一種大米中205種農(nóng)藥殘留量的檢測(cè)方法
【技術(shù)領(lǐng)域】：
[0001] 本發(fā)明涉及分析化學(xué)、食品安全領(lǐng)域，具體地說(shuō)，是一種大米中農(nóng)藥殘留量的檢測(cè) 方法。
【背景技術(shù)】：
[0002] 隨著農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中農(nóng)藥應(yīng)用的增加，人們逐漸發(fā)現(xiàn)其在植物內(nèi)的殘留，可通過(guò)植物 源食品傳遞給人類。因此，農(nóng)藥在農(nóng)產(chǎn)品中的殘留問(wèn)題給人們身體健康帶來(lái)了較大的隱患，
[0003] 隨著全球經(jīng)濟(jì)一體化和食品貿(mào)易國(guó)際化，食品安全已成為一個(gè)世界性的挑戰(zhàn)和全 球重要的公共衛(wèi)生問(wèn)題。植物性食品安全已成為全世界關(guān)注的焦點(diǎn)，其中農(nóng)藥殘留問(wèn)題是 影響植物性食品安全的最主要農(nóng)藥。我國(guó)是大米出口國(guó)，每年出口大米200多萬(wàn)噸，主要出 口日本、韓國(guó)和非洲一些國(guó)家。隨著人們的食品安全意識(shí)的提高和技術(shù)貿(mào)易壁壘的需要，各 國(guó)對(duì)農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留限制越來(lái)越嚴(yán)，要求檢驗(yàn)的項(xiàng)目越來(lái)越多，方法的檢測(cè)低限要求越 來(lái)越高。以出口大米為例，日本規(guī)定的輸日大米農(nóng)殘檢驗(yàn)項(xiàng)目逐年增加。
[0004] 目前，有關(guān)農(nóng)藥殘留檢測(cè)我國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法共有76個(gè)，涉及502種化學(xué)物質(zhì)， 可以用于出口農(nóng)產(chǎn)品檢測(cè)的方法僅有16個(gè)，涉及檢測(cè)項(xiàng)目50項(xiàng)，其余60個(gè)方法已不適用。 行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法有305個(gè)，涉及檢測(cè)項(xiàng)目338種化學(xué)物質(zhì)，多為單殘留分析方法，遠(yuǎn)遠(yuǎn)不 能滿足出口大米農(nóng)殘檢驗(yàn)的實(shí)際需要。因此，急需建立一套大米中多類農(nóng)藥殘留集成化檢 測(cè)方法。

【發(fā)明內(nèi)容】
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[0005] 本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有不足問(wèn)題，提供一種大米中205種農(nóng)藥殘留量的檢測(cè)方 法，液相色譜/串聯(lián)質(zhì)譜法檢測(cè)大米中205種農(nóng)藥殘留量的方法，可方便、準(zhǔn)確、高效地同時(shí) 檢測(cè)大米中205種農(nóng)藥殘留量。
[0006] 本發(fā)明為實(shí)現(xiàn)上述目的所采用的技術(shù)方案是：一種大米中205種農(nóng)藥殘留量的檢 測(cè)方法，按照下述步驟及物質(zhì)比例進(jìn)行檢測(cè)：
[0007] 1、樣品提?。?br>[0008] 5g(精確到0.0 lg)大米樣品置于50mL離心管中，加入10mL水，加蓋，渦旋混合1 分鐘，再向離心管中乙腈（〇. 1 %乙酸）15mL，渦旋1分鐘，之后加入6g無(wú)水硫酸鎂與1. 5g 醋酸鈉，劇烈振搖20s，使塊狀結(jié)晶充分散開(kāi)。4000轉(zhuǎn)/分的標(biāo)準(zhǔn)轉(zhuǎn)速離心5分鐘；
[0009] 2、樣品凈化：
[0010] 取離心后的上清液中取8mL上層溶液，并置于15mL的離心管中，該離心管中之前 已經(jīng)添加了 PSA400mg，無(wú)水硫酸鎂1200mg，C18400mg，渦旋混合15min，4000轉(zhuǎn)/分的標(biāo)準(zhǔn) 轉(zhuǎn)速離心5分鐘；
[0011] 3、液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜儀測(cè)定：
[0012] 按照液相色譜一質(zhì)譜/質(zhì)譜條件測(cè)定樣品和標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，質(zhì)譜分離采用在正離 子模式下進(jìn)行母離子全掃描，再對(duì)其子離子進(jìn)行全掃描；通過(guò)被測(cè)樣品的質(zhì)譜和相關(guān)信息， 得到其定性和定量結(jié)果；定性時(shí)應(yīng)當(dāng)與濃度相當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的相對(duì)豐度一致，相對(duì)豐度 允許偏差不超過(guò)規(guī)定的范圍，則可判斷樣品中存在對(duì)應(yīng)的被測(cè)物。定量測(cè)定時(shí)采用標(biāo)準(zhǔn)曲 線法。
[0013] 作為優(yōu)選，在步驟3中所述液相色譜分析條件為：
[0014] 色譜柱：反相C18色譜柱
[0015] 流動(dòng)相A :5ml (1M甲酸胺溶液）+895ml二次水+100ml甲醇；
[0016] 流動(dòng)相B :5ml (1M甲酸胺溶液）+95ml二次水+900ml甲醇；梯度洗脫。
[0017]柱溫：40°C
[0018]流速：0? 4mL/min
[0019]進(jìn)樣量：10uL
[0020] 作為優(yōu)選，所述反相 C18 柱為 Phenomenex Synergi 2. 5 u Fusion-RP C18100A 50X2. 0mm(i. d)。
[0021] 作為優(yōu)選，所述梯度洗脫程序?yàn)椋?br>[0022] 0~1分鐘，流動(dòng)相A100 %，流動(dòng)相B 0 % ;
[0023]1~15分鐘，流動(dòng)相A100~0%，流動(dòng)相B 0~100%;
[0024]15~18分鐘，流動(dòng)相A 0 %，流動(dòng)相B 100 %;
[0025] 18. 01，流動(dòng)相 A 100%，流動(dòng)相 B 0% ?
[0026]18. 01~20分鐘，流動(dòng)相A100%，流動(dòng)相B0%?
[0027] 作為優(yōu)選，在步驟3中所述質(zhì)譜條件為：
[0028] a)離子源：電噴霧離子源
[0029] b)掃描方式：正離子掃描
[0030] c)檢測(cè)方式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM)
[0031] d)離子化電壓 IS:+5500V :5500. 00V
[0032] e)霧化氣（GS1) :55. OOPsi
[0033] f)輔助氣（GS2) :60.0 OL/min
[0034] g)氣簾氣（CUR) :35. OOPsi
[0035] h)離子源溫度（TEM) :550°C
[0036] i)分別設(shè)定母離子、子離子、去簇電壓（DP)、碰撞室入口電壓（EP)、碰撞室
[0037] 出口電壓（CXP)、碰撞氣能量（CE)。
[0038] 作為優(yōu)選，在步驟3中標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的配置方法為：農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)溶液自A組至K 組共分10組，見(jiàn)表1,每一組中每種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品的濃度均為100 u g/mL乙腈溶液：
[0039] 表1205種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液
[0040]
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種大米中205種農(nóng)藥殘留量的檢測(cè)方法，其特征在于：按照下述步驟及物質(zhì)比例 進(jìn)行檢測(cè)： (1) 樣品提?。? 將5g大米樣品置于50mL離心管中，加入10mL水，加蓋，渦旋混合1分鐘，再向離心管 中加含0. 1 %乙酸的乙腈5mL，渦旋1分鐘，之后加入6g無(wú)水硫酸鎂與1. 5g醋酸鈉，劇烈振 搖20s，使塊狀結(jié)晶充分散開(kāi)，4000轉(zhuǎn)/分的標(biāo)準(zhǔn)轉(zhuǎn)速離心5分鐘； (2)樣品凈化： 取離心后的上清液中取8mL上層溶液,并置于15mL的離心管中，該離心管中之前已經(jīng) 添加了PSA400mg，無(wú)水硫酸鎂1200mg，C18 400mg，渦旋混合15min，4000轉(zhuǎn)/分的標(biāo)準(zhǔn)轉(zhuǎn)速 離心5分鐘； (3) 液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜儀測(cè)定： 按照液相色譜一質(zhì)譜/質(zhì)譜條件測(cè)定樣品和標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，質(zhì)譜分離采用在正離子模 式下進(jìn)行母離子全掃描，再對(duì)其子離子進(jìn)行全掃描；通過(guò)被測(cè)樣品的質(zhì)譜和相關(guān)信息，得到 其定性和定量結(jié)果；定性時(shí)應(yīng)當(dāng)與濃度相當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的相對(duì)豐度一致，相對(duì)豐度允許 偏差不超過(guò)規(guī)定的范圍，則可判斷樣品中存在對(duì)應(yīng)的被測(cè)物；定量測(cè)定時(shí)采用標(biāo)準(zhǔn)曲線法。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種大米中205種農(nóng)藥殘留量的檢測(cè)方法，其特征在于：所 述步驟（3)中液相色譜分析條件為： 色譜柱：反相C18色譜柱 流動(dòng)相A:5ml(1M甲酸胺溶液）+895ml二次水+100ml甲醇； 流動(dòng)相B:5ml(1M甲酸胺溶液）+95ml二次水+900ml甲醇；梯度洗脫； 柱溫：40°C流速：〇? 4mL/min 進(jìn)樣量：10iiL。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種大米中205種農(nóng)藥殘留量的檢測(cè)方法，其特征在于：所 述步驟（3)中液相色譜分析條件為：反相C18色譜柱為作為優(yōu)選，所述反相C18色譜柱為 PhenomenexSynergi2. 5uFusion-RPC18 100A50X2.0mm(i.d)。
4. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種大米中205種農(nóng)藥殘留量的檢測(cè)方法，其特征在于：所 述步驟（3)中液相色譜分析條件為：梯度洗脫的梯度變化為： 0~1分鐘，流動(dòng)相A100 %，流動(dòng)相B 0 % ; 1~15分鐘，流動(dòng)相A100~0%，流動(dòng)相B 0~100% ; 15~18分鐘，流動(dòng)相A 0%，流動(dòng)相B 100% ; 18.01分鐘，流動(dòng)相A 100%，流動(dòng)相B 0% ; 18. 01~20分鐘，流動(dòng)相A 100%，流動(dòng)相B 0%。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種大米中205種農(nóng)藥殘留量的檢測(cè)方法，其特征在于：步 驟（3)中所述質(zhì)譜條件為： 離子源：電噴霧離子源 掃描方式：正離子掃描 檢測(cè)方式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM) 離子化電壓IS:+5500V:5500. 00V 霧化氣（GS1) :55.OOPsi輔助氣（GS2) :60.OOL/min 氣簾氣（CUR) :35.OOPsi 離子源溫度（TEM) :550°C 分別設(shè)定母離子、子離子、去簇電壓（DP)、碰撞室入口電壓（EP)、碰撞室出口電壓 (CXP)、碰撞氣能量（CE)。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種大米中205種農(nóng)藥殘留量的檢測(cè)方法，其特征在于：所 述步驟（3)中標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的配置方法為： 農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)溶液自A組至K組共分10組，見(jiàn)表1，每一組中每種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品的濃度均 為100iiL/mL乙腈溶液： 表1 205種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液 表1 205種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液


混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液：從每組農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)溶液中各取10yL于一個(gè)lml棕色安瓶中，加 900yL乙腈，置于-18°C冰箱中保存；205種農(nóng)藥的濃度相當(dāng)于1yg/mL; 標(biāo)準(zhǔn)工作溶液：取混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液0.2mL用甲醇定容至lOmL容量瓶中，再根據(jù)需要用 乙腈將混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液逐級(jí)稀釋；逐級(jí)稀釋濃度為：〇.lng/mL，0. 25ng/mL，0. 5ng/mL，2ng/ mL,5ng/mL,lOng/mL,15ng/mL,20ng/mL〇
7.根據(jù)權(quán)利要求1-5任一所述的一種大米中205種農(nóng)藥殘留量的檢測(cè)方法，其特征在 于： 所述205種農(nóng)藥包括下表2至少一種農(nóng)藥： 表2 205種農(nóng)藥
CN104698114A 權(quán)利要求書(shū) 9/12頁(yè)

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【專利摘要】本發(fā)明涉及分析化學(xué)、食品安全領(lǐng)域。一種大米中205種農(nóng)藥殘留量的檢測(cè)方法，該方法樣品經(jīng)樣品乙腈提取，提取液經(jīng)過(guò)QuEChERS方法凈化后，采用色譜柱:Phenomenex Synergi2.5 Fusion-RP C18 100A50×2.0mm（i.d）分析柱，以甲醇－甲酸銨水溶液為流動(dòng)相，梯度洗脫，電噴霧、正離子掃描模式分離與檢測(cè)205種農(nóng)藥。通過(guò)對(duì)質(zhì)譜條件的一系列優(yōu)化，兼顧各成分的靈敏度，建立了最佳質(zhì)譜分析條件。205種農(nóng)藥檢出限均低于10μg/kg，205種農(nóng)藥的回收率范圍均在50%~130%以內(nèi)。方法檢測(cè)限、回收率和精密度等技術(shù)指標(biāo)滿足國(guó)內(nèi)外對(duì)大米中農(nóng)藥殘留量檢測(cè)的有關(guān)要求。
【IPC分類】G01N30-88
【公開(kāi)號(hào)】CN104698114
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201410585638
【發(fā)明人】陳溪, 董偉峰, 崔晗
【申請(qǐng)人】陳溪, 董偉峰, 崔晗
【公開(kāi)日】2015年6月10日
【申請(qǐng)日】2014年10月28日