專利名稱:體液取樣方法
將少量血液采集在一張濾紙上并進行處理作為測試的簡便性已經(jīng)在采用干燥血樣對由于血液攜帶的疾病(如獲得性免疫缺陷綜合癥)的篩選檢測方面是很有價值的。該技術相對于利用冷凍,離心作用分離血液和昂貴的一次性物品的大量供應方面受到限制的傳統(tǒng)方法具有明顯的優(yōu)點。采集在濾紙上并干燥的全血血樣還比通過靜脈穿刺采集的血樣更容易運輸且更安全。
全國性地采用干燥的新生兒血樣進行人類免疫缺陷病毒1型(HIV-1)血清流行病調(diào)查對于評估產(chǎn)婦中的血清流行病情況是很關鍵的。然而,對于HIV-1抗體測試來說,未包含被認為″數(shù)量不充分″(QNS)的血樣潛在地引起偏差。在利用干燥的新生兒血樣的HIV-1血清流行病調(diào)查中,QNS率可以通過采用多個1/8英寸的DBS分析樣品降低,所說的樣品用標準的1/4英寸穿孔測試是數(shù)量上不足的。通過降低QNS率,采用多個1/8英寸血點可能是保證-HIV-1血清流行病評估準確性的一種有效方式。Redus等人(″在產(chǎn)婦調(diào)查中采用1/8英寸穿孔所得樣片法降低QUS率并改善血清流行的評估″,疾病控制和預防中心(Centers for Disease Control and Prevention,Atlanta,Georgia),Hoxie等人(″改善產(chǎn)婦中HIV-1血清流行病評估采用更小的血點″,Am.J.Pub.Health,1992年10月,第82卷,第10號,第1370-1373頁)以及Tappin等人(″在對新生兒的離體無名測試基礎上,蘇格蘭的母親HIV感染流情況″,The Lancet″,,第337卷,1991年6月29日,第1565-1567頁)已經(jīng)描述了在無法獲得1/4英寸穿孔所得樣片時,采用小于1/4英寸的DBS和四個1/8英寸直徑的穿孔所得樣片來替代一個1/4英寸直徑的穿孔。
用來對患者樣本進行測試的免疫測定法通常最優(yōu)選的是在給定樣本中,對最小量的特定抗體進行最大限度的檢測。由于標準作法,這些測試需要必要的由一個普通人提供的一個1/4英寸或多個1/4英寸的DBS穿孔所得樣片的份額。因此,所需樣本比標準尺寸的穿孔所得樣片所能提供的樣本要多。采用標準尺寸的穿孔所得樣片通常不可能完成全部測試。例如,酶免疫測定法需要從分開的DBS穿孔樣片中洗提,用于測試以及隨后的確定性測試法需要從公開的DBS中另外的洗提。
當大多數(shù)普通人只能提供一個產(chǎn)生一個比所需的1/4英寸穿孔樣片更小尺寸的穿孔樣片的DBS時,要求一個1/4英寸的穿孔樣片是對一致率的一種限制。而且,由于圓圈的幾何形狀,為了從一個DBS中獲得四個1/8英寸的點,需要至少一個完整的1/2英寸的DBS,或者具有各種不同的大于1/8英寸直徑的點的混合。在臨床或醫(yī)院實驗室設置中,當從新生兒中獲取樣本時,上述情況是可能的。但是對于一個普通人來說這就是一個不實際的要求。因此,需要一種方法以便從相同的DBS中穿孔得到大量的低于標準尺寸以下的DBS,所述相同的DBS總體上等同于特定的測試法所需的標準穿孔尺寸。
本發(fā)明的一個目的就是提供一種從一個單個干燥血點中獲得多于一個穿孔樣片的方法。
本發(fā)明的另一個目的就是提供一種方法,即,在一個單個干燥血點中取得一個第一穿孔所得樣片并接著在同一干燥血點中取得一個第二穿孔所得樣片,且第二穿孔所得樣片的邊界至少部分地位于第一穿孔所得樣片邊界的外側。
本發(fā)明還有另一個目的就是提供一種取得至少一個第一和第二穿孔所得樣片的方法,其中兩個穿孔所得樣片加在一起具有測試干燥血點所需的最小表面積。
從對本說明書的其余部分及權利要求書的閱讀中,這些及其它目的將會是顯而易見的。
圖1是從一個干燥血斑點中獲得的一個以上同心穿孔所得的示意圖。
圖2是從一個干燥血斑點中獲得一個以上偏心穿孔所得樣片的示意圖。
本發(fā)明提供了一種從一個單個體液斑點中獲得一個以上穿孔的方法。該方法對于任何可以在適當介質(zhì)上被制成斑點的體液(如血液、尿液、淚液、唾液等)都具有實用性。斑點的尺寸和形狀受到體液在其上被吸收的介質(zhì)、用來制成體液斑點的打點裝置以及受到將被用來分析斑點的測定法的限制。
尤其是,本發(fā)明在分析干燥血樣中對血液攜帶的疾病(如獲得性免疫缺陷綜合征)篩選測試具有實用性。通常采用包含(但并非限定性的)任何酶免疫測定,確定性測試以及采用聚合物酶的鏈反應的放大技術在內(nèi)的已知測定法對這種樣本或干燥血斑通常用于HIV抗體的測試。
本發(fā)明在下列情況中也具有實用性二苯酮尿癥、代謝功能障礙(如半乳糖血癥)支鏈酮尿癥、甲狀腺機能亢進、鐮狀細胞性貧血、麻診的篩選、風疹免疫測試、糖尿病篩選以及監(jiān)測血液中鉛含量。
當測試HIV抗體,可以利用Confide卡采集每個人的血樣。Confide卡是一份待審批專利申請中的發(fā)明主題并包含一種測試條,該測試條具有一層夾在兩層涂覆的紙板中間的濾紙,兩紙板還帶有一個將測試條的前面和后面曝露出來的窗口或切口區(qū)域。在測試條窗口的前面上印有三個約5/16英寸的圓圈,而在后面印有三個約1/4英寸的與每個前面的圓圈同心的圓圈。測試條的濾紙符合由臨床實驗室標準國家委員會(National Committee for ClinicalLaboratory Standards)制定的規(guī)格??ǖ氖褂谜呖梢酝ㄟ^將一滴血施放在濾紙部分上來收集血液。濾紙上的這滴血最終成為所稱的干燥血點(DBS)。
還可以采用疾病控制中心規(guī)程(the Centers for DiseaseControl Procedure)的″制備干燥血點物質(zhì)以保證測定人類免疫缺陷病毒抗體的質(zhì)量″的方法,在類似的條件下獲得干燥血點?;鶞仕降腄BS質(zhì)量控制采用以50±1%血細胞比容與血紅細胞結合的HIV抗體陽性血清(或血漿)和HIV抗體陰性血清進行采樣。既可以采用陰性血清和捐獻者陽性血清也可以通過將兩種或兩種以上具有不同條帶形狀的HIV陽性血清樣本進行混合的方法來產(chǎn)生特定的樣本類型。用來進行測定(熟練測試)的DBS物質(zhì)可以采用類似方式,通過利用一捐獻者未混合血清或匯集的血清進行制備。將全血物質(zhì)散布在濾紙片上以獲得適當?shù)拿该庖呶談y定(EIA)標的物的吸光變值和韋斯特印跡(Western Blot(WB)帶以及高陽性、低陽性和陰性HIV抗體樣本的強度圖案。
圖1和圖2是本發(fā)明的一個具體實施例的示意圖。以一個干燥血點1開始,一個由外部邊界22限定的第一穿孔所得樣片2和一個由外部邊界33和內(nèi)部邊界22限定的第二穿孔所得樣片3可以在干燥血點1中依次制出。在該具體實施例中,穿孔所得樣片2可為圓形,而穿孔所得樣片3可為環(huán)形。還可以得到一個環(huán)形且具有內(nèi)邊界的第三穿孔所得樣片4。圖1說明了以同心方式制出穿孔樣片的具體實施例。相反,圖2示出了以偏心方式制出穿孔樣片的具體實施例且如圖2所示,邊界22和33與半月形穿孔樣片3和4可以是正切的。
干燥血點1的總表面積及其直經(jīng)決定了可用于HIV抗體測試的血液量。例如,干燥血點1的直徑在約1/16英寸到約1/2英寸范圍內(nèi)并且一般由上述任何一種測試來限定。相反地,每個穿孔所得樣片的表面積一般由將要進行的測試所限定上。在本發(fā)明的一個應用中,當將一個以上的來自相同干燥血點的穿孔所得樣片用于篩選和確定性測定時,穿孔所得樣片通常符合特定測定所需的最小表面積要求。例如,當將酶免疫吸收劑測定用作篩選測試時,最小表面積可為約1/8至1/4英寸。同樣,當將免疫熒光法或韋斯特印跡(WesternBlot(WB)測定用作確定性測定時,可采用同樣的要求。
從前面的描述中了解了本發(fā)明及其伴隨的許多優(yōu)點,而且顯而易見的是,在不偏離本發(fā)明的精神范圍的前提下或在不犧牲其所有主要優(yōu)點的情況下可以做出各種不同的改進或改變,特定的材料、方法及此前的實例都將僅作為優(yōu)選實施例。
權利要求
1.一種從一個單一個干燥血點中制出一個以上穿孔所得樣片的方法,該方法包括以下步驟在所述干燥血點中制出第一穿孔所得樣片,該第一穿孔所得樣片具有第一邊界;以及接著在所述干燥血點中制出至少一個第二穿孔所得樣片,該第二穿孔所得樣片具有第二邊界,其中至少部分所述第二邊界為所述第一邊界的外側。
2.如權利要求1所述方法,其中第一和第二穿孔所得樣片的表面積加在一起等于測試所述干燥血點所需的最小表面積。
3.一種從一個單個干燥血點中制出一個以上穿孔所得樣片的方法,該方法包括以下步驟在所述干燥血中制出一個第一穿孔所得樣片,該第一穿孔所得樣片具有圓形并具有第一邊界;以及接著在所述干燥血點中制出至少一個第二穿孔所得樣片,該第二穿孔所得樣片具有第二邊界,其中至少部分所述第二邊界為所述第一邊界的外側。
4.如權利要求3所述方法,其中第一和第二穿孔所得樣片的表面積加在一起等于測試所述干燥血點所需的最小表面積。
5.如權利要求4所述方法,其中所述第二邊界與所述第一邊界相切。
6.如權利要求5所述方法,其中所述第二穿孔所得樣片為環(huán)形。
7.如權利要求5所述方法,其中所述第二穿孔所得樣片為月牙形。
8.一種從一個單個干燥血點中制出一個以上的穿孔所得樣片的方法,該方法包括以下步驟在所述干燥血點中制出一個第一穿孔所得樣片,該第一穿孔所得樣片具有第一邊界;接著在所述干燥血點中制出至少一個第二穿孔所得物,所述第二穿孔所得物具有第二邊界,其中至少部分所述第二邊界為所述第一邊界的外側;以及其中所述第一和第二穿孔所得樣片的表面積加在一起等于測試所述干燥血點所需的最小表面積。
9.如權利要求8所述方法,其中所述最小表面積是1/4英寸干燥血點的表面積。
10.如權利要求9所述方法,其中第一穿孔所得樣片的表面積為1/8英寸干燥血點的表面積。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種從單個干燥血點中制出一個以上穿孔所得樣片的方法。該方法包括在干燥血點中制出一個第一穿孔的步驟又及接著在其上制出至少一個第二穿孔的步驟。第二穿孔包括為至少部分所述第一穿孔邊界外側的邊界。第一和第二穿孔表面積加在一起等于測試干燥血點所需的最小面積。
文檔編號G01N33/569GK1146320SQ9610140
公開日1997年4月2日 申請日期1996年1月2日 優(yōu)先權日1994年12月30日
發(fā)明者N·羅龍, W·帕格斯, R·伊根 申請人:鄰位藥品公司