流動池(具有一系列陽極和陰極)。
在各種實施例中，陽極由包括al、co、cr、cu、mg、ti、zn、zr、fe、co、ni、pt或包含它們的合金材料制成。在一些實施例中，陽極由包括fe、co、ni、pt或包含它們的合金的材料制成。在某些實施例中，陽極由包括ni或pt的材料制成。在具體實施方案中，陽極包括ni。在具體實施方案中，陽極包括pt。在各實施方案中，陰極由包含ni、fe、cu、pt，包含它們的合金或c的材料制成。在一些實施方案中，陰極由包括ni或pt的材料制成。在某些實施方案中，陰極包括ni。在某些實施方案中，陰極包括pt。
本發(fā)明的底物可以以任何順序被引入到ecf池中，只要是可行的。在各實施方案中，將本發(fā)明的底物加入到容納有無水氟化氫的ecf池中。在各實施方案中，本發(fā)明的底物和無水氟化氫同時加入到ecf池中。在各實施方案中，將本發(fā)明的底物加入到ecf池中，然后加入無水氟化氫。在一些實施方案中，無水氟化氫以含氟化合物相的溶液加入。在一些實施方案中，將底物以含氟化合物相的溶液加入。在一些實施方案中，將底物任選地以含氟化合物相的溶液加入到ecf池中。
反應混合物可以針對各種性質進行篩選。在各實施方案中，基于對生物靶標的親和力或活性、人微粒體穩(wěn)定性、pampa滲透性、血漿蛋白結合力、血腦屏障(bbb)滲透性或藥物制劑中的溶解度，篩選反應混合物。在一些實施方案中，基于對用于篩選底物的生物靶標的親和力，篩選反應混合物。在一些實施方案中，基于對沒有用于篩選底物的生物靶標的親和力，篩選反應混合物。
示例性地，生物靶標可以包括蛋白質，包括重組蛋白質、糖蛋白、糖胺聚糖、蛋白聚糖、整聯蛋白、酶、凝集素、選擇子(selecting)、細胞粘附分子、毒素、細菌性皮脂、轉運蛋白、參與信號轉導或激素結合的受體、激素、抗體、主要組織相容性復合物、免疫球蛋白超家族、鈣黏著蛋白、dna或dna片段、rna和rna片段、全細胞、細胞片段、組織、細菌、真菌、病毒、寄生蟲、前子及其合成類似物或衍生物。在某些實施方案中，生物靶標包括蛋白質或其片段。在具體實施方案中，蛋白質是激酶、蛋白酶、肽酶、核激素受體、蛋白質復合物、g蛋白偶聯受體(gpcr)、蛋白質-蛋白質相互作用靶標或轉錄因子。
在各實施方案中，直接對反應混合物進行篩選，這意味著反應混合物與生物靶接觸，通過檢測方法檢測所得的復合物。例如，反應混合物中的組分可以與生物靶標形成共價或非共價復合物，并且可以通過各種基于質譜(ms)的方法檢測這些復合物。在一些實施方案中，檢測方法是片段基先導組裝、納米電噴霧ms、多靶標親和/特異性篩選、通過電噴霧離子化(esi)-ms(dolce-ms)或esi-電子俘獲解離檢測寡核苷酸-配體復合物，其中每一種方法通常是本領域普通技術人員已知的。
對于親和力研究，還可以使用親和分離技術，包括：超濾、分子排阻色譜、透析和/或親和層析。wanner，k.等人，massspectrometryinmedicinalchemistry：applicationsindrugdiscovery，volume36，wiley2007以及comess，k.m.andschurdak，m.e.，affinity-basedscreeningtechniquesforenhancingleaddiscovery，currentopinionindrugdiscovery&development2004，7(4)，411-416中描述了這些親和分離技術，其各自通過引用整體并入本文。
與lc-ms或nmr等檢測方法聯用的這些技術可用于測定混合物組分的相對親和力。對于混合物的活性測量，可以將lc-ms與在線生物反應器聯合使用，其中之一描述于vanliempd，s.m.，等人on-lineformation，separation，andestrogenreceptoraffinityscreeningofcytochromep450-derivedmetabolitesofselectiveestrogenreceptormodulators，drugmetabolismanddisposition，2006，34(9)，1640-1649以及dejong，c.f.，等人high-performanceliquidchromatography-massspectrometry-basedacetylcholinesteraseassayforthescreeningofinhibitorsinnaturalextracts，journalofchromatographya，2006，1112，303-310，其全部內容通過引用整體并入本文。因此，在各實施方案中，通過使用自動配體識別系統(alis)、speedscreen、具有m檢測s的前沿親和層析、親和捕獲-ms、親和毛細管電泳-ms、超濾-ms或脈沖超濾-ms來篩選反應混合物，其中每一種方法通常為本領域普通技術人員所知。在一些實施方案中，使用minispintm柱篩選反應混合物。
對于人肝微粒體穩(wěn)定性實驗，可以將本發(fā)明的反應混合物與人肝微粒體制劑一起培養(yǎng)，并在培養(yǎng)之前和之后用lc-ms或nmr測量混合物組分的濃度。
pampa滲透性，是口服藥物被腸道系統吸收的能力的指標，可以使用專用的pampa平板進行化合物滲透性實驗，并使用lc-ms測量pampa膜不同兩側的化合物濃度(頂端和底端)來計算滲透性。
對于血漿蛋白結合力，可以用透析板通過lc-ms測量來測量混合物組分的游離和結合部分。
如果反應混合物對生物靶標顯示出期望的性質，則可以純化反應混合物來鑒定產生期望性質的組分。性質可以包括但不限于：親和力、活性、人微粒體穩(wěn)定性、膜通透性、血漿蛋白結合力、血腦屏障(bbb)滲透性或在藥物制劑中的溶解度。
在各實施方案中，通過液相色譜(lc)純化反應混合物以分離反應混合物中的每種組分。例如，lc可以是高壓lc(hplc)或制備lc(preplc)。在各實施方案中，由ms鑒定每個組分，該ms任選地與另一ms連接，另一ms任選地與又一ms連接。在某些實施方案中，分離反應混合物，通過lc-ms，lc-ms-ms或lc-ms-ms-ms鑒定組分。在各實施方案中，通過使用preplc純化反應混合物。用于化合物收集的ms檢測和觸發(fā)可以幫助從混合物中純化所選擇的組分。blomk.f.，等人preparativelc-mspurification：improvedcompound-specificmethodoptimization，jcombchem.2004，6(6)，874-83中描述了這種方法的實例，并通過引用整體并入本文。
在各實施方案中，通過使用lc-ms、lc-ms-ms或lc-ms-ms-ms鑒定具有期望性質的組分。在各實施方案中，通過使用其它分析方法鑒定具有期望性質的組分。例如，其他的分析方法可以包括核磁共振或x射線衍射。在需要更大量的反應混合物的實施方案中，電化學氟化可以按比例放大或重復以產生足夠的材料用于分離。
在各實施方案中，期望的性質包括與底物相同的性質。在各實施方案中，期望的性質包括與底物相同和改進的性質。在各實施方案中，期望的性質包括不同的性質。在一些實施方案中，期望的性質包括不同但有用的性質。
在本發(fā)明的反應混合物中期望的組分的結構確定之后，可以獲得足夠量的純形式的期望的組分，用于體外測試以確定其相對于起始底物的性質。當化合物的結構完全確定時，可以通過混合物的分離和純化或通過化合物的有機合成獲得足夠量的所描述的重復或放大的電化學氟化。
在分離和純化以獲得足夠量之后，可以單獨測試底物的反應混合物中期望的組分以確認相對于底物的性質。
具有本領域普通技能的人可以理解本發(fā)明的一個方面是底物的電化學氟化，直接或間接地用生物靶標篩選反應混合物，以及確認和/或鑒定具有期望和/或改進性質的一種或多種含氟化合物的組合。在各實施方案中，這種組合有助于及時鑒定具有期望和/或改進性質的氟化化合物。不打算對任何現有的藥物發(fā)現過程進行描述，本發(fā)明的方法通常加速藥物發(fā)現過程。例如，鑒定一種或多種具有期望和/或改進性能的氟化化合物可能需要不超過10天。在一些實施方案中，用電化學氟化改性底物，篩選氟化混合物，并確認和/或鑒定一種或多種具有期望和/或改進性質的氟化化合物需要不超過9天、8天、7天、6天、5天、4天、3天、2天或1天。在某些實施方案中，用電化學氟化改性底物，篩選氟化混合物，并確認和/或鑒定一種或多種具有期望和/或改進性質的氟化化合物需要不超過3天，2天或1天。在具體實施方案中，用電化學氟化改性底物，篩選氟化混合物，并確認和/或鑒定一種或多種具有期望和/或改進性質的氟化化合物需要不超過2天或1天。
本發(fā)明的另一方面涉及通過本發(fā)明的方法鑒定的具有期望性質的組分。在各實施方案中，組分包括一種化合物。在各實施方案中，組分包括兩種或多種化合物。
本發(fā)明的另一方面涉及與本發(fā)明的方法一起使用的系統。例如，該系統可以包括lc-ms或lc-ms-ms。
以下實施例旨在說明本發(fā)明的某些實施方案，沒有示例出本發(fā)明的全部范圍，因此不應被解釋為限制本發(fā)明的范圍。
實施例1：羅格列酮的電化學氟化
將羅格列酮(10mg)溶解于0.3met4nf·4hf的乙腈溶液(10ml)中。將溶液轉移到
圖2a和圖2b示出了在反應開始之前，反應混合物的示例性lc-ms色譜圖，其中ms檢測器分別設置為(18+h+羅格列酮的分子量(mw))和(h+羅格列酮的mw))。圖2c和圖2d示出了在反應開始之前，反應混合物的示例性lc色譜圖，其中二極管陣列檢測器(dad)和ms檢測器分別檢測總離子電流。
圖3a和圖3b示出了在反應開始后10小時，反應混合物的示例性lc-ms色譜圖，其中ms檢測器分別設定為(18+h+羅格列酮的mw)和(h+羅格列酮的mw)。圖3c和圖3d示出了在反應開始后10小時，反應混合物的示例性lc色譜圖，其中二極管陣列檢測器(dad)和ms檢測器分別檢測總離子電流。
實施例2：替米沙坦的電化學氟化
替米沙坦(10mg)溶解于0.3met4nf·4hf的乙腈溶液(10ml)中。將溶液轉移到
圖4a和圖4b示出了在反應開始之前，反應混合物的示例性lc-ms色譜圖，其中ms檢測器分別設置為(18+h+替米沙坦的mw)和(h+替米沙坦的mw)。圖4c和圖4d示出了在反應開始之前，反應混合物的示例性lc色譜圖，其中二極管陣列檢測器(dad)和ms檢測器分別檢測總離子電流。
圖5a和圖5b示出了在反應開始后22小時，反應混合物的示例性lc-ms色譜圖，其中ms檢測器分別設定為(18+h+替米沙坦的mw)和(h+替米沙坦的mw)。圖5c和圖5d示出了在反應開始后22小時，反應混合物的示例性lc色譜圖，其中二極管陣列檢測器(dad)和ms檢測器分別檢測總離子電流。
實施例3：索拉非尼的電化學氟化
索拉非尼(5mg)溶解于0.3met4nf·4hf的乙腈溶液(10ml)中。將溶液轉移到
圖6a和圖6b顯示了在反應開始之前，反應混合物的示例性lc-ms色譜圖，其中ms檢測器分別設置為(18+h+索拉非尼的mw)和(h+索拉非尼的mw)。圖6c和圖6d示出了在反應開始之前，反應混合物的示例性lc色譜圖，其中二極管陣列檢測器(dad)和ms檢測器分別檢測總離子電流。
圖7a和圖7b示出了在反應開始后10小時，反應混合物的示例性lc-ms色譜圖，其中ms檢測器分別設定為(18+h+索拉非尼的mw)和(h+索拉非尼的mw)。圖7c和圖7d示出了在反應開始后10小時，反應混合物的示例性lc色譜圖，其中二極管陣列檢測器(dad)和ms檢測器分別檢測總離子電流。
通過使用與實施例1-3中所述類似的方法，將以下化合物氟化：
實施例4：索拉非尼的ecf反應混合物對vegfr-2的親和力選擇-質譜篩選
用合適的pms緩沖液調節(jié)minispintm色譜柱(nestgroup)。將ecf反應混合物與過量的靶標蛋白質溶液混合，并培養(yǎng)所得混合物。將ecf反應混合物和靶標蛋白質溶液的混合物加到經調節(jié)的minispintm柱上，將其在高速離心機中離心。通過lc-ms分析每個洗脫液。洗脫液中單氟化產物的存在表明單氟化產物與靶標蛋白質結合，從minispintm柱洗出單氟化產物-靶標蛋白質復合物。因此，單氟化產物是期望的化合物。
具體地，將1μl氟化索拉非尼混合物(上述實施例3)與20μl磷酸鹽-緩沖鹽水(pbs)緩沖液混合。溶液在室溫下放置30分鐘。將20μl該溶液加入到pbs緩沖液調節(jié)的g-25旋轉柱(nestgroup)中。將柱在2,000rpm離心3分鐘。通過lc-ms分析洗脫液。圖8a和8b示出了在用旋轉柱處理之前，反應混合物的示例性lc-ms色譜圖，其中ms檢測器分別設置在(18+h+索拉非尼的mw)和(h+索拉非尼的mw)；圖9a和圖9b顯示了在用旋轉柱處理后，反應混合物的示例性lc-ms色譜圖，其中ms檢測器分別設置在(18+h+索拉非尼的mw)和(h+索拉非尼的mw)。如圖9a和圖9b所示，在洗脫液中未檢測到索拉非尼及其氟化化合物。
將1μl氟化索拉非尼混合物(上述實施例3)與20μl的15μmvegfr-2混合。將溶液在室溫下培養(yǎng)30分鐘，然后將20μl該溶液加到pbs緩沖液調節(jié)的g-25旋轉柱(nestgroup)上。將柱在2,000rpm離心3分鐘。洗脫液進行l(wèi)c-ms分析。圖10a和10b示出了在用旋轉柱處理之后，反應混合物的示例性lc-ms色譜圖，其中ms檢測器分別設置在(18+h+索拉非尼的mw)和(h+索拉非尼的mw)。如圖10a和圖10b所示，在洗脫液中檢測到索拉非尼及其單氟化化合物，表明索拉非尼和單氟化化合物均與vegfr-2結合。
盡管本文中描述和示出了本發(fā)明的幾個實施方案，但本領域普通技術人員容易想到用于實現功能和/或獲得結果和/或一個或多個本文描述的優(yōu)點的各種其他手段和/或結構，每一個所做的這種變化和/或修改也被認為包括在本發(fā)明的范圍內。更通常地，本領域技術人員容易理解，本文所述的所有參數、尺寸、材料和構造意在是示例性的，并且實際的參數、尺寸、材料和/或構造取決于應用本發(fā)明的具體應用或應用。本領域技術人員能夠識別或能夠使用常規(guī)實驗及等同物來確定所描述的本發(fā)明的具體實施方案。因此，應當理解，前述實施方案僅作為示例來呈現，并且在所附權利要求及其等同物的范圍內，本發(fā)明可以通過與具體描述和要求保護的不同的方式實施。本發(fā)明涉及所描述的每個單獨特征和/或方法。此外，如果這些特征和/或方法不相互矛盾，則兩個或更多個這樣的特征和/或方法的任何組合都包括在本發(fā)明的范圍內。
提供所公開的實施方案的上述描述以使本領域任何技術人員能夠制作或使用本發(fā)明。對這些實施方案的各種修改對于本領域技術人員將是顯而易見的，并且在不脫離本發(fā)明的精神或范圍的情況下，本文所述的一般原則可應用于其它實施方案。因此，應當理解，本文的說明書和附圖是代表本發(fā)明廣泛預期的主題。還應當理解，本發(fā)明的范圍不旨在限制本文所示的實施方案，而是符合專利法以及本文所公開的原則和新穎特征相一致的最寬范圍。
本文也描述了所要求保護的公開的替代實施方案。其中，所公開的實施方案的變化對于本領域普通技術人員在閱讀上述公開內容后變得顯而易見。本發(fā)明人期望技術人員適當地使用這種變化(例如，改變或組合特征或實施方案)，并且本發(fā)明人意圖以不同于本文中具體描述的方式實施本發(fā)明。
因此，本發(fā)明包括根據適用法律允許的所附權利要求中列舉的主題的所有修改和等同物。此外，除非本文另有說明或上下文明顯矛盾之外，本發(fā)明涵蓋了所有可能變化的上述元素的任何組合。
本文引用的所有參考文獻，包括出版物，專利申請和專利以相同程度通過引用并入本文，就像每個參考文獻被單獨地和具體地通過引用并入并且在全文進行闡述。
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