一種液體化妝品中表睪酮的快速檢測(cè)方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及食品質(zhì)量安全檢測(cè)領(lǐng)域，特別是涉及一種液體化妝品中表睪酮的快速檢測(cè)方法。
【背景技術(shù)】
[0002]化妝品與人類生活密切相關(guān)，隨著我國(guó)國(guó)民經(jīng)濟(jì)的快速發(fā)展和人民生活水平的不斷提高，化妝品日益成為日常生活不可或缺的必需品。根據(jù)國(guó)家統(tǒng)計(jì)局?jǐn)?shù)據(jù)，2014年化妝品類商品的國(guó)內(nèi)銷售總額達(dá)1824.7億元人民幣，近三年的平均增幅為13.4%。面對(duì)化妝品行業(yè)的高速發(fā)展和化妝品需求量的與日倶增，化妝品的產(chǎn)品質(zhì)量和安全性越來越受到廣大消費(fèi)者的關(guān)注和重視。
[0003]表睪酮屬于常用激素的一種，使用添加激素的化妝品短期內(nèi)對(duì)皮膚具有一定的嫩白作用，但如果長(zhǎng)期使用，會(huì)引發(fā)血糖升高、高血壓、骨質(zhì)疏松、免疫功能下降及肥胖等危害，激素已被列為化妝品禁用物質(zhì)，因此急需開發(fā)化妝品中表睪酮的檢測(cè)方法。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種成本低廉、操作簡(jiǎn)便、可以實(shí)現(xiàn)快速和準(zhǔn)確檢測(cè)的液體化妝品中表睪酮的快速檢測(cè)方法。
[0005]—種液體化妝品中表睪酮的快速檢測(cè)方法，包括如下步驟:
[0006]制作噴霧電離裝置:包括硼硅酸鹽玻璃毛細(xì)管的拉制和噴霧電離裝置的組裝;所述噴霧電離裝置包括金屬微電極、硼硅酸鹽玻璃毛細(xì)管、支架、金屬夾、電源線和高壓電源；
[0007]檢測(cè):由所述硼酸鹽玻璃毛細(xì)管的后端向其中依次注入溶劑和液體化妝品樣品，待充分混合萃取且彼此分層后形成有機(jī)相層和水相層，將金屬微電極由所述硼酸鹽玻璃毛細(xì)管的后端插入至所述有機(jī)相層，所述金屬微電極的后端分別與所述支架和所述金屬夾相連，所述金屬夾通過所述電源線與所述高壓電源的輸出接口相連，將所述硼酸鹽玻璃毛細(xì)管的前端放置于離子阱質(zhì)譜儀的進(jìn)樣口前端，組裝完成所述噴霧電離裝置，設(shè)定所述離子阱質(zhì)譜儀參數(shù)，所述高壓電源向所述金屬夾施加高壓，并由所述金屬微電極傳導(dǎo)到所述硼酸鹽玻璃毛細(xì)管，產(chǎn)生電噴霧進(jìn)行質(zhì)譜分析，正離子模式檢測(cè)，得到相應(yīng)實(shí)驗(yàn)圖譜。
[0008]本發(fā)明所述的液體化妝品中表睪酮的快速檢測(cè)方法，其中，所述溶劑為乙酸乙酯和羥胺水溶液，由所述硼酸鹽玻璃毛細(xì)管的后端向其中依次注入乙酸乙酯、羥胺水溶液和液體化妝品樣品，待充分混合萃取且彼此分層后形成有機(jī)相層和水相層，所述水相層由羥胺水溶液和液體化妝品樣品共同組成，所述有機(jī)相層為乙酸乙酯層。
[0009]本發(fā)明所述的液體化妝品中表睪酮的快速檢測(cè)方法，其中，所述乙酸乙酯、羥胺水溶液和所述液體化妝品樣品注入量均為1yL，其中，所述輕胺水溶液的濃度為100mmol/L ；
[0010]所述液體化妝品樣品中的待測(cè)表睪酮與羥胺水溶液發(fā)生衍生化反應(yīng)，生成反應(yīng)產(chǎn)物3-肟基-表睪酮，通過液-液萃取作用，3-肟基-表睪酮進(jìn)一步迀移至乙酸乙酯層，并經(jīng)電噴霧離子化產(chǎn)生質(zhì)譜信號(hào)響應(yīng)。
[0011]本發(fā)明所述的液體化妝品中表睪酮的快速檢測(cè)方法，其中，所述離子阱質(zhì)譜儀為小型便攜式離子阱質(zhì)譜儀，檢測(cè)3-肟基-表睪酮，具體參數(shù)為:噴霧電壓2.5kV，逆傅里葉變換存儲(chǔ)波形陷波頻率194?202kHz，碰撞誘導(dǎo)解離直流電壓0.68V，直流頻率106.9kHz ；
[0012]檢測(cè)到了3-肟基-表睪酮即表明所述液體化妝品中含有表睪酮，所述液體化妝品中表睪酮的檢出限為5yg/kg。
[0013]本發(fā)明所述的液體化妝品中表睪酮的快速檢測(cè)方法，其中，所述溶劑為乙酸乙酯，待充分混合萃取且彼此分層后形成乙酸乙酯層和水相層，所述乙酸乙酯和所述液體化妝品樣品注入量均為I OyL;
[0014]所述離子阱質(zhì)譜儀為小型便攜式離子阱質(zhì)譜儀，檢測(cè)表睪酮，具體參數(shù)為:噴霧電壓2.5kV，逆傅里葉變換存儲(chǔ)波形陷波頻率183?191kHz，碰撞誘導(dǎo)解離直流電壓0.68V，直流頻率101.4kHz;所述液體化妝品中表睪酮的檢出限為100yg/kg。
[0015]本發(fā)明所述的液體化妝品中表睪酮的快速檢測(cè)方法，其中，所述高壓電源向所述金屬夾施加2.5kV電壓，所述小型便攜式質(zhì)譜儀為Mini 12型小型便攜式矩形線性離子阱質(zhì)譜儀。
[0016]本發(fā)明所述的液體化妝品中表睪酮的快速檢測(cè)方法，其中，所述乙酸乙酯需充注至所述硼硅酸鹽玻璃毛細(xì)管的尖端，所述有機(jī)相層、所述水相層以及二者之間均不能產(chǎn)生氣泡。
[0017]本發(fā)明所述的液體化妝品中表睪酮的快速檢測(cè)方法，其中，所述硼硅酸鹽玻璃毛細(xì)管的前端即尖端的內(nèi)徑為5?15μπι;所述硼酸鹽玻璃毛細(xì)管的前端放置于所述離子阱質(zhì)譜儀的進(jìn)樣口前端5mm處。
[0018]本發(fā)明所述的液體化妝品中表睪酮的快速檢測(cè)方法，其中，所述硼硅酸鹽玻璃毛細(xì)管采用標(biāo)準(zhǔn)壁硼硅酸鹽玻璃毛坯和微電極拉制儀制備得到，所述標(biāo)準(zhǔn)壁硼硅酸鹽玻璃毛還的規(guī)格為:外徑為1.5mm，內(nèi)徑為0.86mm ；具體制備方法包括如下步驟:
[0019]將所述標(biāo)準(zhǔn)壁硼硅酸鹽玻璃毛坯置于所述微電極拉制儀中，設(shè)置所述微電極拉制儀的各項(xiàng)參數(shù)，制作得到所述硼硅酸鹽玻璃毛細(xì)管，所述微電極拉制儀的各項(xiàng)參數(shù)設(shè)置為:加熱溫度450°C，拉力值O牛頓，速率5°C/秒，循環(huán)周期時(shí)間I秒，氣壓600百帕。
[0020]本發(fā)明所述的液體化妝品中表睪酮的快速檢測(cè)方法，其中，所述方法還包括含有表睪酮的陽性液體化妝品樣品的制備方法，具體包括如下步驟:稱取經(jīng)檢測(cè)不含有表睪酮的液體化妝品樣品5g，置于一 1mL比色管中，再加入以甲醇配制的濃度為lyg/mL的表睪酮標(biāo)準(zhǔn)溶液ImL，混合均勻，即制得含有表睪酮的陽性液體化妝品樣品。
[0021]本發(fā)明液體化妝品中表睪酮的快速檢測(cè)方法與現(xiàn)有技術(shù)不同之處在于:
[0022]本發(fā)明液體化妝品表睪酮的快速檢測(cè)方法成本低廉、操作簡(jiǎn)便、可以實(shí)現(xiàn)快速和準(zhǔn)確檢測(cè)，本發(fā)明采用的噴霧電離裝置結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，使用方便，無需樣品前處理，3分鐘內(nèi)即可完成操作流程。本發(fā)明采用的離子阱質(zhì)譜儀為小型便攜式離子阱質(zhì)譜儀，優(yōu)選為Mini 12型小型便攜式矩形線性離子阱質(zhì)譜儀，方便攜帶和運(yùn)輸，可實(shí)現(xiàn)現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)。
[0023]本發(fā)明中，向硼酸鹽玻璃毛細(xì)管中依次注入乙酸乙酯、羥胺水溶液和液體化妝品樣品，衍生化化學(xué)反應(yīng)是改變待測(cè)物性質(zhì)以提高分離或離子化效率的有效手段。表睪酮化學(xué)物質(zhì)本身的離子化效率較低，信號(hào)響應(yīng)很弱。但表睪酮通過與衍生化試劑羥胺反應(yīng)，其生成的衍生化產(chǎn)物3-肟基-表睪酮的離子化效率較表睪酮大大提高，可獲得顯著提高的檢測(cè)靈敏度。采用乙酸乙酯，對(duì)于衍生化產(chǎn)物3-肟基-表睪酮的萃取效率和噴霧離子化效果最佳，其他溶劑都無法達(dá)到本發(fā)明的效果。
[0024]下面結(jié)合附圖對(duì)本發(fā)明的液體化妝品中表睪酮的快速檢測(cè)方法作進(jìn)一步說明。
【附圖說明】
[0025]圖1為本發(fā)明中噴霧電離裝置的結(jié)構(gòu)示意圖；
[0026]圖2為采用本發(fā)明的方法進(jìn)行液體化妝品檢測(cè)得到的3-肟基-表睪酮的二級(jí)質(zhì)譜圖；
[0027]圖3為采用本發(fā)明的方法進(jìn)行液體化妝品檢測(cè)得到的表睪酮的二級(jí)質(zhì)譜圖。
【具體實(shí)施方式】
[0028]實(shí)施例1
[0029]—、檢測(cè)方法
[0030]一種液體化妝品中表睪酮的快速檢測(cè)方法，包括如下步驟:
[0031]制作噴霧電離裝置:包括硼硅酸鹽玻璃毛細(xì)管的拉制和噴霧電離裝置的組裝;如圖1所示，噴霧電離裝置包括金屬微電極1、硼硅酸鹽玻璃毛細(xì)管2、支架3、金屬夾4、電源線5和高壓電源；
[0032]檢測(cè):由硼酸鹽玻璃毛細(xì)管2的后端向其中依次注入乙酸乙酯、羥胺水溶液和液體化妝品樣品，待充分混合萃取且彼此分層后形成乙酸乙酯層和水相層，所述水相層由羥胺水溶液和液體化妝品樣品組成，將金屬微電極I由硼酸鹽玻璃毛細(xì)管的后端插入至乙酸乙酯層，金屬微電極I的后端分別與支架3和金屬夾4相連，金屬夾4通過電源線5與高壓電源的輸出接口相連，將硼酸鹽玻璃毛細(xì)管2的前端放置于離子阱質(zhì)譜儀的進(jìn)樣口前端，組裝完成噴霧電離裝置，設(shè)定離子阱質(zhì)譜儀參數(shù)，高壓電源向金屬夾4施加高壓，并由金屬微電極I傳導(dǎo)到硼酸鹽玻璃毛細(xì)管2，產(chǎn)生電噴霧進(jìn)行質(zhì)譜分析，正離子模式檢測(cè)，得到相應(yīng)實(shí)驗(yàn)圖譜。[0033 ]乙酸乙酯、輕胺水溶液和液體化妝品樣品注入量均為1yL，其中，輕胺水溶液的濃度為10mmo 1/L;乙酸乙酯、羥胺水溶液和液體化妝品樣品在硼硅酸鹽玻璃毛細(xì)管2內(nèi)充分混合的方式為，以硼硅酸鹽玻璃毛細(xì)管2的中心點(diǎn)為軸心，將硼硅酸鹽玻璃毛細(xì)管2的前端和后端依次上下移動(dòng)，連續(xù)操作10?15次，使乙酸乙酯、羥胺水溶液和液體化妝品樣品依靠重力作用在硼硅酸鹽玻璃毛細(xì)管2內(nèi)往復(fù)運(yùn)動(dòng)，待充分混合后進(jìn)行下一步操作。
[0034]液體化妝品樣品中的待測(cè)表睪酮與羥胺發(fā)生衍生化反應(yīng)，生成反應(yīng)產(chǎn)物3-肟基-表睪酮，通過液-液萃取作用，3-肟基-表睪酮進(jìn)一步迀移至乙酸乙酯層，并經(jīng)電噴霧離子化產(chǎn)生質(zhì)譜信號(hào)響應(yīng)。
[0035]離子阱質(zhì)譜儀說明:現(xiàn)有的離子阱質(zhì)譜儀都可以滿足本發(fā)明的需要，例如:LTQXL型離子阱質(zhì)譜儀(賽默飛世爾科技公司)。為滿足方便攜帶和運(yùn)輸，并快速檢測(cè)的目的，優(yōu)選為小型便攜式離子阱質(zhì)譜儀，例如= Mini 12型小型便攜式矩形線性離子阱質(zhì)譜儀(清譜科技公司)，檢測(cè)3-肟基-表睪酮，具體參數(shù)為:噴霧電壓2.5kV，逆傅里葉變換存儲(chǔ)波形陷波頻率194?202kHz，碰撞誘導(dǎo)解離直流電壓0.68V，直流頻率106.9kHz。
[0036]乙酸乙酯、羥胺水溶液和液體化妝品樣品需由硼硅酸鹽玻璃毛細(xì)管2的后端依次注入，彼此之間不能產(chǎn)生氣泡，產(chǎn)生氣泡后會(huì)影響液-液萃取和噴霧離子化效果，所述乙酸乙酯需充注至所述硼硅酸鹽玻璃毛細(xì)管的尖端。硼硅酸鹽玻璃毛細(xì)管2的前端即尖端的內(nèi)徑為5?15μπι，硼硅酸鹽玻璃毛細(xì)管2采用標(biāo)準(zhǔn)壁硼硅酸鹽玻璃毛坯和微電極拉制儀制備得至IJ，標(biāo)準(zhǔn)壁硼硅酸鹽玻璃毛坯的規(guī)格為:外徑為1.5_，內(nèi)徑為0.86_;具體制備方法包括如下步驟:
[0037]將標(biāo)準(zhǔn)壁硼硅酸鹽玻璃毛坯置于微電極拉制儀中，設(shè)置微電極拉制儀的各項(xiàng)參數(shù)，制作得到硼硅酸鹽玻璃毛細(xì)管2，微電極拉制儀的各項(xiàng)參數(shù)設(shè)置為:加熱溫度450°C，拉力值O牛頓，速率5 0C /秒，循環(huán)周期時(shí)間I秒，氣壓600百帕。
[0038]微電極拉制儀為P-1000型微電極拉制儀(美國(guó)Sutter公司)。
[0039]二、檢測(cè)參數(shù)