金剛烷胺的模擬磁性分子印跡材料的制備方法及應(yīng)用
【專利說明】金剛烷胺的模擬磁性分子印跡材料的制備方法及應(yīng)用
[0001]
技術(shù)領(lǐng)域
[0002]本發(fā)明屬于屬于食品安全檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種雞禽流感的預(yù)防和早期治療的藥品的檢測(cè)技術(shù)。
[0003]
【背景技術(shù)】
[0004]金剛烷胺又名三環(huán)癸胺，英文名為Amantadine，分子式為CiqH17N,是最早用于抑制流感病毒的抗病毒藥之一，1966年美國(guó)批準(zhǔn)其作為用于亞洲感冒流行的預(yù)防藥。在畜牧養(yǎng)殖上，金剛烷胺主要用于雞禽流感的預(yù)防和早期治療，和豬傳染性胃腸炎的防治，但由于它具有致精神異常的副作用和耐藥性對(duì)畜產(chǎn)品消費(fèi)者存在較大風(fēng)險(xiǎn)，美國(guó)Π)Α明確禁止在禽畜養(yǎng)殖中使用此藥物。我國(guó)農(nóng)業(yè)部560號(hào)公告中禁止金剛烷胺用于禽畜養(yǎng)殖過程。
[0005]在食品安全檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域中，樣品前處理效果對(duì)分析結(jié)果的確準(zhǔn)性起到至關(guān)重要的作用，磁性分子印跡技術(shù)是近年發(fā)展起來的一種新型樣品前處理技術(shù)，主要用于樣品的分離和富集，能更具特異性的吸附目標(biāo)物質(zhì)，且磁性材料可以利用外加磁場(chǎng)分離的特性，更加簡(jiǎn)化了萃取的步驟，具有操作簡(jiǎn)便和分離效率高等優(yōu)點(diǎn)。在食品安全檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域中正被逐步采用，成為樣品分離純化的新型技術(shù)。
[000?]通常磁性分子印跡材料米用的模板分子為目標(biāo)分子，而米用目標(biāo)分子作為模板可能會(huì)由于材料中洗脫不徹底，造成模板泄漏的問題，針對(duì)這一現(xiàn)象，許多研究者采用與目標(biāo)物結(jié)構(gòu)類似的物質(zhì)作為模擬的模板分子，采用這一方法合成的聚合物既對(duì)目標(biāo)物具有特異性的識(shí)別能力，同時(shí)還避免了由模板泄漏引起的假陽(yáng)性問題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]為解決現(xiàn)有技術(shù)中分離富集金剛烷胺時(shí)，采用目標(biāo)分子作為模板，材料中洗脫不徹底，容易造成模板泄漏引起的假陽(yáng)性問題，本發(fā)明提供一種金剛烷胺的模擬磁性分子印跡材料的制備方法，其技術(shù)方案如下:
一種金剛烷胺的模擬磁性分子印跡材料的制備方法，以環(huán)六亞甲基四胺作為模擬金剛烷胺的模板分子，2-甲基丙烯酸作為功能單體，2-甲基-2-丙烯酸-1，2_乙二醇酯作為交聯(lián)劑，2，2 ’ -偶氮二異丁腈作為引發(fā)劑，包括以下步驟:
先取模板分子放入反應(yīng)容器中，然后加入功能單體和交聯(lián)劑，再加入甲醇/乙腈混合溶劑，充分混勻溶解，所述模板分子與功能單體的摩爾比為1:4，交聯(lián)劑與功能單體的摩爾比為5:1，所述甲醇/乙腈混合溶劑是指體積比為1:4的甲醇與乙腈的混合溶液，甲醇/乙腈混合溶劑的體積與功能單體的摩爾數(shù)之比為1L/ mol ；
然后在上述反應(yīng)容器中加入四氧化三鐵粒子，再加入引發(fā)劑，然后充入氮?dú)?分鐘后，在60°C水浴條件下密閉振蕩反應(yīng)24小時(shí)，經(jīng)過濾后得到聚合物顆粒;所述四氧化三鐵粒子的質(zhì)量與功能單體的摩爾數(shù)之比為250g/mol，引發(fā)劑與功能單體的摩爾比為1:10；
然后將聚合物顆粒用孔徑為80?120微米的定性濾紙包好，放入索氏抽提器中，先用乙酸/甲醇混合溶劑抽提18小時(shí)，所述乙酸/甲醇混合溶劑是指體積比為1:4的乙酸與甲醇的混合溶液，乙酸/甲醇混合溶劑的體積與功能單體的摩爾數(shù)之比為125L/ mol，再用甲醇對(duì)索氏抽提器中的聚合物顆粒抽提6小時(shí)，所述甲醇的體積與功能單體的摩爾數(shù)之比為125L/mol ；
然后將索氏抽提器中的聚合物顆粒用孔徑為80?120微米的定性濾紙過濾后，在60°C的條件下真空干燥，得到金剛烷胺的模擬磁性分子印跡材料。
[0008]本發(fā)明中的孔徑為80?120微米的定性濾紙，即為快速定性濾紙。
[0009]
優(yōu)選地，所述四氧化三鐵粒子的制備方法如下:
取去離子水放入反應(yīng)皿中，然后取摩爾比為1:2的FeCl2.4H20和FeCl3.6H20溶于去離子水中，于70°C水浴加熱5分鐘，所述去離子水的體積與FeCl2.4H20的摩爾數(shù)之比為5L/mol ；
然后在上述反應(yīng)皿中加入乙醇，再邊攪拌邊加入氨水，靜置10分鐘，所述氨水是指質(zhì)量百分比濃度為10%的氨的水溶液，去離子水、乙醇、氨水的體積比為5:1:2;
然后在上述反應(yīng)皿外壁上設(shè)置磁場(chǎng)，使反應(yīng)皿中的固體物質(zhì)在磁場(chǎng)的作用下吸附在反應(yīng)皿內(nèi)壁上，再將反應(yīng)皿中的溶液傾倒出來，固體物質(zhì)保留在反應(yīng)皿中；
然后將上述反應(yīng)皿外壁上的磁場(chǎng)撤去，將反應(yīng)皿中的固體物質(zhì)用去離子水洗滌兩次以上，所述反應(yīng)皿中的固體物質(zhì)的質(zhì)量與去離子水的體積之比為10g /L，再用乙醇洗滌兩次以上，所述反應(yīng)皿中的固體物質(zhì)的質(zhì)量與乙醇的體積之比為10g /L，待洗滌后排出的乙醇呈中性，所得到的反應(yīng)皿中的固體物質(zhì)即為四氧化三鐵粒子。
[0010]
優(yōu)選地，所述四氧化三鐵粒子還需要按以下方法進(jìn)行表面改性處理:
取四氧化三鐵粒子放入反應(yīng)容器中，加入油酸，充分混合，使四氧化三鐵粒子表面被油酸覆蓋，所述四氧化三鐵粒子的質(zhì)量與油酸的體積之比為Ikg /L，靜置I小時(shí)，再用乙醇洗去多余的油酸，所述四氧化三鐵粒子的質(zhì)量與乙醇的體積之比為Ikg /L，得到改性后的四氧化三鐵粒子。
[0011]
本發(fā)明還提供上述金剛烷胺的模擬磁性分子印跡材料在分離富集食品中的金剛烷胺中的應(yīng)用。
[0012]優(yōu)選地，包括以下步驟:
步驟I，萃取:取待檢測(cè)的食品樣品與提取溶劑混合振蕩2分鐘，然后用孔徑為80?120微米的定性濾紙過濾后，得到提取液，所述提取溶劑是指甲醇、乙醇、乙腈或水中的一種，所述提取溶劑也可以是體積比為1:4的甲醇與水的混合溶液，所述提取溶劑也可以是體積比為1:4的乙醇與水的混合溶液，所述提取溶劑也可以是體積比為1:4的乙腈與水的混合溶液，所述待檢測(cè)的食品樣品的質(zhì)量與提取溶劑的體積之比為200g /L;然后取提取液置于可密封的樣品瓶中，添加金剛烷胺的模擬磁性分子印跡材料，振蕩混勻，所述金剛烷胺的模擬磁性分子印跡材料的質(zhì)量與提取液的體積之比為4g/L; 步驟2，分離:在上述樣品瓶外壁上設(shè)置磁場(chǎng)，使樣品瓶中的固體物質(zhì)在磁場(chǎng)的作用下吸附在樣品瓶?jī)?nèi)壁上，再將樣品瓶中的溶液傾倒出來，固體物質(zhì)保留在樣品瓶中；
步驟3，淋洗:在上述樣品瓶中加入乙腈作為淋洗液，振蕩混合，所述金剛烷胺的模擬磁性分子印跡材料的質(zhì)量與乙腈的體積之比4g/L，然后在樣品瓶外壁上設(shè)置磁場(chǎng)，使樣品瓶中的固體物質(zhì)在磁場(chǎng)的作用下吸附在樣品瓶?jī)?nèi)壁上，再將樣品瓶中的溶液傾倒出來，固體物質(zhì)保留在樣品瓶中；
步驟4，洗脫:在上述樣品瓶中加入氨化甲醇作為洗脫液，振蕩混合，所述金剛烷胺的模擬磁性分子印跡材料的質(zhì)量與氨化甲醇的體積之比4g/L，所述氨化甲醇是指將體積比為1:19氨水和甲醇混合后得到的溶液，所述氨水是指質(zhì)量百分比濃度為25%?28%的氨的水溶液;然后在樣品瓶外壁上設(shè)置磁場(chǎng)，使樣品瓶中的固體物質(zhì)在磁場(chǎng)的作用下吸附在樣品瓶?jī)?nèi)壁上，再將樣品瓶中的溶液傾倒出來作為洗脫液，將洗脫液在溫度為40 °C的條件下氮吹至近干后，加入到甲醇中重新溶解，所述金剛烷胺的模擬磁性分子印跡材料的質(zhì)量與甲醇的體積之比20g/L，然后采用0.45μπι有機(jī)相濾膜過濾，所得濾液即為分離了富集食品中的金剛烷胺的溶液。
[0013]上述所得濾液供氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀測(cè)定，如果濾液中的金剛烷胺呈陽(yáng)性，則可以判定待檢測(cè)的食品樣品中的金剛烷胺含量呈陽(yáng)性。
[0014]本發(fā)明中的氮吹，是指采用氮吹儀充入純度大于99.5%的氮?dú)獬酢?br>[0015]本發(fā)明制備的金剛烷胺的模擬磁性分子印跡材料與傳統(tǒng)的固相萃取、液液萃取等方法相比具有如下優(yōu)勢(shì):制備的過程簡(jiǎn)單易行，得到的聚合物能使金剛烷胺較好地吸附于其上，萃取、分離、淋洗和洗脫過程都可以通過外加磁場(chǎng)完成，方便快速，且因?yàn)椴捎铆h(huán)六亞甲基四胺作為模擬金剛烷胺的模板分子，避免了由模板泄漏引起的假陽(yáng)性問題。實(shí)現(xiàn)了對(duì)金剛烷胺的高選擇性檢測(cè)，回收率高，回收率的平均值達(dá)到94.7%，具有操作更為簡(jiǎn)單和準(zhǔn)確等特點(diǎn)。
[0016]
【具體實(shí)施方式】
[0017]為更好地說明本發(fā)明，便于理解本發(fā)明的技術(shù)方案，本發(fā)明的典型但非限制性的實(shí)施例如下:
實(shí)施例1:金剛烷胺的模擬磁性分子印跡材料的制備
取50mL去離子水放入容器中，將1mmol的FeCl2.4H2O與20mmol的FeCl3.6H2O溶于去離子水中，于70°C水浴加熱5分鐘后，加入1mL的乙醇，在攪拌過程中加入20mL濃度為10%的氨水，反應(yīng)10分鐘后，將釹鐵硼置于容器外側(cè)，利用外加磁場(chǎng)從溶液中分離出四氧化三鐵，四氧化三鐵在釹鐵硼的磁力作用下，吸附在容器壁上，此時(shí)，用手將釹鐵硼和容器同時(shí)握住，將容器中的溶液自然傾斜后倒出來，將容器中的殘留的固體渣狀物用去離子水洗滌四氧化三鐵三次，每10克固體渣狀物一次洗滌采用100毫升去離子水，再用乙醇洗滌四氧化三鐵三次，10克固體渣狀