專(zhuān)利名稱(chēng)：高產(chǎn)抗逆雜交扇貝品種的育成方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于海洋生物技術(shù)領(lǐng)域，系貝類(lèi)遺傳改良研究中結(jié)合選擇育種和遠(yuǎn)緣雜交育種技術(shù)為一體的復(fù)合育種方案，具體是一種高產(chǎn)抗逆雜交扇貝品種的育成方法技術(shù)背景扇貝是一直是我國(guó)海水養(yǎng)殖業(yè)的主要種類(lèi)之一，多年來(lái)，我國(guó)扇貝養(yǎng)殖規(guī)模和產(chǎn)量均居世界首位。但自1997年夏季爆發(fā)櫛孔扇貝大規(guī)模死亡以來(lái)，我國(guó)扇貝養(yǎng)殖的種類(lèi)結(jié)構(gòu)發(fā)生了重大的變化，目前海灣扇貝已代替昔日的櫛孔扇貝占據(jù)了扇貝養(yǎng)殖產(chǎn)量的主導(dǎo)地位，近年來(lái)我國(guó)櫛孔扇貝的養(yǎng)殖產(chǎn)量一直排洄在10萬(wàn)噸左右。櫛孔扇貝是我國(guó)近海自然分布的地方扇貝種，較之引進(jìn)的海灣扇貝有肉質(zhì)細(xì)嫩、味道鮮美、營(yíng)養(yǎng)豐富等優(yōu)點(diǎn)，符合我國(guó)人民的飲食習(xí)慣和風(fēng)味，在國(guó)際市場(chǎng)也非常受到歡迎，曾是我國(guó)重要的出口水產(chǎn)品。櫛孔扇貝養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)的復(fù)壯工作亟待開(kāi)展，這對(duì)于改善我國(guó)人民飲食的營(yíng)養(yǎng)結(jié)構(gòu)，提高我國(guó)人民的生活水平以及增加出口創(chuàng)匯都有著重要意義。
在櫛孔扇貝養(yǎng)殖過(guò)程中，有兩大突出問(wèn)題困擾著養(yǎng)殖戶(hù)，嚴(yán)重挫傷了群眾的養(yǎng)殖積極性，也就抑制了我國(guó)櫛孔扇貝養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展和恢復(fù)。第一個(gè)突出問(wèn)題是夏季死亡率高，大規(guī)模死亡現(xiàn)象連年發(fā)生。春夏季節(jié)，海區(qū)自然采苗苗種當(dāng)年度夏死亡率在70％以上，次年養(yǎng)成度夏死亡率更是在90％以上。第二個(gè)突出問(wèn)題是性狀的遺傳穩(wěn)定性差，不便于生產(chǎn)的統(tǒng)一操作和管理。商品苗種生長(zhǎng)慢、整齊度差、小個(gè)體比例大是其當(dāng)年死亡率高達(dá)70％的重要原因，小型個(gè)體苗種對(duì)于高溫的耐受力非常弱，入夏前5mm以下扇貝均很難渡夏。
生產(chǎn)中強(qiáng)烈要求有生長(zhǎng)快速、性狀一致度高和耐高溫的養(yǎng)殖櫛孔扇貝。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種高產(chǎn)抗逆雜交扇貝品種的育成方法，培育生長(zhǎng)快速、性狀一致度高、抗逆能力強(qiáng)的雜交扇貝苗種，以有效解決我國(guó)扇貝生產(chǎn)中存在的突出問(wèn)題和矛盾，推動(dòng)我國(guó)優(yōu)勢(shì)扇貝種類(lèi)養(yǎng)殖的發(fā)展和產(chǎn)業(yè)復(fù)興。
本發(fā)明是按照以下操作方法完成的首先培育CDS5母本系和ZHJ父本系，再調(diào)控雙親性腺同步發(fā)育和成熟，進(jìn)行雜交受精，最后雜交一代苗種培育。
所述培育CDS5母本系方法為對(duì)櫛孔扇貝長(zhǎng)島群體，以殼高指標(biāo)，選取生長(zhǎng)速度為4-7cm/年進(jìn)行連續(xù)多代選擇繁育得到。
培育ZHJ父本系方法為以CDS5系的櫛孔扇貝和華貴櫛孔扇貝遠(yuǎn)緣雜交后代中的雌貝為母本，再與櫛孔扇貝膠南群體的選育群中的雄貝復(fù)交得到高產(chǎn)抗逆ZHJ系。
CDS5母本系和ZHJ父本系雜交受精制種過(guò)程中，ZHJ父本系個(gè)體數(shù)保證在100只以上。
調(diào)控雙親性腺同步發(fā)育和成熟方法為ZHJ父本系應(yīng)較CDS5母本系先行一周入池培育，在三月中上旬先后入池，性腺促熟采用升溫培育，入池水溫與親貝生境水溫一致，穩(wěn)定2-3后每天升溫0.5-1℃，最終穩(wěn)定在14-16℃培育親貝，培養(yǎng)中期應(yīng)經(jīng)常觀察性腺發(fā)育進(jìn)度，采取調(diào)解溫度、光照和投喂餌料等措施實(shí)現(xiàn)雙親同步成熟，待產(chǎn)前2-3天水溫日變化0.5℃以?xún)?nèi)，禁止倒池和大換水，餌料投喂要輕緩，勤吸池底殘余餌料和糞便；催產(chǎn)水溫為20-22℃，應(yīng)待較多ZHJ父本系排精后，再予向產(chǎn)卵池中加入精子，精子數(shù)量以顯微鏡檢每個(gè)卵子周?chē)锌梢?jiàn)精子3-5個(gè)為宜；雜交一代苗種培育方法為雜交后受精卵經(jīng)28h左右發(fā)育到D形幼蟲(chóng)時(shí)，進(jìn)行選優(yōu)轉(zhuǎn)移到幼蟲(chóng)培養(yǎng)池中培養(yǎng)，幼蟲(chóng)培育水溫應(yīng)穩(wěn)定在20-22℃，以金藻作為其開(kāi)口餌料，培養(yǎng)中后期可搭配投喂金藻、硅藻和扁藻等單胞藻，雜交扇貝幼蟲(chóng)期間的其他管理同櫛孔扇貝。
實(shí)踐證明，采用多年累代選擇育種培育的CDS5母本系，與經(jīng)櫛孔扇貝與華貴櫛孔扇貝遠(yuǎn)緣雜交在與櫛孔扇貝復(fù)交得到的ZHJ父本系雜交，通過(guò)采用選擇育種策略，結(jié)合遠(yuǎn)緣雜交和復(fù)合雜交技術(shù)，得到的雜交扇貝形態(tài)和營(yíng)養(yǎng)成分類(lèi)似于自然海區(qū)種野生的櫛孔扇貝，突出的優(yōu)點(diǎn)是殼色鮮紅、生長(zhǎng)快速、性狀一致度高、耐高溫養(yǎng)殖。具有如下特點(diǎn)與已有技術(shù)對(duì)比，本發(fā)明技術(shù)育成的扇貝結(jié)合了生長(zhǎng)基因累積和雜種優(yōu)勢(shì)的利用于一體；憑借對(duì)櫛孔扇貝長(zhǎng)島群體連續(xù)多代的選擇育種，獲得了殼色鮮紅、生長(zhǎng)快速、繁殖力強(qiáng)、性狀一致度高的母本系；在選擇育種的基礎(chǔ)上，通過(guò)櫛孔扇貝和華貴櫛孔扇貝遠(yuǎn)緣雜交和復(fù)合雜交技術(shù)，培育出殼色紅艷、抗逆力強(qiáng)、生長(zhǎng)快速、遺傳一致度高的父本系；將獲得的母本系和復(fù)本系雜交，可以方便地進(jìn)行雜交扇貝的商品苗種生產(chǎn)，經(jīng)70天左右的培育(從受精始)，所得商品苗種最小規(guī)格可達(dá)5mm，平均7mm以上。
本發(fā)明養(yǎng)成過(guò)程中管理方便，當(dāng)年度夏存活率(對(duì)春苗)在70％以上(常規(guī)的苗種≤30％)，次年度夏存活率可達(dá)30-40％(常規(guī)的苗種≤10％)；14月齡扇貝殼高可達(dá)6.5cm以上，部分海區(qū)可達(dá)7cm以上(常規(guī)的苗種在3～6cm范圍變異，平均≤5cm)。
具體實(shí)施例方式
最佳實(shí)施例具體操作工藝過(guò)程關(guān)鍵的操作工藝過(guò)程包括親貝培養(yǎng)、雜交受精、幼蟲(chóng)培養(yǎng)。
母本CDS5系、父本ZHJ系的親貝可從國(guó)家“863”項(xiàng)目扇貝原種培育基地(煙臺(tái)和青島)購(gòu)買(mǎi)。
1親貝培養(yǎng)親貝應(yīng)在計(jì)劃產(chǎn)卵前15到25天入池培養(yǎng)，因ZHJ父本系性腺發(fā)育較遲緩，故宜在CDS5母本系先行一周入池。
1)培養(yǎng)條件(1)培育池水泥池或玻璃鋼水槽，10～30m3，水深1.1～1.5m；(2)水質(zhì)水源符合GB 11607的規(guī)定，培育用水符合NY 5052的規(guī)定；(3)水溫從其所在的生境水溫逐步提升至14～16℃培育；(4)鹽度25～32；(5)光照500～10001x；(6)培育密度100～120個(gè)/m3，采用多層網(wǎng)籠或單層浮式網(wǎng)箱為培育容器。
2)日常管理(1)親貝入池處理親貝入池前，應(yīng)清除貝殼上的附著生物和浮泥。入池前應(yīng)對(duì)性別做初步挑選，剔除明確可辨的SDS5母本系中的雄貝和ZHJ父本系中的雌貝。培養(yǎng)過(guò)程中期應(yīng)再集中挑取一次SDS5母本系中的雄貝雄貝和ZHJ父本系中的雌貝并予剔除。(2)投餌投喂硅藻、金藻或扁藻等單胞藻或淀粉、螺旋藻粉、蛋黃等代用餌料。水溫低于10℃時(shí)，日投喂量(12-15)×104細(xì)胞/ml；10℃以上，逐步增加投喂量，到14℃時(shí)每天為(35-40)×104細(xì)胞/ml。每天分6-12次投喂。在親貝培育中后期，應(yīng)根據(jù)雙親的發(fā)育進(jìn)度適當(dāng)調(diào)節(jié)投喂量以達(dá)到父母本同步成熟。(3)換水早期和中期每天2-3次，日換水量100％；晚期每天換水1-2次，日換水量1/3，要有條件盡量從池底進(jìn)排水，水溫保持恒定。(4)倒池早期和中期隔天倒池清底一次；臨近采卵前不倒池。(5)吸底早期和中期每天早、晚各吸底一次；晚期適當(dāng)增加吸底次數(shù)。(6)升溫親貝入池后，在接近親貝生境水溫中穩(wěn)定2-3d，而后每天升高0.5～1.0℃至14-16℃，穩(wěn)定在此溫度下進(jìn)行培養(yǎng)。(7)充氣連續(xù)微量充氣。(8)有效積溫穩(wěn)定培養(yǎng)階段有效積溫范圍150-200℃·日。
2雜交受精為保持扇貝的遺傳多樣性水平，規(guī)模雜交生產(chǎn)過(guò)程中參與繁殖受精的的ZHJ父本系的數(shù)量應(yīng)保證在100只以上。；ZHJ父本系應(yīng)較CDS5母本系先行一周入池培育，一般宜在三月中上月先后入池(可保證扇貝在四月得卵)；性腺促熟采用升溫培育，入池水溫與親貝生境水溫相當(dāng)，穩(wěn)定2-3后每天升溫0.5-1℃，最終穩(wěn)定在14-16℃培育親貝，培養(yǎng)中期應(yīng)經(jīng)常觀察性腺發(fā)育進(jìn)度，采取調(diào)解溫度、光照和投喂餌料等措施實(shí)現(xiàn)雙親同步成熟，待產(chǎn)前2-3天水溫日變化0.5℃以?xún)?nèi)，禁止倒池和大換水，餌料投喂要輕緩，勤吸池底殘余餌料和糞便；催產(chǎn)水溫為20-22℃，應(yīng)待較多ZHJ父本系排精后，再予向產(chǎn)卵池中加入精子，精子數(shù)量以顯微鏡檢每個(gè)卵子周?chē)锌梢?jiàn)精子3-5個(gè)為宜。產(chǎn)卵當(dāng)日，在陰干時(shí)對(duì)親貝性別可再作一次精確挑選，舍棄SDS5母本系中的雄貝或可疑雌貝和ZHJ父本系中的雌貝或可疑雄貝。
3.幼蟲(chóng)培養(yǎng)雜交胚胎經(jīng)28h左右發(fā)育到D形幼蟲(chóng)，應(yīng)及時(shí)進(jìn)行選優(yōu)轉(zhuǎn)移到幼蟲(chóng)培養(yǎng)池中培養(yǎng)，幼蟲(chóng)培育水溫應(yīng)穩(wěn)定在20-22℃，以金藻作為其開(kāi)口餌料，培養(yǎng)中后期可搭配投喂金藻、硅藻和扁藻等單胞藻。其他管理方法同櫛孔扇貝。
CDS5母本系和ZHJ父本系的培育及雜交扇貝生產(chǎn)試驗(yàn)結(jié)果CDS5母本系選育過(guò)程對(duì)櫛孔扇貝長(zhǎng)島野生群體進(jìn)行扇貝高產(chǎn)和抗逆性狀的選擇育種，形成具備高產(chǎn)、抗逆、殼色紅等性狀，和基本穩(wěn)定的遺傳性能的扇貝群系。
ZHJ父本系培育過(guò)程對(duì)部分櫛孔扇貝選育群系與華貴櫛孔貝的遠(yuǎn)緣雜交后代選育出表現(xiàn)生長(zhǎng)快速，抗逆性強(qiáng)，殼色紅的特異生產(chǎn)性狀的個(gè)體，。再與膠南選擇群進(jìn)行了復(fù)雜，通過(guò)對(duì)子代選育，建立了復(fù)合雜交父本群體(ZHJ復(fù)雜父本系)。
再用CDS5母本系與ZHJ父本系雜交，雜種子代具有生長(zhǎng)快速，抗逆性能突出，殼色鮮紅特點(diǎn)，遺傳穩(wěn)定性達(dá)95％以上。CDS5母本系與ZHJ系的雜交受精率為90％以上，孵化率為85％以上。雜交子代性狀優(yōu)良，殼色鮮紅，該雜交貝被養(yǎng)殖戶(hù)稱(chēng)為海大蓬萊紅扇貝。2003-2004年試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表1、表2。
表1雜交扇貝生產(chǎn)育苗附著60天對(duì)照試驗(yàn)結(jié)果比較(2003)

對(duì)照為煙臺(tái)套子灣海區(qū)自然采苗獲得的苗種，殼色為1000粒個(gè)體結(jié)果，殼高是隨機(jī)觀測(cè)100粒個(gè)體的統(tǒng)計(jì)結(jié)果表2雜交扇貝生產(chǎn)對(duì)照養(yǎng)成試驗(yàn)觀測(cè)結(jié)果比較(2003-2004)

對(duì)照為煙臺(tái)套子灣海區(qū)自然采苗苗種養(yǎng)成的，殼色為1000粒個(gè)體結(jié)果，殼高、活體重是隨機(jī)觀測(cè)100粒個(gè)體均值，為14月齡記錄結(jié)果。死亡率隨機(jī)觀測(cè)十個(gè)扇貝養(yǎng)成籠
權(quán)利要求
1.一種高產(chǎn)抗逆雜交扇貝品種的育成方法，其特征在于首先培育CDS5母本系和ZHJ父本系，再調(diào)控雙親性腺同步發(fā)育和成熟，進(jìn)行雜交受精，最后雜交一代苗種培育。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的高產(chǎn)抗逆雜交扇貝品種的育成方法，其特征是培育CDS5母本系方法為對(duì)櫛孔扇貝長(zhǎng)島群體，以殼高指標(biāo)，選取生長(zhǎng)速度為4-7cm/年，進(jìn)行連續(xù)多代選擇繁育得到。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的高產(chǎn)抗逆雜交扇貝品種的育成方法，其特征是培育ZHJ父本系方法為以CDS5系的櫛孔扇貝和華貴櫛孔扇貝遠(yuǎn)緣雜交后代中的雌貝為母本，再與櫛孔扇貝膠南群體的選育群中的雄貝復(fù)交得到高產(chǎn)抗逆ZHJ系。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的高產(chǎn)抗逆雜交扇貝品種的育成方法，其特征在于CDS5母本系和ZHJ父本系雜交受精制種過(guò)程中，ZHJ父本系個(gè)體數(shù)保證在100只以上。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的高產(chǎn)抗逆雜交扇貝品種的育成方法，其特征在于調(diào)控雙親性腺同步發(fā)育和成熟方法為ZHJ父本系應(yīng)較CDS5母本系先行一周入池培育，在三月中上旬先后入池，性腺促熟采用升溫培育，入池水溫與親貝生境水溫一致，穩(wěn)定2-3后每天升溫0.5-1℃，最終穩(wěn)定在14-16℃培育親貝，培養(yǎng)中期應(yīng)經(jīng)常觀察性腺發(fā)育進(jìn)度，采取調(diào)解溫度、光照和投喂餌料等措施實(shí)現(xiàn)雙親同步成熟，待產(chǎn)前2-3天水溫日變化0.5℃以?xún)?nèi)，禁止倒池和大換水，餌料投喂要輕緩，勤吸池底殘余餌料和糞便；催產(chǎn)水溫為20-22℃，應(yīng)待較多ZHJ父本系排精后，再予向產(chǎn)卵池中加入精子，精子數(shù)量以顯微鏡檢每個(gè)卵子周?chē)锌梢?jiàn)精子3-5個(gè)為宜；
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的高產(chǎn)抗逆雜交扇貝品種的育成方法，其特征在于雜交一代苗種培育方法為雜交后受精卵經(jīng)28h左右發(fā)育到D形幼蟲(chóng)時(shí)，進(jìn)行選優(yōu)轉(zhuǎn)移到幼蟲(chóng)培養(yǎng)池中培養(yǎng)，幼蟲(chóng)培育水溫應(yīng)穩(wěn)定在20-22℃，以金藻作為其開(kāi)口餌料，培養(yǎng)中后期可搭配投喂金藻、硅藻和扁藻等單胞藻，雜交扇貝幼蟲(chóng)期間的其他管理同櫛孔扇貝。
全文摘要
一種高產(chǎn)抗逆雜交扇貝品種的育成方法，主要是通過(guò)連續(xù)多代選擇育種獲得高產(chǎn)櫛孔扇貝CDS5母本系，經(jīng)櫛孔扇貝和華貴櫛孔扇貝遠(yuǎn)緣雜交再與櫛孔扇貝JNR群復(fù)交得到高產(chǎn)抗逆ZHJ父本系。利用CDS5母本系與ZHJ父本系雜交，解決親貝培育，實(shí)現(xiàn)父母本性腺同步發(fā)育和成熟，并掌握雜交子一代苗種培育技術(shù)，培育出具有高產(chǎn)、抗逆特性的雜交子一代。本發(fā)明可適用于扇貝大規(guī)模生產(chǎn)，培育出的雜交子一代，經(jīng)養(yǎng)成試驗(yàn)，與常規(guī)櫛孔扇貝生產(chǎn)用種相比較，生長(zhǎng)速度提高35％，成活率提高200％以上，該項(xiàng)技術(shù)的開(kāi)發(fā)和應(yīng)用，將使扇貝養(yǎng)殖產(chǎn)量在現(xiàn)有條件下提高30－50％。
文檔編號(hào)A61D19/00GK1895037SQ20061007694
公開(kāi)日2007年1月17日 申請(qǐng)日期2006年4月11日 優(yōu)先權(quán)日2005年10月9日
發(fā)明者包振民, 陳剛, 胡景杰, 汪小龍, 王師, 孫長(zhǎng)森 申請(qǐng)人:中國(guó)海洋大學(xué)