專(zhuān)利名稱(chēng)：預(yù)防性和治療性治療鏈球菌感染的方法
背景技術(shù)：
1、發(fā)明領(lǐng)域本發(fā)明涉及含有C組鏈球菌噬菌體相關(guān)性細(xì)胞溶素酶和載體的組合物，其中所述載體用于把該C組鏈球菌噬菌體相關(guān)性細(xì)胞溶素酶釋放至哺乳動(dòng)物的口、喉或鼻腔。所述組合物特別適用于預(yù)防性和治療性治療鏈球菌感染包括通常稱(chēng)之為鏈球菌咽喉炎的感染。
2、現(xiàn)有技術(shù)描述已知對(duì)于無(wú)癥狀個(gè)體或者患有輕度喉嚨痛、扁桃腺炎或膿皰病的帶癥狀個(gè)體來(lái)說(shuō)，A組鏈球菌已經(jīng)顯示為能夠以載體狀態(tài)存在的重要病原體。如果不予以治療，這些鏈球菌感染能夠?qū)е履I小球性腎炎、風(fēng)濕熱和可能永久性的風(fēng)濕性心臟病。隨著抗生素特別是青霉素類(lèi)抗生素的問(wèn)世，按照合適的抗生素治療處方方案，病原生物容易得到消除。
由于被感染的個(gè)體(通常為兒童和年輕人)能夠把A組鏈球菌傳遞給其他人，特別是在托兒所和學(xué)校，因此必須在抗微生物治療開(kāi)始后至少24-72小時(shí)把已知的被感染個(gè)體從這些環(huán)境中分離開(kāi)。在對(duì)照研究中表明早期診斷和合適的治療能夠使令人討厭的病原體的總循環(huán)傳染降低，并且能夠降低或減少A類(lèi)感染的后遺癥(關(guān)節(jié)熱或腎炎)。
美國(guó)專(zhuān)利US 5,604,109(Fischetti等)教導(dǎo)通過(guò)應(yīng)用C組鏈球菌噬菌體相關(guān)性細(xì)胞溶素酶進(jìn)行診斷分析，能夠?qū)組鏈球菌抗原進(jìn)行快速和靈敏檢測(cè)。這種檢測(cè)能夠有助于迅速鑒定被感染個(gè)體，然后使被感染個(gè)體接受常規(guī)抗生素治療。
然而，還存在一個(gè)問(wèn)題就是是否能有效抵抗鏈球菌感染?；加墟溓蚓恃椎幕颊呔哂懈叨葌魅拘?，并且能夠把病原體傳遞至密切接觸者，從而導(dǎo)致膿毒性咽喉炎流行。這個(gè)問(wèn)題在人群密度較大的人與人密切接觸的學(xué)校和軍隊(duì)顯得尤為突出。而且，需要防止鏈球菌感染的預(yù)防方法，這是因?yàn)橛捎诙喾矫嬖?，通常的抗生素預(yù)防應(yīng)用是不合適的。
發(fā)明概述本發(fā)明(其引用美國(guó)專(zhuān)利US 5,604,109中的內(nèi)容作為參考)提供含有C組鏈球菌噬菌體相關(guān)性細(xì)胞溶素酶和載體的組合物，所述載體用于把該C組鏈球菌嗜菌體相關(guān)性細(xì)胞溶素酶釋放至動(dòng)物例如人的口、喉或鼻腔。這樣的組合物特別能夠用作預(yù)防性治療以防止在接觸已感染個(gè)體后被感染，或者對(duì)已經(jīng)被感染的患者進(jìn)行鏈球菌A喉感染的治療性治療，從而減輕感染。
由于口腔或鼻腔中存在細(xì)胞溶素，因此當(dāng)鏈球菌從被感染個(gè)體引入時(shí)，至少有一些侵入的鏈球菌被殺死，因此通過(guò)防止感染達(dá)到預(yù)防效果。通過(guò)降低感染以及促進(jìn)減少鏈球菌傳播至其它個(gè)體的方式，細(xì)胞溶素酶這種快速和特異性(致死性)抗已有鏈球菌感染的活性具有治療效果。
在本發(fā)明的一個(gè)方案中，細(xì)胞溶素酶的給藥形式為糖果、口香糖、錠劑、糖錠、片劑、粉末、氣霧劑、液體(例如含漱劑)或液體噴霧劑。在本發(fā)明另一個(gè)實(shí)施方案中，細(xì)胞溶素酶以鼻噴霧劑給藥。
治療鏈球菌A感染的方法包括把有效劑量的可藥用量C組鏈球菌嗜菌體相關(guān)性細(xì)胞溶素酶施用于需要治療的哺乳動(dòng)物的口腔或鼻腔，讓細(xì)胞溶素酶接觸口腔粘膜并停留必要的一段時(shí)間從而使其飽和口腔粘膜；然后以同樣的方式施用另外劑量的這種細(xì)胞溶素酶直至治療完成時(shí)為止。根據(jù)含有細(xì)胞溶素酶的載體的不同，所述酶可以被給藥至喉或鼻的粘膜壁(mucosal lining)。
除了能夠有效地抵抗A組鏈球菌感染外，所述組合物還能以類(lèi)似方式用于抵抗C組鏈球菌感染。并且，所述酶還能以類(lèi)似方式抵抗E組鏈球菌。
發(fā)明詳述據(jù)發(fā)現(xiàn)當(dāng)鏈球菌從被感染個(gè)體侵入時(shí)，細(xì)胞溶素在口腔中停留一段時(shí)間能夠殺死侵入的鏈球菌，從而預(yù)防感染并提供預(yù)防性治療以防止鏈球菌感染。在被感染的個(gè)體中，通過(guò)降低感染以及減少鏈球菌傳播至其它個(gè)體的方式，細(xì)胞溶素酶這種快速和特異性(致死性)抗鏈球菌感染的活性還產(chǎn)生治療效果。
被特定的噬菌體(稱(chēng)C1)感染后，C組鏈球菌生物體產(chǎn)生酰胺酶muralytic(細(xì)胞溶素)酶，將其分離并收集，這些方法記載于第5,604,109號(hào)美國(guó)專(zhuān)利中。或者，通過(guò)任意其它已知方法，也可以分離和收集這種C組鏈球菌酶(也稱(chēng)為細(xì)胞溶素酶)，這種酶對(duì)A、C和E組鏈球菌的細(xì)胞壁具有獨(dú)特的特異性。
用于預(yù)防性和治療性治療鏈球菌感染的組合物含有細(xì)胞溶素酶和應(yīng)用工具(例如載體系統(tǒng)或口服給藥模式)以釋放于口腔或鼻腔粘膜壁。
當(dāng)把這種酶加入到載體系統(tǒng)或口腔給藥模式中期間或之前，優(yōu)選把該酶置于穩(wěn)定的緩沖環(huán)境中用于維持pH范圍在約4.0-約8.0、更優(yōu)選約5.5至約7.5和最優(yōu)選約6.1。
所述穩(wěn)定的緩沖劑應(yīng)該使細(xì)胞溶素酶顯示最佳活性。該緩沖劑可以是還原劑例如二硫蘇糖醇。所述穩(wěn)定的緩沖劑還可以含有或可以是金屬螯合劑例如乙二胺四乙酸二鈉鹽，或者其也可含有磷酸鹽或檸檬酸鹽酸磷酸鹽緩沖劑。
為了防止變質(zhì)，所述穩(wěn)定的緩沖劑還可含有抗菌劑或抑菌劑作為防腐劑，例如其可含有少量苯甲酸鈉。
應(yīng)用方式包括但不限于直接、間接、載體和特殊方式或者任意方式的組合。把細(xì)胞溶素酶直接應(yīng)用至鼻粘膜可以通過(guò)的方式為鼻噴霧劑、滴鼻劑、鼻軟膏、洗鼻劑、鼻注射液、鼻填充物或者通過(guò)把軟膏直接施用于鼻孔、鼻橋或面部或者上述方式的任意組合，或者通過(guò)類(lèi)似的應(yīng)用方法或其它已知的鼻載體施用。施用于口腔或喉部可以通過(guò)的方式為應(yīng)用喉錠劑或通過(guò)應(yīng)用漱口劑、含漱劑、溶液劑、噴霧劑、糖果和膠等。因此，可以施用細(xì)胞溶素的形式包括但不限于錠劑、糖錠、糖果、注射劑、口香糖劑、片劑、粉劑、噴霧劑、液體制劑、軟膏和氣霧劑。
加有細(xì)胞溶素酶的錠劑、片劑或膠可以含有糖、玉米漿、各種染料、非糖甜味劑、矯味劑、任意的粘合劑或這些物質(zhì)的組合。類(lèi)似地，任意膠基產(chǎn)品可以含有阿拉伯膠、巴西棕櫚蠟、檸檬酸、玉米淀粉、食品著色劑、矯味劑、非糖甜味劑、明膠、葡萄糖、甘油、膠基、紫膠、糖精鈉、糖、水、白蠟、纖維素、其它粘合劑以及上述物質(zhì)的組合。
錠劑還可以含有糖、玉米淀粉、阿拉伯膠、黃蓍膠、茴香腦、亞麻籽、含油樹(shù)脂、礦物油和纖維素、其它粘合劑以及這些物質(zhì)的組合。在本發(fā)明另一實(shí)施方案中，應(yīng)用糖取代物替換葡萄糖、蔗糖或其它糖。
還可以把該酶置于鼻噴霧劑中，其中鼻噴霧劑為載體。所述鼻噴霧劑可以是長(zhǎng)期作用的噴霧劑或暫時(shí)釋放的噴霧劑，并且可以通過(guò)本領(lǐng)域公知的方式制備。
所有這些用于細(xì)胞溶素酶的載體均可以通過(guò)常規(guī)方式制備，但優(yōu)選任何漱口劑或類(lèi)似產(chǎn)品不含有乙醇以防止酶變性。類(lèi)似地，在制備過(guò)程期間，當(dāng)把細(xì)胞溶素酶置于止咳糖、膠、糖果或錠劑中時(shí)，應(yīng)該在錠劑或糖果硬化之前但在止咳糖或糖果稍微冷卻后將細(xì)胞溶素酶放置好，這樣可以避免酶變性。
可以把所述酶加入到這些液體形式或凍干狀態(tài)的物質(zhì)中，因此所述酶遇到液體時(shí)會(huì)被溶解。所述酶也可以是例如微膠?；蛑|(zhì)體形式，或者其它被包封形式，或者以前藥形式或緩釋形式給藥以便提供延長(zhǎng)的儲(chǔ)存期和/或釋放效果。
治療感染的細(xì)胞溶素酶的有效劑量或含量將部分取決于以下因素該細(xì)胞溶素酶是用于預(yù)防還是治療、用藥者接觸鏈球菌的持續(xù)時(shí)間、和/或感染的性質(zhì)、個(gè)體體積和重量等。合適劑量的確定容易由本領(lǐng)域技術(shù)人員確定。含有該酶的組合物的應(yīng)用持續(xù)時(shí)間也取決于以下因素所述應(yīng)用是否用于預(yù)防目的，用于預(yù)防目的時(shí)所述應(yīng)用可以是例如每天或每周，持續(xù)確定的時(shí)間例如1周、1月或更長(zhǎng)；或者所述應(yīng)用是否用于治療目的，當(dāng)用于治療目的時(shí)，可能應(yīng)用更加強(qiáng)的方案例如應(yīng)用2、3、4、5、6、7、10或14天或更長(zhǎng)。因此，治療性治療可能橫跨數(shù)天或數(shù)周，可以以天為基礎(chǔ)，并可能在一天期間有多個(gè)間隔。
為了達(dá)到效果，所述酶應(yīng)該以足夠量存在以提供有效數(shù)目的酶單位來(lái)接觸口、喉或鼻腔。如果接觸口、喉或鼻腔的酶單位太少，即使是長(zhǎng)時(shí)間接觸也不會(huì)產(chǎn)生需要的有益效果。因此，所有應(yīng)用的劑型應(yīng)該在一段時(shí)間內(nèi)提供大約最少量的數(shù)量單位，這樣所述劑型將把酶提供至口、喉、或鼻腔。在鼻腔或口腔環(huán)境中，被認(rèn)為提供有效含量或劑量活性單位酶濃度的范圍是約100單位至約100,000單位。據(jù)信，從約100單位至約10,000單位的較寬范圍是可以接受的。這樣的單位可以存在于小體積載體中例如1ml或更小體積的載體例如液體或唾液中(例如錠劑)，或者也可以存在于大體積例如若干毫升含漱劑中。因此，通常載體的體積越大，達(dá)到活性酶有效濃度所需的單位總數(shù)越大。因此，在鼻或口腔中，可接受濃度可以是約100單位/毫升至約100,000單位/毫升流體中。在此范圍內(nèi)，約100單位/毫升至約10,000單位/毫升的濃度是可以接受的。
因此，在實(shí)踐中，接觸活性酶單位的時(shí)間可以影響活性酶單位在每毫升劑量中所需要的濃度。例如，被考慮提供緩釋的載體(某些鼻噴霧劑、錠劑和被包封酶)能夠提供每毫升較低濃度的活性酶單位，但持續(xù)時(shí)間較長(zhǎng)。相反，較短的持續(xù)治療(例如含漱劑)能夠提供每毫升較高濃度的活性酶單位。所有在感染部位提供有效濃度活性酶或提供足夠預(yù)防效果的含有足夠細(xì)胞溶素酶的任何劑量完全屬于常規(guī)實(shí)驗(yàn)范圍之內(nèi)，因此完全在本發(fā)明范圍之內(nèi)。
本發(fā)明的組合物還可含有至少一個(gè)其它添加劑，所述添加劑能有效地用于治療性或預(yù)防性治療鏈球菌感染或者減輕其癥狀。另外，這些試劑還可以有效地用于某些其它治療和/或起預(yù)防作用，例如減輕疼痛。一些試劑可以是局部活性或全身活性，并可含有抗生素或疼痛減輕藥物包括例如局部用抗菌劑用于減輕咽喉痛?；蛘撸梢栽趹?yīng)用本發(fā)明組合物處理之前或之后給予這樣的試劑?？股氐膭┝繎?yīng)該能有效地用于治療性或預(yù)防性治療鏈球菌感染或用于治療這些感染的癥狀。
當(dāng)這些治療用于任意的動(dòng)物或哺乳動(dòng)物時(shí)，優(yōu)選把這些產(chǎn)品應(yīng)用于人。
讓含有各個(gè)劑量細(xì)胞溶素的載體接觸口腔粘膜必要的時(shí)間以便提供期望的預(yù)防或治療效果。把細(xì)胞溶素酶給藥至口腔粘膜的方式可以為任意方式，例如含漱劑、口腔清洗劑(mouth rinses)、錠劑、糖錠、口香糖、糖果、粉劑、和鼻或口腔噴霧劑，條件是其安全并其能提供期望的預(yù)防或治療效果。根據(jù)本發(fā)明，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以知道用于給藥細(xì)胞溶素酶的其它可能方法和組合物。
實(shí)施例1C組嗜菌體細(xì)胞溶素酶制備如下在18mm試管中，在37℃下的ToddHewitt培養(yǎng)基中把C組鏈球菌株26RP66(ATCC#21597)或任意的C組鏈球菌株培養(yǎng)至其在650nm處的OD為0.23。以1份嗜菌體比4份細(xì)胞的比例把C組噬菌體(C1)(ATCC#21597-B1)以5×106的效價(jià)加入。然后讓該混合物在37℃溫度下維持18分鐘，期間把感染細(xì)胞傾入到冰塊上以把溶液的溫度降低至15℃以下。然后在冷凍離心機(jī)中收集被感染細(xì)胞，將其以原始體積的1/300懸浮于0.1M的磷酸緩沖液中，所述緩沖液的pH為6.1，并含有5×10-3M的二硫蘇糖醇和10μg DNA酶。這些細(xì)胞將溶解釋放出嗜菌體和細(xì)胞溶素酶。以100,000Xg離心5小時(shí)以除去大部分細(xì)胞碎片和嗜菌體，把酶溶液分成等份試樣，然后測(cè)試其溶解A組鏈球菌的能力。
測(cè)定許多酶的單位/毫升數(shù)目使其成為酶的最高稀釋的倒數(shù)，從而在15分鐘內(nèi)把A組鏈球菌的懸浮液的OD650從0.3降低至0.15。在典型的酶制劑中，在單個(gè)12升批量中生成4×105至4×106單位。
根據(jù)所需要的培養(yǎng)時(shí)間，酶的應(yīng)用需要最少量的細(xì)胞溶素酶單位。用含有穩(wěn)定緩沖物質(zhì)的合適調(diào)節(jié)劑稀釋酶，所述調(diào)節(jié)劑能使酶穩(wěn)定并發(fā)揮最大酶活性。優(yōu)選的方案為應(yīng)用冷凍干燥的細(xì)胞溶素酶。所述穩(wěn)定緩沖物質(zhì)可以含有還原劑，該還原劑可以是二硫蘇糖醇，濃度為0.001M-1.0M，優(yōu)選0.005M。所述穩(wěn)定的緩沖物質(zhì)可以含有金屬螯合劑，其可以是0.00001M至1.0M、優(yōu)選0.005M濃度的乙二胺四乙酸二鈉鹽。該穩(wěn)定緩沖物質(zhì)可以含有檸檬酸磷酸鹽緩沖劑，濃度為0.001 M-1.0M，優(yōu)選0.05M。所述穩(wěn)定的緩沖劑的pH值范圍是約4.0-8.0、優(yōu)選6.1。穩(wěn)定的緩沖物質(zhì)可以含有作為防腐劑的殺菌劑或抗菌劑。這樣的防腐劑可以是疊氮化鈉，其濃度為0.001％至0.1％，優(yōu)選0.02％。
用于產(chǎn)生細(xì)胞溶素的嗜菌體原料的制備可以按照上述在細(xì)胞溶素酶制備中用于感染嗜菌體和C組鏈球菌的相同方法進(jìn)行。然而，此制備方法并不把被感染細(xì)胞傾入到冰上，在37℃溫度下培養(yǎng)的時(shí)間共持續(xù)1小時(shí)，以使嗜菌體和酶在總體積中溶解和釋放。為了把嗜菌體用于隨后的細(xì)胞溶素生成，必須滅活殘余酶，或者將這些酶除去以防止從沒(méi)有C組噬菌體的細(xì)胞而不是嗜菌體感染的細(xì)胞中溶解。
實(shí)施例2按照實(shí)施例1制備的酶稀釋至濃度為100單位/毫升的緩沖液中，所述緩沖液的組成為0.05M檸檬酸鹽磷酸鹽緩沖液(其pH為6.1并含有0.1％的兔免疫球蛋白、0.005M(亞乙基二硝基)四乙酸二鈉鹽(EDTA)、0.005M二硫蘇糖醇、0.02％疊氮化鈉、0.01％N-乙酰基葡糖胺。把用A組鏈球菌抗體標(biāo)記的膠體金溶膠(OD5201.5)懸浮于0.02M Tris緩沖液(其pH為8.2，含有1.0％牛血清白蛋白、0.02％疊氮化鈉、300K單位肝素)中，將1份此懸浮液加入到3份酶試劑中，混合，并通過(guò)0.22微米濾器過(guò)濾，每試管中含有200微升等份樣品，進(jìn)行冷凍干燥。該冷凍干燥的酶在升高的溫度下(即45℃)能穩(wěn)定短時(shí)間(2周)，在室溫下能長(zhǎng)期(大于1年)保持穩(wěn)定。
實(shí)施例3方法1.把A組鏈球菌株S43/192/39R(抗鏈霉素型)培養(yǎng)1天(從冷凍血肉湯中)；將500μl置于50ml含有1％酵母提取物和100pl鏈霉素/ml的Todd Hewitt(TH)肉湯中。
2.培養(yǎng)至OD650為0.59。
3.在3000rpm下離心15分鐘以沉淀細(xì)菌。
4.把這些生物體重新懸浮于1ml體積TH w/o抗生素(3×105/100μl，由平板計(jì)數(shù)確定)。
5.把0.5這些濃度的細(xì)胞加入到1.5ml pH6.1的磷酸緩沖液中作為對(duì)照。
6.在給藥至小鼠前5分鐘，把0.5ml濃縮的細(xì)胞懸浮液與0.5ml嗜菌體細(xì)胞溶素在pH6.1磷酸緩沖液中的溶液混合，其中所述嗜菌體細(xì)胞溶素溶液被預(yù)先稀釋至10,000單位/毫升。
把5只接受60μl“對(duì)照”溶液的小鼠分開(kāi)，等量口腔用藥和鼻腔用藥。
把5只接受60μl細(xì)胞溶素和細(xì)菌混合物的小鼠分開(kāi)，等量口腔用藥和鼻腔用藥。在5％綿羊血、蛋白胨瓊脂培養(yǎng)皿上進(jìn)行喉擦洗，所述培養(yǎng)皿含 有500μg/ml鏈霉素。在37℃溫度下培養(yǎng)表面皿過(guò)夜。得到下列結(jié)果
7/22 7/23 7/24 7/281天2天3天7天菌落形成單位細(xì)胞溶素L10 0 0 0L20 0 0 0L30 0 0 0L40 1 0 0L50 0 1 0對(duì)照C126 14 7 0C2＞400 17 10083C39 0 15 0C4＞400 ＞400 ＞400 220C52 2 30 0這些結(jié)果顯示在此模型系統(tǒng)中，嗜菌體細(xì)胞溶素與A組鏈球菌僅僅接觸5分鐘就能防止所述鏈球菌集居于小鼠上呼吸道。
實(shí)施例4為了復(fù)制可能發(fā)生的情況，在鏈球菌進(jìn)入環(huán)境、動(dòng)物、細(xì)菌前把細(xì)胞溶素置于口腔(即通過(guò)錠劑釋放)，然后按照實(shí)施例3(1-5)同樣的方式制備細(xì)胞溶素，但在本實(shí)驗(yàn)中，動(dòng)物作如下處理細(xì)胞溶素組讓5只小鼠接受25μl細(xì)胞溶素，然后立即讓其接受50μl細(xì)菌懸浮液。
對(duì)照組讓5只小鼠接受25μl緩沖液，然后立即讓其接受50μl細(xì)菌懸浮液。
24小時(shí)細(xì)胞溶素L6-L7-L8-L9-L10 -對(duì)照組C6-C7+C8-C9+C10 +結(jié)果當(dāng)加入鏈球菌時(shí)，對(duì)于口腔中含有細(xì)胞溶素的動(dòng)物有0/5的比例被菌集，而對(duì)于接受緩沖液的動(dòng)物有3/5的比例被菌集鏈球菌。因此，如果在加入A組鏈球菌之前存在細(xì)胞溶素可以防止菌集。
實(shí)施例5在37℃下，在Todd Hewitt培養(yǎng)基中培養(yǎng)AM組6型鏈球菌過(guò)夜。用無(wú)菌細(xì)胞溶素緩沖液(50ml磷酸鹽緩沖液，pH6.1)洗滌生物體1次。然后把細(xì)胞沉淀物懸浮于5ml同樣的緩沖液中。
在含有5mM DTT的細(xì)胞溶素緩沖液中，把嗜菌體細(xì)胞溶素稀釋至兩倍合適的單位，然后把混合物進(jìn)行無(wú)菌過(guò)濾。
把1.0ml細(xì)菌懸浮液加入到1.0ml合適的細(xì)胞溶素稀釋液中，然后在37℃溫度下培養(yǎng)該混合物。以一定的時(shí)間間隔除去樣品，進(jìn)行適當(dāng)稀釋?zhuān)瑢⑵渲糜谘傊囵B(yǎng)皿中以測(cè)定細(xì)菌數(shù)目。
把由1.0ml細(xì)菌懸浮液組成的對(duì)照樣品單獨(dú)加入到1.0ml細(xì)胞溶素緩沖液中。除去等分樣品，然后在10倍稀釋液中稀釋?zhuān)训确輼悠分糜谘傊囵B(yǎng)皿中以測(cè)定細(xì)菌數(shù)目。結(jié)果含細(xì)胞溶素的細(xì)菌數(shù)細(xì)胞溶素單位 起始數(shù)目5秒30秒 60秒 5分鐘 10分鐘1000 5×1060 0 0 0 0(平均2 exp)100 8.6×1061530 1196 77164 6(平均4 exp)10 9.8×106＞3000 ＞3000 ＞3000 ＞3000 ＞3000(平均3 exp)根據(jù)上述教導(dǎo)可以對(duì)本發(fā)明作出許多改進(jìn)和變動(dòng)。因此應(yīng)該理解本發(fā)明的范圍由權(quán)利要求書(shū)確定，而不限于說(shuō)明書(shū)具體說(shuō)明的方案。
權(quán)利要求
1.用于預(yù)防性或治療性治療鏈球菌感染的組合物，包括有效量的C組鏈球菌嗜菌體相關(guān)性細(xì)胞溶素酶；和用于把所述細(xì)胞溶素酶釋放于口、喉或鼻腔的載體。
2.權(quán)利要求1的組合物，其中所述載體選自糖果、口香糖、錠劑、糖錠、片劑、粉劑、氣霧劑、液體、液體噴霧劑、鼻噴霧劑和鼻軟膏。
3.權(quán)利要求1的組合物，其還含有維持所述組合物pH為約4.0-約9.0的緩沖物質(zhì)。
4.權(quán)利要求3的組合物，其中所述緩沖物質(zhì)維持該組合物的pH為約5.5-約7.5。
5.權(quán)利要求3的組合物，其中所述緩沖物質(zhì)含有還原劑。
6.權(quán)利要求5的組合物，其中所述還原劑為二硫蘇糖醇。
7.權(quán)利要求3的組合物，其中所述緩沖物質(zhì)含有金屬螯合劑。
8.權(quán)利要求7的組合物，其中所述金屬螯合劑為乙二胺四乙酸二鈉鹽。
9.權(quán)利要求3的組合物，其中所述緩沖物質(zhì)為檸檬酸鹽磷酸鹽緩沖劑。
10.權(quán)利要求1的組合物，其還含有作為防腐劑的抗菌劑和殺菌劑。
11.權(quán)利要求1的組合物，其中所述細(xì)胞溶素酶是冷凍干燥的。
12.權(quán)利要求1的組合物，其中所述載體還含有甜味劑。
13.權(quán)利要求1的組合物，其中在鼻或口腔環(huán)境中，所述載體提供濃度約100-約100,000活性酶單位/毫升流體。
14.權(quán)利要求13的組合物，其中在鼻或口腔環(huán)境中，所述載體提供濃度約100-約10,000活性酶單位/毫升流體。
15.權(quán)利要求1的組合物，其中所述組合物用于治療性治療鏈球菌感染。
16.權(quán)利要求1的組合物，其中所述組合物用于預(yù)防性治療鏈球菌感染。
17.權(quán)利要求15的組合物，其中所述鏈球菌感染為鏈球菌咽喉感染。
18.權(quán)利要求1的組合物，其中所述載體為糖果。
19.權(quán)利要求1的組合物，其中所述載體為口香糖。
20.權(quán)利要求1的組合物，其中所述載體為錠劑。
21.權(quán)利要求1的組合物，其中所述載體為糖錠。
22.權(quán)利要求1的組合物，其中所述載體為粉劑。
23.權(quán)利要求1的組合物，其中所述載體為氣霧劑。
24.權(quán)利要求1的組合物，其中所述載體為液體噴霧劑。
25.權(quán)利要求1的組合物，其中所述載體為鼻噴霧劑。
26.權(quán)利要求1的組合物，其中所述哺乳動(dòng)物為人。
27.權(quán)利要求1的組合物，其中所述載體適合把所述細(xì)胞溶素酶釋放至口和喉。
28.權(quán)利要求1的組合物，其中所述載體適合把所述細(xì)胞溶素酶釋放至鼻腔。
29.權(quán)利要求1的組合物，其還含有有效地用于治療性或預(yù)防性治療鏈球菌感染或減輕其癥狀的至少一種試劑。
30.預(yù)防性或治療性治療鏈球菌感染的方法，包括把 1-29任意一項(xiàng)的組合物給藥至需要的哺乳動(dòng)物。
31.C組鏈球菌嗜菌體相關(guān)性細(xì)胞溶素在制備權(quán)利要求1-29任意一項(xiàng)的藥物組合物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及含有C組鏈球菌嗜菌體相關(guān)性細(xì)胞溶素酶的組合物,所述組合物用于預(yù)防性和治療性治療鏈球菌感染包括通常所稱(chēng)的鏈球菌咽喉炎。本發(fā)明還記載了治療性或預(yù)防性治療這樣的感染的方法。
文檔編號(hào)G01N33/569GK1352567SQ99816592
公開(kāi)日2002年6月5日 申請(qǐng)日期1999年2月25日 優(yōu)先權(quán)日1999年2月25日
發(fā)明者V·菲舍蒂, L·洛米斯 申請(qǐng)人:新眼界診斷公司