鮑內臟抗氧化肽的制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開一種鮑內臟抗氧化肽的制備方法，該方法采用酶解法制備鮑內臟抗氧化肽，采用鼠尾藻粉對鮑內臟抗氧化肽進行脫除重金屬處理，采用活性碳對鮑內臟抗氧化肽進行精制，經活性碳處理后，實現(xiàn)了酶解液的脫腥脫色；同時結合陶瓷膜和超濾膜分離技術對酶解產物進行初步分離純化，實現(xiàn)了多肽和多糖的有效分離。將鮑內臟開發(fā)成為抗氧化活性肽功能食品，實現(xiàn)鮑內臟資源的高值化利用，既具有成本優(yōu)勢，還對綜合利用蛋白質資源提供了一條有效途徑。經超濾處理后其總糖含量降至3％左右，顯著低于原液的40％，該工藝可制備高活性的抗氧化肽，適用于抗氧化肽的規(guī)?；a。
【專利說明】
鮑內臟抗氧化肽的制備方法
技術領域
[0001]本發(fā)明涉及海產品副產物加工的技術領域。更具體地，涉及一種鮑內臟抗氧化肽的制備方法。
【背景技術】
[0002]近年來，鮑產業(yè)已成為福建省海水養(yǎng)殖的支柱產業(yè)之一，2013年，鮑養(yǎng)殖量達到
8.8470萬噸，約占全國鮑產量的80%。隨著與日倶增的市場需求，鮑加工產業(yè)呈現(xiàn)蓬勃發(fā)展的趨勢。
[0003]目前，在鮑魚加工生產中，主要以生產鮮活鮑魚、鮑魚罐頭和干鮑3種產品為主，鮑魚的加工與食用大部分以腹足為主，在鮑魚加工過程中，產生的大量的鮑內臟、鮑蒸煮液等副產物。雖然鮑魚加工的臟器副產物中含有豐富的蛋白質、維生素等營養(yǎng)成分及一些生物活性物質，但是由于鮑魚內臟利用技術的缺乏，導致占鮑魚總重量1/4左右的鮑魚內臟無法充分利用。
[0004]現(xiàn)有技術中，鮑魚副產物可以用來生產飼料等低附加值產品；極少部分鮑魚內臟用于加工成飼料，大部分鮑魚內臟沒有得到充分的利用。國內外有報道將鮑魚內臟加工成魚蛋白飼料粉、魚油、魚精蛋白與發(fā)酵成魚露等；在學術研究方面，有學者從鮑魚內臟中提取纖維素酶、制備鮑魚多糖等，從鮑魚殼中提取甲殼素等。但是，將鮑魚內臟開發(fā)成為抗氧化活性肽功能的食品還未見報道。
[0005]因此，需要提供一種鮑內臟抗氧化肽的制備方法。

【發(fā)明內容】

[0006]本發(fā)明的目的在于提供一種鮑內臟抗氧化肽的制備方法，該方法解決下述兩個問題:。
[0007]本發(fā)明要解決的第一個問題是對所提活性物質進行脫除重金屬、脫色和脫腥處理。
[0008]本發(fā)明要解決的第二個問題是對所提活性物質進行初步分離純化，實現(xiàn)了多肽和多糖的有效分離，該方法提取工藝簡單，適合工業(yè)化生產。
[0009]為達到上述目的，本發(fā)明采用下述技術方案:
[0010]一種鮑內臟抗氧化肽的制備方法，所述鮑內臟抗氧化肽的制備方法包括以下步驟:
[0011](I)預處理，將鮑內臟先初步粉碎后，再經膠體磨研磨成均勻顆粒的勻漿；
[0012](2)動物蛋白酶酶解，將鮑內臟與水按質量比1:1(即料液比1/1)混合，用動物蛋白酶進行酶解；
[0013](3)鼠尾藻粉脫除重金屬:將鼠尾藻經低溫30-45°C烘干，粉碎、過篩得到40-100目鼠尾藻粉，添加到步驟(2)的酶解液中，攪拌；
[0014](4)活性碳脫色脫腥，將脫除重金屬的酶解液在35°C的條件下采用活性碳進行脫色脫腥Ih;
[0015](5)陶瓷膜處理，將酶解液經陶瓷膜處理，濾除雜質，收集透過液；
[0016](6)超濾處理，將陶瓷膜處理的透過液經超濾膜處理，收集分子量小于1kDa的組分，干燥，即可得到高活性的抗氧化肽粉。
[0017]優(yōu)選地，步驟(2)所述酶解時間4.8h、酶添加量3000U/g，酶解溫度54°C ；
[0018]優(yōu)選地，步驟(3)所述的鼠尾藻粉添加量為酶解液的0.5_3wt%，攪拌時間為1-3小時。
[0019]優(yōu)選地，步驟(4)所述活性碳添加量為酶解液的1.0wt%。
[0020]優(yōu)選地，步驟(5)所述陶瓷膜過濾的操作壓力1.5-2.5Mpa，陶瓷膜孔徑為200nm。
[0021]優(yōu)選地，步驟(6)所述超濾膜過濾的操作壓力2.0-4.0Mpa，超濾膜為截留相對分子質量MffCO 1kDa的超濾膜。
[0022]本發(fā)明的有益效果如下:
[0023]本發(fā)明采用酶解法制備鮑內臟抗氧化肽，采用鼠尾藻粉對鮑內臟抗氧化肽進行脫除重金屬處理，采用活性碳對鮑內臟抗氧化肽進行精制，經活性碳處理后，實現(xiàn)了肽粉的脫腥脫色；同時結合陶瓷膜和超濾膜分離技術對酶解產物進行初步分離純化，實現(xiàn)了多肽和多糖的有效分離。將鮑內臟開發(fā)成為抗氧化活性肽功能食品，實現(xiàn)鮑內臟資源的高值化利用，既具有成本優(yōu)勢，還對綜合利用蛋白質資源提供了一條有效途徑。經超濾處理后其總糖含量降至3%左右，顯著低于原液的40%，該工藝可制備高活性的抗氧化肽，適用于抗氧化肽的規(guī)?；a。
【具體實施方式】
[0024]為了更清楚地說明本發(fā)明，下面結合優(yōu)選實施例對本發(fā)明做進一步的說明。本領域技術人員應當理解，下面所具體描述的內容是說明性的而非限制性的，不應以此限制本發(fā)明的保護范圍。
[0025]實施例1
[0026]—種鮑內臟抗氧化肽的制備方法，所述鮑內臟抗氧化肽的制備方法包括以下步驟:
[0027](I)預處理，將1000克(濕重)鮑內臟先初步粉碎后，再經膠體磨研磨成均勻顆粒的勻漿；
[0028](2)動物蛋白酶酶解，將鮑內臟與水混合，鮑內臟與水質量比為1:1(即料液比1/1)、酶解時間4.8h、酶添加量3000U/g，酶解溫度54°C ；
[0029](3)鼠尾藻粉脫除重金屬，將40克鼠尾藻經低溫40°C烘干，粉碎、過40目篩得到鼠尾藻粉，添加到步驟(2)所述的2000克的酶解液中，，攪拌2小時；
[0030](4)活性碳脫色脫腥，將酶解液在35°C的條件下采用活性炭進行脫腥脫色lh，其中活性炭添加量為酶解液的1.0wt%。
[0031](5)陶瓷膜處理，將酶解液經孔徑為200nm的陶瓷膜處理，濾除大部分雜質，收集透過液；所述的陶瓷膜過濾的操作壓力1.5Mpa ;
[0032](6)超濾處理，將陶瓷膜處理的透過液經超濾膜處理，所述的超濾膜過濾的操作壓力2.0Mpa,收集分子量小于1kDa的組分，干燥，即可得到高活性的抗氧化肽粉99.25克(干重)；超濾后總糖含量為3.84%，原液的總糖含量為40.18%。
[0033]采用了鼠尾藻粉和活性碳對所制備的鮑內臟酶解液進行了脫除重金屬和脫色脫腥處理。一般鮑內臟多糖都采用醇沉的方法進行糖與蛋白的分離，而本發(fā)明采用了超濾膜技術實現(xiàn)了多肽與多糖的有效分離，適用于抗氧化肽的規(guī)?；a。
[0034]經體外抗氧化實驗，測得鮑內臟抗氧化肽的DPPH自由基清除能力的IC5。為
0.87mg/mL，輕自由基清除能力的IC5q為7.53mg/mL，超氧陰離子自由基清除能力的IC 5。為
19.41mg/mL.經細胞實驗表明，所制備的鮑內臟抗氧化肽對HepG2細胞無細胞毒作用，在HepG2細胞氧化應激模型中，鮑內臟抗氧化肽顯著提高細胞存活率，減少H2O2對細胞的氧化損傷。同時，經動物實驗驗證表明，鮑內臟抗氧化肽在一定程度上能提高抗氧化酶類的活性、總抗氧化能力水平和降低丙二醛的含量，具有一定的抗氧化能力。
[0035]實施例2
[0036]—種鮑內臟抗氧化肽的制備方法，所述鮑內臟抗氧化肽的制備方法包括以下步驟:
[0037](I)預處理，將1000克(濕重)鮑內臟先初步粉碎后，再經膠體磨研磨成均勻顆粒的勻漿；
[0038](2)動物蛋白酶酶解，將鮑內臟與水混合，鮑內臟與水質量比為1:1(即料液比1/1)、酶解時間4.8h、酶添加量3000U/g，酶解溫度54°C ；
[0039](3)鼠尾藻粉脫除重金屬，將30份鼠尾藻經低溫35°C烘干，粉碎、過100目篩得到鼠尾藻粉，加入到酶解液中，攪拌2小時；
[0040](4)活性碳脫色脫腥，將酶解液在35°C的條件下采用活性炭進行脫腥脫色lh，其中活性炭添加量為1.0wt %。
[0041](5)陶瓷膜處理，將酶解液經孔徑為200nm的陶瓷膜處理，濾除大部分雜質，收集透過液；所述的陶瓷膜過濾的操作壓力2.5Mpa ;
[0042](6)超濾處理，將陶瓷膜處理的透過液經超濾膜處理，所述的超濾膜過濾的操作壓力4.0Mpa,收集分子量小于1kDa的組分，干燥，即可得到高活性的抗氧化肽粉99.74克(干重)；超濾后總糖含量為3.91%，原液的總糖含量為41.27%。
[0043]采用了鼠尾藻粉和活性碳對所制備的鮑內臟酶解液進行了脫除重金屬和脫色脫腥處理。一般鮑內臟多糖都采用醇沉的方法進行糖與蛋白的分離，而本發(fā)明采用了超濾膜技術實現(xiàn)了多肽與多糖的有效分離，適用于抗氧化肽的規(guī)?；a。
[0044]經動物實驗驗證表明，鮑內臟抗氧化肽在一定程度上能提高抗氧化酶類的活性、總抗氧化能力水平和降低丙二醛的含量，具有一定的抗氧化能力。
[0045]實施例3
[0046]—種鮑內臟抗氧化肽的制備方法，所述鮑內臟抗氧化肽的制備方法包括以下步驟:
[0047](I)預處理，將1000克(濕重)鮑內臟先初步粉碎后，再經膠體磨研磨成均勻顆粒的勻漿；
[0048](2)動物蛋白酶酶解，將鮑內臟與水混合，鮑內臟與水質量比為1:1(即料液比1/1)、酶解時間4.8h、酶添加量3000U/g，酶解溫度54°C ；
[0049](3)鼠尾藻粉脫除重金屬，將35份鼠尾藻經低溫35°C烘干，粉碎、過80目篩得到鼠尾藻粉，加入到酶解液中，攪拌2小時；
[0050](4)活性碳脫色脫腥，將酶解液在35°C的條件下采用活性炭進行脫腥脫色lh，其中活性炭添加量為1.0wt %。
[0051](5)陶瓷膜處理，將酶解液經孔徑為200nm的陶瓷膜處理，濾除大部分雜質，收集透過液；所述的陶瓷膜過濾的操作壓力2.5Mpa ;
[0052](6)超濾處理，將陶瓷膜處理的透過液經超濾膜處理，所述的超濾膜過濾的操作壓力4.0Mpa,收集分子量小于1kDa的組分，干燥，即可得到高活性的抗氧化肽粉99.74克(干重)；超濾后總糖含量為3.91%，原液的總糖含量為41.27%。
[0053]采用了鼠尾藻粉和活性碳對所制備的鮑內臟酶解液進行了脫除重金屬和脫色脫腥處理。一般鮑內臟多糖都采用醇沉的方法進行糖與蛋白的分離，而本發(fā)明采用了超濾膜技術實現(xiàn)了多肽與多糖的有效分離，適用于抗氧化肽的規(guī)?；a。
[0054]經動物實驗驗證表明，鮑內臟抗氧化肽在一定程度上能提高抗氧化酶類的活性、總抗氧化能力水平和降低丙二醛的含量，具有一定的抗氧化能力。
[0055]顯然，本發(fā)明的上述實施例僅僅是為清楚地說明本發(fā)明所作的舉例，而并非是對本發(fā)明的實施方式的限定，對于所屬領域的普通技術人員來說，在上述說明的基礎上還可以做出其它不同形式的變化或變動，這里無法對所有的實施方式予以窮舉，凡是屬于本發(fā)明的技術方案所引伸出的顯而易見的變化或變動仍處于本發(fā)明的保護范圍之列。
【主權項】
1.一種鮑內臟抗氧化肽的制備方法，其特征在于，所述鮑內臟抗氧化肽的制備方法包括以下步驟: (1)預處理，將鮑內臟先初步粉碎后，再經膠體磨研磨成均勻顆粒的勻漿； (2)動物蛋白酶酶解，將經過預處理的鮑內臟與水按質量比1:1混合，用動物蛋白酶進行酶解得到酶解液； (3)鼠尾藻粉脫除重金屬:將鼠尾藻經低溫30-45°C烘干，粉碎、過篩得到40-100目鼠尾藻粉，添加到步驟(2)的酶解液中，攪拌； (4)活性碳脫色脫腥，將脫除重金屬的酶解液在35°C的條件下采用活性碳進行脫色脫腥Ih; (5)陶瓷膜處理，將酶解液經陶瓷膜處理，濾除雜質，收集透過液； (6)超濾處理，將陶瓷膜處理的透過液經超濾膜處理，收集分子量小于1kDa的組分，干燥，即可得到高活性的抗氧化肽粉。2.根據權利要求1所述的鮑內臟抗氧化肽的制備方法，其特征在于:步驟(2)所述酶解時間為4.8h、酶添加量3000U/g，酶解溫度54°C。3.根據權利要求1所述的鮑內臟抗氧化肽的制備方法，其特征在于:步驟(3)所述的鼠尾藻粉添加量為酶解液的0.5-3wt%，攪拌時間為1-3小時。4.根據權利要求1所述的鮑內臟抗氧化肽的制備方法，其特征在于:步驟(4)所述活性碳添加量為酶解液的1.0wt%。5.根據權利要求1所述的鮑內臟抗氧化肽的制備方法，其特征在于:步驟(5)所述的陶瓷膜過濾的操作壓力1.5-2.5Mpa，陶瓷膜孔徑為200nm。6.根據權利要求1所述的鮑內臟抗氧化肽的制備方法，其特征在于:步驟(6)所述的超濾膜過濾的操作壓力2.0-4.0Mpa,超濾膜為截留相對分子質量MffCO 1kDa的超濾膜。
【文檔編號】A23J3/34GK105851458SQ201510030649
【公開日】2016年8月17日
【申請日】2015年1月22日
【發(fā)明人】吳靖娜, 劉智禹, 路海霞
【申請人】福建省水產研究所