熒光磁性貴金屬納米蛋及其制備和顯現(xiàn)指印的方法
【專利摘要】本發(fā)明的目的是提供一種熒光磁性貴金屬納米蛋及其制備和顯現(xiàn)指印的方法。所述熒光磁性貴金屬納米蛋為熒光磁性金納米蛋、熒光磁性銀納米蛋和熒光磁性鉑納米蛋中的任意一種；所述熒光磁性貴金屬納米蛋為表面包覆有熒光藻紅蛋白的納米PEI?Fe3O4粒子與納米貴金屬粒子的結(jié)合體；所述納米PEI?Fe3O4粒子是指經(jīng)過聚乙烯亞胺修飾的納米磁性四氧化三鐵粒子。本發(fā)明制備的熒光磁性納米金蛋熒光量子產(chǎn)率高，且熒光持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)，具有低毒性；本發(fā)明的指印顯現(xiàn)方法操作快速高效，可清晰顯現(xiàn)30天的陳舊指印且效果優(yōu)于傳統(tǒng)試劑的顯現(xiàn)方法。
【專利說明】熒光磁性貴金屬納米蛋及其制備和顯現(xiàn)指印的方法
[0001]
技術(shù)領(lǐng)域
[0002]本發(fā)明屬于公安刑事技術(shù)指印鑒定領(lǐng)域，具體涉及一種熒光磁性貴金屬納米蛋及其制備和顯現(xiàn)指印的方法。
【背景技術(shù)】
[0003]指紋具有人各不同、終生不變、觸物留痕特性，有“人體身份證”和“證據(jù)之王”的美稱，對(duì)揭露、證實(shí)犯罪和識(shí)別罪犯有不可忽視的作用。人雙手手指指頭的乳突花紋上分布有汗孔，汗孔分泌的汗液常含有油脂以及其他微小物質(zhì)。因此遺留在客體上的汗?jié)撝赣〕煞职倭康乃?、少量的無機(jī)物、蛋白質(zhì)、油脂等有機(jī)物。
[0004]指印顯現(xiàn)技術(shù)已有上百年的歷史，傳統(tǒng)顯現(xiàn)方法有502熏顯法、茚三酮法、DFO法等。隨著納米技術(shù)的飛速發(fā)展，新型納米材料應(yīng)用于潛指印顯現(xiàn)引起了科研工作者的關(guān)注，出現(xiàn)了利用金屬、上轉(zhuǎn)換發(fā)光、磁性納米材料顯現(xiàn)指印等方法。
[0005]作為傳統(tǒng)顯現(xiàn)方法的磁粉，顆粒大小約為800目，由于顆粒具有磁性，用于潛指印刷顯時(shí)被磁粉刷吸引而不懸浮于空氣中，因此是刑科人員在現(xiàn)場(chǎng)勘驗(yàn)時(shí)的首選。受此啟發(fā)，磁性粒子也開始受到關(guān)注，被納入潛指印顯現(xiàn)的方法試劑中。關(guān)于功能化納米磁珠的報(bào)道很多，其中一種是類似啞鈴狀的納米金功能化的納米Fe3Ck(尺寸控制4-20nm)。納米金具有特殊的穩(wěn)定性、小尺寸效應(yīng)等特點(diǎn)，使它能與含巰基、氨基的有機(jī)物如蛋白質(zhì)等結(jié)合，與含苯環(huán)的熒光素形成共價(jià)鍵，增強(qiáng)熒光素的熒光效果等。因此，該功能化后Au-Fe3O4納米粒子具有可選擇性、兼容性和超順磁特性，可以應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)、MRI成像、癌細(xì)胞診斷、控制毒品分散等領(lǐng)域，也有關(guān)于其在潛指紋顯現(xiàn)的報(bào)道，但是該復(fù)合的磁性納米粒子因?yàn)榱Ｗ拥念伾忍攸c(diǎn)，應(yīng)用于背景反差不大的潛指紋顯現(xiàn)中受到了一定的限制。
[0006]藻紅蛋白作為一種新型的熒光標(biāo)記試劑，在特定波長(zhǎng)激發(fā)下，藻紅蛋白能發(fā)射強(qiáng)烈的熒光，其熒光強(qiáng)度是熒光素的30-100倍。具有很好的吸光性能和很高的量子產(chǎn)率，在可見光譜區(qū)有很寬的激發(fā)及發(fā)射范圍。其多通過常規(guī)的標(biāo)記方法和生物素、親和素和各種單克隆抗體結(jié)合起來制成熒光探針，用于臨床診斷及生物工程技術(shù)如免疫檢測(cè)、熒光顯微技術(shù)和流式細(xì)胞熒光測(cè)定等。但在刑事科學(xué)技術(shù)領(lǐng)域的研究與應(yīng)用鮮有文獻(xiàn)報(bào)道，仍處起步階段。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]本發(fā)明的目的是提供一種熒光磁性貴金屬納米蛋及其制備和顯現(xiàn)指印的方法。
[0008]本發(fā)明一種焚光磁性貴金屬納米蛋，其特征在于，所述焚光磁性貴金屬納米蛋為熒光磁性金納米蛋、熒光磁性銀納米蛋和熒光磁性鉑納米蛋中的任意一種;所述熒光磁性貴金屬納米蛋為表面包覆有焚光藻紅蛋白的納米PE1- Fe304粒子與納米貴金屬粒子的結(jié)合體;所述納米PE1- Fe3(k粒子是指經(jīng)過聚乙稀亞胺修飾的納米磁性四氧化三鐵粒子。
[0009]本發(fā)明一種熒光磁性貴金屬納米蛋的制作方法，其特征在于，所述熒光磁性貴金屬納米蛋為熒光磁性金納米蛋、熒光磁性銀納米蛋和熒光磁性鉑納米蛋中的任意一種;所述制作方法為利用靜電吸附作用將納米PE1- FΘ304粒子與納米貴金屬溶液中的納米貴金屬粒子結(jié)合;再將熒光藻紅蛋白包覆在PE1- Fe3O4粒子與納米貴金屬的結(jié)合體表面形成熒光磁性貴金屬納米蛋;所述納米PE1- Fe3(k粒子是指經(jīng)過聚乙稀亞胺修飾的納米磁性四氧化三鐵粒子。
[00?0]進(jìn)一步的，所述納米PE1- Fe3(k粒子是指經(jīng)過聚乙稀亞胺修飾的納米磁性四氧化三鐵粒子，包括以下步驟:
制備納米Fe304，將3mol二價(jià)鐵鹽FeSO4.7H20和6mol三價(jià)鐵鹽FeCl3.6H20溶于250mL蒸餾水中并將其加入到500mL三口燒瓶中，在氮?dú)鈿夥毡Ｗo(hù)下將氨水溶液加到反應(yīng)體系中使體系的PH多10，劇烈攪拌，水浴恒溫;攪拌30min后結(jié)束反應(yīng)，用蒸餾水洗滌直至中性，傾去上層清液，在60 °C下真空干燥后，研磨即得納米Fe3O4;
制備納米PEI_Fe304粒子，將0.37g納米Fe304加入20mL、4g/L的聚乙稀亞胺PEI溶液中，在頻率2450MHz、功率800W微波條件下加熱120min，反應(yīng)后用外加磁場(chǎng)進(jìn)行分離，然后將沉淀部分用去離子水洗滌至中性，冷凍干燥即可得到納米PE1-Fe3O4粒子。
[0011 ] 進(jìn)一步的，所述納米貴金屬溶液為納米Au溶液、納米Ag溶液和納米Pt溶液中的任意一種;所述納米貴金屬溶液的制備，包括:
制備納米Au溶液，將100mL、0.0206moVL的HAuC14溶液與25mL、0.0025moVL的檸檬酸三鈉溶液混合后放入超聲儀中振蕩30min，接著在功率700W，溫度250°C微波條件下加熱lmin，反應(yīng)結(jié)束后將溶液冷卻至室溫，用超純水定容至100mL，得到濃度約為0.0206mol/L的納米Au溶液并于4°C的冰箱中保存；
制備納米Ag溶液，將10mL、0.0103mo 1/L的硝酸銀溶液與25mL、0.0025moI/L的檸檬酸三鈉溶液混合后放入超聲儀中振蕩30min，接著在功率700W，溫度245°C微波條件下加熱5min，反應(yīng)結(jié)束后將溶液冷卻至室溫，用超純水定容至10ml，得到濃度約為0.0103mol/L的納米Ag溶液并于4°C的冰箱中保存；
制備納米Pt溶液，向燒杯中加入2.5mL乙二醇，13mL、10g/50mL的氯鉑酸溶液，0.4mL、0.04mol/L的KOH溶液后放入超聲波振蕩儀中振蕩30min，接著微波加熱30S，微波功率為700W，溫度245°C，反應(yīng)結(jié)束后將溶液冷卻至室溫，用超純水定容至lOOmL，得到濃度約為0.4746mol/L的納米Pt溶液并于4°C的冰箱中保存。
[0012]進(jìn)一步的，所述采用靜電吸附作用將納米PE1-Fe3O4粒子與納米貴金屬溶液中的納米貴金屬粒子結(jié)合;包括:
制備納米Fe3O4OAu，將2mL PE1- Fe3O4水溶液加入1mL納米Au種子溶液，用超聲儀頻率為80KHz分散3min后進(jìn)行磁性分離，將沉淀部分分散于20mL水中，然后加入110mL、0.lmol/L的NaOH溶液，并逐次滴加0.5mL、1%HAuC14溶液和0.75mL、0.2mol/L的NH2OH-HCl溶液，最后利用外加磁場(chǎng)分離所得的納米Fe3O4OAu ；
制備納米Fe3O4O Ag，取2mL PEI_Fe304水溶液加入1mL納米Ag種子溶液，用超聲儀頻率為80KHz分散2min后進(jìn)行磁性分離，將沉淀部分分散于20mL水中，然后加入110mL、
0.lmol/L的NaOH溶液，并逐次滴加0.35mL、0.1552mol/L的AgNO3溶液和0.75mL、0.2mol/L的NH2OH-HCl溶液，最后利用外加磁場(chǎng)分離所得的納米Fe3O4OAg; 制備納米Fe3O4OPt，取2mL PE1- Fe3O4溶液加入1mL納米Pt種子溶液，用超聲波洗滌儀頻率為80KHz分散Imin后進(jìn)行磁性分離。將沉淀部分分散于20mL水中，然后加入IlOmU
0.lmol/L的 NaOH水溶液，并逐次滴加0.5mL、l%H2PtCl5水溶液和0.75mL、0.2mol/L的NH2OH-HCl水溶液，最后利用外加磁場(chǎng)分離所得的納米Fe3O4OPt。
[0013]進(jìn)一步的，所述將焚光藻紅蛋白包覆在PE1-Fe304粒子與納米貴金屬的結(jié)合體表面形成熒光磁性貴金屬納米蛋體系，包括:
制備焚光磁性金納米蛋，稱取0.06g納米Fe304@Au分散于2ml的去離子水中，超聲溶解后取上層溶液，磁場(chǎng)下分離，分離后用去離水洗滌磁性納米粒子二次，然后，加入50yL、l.0mg/mL的藻紅蛋白PE和950μL、10mmol/L的PBS，且該P(yáng)BS的pH為7.4，搖勻后于37°C反應(yīng)12h，磁性分離后，用lOmmol/L的PBS溶液，且該P(yáng)BS溶液的pH為7.4，洗滌納米粒子二次，得到兼具磁性與熒光性能的熒光磁性金納米蛋試劑；
制備焚光磁性銀納米蛋，稱取0.04g納米Fe304@Ag分散于2ml的去離子水中，超聲溶解后取上層溶液，磁場(chǎng)下分離，分離后用去離水洗滌磁性納米粒子二次，然后，加入50yL、l.0mg/mL的藻紅蛋白PE和950μL、10mmol/L的PBS，且該P(yáng)BS的pH為7.4，搖勻后于37°C反應(yīng)12h，磁性分離后，用lOmmol/L的PBS溶液，且該P(yáng)BS溶液的pH為7.4，洗滌納米粒子二次，得到兼具磁性與熒光性能的熒光磁性銀納米蛋試劑；
制備熒光磁性鉑納米蛋，稱取0.05g納米Fe3O4OPt分散于2ml的去離子水中，超聲溶解后取上層溶液，磁場(chǎng)下分離，分離后用去離水洗滌磁性納米粒子二次，然后，加入50yL1.0mg/mL、的藻紅蛋白PE和950yL、10mmol/L的PBS，且該P(yáng)BS的pH為7.4，搖勻后于37°C反應(yīng)12h，磁性分離后，用lOmmol/L的PBS溶液，且該P(yáng)BS溶液的pH為7.4，洗滌納米粒子二次，得到兼具磁性與熒光性能的熒光磁性鉑納米蛋試劑。
[0014]本發(fā)明還提供了一種熒光磁性貴金屬納米蛋試劑顯現(xiàn)陳舊汗?jié)撝赣〉姆椒?，包括以下步驟:
51、配置汗?jié)撝赣★@現(xiàn)試劑，該顯現(xiàn)試劑為熒光磁性貴金屬納米蛋，所述熒光磁性貴金屬納米蛋為熒光磁性金納米蛋、熒光磁性銀納米蛋和熒光磁性鉑納米蛋中的任意一種;所述焚光磁性貴金屬納米蛋為表面包覆有焚光藻紅蛋白的納米PE1- Fe304粒子與納米貴金屬粒子的結(jié)合體;所述納米PE1- Fe3(k粒子是指經(jīng)過聚乙稀亞胺修飾的納米磁性四氧化三鐵粒子；
52、志愿者將手洗凈晾干后，在玻璃、塑料、保鮮膜、金屬客體上捺印汗?jié)撝赣?，獲得指印樣本。
[0015]S3、將步驟SI制得的的顯現(xiàn)試劑滴顯步驟S2制得的汗?jié)撝赣?，反?yīng)10分鐘；
54、使用超純水洗去步驟S3滴顯后的汗?jié)撝赣「∩?br> 55、將步驟S4洗去浮色后的汗?jié)撝赣『娓桑?br> 56、在顯現(xiàn)觀察系統(tǒng)下，觀察固定步驟S5烘干后的汗?jié)撝赣D像。
[0016]進(jìn)一步的，所述步驟S2的指印樣本的存放時(shí)間為7—30天。
[0017]進(jìn)一步的，所述步驟S3為用膠頭滴管吸取步驟SI所制得的貴金屬納米簇顯現(xiàn)試劑，使其沿指印乳突紋線順時(shí)針滴顯，并與指印物質(zhì)充分反應(yīng)2h。
[0018]進(jìn)一步的，所述步驟S6中顯現(xiàn)觀察系統(tǒng)為利用多波段光源、有色濾光鏡、數(shù)碼單反相機(jī)搭建的顯現(xiàn)觀察系統(tǒng)。
[0019]本發(fā)明提供了一種新型汗?jié)撝赣★@現(xiàn)試劑，創(chuàng)新的使用了藻紅蛋白修飾了納米金、銀、鉑包覆的磁性四氧化三鐵納米粒子。利用它們粒徑小、體系穩(wěn)定且兼具磁性與高熒光量子產(chǎn)率等特點(diǎn)，借助自主搭建顯現(xiàn)觀察系統(tǒng)，對(duì)熒光磁性貴金屬納米蛋體系顯現(xiàn)的汗?jié)撝赣∵M(jìn)行觀察固定。
[0020]本發(fā)明具有如下優(yōu)點(diǎn):
1.本發(fā)明將藻紅蛋白應(yīng)用于納米貴金屬包覆的磁性四氧化三鐵體系屬首創(chuàng)；
2.制備的熒光磁性納米金蛋熒光量子產(chǎn)率高，且熒光持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)，具有低毒性；
3.指印顯現(xiàn)操作快速高效，可清晰顯現(xiàn)30天的陳舊指??；
4.本發(fā)明制備的熒光磁性貴金屬納米蛋顯現(xiàn)陳舊指印的性能優(yōu)于傳統(tǒng)顯現(xiàn)試劑；
5.顯現(xiàn)觀察系統(tǒng)能較高的固定指印信息，有利于檢驗(yàn)鑒定。
【附圖說明】
[0021]圖1為熒光磁性貴金屬金納米蛋體系合成原理圖(銀、鉑類似)。
[0022]圖2為熒光磁性金納米蛋、熒光磁性銀納米蛋、熒光磁性鉑納米蛋在玻璃客體顯現(xiàn)陳舊指印圖。
[0023](A)為熒光磁性金納米蛋在玻璃客體顯現(xiàn)陳舊指印圖；
(B)為熒光磁性銀納米蛋在玻璃客體顯現(xiàn)陳舊指印圖；
(C)為熒光磁性鉑納米蛋在玻璃客體顯現(xiàn)陳舊指印圖。
[0024]圖3為顯現(xiàn)觀察系統(tǒng)及顯現(xiàn)原理示意圖。
[0025]圖4為貴金屬納米簇顯現(xiàn)試劑顯現(xiàn)汗?jié)撝赣〉墓に嚵鞒虉D。
【具體實(shí)施方式】
[0026]實(shí)施例1
熒光磁性金納米蛋的制備:
(I)制備納米Au溶液，將10mL0.0206mol/L的HAuC14溶液與25mL0.0025mol/L的檸檬酸三鈉溶液混合后放入超聲儀中振蕩30min，接著在功率700W，溫度250° C微波條件下加熱lmin，反應(yīng)結(jié)束后將溶液冷卻至室溫，用超純水定容至100mL，得到濃度約為0.0206mol/L的納米Au溶液并于4° C的冰箱中保存；
(2)制備納米Fe304，將3mol二價(jià)鐵鹽(FeS04.7H20)和6mol三價(jià)鐵鹽(FeCl3.6H20)溶于250mL蒸餾水中并將其加入到500mL三口燒瓶中，在氮?dú)鈿夥毡Ｗo(hù)下將氨水溶液加到反應(yīng)體系中使體系的PH多10，劇烈攪拌，水浴恒溫。攪拌30min后結(jié)束反應(yīng)，用蒸餾水洗滌直至中性，傾去上層清液，在60 °C下真空干燥后，研磨即得納米Fe3O4;
(3)制備納米PE1-Fe3O4粒子，將0.37g納米Fe3O4加入20mL4g/L聚乙烯亞胺(PEI)溶液中，在頻率2450MHz、功率800W微波條件下加熱120min，反應(yīng)后用外加磁鐵進(jìn)行分離，然后將沉淀部分用去離子水洗滌至中性，冷凍干燥即可得到納米PE1- Fe3O4粒子；
(4)制備納米Fe3O4OAu，將2mLPE1- Fe3O4水溶液加入1mL納米Au種子溶液，用超聲儀分散3min后(頻率為80KHz)，進(jìn)行磁性分離，將沉淀部分分散于20mL水中，然后加入IlOmL0.lmol/L NaOH溶液，并逐次滴加0.5mLl%HAuCl4溶液和0.75mL0.2mol/L NH2OH-HCl溶液，最后利用外加磁場(chǎng)分離所得的納米Fe3O4OAu ； (5)制備焚光磁性金納米蛋，稱取0.06g納米Fe304@Au分散于2ml的去離子水中，超聲溶解后取上層溶液，磁場(chǎng)下分離，分離后用去離水洗滌磁性納米粒子二次，然后，加入50yL的l.0mg.mL-1藻紅蛋白PE和950yL10mmol/L PBS，且該P(yáng)BS的pH為7.4，搖勻后于37°C反應(yīng)12h，磁性分離后，用1mmoI/LPBS溶液，且該I3BS溶液的pH為7.4，洗滌納米粒子二次，得到兼具磁性與熒光性能的熒光磁性金納米蛋。
[0027]實(shí)施例2
9?光磁性銀納米蛋的制備:
(1)制備納米Ag溶液，將10mL0.0103mol/L的硝酸銀溶液與25mL0.0025mol/L的檸檬酸三鈉溶液混合后放入超聲儀中振蕩30min，接著在功率700W，溫度245° C微波條件下加熱5min，反應(yīng)結(jié)束后將溶液冷卻至室溫，用超純水定容至10ml，得到濃度約為0.0103mol/L的納米Ag溶液并于4° C的冰箱中保存；
(2)制備納米Fe304，將3mol二價(jià)鐵鹽(FeS04.7H20)和6mol三價(jià)鐵鹽(FeCl3.6H20)溶于250mL蒸餾水中并將其加入到500mL三口燒瓶中，在氮?dú)鈿夥毡Ｗo(hù)下將氨水溶液加到反應(yīng)體系中使體系的PH多10，劇烈攪拌，水浴恒溫。攪拌30min后結(jié)束反應(yīng)，用蒸餾水洗滌直至中性，傾去上層清液，在60 °C下真空干燥后，研磨即得納米Fe3O4;
(3)制備納米PE1-Fe3O4粒子，將0.37g納米Fe3O4加入20mL4g/L聚乙烯亞胺(PEI)溶液中，在頻率2450MHz、功率800W微波條件下加熱120min，反應(yīng)后用外加磁鐵進(jìn)行分離，然后將沉淀部分用去離子水洗滌至中性，冷凍干燥即可得到納米PE1- Fe3O4粒子；
(4)制備納米Fe3O4OAg，取2mL PEI_Fe304水溶液加入1mL納米Ag種子溶液，用超聲儀分散2min后(頻率為80KHz)，進(jìn)行磁性分離，將沉淀部分分散于20mL水中，然后加入IlOmL0.lmol/L NaOH溶液，并逐次滴加0.35mL0.1552moL/L的AgNO3溶液和0.75mL 0.2mol/L NH2OH-HCl溶液，最后利用外加磁場(chǎng)分離所得的納米Fe3O4OAg;
(5)制備焚光磁性銀納米蛋，稱取0.04g納米Fe304@Ag分散于2ml的去離子水中，超聲溶解后取上層溶液，磁場(chǎng)下分離，分離后用去離水洗滌磁性納米粒子二次，然后，加入50yL的l.0mg.mL-1藻紅蛋白PE和950yL10mmol/L PBS，且該P(yáng)BS的pH為7.4，搖勻后于37°C反應(yīng)12h，磁性分離后，用1mmoI/LPBS溶液，且該I3BS溶液的pH為7.4，洗滌納米粒子二次，得到兼具磁性與熒光性能的熒光磁性銀納米蛋。
[0028]實(shí)施例3
9?光磁性銷納米蛋的制備:
(1)制備納米Pt溶液，向燒杯中加入2.5mL乙二醇、13mL 10g/50mL氯鉑酸溶液、
0.4mL 0.04mol/LK0H溶液后放入超聲波振蕩儀中振蕩30min，接著微波加熱30S，微波功率為700W，溫度245°C，反應(yīng)結(jié)束后將溶液冷卻至室溫，用超純水定容至100mL，得到濃度約為0.4746mol/L的納米Pt溶液并于4°C的冰箱中保存；
(2)制備納米Fe3O4，將一定量二價(jià)鐵鹽(FeS04■ 7H20)和三價(jià)鐵鹽(FeCl3 ■ 6H20)混合溶液加入到三口燒瓶中，滴液漏斗中加入一定濃度的沉淀劑NH3 ■ H20，在氮?dú)鈿夥障聦彼芤杭拥椒磻?yīng)試劑中，使試劑的PH多10，劇烈攪拌，水浴恒溫。攪拌30min后結(jié)束反應(yīng)，用蒸餾水洗滌直至中性，傾去上層清液，在60°C下真空干燥后，研磨即得納米Fe304;
(3)制備納米PE1-Fe3O4粒子，將0.37g納米Fe304加入20mL4g/L聚乙烯亞胺(PEI)溶液中，在頻率2450MHz、功率800W微波條件下加熱120min，反應(yīng)后用外加磁鐵進(jìn)行分離，然后將沉淀部分用去離子水洗滌至中性，冷凍干燥即可得到納米PE1- Fe304粒子；
(4)制備納米Fe3O4OPt，取2mL PEI_Fe304溶液加入1mL納米Pt種子溶液，用超聲波洗滌儀分散Imin后(頻率為80KHz)，進(jìn)行磁性分離。將沉淀部分分散于20mL水中，然后加入IlOmL 0.lmol/L NaOH 水溶液，并逐次滴加 0.5mLl%H2PtC15 水溶液和 0.75mL 0.2mol/LNH20H-HC1水溶液，最后利用外加磁場(chǎng)分離所得的納米Fe304@Pt;
(5)制備熒光磁性鉑納米蛋，稱取0.05g納米Fe304@Pt分散于2ml的去離子水中，超聲溶解后取上層溶液，磁場(chǎng)下分離，分離后用去離水洗滌磁性納米粒子二次，然后，加入50yL的l.0mg.mL-1藻紅蛋白PE和950yL10mmol/L PBS，且該P(yáng)BS的pH為7.4，搖勻后于37°C反應(yīng)12h，磁性分離后，用1mmoI/LPBS溶液，且該I3BS溶液的pH為7.4，洗滌納米粒子二次，得到兼具磁性與熒光性能的熒光磁性鉑納米蛋。
[0029]實(shí)施例4
一種利用熒光磁性貴金屬納米蛋試劑顯現(xiàn)陳舊汗?jié)撝赣〉姆椒?，包括以下步驟:
51、貴金屬納米蛋顯現(xiàn)試劑的制備；
52、志愿者將手洗凈晾干后，在玻璃上捺印汗?jié)撝赣?，獲得指印樣本，指印樣本擺放間距適中，為模仿案件現(xiàn)場(chǎng)上遺留的陳舊汗?jié)撝赣?，本?shí)驗(yàn)指印樣本在自然條件下存放在干凈托盤內(nèi)，存放時(shí)間為30d ；
53、用膠頭滴管吸取步驟SI所制得的金納米簇顯現(xiàn)試劑，使其沿指印乳突紋線順時(shí)針滴顯，并與指印物質(zhì)充分反應(yīng)Ih;
54、用超純水洗去步驟S3滴顯后的汗?jié)撝赣「∩?br> 55、將步驟S4洗去浮色后的汗?jié)撝赣≡诤嫦錂C(jī)中真空、37°C條件下烘干0.5h;
56、利用多波段光源、有色濾光鏡、數(shù)碼單反相機(jī)搭建顯現(xiàn)觀察系統(tǒng)對(duì)熒光汗?jié)撝赣∵M(jìn)行觀察固定，在黑暗條件下，將多波段光源照射被金納米簇顯現(xiàn)的汗?jié)撝赣?，指印產(chǎn)生的熒光透過有色濾光鏡被數(shù)碼單反相機(jī)記錄，將指印乳突紋線及其細(xì)節(jié)特征固定下來。
[0030]以上實(shí)施例僅用以說明本發(fā)明的技術(shù)方案而非限制，盡管參照較佳實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行了詳細(xì)說明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可以對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的宗旨和范圍，其均應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的權(quán)利要求范圍當(dāng)中。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種熒光磁性貴金屬納米蛋，其特征在于，所述熒光磁性貴金屬納米蛋為熒光磁性金納米蛋、熒光磁性銀納米蛋和熒光磁性鉑納米蛋中的任意一種;所述熒光磁性貴金屬納米蛋為表面包覆有焚光藻紅蛋白的納米PE1- Fe304粒子與納米貴金屬粒子的結(jié)合體;所述納米PE1- Fe304粒子是指經(jīng)過聚乙稀亞胺修飾的納米磁性四氧化三鐵粒子。2.—種焚光磁性貴金屬納米蛋制備方法，其特征在于，所述焚光磁性貴金屬納米蛋為熒光磁性金納米蛋、熒光磁性銀納米蛋和熒光磁性鉑納米蛋中的任意一種;采用靜電吸附作用將納米PE1- Fe3(k粒子與納米貴金屬溶液中的納米貴金屬粒子結(jié)合;再將焚光藻紅蛋白包覆在PE1- Fe3(k粒子與納米貴金屬的結(jié)合體表面形成焚光磁性貴金屬納米蛋;所述納米PE1- Fe304粒子是指經(jīng)過聚乙稀亞胺PEI修飾的納米磁性四氧化三鐵粒子。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述焚光磁性貴金屬納米蛋制備方法，其特征在于，所述納米PE1-Fe304粒子是指經(jīng)過聚乙稀亞胺PEI修飾的納米磁性四氧化三鐵粒子，包括以下步驟: 制備納米Fe304，將3mol二價(jià)鐵鹽FeSO4.7H20和6mol三價(jià)鐵鹽FeCl3.6H20溶于250mL蒸餾水中并將其加入到500mL三口燒瓶中，在氮?dú)鈿夥毡Ｗo(hù)下將氨水溶液加到反應(yīng)體系中使體系的PH多10，劇烈攪拌，水浴恒溫;攪拌30min后結(jié)束反應(yīng)，用蒸餾水洗滌直至中性，傾去上層清液，在60 °C下真空干燥后，研磨即得納米Fe3O4; 制備納米PE1- Fe304粒子，將0.37g納米Fe304加入20mL、4g/L聚乙稀亞胺PEI溶液中，在頻率2450MHz、功率800W微波條件下加熱120min，反應(yīng)后用外加磁場(chǎng)進(jìn)行分離，然后將沉淀部分用去離子水洗滌至中性，冷凍干燥即得到經(jīng)過聚乙烯亞胺PEI修飾的納米磁性四氧化三鐵粒子。4.根據(jù)權(quán)利要求2所述焚光磁性貴金屬納米蛋制備方法，其特征在于，所述納米貴金屬溶液為納米Au溶液、納米Ag溶液和納米Pt溶液中的任意一種； 所述納米貴金屬溶液的制備，包括: 制備納米Au溶液，將1001^、0.020611101/1的說11(:14溶液與251^、0.002511101/1的檸檬酸三鈉溶液混合后放入超聲儀中振蕩30min，接著在功率700W，溫度250° C微波條件下加熱Imin，反應(yīng)結(jié)束后將溶液冷卻至室溫，用超純水定容至lOOmL，得到濃度為0.0206mo VL的納米Au溶液并于4° C的冰箱中保存； 制備納米Ag溶液，將10mL、0.0103mol/L的硝酸銀溶液與25mL、0.0025mol/L的檸檬酸三鈉溶液混合后放入超聲儀中振蕩30min，接著在功率700W，溫度245° C微波條件下加熱5min，反應(yīng)結(jié)束后將溶液冷卻至室溫，用超純水定容至10ml，得到濃度為0.0103mol/L的納米Ag溶液并于4° C的冰箱中保存； 制備納米Pt溶液，向燒杯中加入2.5mL乙二醇，13 mL、10g/50mL氯鉑酸溶液，0.4mL、0.04mol/LK0H溶液后放入超聲波振蕩儀中振蕩30min，接著微波加熱30S，微波功率為700W，溫度245 °C，反應(yīng)結(jié)束后將溶液冷卻至室溫，用超純水定容至100mL，得到濃度為0.4746mol/L的納米Pt溶液并于4°C的冰箱中保存。5.根據(jù)權(quán)利要求2所述熒光磁性貴金屬納米蛋制備方法，其特征在于，所述采用靜電吸附作用將納米PE1- Fe304粒子與納米貴金屬溶液中的納米貴金屬粒子結(jié)合;包括: 制備納米Fe3O4OAu，將2mL PE1- Fe3O4水溶液加入1mL納米Au種子溶液，用超聲儀頻率為80KHz分散3min后進(jìn)行磁性分離，將沉淀部分分散于20mL水中，然后加入110!111^、0.11]101凡的NaOH溶液，并逐次滴加0.5mL、1%HAuC14溶液和0.75mL、0.2mol/L的NH2OH-HCl溶液，最后利用外加磁場(chǎng)分離所得的納米Fe3O4OAu ； 制備納米Fe3O4O Ag，取2mL PEI_Fe304水溶液加入1mL納米Ag種子溶液，用超聲儀頻率為80KHz分散2min后進(jìn)行磁性分離，將沉淀部分分散于20mL水中，然后加入110!111^、0.11]101凡的 NaOH 溶液，并逐次滴加 0.35mL、0.1552moL/L 的 AgNO3 溶液和 0.75mL、0.2mo I/L 的 NH2OH-HCI溶液，最后利用外加磁場(chǎng)分離所得的納米Fe3O4OAg ； 制備納米Fe3O4OPt，取2mL PE1- Fe3O4溶液加入1mL納米Pt種子溶液，用超聲儀頻率為80KHz分散Imin后進(jìn)行磁性分離，將沉淀部分分散于20mL水中，然后加入110mL、0.lmol/L的NaOH水溶液，并逐次滴加0.5mL、l%H2PtCl5水溶液和0.75mL、0.2mol/L的NH2OH-HCl水溶液，最后利用外加磁場(chǎng)分離所得的納米Fe304@Pt。6.根據(jù)權(quán)利要求2所述熒光磁性貴金屬納米蛋制備方法，其特征在于，所述將熒光藻紅蛋白包覆在PE1- Fe3(k粒子與納米貴金屬的結(jié)合體表面形成焚光磁性貴金屬納米蛋體系，包括: 制備焚光磁性金納米蛋，稱取0.06g納米Fe304@Au分散于2ml的去離子水中，超聲溶解后取上層溶液，磁場(chǎng)下分離，分離后用去離水洗滌磁性納米粒子二次，然后，加入50yL、1.0mg/mL的藻紅蛋白PE和950μL、10mmol/L的PBS，且該P(yáng)BS的pH為7.4，搖勻后于37°C反應(yīng)12h，磁性分離后，用lOmmol/L的PBS溶液，且該P(yáng)BS溶液的pH為7.4，洗滌納米粒子二次，得到兼具磁性與熒光性能的熒光磁性金納米蛋試劑； 制備焚光磁性銀納米蛋，稱取0.04g納米Fe304@Ag分散于2ml的去離子水中，超聲溶解后取上層溶液，磁場(chǎng)下分離，分離后用去離水洗滌磁性納米粒子二次，然后，加入50yL、1.0mg/mL的藻紅蛋白PE和950yL、10mmol/L的PBS，且該P(yáng)BS的pH為7.4，搖勻后于37°C反應(yīng)12h，磁性分離后，用lOmmol/L的PBS溶液，且該I3BS溶液的pH為7.4，洗滌納米粒子二次，得到兼具磁性與熒光性能的熒光磁性銀納米蛋試劑； 制備熒光磁性鉑納米蛋，稱取0.05g納米Fe3O4OPt分散于2ml的去離子水中，超聲溶解后取上層溶液，磁場(chǎng)下分離，分離后用去離水洗滌磁性納米粒子二次，然后，加入50yL、1.0mg/mL的藻紅蛋白PE和950yL、10mmol/L的PBS，且該P(yáng)BS的pH為7.4，搖勻后于37°C反應(yīng)12h，磁性分離后，用lOmmol/L的PBS溶液，且該I3BS溶液的pH為7.4，洗滌納米粒子二次，得到兼具磁性與熒光性能的熒光磁性鉑納米蛋試劑。7.—種熒光磁性貴金屬納米蛋試劑顯現(xiàn)陳舊汗?jié)撝赣〉姆椒ǎ涮卣髟谟?，采用?quán)利要求I所述熒光磁性貴金屬納米蛋顯現(xiàn)陳舊汗?jié)撝赣?，或者采用?quán)利要求2至7中任意一項(xiàng)所述制備方法制備的熒光磁性貴金屬納米蛋顯現(xiàn)陳舊汗?jié)撝赣?，包括以下步驟: 51、配置汗?jié)撝赣★@現(xiàn)試劑，該顯現(xiàn)試劑為熒光磁性貴金屬納米蛋，所述熒光磁性貴金屬納米蛋為熒光磁性金納米蛋、熒光磁性銀納米蛋和熒光磁性鉑納米蛋中的任意一種;所述焚光磁性貴金屬納米蛋為表面包覆有焚光藻紅蛋白的納米PE1- Fe304粒子與納米貴金屬粒子的結(jié)合體;所述納米PE1- Fe3(k粒子是指經(jīng)過聚乙稀亞胺修飾的納米磁性四氧化三鐵粒子； 52、志愿者將手洗凈晾干后，在玻璃、塑料、保鮮膜、金屬客體上捺印汗?jié)撝赣。@得指印樣本； 53、將步驟SI制得的的顯現(xiàn)試劑滴顯步驟S2制得的汗?jié)撝赣?，反?yīng)10分鐘； 54、使用超純水洗去步驟S3滴顯后的汗?jié)撝赣「∩? 55、將步驟S4洗去浮色后的汗?jié)撝赣『娓桑?56、在顯現(xiàn)觀察系統(tǒng)下，觀察固定步驟S5烘干后的汗?jié)撝赣D像。8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的顯現(xiàn)陳舊汗?jié)撝赣〉姆椒?，其特征在于，所述步驟S2的指印樣本的存放時(shí)間為7—30天。9.根據(jù)權(quán)利要求7所述的顯現(xiàn)陳舊汗?jié)撝赣〉姆椒?，其特征在于，所述步驟S3為用膠頭滴管吸取步驟SI所制得的貴金屬納米簇顯現(xiàn)試劑，使其沿指印乳突紋線順時(shí)針滴顯，并與指印物質(zhì)充分反應(yīng)2h。10.根據(jù)權(quán)利要求7至9中任一項(xiàng)所述的顯現(xiàn)陳舊汗?jié)撝赣〉姆椒ǎ涮卣髟谟?，所述步驟S6中顯現(xiàn)觀察系統(tǒng)為利用多波段光源、有色濾光鏡、數(shù)碼單反相機(jī)搭建的顯現(xiàn)觀察系統(tǒng)。
【文檔編號(hào)】A61B5/1172GK105962947SQ201610283027
【公開日】2016年9月28日
【申請(qǐng)日】2016年5月3日
【發(fā)明人】黃銳, 張凌燕, 劉睿, 陳虹宇
【申請(qǐng)人】西南政法大學(xué)