一種丁酸氯維地平原料藥合成過程的實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于醫(yī)藥分析技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種丁酸氯維地平原料藥合成過程的實(shí) 時(shí)監(jiān)測(cè)方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 藥物的合成過程中，工藝參數(shù)的優(yōu)化可以直接影響到原料藥的質(zhì)量，對(duì)原料藥的 品質(zhì)起到?jīng)Q定性的作用，不良工藝參數(shù)對(duì)反應(yīng)結(jié)果影響很大，不僅可以直接影響終產(chǎn)物的 濃度，而且還可能引入很多工藝雜質(zhì)，影響藥物的質(zhì)量。目前，常用的分析原料藥合成過程 中成分濃度的分析方法為高效液相色譜法（HPLC)、薄層色譜法（TLC)、氣相色譜法（GC)等， 這些方法均是先采集反應(yīng)過程中不同時(shí)間點(diǎn)的樣品，然后集中進(jìn)行測(cè)試，因此具有延滯性， 對(duì)于反應(yīng)過程中出現(xiàn)的工藝參數(shù)波動(dòng)，無法及時(shí)調(diào)整。同時(shí)，此類方法檢測(cè)復(fù)雜樣品時(shí)耗時(shí) 較長(zhǎng)，以HPLC為例，HPLC具有高效的分離能力，能夠很好的分析復(fù)雜樣品，但對(duì)于類似于反 應(yīng)液的樣本分析時(shí)，由于各成分差異懸殊，往往會(huì)出現(xiàn)包合峰的現(xiàn)象；雖然通過不斷的條件 優(yōu)化能夠使目的峰與其他雜峰分離，但分析周期必然會(huì)加長(zhǎng)。如采用HPLC測(cè)定丁酸氯維地 平合成過程中的反應(yīng)物以及產(chǎn)物的濃度時(shí)，分析周期長(zhǎng)達(dá)70min，顯然不能及時(shí)提供反應(yīng)狀 態(tài)數(shù)據(jù)，非常不利于實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)。
[0003] 近年來，近紅外光譜（NIR)等光譜分析方法逐漸應(yīng)用于在線實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)上，通過及 時(shí)提供成分信息確保有效反應(yīng)在最優(yōu)條件下進(jìn)行，但NIR的譜圖中光譜峰存在特征性差 異、譜峰嚴(yán)重重疊且難以解析等問題，限制了其推廣應(yīng)用。
[0004] 拉曼光譜除了具有NIR所具有的檢測(cè)快速性、對(duì)樣品無破壞性的特點(diǎn)外，還具有 圖譜特征性強(qiáng)、譜峰重疊較少、光譜信息更加直接的優(yōu)勢(shì)，廣泛應(yīng)用于多種領(lǐng)域的分析檢 測(cè)，如食品化學(xué)、化學(xué)化工、生物醫(yī)學(xué)、環(huán)境分析等?，F(xiàn)有技術(shù)中，已有報(bào)道將其用于雙氧水 合成的實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)，石油的快速分析，大豆的快速檢測(cè)等。但將拉曼光譜技術(shù)應(yīng)用與藥物合成 過程的實(shí)時(shí)檢測(cè)還略顯不足。本文以丁酸氯維地平原料藥的合成為例，將拉曼光譜技術(shù)應(yīng) 用于藥物合成過程的快速監(jiān)測(cè)中，并采用簡(jiǎn)單明了的線性回歸法建立定量模型，實(shí)現(xiàn)簡(jiǎn)單 易操作的目的，同時(shí)采用溶劑特征峰作為參比峰，抵消檢測(cè)環(huán)境變化對(duì)拉曼信號(hào)采集的影 響。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明是為解決上述問題而進(jìn)行的，以丁酸氯維地平原料藥的合成過程為例，提 供了一種采用拉曼光譜分析技術(shù)快速監(jiān)測(cè)藥物合成過程的方法。
[0006] 本發(fā)明采用了如下技術(shù)方案：
[0007] 本發(fā)明提供了一種丁酸氯維地平原料藥合成過程的實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)方法，該丁酸氯維地 平以氯維地平酸與丁酸氯甲酯為反應(yīng)物，其特征在于，采用拉曼光譜分析技術(shù)進(jìn)行測(cè)試，包 括以下步驟：
[0008] 步驟一：樣品溶液的配制
[0009] 分別配制一定梯度濃度的丁酸氯甲酯校正集溶液和丁酸氯維地平校正集溶液，用 于建立模型；另配制一定梯度濃度的丁酸氯甲酯驗(yàn)證集溶液和丁酸氯維地平驗(yàn)證集溶液， 用于交叉驗(yàn)證。
[0010] 步驟二：拉曼光譜數(shù)據(jù)的獲得
[0011] 采用拉曼光譜儀測(cè)得校正集樣品溶液和驗(yàn)證集樣品溶液的原始拉曼光譜數(shù)據(jù)，每 份樣本平行測(cè)定3~6次，采用計(jì)算機(jī)對(duì)原始拉曼光譜數(shù)據(jù)進(jìn)行預(yù)處理，得到待測(cè)樣品的拉 曼光譜數(shù)據(jù)，該預(yù)處理包括特征波段的選擇、對(duì)特征波段進(jìn)行5~13點(diǎn)平滑、對(duì)拉曼光譜數(shù) 據(jù)進(jìn)行基線校正。
[0012] 步驟三，參比峰和特征峰的選擇
[0013] 分別采集空白溶劑乙腈、丁酸氯甲酯以及丁酸氯維地平的拉曼光譜原始圖譜，按 照步驟二進(jìn)行預(yù)處理后，得到預(yù)處理圖譜，在預(yù)處理圖譜中選擇空白溶劑的無其他物質(zhì)干 擾的峰位作為參比峰，選擇丁酸氯甲酯溶液的無其他物質(zhì)干擾的峰位作為丁酸氯甲酯的特 征峰，記為第一特征峰，選擇丁酸氯維地平溶液的無其他物質(zhì)干擾的峰位作為丁酸氯維地 平的特征峰，記為第二特征峰。
[0014] 步驟四，定量模型曲線的建立
[0015] 選出參比峰與特征峰后，提取對(duì)應(yīng)峰位的相對(duì)峰強(qiáng)，以特征峰峰強(qiáng)/參比峰峰強(qiáng) 為Y軸對(duì)相應(yīng)的組分濃度進(jìn)行線性回歸分析。并計(jì)算對(duì)應(yīng)回歸曲線的R 2值、校正集標(biāo)準(zhǔn)偏 差（SEC)和校正集相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（％ RSEC)，R2值不得低于0. 990, SEC不得高于2. 0，％ RSEC不得高于5. 0%。
[0016] 步驟五，定量模型的驗(yàn)證
[0017] 使用所建模型對(duì)驗(yàn)證集樣本進(jìn)行預(yù)測(cè)，預(yù)測(cè)濃度與參比濃度對(duì)比，驗(yàn)證集標(biāo)準(zhǔn)偏 差（SEP)和驗(yàn)證集相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSEP)分別不得高于2. 0和5. 0%。以所建模型的R2 值越大、校正集及驗(yàn)證集的標(biāo)準(zhǔn)偏差和標(biāo)準(zhǔn)偏差越小，選擇最優(yōu)定量模型用于合成過程監(jiān) 測(cè)。
[0018] 步驟六，合成反應(yīng)的預(yù)測(cè)
[0019] 間隔預(yù)定時(shí)間連續(xù)采集反應(yīng)過程中的反應(yīng)母液，濾膜過濾后乙腈稀釋一倍，按照 步驟二獲得原始光譜后進(jìn)行預(yù)處理，得到所述預(yù)處理后的拉曼光譜數(shù)據(jù)，根據(jù)特征峰峰強(qiáng)/ 參比峰峰強(qiáng)的值對(duì)應(yīng)最優(yōu)所述"第一特征峰峰強(qiáng)/參比峰峰強(qiáng)-丁酸氯甲酯濃度"定量模 型曲線以及最優(yōu)所述"第二特征峰峰強(qiáng)/參比峰峰強(qiáng)-丁酸氯維地平濃度"定量模型曲線， 分別得到各時(shí)間點(diǎn)時(shí)反應(yīng)母液中丁酸氯甲酯以及丁酸氯維地平的濃度，實(shí)現(xiàn)對(duì)丁酸氯維地 平原料藥合成過程的實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)。
[0020] 本發(fā)明提供的丁酸氯維地平原料藥合成過程的實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)方法，還可以具有這樣的 特征，包括：在步驟六之前對(duì)步驟四中的定量模型曲線進(jìn)行驗(yàn)證的步驟，驗(yàn)證方法為選用已 知濃度的丁酸氯甲酯標(biāo)準(zhǔn)溶液以及已知濃度的丁酸氯維地平標(biāo)準(zhǔn)溶液。
[0021] 本發(fā)明提供的丁酸氯維地平原料藥合成過程的實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)方法，還可以具有這樣的 特征：驗(yàn)證方法還可以將預(yù)測(cè)濃度和測(cè)試樣品的HPLC數(shù)據(jù)進(jìn)行比對(duì)。
[0022] 本發(fā)明提供的丁酸氯維地平原料藥合成過程的實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)方法，還可以具有這樣的 特征：選擇空白溶劑的波數(shù)為2294CHT 1或1377CHT1處的峰位作為參比峰，選擇丁酸氯甲酯 溶劑溶液的波數(shù)為718CHT 1的峰位作為丁酸氯甲酯的特征峰，選擇丁酸氯維地平溶劑溶液 的波數(shù)為1652011^59701^1以及468CHT1處的峰位作為丁酸氯維地平的特征峰。
[0023] 本發(fā)明提供的丁酸氯維地平原料藥合成過程的實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)方法，還可以具有這樣的 特征：最優(yōu)的"第一特征峰峰強(qiáng)/參比峰峰強(qiáng)-丁酸氯甲酯濃度"定量模型曲線以及"第二 特征峰峰強(qiáng)/參比峰峰強(qiáng)-丁酸氯維地平濃度"定