專利名稱：含有高度不飽和脂肪酸、其鹽或其酯的外用組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及氧化穩(wěn)定性提高、抑制高度不飽和脂肪酸氧化所引起的特有臭味的產(chǎn)生、抑制過氧化物的生成的，含有高度不飽和脂肪酸、其鹽或其酯的外用組合物。具體而言，本發(fā)明涉及氧化穩(wěn)定性提高的，當(dāng)適用于皮膚時(shí)避免產(chǎn)生臭味等由氧化引起的問題的外用組合物，該外用組合物通過向高度不飽和脂肪酸、其鹽或其酯中添加芝麻的抗氧化成分以及抗壞血酸或抗壞血酸脂肪酸酯而得到。本發(fā)明還涉及用于治療皮膚的炎癥性疾病的外用組合物。
本發(fā)明中的高度不飽和脂肪酸是具有3個(gè)或3個(gè)以上雙鍵的脂肪酸。
本發(fā)明中的外用組合物是指外用醫(yī)藥品、外用醫(yī)藥部外品、化妝品等適用于皮膚的組合物。
「外用」是指適用于皮膚。
「醫(yī)藥品」是以用于人或動(dòng)物的疾病的診斷、治療或預(yù)防為目的的物質(zhì)，「化妝品」是為了清潔、美化身體，增加魅力，改變?nèi)菝玻蛘弑３制つw或毛發(fā)健康而通過涂抹、散布及其他類似的方法使用于身體的物質(zhì)，所謂對(duì)人體作用緩和的物質(zhì)?！羔t(yī)藥部外品」是介于上述兩者之間的物質(zhì)，是比化妝品效果明確、不引起副作用且能預(yù)防皮膚疾病的物質(zhì)。在不使用這種定義的國家，以按照這些標(biāo)準(zhǔn)分類的物質(zhì)作為對(duì)象。
背景技術(shù)：
近年來，隨著生活環(huán)境的變化和復(fù)雜化，或飲食生活的變化，過敏性皮膚疾病急劇增加。所述過敏性皮膚疾病包括過敏性皮炎、牛皮癬、接觸性皮炎等。針對(duì)這些過敏性皮膚疾病，以往利用各種治療方法進(jìn)行治療，例如，通過改善生活環(huán)境和食物療法來避免過敏原，使用抗過敏劑和類固醇劑等。但是，目前針對(duì)過敏性皮膚疾病還沒有確立決定性的治療方法，正期待得到具有未見副作用、安全而且充分的治療效果的治療藥物。
二十碳五烯酸、二十二碳六烯酸是主要含在魚油中的高度不飽和脂肪酸，被發(fā)現(xiàn)具有預(yù)防高血壓、防止皮膚老化等各種作用，作為促進(jìn)健康的食品原料、醫(yī)藥品使用。期待這些脂肪酸具有針對(duì)過敏性疾病的治療效果，實(shí)際上，已有關(guān)于利用二十碳五烯酸內(nèi)服給藥或涂布于皮膚能改善過敏性皮炎的報(bào)告(Brit Respir J 1987 117463-469，The Journal of Medical Investigation 199946173-177)。
二十碳五烯酸(EPA)對(duì)各種過敏性疾病顯示效果的作用，被認(rèn)為是源于抗炎作用和免疫抑制作用。眾所周知飲食對(duì)炎癥細(xì)胞和免疫細(xì)胞膜上的脂肪酸組成有很大影響。尤其是高度不飽和脂肪酸構(gòu)成的主要因素隨來源于飲食的脂肪酸而變化，所以認(rèn)為與炎癥和免疫相關(guān)?；ㄉ南┧?AA)是前列腺素和白三烯的前體，所以在炎癥和免疫的控制中顯示重要的作用。魚油中含有EPA，魚油的攝入引起細(xì)胞膜上AA和EPA的交換。這使AA衍生的介質(zhì)減少。另外，EPA成為環(huán)氧合酶和脂氧合酶的基質(zhì)，已經(jīng)知道來源于EPA的代謝物和來源于AA的代謝物，具有不同的生理學(xué)作用。EPA對(duì)各種過敏性疾病的效果中，被期待的最大的效果是與來源于AA的介質(zhì)相反的作用。而且EPA對(duì)免疫細(xì)胞的抑制效果已有各種報(bào)道。由于EPA效力不強(qiáng)，推測(cè)具有適度的免疫調(diào)節(jié)作用，幾乎沒有副作用，所以可以長期給藥，期待作為慢性免疫疫病的基礎(chǔ)治療藥物被應(yīng)用。
高度不飽和脂肪酸，尤其是二十碳五烯酸(EPA)、二十二碳六烯酸(DHA)由于具有各種生理活性，所以作為醫(yī)藥品、食品等被廣泛應(yīng)用，但由于含有高度不飽和脂肪酸的油脂類氧化穩(wěn)定性非常低，所以作為醫(yī)藥品時(shí)，制成膠囊經(jīng)口給藥，作為食品時(shí)需要各種抗氧化劑、掩蔽劑等。但是，還沒有完全的方法，其使用自然而然地例如在制品的種類、流通溫度、添加量、保存方法等中有限制。期望適合作為外用劑、并且具有氧化穩(wěn)定性的制劑。
關(guān)于EPA等作為抗過敏劑使用己進(jìn)行各種討論，并提出特許申請(qǐng)。但是，任意一個(gè)都沒有達(dá)到實(shí)用化(特開平2-290812號(hào)公報(bào)、特開平6-62795號(hào)公報(bào))。另外，EPA等作為外用劑使用的方法也有(特開平3-90046號(hào)公報(bào)、特開平8-109128號(hào)公報(bào)、特開平6-298642號(hào)公報(bào)、特開平7-112913號(hào)公報(bào))，但也沒有達(dá)到實(shí)用化。特開平5-58902號(hào)公報(bào)中記載了由EPA和芝麻油組成的過敏預(yù)防油脂組合物，但制成膠囊劑內(nèi)服，仍然不是適合外用的具有抗氧化作用的物質(zhì)。
為提高油脂的氧化穩(wěn)定性，可以使用各種抗氧化劑。通過組合多種抗氧化劑，或通過添加抗氧化劑和磷酸、枸櫞酸、抗壞血酸這樣的增效劑提高抗氧化性。如果是植物油程度(脂肪酸的雙鍵小于等于3個(gè))，利用這些物質(zhì)就能得到充分的實(shí)用性，但在魚油這樣的氧化穩(wěn)定性極差的油脂(含有很多雙鍵數(shù)目大于等于4的脂肪酸)的情況下，只使用通?？紤]的抗氧化劑、增效劑的組合，氧化穩(wěn)定性的提高是有限的。
由于芝麻油對(duì)氧化比較穩(wěn)定，所以很早就知道芝麻中含有抗氧化成分，已知含有以芝麻酚為首的各種木酚素類等(特開昭58-132076號(hào)公報(bào)；《食の科學(xué)》，225(11)p.40～48(1996)；《食の科學(xué)》，225(11)p.32～36(1996))。
芝麻酚是被視為食品添加劑的含有油脂類和油脂的食品用抗氧化劑，但在魚油這樣的氧化穩(wěn)定性極差的油脂中無效果(日本油脂株式會(huì)社；DHA高度精制抽出技術(shù)開發(fā)事業(yè)，平成4-8年度，《結(jié)果概要》，“DHA高度精製抽出技術(shù)研究組合”，P74-79(2002))，不作為用于提高魚油的氧化穩(wěn)定性使用。
另外，抗壞血酸或抗壞血酸衍生物是被視為食品添加劑的含有油脂類和油脂的食品用抗氧化劑，但在魚油這樣的氧化穩(wěn)定性極差的油脂中單獨(dú)使用無效，即使與維生素E組合使用，其效果仍不充分。
為防止油脂氧化，各種抗氧化劑的組合使用被嘗試。例如，特開2002-142673號(hào)公報(bào)公開了利用親油性乳化劑將沒食子酸、水溶性抗氧化劑以及油溶性抗氧化劑乳化成油包水型親油性抗氧化劑。作為水溶性抗氧化劑可舉出維生素C、枸櫞酸、綠原酸及其衍生物、糖胺反應(yīng)物、原花色素、黃酮衍生物、茶萃取物、葡萄種子萃取物以及蘆丁，作為油溶性抗氧化劑可舉出維生素E、抗壞血酸棕櫚酸酯、芝麻酚、γ-米糠醇。
《日本營飬·食糧學(xué)會(huì)志》，44(6)p.493-498(1991)，《日本營飬·食糧學(xué)會(huì)志》，45(3)p.291-295(1992)，《日本營飬·食糧學(xué)會(huì)志》，45(3)p.285-290(1992)中討論比較了針對(duì)植物油脂中維生素E熱分解的各種抗氧化劑的效果。在各種抗氧化劑中，含有芝麻酚和抗壞血酸酯并用的物質(zhì)與其它抗氧化劑比較，并未見特別優(yōu)異的效果。與高度不飽和脂肪酸(不飽和鍵大于等于3)在室溫等保存時(shí)發(fā)生的氧化不同，本文獻(xiàn)中以植物油(不飽和鍵小于等于3)在高溫加熱時(shí)油脂的氧化的效果作為對(duì)象，認(rèn)為是由于對(duì)象物或條件不同所以未見芝麻酚和抗壞血酸酯并用的優(yōu)異效果。另外，也考慮了抗氧化劑自身的熱穩(wěn)定性的影響。
盡管以上的芝麻酚、抗壞血酸或其酯都是已知的抗氧化劑，但還不知道其組合與其它抗氧化劑或其它抗氧化劑的組合比較具有顯著的抗氧化作用。
外用劑由于薄薄地涂布于皮膚表面，與氧氣接觸面積大，很容易被氧化，而且要原樣保持長時(shí)間，所以如果不被賦予比內(nèi)服藥更高的氧化穩(wěn)定性則沒有實(shí)用性。另外，附著在衣服上的EPA等不能通過普通的洗滌而洗脫掉，總有味道，作為藥雖然有效，但在實(shí)際使用的情況下，在藥劑的忍容性上存在問題。而且眾所周知由于氧化產(chǎn)生的過氧化物對(duì)活體會(huì)產(chǎn)生有害的作用，所以抑制過氧化物的生成也是重要的課題。
在以往的外用劑中，作為合成抗氧化劑可以使用叔丁基羥基甲苯(BHT)、丁基羥基苯甲醚(BHA)、叔丁基氫醌(TBHQ)、乙氧基喹等。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的課題是提供氧化穩(wěn)定性顯著提高的含有高度不飽和脂肪酸、其鹽、或其酯的外用組合物。即，課題是提供即使在適用于皮膚的情況下也能抑制由于氧化產(chǎn)生的臭味以及過氧化物的生成等的EPA等的含有高度不飽和脂肪酸的外用組合物。
本發(fā)明人員為提高油脂(含有很多高度不飽和脂肪酸的油脂，例如魚油等水產(chǎn)動(dòng)物油)的氧化穩(wěn)定性，進(jìn)行了各種研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)通過組合添加芝麻酚等芝麻的抗氧化成分與抗壞血酸或抗壞血酸脂肪酸酯、及維生素E，能顯著提高油脂的氧化穩(wěn)定性，進(jìn)而完成了本發(fā)明。
本發(fā)明的要點(diǎn)是以下(1)～(15)所述的外用組合物及其制備方法。
(1)一種外用組合物，其中添加了作為抗氧化劑的芝麻的抗氧化成分以及抗壞血酸或抗壞血酸脂肪酸酯，含有高度不飽和脂肪酸、其鹽或其酯以及外用基劑，具有氧化穩(wěn)定性。
(2)一種外用組合物，其中添加了作為抗氧化劑的至少一種芝麻的抗氧化成分以及抗壞血酸或抗壞血酸脂肪酸酯，含有高度不飽和脂肪酸、其鹽或其酯以及外用基劑，具有氧化穩(wěn)定性，所述芝麻的抗氧化成分是通過使用電化學(xué)檢測(cè)器的高效液相色譜檢測(cè)，在洗脫時(shí)間為2.66、3.40、3.84、4.57、4.98、5.82、7.00、8.67、9.84、11.24、12.29、12.49、13.36、14.04、14.32、14.74、15.22、15.60、15.82、16.34、16.98、18.10、18.43、34.91分鐘附近出現(xiàn)峰的成分。
(3)一種外用組合物，其中添加了作為抗氧化劑的芝麻的抗氧化成分以及抗壞血酸或抗壞血酸脂肪酸酯，含有高度不飽和脂肪酸、其鹽或其酯以及外用基劑，具有氧化穩(wěn)定性，所述芝麻的抗氧化成分是芝麻、芝麻油或芝麻糟用溶劑、脂質(zhì)、或乳化劑中的任一種單獨(dú)或混合溶劑的萃取物。
(4)一種外用組合物，其中添加了作為抗氧化劑的芝麻的抗氧化成分以及抗壞血酸或抗壞血酸脂肪酸酯，含有高度不飽和脂肪酸、其鹽或其酯以及外用基劑，具有氧化穩(wěn)定性，所述芝麻的抗氧化成分是含有選自芝麻酚、芝麻明酚(セサミノ一ル)(sesaminol)、表芝麻明酚(エピセサミノ一ル )(epysesaminol)、松脂醇、表松脂醇(エピヒノレジノ一ル)(epypinoresinol)、丁香樹脂醇、芝麻素(サミン)(samine)、芝麻林酚(セサモリノ一ル)(sesamolinol)、2，3-二(4’-羥基-3’-甲氧基苯甲基)-2-丁烯-4-羥酸內(nèi)酯中至少一種物質(zhì)。
(5)如上述(1)至(4)所述的外用組合物，其中添加了抗壞血酸棕櫚酸酯或抗壞血酸硬脂酸酯作為抗壞血酸脂肪酸酯。
(6)如上述(1)至(4)所述的外用組合物，其中添加了相對(duì)高度不飽和脂肪酸、其鹽或其酯可溶量或可溶量以上的過剩量的抗壞血酸或抗壞血酸脂肪酸酯。
(7)如上述(1)至(4)所述的外用組合物，其中以粉末或固體物狀態(tài)添加相對(duì)高度不飽和脂肪酸、其鹽或其酯可溶量或可溶量以上的過剩量的抗壞血酸或抗壞血酸脂肪酸酯。
(8)如上述(1)至(7)所述的外用組合物，其中高度不飽和脂肪酸是含有二十碳五烯酸、二十二碳六烯酸中的任一種或一種以上的脂肪酸。
(9)如上述(1)至(8)所述的外用組合物，其中高度不飽和脂肪酸酯是高度不飽和脂肪酸作為構(gòu)成成分的甘油三酸酯或高度不飽和脂肪酸的低級(jí)醇酯。
(10)如上述(1)至(8)所述的外用組合物，其中含有作為精制魚油的高度不飽和脂肪酸酯。
(11)如上述(1)至(10)所述的外用組合物，其中進(jìn)一步含有維生素E。
(12)如上述(1)至(11)所述的外用組合物，用于皮膚的炎癥性疾病。
(13)如上述(1)至(12)任一項(xiàng)所述的外用組合物，其中作為外用基劑是使用白色軟膏、白色凡士林、氧化鋅軟膏等的油脂型基劑，親水軟膏、精制羊毛脂、吸水軟膏、尿素乳膏等乳劑型基劑(乳膏劑)中任一種的物質(zhì)。
(14)如上述(13)所述的外用組合物，其中作為外用基劑是使用白色軟膏、白色凡士林、尿素乳膏、氧化鋅軟膏中任一種的物質(zhì)。
(15)一種外用組合物的制備方法，其特征在于，在抑制氧氣混入的環(huán)境下，向過氧化值(PV)小于等于3.0meq/kg、酸值(AV)小于等于1.0，并且官能上無臭味的高度不飽和脂肪酸、其鹽或其酯、或含有這些物質(zhì)的油脂中，混合芝麻的抗氧化成分、抗壞血酸或抗壞血酸脂肪酸酯以及外用基劑，然后快速注入密封容器中，所述外用組合物具有氧化穩(wěn)定性，并且含有高度不飽和脂肪酸、其鹽或其酯。
(16)如上述(15)所述的制備方法，其中在抑制氧氣混入的環(huán)境下是在惰性氣體置換的環(huán)境下。
利用本發(fā)明能提供比以往含有高度不飽和脂肪酸的外用組合物氧化穩(wěn)定性更優(yōu)異的外用組合物。以往，能提供含有EPA等高度不飽和脂肪酸的外用醫(yī)藥品、外用醫(yī)藥部外品、化妝品，所述EPA等高度不飽和脂肪酸具有有效性，但同時(shí)因氧化產(chǎn)生的臭味而作為外用劑的實(shí)用化遲緩。本發(fā)明的組合物由于氧化穩(wěn)定性優(yōu)異，利用高度不飽和脂肪酸時(shí)，容易制備、能夠保存，而且能增加高度不飽和脂肪酸的添加量。


圖1是表示試驗(yàn)例1的油脂的氧吸收量的圖。
圖2是表示試驗(yàn)例2的油脂的氧吸收量的圖。
圖3是表示試驗(yàn)例3的油脂的氧吸收量圖。
圖4是表示試驗(yàn)例4的油脂的氧吸收量的圖。
圖5是表示試驗(yàn)例5的油脂的氧吸收量的圖。
圖6是表示試驗(yàn)例6的芝麻糟萃取物1的使用電化學(xué)檢測(cè)器的高效液相色譜圖。
圖7是表示試驗(yàn)例6的樣品的氧吸收量隨時(shí)間變化的圖。
圖8是表示試驗(yàn)例7的樣品的丙二醛(マロンジァルデヒド)malondialdehyde)濃度隨時(shí)間的變化的圖。
圖9是表示試驗(yàn)例7的樣品的烯烴化合物類濃度隨時(shí)間的變化圖。
圖10是表示試驗(yàn)例8的樣品(0.5％芝麻酚)的氧吸收量和抗氧化劑的殘留量隨時(shí)間的變化圖。
圖11是表示試驗(yàn)例8的樣品(1.0％芝麻酚)的氧吸收量和抗氧化劑的殘留量隨時(shí)間的變化的圖。
圖12是表示試驗(yàn)例8四天后追加抗壞血酸棕櫚酸酯情況下的樣品的氧吸收量和抗氧化劑的殘留量隨時(shí)間的變化圖。
圖13是表示試驗(yàn)例9的樣品的PV隨時(shí)間的變化圖。
圖14是表示圖13的樣品的氧吸收量隨時(shí)間的變化圖。
具體實(shí)施例方式
本發(fā)明中的高度不飽和脂肪酸、其鹽、或其酯是高度不飽和脂肪酸、高度不飽和脂肪酸的低級(jí)醇酯、以高度不飽和脂肪酸作為構(gòu)成成分的甘油三酸酯等。具體可以例舉含有大量二十碳五烯酸、二十二碳六烯酸等的魚油等水產(chǎn)動(dòng)物油、及其酯化后的二十碳五烯酸乙酯、二十二碳六烯酸乙酯等。另外，高度不飽和脂肪酸是指不飽和度大于等于3的脂肪酸。作為不飽和度大于等于3的高度不飽和脂肪酸可以例舉α-亞麻酸、花生四烯酸、二十碳五烯酸、二十二碳六烯酸等。另外，本發(fā)明的高度不飽和脂肪酸類包含這些脂肪酸的甲酯、乙酯、甘油三酸酯、甘油二酸酯、甘油單酸酯等酯型衍生物。
二十碳五烯酸是碳原子數(shù)為20、雙鍵數(shù)為5的不飽和脂肪酸的總稱，作為天然產(chǎn)物，是指雙鍵位置在5，8，11，14，17，且全部為順式的直鏈5元不飽和n-3系列脂肪酸。二十二碳六烯酸是在4，7，10，13，16，19位置處具有順式雙鍵的碳原子數(shù)為22的直鏈六烯酸。這些來源于天然產(chǎn)物的EPA、DHA以其自身或其甘油酯等衍生物包含在天然油脂，尤其是金槍魚、鰹、青花魚、沙丁魚、鱈等水產(chǎn)物油脂中。
本發(fā)明如果是含有上述不飽和度大于等于3的高度不飽和脂肪酸的油脂的原料，可以使用任何物質(zhì)。作為含有高度不飽和脂肪酸的油脂的原料可以是來源于沙丁魚、青花魚、秋刀魚、金槍魚、鰹等的海產(chǎn)魚、來源于微生物的脂質(zhì)、磷蝦、蝦等甲殼類、魚油、動(dòng)植物油、遺傳因子重組體植物油等。
將含有上述不飽和度大于等于3的高度不飽和脂肪酸的油脂通過凍凝處理(wintering)、酶處理等，能濃縮高度不飽和脂肪酸?；蛘邔⒑猩鲜霾伙柡投却笥诘扔?的高度不飽和脂肪酸的油脂變成與脂肪酸或醇形成的酯，再進(jìn)行蒸餾處理、尿素加成處理、柱處理、酶處理、超臨界二氧化碳處理等，能濃縮高度不飽和脂肪酸。
由于本發(fā)明的抗氧化劑不能還原已經(jīng)氧化的物質(zhì)，所以添加抗氧化劑之前，所使用的高度不飽和脂肪酸、其鹽、或其酯必須在進(jìn)行脫膠、脫酸、脫色、除臭等處理以去除氧化物后的狀態(tài)下使用。精制程度優(yōu)選PV小于等于3.0meq/kg、AV小于等于1.0、且官能上無臭味。
在本發(fā)明外用劑中含有的以高度不飽和脂肪酸為構(gòu)成成分的油脂類的酸敗中，具有加水分解產(chǎn)生的物質(zhì)和氧化產(chǎn)生的物質(zhì)。由于氧化生成氫過氧化物的分解產(chǎn)物，例如，大豆油氧化產(chǎn)生丙醛(プロピオンァルデヒド)、2-戊烯醛、正己醛、乙醛、巴豆醛等。魚油中具有令人不快的嗅味的物質(zhì)是高度不飽和脂肪酸的氧化產(chǎn)物，其發(fā)出特有的腥味。在含有不飽和脂肪酸的魚油、大豆油、亞麻籽油、菜籽油等精制油中，即使氧化最初也會(huì)產(chǎn)生令人不快的嗅味以及發(fā)生色澤的劣質(zhì)化。此現(xiàn)象稱為反胃(モドリ)。脫色植物精制油的顏色的反胃(モドリ)是由維生素E的氧化產(chǎn)物，苯并二氫吡喃-5，6-醌引起的。本發(fā)明是抑制高度不飽和脂肪酸的這些氧化物質(zhì)，在氧化穩(wěn)定性低的動(dòng)物油中觀察到特別顯著的效果。
作為本發(fā)明中所用的芝麻的抗氧化成分可以使用芝麻中含有的酚型的各種抗氧化物質(zhì)。具體可以例舉芝麻酚、芝麻明酚(セサミノ一ル)(sesaminol)、表芝麻明酚(エピセサミノ一ル)、松脂醇、表松脂醇(エピヒノレジノ一ル)(epypinoresinol)、丁香樹脂醇、芝麻素(サミン)(samine)、芝麻林酚(セサモリノ一ル)(sesamolinol)、2，3-二(4’-羥基-3’-甲氧基苯甲基)-2-丁烯-4-羥酸內(nèi)酯。圖6的HPLC色譜圖的峰是利用電化學(xué)檢測(cè)器檢測(cè)到的峰，分別表示抗氧化成分。芝麻中含有很多像這樣的抗氧化成分。芝麻酚等成分單獨(dú)使用時(shí)顯示充分的效果，混合使用時(shí)顯示更強(qiáng)的抗氧化作用。芝麻的這些抗氧化成分可以單獨(dú)使用，也可以幾個(gè)組合使用。
所以，本發(fā)明中所用的芝麻的抗氧化成分可以是芝麻經(jīng)高度精制后的物質(zhì)，也可以是除了以輕度精制的芝麻酚為首的抗氧化成分外還含有芝麻衍生物質(zhì)、芝麻木酚素類、維生素E類等的物質(zhì)。另外也可以是化學(xué)合成的物質(zhì)。并且，如果芝麻油特有的味道不構(gòu)成問題，即使芝麻油原樣也可以直接使用。
具體而言，能從芝麻籽、芝麻油或榨過芝麻油的芝麻脫脂糟中萃取上述抗氧化成分。也可以從芝麻油除臭時(shí)作為被蒸餾成分的糟粕中得到。從增加抗氧化成分考慮，優(yōu)選煎炒芝麻，但不經(jīng)煎炒的芝麻中也含有一定量的抗氧化成分，也可以使用。從芝麻籽中萃取時(shí)，優(yōu)選壓榨除去作為主要成分的中性脂質(zhì)，或利用己烷等非極性溶劑除去。芝麻油可以照原樣直接使用，但由于中性脂質(zhì)的絕對(duì)含量高，抗氧化成分所占比例小，所以用途受到限制。
作為本發(fā)明芝麻的萃取物，如果是能萃取圖6HPLC的峰表示的抗氧化成分的方法，無論何種溶劑、脂質(zhì)、乳化劑萃取的物質(zhì)都可以使用。具體而言就是可以利用一氧化二氮、丙酮、乙醇、乙基甲基酮、丙三醇、醋酸乙酯、醋酸甲酯、二乙基醚、環(huán)己烷、二氯甲烷、1，1，1，2-四氟乙烷、1，1，2-三氯乙烷、二氧化碳、1-丁醇、2-丁醇、丁烷、1-丙醇、2-丙醇、丙烷、丙二醇、己烷、甲醇等有機(jī)溶劑和甘油三酸酯、甘油二酸酯、甘油單酸酯等脂質(zhì)、丙二醇脂肪酸酯、聚甘油脂肪酸酯、脫水山梨糖醇脂肪酸酯等乳化劑萃取芝麻、芝麻油或芝麻糟而得到。然后蒸餾除去溶劑，再次溶于有機(jī)溶劑等，通過用水分配以除去水溶性成分、過濾除去不溶性成分等的操作能濃縮抗氧化成分。
本發(fā)明中抗氧化劑的添加量根據(jù)使用的基劑和保存條件、保存期限而有所增減。關(guān)于芝麻的抗氧化劑的添加量，在芝麻酚的情況下，如果添加相對(duì)高度不飽和脂肪酸0.5％或其以上則有效。相對(duì)高度不飽和脂肪酸抗壞血酸脂肪酸酯的可溶量是不超過0.1％左右，但由于過剩添加能提高抗氧化作用的持續(xù)性，所以能根據(jù)目的而適當(dāng)增加。例如，含有5％的添加有1.0％芝麻酚和0.5％抗壞血酸棕櫚酸酯的高度不飽和脂肪酸的外用組合物，得到在常溫下能保存1年時(shí)間的制品。
本發(fā)明所用的抗壞血酸或抗壞血酸脂肪酸酯可以使用抗壞血酸、抗壞血酸棕櫚酸酯、抗壞血酸硬脂酸酯等抗壞血酸脂肪酸酯。除此以外，還可以使用抗壞血酸鹽等，但優(yōu)選對(duì)脂質(zhì)溶解性高的物質(zhì)。
通常，油脂中添加抗氧化劑時(shí)以可溶量添加。如果過量添加，有不溶物存在，制品被視為有異物混入的次品，而且從功能上考慮，即使過剩添加，如果不溶解也沒有意義。
但是，本發(fā)明人員發(fā)現(xiàn)了并用芝麻的抗氧化成分和抗壞血酸或抗壞血酸脂肪酸酯的量的關(guān)系，如試驗(yàn)例11～12所示，芝麻的抗氧化成分，芝麻酚即使同量，如果有過剩的抗壞血酸脂肪酸酯存在，則其抗氧化作用也持續(xù)。過剩量的抗壞血酸或抗壞血酸脂肪酸酯可以以粉末狀態(tài)混入，也可以以固體狀態(tài)混入，都有效。但使用粘度高的基劑的情況下，由于自動(dòng)擴(kuò)散遲緩，有必要以微粉狀態(tài)進(jìn)行均一混合。作為外用劑時(shí)，不言而喻不優(yōu)選對(duì)使用感覺有影響的粗粉。
通過添加本發(fā)明的芝麻的抗氧化成分以及抗壞血酸或抗壞血酸脂肪酸酯使氧化穩(wěn)定性提高的油脂，即使單獨(dú)使用，氧化穩(wěn)定性也非常優(yōu)異，但也可以與其他抗氧化劑并用。還可以與氧化穩(wěn)定性優(yōu)異的油脂(植物油脂等)混合使用。
本發(fā)明中除芝麻的抗氧化成分以及抗壞血酸或抗壞血酸脂肪酸酯以外，也可以添加維生素E。維生素E可以是α、β、γ、δ-維生素E、或它們中的2種或2種以上混合的維生素E中任意一個(gè)，其中優(yōu)選δ-維生素E。以精制魚油為首的高度不飽和脂肪酸或其鹽或其酯等在制備階段添加維生素E的物質(zhì)市場(chǎng)上大量有售。如果以這些物質(zhì)作為原料，自然就含有維生素E。維生素E的有無對(duì)芝麻的抗氧化成分以及抗壞血酸或抗壞血酸脂肪酸酯的協(xié)同作用沒有影響。
本發(fā)明的外用組合物中的二十二碳六烯酸和二十碳五烯酸、以及它們的酯衍生物的含量沒有特別限定。根據(jù)使用目的可以使用必要的量。所以，下限是顯示有效性的最低量。另外，上限是能與選擇的基劑混合的可能量。具體地說，在外用劑中0.01％～20％范圍的含量是標(biāo)準(zhǔn)的。
作為本發(fā)明提供的外用醫(yī)藥品、外用醫(yī)藥部外品、化妝品的形態(tài)，只要是能直接將有效成分賦予皮膚的局部表面的劑型，沒有特別限定。可以例舉油脂性軟膏、乳劑型軟膏(乳膏劑)、水溶性軟膏劑等軟膏劑，凝膠劑、洗劑、膠帶劑、粘合劑、噴霧劑、凝膠、貯存型片等。
在本發(fā)明的外用組合物中，根據(jù)需要可以使用外用組合物中通常使用的基劑、吸收促進(jìn)劑、保濕劑、增稠劑、乳化劑、著色劑、芳香劑、抗氧化劑、穩(wěn)定劑、殺菌劑、防腐劑等。
作為外用基劑，例如可以例舉白色凡士林、十六(烷)醇、十八烷醇、硬脂酸、漂白蜂蠟、液體石蠟、月桂基聚乙烯醇(ラゥロマクロゴ一ル)、角鯊?fù)椤?角)鯊烯、羊毛脂、豆蔻酸異丁酯、中鏈脂肪酸甘油三酯等。由于高度不飽和脂肪酸或其鹽或其酯是油性，所以可以在油性基劑中簡(jiǎn)單均一混合。即使是含水基劑，如果是乳化物，則可以通過使其與水包油型(W/O)、油包水型(O/W)中任一種的油相混合而容易混合。
作為吸收促進(jìn)劑可以例舉尿素、N-乙-N-2-J烯酰鄰甲苯胺、癸二酸二乙酯、己二酸二異丙酯等。
作為保濕劑可以例舉甘油、山梨糖醇、丙二醇、1，3-丁二醇、吡咯烷酮羧酸鈉、透明質(zhì)酸鈉等多元醇類。
作為增稠劑可以例舉阿拉伯膠、瓜耳樹膠、角豆樹膠、角叉菜膠、羧甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉、聚丙烯酸鹽類、聚丙烯酸酯類、天然橡膠、醋酸乙烯酯樹脂乳劑、聚乙烯醇、羥丙基纖維素、羥丙基甲基纖維素等。
作為乳化劑可以例舉甘油脂肪酸酯、蔗糖脂肪酸酯(糖酯)、山梨糖醇脂肪酸酯、丙二醇脂肪酸酯、卵磷脂、聚氧乙烯脂肪酸酯、聚氧乙烯蓖麻籽油、聚氧乙烯固化蓖麻籽油、聚氧乙烯烷基醚、聚氧乙烯山梨糖醇脂肪酸酯、月桂烷基硫酸鈉等。
作為芳香劑可以例舉桉樹油、熏衣草油、薄荷醇、薄荷油、玫瑰油、柑桔油、櫻桃香料、水果香料、香草醛、香草香料等。
作為抗氧化劑可以例舉L-抗壞血酸、抗壞血酸硬脂酸酯、抗壞血酸棕櫚酸酯、抗壞血酸鈉、異抗壞血酸、異抗壞血酸鈉、枸櫞酸異丙酯、dl-α-維生素E、dl-δ-維生素E、二丁基羥基甲苯(BHT)、丁基羥基苯甲醚(BHA)等，其中優(yōu)選抗壞血酸棕櫚酸酯、抗壞血酸硬脂酸酯、L-抗壞血酸、dl-α-維生素E、dl-δ-維生素E等、或它們的組合。
作為穩(wěn)定劑可以例舉聚山梨醇酯、聚乙二醇、乙醇、丙酮、輕質(zhì)硅酸酐、EDTA等。
作為防腐劑可以例舉對(duì)羥基安息香酸酯類、氯代苯甲烷銨、山梨酸、苯酚、氯代丁醇、氯化甲酚、芐醇等。
在本發(fā)明的外用組合物中還可以同時(shí)含有以前治療皮炎、過敏性皮膚疾病所使用的藥物，例如類固醇、抗過敏劑、免疫抑制劑、抗炎藥物等的有效成分。
本發(fā)明的外用組合物對(duì)高度不飽和脂肪酸有效的皮炎、過敏性皮膚疾病有用。具體地說能直接適用于過敏性皮炎、干癬等患處。
本發(fā)明的外用組合物的使用根據(jù)癥狀、患處面積、年齡、體重、藥物的給藥方式等，能在很寬的范圍內(nèi)變化，通常每日的用量標(biāo)準(zhǔn)是0.1g～5g，通常每日將其直接涂布患處1次或數(shù)次。
本發(fā)明的外用組合物氧化穩(wěn)定性優(yōu)異，但在制備過程中如果不防止高度不飽和脂肪酸完全氧化、或不避開過度易氧化的環(huán)境，則不能充分發(fā)揮其效果。
抗氧化劑可以預(yù)先添加到高度不飽和脂肪酸或其鹽或其酯中，然后與基劑混合，也可以三者同時(shí)混合。任意一種情況下都有必要使高度不飽和脂肪酸的氧化盡可能小。具體優(yōu)選在氮?dú)?、氦氣、氬氣等惰性氣體置換的環(huán)境下進(jìn)行全部的操作。或可以使用無空氣混入的混合裝置進(jìn)行混合。
本發(fā)明外用組合物的處方舉例如下所示。
(1)油脂型基劑 表1
表2

(2)乳劑型基劑 表3
表4
表5

(3)氧化鋅軟膏表6

(4)尿素乳膏表7

實(shí)施例下面利用實(shí)施例說明本發(fā)明，但本發(fā)明并不限定于這些實(shí)施例。
在本實(shí)施例中精制魚油、芝麻酚、抗壞血酸棕櫚酸酯、抗壞血酸、δ-維生素E、二十碳五烯酸乙酯、外用基劑等使用下面的物質(zhì)。
精制魚油(含有0.5重量％的δ-維生素E)日本水產(chǎn)株式會(huì)社制DD油脂型3(以金槍魚油為原料，進(jìn)行脫膠、脫酸、除臭等的精制，精制至得到過氧化值小于等于5meq/kg、酸值小于等于1、色差等級(jí)小于等于3的精制魚油。含8重量％EPA、22重量％DHA。
精制魚油(不含有δ-維生素E)日本水產(chǎn)株式會(huì)社制DD油脂型3的制備過程中，添加δ-維生素E前的樣品。
精制魚油(沙丁魚油)日本水產(chǎn)株式會(huì)社制DD油脂型2(以沙丁魚油為原料，進(jìn)行脫膠、脫酸、除臭等精制，精制至得到過氧化值小于等于5meq/kg、酸值小于等于1、色差等級(jí)小于等于3的精制魚油。含28重量％EPA、12重量％DHA。含有0.5重量％δ-維生素E)。
芝麻酚ナカラィテスク株式會(huì)社制芝麻酚(純度為98％)抗壞血酸棕櫚酸酯三共食品株式會(huì)社制抗壞血酸棕櫚酸酯(純度大于等于95％)抗壞血酸ナカラィテスク株式會(huì)社制L(+)-抗壞血酸(純度大于等于99.5％)δ-維生素E和光純藥工業(yè)株式會(huì)社制D-δ-維生素E(純度為90％)二十碳五烯酸乙酯以沙丁魚油為原料，金屬鈉為催化劑，與乙醇進(jìn)行酯交換反應(yīng)，制得沙丁魚油乙酯，然后進(jìn)行精餾，使用HPLC精制至純度為99％。
α-維生素E和光純藥工業(yè)株式會(huì)社制(±)-α-維生素E(純度為98％)外用基劑或其成分漂白蜂蠟(小林化工)、倍半油酸山梨糖醇酐酯(和光純藥工業(yè)株式會(huì)社)、白色凡士林(和光純藥工業(yè)株式會(huì)社)、白色凡士林(和光純藥工業(yè)株式會(huì)社)、親水軟膏(日興制藥株式會(huì)社)、精制羊毛脂(日興制藥株式會(huì)社)、吸水軟膏(日興制藥株式會(huì)社)、氧化鋅(和光純藥工業(yè)株式會(huì)社)、液體石蠟(純正化學(xué)株式會(huì)社)、尿素(純正化學(xué)株式會(huì)社)、十六烷醇(株式會(huì)社共和テクノス)、甘油單硬脂酸酯(東京化成工業(yè)株式會(huì)社)、液體石蠟(純正化學(xué)株式會(huì)社)、甘油(和光純藥工業(yè)株式會(huì)社)、聚羥基乙烯(20)十六烷基醚(和光純藥工業(yè)株式會(huì)社)、甲基聚硅氧烷(東京化成工業(yè)株式會(huì)社)、對(duì)羥基安息香酸甲酯(東京化成工業(yè)株式會(huì)社)、乙二胺四乙酸四鈉(株式會(huì)社同仁化學(xué)研究所)、枸櫞酸鈉(和光純藥工業(yè)株式會(huì)社)實(shí)施例1～7<各種外用組合物的調(diào)制>
在表8所示的各種外用基劑中調(diào)制含有精制魚油和抗氧化劑調(diào)制外用組合物。實(shí)施例1～7的各組合物的處方如表1～7所示。相對(duì)95g調(diào)制的各基劑，將5g添加了本發(fā)明的抗氧化處方(1.0％芝麻酚+0.5％抗壞血酸棕櫚酸酯)的精制魚油(沙丁魚油)(含有0.5重量％的δ-維生素E)在氮?dú)饬飨路执紊倭考尤牖鶆┲?，同時(shí)用玻璃乳缽攪拌。在氮?dú)饬飨聦嚢璧脑嚵涎杆俦４嬖阡X制管中。作為比較例是向各種基劑中只添加精制魚油(沙丁魚油)(含有0.5重量％的δ-維生素E)進(jìn)行調(diào)制。
表8

<外用組合物的抗氧化效果的確認(rèn)>
確認(rèn)了利用上述方法調(diào)制的各種外用組合物的保存性。
將各種外用組合物填充到鋁制管中，在40℃下保存。分別在2周后、1個(gè)月后、2個(gè)月后、3個(gè)月后對(duì)保存的外用組合物進(jìn)行官能上的魚腥味程度的評(píng)價(jià)和化學(xué)上的外用組合物的酸值分析。
在3名魚腥味專門評(píng)審員的手腕皮膚上涂布一定量的各外用組合物，基于評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)(表9)評(píng)價(jià)涂布后即刻以及0～3小時(shí)后的魚腥味程度。
表9

結(jié)果官能評(píng)價(jià)結(jié)果見表10(涂布后即刻)、表11(40℃下保存2個(gè)月的樣品、涂布后0～3小時(shí))。
表10

表11

使用白色凡士林作為基劑的情況下，比較例1是在40℃下保存2個(gè)月后產(chǎn)生魚腥味，40℃下保存3個(gè)月后魚腥味更強(qiáng)。與此相反，實(shí)施例1即使在40℃下保存3個(gè)月也仍然能幾乎完全抑制魚腥味。
使用白色軟膏作為基劑的情況下，比較例2是在40℃下保存2個(gè)月后仍無魚腥味，但40℃下保存3個(gè)月后產(chǎn)生魚腥味。相對(duì)應(yīng)的實(shí)施例2即使在40℃下保存3個(gè)月也仍然能幾乎完全抑制魚腥味。表11中涂布后的比較例2在2小時(shí)后就產(chǎn)生魚腥味，與此相反，實(shí)施例2在涂布3小時(shí)后仍完全沒有魚腥味。
使用氧化鋅軟膏作為基劑的情況下，比較例3是在40℃下保存1個(gè)月后稍有一點(diǎn)魚腥味，但其后再無魚腥味。另外，實(shí)施例3即使在40℃下保存3個(gè)月也仍然能幾乎完全抑制魚腥味。但是，如表11所示，如果比較涂布后的經(jīng)過，則比較例3在涂布0.5小時(shí)后就產(chǎn)生魚腥味，且魚腥味隨時(shí)間增強(qiáng)。與此相反，實(shí)施例3在涂布3小時(shí)后仍幾乎沒有魚腥味。
以精制羊毛脂作為基劑的比較例4、實(shí)施例4都無魚腥味。
以親水軟膏作為基劑的情況下，比較例5在40℃下保存2周后產(chǎn)生強(qiáng)的魚腥味，此后魚腥味仍很強(qiáng)。與此相反，實(shí)施例5比同樣條件下保存的比較例5的魚腥味弱。
以尿素乳膏作為基劑的情況下，比較例6在40℃下保存2周后產(chǎn)生強(qiáng)的魚腥味，直至3個(gè)月后魚腥味隨時(shí)間增強(qiáng)。與此相反，實(shí)施例6即使在40℃下保存3個(gè)月也仍然能幾乎完全抑制魚腥味。
以吸水軟膏作為基劑的比較例7、實(shí)施例7都無魚腥味。
已經(jīng)證明在白色凡士林、白色軟膏、氧化鋅軟膏、親水軟膏、尿素乳膏中，利用本發(fā)明的抗氧化處方能抑制魚腥味的產(chǎn)生。精制羊毛脂和吸水軟膏基劑本身就有強(qiáng)的臭味，由于此味道的掩蔽效果，官能檢查未見差異。
具體地說，除了親水軟膏，在任意基劑中使用本發(fā)明的抗氧化劑的情況下，即使在40℃下保存3個(gè)月官能上也沒有因氧化產(chǎn)生的臭味。40℃下保存3個(gè)月相當(dāng)于常溫下保存一年。親水軟膏的情況下，其結(jié)果仍比比較例好。
各外用組合物的氧化是通過利用SaftestR成套工具(美國Saftest Inc.制的脂質(zhì)的萃取到氧化分析)測(cè)定過氧化值(PV)、丙二醛量、烯烴化合物量來評(píng)價(jià)的。
取1g試料軟膏，加入3mL Preparation agent(處方試劑)(Saftest Inc.)。55℃下加熱5分鐘后，劇烈振蕩，再在55℃下加熱15分鐘。然后進(jìn)行離心分離(3000rpm×5分鐘)，上清用Membrane Sparation Unit(隔膜分離器)(Saftest Inc.)過濾，將所得濾體作為試料液。
①PV測(cè)定取50l調(diào)制的試料液分注于試管中，再分別加入Peroxysafe reagent A、B、C(Saftest Inc.)，混合，常溫下(18℃～25℃)靜置15分鐘。靜置后利用SaftestTM分析儀(Saftest Inc.)分析吸光度，得到PV。
②丙二醛量測(cè)定取150l調(diào)制的試料液分注于試管中，再分別加入Aldesafe reagent A、B(Saftest Inc.)，混合，40℃靜置90分鐘。靜置后，利用SaftestTM分析儀(SaftestInc.)分析吸光度，求得丙二醛量。
③烯烴化合物量測(cè)定取200l調(diào)制的試料液分注于試管中，再分別加入Alkalsafe reagentA、B(Saftest Inc.)，混合，常溫(18℃～25℃)靜置20分鐘。靜置后，利用SaftestTM分析儀(Saftest Inc.)分析吸光度，求得烯烴化合物量。
結(jié)果PV、丙二醛量、烯烴化合物量的測(cè)定結(jié)果分別見表12、表13、表14?；鶆┎煌?、基底值不同，所以以保存2個(gè)月后的實(shí)施例與比較例的差表示。對(duì)于PV(表12)，除尿素乳膏以外，實(shí)施例比比較例更加抑制PV上升。對(duì)于丙二醛量(表13)，在所有的基劑中實(shí)施例比比較例更加抑制丙二醛的生成。另外，對(duì)于烯烴化合物量(表14)，也是在所有的基劑中實(shí)施例比比較例更加抑制烯烴化合物的生成。通過以上結(jié)果，不僅從官能上，即使在化學(xué)上也都確認(rèn)了本發(fā)明的抗氧化劑的抗氧化效果。
精制羊毛脂和吸水軟膏本身的基底大，不能確切測(cè)定。
表12PV(meq/kg)

表13丙二醛(nmol/mL)

表14烯烴化合物量(nmol/mL)

試驗(yàn)例下面例舉具有同樣效果的試驗(yàn)例，其使用的抗氧化劑是上述實(shí)施例中有效的芝麻酚和抗壞血酸棕櫚酸酯組合以外的物質(zhì)。
試驗(yàn)例1
<芝麻酚+抗壞血酸棕櫚酸酯+δ-維生素E的效果的確認(rèn)>
向精制魚油(含有0.5重量％的δ-維生素E)中分別加入以下抗氧化劑，調(diào)制樣品。
芝麻酚(1.0重量％)+抗壞血酸棕櫚酸酯(0.01重量％)僅芝麻酚(1.0重量％)僅抗壞血酸棕櫚酸酯(0.01重量％)取這些樣品3mL放于30mL褐色瓶中，用膜密封后，60℃下保存，兩天后利用氣相色譜測(cè)定頂部空間的氧氣濃度，計(jì)算油脂吸收(與油脂反應(yīng))的氧量。結(jié)果見圖1。通過芝麻酚和抗壞血酸棕櫚酸酯并用精制魚油的氧吸收量受到抑制，與單獨(dú)添加芝麻酚、或抗壞血酸棕櫚酸酯的情況相比，精制魚油的氧化穩(wěn)定性顯著提高。
試驗(yàn)例2<芝麻酚+抗壞血酸+δ-維生素E的效果的確認(rèn)>
向精制魚油(含有0.5重量％的δ-維生素E)中分別加入以下抗氧化劑，調(diào)制樣品。
芝麻酚(1.0重量％)+抗壞血酸(0.01重量％)僅抗壞血酸(0.01重量％)各取樣品4mL放于30mL褐色瓶中，進(jìn)行與試驗(yàn)例1相同的保存試驗(yàn)。結(jié)果見圖2。通過芝麻酚和抗壞血酸并用精制魚油的氧吸收量受到抑制，與單獨(dú)添加抗壞血酸的情況相比，精制魚油的氧化穩(wěn)定性顯著提高。
試驗(yàn)例3<芝麻酚、抗壞血酸棕櫚酸酯的用量依賴性>
分別按照下面的比例向精制魚油(含有0.5重量％的δ-維生素E)中添加作為抗氧化劑的δ-維生素E∶芝麻酚∶抗壞血酸棕櫚酸酯，調(diào)制樣品。
0.5％∶0.5％∶0.05％0.5％∶0.5％∶0.1％0.5％∶1.0％∶0.05％0.5％∶1.0％∶0.1％將這些樣品進(jìn)行與試驗(yàn)例2相同的保存試驗(yàn)，保存11天。結(jié)果見圖3。由結(jié)果發(fā)現(xiàn)隨精制魚油中添加的芝麻酚、抗壞血酸棕櫚酸酯量的增加，氧吸收量越被抑制，使精制魚油的氧化穩(wěn)定性用量依賴性提高。
試驗(yàn)例4<芝麻酚+抗壞血酸棕櫚酸酯的效果的確認(rèn)>
向精制魚油(不含有δ-維生素E)中添加作為抗氧化劑的芝麻酚(1.0重量％)+抗壞血酸棕櫚酸酯(0.01重量％)，調(diào)制樣品。將此樣品進(jìn)行與試驗(yàn)例1相同的保存試驗(yàn)。結(jié)果見圖4。即使沒有維生素E，通過芝麻酚和抗壞血酸棕櫚酸酯并用也能抑制氧吸收量，精制魚油的氧化穩(wěn)定性顯著提高。
試驗(yàn)例5<芝麻油萃取物+抗壞血酸棕櫚酸酯(0.1重量％)+δ-維生素E的效果的確認(rèn)>
向8.23g稠芝麻油中添加100mL甲醇，劇烈攪拌后蒸餾除去甲醇層中的甲醇，得到0.28g甲醇萃取物。此甲醇萃取物經(jīng)薄層色譜分析確認(rèn)含有芝麻酚(薄層Merck社Kiesolgel 60 F254 0.25mm，展開劑己烷∶二乙醚∶醋酸＝70∶30∶1，顯色劑1，1-二苯基-2-苦基偕腙肼，自由基)。
向精制魚油(含有0.5重量％的δ-維生素E)中分別加入以下抗氧化劑，調(diào)制樣品。
上述芝麻油甲醇萃取物(2.0重量％)+抗壞血酸棕櫚酸酯(0.1重量％)僅上述芝麻油甲醇萃取物(2.0重量％)僅抗壞血酸棕櫚酸酯(0.1重量％)將這些樣品進(jìn)行與試驗(yàn)例2相同的保存試驗(yàn)。結(jié)果見圖5?？梢钥闯?，芝麻油甲醇萃取物即使同樣單獨(dú)添加在芝麻酚中也無效，與抗壞血酸棕櫚酸酯并用，抑制氧吸收量，提高精制魚油的氧化穩(wěn)定性。
試驗(yàn)例6<炒制芝麻糟萃取物+抗壞血酸棕櫚酸酯+δ-維生素E的效果的確認(rèn)>
(1)炒制芝麻糟萃取物1向1.0kg炒制芝麻糟中添加2.0kg 95％乙醇，40℃下劇烈攪拌2小時(shí)，然后過濾炒制芝麻糟，得萃取液。向過濾后的炒制芝麻糟中再次添加1.5kg 95％乙醇，在40℃下劇烈攪拌1小時(shí)，過濾，得萃取液。濃縮2次的萃取液，然后加入240g醋酸乙酯、80g水，45℃下劇烈攪拌1小時(shí)。攪拌后除去水層，向醋酸乙酯層加入40g丙二醇單油酸酯，蒸餾除去醋酸乙酯，得58g炒制芝麻糟萃取物1(其中含有40g丙二醇單油酸酯，故炒制芝麻糟萃取物實(shí)際為18g)。
(2)炒制芝麻糟萃取物2向1.0kg炒制芝麻糟中添加2.0kg 95％乙醇，40℃下劇烈攪拌2小時(shí)，然后過濾炒制芝麻糟，得萃取液。向過濾后的炒制芝麻糟中再次添加1.5kg 95％乙醇，在40℃下劇烈攪拌1小時(shí)，過濾，得萃取液。向得到的兩次萃取液中加入40g丙二醇單油酸酯，蒸餾除去95％乙醇，得50g炒制芝麻糟萃取物(其中含有40g丙二醇單油酸酯，故炒制芝麻糟萃取物實(shí)際為10g)。
(3)炒制芝麻糟萃取物3向200g炒制芝麻糟中添加300mL 95％乙醇，40℃下劇烈攪拌2小時(shí)，然后過濾炒制芝麻糟，得萃取液。向過濾后的炒制芝麻糟中再次添加300mL95％乙醇，在40℃下劇烈攪拌2小時(shí)，過濾，得萃取液。濃縮得到的兩次萃取液，然后加入150mL醋酸乙酯、50mL水，室溫下劇烈攪拌1小時(shí)。攪拌后除去水層， 進(jìn)一步蒸餾除去醋酸乙酯，得9.0g炒制芝麻糟萃取物。
對(duì)炒制芝麻糟萃取物1利用具有電化學(xué)檢測(cè)器的高效液相色譜進(jìn)行測(cè)定。測(cè)定條件如下。色譜圖如圖6所示。由于是電化學(xué)檢測(cè)器的峰，所以所有峰都代表具有抗氧化作用的物質(zhì)。顯示含有以芝麻酚、松脂醇為代表的很多抗氧化成分。
測(cè)定條件色譜柱TSK-gel ODS-80Ts 4.6×150mm流動(dòng)相0～5min甲醇∶水(含2％1M醋酸銨緩沖液，pH4.4)＝40∶6010～17min 甲醇∶水(含2％1M醋酸銨緩沖液，pH4.4)＝70∶3022～40min 甲醇∶水(含2％1M醋酸銨緩沖液，pH4.4)＝100∶0流速1.0mL/min柱溫35℃樣品濃度10～12mg/mL樣品溶解液甲醇∶乙醇∶己烷＝5∶4∶1
注射量10L電極1(還原電位)-1V電極2(氧化電位)500mV量程20A向精制魚油(含有0.5重量％的δ-維生素E)中分別加入以下抗氧化劑，調(diào)制樣品。
上述炒制芝麻糟萃取物1(1.0重量％)+抗壞血酸棕櫚酸酯(0.05重量％)上述炒制芝麻糟萃取物1(1.0重量％)+抗壞血酸棕櫚酸酯(0.1重量％)僅上述炒制芝麻糟萃取物1(1.0重量％)僅抗壞血酸棕櫚酸酯(0.1重量％)上述炒制芝麻糟萃取物2(1.0重量％)+抗壞血酸棕櫚酸酯(0.1重量％)上述炒制芝麻糟萃取物3(1.0重量％)+抗壞血酸棕櫚酸酯(0.1重量％)將這些樣品進(jìn)行與試驗(yàn)例2相同的保存試驗(yàn)。結(jié)果見圖7?？梢钥闯?，炒制芝麻糟萃取物通過同樣在樣品中與抗壞血酸棕櫚酸酯并用，抑制氧吸收量，提高精制魚油的氧化穩(wěn)定性。
試驗(yàn)例7<炒制芝麻糟萃取物+抗壞血酸棕櫚酸酯+δ-維生素E的效果的確認(rèn)>
分別取添加試驗(yàn)例6的炒制芝麻糟萃取物1(1.0重量％)+抗壞血酸棕櫚酸酯(0.1重量％)的樣品、以及添加炒制芝麻糟萃取物2(1.0重量％)+抗壞血酸棕櫚酸酯(0.1重量％)的樣品各10mL，加入20mL褐色瓶中，60℃下開放保存，保存過程中利用Saftest Inc.社的Saftest測(cè)定丙二醛、烯烴化合物類濃度的變化。結(jié)果見圖8、圖9。可以看出，精制魚油中通過添加炒制芝麻糟萃取物和抗壞血酸棕櫚酸酯，能高度抑制作為魚油的氧化分解物、以及劣質(zhì)魚油的臭味物質(zhì)的丙二醛、烯烴化合物類的生成，從而使魚油穩(wěn)定化。
試驗(yàn)例8代替實(shí)施例1中的芝麻酚，使用由炒制芝麻糟萃取物3通過常壓硅膠柱、ODS-HPLC得到的芝麻明酚(セサミノ一ル )(sesaminol)，得到同樣的效果。
試驗(yàn)例9代替實(shí)施例1中的芝麻酚，使用由炒制芝麻糟萃取物3通過常壓硅膠柱、ODS-HPLC得到的松脂醇，得到同樣的效果。
試驗(yàn)例10代替實(shí)施例1中的芝麻酚，使用由炒制芝麻糟萃取物3通過常壓硅膠柱、ODS-HPLC得到的2，3-二(4’-羥基-3’-甲氧基苯甲基)-2-丁烯-4-羥酸內(nèi)酯，得到同樣的效果。
試驗(yàn)例11<過剩量抗壞血酸棕櫚酸酯的效果的確認(rèn)>
向精制魚油(含有0.5重量％的δ-維生素E)中分別加入以下抗氧化劑，調(diào)制樣品。
芝麻酚(0.5重量％)+抗壞血酸棕櫚酸酯(0.1重量％)芝麻酚(1.0重量％)+抗壞血酸棕櫚酸酯(0.1重量％)各取樣品4mL放入30mL褐色瓶中，用膜密封后，60℃下保存，利用氣相色譜測(cè)定保存中的氧氣濃度，計(jì)算與油脂反應(yīng)(吸收)的氧量。另外，利用具有電化學(xué)檢測(cè)器的高效液相色譜分析各抗氧化劑的殘留量。
結(jié)果分別見圖10、圖11。顯示出，任一種情況下，抗壞血酸棕櫚酸酯首先被消耗(氧化)，如果沒有抗壞血酸棕櫚酸酯，精制魚油、δ-維生素E、芝麻酚同時(shí)開始被氧化。所以，作為抗氧化劑的δ-維生素E+芝麻酚+抗壞血酸棕櫚酸酯同時(shí)存在的情況下，認(rèn)為抗壞血酸棕櫚酸酯殘留很重要。為了確認(rèn)此結(jié)論，在于圖11相同的系統(tǒng)中，第四天再追加0.1％抗壞血酸棕櫚酸酯，結(jié)果見圖12。在圖11中，如果沒有抗壞血酸棕櫚酸酯，則油脂的氧化開始(大約第十天)，而在相同系統(tǒng)下第四天追加抗壞血酸棕櫚酸酯的圖12中，油脂的氧化第十天以后仍被抑制。
所以，根據(jù)這些結(jié)果，證明在本發(fā)明的抗氧化系統(tǒng)中，抗壞血酸棕櫚酸酯殘留是很重要的。
試驗(yàn)例12<本發(fā)明針對(duì)二十碳五烯酸乙酯的效果，以及過剩量抗壞血酸棕櫚酸酯的效果的確認(rèn)>
向純度為99％的二十碳五烯酸乙酯(含有0.2％的α-維生素E)中分別加入以下抗氧化劑，調(diào)制樣品。
芝麻酚1.0％+抗壞血酸棕櫚酸酯0.1％芝麻酚1.0％+抗壞血酸棕櫚酸酯0.5％在60℃下保存這些樣品，測(cè)定過氧化值(PV)。
結(jié)果見圖13。與添加溶解量的抗壞血酸棕櫚酸酯(0.1％)的情況相比，添加過剩量的抗壞血酸棕櫚酸酯(0.5％)時(shí)抗氧化作用持續(xù)。
試驗(yàn)例13<與外用劑中通常使用的抗氧化劑(叔丁基羥基甲苯(BHT))的比較>
①在散裝精制魚油中效果的比較比較外用劑中通常使用的抗氧化劑叔丁基羥基甲苯(BHT)和本發(fā)明的抗氧化處方。向精制魚油(沙丁魚油)(含有0.5％的δ-維生素E)中分別添加相對(duì)精制魚油0.5％、1.5％、10.0％的BHT、或1.0％芝麻酚、0.5％抗壞血酸棕櫚酸酯。各取樣品油脂4mL分別放于30mL褐色瓶中，用膜密封后，37℃下保存，利用氣相色譜隨時(shí)間延長測(cè)定頂部空間的氧濃度，計(jì)算與油脂反應(yīng)(吸收)的氧量。
結(jié)果在散裝精制魚油中的BHT和本發(fā)明的抗氧化處方的抗氧化效果的比較見圖14。本發(fā)明的抗氧化處方的抗氧化劑效果比與本發(fā)明的抗氧化處方中含有的抗氧化劑量的總和(1.5％)相同的BHT、甚至更多量(10.0％)的BHT的添加試料的抗氧化效果高。
②添加在外用劑中的效果的比較分別添加相對(duì)精制魚油0.5％、1.5％、10.0％的BHT。與以白色凡士林作為基劑的實(shí)施例1相同，調(diào)制由添加BHT的魚油組成的外用劑，進(jìn)行保存試驗(yàn)(40℃)，與上述相同進(jìn)行官能評(píng)價(jià)(n＝3)。
結(jié)果0.5％、1.5％、10.0％的BHT中任一濃度在保存2周后都產(chǎn)生魚腥味。如表15所示，使用本發(fā)明的抗氧化處方的試料保存1個(gè)月后仍無魚腥味。所以，本發(fā)明的抗氧化處方比BHT具有更好的魚腥味抑制效果、抗氧化效果。
表15

產(chǎn)業(yè)上的可利用性本發(fā)明能提供盡管含有高度不飽和脂肪酸、其鹽或其酯，但是具有氧化穩(wěn)定性的外用組合物。還能提供含有以往由于氧化產(chǎn)生臭味而使使用方法、使用量等受到限制的EPA等的高度不飽和脂肪酸等的外用醫(yī)藥品、外用醫(yī)藥部外品、化妝品。
權(quán)利要求
1.一種外用組合物，其中添加了作為抗氧化劑的芝麻的抗氧化成分以及抗壞血酸或抗壞血酸脂肪酸酯，含有高度不飽和脂肪酸、其鹽或其酯以及外用基劑，具有氧化穩(wěn)定性。
2.如權(quán)利要求1所述的外用組合物，其中芝麻的抗氧化成分含有至少一種或更多的，通過使用電化學(xué)檢測(cè)器的高效液相色譜檢測(cè)，在洗脫時(shí)間為2.66、3.40、3.84、4.57、4.98、5.82、7.00、8.67、9.84、11.24、12.29、12.49、13.36、14.04、14.32、14.74、15.22、15.60、15.82、16.34、16.98、18.10、18.43、34.91分鐘附近出現(xiàn)峰的成分。
3.如權(quán)利要求1所述的外用組合物，其中芝麻的抗氧化成分是芝麻、芝麻油或芝麻糟用溶劑、脂質(zhì)、或乳化劑中任意一種單獨(dú)或混合溶劑的萃取物。
4.如權(quán)利要求1所述的外用組合物，其中芝麻的抗氧化成分是含有選自芝麻酚、芝麻明酚(セサミノ一ル)(sesaminol)、表芝麻明酚(エピセサミノ一ル)、松脂醇、表松脂醇(エピヒノレジノ一ル)(epypinoresinol)、丁香樹脂醇、芝麻素(サミン)(samine)、芝麻林酚(セサモリノ一ル)(sesamolinol)、2，3-二(4’-羥基3’-甲氧基苯甲基)-2-丁烯-4-羥酸內(nèi)酯中至少一種或更多的成分。
5.如權(quán)利要求1至4任一項(xiàng)所述的外用組合物，其中抗壞血酸脂肪酸酯是含有抗壞血酸棕櫚酸酯或抗壞血酸硬脂酸酯的物質(zhì)。
6.如權(quán)利要求1至5任一項(xiàng)所述的外用組合物，其中添加了相對(duì)高度不飽和脂肪酸、其鹽或其酯可溶量或可溶量以上的過剩量的抗壞血酸或抗壞血酸脂肪酸酯。
7.如權(quán)利要求6所述的外用組合物，其中過剩量的抗壞血酸或抗壞血酸脂肪酸酯以粉末或固態(tài)物狀態(tài)添加。
8.如權(quán)利要求1至7任一項(xiàng)所述的外用組合物，其中高度不飽和脂肪酸是含有二十碳五烯酸、二十二碳六烯酸中任一種或一種以上的脂肪酸。
9.如權(quán)利要求1至8任一項(xiàng)所述的外用組合物，其中高度不飽和脂肪酸酯是含有高度不飽和脂肪酸作為構(gòu)成成分的甘油三酸酯或高度不飽和脂肪酸的低級(jí)醇酯。
10.如權(quán)利要求1至8任一項(xiàng)所述的外用組合物，其中含有作為精制魚油的高度不飽和脂肪酸酯。
11.如權(quán)利要求1至10任一項(xiàng)所述的外用組合物，其中進(jìn)一步含有維生素E。
12.如權(quán)利要求1至11任一項(xiàng)所述的外用組合物，用于皮膚的炎癥性疾病。
13.如權(quán)利要求1至12任一項(xiàng)所述的外用組合物，其中作為外用基劑是使用白色軟膏、白色凡士林、氧化鋅軟膏等的油脂型基劑，親水軟膏、精制羊毛脂、吸水軟膏、尿素乳膏等的乳劑型基劑(乳膏劑)中的任一種。
14.如權(quán)利要求13所述的外用組合物，其中作為外用基劑是使用白色軟膏、白色凡士林、尿素乳膏、氧化鋅軟膏中的任一種。
15.一種外用組合物的制備方法，其特征在于，在抑制氧氣混入的環(huán)境下，向過氧化值(PV)小于等于3.0meq/kg、酸值(AV)小于等于1.0，并且官能上無臭味的高度不飽和脂肪酸、其鹽或其酯、或含有這些物質(zhì)的油脂中，混合芝麻的抗氧化成分、抗壞血酸或抗壞血酸脂肪酸酯以及外用基劑，然后快速注入密封容器中，所述外用組合物具有氧化穩(wěn)定性，并且含有高度不飽和脂肪酸、其鹽或其酯。
16.如權(quán)利要求15所述的外用組合物的制備方法，其中在抑制氧氣混入的環(huán)境下是在惰性氣體置換的環(huán)境下。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種外用組合物及其制備方法。向高度不飽和脂肪酸、其鹽或其酯中添加芝麻的抗氧化成分以及抗壞血酸或抗壞血酸脂肪酸酯。在抑制氧氣混入的環(huán)境下或利用抑制氧氣混入的方法，向PV小于等于3.0、AV小于等于1.0、且官能上無臭味的高度不飽和脂肪酸、其鹽或其酯、或含有這些物質(zhì)的油脂中，混合芝麻的抗氧化成分、抗壞血酸或抗壞血酸脂肪酸酯以及外用基劑，然后快速注入密封容器中。利用上述方法，能得到氧化穩(wěn)定性提高、抑制高度不飽和脂肪酸氧化所引起的特有臭味的產(chǎn)生、抑制過氧化物生成的，含有高度不飽和脂肪酸、其鹽或其酯的外用組合物。
文檔編號(hào)A23K1/16GK1714135SQ20038010393
公開日2005年12月28日 申請(qǐng)日期2003年11月21日 優(yōu)先權(quán)日2002年11月22日
發(fā)明者土居崎信滋, 山口秀明, 神野修次, 迎勝也 申請(qǐng)人:日本水產(chǎn)株式會(huì)社