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      植物病原體的管理的制作方法

      文檔序號(hào):327715閱讀:2320來源:國知局

      專利名稱::植物病原體的管理的制作方法植物病原體的管理發(fā)明背景發(fā)明領(lǐng)域本發(fā)明一般涉及控制植物病原體,包括植物病蟲害,的多面性方法。更具體地,本發(fā)明涉及經(jīng)遺傳修飾產(chǎn)生至少兩種殺病蟲害藥劑或抑病蟲害藥劑的植物例如作物植物,其中所述藥劑聯(lián)合賦予所述植物對植物病蟲害的增強(qiáng)抗性或降低的易感性。本發(fā)明還提供編碼所述殺病蟲害藥劑或抑病蟲害藥劑的遺傳構(gòu)建體以及包含這些藥劑的組合物。綜合的植物病蟲害管理策略也是本發(fā)明的一部分?,F(xiàn)有技術(shù)描述在本說明書中提及的出版物的文獻(xiàn)細(xì)節(jié)收集在本說明書末尾。在本說明書中提及任何現(xiàn)有技術(shù)并不是,且不應(yīng)視為,承認(rèn)或以任何形式暗示該現(xiàn)有技術(shù)在任何國家構(gòu)成普通常識(shí)的部分。植物病原體(包括昆蟲害和真菌)是導(dǎo)致農(nóng)作物損失的主要因素。例如,據(jù)估計(jì)在美國僅歐洲玉米螟(Europeancornborer)就造成玉米栽培業(yè)每年有多達(dá)十億美元消耗在損失的產(chǎn)量和控制措施上。一種尤其重要的農(nóng)作物是棉花。在許多國家棉花業(yè)是一種正在快速增長的經(jīng)濟(jì)作物,例如,在澳大利亞,每年紡大約200,000包棉花。這其中,"%用于出口。然而,棉花植物易于受到眾多病蟲害的侵害,單在澳大利亞用于控制病蟲害對棉花的侵?jǐn)_的花費(fèi)就以幾千萬美元計(jì)。傳統(tǒng)上,控制植物病蟲害例如昆蟲的主要方法是使用各種i脊的化學(xué)殺昆蟲劑和殺真菌劑。然而,由于環(huán)境、管理和健康原因,目前不鼓勵(lì)對作物使用化學(xué)藥品。實(shí)際上,許多廣傳化學(xué)藥品已經(jīng)被禁止使用或者它們的應(yīng)用被嚴(yán)格地限制于特定作物或者特定農(nóng)業(yè)區(qū)域。急需開發(fā)用于控制和管理作物病蟲害(包括昆蟲和真菌)的備選策略。一種方法是使用更天然的藥劑。一種此類藥劑是絲氨酸蛋白酶抑制劑。它們的貯藏器官中以及在葉中累積絲氨酸蛋白酶抑制劑(Brown和Ryan,Biochemistry23:3418-3422,1984;RichardPhytochemistry16:159-169,1977)。這些蛋白質(zhì)對廣泛的微生物和動(dòng)物來源的蛋白酶具有抑制性活性,但是該抑制性活性很少針對植物蛋白酶(Richardson,1977,見上文)。這些抑制劑被認(rèn)為參與到植物對病原體和捕食者的防御中。在馬鈴薯塊莖和豆類作物的種子中,這些抑制劑可以占貯藏蛋白的10%或更多(Richardson,1977,見上文),而在番茄和馬鈴薯(Green和Ryan,Science776-777,1972)及紫花苜蓿(Brown和Ryan,1984,見上文)的葉中,蛋白酶抑制劑可以在昆蟲攻擊或者其它類型損傷的48小時(shí)內(nèi)累積至可溶性蛋白質(zhì)的2%的水平(Brown和Ryan,1984,見上文;Graham等,Plants169:399-405,1986)。野生番茄,秘魯番茄(Lycopersiconperuvianum)的未成熟果實(shí)中也存在高水平的這些抑制劑(多達(dá)總可溶性蛋白的50%)(Pearce等,Planta175:527-531,1988)。在番茄和馬鈴薯中存在兩個(gè)絲氨酸蛋白酶抑制劑家族(Brown和Ryan,l984,見上文)。I型抑制劑是小蛋白(單體Mr8100),在單個(gè)活性位點(diǎn)抑制胰凝乳蛋白酶(Melville和Ryan,ArchivesofBiochemistryandBiophysics138:700-702,1970;Plunkett等,ArchBiochemBiophys213:463-472,1982)。II型抑制劑家族一般含有兩個(gè)活性位點(diǎn),其中一個(gè)抑制胰凝乳蛋白酶而另一個(gè)抑制胰蛋白酶(Bryant等,Biochemistry15:3418-3424,1976;Plunkett等,1982,見上文)。II型抑制劑具有12,300的單體Mr(Plunkett等,1982,見上文)。蛋白酶抑制劑I在黃化的煙草(Nicotianatabacum)葉中累積(Kuo等,ArchBiochemBiophys230:504-510,1984),并且發(fā)現(xiàn)來自煙草寄生疫霉(PhytophthoraparasiticaVar.nicotianae)的誘導(dǎo)子(elicitor)可以在煙草細(xì)胞懸浮培養(yǎng)物中誘導(dǎo)Rickauer等,PlantPhysiol9:1065-1070,1989)。來自煙草的絲氨酸蛋白酶抑制劑前體NaPI已經(jīng)得到尤其充分的表征并用于病蟲害控制(見美國專利6,031,087、6,440,727、6,451,573和6,261,821號(hào),所有這些專利并入此處作為參考)。某些微生物物種也已知具有針對廣鐠病蟲害(包括鱗翅目(Lepidoptera)、雙翅目(Diptera)、鞘翅目(Coleptera)、半翅目(Hemiptera)等)的殺病原體活性。蘇云金芽孢桿菌(Bacillusthuringiensis)和金龜子芽孢桿菌(Bacilluspapilliae)是兩種特別有用的生物控制劑。殺病蟲害活性集中于伴胞晶體蛋白包函體中,但是也已經(jīng)自營養(yǎng)生長階段的芽孢桿菌分離到殺病蟲害蛋白。已經(jīng)克隆和表征了編碼殺病蟲害蛋白的幾種基因(見美國專利5,366,982和5,840,868號(hào))。已經(jīng)對玉米和棉花植物進(jìn)行遺傳工程化改造以產(chǎn)生來自蘇云金芽孢桿菌的殺病蟲害5-內(nèi)毒素和晶體毒素(crytoxins)(AronsonCellMolLifeSci59(3):417-425,2002;Schnepf等,MicrobiolMolBiolRev62(3):775-806,1998)。盡管有生物控制劑的成功,但是總是存在抗性發(fā)生的危險(xiǎn)。此外,也存在與單種藥劑的細(xì)胞毒性相關(guān)的一些變異性。需要開發(fā)在植物中用于病蟲害控制的替代策略。發(fā)明概述在整個(gè)本說明書中,除非上下文有不同要求,否則措詞"包含"或其變體例如"含有"或"包括"將理解為意味著包括已經(jīng)指出的項(xiàng)目或整體或者項(xiàng)目或整體的組但不排除任何其它的項(xiàng)目或整體或者項(xiàng)目或整體的組。根據(jù)本發(fā)明,提供一種用于在植物,尤其是農(nóng)作物中進(jìn)行病蟲害控制的多面性方法。在該方法中,源于生物來源的殺病蟲害藥劑或抑病蟲害藥劑組件(modules)在植物或組合物中聯(lián)合。其中至少一種藥劑是絲氨酸蛋白酶抑制劑或其前體,而至少一種其它藥劑以不同于蛋白酶抑制劑的方式起作用。一般地,至少一種藥劑是Bt蛋白,例如Cry家族蛋白營養(yǎng)期殺昆蟲蛋白(VegetativeInsecticidalProtein,VIP)或者是防衛(wèi)素樣分子。一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中,絲氨酸蛋白酶抑制劑來自于茄科(Solanaceae),例如但不限于來自煙草的NaPI。一般將編碼所述殺病蟲害藥劑或抑病蟲害藥劑的遺傳物質(zhì)引入期望植物中,然后該植物在遺傳上被賦予產(chǎn)生該殺病蟲害藥劑或抑病蟲害藥劑的能力。兩種或兩種以上的殺病蟲害藥劑或抑病蟲害藥劑組件相聯(lián)合可以賦予增強(qiáng)的、增加的、更穩(wěn)定的、更有效的、更大的殺病蟲害或抑病蟲害活性、更廣的病蟲害鐠和/或?qū)Σ∠x害侵?jǐn)_的更長時(shí)間的持久抗性或降低的易感性。"病蟲害"包括任何植物病原體或者昆蟲或者任何帶有絲氨酸蛋白酶的因子。植物病蟲害的實(shí)例包括真菌、酵母和昆蟲。本發(fā)明尤其考慮的昆蟲組包括例如鈴夜蛾屬(He1icoverpa)、Leptiderpa、鞘翅目、雙翅目、直翅目(Orthoptera)、桿草螟屬(Diatraea)和Spocloptera。因此,本發(fā)明一方面提供經(jīng)遺傳修飾產(chǎn)生至少兩種殺病蟲害藥劑或抑病蟲害藥劑的植物,其中至少一種藥劑是絲氨酸蛋白酶抑制劑或其前體,其中以前體形式包含至少3個(gè)單體,其中至少一個(gè)單體是胰蛋白酶抑制劑而至少一個(gè)其它單體是胰凝乳蛋白酶抑制劑,并且其中至少一種其它藥劑不是絲氨酸蛋白酶抑制劑。更特別地,本發(fā)明提供遺傳修飾的植物或其由自交、回交或與另一植物的雜交獲得的后代,所述植物包含至少兩種殺病蟲害藥劑和/或抑病蟲害藥劑,其中至少一種所述藥劑由所述遺傳修飾或交配所產(chǎn)生,其中至少一種藥劑是來自茄科的絲氨酸蛋白酶抑制劑或其前體,其中它以前體形式包含至少3個(gè)單體,其中至少一個(gè)單體是胰蛋白酶抑制劑并且至少一個(gè)單體是胰凝乳蛋白酶抑制劑,并且其中至少一種其它藥劑是非絲氨酸蛋白酶抑制劑,其中所述植物對病蟲害表現(xiàn)出抗性或降低的易感性。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中,絲氨酸蛋白酶抑制劑或前體來自煙草,并稱作NaPI。另一優(yōu)選實(shí)施方案中,其它藥劑是內(nèi)毒素,例如Bt蛋白,包括Cry家族蛋白、Cry、VIP,或是防衛(wèi)素或其成分。提及防衛(wèi)素包括單獨(dú)的或者與異源蛋白質(zhì)融合的其N端部分、酸性尾和/或中央部分。因此,本發(fā)明另一方面提供遺傳修飾的植物或其通過自交、回交或與另一植物的雜交而產(chǎn)生的后代,所述植物包含至少兩種殺病蟲害藥劑和/或抑病蟲害藥劑,其中所述藥劑中的至少一種由所述遺傳修飾或交配所導(dǎo)致,其中至少一種藥刑是NaPI前體或其單體或其重組物或衍生物,并且其中至少一種其它藥劑是非絲氨酸蛋白酶抑制劑,其中所述植物對病蟲害表現(xiàn)出抗性或降低的易感性。本發(fā)明一方面考慮遺傳修飾的植物或其通過自交、回交或與另一植物雜交而產(chǎn)生的后代,所述植物包含至少兩種殺病蟲害藥劑和/或抑病蟲害藥劑,其中所述藥劑中的至少一種由所述遺傳修飾或交配所導(dǎo)致,其中至少一種藥劑是來自茄科的絲氨酸蛋白酶抑制劑或其前體,其中它以前體形式包含至少3個(gè)單體,其中至少一個(gè)單體是胰蛋白酶抑制劑且至少一個(gè)單體是胰凝乳蛋白酶抑制劑,并且其中至少一種其它藥劑是非絲氨酸蛋白酶抑制劑,其中所述植物對病蟲害表現(xiàn)出抗性或降低的易感性,只是其中至少一種其它藥劑是Bt家族蛋白,例如Cry家族蛋白或防衛(wèi)素。Cry蛋白的實(shí)例包括Cry9、Cry2、Cry3、CrylAc、VIP。更特別地,本發(fā)明涉及遺傳修飾的植物或其通過自交、回交或與另一植物的雜交而產(chǎn)生的后代,所述植物包含至少兩種殺病蟲害藥劑和/或抑病蟲害藥劑,其中所述藥劑中的至少一種由所述遺傳修飾或交配所導(dǎo)致,其中至少一種藥劑是NaPI前體或其單體或其重組物或衍生物,并且其中至少一種其它藥劑是非絲氨酸蛋白酶抑制劑,其中所述植物對病蟲害表現(xiàn)出抗性或降低的易感性,只是其中至少一種其它藥劑選自Bt蛋白和防衛(wèi)素。Bt晶體蛋白的實(shí)例描述在Hofte和WhiteleyMicrobiolReviews53:242-255,1989中。本發(fā)明還提供編碼所述至少兩種殺病蟲害藥劑或抑病蟲害藥劑的兩個(gè)或兩個(gè)以上遺傳構(gòu)建體,或者編碼所述至少兩種藥劑的單一構(gòu)建體。此外,本發(fā)明還考慮能通過例如噴霧、涂抹、撒粉或微粉化的蒸氣應(yīng)用于作物、葉、種子、花或根的、含有所述至少兩種藥劑的組合物。經(jīng)遺傳修飾產(chǎn)生所述至少兩種殺病蟲害藥劑或抑病蟲害藥劑的作物的部分、繁殖部分、果實(shí)、種子、花和收獲的部分也是本發(fā)明的一部分。附圖簡述圖1圖示食用包被有CrylAc的棉花葉圓盤后存活的幼蟲的質(zhì)量。對照葉圓盤來自cvCoker;待測葉圓盤來自NaPI基因純合的cvCoker。(注對葉進(jìn)行選擇以便僅給出幼蟲體重的小的降低。)圖2圖示食用包被有CrylAc的棉花葉圓盤后存活的幼蟲的質(zhì)量。對照葉圓盤來自cvCoker;待測葉圓盤來自NaPI基因純合的cvCoker。圖3圖示喂給包被有CryHc的棉葉后幼蟲的死亡率。對照葉圃盤來自cvCoker;待測葉圓盤來自表達(dá)NaPI基因的cvCoker。圖4圖示從第11天至第12天(大約20個(gè)小時(shí))幼蟲的平均體重。誤差條表示平均值的標(biāo)準(zhǔn)誤。圖5圖示自第11天至第12天幼蟲質(zhì)量的平均增加值。誤差條表示平均值的標(biāo)準(zhǔn)誤。發(fā)明詳述本發(fā)明提供一種用于在植物,尤其是作物植物中控制病蟲害的多面小生方法。提及"多面性方法"意味著在靶病蟲害或病蟲害組對植物侵?jǐn)_或者企圖侵?jǐn)_開始時(shí)或期間,聯(lián)合使用兩種或兩種以上藥劑對靶病蟲害或病蟲害組實(shí)現(xiàn)殺病蟲害或抑病蟲害效果。該多面性方法為組件化設(shè)計(jì),因?yàn)槊糠N殺病蟲害藥劑或抑病蟲害藥劑均被認(rèn)為是一個(gè)組件成分。在整個(gè)病蟲害管理系統(tǒng)中使用多個(gè)不同的組件成分。"抑病蟲害(pestistatic)"意味著降低病蟲害的生長或繁殖或建群能力但該病蟲害的死亡不是必需的。盡管殺病蟲害活性是優(yōu)選的,但是抑病蟲害效果也是可以接受的并是本發(fā)明的一部分。本文中,"殺病蟲害活性"包括"殺昆蟲活性"(當(dāng)耙病蟲害是昆蟲時(shí))或者"殺真菌活性"(當(dāng)靶病蟲害是真菌時(shí))或"殺細(xì)菌活性"(當(dāng)靶病蟲害是細(xì)菌時(shí))或"殺線蟲活性,,(當(dāng)靶病蟲害是線蟲時(shí))。這些術(shù)語指藥劑(也稱作"殺病蟲害組件成分")對抗病蟲害的活性。該活性可以方便地基于在暴露于藥劑之后對病蟲害死亡率、病蟲害體重減輕、病蟲害排斥及病蟲害的其它行為、生理和/或物理變化(包括消化蛋白的能力、生長、維持自身和/或繁殖的能力)的影響來測量。因此,所述藥劑對病蟲害的健康有不利影響,這可以通過至少一個(gè)可測量參數(shù)來確定。根據(jù)本發(fā)明,至少兩種藥劑影響病蟲害的健康,該影響可以是加性的或協(xié)同性的或者以其它方式互補(bǔ)的。因此,所述至少兩種藥劑可以對可測量的病蟲害健康參數(shù)表現(xiàn)出相同的作用,或者聯(lián)合效應(yīng)可以不同于每種藥劑的各自效應(yīng)。此外,至少一種藥劑可以表現(xiàn)出殺病蟲害活性而另一種藥劑可以表現(xiàn)出抑病蟲害活性。然而,優(yōu)選地,兩種藥劑均是殺病蟲害的,或者它們的聯(lián)合效應(yīng)是殺病蟲害的。所述藥劑當(dāng)其在植物細(xì)胞中產(chǎn)生時(shí)在性質(zhì)上是蛋白質(zhì),但是當(dāng)摻入殺病蟲害或抑病蟲害組合物中時(shí)其可以被化學(xué)修飾。因此,所迷藥劑可以是如此處所述的肽、多肽、或蛋白質(zhì)或者是化學(xué)類似物或化學(xué)模擬物或功能等價(jià)物。如上所述,藥劑對病蟲害產(chǎn)生效應(yīng),該效應(yīng)可以被稱作"影響"。影響的實(shí)例包括在進(jìn)食能力或習(xí)慣或容量、承受發(fā)育變化的能力上的變化、細(xì)胞毒性、生長停滯、繁殖力下降、對卵或幼蟲的影響、以及病蟲害的死亡或發(fā)病。此外,殺病蟲害或抑病蟲害活性的效力可以通過在作物植物上產(chǎn)生的效應(yīng),例如生長產(chǎn)率、較少的病蟲害、減輕的病理來評(píng)價(jià)。以"有效殺病蟲害的量,,或以"有效抑病蟲害的量"向植物或者在植物中提供本發(fā)明藥劑。這些量指藥劑在單獨(dú)或者聯(lián)合情況下可以提供單種或整體殺病蟲害或抑病蟲害活性或其它適宜影響的量。本文中提及植物包括單子葉植物或雙子葉植物,并且該植物可以從遺傳轉(zhuǎn)化的愈傷組織或組織產(chǎn)生、或者可以是所轉(zhuǎn)化的植物的后代或者轉(zhuǎn)化的植物或其后代與未轉(zhuǎn)化的植物之間的雜種。本文中,術(shù)語植物包括植物細(xì)胞、植物原生質(zhì)體、能夠再生植物的植物細(xì)胞組織培養(yǎng)物、植物愈傷組織、植物塊、以及植物中完好的植物細(xì)胞或植物部分例如胚胎、花粉、胚珠、種子、葉、花、枝、果實(shí)、核仁、穗、穗軸、果殼、莖稈、根、根尖、花藥等。目的植物的實(shí)例包括,但不限于,玉米(Zeamays)、蕓萑屬物種(Brassicasp,)(例如,油菜(B,napus)、蕪青(B.rapa)、芥菜(B.juncea)),尤其是可用作菜籽油來源的那些蕓苔屬物種、紫花苜蓿(Medicagosativa)、稻(0ryzasativa)、黑麥(Secalecereale)、高梁(Sorghumbicolor,Sorghumvulgare)、粟(例如,珍珠粟(Pennisetumglaucum)、黍(Panicummiliaceum)、粟(foxtailmillet,Setariaitalica)、糝子(fingermillet,Eleusinecoracana)、向曰葵(Helianthusannuus)、紅花(Carthamustinctorius)、小麥(Triticumaestivum)、大豆(Glycinemax)、煙草(Nicotianatabacum)、馬鈴薯(Solariumtuberosum)、花生(Arachishypogaea)、棉(海島棉(Gossypiumbarbadense)、陸地棉(Gossypiumhirsutum))、甘薯(Ipomoeabatatus)、木薯(Manihotesculenta)、咖啡(Coffeaspp.)、椰子(Cocosnucifera)、cotton菠蘿(Ananascomosus)、柑橘樹(Citrusspp.)、可可(Theobromacacao)、茶(Camelliasinensis)、香蕉(Musaspp.)、聘梨(Perseaamericana)、無花果(Ficuscasica)、番石榴(Psidiumguajava)、芒果(Mangiferaindica)、橄欖(01eaeuropaea)、番木瓜(Caricapapaya)、腰果樹(Anacardiumoccidental)、澳大利亞堅(jiān)果(Macadamiaintegrifolia)、扁桃(Prunusamygdalus)、甜菜(Betavulgaris)、甘蔗(Saccharumspp.)、燕麥、大麥、蔬菜、觀賞植物和針葉樹。蔬菜包括番癡(Lycopersiconesculentum)、萵苣(例如,Lactucasativa)、菜豆(Phaseolusvulgaris)、利馬豆(Phaseoluslimensis)、豌豆類(Lathyrusspp.)、以及甜瓜屬(Cucumis)成員例如黃瓜(C.sativus)、羅馬甜瓜(cantaloupe,C.cantalupensis)以及甜瓜(C.melo)。觀賞植物包括杜鵑(Rhododendronspp.)、繡球(Macrophyllahydrangea)、扶桑(Hibiscusrosasanensis)、玫瑰(Rosaspp.)、郁金香(Tulipaspp.)、7JC仙(Narcissusspp.)、碧冬癡(Petuniahybrida)、康乃舉(Dianthuscaryophyllus)、一品紅(Euphorbiapulcherrima)和菊花??捎糜趯?shí)踐本發(fā)明的針葉樹包括,例如,;^如火炬木XPinustaeda)、濕地木XPinuseiliotii)、美國黃松(Pinusponderosa)、小干松(Pinuscontorta)和輻射松(Pinusradiata);花旗松(Pseudotsugamenziesii);加拿大鐵杉(Tsugacanadensis);白云杉(Piceaglauca);紅杉(Sequoiasempervirens);真正的冷杉例如太平洋銀冷杉(Abiesamabilis)和香脂冷杉(Abiesbalsamea);以及柏例如美國西部側(cè)柏(Thujaplicata)和黃扁柏(Chamaecyparis麵tkatensis)。本發(fā)明的植物包括作物植物(例如,棉、玉米、紫花苜蓿、向日葵、蕓苔屬植物、大豆、棉、紅花、花生、高梁、小麥、粟、煙草等),例如玉米和大豆植物。草沖草包括,但不限于早熟禾(Poaannua);多花黑麥草(Loliummultinorum);加拿大早熟禾(Poacompressa);紫羊茅(Festucarubra);細(xì)弱剪股穎(Agrostistenuis);匍旬蓊股穎(Agrostispalustris);沙生冰草(Agropyrondesertorum);扁穗冰草(Agropyroncristatum);硬羊茅(Festucalongifolia);草地早熟禾(Poapratensis);鴨茅(Dactylisglomerata);黑麥草(Loliumperenne);紫羊茅(Festucarubra);小糠草(Agrostisalba);普通早熟禾(Poatrivialis);羊茅(Festucaovina);無芒雀麥(Bromusinermis);高羊茅(Festucaarundinacea);貓尾草(Phleumpratense);絨毛蓊股穎(Agrostiscanina);堿茅(Puccinelliadistans);藍(lán)莖水草(Agropyronsmithii);狗牙根(Cynodonspp.);奧古斯汀草(Stenotaphrumsecundatum);結(jié)縷草(Zoysiaspp.);巴哈雀稗(Paspalumnotatum);地越草(Axonopusaffinis);百足草(Eremochloaophiuroides);東非多良尾草(Pennisetumclandesinum);海濱雀稗(Paspalumvaginatum);格蘭馬草(Boutelouagracilis);野牛草(Buchloedactyloids);垂穗草(Boutelouacurtipendula)。目的植物包括提供目的種子的谷類植物、油籽植物和豆科植物。目的種子包括谷粒,例如玉米、小麥、大麥、稻、高梁、黑麥、粟等。油籽植物包括棉、大豆、紅花、向日葵、蕓苔屬植物、玉米、紫花苜蓿、棕櫚、椰子、亞麻、蓖麻、橄欖等。豆科植物包括菜豆類(beans)和豌豆類(peas)。菜豆類植物包括瓜爾豆(guar)、槐豆(locustbean)、胡,巴(fenugreek)、大豆、青刀豆(gardenbeans)、5t豆(cowpea)、綠豆(mungbean)、利馬豆(limabean)、蠶豆(favabean)、扁豆(lentil)、鷹嘴豆(chickpea)等。本文考慮的優(yōu)選植物包括棉、甜玉米、番茄、煙草、甜椒(piniento)、馬鈴薯、向曰葵、柑橘、李子、高梁、韭蔥、大豆、紫花苜蓿、菜豆類、木豆類(pidgeonpeas)、鷹嘴豆類、洋薊類、curcurbits、萵苣、石竹(Dianthus)、天竺葵類、燈籠果、玉米、亞麻和亞麻籽、羽扇豆類、蠶豆類、青豆類、花生類、canola、金魚草類、櫻桃、向日葵、金盞花類、蠟菊(Helichrysum)、小麥、大麥、燕麥類、黑小麥、胡蘿卜類、洋蔥類、蘭花類、薔薇類和矮牽牛類。本發(fā)明的實(shí)施方案可以有效地抵抗各種病蟲害。為了本發(fā)明的目的,病蟲害包括,但不限于,昆蟲、真菌、細(xì)菌、線蟲、蜱螨類(acarids)、原生動(dòng)物病原體、動(dòng)物寄生性肝吸蟲等。尤其有意義的病蟲害是昆蟲病蟲害,尤其是給農(nóng)業(yè)植物造成重大損失的昆蟲病蟲害。術(shù)語"昆蟲病蟲害"在本文中指昆蟲和其它相似病蟲害,例如,蜱螨目(Acari)的病蟲害,包括但不限于螨類和虱類。本發(fā)明的昆蟲病蟲害包括,但不限于,鱗翅目昆蟲,例如,小蠟螟(Achoroiagrisella)、東部黑頭長翅巻蛾(Aclerisgloverana)、黑頭長翅巻蛾(Aclerisvariana)、沖帛褐帶巻葉蛾(Adoxophyesorana)、小地老虎(Agrotisipsilon)、Alabamaargillacea、秋星尺蠖(Alsophilapometaria)、Amyeloistransitella、地中海粉螟(Anagastakuehniella)、桃條麥蛾(Anarsialineatella)、Anisotasenatoria、拃蠶(Antheraeapernyi)、黎豆夜蛾(Anticarsiagemmatalis)、黃巻蛾屬(Archipssp.)、條巻蛾屬(Argyrotaeniasp.)、Athetismindara、家蠶(Bombyxmori)、棉潛葉蛾(Bucculatrixthurberiella)、粉斑螟(Cadracautella)、色巻蛾屬(Choristoneurasp.)、Cochyllshospes、苜蓿粉蝶(Coliaseurytheme)、米蛾(Corcyracephalonica)、Cydialatiferreanus、蘋果蠹蛾(Cydiapomonella)、Datanaintegerrima、落葉松毛蟲(Dendrolimussibericus)、Desmiafeneralis、甜瓜絹野螟(Diaphaniahyalinata)、黃瓜絹野螟(Diaphanianitidalis)、西南玉米桿草螟(Diatraeagrandiosella)、小蔑螟(Diatraeasaccharalis)、白尺蠖蛾(Ennomossubsignaria)、Eore認(rèn)aloftini、煙草粉螟(Esphestiaelutella)、Erannistilaria、細(xì)斑燈蛾(Estigmeneacrea)、Euliasalubricola、Eupocoelliaambiguella、女貞細(xì)巻蛾(Eupoeci1iaambiguella)、黃毒蛾(Euproctischrysorrhoea)、暗緣地老虎(Euxoamessoria)、蠟螟(Galleriamellonella)、梨小食心蟲(GrapholUamolesta)、黑擬蛉蛾(Harrisinaamericana)、Helicoverpasubflexa、谷實(shí)夜蛾(Helicoverpazea)、煙芽夜蛾(Heliothisvirescens)、新墨西哥草原毛蟲(Hemileucaoliviae)、向曰葵斑螟(Homoeosomaelectellum)、美國白蛾(Hyphantiacunea)、Keiferialycopersicella、Lambdinafiscellariafiscellaria、Lambdinafiscellarialugubrosa、雪毒蛾(Leucomasalicis)、葡萄漿果小巻蛾(Lobesiabotrana)、草地螟(Loxostegesticticalis)、舞毒蛾(Lymantriadispar)、Macallathyrisalis、天幕毛蟲屬(Malacosomasp.)、甘藍(lán)燈蛾(Mamestrabrassicae)、Mamestraconfigurata、Manducaquinquemaculata、煙草天蛾(Manducasexta)、豆野螟(Marucatestulalis)、Melanchrapicta、秋尺蛾(Operophterabrumata)、古毒蛾屬(Orgyiasp.)、歐洲玉米螟(Ostrinianubilalis)、Paleacritavernata、Papiliocresphontes、棉紅鈴蟲(Pectinophoragossypiella)、Phryganidiacalifornica、Phyllonorycterblancardella、暗脈菜粉蝶(Pierisnapi)、油菜菜粉蝶(Pierisrapae)、苜蓿綠夜蛾(Plathypenascabra)、Platynotanouendana、荷蘭石竹小巻蛾(Platynotastultana)、Platyptiliacarduidactyla、印度谷螟(Plodiainterpunctella)、小菜蛾(Plutellaxylostella)、Pontiaprotodice、一點(diǎn)粘蟲(Pseudaletiaunipuncta)、大豆夜蛾(Pseudoplasiaincludens)、Sabulodesaegrotata、Schizuraconcinna、麥蛾(Sitotrogacerealella)、蘋白小巻蛾(Spilontaocellana)、灰翅夜蛾屬(Spodopterasp.)、Thaurnstopoeapityocampa、幕谷蛾(Tinsolabisselliella)、粉故夜蛾(Trichoplusiahi)、溫室結(jié)網(wǎng)野螟(Udearubigalis)、Xylomygescuriails、和蘋果巢蛾(Yponomeutapadella)。此外,本發(fā)明的實(shí)施方案也可以有效地對抗昆蟲病蟲害,包括,但不限于選自雙翅目、膜翅目(Hymenoptera)、鱗翅目、食毛目(Mallophaga)、同翅目(Homoptera)、半翅目、直翅目(Orthroptera)、纓翅目(Thysanoptera)、革翅目(Dermaptera)、等翅目(Isoptera)、虱目(A卿lura)、蚤目(Siphonaptera)、毛翅目(Trichoptera)、鞘翅目(Coleoptera)等的昆蟲,尤其是鱗翅目昆蟲。針對主要作物,本發(fā)明昆蟲病蟲害包括,但不限于玉米歐洲玉米螟(Ostrinianubilalis,Europeancornborer);小地老虎(Agrotisipsilon,blackcutworm);谷實(shí)夜蛾(Helicoverpazeae,cornearworm);草地貪夜蛾(Spodopterafrugiperda,fallarmyworm);西南玉米桿草螟(Diatraeagrandiosella,southwesterncornborer);南美玉米苗斑螟(Elasmopalpuslignosellus,lessercornstalkborer);小蔑螟(Diatraeasaccharalis,surgarcaneborer);西部玉米根蟲(westerncornrootworm),例如,玉米根螢葉曱(Diabroticavirgiferavirgifera);北部玉米根蟲(northerncornrootworm),例如,Diabroticalongicornisbarberi;南部玉米根蟲(southerncornrootworm),例如,黃瓜十一星葉甲(Diabroticaundecimpunctatahowardi);梳爪叩甲屬(Melanotusspp.),金針蟲(wireworms);圓頭犀金龜(Cyclocephalaborealis,northernmaskedchafer(whitegrub));圓頭無斑犀金龜(Cyclocephalaimmaculata,southernmaskedchafer(whitegrub));曰本麗金龜(Popilliajaponica,Japanesebeetle)5玉米跳甲(Chaetocnemapulicaria,cornfleabeetle);玉米象蟲(Sphenophorusmaidis,maizebillbug);玉米縊管奸(Rhopalosiphummaidis,cornleafaphid);玉米根椅(Anuraphismaidiradicis,cornrootaphid);麥長棒(Blissusleucopterusleucopterus,chinchbug);紅腿埴(Melanoplusfemurrubrum,redleggedgrasshopper);遷徙蚱娃(Melanoplussanguinipes,migratorygrasshopper);灰地種錄(Hylemyaplatura,seedcornmaggot);玉米斑潛錄(Agromyzaparvicornis,cornblotchleafminer);美洲錐尾薊馬(Anaphothripsobscrurus,grassthrips);竊葉蚊(Solenopsismilesta,thiefant);二斑葉螨(Tetranychusurticae,twospottedspidermite);高梁高粱螟(Chilopartellus,sorghumborer);草地貪夜蛾(Spodopterafrugiperda,fallarmyworm);谷實(shí)夜蛾(Helicoverpazea,cornearworm);南美玉米苗斑螟(Elasmopalpuslignosellus,lesercornstalkborer);粒膚地老虎(Feltiasubterranea,granulatecutworm);蜂螬(Phyllophagacrinita,whitegrub);Eleodes,單葉叩曱屬(Conoderus),和Aeolusspp.,鐵絲蟲;黑角負(fù)泥蟲(0ulemamelanopus,cerealleafbeetle);玉米跳甲(Chaetocnemapulicaria,cornfleabeetle);玉米象蟲(Sphenophorusmaidis,maizebillbug);玉米級(jí)管對(Rhopalosiphummaidis,cornleafaphid);庶黃偽毛坊(Siphaflava,yellowsugarcaneaphid);麥長蝽(chinchbug,例如,Blissusleucopterusleucopterus);高梁痿蚊(Contariniasorghicola,sorghummidge);朱砂葉螨(Tetranychuscinnabari鵬,carminespidermite);二斑葉螨(Tetranychusurticae,two-spottedspidermite);小麥一點(diǎn)粘蟲(Pseudaletiaunipunctata,armyworm);草地貪夜蛾(Spodopterafrugiperda,fallarmy窗m);南美玉米苗斑螟(Elasmopalpuslignosellus,lessercornstalkborer);西部灰地老虎(Agrotisorthogonia,palewesterncutworm);南美玉米苗斑螟(Elasmopalpuslignosellus,lessercornstalkborer);黑角負(fù)泥蟲(Oulemamelanopus,cerealleafbeetle);三葉草葉象(Hyperapunctata,cloverleafweevi1);南部玉米根蟲(southerncornrootworm),例如,黃瓜十一星葉曱(Diabroticaundecimpunctatahowardi);俄國麥對(Russianwheataphid);麥二叉辨(Schizaphisgramin認(rèn),greenbug);麥長管椅(Macrosiphumavenae,Englishgrainaphid);紅腿埴(Melanoplusfemurrubrum,redleggedgrasshopper);異黑埴(Melanoplusdifferentialis,differentialgrasshopper);遷徙蚱娃(Melanoplussanguinipes,migratorygrasshopper);小麥黑森痿蚊(Mayetioladestructor,Hessianfly);麥紅吸漿蟲(Sitodiplosismosellana,wheatmidge);美州麥桿錄(Meromyzaamericana,wheatstemmaggot);麥種竭(Hylemyacoarctata,wheatbulbfly);煙薊馬(Frankliniellafusca,tobaccothrips);麥莖蜂(Cephuscinctus,wheatstemsawfly);郁金香痿螨(Aceriatulipae,wheatcurlraite);向曰葵向曰葵莖象甲(Cylindrocupturusadspersus,sunflowerstemweevil);向曰葵紅色種子象(Smicronyxfulus,redsunflowerseedweevil);向曰葵灰色種子象(Smicronyxsordidus,graysunflowerseedweevil);向曰葵食芽蛾(Suleimahelianthana,sunflowerbudmoth);向曰葵螟(Homoeosomaelectellum,sunflowermoth);向曰葵葉甲(Zygogrammaexclaraationis,sunflowerbeetle);胡蘿卜金龜子(Bothyrusgibbosus,carrotbeetle);向曰葵籽癭蚊(Neolasiopteramurtfeldtiana,sunflowerseedmidge);棉煙芽夜蛾(Heliothisvirescens,tobaccobudworra);谷實(shí)夜蛾(Helicoverpazea,棉鈴蟲(cottonbollworm));甜菜夜蛾(Spodopteraexigua,beetarmyworm);紅鈴麥蛾(Pectinophoragossypiella,pinkbollworm);(棉鈴象甲,例如,墨西哥棉鈴象(Anthonomusgrandis));棉奸(Aphisgossypii,cottonaphid);棉盲棒象(Pseudatomoscelisseriatus,cottonfleahopper);束翅粉虱(Trialeurodesabutilonea,bandedwingedwhitefly);無澤盲蝽(Lyguslineolaris,tarnishedplantbug);紅腿植(Melanoplusfemurrubrum,redleggedgrasshopper);異黑埴(Melanoplusdifferentialis,differentialgrasshopper);蔥薊馬(Thripstabaci,onionthrips);煙薊馬(Franklinkiellafusca,tobaccothrips);朱砂葉螨(Tetranychuscinnabarinus,carminespidermite);二斑葉螨(Tetranychusurticae,two-spottedspidermite);稻小蔗螟(Diatraeasaccharalis,sugarcaneborer);草地貪夜蛾(Spodopterafrugiperda,fallarmyworm);谷實(shí)夜蛾(Helicoverpazea,cornearworm);葡萄肖葉甲(Colaspisbrunnea,grapecolaspis);稻水象甲(Lissorhoptrusoryzophilus,ricewaterweevil);米象(Sitophilusoryzae,riceweevil);二條黑尾葉蟬(Nephotettixnigropictus,riceleafhoper);麥長砵(chinchbug,e.g.,Blissusleucopterusleucopterus);喜綠蝽(Acrosternumhilare,greenstinkbug);大豆大豆夜蛾(Pseudoplusiaincludens,soybeanlooper);藜豆夜蛾(Anticarsiagemmatalis,velvetbeancaterpillar);苜蓿綠夜蛾(Plathypenascabra,greencloverworm);歐洲玉米螟(0strinianubilalis,Europeancornborer);小地老虎(Agrotisipsilon,Mackcutworm);甜菜夜蛾(Spodopteraexigua,beetarmyworm);煙芽夜蛾(Heliothisvirescens,tobaccobudworm);谷實(shí)夜蛾(Helicoverpazea,沖帛鈴蟲);墨西哥大豆胍蟲(Epilachnavarivestis,Mexicanbeanbeetle);桃蜂(Myzuspersicae,greenpeachaphid);馬鈴薯微葉蟬(Empoascafabae,potatoleafhopper);喜綠棒(Acrosternumhilare,greenstinkbug);紅腿埴(Melanoplusfemurrubrum,redleggedgrasshopper);異黑埴(Melanoplusdifferentialis,differentialgrasshopper);灰地種錄(Hylemyaplatura,seedcornmaggot);大豆薊馬(Sericothripsvariabilis,soybeanthrips);蔥薊馬(Thripstabaci,onionthrips);土耳其斯坦葉螨(Tetranychusturkestani,strawberryspidermite);二斑葉螨(Tetranychusurticae,two-spottedspidermite);大麥歐洲玉米螟(Ostrinianubilalis,Europeancornborer);小地老虎(Agrotisipsilon,blackcutworm);麥二叉椅(Schizaphisgraminum,greenbug);麥長蝽(chinchbug,例如,Blissusleucopterusleucopterus);喜綠棒(Acrosternumhilare,greenstinkbug);褐臭棒(Euschistusservus,brownstinkbug);灰地種竭(Jylemyaplatura,seedcornmaggot);小麥黑森癭蚊(Mayetioladestructor,Hessianfly)j麥巖螨(Petrobialatens,brownwheatmite);油籽油菜甘藍(lán)蜂(Vrevicorynebrassicae,cabbageaphid);十字花科跳甲(Phyllotretacruciferae,cruciferfleabeetle);黃曲條跳甲(Phyllotretastriolata,stripedfleabeetle);芫胥淡足跳甲(Phyllotretanemorum,stripedturnipfleabeetle);油菜露尾甲(Meligethesaeneus,rapeseedbeetle);以及露尾曱(pollenbeetle)(Meligethesrufimanus,Meligethesnigrescens,Meligethescanadianus,和Meligethesviridescens);馬鈴薯科羅拉多馬鈴薯葉甲(Leptinotarsadecemlineata,Coloradopotatobeetle)。而且,本發(fā)明的實(shí)施方案可以有效地對抗半翅目昆蟲,例如,豆莢草盲蜂(Lygushesperus),美國牧草盲漆(Lyguslineolaris),牧草盲砵(Lyguspratensis),長毛草盲蝽(LygusrugulipennisPopp),Lyguspabulinus,Calocorisnorvegicus,0rthopscompestris,Plesiocorisrugicollis,Cyrtopeltismodestus,Cyrtopeltisnotatus,Spanagonicusalbofasciatus,Diaphnocorischlorinonis,Labopidicolaallii,Pseudatomoscelisseriatus,Adelphocorisrapidus,Poecilocapsuslineatus,麥長棒(Blissusleucopterus),小長棒(Nysiusericae),谷長漆若蟲(Nysiusraphanus),褐臭棒(Euschistusservus),稻綠椿(Nezaraviridula),扁盾棒屬(Eurygaster),緣蝽科(Coreidae),紅棒科(Pyrrhocoridae),(Tinidae),負(fù)子棒科(Blostomatidae),獵棒科(Reduviidae),和臭砵科(Cimicidae)。目的病蟲害也包括咖啡豆象(Araecerusfasciculatus,coffeebeanweevil);菜豆象(Acanthoscelidesobtectus,beanweevil);蠶豆象(Bruchusrufmanus,broadbeanweevi1);豌豆象(Bruchuspisorum,peaweevil);巴西豆象(Zabrotessubfasciatus,Mexicanbeanweevil);黃瓜條葉甲(Diabroticabalteata,bandedcucumberbeetle);菜豆螢葉甲(Cerotomatrifurcata,beanleafbeetle);玉米根葉甲(Diabroticavirgifera:Mexicancornrootworm);美洲馬鈴薯跳甲(Epitrixcucumeris,potatofleabeetle);甘薯葉甲(Chaetocnemaconfinis,sweetpotatofleabeetle)5苜蓿葉象蟲(Hyperapostica,alfalfaweevil);蘋果象甲(Anthonomusquadrigibbus,applecurculio);豆莖象(Sternechuspaludatus,beanstalkweevil);埃及苜蓿葉象(Hyperabrunnipennis,Egyptianalfalfaweevil);谷象(Sitophilusgranaries,granaryweevil);葡萄象甲(Craponiusinaequalis,grapecurculio);玉米象(Sitophiluszeamais,maizeweevil);李象(Conotrachelusnenuphar,plumcurculio);西印度群島甘薯象曱(Euscepespostfaciatus,WestIndiansweetpotatoweevil);紫絨鮑角金龜(Maladeracastanea,Asiaticgardenbeetle);歐洲切根錄金龜(Rhizotrogusmajalis,Europeanchafer);薔薇緦角金龜(Macrodactylussubspinosus,rosechafer);雜擬谷盜(Triboliumconfusum,confusedflourbeetle);黑粉蟲(Tenebrioobscurus,darkmealworm);赤擬谷盜(Triboliumcastane體,redflourbeetle);黃粉蟲(Tenebriomolitor,yellowmealworm)。線蟲包括寄生線蟲,例如根結(jié)線蟲、胞嚢線蟲和壞死線蟲,包括胞囊線蟲屬(Heteroderaspp.),根結(jié)線蟲屬(Meloidogynespp.),和球形胞囊線蟲屬(Globoderaspp.);尤其是胞嚢線蟲成員,包括但不限于,Heteroderaglycines(大豆胞囊線蟲);Heteroderaschachtii(甜菜胞嚢線蟲);Heteroderaavenae(禾谷胞嚢線蟲)j和馬鈴薯金線蟲(Globoderarostochiensis)和馬鈴薯白線蟲(Globoderapailida)(馬鈴薯胞嚢線蟲)。壞死線蟲包括根腐線蟲屬(Pratylenchusspp.)。本發(fā)明涉及植物病蟲害管理系統(tǒng),該系統(tǒng)在其涉及兩種或兩種以上殺病蟲害和/或抑病蟲害藥劑的意義上為多面性的,其中所述藥劑一般設(shè)計(jì)為對植物病蟲害表現(xiàn)出聯(lián)合的影響。至少一種藥劑是絲氨酸蛋白酶抑制劑,且至少一種藥劑是非絲氨酸蛋白酶抑制劑(即,其通過不同于抑制絲氨酸蛋白酶活性的機(jī)制起作用)。該多面性系統(tǒng)可以同時(shí)地或相繼地使用這兩種藥劑。在任一種情況下,這都被描述為藥劑的"聯(lián)用,,。因此,本發(fā)明一方面提供遺傳修飾的植物或其由自交、回交或與另一植物的雜交得到的后代,所述植物包含至少兩種殺病蟲害和/或抑病蟲害藥劑,其中所述藥劑中至少一種由所述遺傳修飾或交配產(chǎn)生,其中至少一種藥劑是來自茄科的絲氨酸蛋白酶抑制劑或其前體,其中該絲氨酸蛋白酶抑制劑以前體形式包含至少3個(gè)單體,其中至少一個(gè)單體是胰蛋白酶抑制劑并且至少一個(gè)單體是胰凝乳蛋白酶抑制劑,并且其中至少一種其它藥劑是非絲氨酸蛋白酶抑制劑,其中所述植物對病蟲害表現(xiàn)出抗性或降低的易感性。所述絲氨酸蛋白酶抑制劑優(yōu)選來自煙草,并且可以在前體形式中包含至少3個(gè)單體或者4個(gè)單體或者5個(gè)單體或者6個(gè)單體或者7個(gè)單體或者8個(gè)單體,其中至少一個(gè)單體抑制胰蛋白酶而且至少一個(gè)單體抑制胰凝乳蛋白酶。術(shù)語"前體"在本文中不旨在對前體分子本身的應(yīng)用設(shè)置任何限制,也不旨在要求該分子在蛋白酶抑制活性獲得表達(dá)之前首先被加工成單體。該前體分子具有蛋白酶抑制活性,并且本發(fā)明涉及該前體以及該前體的各個(gè)單體。在一個(gè)最優(yōu)選的實(shí)施方案中,所述蛋白酶抑制劑或其前體來自Nicotianaalata(NaPI)(其描述于國際專利申請PCT/AU93/00659號(hào)[WO94/13810],并入此處作為參考)。因此,本發(fā)明另一方面提供遺傳修飾的植物或其通過自交、回交或與另一植物的雜交而產(chǎn)生的后代,所述植物包含至少兩種殺病蟲害藥劑和/或抑病蟲害藥劑,其中所述藥劑中的至少一種由所述遺傳修飾或交配所導(dǎo)致,其中至少一種藥劑是NaPI前體或其單體或其重組物或衍生物,并且其中至少一種其它藥劑是非絲氨酸蛋白酶抑制劑,其中所述植物對病蟲害表現(xiàn)出抗性或降低的易感性。優(yōu)選的至少一種其它藥劑是毒素,包括內(nèi)毒素,例如來源于微生物或真菌的內(nèi)毒素。特別有用的實(shí)例包括來源于芽孢桿菌屬物種的毒素。提及毒素包括表現(xiàn)出殺病蟲害或抑病蟲害活性但是并不僅僅能抑制絲氨酸蛋白酶的肽、多肽或蛋白質(zhì)。所述毒素只有在其還表現(xiàn)出另一方式的殺病蟲害或抑病蟲害活性時(shí)才可能抑制絲氨酸蛋白酶。尤其有用的毒素是來自蘇云金芽孢桿菌的Bt相關(guān)毒素,例如Cry內(nèi)毒素家族。這些內(nèi)毒素的實(shí)例包括Cry9、Cry2s、Cry3s或CrylA內(nèi)毒素家族。術(shù)語"Cry9家族,,在本文中用于指與先前描述的野生型Cry9或Cry9D序列具有高度序列同一性或相似性的核苷酸或氨基酸序列。Bt毒素或內(nèi)毒素旨在包括在各種狀態(tài)的蘇云金芽孢桿菌中發(fā)現(xiàn)的更寬的Cry毒素類型,并且包括諸如CrylAc、Cryls、Cry2s和Cry3s等毒素。適宜毒素的實(shí)例可以見于美國專利申請2005/0138685、2004/0016020和2004/0221333(均并入此處作為參考)。其它適宜的毒素包括營養(yǎng)期殺昆蟲蛋白(VIP)以及防衛(wèi)素。適宜的防衛(wèi)素描述在國際專利申請PCT/AU2004/000524(并入此處作為參考)中。因此,本發(fā)明另一方面考慮遺傳修飾的植物或其通過自交、回交或與另一植物雜交而產(chǎn)生的后代,所述植物包含至少兩種殺病蟲害藥劑和/或抑病蟲害藥劑,其中所述藥劑中的至少一種由所述遺傳修飾或交配所導(dǎo)致,其中至少一種藥劑是來自茄科的絲氨酸蛋白酶抑制劑或其前體,其中該絲氨酸蛋白酶抑制劑以前體形式包含至少3個(gè)單體,其中至少一個(gè)單體是胰蛋白酶抑制劑且至少一個(gè)單體是胰凝乳蛋白酶抑制劑,并且其中至少一種其它藥劑是非絲氨酸蛋白酶抑制劑,其中所述植物對病蟲害表現(xiàn)出抗性或降低的易感性,只是其中至少一種其它藥劑選自Bt蛋白,Cry9家族蛋白、Cry2家族蛋白或Cry3家族蛋白、CrylAC、VIP和防衛(wèi)素。更特別地,本發(fā)明涉及遺傳修飾的植物或其通過自交、回交或與另一植物雜交而產(chǎn)生的后代,所述植物包含至少兩種殺病蟲害藥劑和/或抑病蟲害藥劑,其中所述藥劑中的至少一種由所述遺傳修飾或交配所導(dǎo)致,其中至少一種藥劑是NaPI前體或其單體或其重組物或衍生物,并且其中至少一種其它藥劑是非絲氨酸蛋白酶抑制劑,其中所述植物對病蟲害表現(xiàn)出抗性或降低的易感性,只是其中至少一種其它藥劑選自Bt蛋白,包括Cry家族蛋白、VIP和防衛(wèi)素。提及NaPI、蛋白酶抑制劑、Bt、Cry9、CrylAc、Cryls、Cry2s、Cry3s、VIP和防衛(wèi)素及類似物包括衍生物和片段以及以其它方式修飾的形式。修飾形式的實(shí)例包括經(jīng)誘變的形式,例如具有改變的底物特異性或者表現(xiàn)出更大的穩(wěn)定性或者使所述藥劑定向于植物細(xì)胞的細(xì)胞器例如液泡的突變體。絲氨酸蛋白酶抑制劑例如NaPI已知直接作用于鱗翅目病蟲害消化系統(tǒng)的消化道蛋白酶。該特異抑制劑(胰蛋白酶或胰凝乳蛋白酶抑制劑)和該蛋白酶(胰蛋白酶或胰凝乳蛋白酶)之間形成復(fù)合物。然后這些復(fù)合物被排泄在蟲糞中。結(jié)果是降低昆蟲對蛋白質(zhì)的消化能力和耗竭昆蟲幼蟲的蛋白儲(chǔ)備。蛋白酶抑制劑也可以影響昆蟲的天然免疫系統(tǒng)。為了實(shí)現(xiàn)此效果,抑制劑必須移動(dòng)進(jìn)入血淋巴,它們在該處能夠與天然免疫系統(tǒng)級(jí)聯(lián)中的蛋白酶復(fù)合。正常地,外來分子向昆蟲的該基本免疫系統(tǒng)的接近受到極大的限制。本發(fā)明的一個(gè)方面是提供允許增強(qiáng)PI向該天然免疫系統(tǒng)接近的條件。如上所述,本發(fā)明延伸至遺傳修飾的植物或其后代的部分,包括種子、花粉、葉、花、柱頭、莖、根、根毛、樹皮和頂端分生組織。所述部分也包括根狀莖或者其它形式的商業(yè)可利用植物部分。本發(fā)明還提供編碼所述殺病蟲害或抑病蟲害藥劑的核酸分子。這些核酸分子可以在單個(gè)構(gòu)建體中、在多個(gè)構(gòu)建體中或者可以在植物細(xì)胞基因組中位于原位。方便地,這些核酸分子形成遺傳組合物。這些核酸分子也可以成為珠子例如用于生物轟擊DNA轉(zhuǎn)移的珠子的部分。因此,本發(fā)明另一方面提供包含至少一種編碼絲氨酸蛋白酶抑制劑或其前體形式的構(gòu)建體和至少一種編碼非絲氨酸蛋白酶抑制劑的構(gòu)建體的遺傳組合物,其中所述絲氨酸蛋白酶抑制劑以前體形式包含至少3個(gè)單體,其中至少一個(gè)單體是胰蛋白酶抑制劑且至少一個(gè)其它單體抑制胰凝乳蛋白酶。一般地,核酸分子與一個(gè)或多個(gè)啟動(dòng)子可操作連接。就表達(dá)所發(fā)生在的細(xì)胞、組織或器官而言,或者就表達(dá)所發(fā)生在的發(fā)育階段而言、或者響應(yīng)于外在刺激例如生理脅迫、或病原體或金屬離子等等,啟動(dòng)子可以差異地調(diào)節(jié)編碼藥劑的核苷酸序列的表達(dá)。優(yōu)選地,啟動(dòng)子能夠在植物細(xì)胞、組織或器官中至少一段時(shí)間調(diào)節(jié)核酸分子的表達(dá),在該段時(shí)間編碼藥劑的核苷酸序列在其中表達(dá)。尤其優(yōu)選將植物可操作啟動(dòng)子用于本發(fā)明的構(gòu)建體。適宜啟動(dòng)子的實(shí)例包括pCaMV35S(Fang等,戶/a"夭141—150,1989),PGEL1(Hajdukiewicz等,/VaWM"Zo7":989-994,1994),III型幾丁質(zhì)酶(Samac和Shah,戶/ai7fCe//J:1063-1072,1991),(Keil等,扁O":1323-1330,1989),PEP羧化酶(Pathirana等,戶7fl/^/293-304,1997;MAP激酶(Schoenbeck等,#o/ec尸/a/3d/cro6e/"era",1999),MSV(Legavre等,In:VthInternationalCongressofPlantMolecularBiology,Singapore,1997),p/^(Hsu等,尸細(xì)"c〃"63-70,1999),p邁;/(Cordero等,In:GeneralMeetingoftheInternationalProgramonRiceBiotechnologyoftheRockefellerFoundation,Malacca,Malaysia1997)或者谷氨酰胺合成酶(Pujade-Renaud等,戶/a;^戶力7s/0/5/oc力e邁JJ:85—93,1997)。在本上下文中,術(shù)語"可操作連接"或者"可操作地在……的控制下"或類似術(shù)語應(yīng)理解為指在細(xì)胞、組織、器官或整林植物中核酸分子的表達(dá)處于和其在空間上連接的啟動(dòng)子序列的控制下。有大量的啟動(dòng)子可以用于實(shí)踐本發(fā)明??梢曰谄谕慕Y(jié)果來選擇啟動(dòng)子。為了在宿主生物中表達(dá),核酸可以與組成型的、組織優(yōu)先型的、誘導(dǎo)型的或其它的啟動(dòng)子組合。適宜用于植物宿主細(xì)胞中的組成型啟動(dòng)子包括例如,Rsyn7啟動(dòng)子中的核心啟動(dòng)子和W099/43838及美國專利6,072,050號(hào)中公開的其它組成型啟動(dòng)子;核心CaMV35S啟動(dòng)子(Odell爭,AW"reJ/ii810-812,1985);稻肌動(dòng)蛋白(McElroy爭,/7a/7fCe//么163-171,1990);泛素(Christensen爭,尸/s;f超脅/":619-632,1989和Christensen爭,戶/W淑脅/7^675-689,1992);pEMU(Last爭,r力eorJ/W《7:581—588,1991);MAS(Velten爭,/J:2723-2730,1984);ALS啟動(dòng)子(美國專利5,659,026號(hào)),等等。其它組成型啟動(dòng)子包括,例如,美國專利5,608,149;5,608,144;5,604,121;5,569,597;5,466,785;5,399,680;5,268,463;5,608,142;和6,177,611中討論的那些。取決于所期望的結(jié)果,可能有益的是從誘導(dǎo)型啟動(dòng)子表達(dá)基因。對于在植物中調(diào)節(jié)本發(fā)明核苷酸序列的表達(dá)而言,尤其有意義的是創(chuàng)傷誘導(dǎo)型啟動(dòng)子。此類創(chuàng)傷誘導(dǎo)型啟動(dòng)子可以對昆蟲進(jìn)食所導(dǎo)致的損害作出響應(yīng),并且包括馬鈴薯蛋白酶抑制劑(pinII)基因(RyanAnnRevPhytopath28:425-449,1990;D廳等,NatureBiotechnology14:494-498,1996);wunl和wun2,美國專利5,428,148號(hào);winl和win2(Stanford等,MolGenGenet215:200-208,1989);系統(tǒng)素(McGurl等,Science225:1570-1573,1992);WIP1(Rohmeier等,PlantMolBiol22:783-792,1993;Eckelkamp等,F(xiàn)EBSLetters323:73-76,1993);MPI基因(Corderok等,PlantJ6(2):141-150,1994);等等,并入此處作為參考。此外,病原體誘導(dǎo)型啟動(dòng)子也可以用于本發(fā)明方法和核苷酸構(gòu)建體中。此類病原體誘導(dǎo)型啟動(dòng)子包括來自致病相關(guān)蛋白質(zhì)(PR蛋白質(zhì))的那些啟動(dòng)子,其中所述致病相關(guān)蛋白質(zhì)在病原體感染后被誘導(dǎo),例如,PR蛋白質(zhì)、SAR蛋白質(zhì)、P-1,3-葡聚糖酶、幾丁質(zhì)酶等。見例如,Redolfi等,MethJPlantPathol89:245-254,1983;Uknes等,PlantCell4:645-656,1992;和VanLoonPlantMolVirol4:111-116,1985。也參見WO99/43819,并入此處作為參考。有意義的是在病原體感染位置或者鄰近位置局部表達(dá)的啟動(dòng)子。見例如,Marineau等,PlantMolBiol9:335-342,1987;Matton等,MolecularPlant-MicrobeInteractions2:325-331,1989;Somsisch等,ProcNat1AcadSciUSA83:2427-2430,1986;Somsisch等,MolGenGenet2:93-98,1988;和YangProcNatlAcadSciUSA93:14972-14977,1996。也參見Chen等,PlantJ10:955-966,1996;Zhang等,ProcNatlAcadSciUSA91:2507-2511,1994;Warner等,PlantJ3:191—201,1993;Siebertz等,PlantCel11:961-968,1989;美國專利5,750,386號(hào)(線蟲誘導(dǎo)型);以及其中引用的參考文獻(xiàn)。尤其有意義的是用于玉米PRms基因(其由病原體串珠鐮孢菌(Fusariummoni1iforme)誘導(dǎo)表達(dá))的誘導(dǎo)型啟動(dòng)子(見,例如,Cordero等,PhysiolMolPlantPath41:189-200,1992)??梢岳檬芑瘜W(xué)藥品調(diào)節(jié)的啟動(dòng)子通過施用外源化學(xué)調(diào)節(jié)劑調(diào)制植物中基因的表達(dá)。根據(jù)目的的不同,啟動(dòng)子可以是化學(xué)藥品誘導(dǎo)型啟動(dòng)子(在此該化學(xué)藥品的施用可以誘導(dǎo)基因表達(dá)),或化學(xué)藥品阻抑型啟動(dòng)子(在此該化學(xué)藥品的施用可以阻抑基因表達(dá))。化學(xué)藥品誘導(dǎo)型啟動(dòng)子是本領(lǐng)域已知的,并且包括,但不限于,玉米In2-2啟動(dòng)子(由苯磺酰胺除草劑安全劑激活)、玉米GST啟動(dòng)子(由用作芽前除草劑的疏水性親電子化合物激活)、以及煙草PR-la啟動(dòng)子(由水楊酸激活)。其它有意義的化學(xué)藥品誘導(dǎo)型啟動(dòng)子包括類固醇響應(yīng)啟動(dòng)子(見,例如,Schena等,ProcNatlAcadSciUSA88:10421-10425,1991和McNellis等,PlantJ14(2):247-257,1998中的糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)型啟動(dòng)子),以及四環(huán)素誘導(dǎo)型和四環(huán)素阻抑型啟動(dòng)子(見,例如,Gatz等,MolGenGenet227:229-237,1991,和美國專利5,814,618號(hào)及5,789,156號(hào)),并入此處作為參考。組織優(yōu)先型啟動(dòng)子可以用于使殺病蟲害蛋白質(zhì)定向在特定植物組織中增強(qiáng)表達(dá)。組織優(yōu)先型啟動(dòng)子包括Yamamoto等,PlantJ12(2):255-265,1997;Kawamata等,PlantCellPhysiol38(7):792-803,1997;Hansen等,MolGenGenet254(3):337-343,1997;Russell等,TransgenicRes6(2):157-168,1997;Rinehart等,PlantPhysiol112(3):1331-1341,1996;VanCamp等,PlantPhysiol112(2):525-535,1996;Canevascini等,PlantPhysiol112(2):513-524,1996;Yamamoto等,PlantCellPhysiol35(5):773-778,1994;LamResultsProblCel1Differ20:181-196,1994;Orozco等,PlantMolBiol23(6):1129-1138,1993;Matsuoka等,ProcNatlAcadSciUSA90(20):9586-9590,1993;和Guevara-Garcia等,PlantJ4(3):495-505,1993中討論的那些。如果必要的話,可以對此類啟動(dòng)子進(jìn)行修飾以便弱表達(dá)。葉優(yōu)先型啟動(dòng)子是本領(lǐng)域已知的。見,例如,Yamamoto等,1997見上文;Kwon等,PlantPhysiol105:357-67,1994;Yamamoto等,1994見上文;Gotor等,PlantJ3:509-18,1993;Orozco等,1993見上文和Matsuoka等,1993見上文。根優(yōu)先型或根特異性啟動(dòng)子是已知的,并且可以選自許多可自文獻(xiàn)獲得的啟動(dòng)子或者可以自各種相容性物種從頭分離。見,例如,Hire等,PlantMolBiol20(2):207-218,1992(大豆根特異性谷氨酰胺合成酶基因);Keller和BaumgartnerPlantCell3(10):1051-1061,1991(四季豆(Frenchbean)的GRP1.8基因中的根特異性控制元件);Sanger等,PlantMolBiol14(3):433-443,1990(根癌農(nóng)桿菌(Agrobacteriumtumefaciens)甘露堿合酶(MAS)基因的根特異性啟動(dòng)子);和Miao等,PlantCell3(1):11-22,1991(編碼胞質(zhì)谷氨酰胺合成酶(GS)的全長cDM克隆,其在大豆的根和根瘤中表達(dá))。也參見Bogusz等,PlantCell2(7):633-641,1990,此處描述了分離自非豆科固氮植物Parasponiaandersonii和非固氮非豆科的親緣植物山黃麻(Trematomentosa)的血紅蛋白基因的兩種根特異性啟動(dòng)子。將這些基因的啟動(dòng)子與P-葡糖醛酸酶報(bào)道基因連接,并引入非豆科植物煙草(Nicotianatabacum)和豆科植物百脈根(Lotuscorniculatus)兩者中,在兩種情況下均保存了根特異性啟動(dòng)子活性。發(fā)根農(nóng)桿菌(Agrobacteriumrhizogenes)的rolC和rolD根誘導(dǎo)基因的啟動(dòng)子也是可用的(見LimerickPlantScience79(1):69-76)。Teeri等,EMBOJ8(2):343-350,1989描述了與lacZ的基因融合,證實(shí)編碼章魚堿合酶的農(nóng)桿菌T-DNA基因在根尖表皮中尤其具有活性并且TR2,基因在完整植物中是根特異性的而在葉組織中受到創(chuàng)傷的刺激(對于和殺昆蟲或殺幼蟲基因一起使用而言這是一種尤其期望的特征組合)。與nptII(新霉素磷酸轉(zhuǎn)移酶II)融合的TRl,基因表現(xiàn)出類似的特征。其它根優(yōu)先型啟動(dòng)子包括VfEN0D-GRP3基因啟動(dòng)子(Kuster等,PlantMolBiol29(4):759-772,1995);和rolb啟動(dòng)子(Capana等,PlantMolBiol25(4):681-691,1994。也參見美國專利5,837,876;5,750,386;5,633,363;5,459,252;5,401,836;5,110,732;和5,023,179。"種子優(yōu)先型"啟動(dòng)子包括"種子特異性,,啟動(dòng)子(在種子發(fā)育過程中具有活性的那些啟動(dòng)子,例如,種子貯藏蛋白的啟動(dòng)子)以及"種子萌發(fā)"啟動(dòng)子(在種子萌發(fā)過程中具有活性的那些啟動(dòng)子)。見Thompson等,BioEssays10:108,1989,在此并入作為參考。此類種子優(yōu)先型啟動(dòng)子包括,但不限于,Ciml(細(xì)胞分裂素誘導(dǎo)的信息);cZ19Bl(玉米19kDa玉米醇溶蛋白);和milps(肌醇-l-磷酸合酶)(見美國專利6,225,529號(hào),并入此處作為參考)。y-玉米醇溶蛋白和Glob-l是胚乳特異性啟動(dòng)子。對于雙子葉植物,種子特異性啟動(dòng)子包括,但不限于,菜豆P-菜豆蛋白、napin、0-conglycinin、大豆凝集素、cruciferin等等。對于單子葉植物,種子特異性啟動(dòng)子包括,但不限于,玉米15kDa玉米醇溶蛋白、22kDa玉米醇溶蛋白、27kDa玉米醇溶蛋白、g-玉米醇溶蛋白、waxy、shrunken1、shrunken2、球蛋白1,等。也參見冊00/12733,其中公開了來自endl和end2基因的種子優(yōu)先型啟動(dòng)子;并入此處作為參考。在特定組織中具有"優(yōu)先的,,表達(dá)的啟動(dòng)子在該組織中比在至少一種其它植物組織中有更大程度的表達(dá)。一些組織優(yōu)先型啟動(dòng)子表現(xiàn)出幾乎只在該特定組織中表達(dá)。當(dāng)期望低水平表達(dá)時(shí),可以使用弱啟動(dòng)子。一般地,術(shù)語"弱啟動(dòng)子"在本文中指驅(qū)動(dòng)編碼序列以低水平表達(dá)的啟動(dòng)子。低水平表達(dá)意指大約1/1000轉(zhuǎn)錄物至大約1/100,OOO轉(zhuǎn)錄物至約1/500,OOO轉(zhuǎn)錄物的水平。備選地,術(shù)語"弱啟動(dòng)子"也被認(rèn)為包括僅在少數(shù)細(xì)胞中驅(qū)動(dòng)表達(dá)而在其它細(xì)胞中不驅(qū)動(dòng)表達(dá)從而給出總的低表達(dá)水平的啟動(dòng)子。當(dāng)啟動(dòng)子以不可接受的高水平驅(qū)動(dòng)表達(dá)時(shí),可以對該啟動(dòng)子序列的部分進(jìn)行缺失或修飾以降低表達(dá)水平。此類弱組成型啟動(dòng)子包括,例如,Rsyn7啟動(dòng)子的核心啟動(dòng)子(WO99/43838和美國專利6,072,050號(hào))、核心35SCaMV啟動(dòng)子等。其它組成型啟動(dòng)子包括,例如,?>開在美國專利號(hào)5,608,149;5,608,144;5,604,121;5,569,597;5,466,785;5,399,680;5,268,463;5,608,142;和6,177,611中的那些;并入此處作為參考。本發(fā)明構(gòu)建體優(yōu)選含有用于實(shí)現(xiàn)有效轉(zhuǎn)錄的其它調(diào)節(jié)元件,例如,轉(zhuǎn)錄終止(或終止子)序列。術(shù)語"終止子"指位于轉(zhuǎn)錄單元末尾的DNA序列,該序列提供終止轉(zhuǎn)錄的信號(hào)。終止子是一般包含多腺苷酸化信號(hào)的3,-非翻譯DNA序列,其促進(jìn)多腺苷酸化序列向初級(jí)轉(zhuǎn)錄物3,末端的添加。在植物細(xì)胞中具有活性的終止子是已知的,描述在文獻(xiàn)中。它們可以自細(xì)菌、真菌、病毒、動(dòng)物和/或植物分離或者從頭合成。與啟動(dòng)子序列一樣,終止子可以是能夠在其預(yù)期用于的細(xì)胞、組織或器官中可操作的任何終止序列。尤其適用于本發(fā)明合成基因的終止子的實(shí)例包括SV4Q多腺苷酸化信號(hào)、HSVTK多腺苷酸化信號(hào)、CYC1終止子、ADH終止子、SPA終止子、根癌農(nóng)桿菌的胭脂堿合酶(NOS)基因終止子、花椰菜花葉病毒(CaMV)35S基因的終止子、來自玉米(Zeamays)的玉米醇溶蛋白基因終止子、核酮糖二磷酸羧化酶-加氧酶小亞基基因(SSU)的終止子序列、地三葉草矮化病毒(subcloverstuntvirus,SCSV)基因序列的終止子、任何rho非依賴性大腸桿菌終止子、或lacZct終止子等等。在一個(gè)特別優(yōu)選的實(shí)施方案中,終止子是可在動(dòng)物細(xì)胞、組織和器官中可操作的SV40多腺苷酸化信號(hào)或者HSVTK多腺苷酸化信號(hào)、在植物細(xì)胞、組織或器官中具有活性的章魚堿合酶(OCS)或胭脂堿合酶(NOS)終止子、或者在原核細(xì)胞中具有活性的lacZct終止子。本領(lǐng)域技術(shù)人員將意識(shí)到可以適用于實(shí)施本發(fā)明的其它終止子序列。這些序列可以容易地使用而無需任何過度的實(shí)驗(yàn)。將構(gòu)建體引入(即,轉(zhuǎn)染或轉(zhuǎn)化)細(xì)胞的手段是本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的。以上描述的構(gòu)建體能夠進(jìn)一步例如通過包括編碼可檢測標(biāo)記酶或其功能類似物或衍生物的標(biāo)記核苷酸序列而修飾,以便利于在表達(dá)本發(fā)明合成基因的細(xì)胞、組織或器官中檢測該基因。根據(jù)此實(shí)施方案,標(biāo)記核苷酸序列可以以可翻譯形式存在并且表達(dá)。此外,可以包括轉(zhuǎn)運(yùn)序列以便使一種或多種藥劑定向于特定的植物細(xì)胞器。本領(lǐng)域技術(shù)人員將明了如何制備本文所述的構(gòu)建體以及為了在特定細(xì)胞或細(xì)胞類型中在期望的條件下獲得其表達(dá)(當(dāng)期望如此時(shí))所需的條件。尤其是,本領(lǐng)域技術(shù)人員將知曉實(shí)施本發(fā)明所需的遺傳操作可能要求在原核細(xì)胞例如大腸桿菌細(xì)胞或者植物細(xì)胞或者動(dòng)物細(xì)胞中擴(kuò)增本文所述的遺傳構(gòu)建體或其衍生物。可以將本發(fā)明構(gòu)建體不加修飾地以線性DNA形式,任選地包含在適宜載體如細(xì)胞、病毒?;蛑|(zhì)體等中,引入適宜的細(xì)胞、組織或器官。為了制備遺傳構(gòu)建體,可以將核酸插入適宜的載體或者附加體分子,例如噬菌體載體、病毒載體或質(zhì)粒、粘?;蛉斯と旧w載體,其中所述載體或附加體分子能在其隨后引入的宿主細(xì)胞、組織或器官中維持和/或復(fù)制和/或表達(dá)。因此,本發(fā)明另一方面提供遺傳構(gòu)建體,該構(gòu)建體至少包含編碼本文所述的一種或兩種殺病蟲害或抑病蟲害藥劑的遺傳元件以及一個(gè)或多個(gè)復(fù)制起點(diǎn)和/或選擇標(biāo)記基因序列。通常,適用于細(xì)菌中的復(fù)制起點(diǎn)或選擇標(biāo)記基因與遺傳構(gòu)建體中所包含的旨在在植物細(xì)胞中表達(dá)或者轉(zhuǎn)移至植物細(xì)胞中、或者整合至植物細(xì)胞基因組中的遺傳序列物理分開。本文中,術(shù)語"選擇標(biāo)記基因"包括向表達(dá)它的細(xì)胞賦予表型以利于鑒定和/或選擇被本發(fā)明遺傳構(gòu)建體或其衍生物轉(zhuǎn)染或轉(zhuǎn)化的細(xì)胞的任何基因。本文中考慮的適宜選擇標(biāo)記基因包括氨芐青霉素抗性基因(AfflpO、四環(huán)素抗性基因(Tc0、細(xì)菌卡那霉素抗性基因(KarO、zeocin抗性基因(Zeocin是博來霉素家族的藥物,是InVitrogen公司的商標(biāo))、賦予對抗生素aureobasidinA的抗性的^W/-C基因、膦絲菌素抗性基因、新霉素磷酸轉(zhuǎn)移酶基因(/7;7"I)、潮霉素抗性基因、13-葡糖醛酸酶(GUS)基因、氯霉素乙酰轉(zhuǎn)移酶(CAT)基因、綠色熒光蛋白編碼基因或者螢光素酶基因等等。優(yōu)選地,選擇標(biāo)記基因是nptll基因或者Kanr基因或者綠色熒光蛋白(GFP)編碼基因。本領(lǐng)域技術(shù)人員將意識(shí)到可以用于實(shí)施本發(fā)明的其它選擇標(biāo)記基因,本發(fā)明不受到該選擇標(biāo)記基因的性質(zhì)的限制。本發(fā)明延伸至基本如本文所述的所有遺傳構(gòu)建體,其包括旨在用于使所述遺傳構(gòu)建體在原核生物或真核生物中得以維持和/或復(fù)制和/或使所述遺傳構(gòu)建體或其部分整合至真核細(xì)胞或生物體的基因組中的其它遺傳序列??梢允褂脴?biāo)準(zhǔn)方法將構(gòu)建體引入細(xì)胞、組織或器官,例如脂質(zhì)體介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染或轉(zhuǎn)化、用減毒的病毒?;蚣?xì)菌細(xì)胞進(jìn)行的細(xì)胞轉(zhuǎn)化、細(xì)胞接合、本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的轉(zhuǎn)化或轉(zhuǎn)染方法。用于將重組DNA引入植物組織或細(xì)胞的其它手段包括,但不限于,使用CaCl2的轉(zhuǎn)化及其變異方案、原生質(zhì)體對DNA的直接DNA攝取、PEG介導(dǎo)的原生質(zhì)體攝取、微粒轟擊、電穿孔、DNA顯微注射、對組織外植體或細(xì)胞的微粒轟擊、核酸對組織的真空滲入、或者對于植物而言,T-DNA介導(dǎo)的自農(nóng)桿菌至植物組織的轉(zhuǎn)移。對于細(xì)胞的微粒轟擊,微粒被推入細(xì)胞中以產(chǎn)生轉(zhuǎn)化的細(xì)胞。任何適宜的轟擊細(xì)胞轉(zhuǎn)化方法學(xué)和裝置均可以用于實(shí)施本發(fā)明。示例性的裝置和方法公開在Stomp等(美國專利5,122,466號(hào))和Sanford及Wolf(美國專利4,945,050號(hào))中。當(dāng)使用轟擊轉(zhuǎn)化法時(shí),遺傳構(gòu)建體可以合并能在待轉(zhuǎn)化的細(xì)胞中復(fù)制的質(zhì)粒。適用于此系統(tǒng)的示例性微粒包括1至5jim金球。DNA構(gòu)建體可以通過任何適宜的技術(shù),例如通過沉淀,沉積在該;敞粒上。本發(fā)明方法涉及將多肽或多核苷酸引入植物。"引入"旨在指以該多核苷酸或多肽。本發(fā)明方法并不依賴于用于將多核苷酸或多肽引入植物的特定方法,只要該多核普酸或多肽可以進(jìn)入該植物的至少一個(gè)細(xì)胞的內(nèi)部即可。用于將多核苷酸或多肽引入植物中的方法是本領(lǐng)域已知的,包括,但不限于,穩(wěn)定轉(zhuǎn)化法、瞬時(shí)轉(zhuǎn)化法和病毒介導(dǎo)的方法。"穩(wěn)定轉(zhuǎn)化"旨在指引入植物的核苷酸構(gòu)建體整合至植物基因組中并能被該植物的后代遺傳。"瞬時(shí)轉(zhuǎn)化"旨在指多核苷酸被引入植物中但是不整合在植物基因組中或者多肽被引入植物中。轉(zhuǎn)化方案以及用于將核苷酸序列引入植物的方案可以根據(jù)作為轉(zhuǎn)化目標(biāo)的植物或植物細(xì)胞的類型,即,單子葉植物或雙子葉植物而變。微注射(Crossway等,Biotechniques4:320-334,1986),電穿孔(Riggs等,ProcNatlAcadSciUSA83:5602-5606,1986),農(nóng)桿菌介導(dǎo)的轉(zhuǎn)化(美國專利號(hào)5,563,055和5,981,840),直接基因轉(zhuǎn)移(Paszkowski等,EMBOJ3:2717-2722,1984),和彈道粒子加速(見,例如,美國專利號(hào)4,945,050;5,879,918;5,886,244;和5,932,782;Tomes等,PlantCell,Tissue,andOrganCulture:FundamentalMethods,1995;以及McCabe等,Biotechnology6:923-926,1988);和Lecl轉(zhuǎn)化(W000/28058)。對于馬鈴薯的轉(zhuǎn)化,參見Tu等,PlantMolecularBiology37:829-838,1998和Chong等,TransgenicResearch9:71-78,2000。其它轉(zhuǎn)化法可以參見Weissinger等,AnnRevGenet22:421-477,1988;Sanford等,ParticulateScienceandTechnology5:27-37,1987(洋蔥);Christou等,PlantPhysiol87:671-674,1988(大豆);McCabe等,Bio/Technology6:923-926,1988(大豆);Finer和McMullenInVitroCellDevBiol27P:175-182,1991(大豆);Singh等,TheorApplGenet96:319-324,1998(大豆);Datta等,Biotechnology8:736-740,1990(稻);Klein等,ProcNatlAcadSciUSA85:4305-4309,1988(玉米);Klein等,Biotechnology6:559-563,1988(玉米);美國專利號(hào)5,240,855;5,322,783和5,324,646;Klein等,PlantPhysiol91:440-444,1988(玉米);Fromm等,Biotechnology8:833-839,1990(玉米);Hooykaas-VanSlogteren等,Nature(Umdon)311:763-764,1984;美國專利號(hào)5,736,369(谷類植物);Bytebier等,ProcNatlAcadSciUSA84:5345-5349,1987(百合科(Li1iaceae));DeWet等,TheExperimentalManipulationofOvuleTissues,197-209,1985(花粉);Kaeppler等,PlantCel1Reports9:415-418,1990和Kaeppler等,TheorApplGenet84:560-566,1992(頸須介導(dǎo)的轉(zhuǎn)化(whisker-mediatedtransformation));D'Halluin等,PlantCell4:1495-1505,1992(電穿孔);Li等,PlantCellReports12:250-255,1993和Christou及FordA醒lsofBotany75:407-413,1995(稻);Osjoda等,NatureBiotechnology14:745-750,1996(玉米,通過根癌農(nóng)桿菌);所有這些文獻(xiàn)均并入此處作為參考。在本發(fā)明再一實(shí)施方案中,本文所述遺傳構(gòu)建體可以適應(yīng)性修改以便整合至表達(dá)其的細(xì)胞的基因組中。本領(lǐng)域技術(shù)人員將明了,為了實(shí)現(xiàn)遺傳序列或遺傳構(gòu)建體在宿主細(xì)胞基因組中的整合,可能需要某些額外的遺傳序列。就植物而言,一般需要來自根癌農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒的T-DNA的左和右邊界序列。本發(fā)明還延伸至包含本發(fā)明構(gòu)建體或其部分的分離的細(xì)胞、組織或器官。本發(fā)明還延伸至由所述細(xì)胞、組織和器官來源的再生的組織、器官和整個(gè)生物以及它們的無性繁殖體和后代以及種子和其它繁殖材料。例如,植物可以從轉(zhuǎn)化的植物細(xì)胞或組織或器官在含有激素的培養(yǎng)基上再生,并且再生的植物可以采取各種形式,例如轉(zhuǎn)化的細(xì)胞和未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞的嵌合體;克隆的轉(zhuǎn)化體(例如,所有的細(xì)胞均被轉(zhuǎn)化以含有表達(dá)盒);轉(zhuǎn)化的和未轉(zhuǎn)化的組織的嫁接物(例如,柑橘物種中嫁接至未轉(zhuǎn)化的接穗上的轉(zhuǎn)化的根砧木)。轉(zhuǎn)化的植物可以通過各種方式,例如,通過克隆繁殖或靜電的育種技術(shù)進(jìn)行繁殖。例如,第一代(或Tl)轉(zhuǎn)化的植物可以自交以產(chǎn)生純合的第二代(或T2)轉(zhuǎn)化植物,該T2植物可以通過經(jīng)典的育種技術(shù)進(jìn)一步繁殖。本發(fā)明考慮可以根據(jù)實(shí)際目的構(gòu)建密碼子使用不同但是編碼具有基本上相同的殺病蟲害或抑病蟲害活性的相同或相似蛋白的任何其它DNA序列。在一些原核和真核表達(dá)系統(tǒng)中已經(jīng)描述過將密碼子使用改變成宿主細(xì)胞的密碼子使用對于外源宿主中的基因表達(dá)是期望的(Bennetzen&Hall,JBiolChem257:3026,1982;Itakura,Science198:1056-1063,1977)。密碼子使用表可以從文獻(xiàn)(Wada等,NuclAcidsRes18:2367-1411,1990;Murray等,NucleicAcidsResearch17:477-498,1989)以及主要的DNA序列數(shù)據(jù)庫中獲得。因此,可以構(gòu)建合成的DNA序列以產(chǎn)生相同或基本上相同的蛋白質(zhì)。明顯地,可以一次設(shè)計(jì)本發(fā)明藥劑蛋白的氨基酸序列的幾種DNA序列。這些其它的DNA序列包括已經(jīng)經(jīng)過改變以造成基因中的某些位點(diǎn)失活的合成的或半合成的DNA序列,其中所述改變可以例如通過如下方式實(shí)現(xiàn)選擇性地失活天然序列中存在的某些隱蔽的調(diào)節(jié)性元件或加工元件、或頁者將全部的密碼子使用適應(yīng)性修改為更相關(guān)的宿主生物的密碼子使用,優(yōu)選地期望在其中實(shí)現(xiàn)表達(dá)的宿主生物的密碼子使用。也可以根據(jù)EP0385962,EP0618967或EP0682115中所述的方法制備合成的DNA序列??梢猿R?guī)地通過PCR介導(dǎo)的誘變(Ho等,Gene77:51-59,1989;Whiteetal,TrendsinGenet5:185-189,1989)對DNA序列進(jìn)行小的修飾例如上述的那些??梢酝ㄟ^自動(dòng)DNA合成以及所得DNA片段的連接,制備新的合成或半合成的基因。為了防止或延遲病蟲害出現(xiàn)抗性,優(yōu)選在相同植物宿主(優(yōu)選轉(zhuǎn)基因植物)中還表達(dá)具有不同作用模式并且一旦在轉(zhuǎn)基因宿主(優(yōu)選植物)中產(chǎn)生后對第一藥劑(例如,絲氨酸蛋白酶抑制劑)所靶向的同一病蟲害具有高度毒性的其它蛋白質(zhì)或蛋白質(zhì)復(fù)合物。適宜與絲氨酸蛋白酶抑制劑聯(lián)合的候選物包括與PCT^HfWO96/10083的VIP2Aa或VIP2Ab蛋白聯(lián)合的成熟VIPUa蛋白(如果這些VIP蛋白具有與所述絲氨酸蛋白酶抑制劑不同的作用模式的話);Photorhabdus或Xenorhabdus屬的玉米根蟲毒素,例如,PhotorhabdusluminescensW-14的殺昆蟲蛋白(Guo等,JBiolChem274:9836-9842,1999);W000/26378的CryET70蛋白;WO97/40162中描述的Bt菌林PS80JJ1,PS149B1和PS167H2產(chǎn)生的殺昆蟲蛋白,尤其是Bt菌林PS149B1的約14kD和大約44kD蛋白;美國專利6,023,013號(hào)的Cry3Bb蛋白;蛋白酶抑制劑例如大豆的N2和Rl半胱氨酸蛋白酶抑制劑(Zhao等,PlantPhysiol111:1299-1306,1996)或者oryzastatine例如稻半胱氨酸蛋白酶抑制劑(Genbank登錄S49967)、玉米半胱氨酸蛋白酶抑制劑(Genbank登錄D38130,D10622,D63342)例如Irie等,PlantMolBiol30:149-157,1996描述的在植物中表達(dá)的玉米半胱氨酸蛋白酶抑制劑)。在此還包括上述任何蛋白質(zhì)的所有等價(jià)物和變體,例如保留殺昆蟲活性的截短的蛋白質(zhì)??梢詫⒈景l(fā)明編碼絲氨酸蛋白酶抑制劑的基因的DNA連接在適宜表達(dá)栽體中并轉(zhuǎn)化大腸桿菌,然后可以使用抗蛋白酶抑制劑的單克隆或多克隆抗體通過常規(guī)菌落免疫探測法(French等,AnalBiochem156:417-423,1986)基于毒素的表達(dá)篩選克隆。此外,該DNA還可以連接在適宜的Bt穿梭載體(Lereclus等,Bio/Technology10:418,1992)中,并轉(zhuǎn)化無晶體(crystalminus)型Bt突變體。然后基于ISP蛋白的產(chǎn)生篩選克隆(通過SDS-PAGE、Westen印跡和/或昆蟲分析試驗(yàn))。本發(fā)明編碼基因可以以常規(guī)方式(Maxam和GilbertMethodsinEnzymol65:499-560,1980;SangerProcNatlAcadSciUSA74:5463-5467,1977)測序以獲得DNA序列。序列比較顯示這些基因與現(xiàn)有技術(shù)中描述的編碼在芽孢桿菌或其它細(xì)菌物種的營養(yǎng)生長期分泌的蛋白質(zhì)的基因以及編碼對鞘翅目昆蟲具有活性的蘇云金芽孢桿菌晶體蛋白的基因(Crickmore等,MicrobiologyandMolecularBiologyReviews62:807-813,1998;W098/44137,W094/21795,W096/10083,W000/09697,WO9957282,和WO9746105)不同。也可以以常規(guī)方式,使用這些基因轉(zhuǎn)化的微生物,或者優(yōu)選地其相應(yīng)的蛋白質(zhì)或其殺病蟲害或抑病蟲害有效部分作為活性成分,與適宜的栽體、稀釋劑、乳化劑和/或分散劑(參見例如Bernhard和Utz,AnEnvironmentalBiopesticide:TheoryandPractice255-267,1993)一起,配制本發(fā)明的殺病蟲害或抑病蟲害組合物。該殺病蟲害或抑病蟲害組合物可以配制成可濕性粉劑、丸劑、顆粒劑或粉劑(dust)或者使用水性或非水性溶劑配制成液體制劑如泡沫、凝膠、懸浮液、濃縮液等??梢杂糜谠诘鞍踪|(zhì)施用給昆蟲前將蛋白質(zhì)包封在穩(wěn)定環(huán)境中的已知微生物包括假單胞菌屬(Pseudomonas)或其它細(xì)菌的細(xì)胞。本發(fā)明還包括以聯(lián)合制劑形式包含本文所述藥劑以便同時(shí)、分開或相繼使用以對玉米植物形成對抗玉米根蟲的保護(hù)作用的產(chǎn)品,特別地該產(chǎn)品是殺昆蟲組合物或轉(zhuǎn)基因玉米植物。根據(jù)本發(fā)明控制病蟲害的方法可以包括向待保護(hù)的地點(diǎn)(區(qū)域)施用(例如,噴霧)殺病蟲害或抑病蟲害有效量的本發(fā)明藥劑或者本發(fā)明基因轉(zhuǎn)化的宿主細(xì)胞。待保護(hù)的地點(diǎn)可以包括,例如,昆蟲病蟲害的棲息地或者正在種植植物的地方或者待要種植植物的區(qū)域。為了獲得本發(fā)明藥劑,可以將表達(dá)所述藥劑的重組宿主的細(xì)胞以常規(guī)方式培養(yǎng)在適宜的培養(yǎng)基上,然后可以使用常規(guī)手段從該培養(yǎng)基獲得該蛋白質(zhì)。所述藥劑之后可以通過標(biāo)準(zhǔn)技術(shù),例如層析、提取或電泳等進(jìn)行分離和純化。然后可以通過蛋白酶例如半胱氨酸或絲氨酸蛋白酶消化該蛋白質(zhì),獲得抗蛋白酶的毒素形式。盡管本發(fā)明不依賴于特定的用于增加植物對植物病蟲害的抗性的生物機(jī)制,但是本發(fā)明核苷酸序列在植物中的表達(dá)可以導(dǎo)致本發(fā)明殺病蟲害或抑病蟲害蛋白的產(chǎn)生并導(dǎo)致植物對植物病蟲害的抗性增加。本發(fā)明植物可以農(nóng)業(yè)應(yīng)用于影響植物病蟲害的方法中。本發(fā)明的某些實(shí)施方案提供轉(zhuǎn)化的作物植物,例如棉花植物,該植物可以用于影響該植物的昆蟲病蟲害的方法中。"對象植物或植物細(xì)胞"是就目的基因而言已經(jīng)實(shí)現(xiàn)遺傳改變例如轉(zhuǎn)化的植物或植物細(xì)胞,或者是來自經(jīng)過如此改變且包含該改變的植物或植物細(xì)胞的后代植物或植物細(xì)胞。"對照"或"對照植物"或"對照植物細(xì)胞,,為測量對象植物或植物細(xì)胞的表型改變提供參考點(diǎn)。對照植物或植物細(xì)胞可以包括,例如(a)野生型植物或細(xì)胞,即,與用于實(shí)施導(dǎo)致對象植物或細(xì)胞的遺傳改變的起始材料具有相同基因型;(b)與起始材料具有相同基因型但是由無效構(gòu)建體(即,對目的性狀沒有已知效應(yīng)的構(gòu)建體,例如,包含標(biāo)記基因的構(gòu)建體)轉(zhuǎn)化的植物或植物細(xì)胞;(c)是對象植物或植物細(xì)胞的后代中的未轉(zhuǎn)化分離子的植物或植物細(xì)胞;(d)遺傳上與對象植物或植物細(xì)胞相同但是未接觸過將誘導(dǎo)目的基因表達(dá)的條件或刺激的植物或植物細(xì)胞;或者(e)處于目的基因不表達(dá)的條件下的對象植物或植物細(xì)胞。如上所述,本領(lǐng)域技術(shù)人員將容易地認(rèn)識(shí)到,分子生物學(xué)領(lǐng)域的進(jìn)展,例如定點(diǎn)誘變和隨機(jī)誘變、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)方法學(xué)及蛋白質(zhì)工程技術(shù),將提供大量的適用于改變或工程化改造具有農(nóng)業(yè)意義的蛋白質(zhì)的氨基酸序列以及作為其基礎(chǔ)的遺傳序列的工具和操作方案。因此,本發(fā)明Cry9家族蛋白可以通過各種方式進(jìn)行改變,包括氨基酸替代、缺失、截短和插入。此類操作的方法是本領(lǐng)域一般已知的。例如,可以通過在合成的核酸(例如,DNA分子)中引入突變來制備殺病蟲害或抑病蟲害蛋白質(zhì)的氨基酸序列變體。用于實(shí)施誘變和核酸改變的方法是本領(lǐng)域熟知的。例如,可以使用寡核苷酸介導(dǎo)的定點(diǎn)誘變技術(shù)引入經(jīng)過設(shè)計(jì)的變化。見,例如,KunkelProcNatlAcadSciUSA82:488-492,1985;Kunkel等,MethodsinEnzymol154:367-382,1987;美國專利4,873,192號(hào);Walker和Gaastra,TechniquesinMolecularBiology1983,以及其中引用的參考文獻(xiàn)??梢詫Ρ景l(fā)明誘變后的Cry9家族核普酸序列進(jìn)行修飾以便改變在所編碼的多肽的一級(jí)序列中存在的大約1、2、3、4、5、6、8、10、12或更多個(gè)氨基酸。備選地,可以引入甚至更多的不同于天然序列的1%或2%、或大約3°/。、4%、5%、6°/。、7%、8%、9%、10%、11%、12%、或甚至大約13%、14%、15°/。、16%、17%、18%、19%、或20%、21%、22%、23%、24%、or25%、30%、35%或40%或更多的密碼子發(fā)生改變或者修飾。以相同的方式,該編碼的蛋白質(zhì)可以相對于相應(yīng)的野生型蛋白質(zhì)有至少大約1°/?;?%、或大約3%、4%、5%、6%、7%、8%、9%、10%、11%、12°/。、或甚至大約13%、14%、15%、16%、17°/。、18%、19%、或20%、21%、22%、23%、24%、或25%、30%、35%、或40%或更多的額外密碼子。應(yīng)當(dāng)理解,本發(fā)明誘變后的Cry9家族核苷酸序列旨在包括具有殺病蟲害活性(例如,通過針對草地貪夜蛾幼蟲的拒食劑性質(zhì)而確定的改善的殺病蟲害活性)的生物學(xué)功能等價(jià)肽。這些序列可以因已知天然存在于核酸序列和由此編碼的蛋白質(zhì)中的密碼子冗余性和功能等效性而產(chǎn)生。本領(lǐng)域技術(shù)人員明了,氨基酸添加和/或替代一般是基于氨基酸側(cè)鏈取代基的相對類似性,例如它們的疏水性、電荷、大小等,而進(jìn)行的??紤]到上述各種特征的示例性氨基酸替代組是本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的,包括精氨酸和賴氨酸;谷氨酸和天冬氨酸;絲氨酸和蘇氨酸;谷氨酰胺和天冬酰胺;以及纈氨酸、亮氨酸和異亮氨酸。在某些實(shí)施方案中,本發(fā)明核苷酸序列可以與任何目的多核苷酸序列組合疊加以便產(chǎn)生具有期望表型的植物。例如,本發(fā)明多核苷酸可以與任何其它編碼殺病蟲害和/或抑病蟲害活性的多肽(例如,其它蘇云金芽孢桿菌毒素蛋白(見美國專利號(hào)5,366,892;5,747,450;5,736,514;5,723,756;5,593,881;以及Geiser等,Gene48:109,1986),pentin(見美國專利號(hào)5,981,722)等)的多核苷酸疊加。所產(chǎn)生的組合也可以包括多拷貝的任何一種目的多核苷酸。本發(fā)明多核苷酸也可以與任何其它基因或基因組合疊加以產(chǎn)生具有各種期望性狀組合的植物,其中所述期望的性狀組合包括,但不限于,對動(dòng)物飼料而言期望的性狀,例如高油基因(例如,美國專利號(hào)6,232,529);平衡的氨基酸(例如,hordothionins(美國專利號(hào)5,990,389;5,885,801;5,885,802;和5,703,049);大麥高賴氨酸(Williamson等,EurJBiochem165:99-106,1987;和W098/20122)以及高曱硫氨酸蛋白質(zhì)(Pedersen等,JBiolChem261:6279,1986;Kirihara等,Gene71:359,1988;和Musumura等,PlantMolBiol12:123,1989);增加的可消化性(例如,修飾的貯藏蛋白(2001年11月7日提交的美國申請系列10/053,410號(hào));和硫氧還蛋白(2001年12月3日提交的美國申請系列10/005,429號(hào))),這些文獻(xiàn)的公開并入此處作為參考。本發(fā)明多核苷酸也可以與如下疊加期望的疾病或除草劑抗性性狀(例如,串珠鐮孢菌毒素脫毒基因(美國專利號(hào)5,792,931);無毒性和疾病抗性基因(Jones等,Science266:789,1994;Martin等,Science262:1432,1993;和Mindrinos等,Cell78:1089,1994);導(dǎo)致除草劑抗性的乙酰乳酸合酶(ALS)突變體例如S4和/或Hra突變體;谷氨酰胺合酶抑制劑,例如膦絲菌素或basta(例如,bar基因);和草甘膦(glyphosate)抗性(美國申請系列號(hào)10/004,357;和10/427,692中公開的EPSPS基因和GAT基因);以及對于正在加工的或加工的產(chǎn)物所期望的性狀,例如高油(例如,美國專利號(hào)6,232,529);改性油(例如,脂肪酸去飽和酶基因(美國專利號(hào)5,952,544;WO94/11516));改性淀粉(例如,ADPG焦磷酸化酶(AGPase)、淀粉合酶(SS)、淀粉分支酶(SBE)和淀粉脫分支酶(SDBE));和聚合物或生物塑料(例如,美國專利號(hào)5,602,321;P-酮基硫解酶(P-ketothiolase)、聚羥基丁酸合酶、和乙酰乙?;?CoA還原酶(Schubert等,JBacteriol170:5837-5847,1988)利于多羥基鏈烷酸酯(PHAs)的表達(dá)),這些文獻(xiàn)的公開并入此處作為參考。也可以將本發(fā)明多核苷酸與提供農(nóng)藝性狀例如雄性不育(例如,見美國專利號(hào)5,583,210)、莖桿強(qiáng)度、開花時(shí)間、或轉(zhuǎn)化技術(shù)性狀例如細(xì)胞周期調(diào)節(jié)或基因靶向(例如WO99/61619;W000/17364;W099/25821)的多核苷酸聯(lián)合,這些文獻(xiàn)的公開并入此處作為參考。這些疊加的組合可以通過任何方法產(chǎn)生,包括但不限于通過任何常規(guī)或TopCross方法學(xué)的雜交育種植物,或者遺傳重組。如果通過遺傳轉(zhuǎn)化植物來疊加性狀,則目的多核苷酸序列可以在任何時(shí)間以任何順序組合。例如,包含一種或多種期望性狀的轉(zhuǎn)基因植物可以用作乾標(biāo)以通過隨后的轉(zhuǎn)化引入其它性狀。在共轉(zhuǎn)化方案中這些性狀可以使用由任何轉(zhuǎn)化盒組合提供的目的多核苷酸同時(shí)地引入。例如,如果要引入兩個(gè)序列,則這兩個(gè)序列可以包含在分開的轉(zhuǎn)化盒中(反式)或者包含在相同的轉(zhuǎn)化盒上(順式)。這些序列的表達(dá)可以由相同啟動(dòng)子或者不同啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)。在某些情況下,可能期望引入可以抑制目的多核苷酸表達(dá)的轉(zhuǎn)化盒。這可以與其它抑制盒或過表達(dá)盒的任何組合聯(lián)合以在植物中產(chǎn)生期望的性狀組合。還可以認(rèn)識(shí)到,多核苷酸序列可以使用定點(diǎn)重組系統(tǒng)在期望的基因組位置實(shí)現(xiàn)疊加。見,例如,W099/25821,W099/25854,W099/25840,W099/25855,和W099/25853,所有文獻(xiàn)并入此處作為參考。本發(fā)明的組合物可以以各種方式用于保護(hù)植物、種子和植物產(chǎn)物。例如,可以在涉及通過選自噴霧、撒粉、播撒或包被種子的方法將有效量的殺病蟲害或抑病蟲害組合物放置在病蟲害的環(huán)境中的方法中使用本發(fā)明的組合物。在植物繁殖材料(杲實(shí)、塊莖、球莖、谷粒、種子),但尤其是種子,作為商品出售之前,慣常使用保護(hù)劑包衣(其包含除草劑、殺昆蟲劑、殺真菌劑、殺細(xì)菌劑、殺線蟲劑、軟體動(dòng)物殺滅劑、或這些制劑中幾種的混合物、如果期望的以及配制領(lǐng)域通常使用的其它載體、表面活性劑或促進(jìn)施用的助劑)進(jìn)行處理,以提供針對有害的細(xì)菌、真菌或動(dòng)物的保護(hù)作用。為了處理種子,可以通過用液體制劑浸透塊莖或谷?;蛘咄ㄟ^用聯(lián)合的濕或干制劑包被它們,從而將保護(hù)劑包衣應(yīng)用于種子。此外,在特殊的情況下,其它向植物進(jìn)行施用的方法也是可以的,例如,指向芽或果實(shí)的處理。包含編碼本發(fā)明藥劑的核苷酸序列的本發(fā)明植物種子可以用種子保護(hù)劑包衣進(jìn)行處理,其中所述包衣包含種子處理化合物,例如,克菌丹(Captan),萎銹靈(carboxin),福美雙(Thiram),甲霜靈(metalaxyl),甲基嘧咬磷(pirimiphos-methyl)及通常用于種子處理的其它化合物。在本發(fā)明范圍內(nèi)的一個(gè)實(shí)施方案中,包含本發(fā)明殺病蟲害組合物的種子保護(hù)劑包衣單獨(dú)地使用或者與一種慣常用于種子處理的種子保護(hù)劑包衣聯(lián)用。在本發(fā)明中,組合物包括整個(gè)生物、細(xì)胞、孢子、殺病蟲害或抑病蟲害蛋白質(zhì)、殺病蟲害或抑病蟲害成分、影響病蟲害的成分、突變體、活的或死的細(xì)胞及細(xì)胞成分,包括活的和死的細(xì)胞及細(xì)胞成分的混合物、并包括破碎的細(xì)胞和細(xì)胞成分,或者分離的殺病蟲害或抑病蟲害蛋白質(zhì)可以與可接受的栽體一起配制成殺病蟲害組合物,該組合物可以是例如懸浮劑、溶液劑、乳劑、撒布劑(dustingpowder)、可分散粒劑、可濕性粉劑、和乳油、氣霧劑、浸漬顆粒劑(impregnatedgranule)、助劑、可涂性糊劑(coatablepaste)、以及在例如聚合物物質(zhì)中的包囊劑。以上公開的組合物可以通過添加表面活性劑、惰性載體、防腐劑、濕潤劑、取食刺激劑、引誘劑、包封劑、粘合劑、乳化劑、色素、UV保護(hù)劑、緩沖液、流動(dòng)劑或肥料、微量營養(yǎng)物供體、或影響植物生長的其它制劑而獲得。一種或多種農(nóng)用化學(xué)藥品,包括但不限于,除草劑、殺昆蟲劑、殺真菌劑、殺細(xì)菌劑、殺線蟲劑、軟體動(dòng)物殺滅劑、殺螨劑、植物生長調(diào)節(jié)劑、落葉劑(harvestaid)和肥料,可以與制劑領(lǐng)域慣常使用的栽體、表面活性劑或助劑或者其它成分聯(lián)合以利于產(chǎn)品的操作和應(yīng)用于特定靶病蟲害。適宜的載體和助劑可以是固體或液體并且對應(yīng)于制劑技術(shù)中通常使用的物質(zhì),例如,天然或再生的礦物質(zhì)、溶劑、分散劑、潤濕劑、增粘劑、粘合劑、或肥料。本發(fā)明活性成分正常以組合物形式施用,并可以施用于待處理的作物區(qū)域、植物或種子。例如,本發(fā)明組合物可以在谷粒預(yù)備用于貯存或者在于糧箱或貯糧塔等中進(jìn)行貯存的期間施用于谷粒。本發(fā)明組合物可以與其它化合物同時(shí)或相繼地施用。施用本發(fā)明活性成分或者含有至少一種由本發(fā)明細(xì)菌菌林產(chǎn)生的殺病蟲害蛋白質(zhì)的本發(fā)明農(nóng)用化學(xué)組合物的方法包括,但不限于,葉的施用、種子包被、以及土壤施用。施用的次數(shù)和施用的速率取決于相應(yīng)病蟲害造成的侵?jǐn)_的強(qiáng)度。適宜的表面活性劑包括,但不限于,陰離子化合物例如羧酸鹽,例如,金屬的羧酸鹽;長鏈脂肪酸的羧酸鹽;N-?;“彼猁};磷酸與脂肪醇乙氧基化物的單或二酯或者該酯的鹽;脂肪族醇的硫酸鹽,例如十二烷基硫酸鈉、十八烷基硫酸鈉或十六烷基硫酸鈉;乙氧基化的脂肪醇的硫酸鹽;乙氧基化的烷基酚的硫酸鹽;木素磺酸鹽;石油磺酸鹽;烷基?;撬猁},例如烷基苯磺酸鹽或低級(jí)烷基萘磺酸鹽,例如,丁基萘磺酸鹽;磺化萘-甲醛縮合物的鹽;磺化苯酚-甲醛縮合物的鹽;更復(fù)雜的磺酸鹽,例如酰胺磺酸鹽類,例如油酸與N-甲基?;撬岬幕腔目s合產(chǎn)物;或二烷基磺基琥珀酸鹽,例如,琥珀酸二辛酯的磺酸鈉。非離子型表面活性劑包括脂肪酸酯、脂肪族醇、脂肪酸酰胺、或脂肪族烷基-或鏈烯基取代的苯酚與環(huán)氧乙烷的縮合產(chǎn)物,多元醇醚的脂肪酸酯,例如,失水山梨糖醇脂肪酸酯、該酯與環(huán)氧乙烷的縮合產(chǎn)物,例如聚氧乙烯山梨糖醇酐脂肪酸酯,環(huán)氧乙烷與環(huán)氧丙烷的嵌段共聚物,炔烴鄰二醇例如2,4,7,9-四乙基-5-癸炔-4,7-二醇,或乙氧基化的炔烴鄰二醇。陽離子表面活性劑的實(shí)例包括,例如,脂肪族單-、二-或多胺,例如乙酸鹽、環(huán)烷酸鹽或油酸鹽;或含氧胺,例如,聚氧乙烯烷基胺的胺氧化物;通過羧酸和二-或多胺的縮合制備的酰胺連接的胺;或季銨鹽。惰性物質(zhì)的實(shí)例包括但不限于無機(jī)礦物質(zhì)例如高嶺土、葉硅酸鹽類(phyllosilicates)、碳酸鹽類、硫酸鹽類、磷酸鹽類,或植物材料例如軟木、玉米棒子粉、花生殼、稻殼和胡桃殼。本發(fā)明組合物可以以適宜的形式直接應(yīng)用或者釆取需要在使用前用適宜量的水或其它稀釋劑稀釋的最初組合物的濃縮物形式。根據(jù)特定制劑的性質(zhì),尤其是其是濃縮物還是直接使用,殺病蟲害濃度將是可變的。組合物含有1至98%固體或液體惰性載體、和0至50%或0.1至50%表面活性劑。這些組合物將以針對該商品標(biāo)示的比率施用,例如,當(dāng)以干形式施用時(shí)每英畝大約0.01lb至5.0lb以及當(dāng)以液體形式施用時(shí)每英畝大約0.01pts.至10pts.。昆蟲病蟲害可以在發(fā)育早期,例如幼蟲或其它未成熟形式時(shí)用于檢測本發(fā)明組合物的殺病蟲害或抑病蟲害活性。可以在全黑及大約20r至大約30"C和大約30%至大約70%相對濕度下飼養(yǎng)這些昆蟲。生物試驗(yàn)可以按照Czapla和LangJEconEntomol83(6):2480-2485,1990中所述進(jìn)行。飼養(yǎng)昆蟲幼蟲和實(shí)施生物試驗(yàn)的方法是本領(lǐng)域普通技術(shù)人員熟知的。本領(lǐng)域普通技術(shù)人員已知大量的生物試驗(yàn)技術(shù)。一般方法包括在封閉式容器中將實(shí)驗(yàn)化合物或生物加入食物源。殺病蟲害活性可以通過,但不限于,在飼喂和暴露適當(dāng)長時(shí)間后死亡率的變化、體重喪失、吸引、排斥及其它行為和身體的變化來測量。此處描迷的生物試驗(yàn)可以用于處于幼蟲或成蟲階段的任何進(jìn)食的昆蟲害蟲。本發(fā)明進(jìn)一步通過以下非限制性實(shí)施例進(jìn)行描述。實(shí)施例1NaPI基于在以不同濃度CrylAc包被的NaPI純合的棉葉上伺喂H.armigera幼蟲開發(fā)了生物試驗(yàn)。特別地選擇NaPI葉以便在幼蟲體重方面給出小的降低。(在以前的生物試驗(yàn)中,在無CrylAc的情況下,使用對幼蟲生長和發(fā)育給出較大影響的葉。)葉的制備使用打孔器將葉切成園盤,并通過浸沒于測試溶液中5分鐘,以CrylA溶液實(shí)施包被。使用鑷子自溶液中取出園盤,然后在塑料網(wǎng)上空氣干燥(大約30分鐘)。當(dāng)葉園盤表面上無可見水分時(shí),將園盤轉(zhuǎn)移至24孔板的孔中。所述孔含有以水潤濕的濾紙。未轉(zhuǎn)化的cvCoker葉材料用于對照實(shí)驗(yàn)中。卵的操作H.armigera卵(由DepartmentofPrimaryIndustry&FisheriesIndooroopilly,Queensland,Australia提供)被空運(yùn)至實(shí)驗(yàn)室,并孵育(根據(jù)發(fā)育階段為18-20。至棕色卵階段(孵化前)。將卵懸浮在聚丙烯酸酯(Aquakeep聚丙烯酸酯,1mg/mlH20)中,含有葉園盤的每個(gè)孔中各放一個(gè)卵。然后向各孔分別轉(zhuǎn)移單個(gè)卵??子脦Э椎腗ylar膜覆蓋,在有光(16小時(shí)光、8小時(shí)暗)的控制溫度的小室中25。C孵育。在第6天或第7天取出幼蟲并分別稱重。CrylAc溶液的制備將CrylAc晶體蛋白/孢子混合物(10mg,來自CSIRO,Canberra,澳大利亞)溶解在0.9ml50fflMNa2C03,(pH10,5)中。在相同緩沖液中制備牛胰腺的胰蛋白酶(SigmaT-8642Type8)貯存液0.75mg/ml,并將0.1ml貯存液加入晶體蛋白孢子混合物中并室溫孵育過夜。離心(14,000rpm)該溶液5分鐘,收集上清液并保存于-70匸。基于50。/。起始材料是CrylA而另外50%是最終的被活化的物質(zhì),活化的CrylA蛋白的濃度估計(jì)為2.5mg/ml。估計(jì)的分子量毒素原133kD;活化的毒素66kD。在作為濕潤劑的0.03%v/vTritonAg98中制備稀釋物。Liao爭,///7rerre6r"e戶"力o/《ft55-63描述了適宜的CrylAc分析試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)1_檢查對幼蟲質(zhì)量的影響在本實(shí)驗(yàn)中,選擇亞致死濃度的CrylAc。焦點(diǎn)是檢查對幼蟲質(zhì)量的影響。使用溫室生長的植物的第二片完全展開的葉(來自正在生長的莖尖)。實(shí)驗(yàn)持續(xù)時(shí)間為7天。結(jié)果卵的孵化率為70-100%;每次試驗(yàn)12個(gè)卵(1個(gè)卵/孔)。圖1顯示存活的幼蟲的質(zhì)量。沒有顯著的死亡??雌饋鞢rylAc和NaPI均有助于幼蟲體重隨著CrylAc濃度的增加而出現(xiàn)的降低。(對于cvCoker,于10jugCrylAc得到的結(jié)果似乎是異常的)。實(shí)驗(yàn)2-高濃度CrylAc的影響本實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)用于通過使用較高濃度的CrylAc來實(shí)現(xiàn)死亡。使用更大數(shù)量的卵。第1天,使用第三片完全展開的葉。第4天,添加第2片完全展開的葉的葉材料。實(shí)驗(yàn)持續(xù)時(shí)間為6天。結(jié)果卵的孵化率為50-83%;每次試驗(yàn)40個(gè)卵(1個(gè)卵/孔)。圖2顯示存活的幼蟲的質(zhì)量。圖3顯示死亡率。除了CrylAc濃度跨50至250jug/ml的范圍進(jìn)行增加外,本實(shí)驗(yàn)基本上與實(shí)驗(yàn)l相同。這些濃度均導(dǎo)致顯著的死亡,因此,給出的數(shù)據(jù)涉及每種CrylAc濃度下存活的原始樣品的子集。Coker或NaPI葉上飼喂的幼蟲之間的質(zhì)量差異在每個(gè)CrylAc濃度(跨50-250jug/ml的范圍)下都基本上相同。不添加CrylAc,死亡率上無顯著差異。在每一個(gè)CrylAc濃度下,應(yīng)用表達(dá)NaPI的葉獲得的死亡率都較應(yīng)用Coker對照材料獲得死亡率顯著增加。在任何這些實(shí)驗(yàn)中NaPI基因的表達(dá)都決不削弱CrylAc的作用。實(shí)驗(yàn)3-使用第三齡幼蟲進(jìn)行的生物試驗(yàn)本實(shí)驗(yàn)的目的是確定Bt毒素(CrylAc)和NaPI對第三至第四齡H.armigera幼蟲的影響。在棉葉cvCoker上飼養(yǎng)幼蟲(48只)ll天,之后轉(zhuǎn)移至含有新鮮葉園盤的新板上。將該48只幼蟲分成4個(gè)處理組,各組12只幼蟲。4種處理如下-未轉(zhuǎn)化的Coker315葉-轉(zhuǎn)基因NaPI葉-用100jLig/ffllCrylAc包被的未轉(zhuǎn)化的Coker葉-用100jug/oilCrylAc包^皮的轉(zhuǎn)基因NaPI葉使幼蟲在25。C再生長20小時(shí)。于第7、11和12天記錄幼蟲體重。實(shí)驗(yàn)細(xì)節(jié)使用兩個(gè)24孔板。每孔中各放入一個(gè)懸浮在聚丙烯酸酯(lg/L)中的H.armigera卵。最初,每孔中放置一個(gè)葉園盤。在需要時(shí)添加其它園盤。在頭11天使用于位置3、4和5的Coker葉。收獲這些葉,切成園盤并混合,之后將它們加入孔中。對于所述的處理,僅使用來自位置2或3的葉。結(jié)果本試驗(yàn)中使用的所有H.armigera卵均獲得孵化(表1)。在第11天,對幼蟲進(jìn)行稱重然后喂給測試食物。大約20個(gè)小時(shí)后(第12天),再次對幼蟲進(jìn)行稱重(表l,圖4)。表l.使用第三齡幼蟲得到的H.armigera生物試驗(yàn)結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage76</column></row><table>無卵12121212孵化的幼蟲12121212存活的幼蟲11U1212第11天的平均體重(mg)64.665.367.169.0第12天的平均體重(mg)95.291.081.474.5第11-12天的質(zhì)量增加y。47%39%21%8%C-未轉(zhuǎn)化的Coker葉,N-表達(dá)NaPI的轉(zhuǎn)基因葉喂養(yǎng)在對照Coker葉和轉(zhuǎn)基因NaPI表達(dá)葉上的幼蟲兩者在經(jīng)過20個(gè)小時(shí)所增加的平均體重方面存在小的差異。對照幼蟲的體重平均增加48。/。,而NaPI飼喂的幼蟲體重平均增加41。/。(表l,圖5)。注意,對于每個(gè)試驗(yàn)組,第11天幼蟲的平均體重稍有差別(表l),在計(jì)算中必須對此加以考慮。由于幼蟲全都被喂給相同飲食,故此差異為幼蟲的天然變異而引起的。當(dāng)給幼蟲喂食CrylAc時(shí)存在較大的體重差異。CrylAc喂食的幼蟲體重僅僅平均增加21%(表1,圖5)。最后,喂給CryUc包被的轉(zhuǎn)基因葉的幼蟲體重僅平均增加7%。有意義的是注意到這12只幼蟲中3只實(shí)際上體重降低或者體重未增加(表l,圖5)。這些結(jié)果提示,NaPI和CrylAc的聯(lián)合可以增強(qiáng)削弱幼蟲生長的作用。這些結(jié)果與來自實(shí)驗(yàn)1和2(其中新鮮賻化的幼蟲被允許在測試葉上飼喂7天)的結(jié)果相符。實(shí)施例2中腸膜的性質(zhì)當(dāng)給H.armigera幼蟲喂食含有NaPI或Bt蛋白,例如CrylAc的飲食時(shí),對腸道上皮細(xì)胞產(chǎn)生不同的作用。Bt在鱗翅目昆蟲飲食中的存在導(dǎo)致柱狀細(xì)胞膨脹以及位于上皮層底部的干細(xì)胞增殖。最終,上皮層中的細(xì)胞在接觸到Bt及相關(guān)細(xì)菌毒素時(shí)爆裂。相反地,飲食中存在NaPI將造成上皮層細(xì)胞的有限膨脹并且無爆裂。當(dāng)飲食含有Bt和NaPI兩者時(shí),上皮細(xì)胞組織出現(xiàn)廣泛且更為快速的崩解。細(xì)胞間隙擴(kuò)得更大并且物質(zhì)向血淋巴的接近得到增強(qiáng)。然后滲透至血淋巴的物質(zhì)可以與參與天然免疫應(yīng)答的蛋白酶接觸。尤其是,當(dāng)PI得以進(jìn)入血淋巴時(shí),它們可以干擾此天然免疫應(yīng)答所必需的蛋白級(jí)聯(lián)。昆蟲腸道自任一種毒素引起的損害后再生的能力被減弱。本領(lǐng)域技術(shù)人員將明了,本文描述的發(fā)明不僅僅限于那些具體描述的方案而是易于進(jìn)行改變和修飾。應(yīng)當(dāng)理解,本發(fā)明包括所有這些變體和修飾。本發(fā)明葉包括本說明書中單獨(dú)地或集合地提及或指出的所有步驟、特性、組合物和化合物,以及所述步驟或特性中的任何兩個(gè)或更多個(gè)的任何和所有組合。參考書目A醒sonCellMolLifeSci59(3):417-425,2002Bennetzen&Hall,JBiolChem257:3026,1982BernhardandUtz,AnEnvironmentalBiopesticide:TheoryandPractice255-267,1993Boguszetal,PlantCell2(7):633-641,1990BrownandRyan,Biochemistry23:3418-3422,1984Bryantetal,Biochemistry15:3418-3424,1976Bytebieretal,ProcNatlAcadSciUSA84:5345-5349,1987Ca證ascinietal,PlantPhysiol112(2):513-524,1996Capanaetal,PlantMolBiol25(4):681-691,1994Chenetal,PlantJ10:955-966,1996Chongetal,TransgenicResearch9:71-78,2000Christensenetal,PlantMolBiol12:619-632,1989Christensenetal,PlantMolBiol18:675-689,1992Christouetal,PlantPhysiol87:671-674,1988ChristouandFordA麵lsofBotany75:407-413,1995Corderoetal,In:GeneralMeetingoftheInternationalProgramonRiceBiotechnologyoftheRockefellerFoundation,Malacca,Malaysia,1997Corderoetal,PhysiolMolPlantPath41:189-200,1992Corderoketal,PlantJ6(2):141-150,1994Crickmore,etal,MicrobiologyandMolecularBiologyReviews62:807-813,1998Crosswayetal,Biotechniques4:320—334,1986CzaplaandLangJEconEntomol83(6):2480-2485,1990Dattaetal,Biotechnology8:736-740,1990DeWetetal,TheExperimentalManipulationofOvuleTissues:197-209,1985D'Halluinetal,PlantCell4:1495-1505,1992D訓(xùn)etal,NatureBiotechnology14:494-498,1996Eckelkampetal,F(xiàn)EBSLetters323:73-76,1993Fangetal,PlantCell1:141-150,1989FinerandMcMullenInVitroCellDevBiol27P:175-182,1991Frenchetal,AnalBiochem156:417-423,1986F謂metal,Biotechnology8:833-839,1990Gatzetal,MolGenGenet227:229-237,1991Geiseretal,Gene48:109,1986Gotoretal,PlantJ3:509-18,1993Grahametal,Plants169:399-405,1986GreenandRyan,Science776-777,1972Guevara-Garciaetal,PlantJ4(3):495-505,1993Guoetal,JBiolChem274:9836-9842,1999Hajdukiewiczetal,PlantMolBiol25:989-994,1994Hansenetal,MolGenGenet254(3):337-343,1997Hireetal,PlantMolBiol20(2):207-218,1992Hoetal,Gene77:51-59,1989HofteandWhiteleyMicrobialReviews53:242-255,1989Hooykaas-VanSlogterenetal,Nature(London)311:763-764,1984Hsuetal,PlantSci143:63-70,1999Irieetal,PlantMolBiol30:149-157,1996Itakura,Science198:1056-1063,1977Jonesetal,Science266:789,1994Kaeppleretal,PlantCellReports9:415-418,1990Kaeppleretal,TheorApplGenet84:560-566,1992Ka畫ataetal,PlantCellPhysiol38(7):792-803,1997Keiletal,EMBOJ8:1323-1330,1989KellerandBaumgartnerPlantCell3(10):1051-1061,1991Kiriharaetal,Gene71:359,1988Kleinetal,Biotechnology6:559-563,1988Kleinetal,PlantPhysiol91:440-444,1988Kleinetal,ProcNatlAcadSciUSA85:4305-4309,1988Kunkeletal,MethodsinEnzymol154:367-382,1987KunkelProcNatlAcadSciUSA82:488-492,1985Kuoetal,ArchBiochemBiophys230:504-510,1984Kusteretal,PlantMolBiol29(4):759-772,1995Kwonetal,PlantPhysiol105:357-67,1994LamResultsProblCellDiffer20:181-196,1994Lastetal,TheorApplGenet81:581-588,1991LeachandAoyagi(1991)Legavreetal,In:VthInternationalCongressofPlantMolecularBiology,Singapore,1997Lereclusetal,Bio/Technology10:418,1992Lietal,PlantCellReports12:250-255,1993Liaoetal,JInvertebratePathol80:55-63LimerickPlantScience79(1):69-76McCabeetal,Bio/Technology6:923-926,1988McCabeetal,Biotechnology6:923-926,1988McElroyetal,PlantCell2:163-171,1990McGurletal,Science225:1570-1573,1992McNellisetal,PlantJ14(2):247-257,1998Marineauetal,PlantMolBiol9:335-342,1987Martinetal,Science262:1432,1993Matsuokaetal,ProcNatlAcadSciUSA90(20):9586-9590,1993Mattonetal,MolecularPlant—MicrobeInteractions2:325-331,1989MaxamandGilbertMethodsinEnzymol65:499-560,1980MelvilleandRyan,ArchivesofBiochemistryandBiophysics138:700-702,1970Miaoetal,PlantCell3(1):1卜22,1991Mindrinosetal,Cell78:1089,1994Murrayetal,NucleicAcidsResearch17:477-498,1989Mus畫raetal,PlantMolBiol12:123,1989Odelletal,Nature313:810-812,1985Orozcoetal,PlantMolBiol23(6):1129-1138,1993Osjodaetal,NatureBiotechnology14:745-750,1996Paszkowskietal,EMBOJ3:2717-2722,1984Pathiranaetal,PlantJ12:293-304,1997Pearceetal,Planta175:527—531,1988Pedersenetal,JBiolChem261:6279,1986Plunkettetal,ArchBiochemBiophys213:463-472,1982Pujade-Re訓(xùn)detal,PlantPhysiolBiochem35:85-93,1997).Redolfietal,MethJPlantPathol89:245-254,1983RichardPhytochemistry16:159-169,1977Rickaueretal,PlantPhysiol9:1065-1070,1989Riggsetal,ProcNatlAcadSciUSA83:5602-5606,1986Rinehartetal,PlantPhysiol112(3):1331-1341,1996Rohmeieretal,PlantMolBiol22:783-792,1993Russelletal,TransgenicRes6(2):157-168,1997RyanAnnRevPhytopath28:425-449,1990SamacandShah,PlantCell3:1063-1072,1991Sanfordetal,ParticulateScienceandTechnology5:27-37,1987Sangeretal,PlantMolBiol14(3):433-443,1990SangerProcNatlAcadSciUSA74:5463-5467,1977Schenaetal,ProcNatlAcadSciUSA88:10421-10425,1991Schnepfetal,MicrobiolMolBiolRev62(3):775-806,1998Schoenbecketal,MolecPlant-MicrobeInteract,1999Schubertetal,JBacteriol170:5837-5847,1988Siebertzetal,PlantCell1:961-968,1989Singhetal,TheorApplGenet96:319-324,1998Somsischetal,MolGenGenet2:93-98,1988Somsischetal,ProcNatlAcadSciUSA83:2427-2430,1986Stanfordetal,MolGenGenet215:200-208,1989Teerietal,EMBOJ8(2):343-350,1989Thompsonetal,BioEssays10:108,1989Tomesetal,PlantCell,Tissue,andOrganCulture:FundamentalMethods,1995Tuetal,PlantMolecularBiology37:829-838,1998Uknesetal,PlantCell4:645-656,1992VanCampetal,PlantPhysiol112(2):525-535,1996VanLoonPlantMolVirol4:111-116,1985Veltenetal,EMBOJ3:2723-2730,1984Wadaetal,NuclAcidsRes18:2367-1411,1990WalkerandGaastra,TechniquesinMolecularBiology1983Warneretal,PlantJ3:191-201,1993Weissingeretal,AnnRevGenet22:421-477,1988Whiteetal,TrendsinGenet5:185-189,1989Williamsonetal,EurJBiochem165:99-106,1987Yamamotoetal,PlantCellPhysiol35(5):773-778,1994Yamamotoetal,PlantJ12(2):255-265,1997YangProcNatlAcadSciUSA93:14972-14977,1996Zhangetal,ProcNatlAcadSciUSA91:2507-2511,1994Zhaoetal,PlantPhysiol111:1299-1306,199權(quán)利要求1.遺傳修飾的植物或其通過自交、回交或與另一植物的雜交而產(chǎn)生的后代,所述植物包含至少兩種殺病蟲害藥劑和/或抑病蟲害藥劑,其中所述藥劑中至少一種由所述遺傳修飾或交配所產(chǎn)生,其中至少一種藥劑是來自茄科的絲氨酸蛋白酶抑制劑或其前體,其中該絲氨酸蛋白酶抑制劑的前體形式包含至少3個(gè)單體,其中至少一個(gè)單體是胰蛋白酶抑制劑并且至少一個(gè)單體是胰凝乳蛋白酶抑制劑,并且其中至少一種其它藥劑是非絲氨酸蛋白酶抑制劑,其中所述植物對病蟲害表現(xiàn)出抗性或降低的易感性。2.權(quán)利要求1的遺傳修飾的植物,其中所述絲氨酸蛋白酶抑制劑以前體形式提供。3.權(quán)利要求2的遺傳修飾的植物,其中前體包含至少4個(gè)單體。4.權(quán)利要求2的遺傳修飾的植物,其中前體包含至少5個(gè)單體。5.權(quán)利要求2的遺傳修飾的植物,其中前體包含至少6個(gè)單體。6.權(quán)利要求5的遺傳修飾的植物,其中絲氨酸蛋白酶抑制劑是來自Nicotianaalata的NaPI。7.權(quán)利要求1至6之任一項(xiàng)的遺傳修飾的植物,其中非絲氨酸蛋白酶抑制劑是內(nèi)毒素。8.權(quán)利要求7的遺傳修飾的植物,其中非絲氨酸蛋白酶抑制劑是Bt蛋白。9.權(quán)利要求7或8的遺傳修飾的植物,其中內(nèi)毒素選自Cry家族成員和VIP。10.權(quán)利要求1至6之任一項(xiàng)的遺傳修飾的植物,其中非絲氨酸蛋白酶抑制劑是防衛(wèi)素分子或其病蟲害毒性部分。11.遺傳修飾的植物或其通過自交、回交或與另一植物的雜交而產(chǎn)生的后代,所述植物包含至少兩種殺病蟲害藥劑和/或抑病蟲害藥劑,其中所述藥劑中的至少一種由所述遺傳^^飾或交配所導(dǎo)致,其中至少一種藥劑是NaPI前體或其單體或其重組物或衍生物,并且其中至少一種其它藥劑是非絲氨酸蛋白酶抑制劑,其中所述植物對病蟲害表現(xiàn)出抗性或降低的易感性。12.權(quán)利要求11的遺傳修飾植物,其中非絲氨酸蛋白酶抑制劑是內(nèi)毒素。13.權(quán)利要求12的遺傳修飾植物,其中非絲氨酸蛋白酶抑制劑是Bt蛋白。14.權(quán)利要求12或13的遺傳修飾植物,其中內(nèi)毒素選自Cry家族成員和VIP。15.權(quán)利要求ll的遺傳修飾植物,其中非絲氨酸蛋白酶抑制劑是防衛(wèi)素分子或其病蟲害毒性部分。16.遺傳修飾的植物或其通過自交、回交或與另一植物雜交而產(chǎn)生的后代,所述植物包含至少兩種殺病蟲害藥劑或抑病蟲害藥劑,其中所述藥劑中的至少一種由所述遺傳修飾或交配所導(dǎo)致,其中至少一種藥劑是來自茄科的絲氨酸蛋白酶抑制劑或其前體,其中該絲氨酸蛋白酶抑制劑的前體形式包含至少3個(gè)單體,其中至少一個(gè)單體是胰蛋白酶抑制劑且至少一個(gè)單體是胰凝乳蛋白酶抑制劑,并且其中至少一種其它藥劑是非絲氨酸蛋白酶抑制劑,其中所述植物對病蟲害表現(xiàn)出抗性或降低的易感性,只是其中至少一種其它藥劑選自Bt蛋白、Cry家族蛋白、VIP和防衛(wèi)素。17.遺傳修飾的植物或其通過自交、回交或與另一植物的雜交而產(chǎn)生的后代,所述植物包含至少兩種殺病蟲害藥劑或抑病蟲害藥劑,其中所述藥劑中的至少一種由所述遺傳修飾或交配所導(dǎo)致,其中至少一種藥劑是NaPI前體或其單體或其重組物或衍生物,并且其中至少一種其它藥劑是非絲氨酸蛋白酶抑制劑,其中所述植物對病蟲害表現(xiàn)出抗性或降低的易感性,只是其中至少一種其它藥劑選自Bt蛋白、Cry家族成員、VIP和防衛(wèi)素。18.權(quán)利要求1或11或16或17的遺傳修飾植物,其中所述植物選自玉米(Zeamays)、蕓莒屬植物(Brassicasp.)(例如,油菜(B.napus)、蕪青(B.rapa)、芥菜(B.juncea)),尤其是可用作菜籽油來源的那些蕓苔屬物種、紫花苜蓿(Medicagosativa)、稻(0ryzasativa)、黑麥(Secalecereale)、高梁(Sorghumbicolor,Sorghumvulgare)、粟(例如,珍珠粟(Pennisetumglaucum)、黍(Panicummiliaceum)、粟(foxtailmillet,Setariaitalica)、糝子(fingermillet,Eleusinecoracana)、向曰葵(Helianthusannuus)、紅花(Carthamustinctorius)、小麥(Triticumaestivum)、大豆(Glycinemax)、煙草(Nicotianatabacum)、馬鈴薯(Solariumtuberosum),花生(Arachishypogaea)、沖帛(海島沖帛(Gossypiumbarbadense)、陸地棉(Gossypiumhirsutum))、甘薯(Ipomoeabatatus)、木著(Manihotesculenta)、咖啡(Coffeaspp.)、挪子(Cocosnucifera)、cotton菠蘿(Ananascomosus)、柑橘樹(Citrusspp.)、可可(Theobromacacao)、茶(Camelliasinensis)、香蕉(Musaspp.)、鱘梨(Perseaamericana)、無花果(Ficuscasica)、番石榴(Psidiumguajava)、芒果(Mangiferaindica)、橄欖(Oleaeuropaea)、番木瓜(Caricapapaya)、腰果樹(Anacardi認(rèn)occidental)、澳大利亞堅(jiān)果(Macadamiaintegrifolia)、扁桃(Primusamygdalus)、甜菜(Betavulgaris)、甘蔗(Saccharumspp.)、燕麥、大麥、蔬菜、觀賞植物和針葉樹;蔬菜包括番癡(Lycopersiconesculentum)、萵苣(例如,Lactucasativa)、菜豆(Phaseolusvulgaris)、利馬豆(Phaseoluslimensis)、豌豆(Lathyrusspp.)、以及甜瓜屬(Cucumis)成員例如黃瓜(Csativus)、羅馬甜瓜(cantaloupe,C.cantalupensis)以及甜瓜(C.melo);觀賞植物包括杜鵑(Rhododendronspp.)、繡球(Macrophyllahydrangea)、扶桑(Hibiscusrosasanensis)、玫瑰(Rosaspp.)、郁金香(Tulipaspp.)、水仙(Narcissusspp.)、碧冬癡(Petuniahybrida)、康乃馨(Dianthuscaryophyllus)、一品紅(Euphorbiapulcherrima)和菊花;可用于實(shí)踐本發(fā)明的針葉樹包括,例如,木>如火炬木〉(Pinustaeda)、濕地;^(Pinuselliotii)、美國黃松(Pinusponderosa)、小千松(Pinuscontorta)和輻射松(Pinusradiata);花旗松(Pseudotsugamenziesii);加拿大鐵杉(Tsugacanadensis);白云杉(Piceaglauca);紅杉(Sequoiasempervirens);真正的冷杉例如太平洋銀冷杉(Abiesamabilis)和香脂冷杉(Abiesbalsamea);以及柏例如美國西部側(cè)柏(Thujaplicata)和黃扁柏(Chamaecyparisnootkatensis);本發(fā)明的植物包括作物植物(例如,棉、玉米、紫花苜蓿、向日葵、蕓苔屬植物、大豆、棉、紅花、花生、高梁、小麥、粟、煙草等),例如玉米和大豆植物;草坪草包括,但不限于早熟禾(Poaannua);多花黑麥草(Loli認(rèn)multiflor認(rèn));加拿大早熟禾(Poacompressa);紫羊茅(Festucarubra);細(xì)弱剪股穎(Agrostistenuis);匍旬苜股穎(Agrostispalustris);沙生冰草(Agropyrondesertor函);扁穗冰草(Agropyroncristatum);硬羊茅(Festucalongifolia);草地早熟禾(Poapratensis);鴨茅(Dactylisglomerata);黑麥草(Loliumperenne);紫羊茅(Festucarubra);小糠草(Agrostisalba);普通早熟禾(Poatrivialis);羊茅(Festucaovina);無芒雀麥(Bromusinermis);高羊茅(Festucaarundinacea);貓尾草(Phleumpratense);絨毛蓊股穎(Agrostiscanina);堿茅(Puccinelliadistans);藍(lán)莖冰草(Agropyronsmithii);狗牙根(Cynodonspp.);奧古斯汀草(Stenotaphrumsecundatum);結(jié)繙草(Zoysiaspp.);巴哈雀稗(Paspalumnotatum);地越草(Axonopusaffinis);百足草(Eremochloaophiuroides);東非狼尾草(Pennisetumclandesinum);海濱雀稗(Paspalumvaginat認(rèn));格蘭馬草(Boutelouagracilis);野牛草(Buchloedactyloids);垂穗草(Boutelouacurtipendula);油籽植物、豆科植物、玉米、小麥、大麥、稻、高梁、黑麥、粟、棉、大豆、紅花、向日葵、蕓苔屬植物、玉米、紫花苜蓿、棕櫚、椰子、亞麻、蓖麻、橄欖、菜豆類、豌豆類、瓜爾豆、槐豆、胡聲巴、大豆、青刀豆、豇豆、綠豆、利馬豆、蠶豆、扁豆和鷹嘴豆。19.權(quán)利要求18的遺傳修飾的植物,其中所述植物是棉、甜玉米、番茄、馬鈴薯、甜椒、馬鈴薯、向日葵、柑橘、李子、高梁、韭蔥、大豆、紫花苜蓿、菜豆、木豆、鷹嘴豆、洋薊、curcurbit、萵苣、石竹(Dianthus)、天竺葵、燈籠果、玉米、亞麻和亞麻籽、羽扇豆、蠶豆、青刀豆、花生、canola、金魚草、櫻桃、向日葵、金盞花、蠟菊(Helichrysum)、小麥、大麥、燕麥、黑小麥、胡蘿卜、洋蔥、蘭花、玫瑰和碧冬茄。20.權(quán)利要求1或11或16或17的遺傳修飾植物,其中所述植物是棉。21.權(quán)利要求1或11或16或17的遺傳修飾植物,其中植物病蟲害選自昆蟲、真菌、細(xì)菌、線蟲、蜱螨、原生動(dòng)物病原體、動(dòng)物寄生性肝吸蟲等。22.權(quán)利要求21的遺傳修飾植物,其中病蟲害是昆蟲。23.權(quán)利要求22的遺傳修飾植物,其中昆蟲選自鈴夜蛾屬、雙翅目、膜翅目(Hymenoptera)、鱗翅目、食毛目、同翅目、半翅目、直翅目、纓翅目、革翅目、等翅目、虱目、蚤目、毛翅目、鞘翅目昆蟲。24.權(quán)利要求22的遺傳修飾植物,其中病蟲害選自小蠟螟(Achoroiagrisella)、東部黑頭長翅巻蛾(Aclerisgloverana)、黑頭長翅巻蛾(Aclerisvariana)、棉褐帶巻葉蛾(Adoxophyesorana)、小地老虎(Agrotisipsilon)、Alabamaargillacea、秋星尺蠖(Alsophilapometaria)、Amyeloistransitella、地中海粉螟(Anagastakuehniella)、桃條麥蛾(Anarsialineatella)、Anisotasenatoria、拃蠶(Antheraeapernyi)、黎豆夜蛾(Anticarsiagemmatalis)、黃巻蛾屬(Archipssp.)、條巻蛾屬(Argyrotaeniasp.)、Athetismindara、家蠶(Bombyxmori)、棉潛葉蛾(Bucculatrixthurberiella)、粉斑螟(Cadracautella)、色巻蛾屬(Choristoneurasp.)、Cochyllshospes、苜蓿粉蝶(Coliaseurytheme)、米蛾(Corcyracephalonica)、Cydialatiferreanus、蘋果囊蛾(Cydiapomonella)、Datanaintegerrima、落葉松毛蟲(Dendrolimussibericus)、Desmiafeneralis、甜瓜絹野螟(Diaphaniahyalinata)、黃瓜纟胃野螟(Diaphanianitidalis)、西南玉米桿草螟(Diatraeagrandiosella)、小蔑螟(Diatraeasaccharalis)、白尺蠖蛾(Ennomossubsignaria)、Eoreumaloftini、煙草粉螟(Esphestiaelute1la)、Erannistilaria、細(xì)斑燈蛾(Estigmeneacrea)、Euliasalubricola、Eupocoelliaambiguella、女貞細(xì)巻蛾(Eupoeciliaambiguella)、黃毒蛾(Euproctischrysorrhoea)、暗緣地老虎(Euxoamessoria)、蠟螟(Galleriamellonella)、梨小食心蟲(Grapholitamolesta)、黑擬蛉蛾(Harrisinaamericana)、Helicoverpasubflexa、谷實(shí)夜蛾(Helicoverpazea)、煙芽夜蛾(Heliothisvirescens)、新墨西哥草原毛蟲(Hemileucaoliviae)、向曰葵斑螟(Homoeosomaelectellum)、美國白蛾(Hyphantiacunea)、Keiferialycopersicella、Lambdinafiscellariafiscellaria、Lambdinafiscellarialugubrosa、雪毒蛾(Leucomasalicis)、葡萄漿果小巻蛾(Lobesiabotrana)、草地螟(Loxostegesticticalis)、舞毒蛾(Lymantriadispar)、Macallathyrisalis、天幕毛蟲屬(Malacosomasp.)、甘藍(lán)燈蛾(Mamestrabrassicae)、Mamestraconfigurata、Manducaquinquemaculata、煙草天蛾(Manducasexta)、豆野螟(Marucatestulalis)、Melanchrapicta、秋尺蛾(Operophterabrumata)、古毒蛾屬(Orgyiasp.)、歐洲玉米螟(0strinianubilalis)、Paleacritavernata、Papiliocresphontes、棉紅鈴蟲(Pectinophoragossypiella)、Phryganidiacalifornica、Phyllonorycterblancardella、暗脈菜粉蝶(Pierisnapi)、油菜菜粉蝶(Pierisrapae)、苜蓿綠夜蛾(Plathypenascabra)、Platynotaflouendana、荷蘭石竹小巻蛾(Platynotastultana)、Platyptiliacarduidactyla、印度谷螟(Plodiainterpunctella)、小菜蛾(Plutellaxylostella)、Pontiaprotodice、一點(diǎn)粘蟲(Pseudaletiaunipuncta)、大豆夜蛾(Pseudoplasiaincludens)、Sabulodesaegrotata、Schizuraconcinna、麥蛾(Sitotrogacerealella)、蘋白小巻蛾(Spilontaocellana)、灰翅夜蛾屬(Spodopterasp,)、Thaurnstopoeapityocampa、幕谷蛾(Tinsolabissel1iella)、粉紋夜蛾(Trichoplusiahi)、溫室結(jié)網(wǎng)野螟(Udearubigalis)、Xylomygescuriails、和蘋果巢蛾(Ypo誦eutapadella);歐洲玉米螟(Ostrinianubilalis,Europeancornborer);小地老虎(Agrotisipsilon,blackcutworm);谷實(shí)夜蛾(Helicoverpazeae,cornearworm);草地貪夜蛾(Spodopterafrugiperda,fallarmyworm);西南玉米桿草螟(Diatraeagrandiosella,southwesterncornborer);南美玉米苗斑螟(Elasmopalpuslignosellus,lessercornstalkborer);小蔗螟(Diatraeasaccharalis,surgarcaneborer);西部玉米才艮蟲(westerncornrootworm),例如,玉米才艮螢葉甲(Diabroticavirgiferavirgifera);北部玉米根蟲(northerncornrootworm),例如,Diabroticalongicornisbarberi;南部玉米根蟲(southerncornrootworm),例如,黃瓜十一星葉甲(Diabroticaundecimpunctatahowardi);梳爪叩甲屬(Melanotusspp.),金針蟲(wireworms));圓頭犀金龜(Cyclocephalaborealis,northernmaskedchafer(whitegrub));圓頭無斑犀金龜(Cyclocephalaimmaculata,southernmaskedchafer(whitegrub));曰本麗金龜(Popilliajaponica,Japanesebeetle);玉米跳甲(Chaetocnemapulicaria,cornfleabeetle);玉米象蟲(Sphenophorusmaidis,maizebillbug);玉米纟益管奸(Rhopalosiphummaidis,cornleafaphid);玉米根對(Anuraphismaidiradicis,cornrootaphid);麥長蝽(Blissusleucopterusleucopterus,chinchbug);紅腿鰉(Melanoplusfemurrubr認(rèn),redleggedgrasshopper);遷徙蚱樣(Melanoplussanguinipes,migratorygrasshopper);灰地種錄(Hylemyaplatura,seedcornmaggot);玉米斑潛螞(Agromyzaparvicornis,cornblotchleafminer);美洲錐尾薊馬(Anaphothripsobscrurus,grassthrips);竊葉奴(Solenopsismilesta,thiefant);二斑葉端(Tetranychusurticae,twospottedspidermite);高梁高粱螟(Chilopartellus,sorghumborer);草地貪夜蛾(Spodopterafrugiperda,fallarmyworm);谷實(shí)夜蛾(Helicoverpazea,cornearworm);南美玉米苗斑螟(Elasmopalpuslig謂ellus,lesercornstalkborer);粒膚地老虎(Feltiasubterranea,granulatecutworm);橋螬(Phyllophagacrinita,whitegrub);(Eleodes),單葉叩甲屬(Conoderus),和Aeolusspp.,金針蟲);黑角負(fù)泥蟲(Oulemamelanopus,cerealleafbeetle);玉米跳曱(Chaetocne魁pulicaria,cornfleabeetle);玉米象蟲(Sphenophorusmaidis,maizebillbug);玉米組管椅(Rhopalosiphummaidis,cornleafaphid);蔑黃偽毛辨(Siphaflava,yellowsugarcaneaphid);麥長棒(chinchbug),例如,Blissusleucopterusleucopterus5高梁癭蚊(Contariniasorghicola,sorghum邁idge);朱砂葉螨(Tetranychuscinnabarinuscarminespidermite);二斑葉螨(Tetranychusurticae,two-spottedspidermite);小麥一點(diǎn)粘蟲(Pseudaletiaunipunctata,armyworm);草地貪夜蛾(Spodopterafrugiperda,fallarmyworm);南美玉米苗斑螟(Elasmopalpuslignosellus,lessercornstalkborer);西部灰地老虎(Agrotisorthogonia,palewesterncutworm);南美玉米苗斑螟(Elasmopalpuslignosellus,lessercornstalkborer);黑角負(fù)泥蟲(Oulemamelanopus,cerealleafbeetle);三葉草葉象(Hyperapunctata,cloverleafweevi1);南部玉米根蟲(southerncornrootworm),例如,黃瓜H—星葉曱(Diabroticaundecimpunctatahowardi);俄國麥奸(Russianwheataphid);麥二叉辨(Schizaphisgraminum,greenbug);麥長管辨(Macrosiphumavenae,Englishgrainaphid);紅腿鰉(Melanoplusfemurrubrum,redleggedgrasshopper);異黑蟲皇(Melanoplusdifferentialis,differentialgrasshopper);遷徙蚱樣(Melanoplussanguinipes,migratorygrasshopper);小麥黑森癭蚊(Mayetioladestructor,Hessianfly);麥紅吸漿蟲(Sitodiplosismosellana,wheatmidge);美州麥#錄(Meromyzaamericana,wheatstemmaggot);麥種錄(Hylemyacoarctata,wheatbulbfly);煙薊馬(Frankliniellafusca,tobaccothrips);麥莖蜂(Cephuscinctus,wheatstemsawfly);郁金香癭螨(Aceriatulipae,wheatcurlmite);向日葵向日葵莖象甲(Cylindrocupturusadspersus,sunflowerstemweevil);向曰葵紅色種子象(Smicronyxfulus,redsunflowerseedweevil);向曰葵灰色種子象(Smicronyxsordidus,graysunflowerseedweevil);向曰葵食芽蛾(Suleimahelianthana,sunflowerbudmoth);向曰葵螟(Homoeosomaelectellum,sunflowermoth);向日葵葉甲(Zygogrammaexclamationis,sunflowerbeetle);胡蘿卜金龜子(Bothyrusgibbosus,carrotbeetle);向曰葵籽癭蚊(Neolasiopterafflurtfeldtiana,sunflowerseedmidge);沖帛煙芽夜蛾(Heliothisvirescens,tobaccobudworm);谷實(shí)夜蛾(Helicoverpazea,棉鈴蟲(cottonbollworm));甜菜夜蛾(Spodopteraexigua,beetarmyworm);紅鈴麥蛾(Pectinophoragossypiella,pinkbollworm);(棉鈴象曱,例如,墨西哥棉鈴象(Anthonomusgrandis));棉蜂(Aphisgossypii,cottonaphid);棉盲漆象(Pseudatomoscelisseriatus,cottonfleahopper);束翅粉虱(Trialeurodesabutilonea,bandedwingedwhitefly);無澤盲蝽(Lyguslineolaris,tarnishedplantbug);紅腿蟲皇(Melanoplusfefflurrubrum,redleggedgrasshopper);異黑埴(Melanoplusdifferentialis,differentialgrasshopper);蔥薊馬(Thripstabaci,onionthrips);煙薊馬(Franklinkiellafusca,tobaccothrips);朱砂葉端(Tetranychuscinnabarinus,carminespidermite);二斑葉螨(Tetranychusurticae,two-spottedspidermite);稻小蔑螟(Diatraeasaccharalis,sugarcaneborer);草地貪夜蛾(Spodopterafrugiperda,fallarmyworm);谷實(shí)夜蛾(Helicoverpazea,cornearworm);葡萄肖葉甲(Colaspisbrunnea,grapecolaspis);稻水象曱(Lissorhoptrusoryzophilus,ricewaterweevil);米象(Sitophilusoryzae,riceweevil);二條黑尾葉蟬(Nephotettixnigropictus,riceleafhoper);麥長椿(chinchbug,e.g.,Blissusleucopterusleucopterus);喜綠蝽(Acrosternumhilare,greenstinkbug);大豆大豆夜蛾(Pseudoplusiaincludens,soybeanlooper);藜豆夜蛾(Anticarsiagemmatalis,velvetbeancaterpillar);苜蓿綠夜蛾(Plathypenascabra,greencloverworm);歐洲玉米螟(Ostrinianubilalis,Europeancornborer);小地老虎(Agrotisipsilon,blackcutworm);甜菜夜蛾(Spodopteraexigua,beetarmyworm);煙芽夜蛾(Heliothisvirescens,tobaccobudworm);谷實(shí)夜蛾(Helicoverpazea,沖帛鈴蟲);墨西哥大豆胍蟲(Epilachnavarivestis,Mexicanbeanbeetle);桃奸(Myzuspersicae,greenpeachaphid)5馬鈴薯微葉蟬(E即oascafabae,potatoleafhopper)5喜綠蝽(Acrosternumhilare,greenstinkbug);紅腿埴(Melanoplusfemurrubrum,redleggedgrasshopper);異黑蟲皇(Melanoplusdifferentialis,differentialgrasshopper);灰地種竭(Hylemyaplatura,seedcornmaggot);大豆薊馬(Sericothripsvariabilis,soybeanthrips);蔥薊馬(Thripstabaci,onionthrips);土耳其斯坦葉螨(Tetranychusturkestani,strawberryspidermite);二斑葉螨(Tetranychusurticae,two-spottedspidermite);大麥歐洲玉米螟(Ostrinianubilalis,Europeancornborer);小地老虎(Agrotisipsilon,blackcutworm);麥二叉椅(Schizaphisgraminum,greenbug);麥長蝽(chinchbug,例如,Blissusleucopterusleucopterus);喜綠棒(Acrosternumhilare,greenstinkbug);褐臭蝽(Euschistusservus,brownstinkbug);灰地種螞(Jylemyaplatura,seedcornmaggot);小麥黑森癭蚊(Mayetioladestructor,Hessianfly);麥巖螨(Petrobialatens,brownwheatmite);油籽油菜甘藍(lán)坊(Vrevicorynebrassicae,cabbageaphid);十字花科跳甲(Phyllotretacruciferae,cruciferfleabeetle);黃曲條跳曱(Phyllotretastriolata,stripedfleabeetle);芫等淡足跳甲(Phyllotretanemorum,stripedturnipfleabeetle);油菜露尾甲(Meligethesaeneus,rapeseedbeetle);以及露尾甲(pollenbeetle)(Meligethesrufiraanus,Meligethesnigrescens,Meligethescanadianus,和Meligethesviridescens);馬鈴薯科羅拉多馬鈴薯葉甲(Leptinotarsadecemlineata,Coloradopotatobeetle);半翅目昆蟲,例如,豆莢草盲蝽(Lygushesperus),美國牧草盲棒(Lyguslineolaris),牧草盲蜂(Lyguspratensis),長毛草盲棒(LygusrugulipermisPopp),Lyguspabulinus,Calocorisnorvegicus,0rthopscompestris,Plesiocorisrugicollis,Cyrtopeltismodestus,Cyrtopeltisnotatus,Spanagonicusalbofasciatus,Diaphnocorischlorinonis,Labopidicolaallii,Pseudatomoscelisseriatus,Adelphocorisrapidus,Poecilocapsus1ineatus,麥長蝽(Blissusleucopterus),小長棒(Nysiusericae),谷長蝽若蟲(Nysiusraphanus),褐臭棒(Euschistusservus),稻綠椿(Nezaraviridula),扁盾蝽屬(Eurygaster),緣棒科(Coreidae),紅蝽科(Pyrrhocoridae),(Tinidae),負(fù)子棒科(Blostomatidae),獵蝽科(Reduviidae),和臭蝽科(Cimicidae);目的病蟲害也包括咖啡豆象(Araecerusfasciculatus,coffeebeanweevil);菜豆象(Acanthoscelidesobtectus,beanweevil);香豆象(Bruchusrufmanus,broadbeanweevi1);豌豆象(Bruchuspisorum,peaweevil);巴西豆象(Zabrotessubfasciatus,Mexicanbeanweevil);黃瓜條葉甲(Diabroticabalteata,bandedcucumberbeetle);菜豆螢葉甲(Cerotomatrifurcata,beanleafbeetle);玉米根葉甲(DiabroUcavirgiferaMexicancornrootworm);美洲馬鈴薯跳曱(Epitrixcucumeris,potatofleabeetle);甘薯葉曱(Chaetocnemaconfinis,sweetpotatofleabeetle);苜蓿葉象蟲(Hyperapostica,alfalfaweevil);蘋果象甲(Anthonomusquadrigibbus,applecurculio);豆莖象(Sternechuspaludatus,beanstalkweevil);埃及苜蓿葉象(Hyperabrunnipennis,Egyptianalfalfaweevil);谷象(Sitophilusgranaries,granaryweevil);葡萄象甲(Craponiusinaequalis,grapecurculio);玉米象(Sitophiluszeamais,maizeweevil);李象(Conotrachelusnenuphar,plumcurculio);西印度群島甘薯象甲(Euscepespostfaciatus,WestIndiansweetpotatoweevil);紫絨總角金龜(Maladeracastanea,Asiaticgardenbeetle);歐洲切根緦金龜(Rhizotrogusmajalis,Europeanchafer);薔薇熟角金龜(Macrodactylussubspinosus,rosechafer);雜擬谷盜(Triboliumconfusum,confusedflourbeetle);黑粉蟲(Tenebrioobscurus,darkmealworm);赤擬谷盜(Triboliumcastaneum,redflourbeetle);黃粉蟲(Tenebriomolitor,yellowmealworm)。25.權(quán)利要求22的遺傳修飾植物,其中病蟲害是選自下列的線蟲胞嚢線蟲屬、根結(jié)線蟲屬和球形胞嚢線蟲屬(Globoderaspp.);尤其是胞囊線蟲成員,包括但不限于,大豆胞囊線蟲;甜菜胞囊線蟲;禾谷胞嚢線蟲;和馬鈴薯金線蟲和馬鈴薯白線蟲(馬鈴薯胞囊線蟲)以及Lesion線蟲,包括才艮腐線蟲屬。26.包含遺傳修飾的植物或其通過自交、回交或與另一植物的雜交而產(chǎn)生的后代的病蟲害管理控制系統(tǒng),所述植物包含至少兩種殺病蟲害和/或抑病蟲害藥劑,其中所述藥劑中的至少一種由所述遺傳修飾或交配所導(dǎo)致,其中至少一種藥劑是來自茄科的絲氨酸蛋白酶抑制劑或其前體,該絲氨酸蛋白酶抑制劑的前體形式包含至少3個(gè)單體,其中至少一個(gè)單體是胰蛋白酶抑制劑并且至少一個(gè)單體是胰凝乳蛋白酶抑制劑,并且其中至少一種其它藥劑是非絲氨酸蛋白酶抑制劑,其中所述植物對病蟲害表現(xiàn)出抗性或降低的易感性。27.權(quán)利要求26的病蟲害管理控制系統(tǒng),其中絲氨酸蛋白酶抑制劑以前體形式提供。28.權(quán)利要求27的病蟲害管理控制系統(tǒng),其中前體包含至少4個(gè)單體。29.權(quán)利要求27的病蟲害管理控制系統(tǒng),其中前體包含至少5個(gè)單體。30.權(quán)利要求27的病蟲害管理控制系統(tǒng),其中前體包含至少6個(gè)單體。31.權(quán)利要求30的病蟲害管理控制系統(tǒng),其中絲氨酸蛋白酶抑制劑是來自Nicotianaalata的NaPI。32.權(quán)利要求26至31之任一項(xiàng)的病蟲害管理控制系統(tǒng),其中非絲氨酸蛋白酶抑制劑是內(nèi)毒素。33.權(quán)利要求32的病蟲害管理控制系統(tǒng),其中非絲氨酸蛋白酶抑制劑是Bt蛋白質(zhì)。34.權(quán)利要求32或33的病蟲害管理控制系統(tǒng),其中內(nèi)毒素選自Cry家族成員和VIP。35.權(quán)利要求26至31之任一項(xiàng)的病蟲害管理控制系統(tǒng),其中非絲氨酸蛋白酶抑制劑是防衛(wèi)素分子或其病蟲害毒性部分。36.包含遺傳修飾的植物或其通過自交、回交或與另一植物的雜交而產(chǎn)生的后代的病蟲害管理控制系統(tǒng),所述植物包含至少兩種殺病蟲害藥劑和/或抑病蟲害藥劑,其中所述藥劑中的至少一種由所述遺傳修飾或交配所導(dǎo)致,其中至少一種藥劑是NaPI前體或其單體或其重組物或衍生物,并且其中至少一種其它藥劑是非絲氨酸蛋白酶抑制劑,其中所述植物對病蟲害表現(xiàn)出抗性或降低的易感性。37.權(quán)利要求36的病蟲害管理控制系統(tǒng),其中非絲氨酸蛋白酶抑制劑是內(nèi)毒素。38.權(quán)利要求37的病蟲害管理控制系統(tǒng),其中非絲氨酸蛋白酶抑制劑是Bt蛋白。39.權(quán)利要求37或38的病蟲害管理控制系統(tǒng),其中內(nèi)毒素選自Cry家族成員和VIP。40.權(quán)利要求36的病蟲害管理控制系統(tǒng),其中非絲氨酸蛋白質(zhì)抑制劑是防衛(wèi)素分子或其病蟲害毒性部分。41.包含遺傳修飾的植物或其通過自交、回交或與另一植物雜交而產(chǎn)生的后代的病蟲害管理控制系統(tǒng),所述植物包含至少兩種殺病蟲害藥劑或抑病蟲害藥劑,其中所述藥劑中的至少一種由所述遺傳修飾或交配所導(dǎo)致,其中至少一種藥劑是來自茄科的絲氨酸蛋白酶抑制劑或其前體,其中該絲氨酸蛋白酶抑制劑的前體形式包含至少3個(gè)單體,其中至少一個(gè)單體是胰蛋白酶抑制劑且至少一個(gè)單體是胰凝乳蛋白酶抑制劑,并且其中至少一種其它藥劑是非絲氨酸蛋白酶抑制劑,其中所述植物對病蟲害表現(xiàn)出抗性或降低的易感性,只是其中至少一種其它藥劑選自Bt蛋白,Cry家族蛋白VIP和防衛(wèi)素。42.包含遺傳修飾的植物或其通過自交、回交或與另一植物雜交而產(chǎn)生的后代的病蟲害管理控制系統(tǒng),所述植物包含至少兩種殺病蟲害藥劑或抑病蟲害藥劑,其中所述藥劑中的至少一種由所述遺傳修飾或交配所導(dǎo)致,其中至少一種藥劑是NaPI前體或其單體或其重組物或衍生物,并且其中至少一種其它藥劑是非絲氨酸蛋白酶抑制劑,其中所述植物對病蟲害表現(xiàn)出抗性或降低的易感性,只是其中所述至少一種其它藥劑選自Bt蛋白、Cry家族蛋白、VIP和防衛(wèi)素。43.權(quán)利要求26或36或41或42的病蟲害管理控制系統(tǒng),其中所述植物選自玉米(Zeamays)、蕓苔屬植物(Brassicasp.)(例如,油菜(B.卿us)、蕪青(B.rapa)、芥菜(B.juncea)),尤其是可用作菜籽油來源的那些蕓莒屬物種、紫花苜蓿(Medicagosativa)、稻(0ryzasativa)、黑麥(Secalecereale)、高梁(Sorghumbicolor,Sorghumvulgare)、粟(例如,珍珠粟(Pennisetumglauc認(rèn))、黍(Panicummi1iaceum)、粟(foxtailmillet,Setariaitalica)、糝子(fingermillet,Eleusinecoracana)、向曰葵(Helianthusannuus)、紅花(Carthamustinctorius)、小麥(Triticumaestivum)、大豆(Glycinemax)、煙草(Nicotianatabacum)、馬鈴薯(Solariumtuberosum)、花生(Arachishypogaea)、棉(海島棉(Gossypiumbarbadense)、陸地棉(Gossypiumhirsutum))、甘薯(Ipomoeabatatus)、木薯(Manihotesculenta)、咖啡(Coffeaspp.)、椰子(Cocosnucifera)、cotton菠蘿(Ananascomosus)、柑橘樹(Citrusspp.)、可可(Theobro歸cacao)、茶(Camelliasinensis)、香蕉(Musaspp.)、鱘梨(Perseaamericana)、無花果(Ficuscasica)、番石榴(PsidiumguaJava)、芒果(Mangiferaindica)、橄欖(Oleaeuropaea)、番木瓜(Caricapapaya)、腰果樹(Anacardiumoccidental)、澳大利亞堅(jiān)果(Macadamiaintegrifolia)、扁桃(Pru畫amygdalus)、甜菜(Betavulgaris)、甘蔗(Saccharumspp.)、燕麥、大麥、蔬菜、觀賞植物和針葉樹;蔬菜包括番癡(Lycopersiconesculentum)、萵苣(例:i口,Lactucasativa)、菜豆(Phaseolusvulgaris)、利馬豆(Phaseoluslimensis)、豌豆(Lathyrusspp.)、以及甜瓜屬(Cucumis)成員例如黃瓜(Csativus)、羅馬甜瓜(cantaloupe,C.cantalupensis)以及甜瓜(C.melo);觀賞植物包括杜鵑(Rhododendronspp.)、繡球(Macrophyllahydrangea)、扶桑(Hibiscusrosasanensis)、玫瑰(Rosaspp.)、郁金香(Tulipaspp.)、水仙(Narcissusspp.)、碧冬癡(Petuniahybrida)、康乃馨(Dianthuscaryophyllus)、一品紅(Euphorbiapulcherrima)和菊花;可用于實(shí)踐本發(fā)明的針葉樹包括,例如,?l^如火炬;^(Pinustaeda)、濕地^(Pinuselliotii)、美國黃松(Pinusponderosa)、小干松(Pinuscontorta)和輻射松(Pinusradiata);花旗松(Pseudotsugamenziesii);力口拿大鐵杉(Tsugacanadensis);白云杉(Piceaglauca);紅杉(Sequoiasempervirens);真正的冷杉例如太平洋4艮冷杉(Abiesamabilis)和香脂冷杉(Abiesbalsamea);以及柏例如美國西部側(cè)柏(Thujaplicata)和黃扁柏(Chamaecyparis謡tkatensis);本發(fā)明的植物包括作物植物(例如,棉、玉米、紫花苜蓿、向日葵、蕓苔屬植物、大豆、棉、紅花、花生、高梁、小麥、粟、煙草等),例如玉米和大豆植物;草沖草包括,但不限于早熟禾(Poaannua);多花黑麥草(Loliummultiflorum);加拿大早熟禾(Poacompressa);紫羊茅(Festucarubra);細(xì)弱剪股穎(Agrostistenuis);匍匐苜股穎(Agrostispalustris);沙生水草(Agropyrondesertorum);扁穗冰草(Agropyroncristatum);硬羊茅(Festucalongifolia);草地早熟禾(Poapratensis);鴨茅(Dactylisglomerata);黑麥草(Loliumperenne);紫羊茅(Festucarubra);小糠草(Agrostisalba);普通早熟禾(Poatrivialis);羊茅(Festucaovina);無芒雀麥(Bromusinermis);高羊茅(Festucaarundinacea);貓尾草(Phleumpratense);絨毛蓊股穎(Agrostiscanina);堿茅(Puccinelliadistans);藍(lán)莖水草(Agropyronsmithii);狗牙根(Cynodonspp.);奧古斯汀草(Stenotaphrumsecundatum);結(jié)縷草(Zoysiaspp.);巴哈雀稗(Paspal認(rèn)notatum);地趙草(Axo卿usaffinis);百足草(Eremochloaophiuroides);東非狼尾草(Pennisetumclandesinum);海濱雀稗(Paspalumvaginatum);格蘭馬草(Boutelouagracilis);野牛草(Buchloedactyloids);垂穗草(Boutelouacurtipendula);油籽植物、豆科植物、玉米、小麥、大麥、稻、高梁、黑麥、粟、棉、大豆、紅花、向曰葵、蕓苔屬植物、玉米、紫花苜蓿、棕櫚、椰子、亞麻、蓖麻、橄欖、菜豆類、豌豆類、瓜爾豆、槐豆、胡蘆巴、大豆、青刀豆、豇豆、綠豆、利馬豆、蠶豆、扁豆和鷹嘴豆。44.權(quán)利要求43的病蟲害管理控制系統(tǒng),其中所述植物是棉、甜玉米、番茄、馬鈴薯、甜椒、馬鈴薯、向日葵、柑橘、李子、高梁、韭蔥、大豆、紫花苜蓿、菜豆、木豆、鷹嘴豆、洋薊、curcurbit、萵苣、石竹(Dianthus)、天竺葵、燈籠果、玉米、亞麻和亞麻籽、羽扇豆、蠶豆、青刀豆、花生、canola、金魚草、櫻桃、向日葵、金盞花、蠟菊(Helichrysum)、小麥、大麥、燕麥、黑小麥、胡蘿卜、洋蔥、蘭花、玫瑰和碧冬茄。45.權(quán)利要求26或36或41或42的病蟲害管理控制系統(tǒng),其中所述植物是棉。46.權(quán)利要求26或36或41或42的病蟲害管理控制系統(tǒng),其中植物病蟲害選自昆蟲、真菌、細(xì)菌、線蟲、蜱螨、原生動(dòng)物病原體、動(dòng)物寄生性肝吸蟲等。47.權(quán)利要求46的病蟲害管理控制系統(tǒng),其中病蟲害是昆蟲。48.權(quán)利要求47的病蟲害管理控制系統(tǒng),其中昆蟲選自鈴夜蛾屬、雙翅目、膜翅目(Hymenoptera)、鱗翅目、食毛目、同翅目、半翅目、直翅目、纓翅目、革翅目、等翅目、虱目、蚤目、毛翅目、鞘翅目昆蟲。49.權(quán)利要求47的病蟲害管理控制系統(tǒng),其中病蟲害選自小蠟螟(Achoroiagrisella)、東部黑頭長翅巻蛾(Aclerisgloverana)、黑頭長翅巻蛾(Aclerisvariana)、棉褐帶巻葉蛾(Adoxophyesorana)、小地老虎(Agrotisipsilon)、Alabamaargillacea、秋星尺蠖(Alsophilapometaria)、Amyeloistransitella、地中海粉螟(Anagastakuehniella)、桃條麥蛾(Anarsialineatella)、Anisotasenatoria、拃蠶(Antheraeapernyi)、黎豆夜蛾(Anticarsiagemmatalis)、黃巻蛾屬(Archipssp.)、條巻蛾屬(Argyrotaeniasp.)、Athetismindara、家蠶(Bombyxmori)、棉潛葉蛾(Bucculatrixthurberiella)、粉斑螟(Cadracautella)、色巻蛾屬(Choristoneurasp.)、Cochyllshospes、苜蓿粉蝶(Coliaseurytheme)、米蛾(Corcyracephalonica)、Cydialatiferreanus、蘋果囊蛾(Cydiapomonella)、Datanaintegerrima、落葉松毛蟲(Dendrolimussibericus)、Desmiafeneralis、甜瓜絹野螟(Diaphaniahyalinata)、黃瓜絹野螟(Diaphanianitidalis)、西南玉米桿草螟(Diatraeagrandiose1la)、小蔑螟(Diatraeasaccharalis)、白尺獲蛾(Ennomossubsignaria)、Eoreumaloftini、煙草粉螟(Esphestiaelutella)、Erannistilaria、細(xì)斑燈蛾(Estigmeneacrea)、Euliasalubricola、Eupocoelliaambiguella、女貞細(xì)巻蛾(Eupoeciliaambiguella)、黃毒蛾(Euproctischrysorrhoea)、暗緣地老虎(Euxoamessoria)、蠟螟(Galleriamellonella)、梨小食心蟲(Grapholitamolesta)、黑擬蛉蛾(Harrisinaamericana)、Helicoverpasubflexa、谷實(shí)夜蛾(Helicoverpazea)、煙芽夜蛾(Heliothisvirescens)、新墨西哥草原毛蟲(Hemileucaoliviae)、向曰葵斑螟(Homoeosomaelectellum)、美國白蛾(Hyphantiacunea)、Keiferialycopersicella、Lambdinafiscellariafiscellaria、Lambdinafiscellarialugubrosa、雪毒蛾(Leucomasalicis)、葡萄漿果小巻蛾(Lobesiabotrana)、草地螟(Loxostegesticticalis)、舞毒蛾(Lymantriadispar)、Macallathyrisalis、天幕毛蟲屬(Malacosomasp.)、甘藍(lán)燈蛾(Mamestrabrassicae)、Mamestraconfigurata、Manducaquinquemaculata、煙草天蛾(Manducasexta)、豆野螟(Marucatestulalis)、Melanchrapicta、秋尺蛾(Operophterabr畫ta)、古毒蛾屬(0rgyiasp,)、歐洲玉米螟(0strinianubilalis)、Paleacritavernata、Papiliocresphontes、棉紅鈴蟲(Pecti卿horagossypiella)、Phryganidiacalifornica、Phyllo謹(jǐn)ycterblancardella、暗脈菜粉蝶(Pierisnapi)、油菜菜粉蝶(Pierisrapae)、苜蓿綠夜蛾(Plathypenascabra)、Platynotaflouendana、荷蘭石竹小巻蛾(Platynotastultana)、Platyptiliacarduidactyla、印度谷螟(Plodiainterpunctella)、小菜蛾(Plutellaxylostella)、PontiaprotocUce、一點(diǎn)粘蟲(Pseudaletiaunipuncta)、大豆夜蛾(Pseudoplasiaincludens)、Sabulodesaegrotata、Schizuraconcinna、麥蛾(Sitotrogacerealella)、蘋白小巻蛾(Spilontaocellana)、灰翅夜蛾屬(Spodopterasp.)、Thaurnstopoeapityocampa、幕谷蛾(Tinsolabissel1iella)、粉玟夜蛾(Trichoplusiahi)、溫室結(jié)網(wǎng)野螟(Udearubigalis)、Xylomygescuriails、和蘋果巢蛾(Yponomeutapadella);歐洲玉米螟(0strinianubilalis,Europeancornborer);小地老虎(Agrotisipsilon,blackcutworm);谷實(shí)夜蛾(Helicoverpazeae,cornearworm);草地貪夜蛾(Spodopterafrugiperda,fallarmyworm);西南玉米桿草螟(Diatraeagrandiosella,southwesterncornborer);南美玉米苗斑螟(Elasmopalpuslignosellus,lessercornstalkborer);小蔑螟(Diatraeasaccharalis,surgarcaneborer);西部玉米根蟲(westerncornrootworm),例如,玉米根螢葉甲(Diabroticavirgiferavirgifera);北部玉米根蟲(northerncornrootworm),例如,Diabroticalongicornisbarberi;南部玉米根蟲(southerncornrootworm),例如,黃瓜十一星葉甲(Diabroticaundecimpunctatahowardi);梳爪叩甲屬(Melanotusspp.),金針蟲(wireworms));圓頭犀金龜(Cyclocephalaborealis,northernmaskedchafer(whitegrub));圓頭無斑犀金龜(Cyclocephalaimmaculata,southernmaskedchafer(whitegrub));曰本麗金龜(Popilliajaponica,Japanesebeetle);玉米跳曱(Chaetocnemapulicaria,cornfleabeetle);玉米象蟲(Sphe卿horusmaidis,maizebillbug);玉米縊管對(Rhopalosiphummaidis,cornleafaphid);玉米根椅(Anuraphismaidiradicis,cornrootaphid);麥長砵(Blissusleucopterusleucopterus,chinchbug);紅腿埴(Melanoplusfemurrubrum,redleggedgrasshopper);遷徙鲊樣(Melanoplussanguinipes,migratorygrasshopper);灰地種蠅(Hylemyaplatura,seedcornmaggot);玉米斑潛繩(Agromyzaparvicornis,cornblotchleafminer);美洲錐尾薊馬(Anaphothripsobscrurus,grassthrips);竊葉蚊(Solenopsismilesta,thiefant);二斑葉螨(Tetranychusurticae,twospottedspidermite);高梁高粱螟(Chilopartellus,sorghumborer);草地貪夜蛾(Spodopterafrugiperda,fallarmyworm);谷實(shí)夜蛾(Helicoverpazea,cornearworm);南美玉米苗斑螟(Elasmopalpuslignosellus,lesercornstalkborer);粒膚地老虎(Feltiasubterranea,granulatecutworm);蜂螬(Phyllophagacrinita,whitegrub);(Eleodes),單葉叩曱屬(Conoderus),和Aeolusspp.,金針蟲);黑角負(fù)泥蟲(0ulemamela卿us,cerealleafbeetle);玉米跳甲(Chaetocnemapulicaria,cornfleabeetle);玉米象蟲(Sphenophorusmaidis,maizebillbug);玉米組管圻(Rhopalosiphummaidis,cornleafaphid);蔑黃偽毛辨(Siphaflava,yellowsugarcaneaphid);麥長蜂(chinchbug),例如,Blissusleucopterusleucopterus;高梁癭蚊(Contariniasorghicola,sorghummidge);朱砂葉螨(Tetranychuscinnabarinus:carminespidermite);二斑葉螨(Tetranychusurticae,two—spottedspidermite);小麥一點(diǎn)粘蟲(Pseudaletiaunipunctata,armyworm);草地貪夜蛾(Spodopterafrugiperda,fallarmyworm);南美玉米苗斑螟(Elasmopalpuslignosellus,lessercornstalkborer);西部灰地老虎(Agrotisorthogonia,palewesterncutworm);南美玉米苗斑螟(Elasmopalpuslignosellus,lessercornstalkborer);黑角負(fù)泥蟲(0ulemamelanopus,cerealleafbeetle);三葉草葉象(Hyperapunctata,cloverleafweevi1);南部玉米根蟲(southerncornrootworm),例如,黃瓜十一星葉甲(Diabroticaundecimpunctatahowardi);俄國麥辨(Russianwheataphid);麥二叉對(Schizaphisgraminum,greenbug);麥長管奸(Macrosiphumavenae,Englishgrainaphid);紅腿埴(Melanoplusfemurrubrum,redleggedgrasshopper);異黑埴(Melanoplusdifferentialis,differentialgrasshopper);遷徙蚱蛭(Melanoplussanguinipes,migratorygrasshopper);小麥黑森癭蚊(Mayetioladestructor,Hessianfly);麥紅吸漿蟲(Sitodiplosismosellana,wheatmidge);美州麥桿錄(Meromyzaamericana,wheatstemmaggot);麥種螞(Hylemyacoarctata,wheatbulbfly);煙薊馬(Frankliniellafusca,tobaccothrips);麥莖蜂(Cephuscinctus,wheatstemsawfly);郁金香癭螨(Aceriatulipae,wheatcurlmite);向日葵向日葵莖象甲(Cylindrocupturusadspersus,sunflowerstemweevil);向曰葵紅色種子象(Smicronyxfulus,redsunflowerseedweevil);向曰葵灰色種子象(Smicronyxsordidus,graysunflowerseedweevil);向曰葵食芽蛾(Suleimahelianthana,sunflowerbudmoth);向曰葵螟(Homoeosomaelectellum,sunflowermoth);向曰葵葉甲(Zygogrammaexclamationis,sunflowerbeetle);胡蘿卜金龜子(Bothyrusgibbosus,carrotbeetle);向曰葵籽癭蚊(Neolasiopteramurtfeldtiana,sunflowerseedmidge);沖帛煙芽夜蛾(Heliothisvirescens,tobaccobudworm);谷實(shí)夜蛾(Helicoverpazea,沖帛鈴蟲(cottonbollworm));甜菜夜蛾(Spodopteraexigua,beetarmyworm);紅鈴麥蛾(Pectinophoragossypiella,pinkbollworm);(棉鈴象甲,例如,墨西哥棉鈴象(Anthonomusgrandis));棉辨(Aphisgossypii,cottonaphid);棉盲蜂象(Pseudatomoscelisseriatus,cottonfleahopper);束翅粉虱(Trialeurodesabutilonea,bandedwingedwhitefly);無澤盲棒(Lyguslineolaris,tarnishedplantbug);紅腿埴(Melanoplusfemurrubrum,redleggedgrasshopper);異黑埴(MelanoplusdifferenUalis,differentialgrasshopper);蔥薊馬(Thripstabaci,onionthrips);煙薊馬(Franklinkiellafusca,tobaccothrips);朱砂葉螨(Tetranychuscinnabarinus,carminespidermite);二斑葉螨(Tetranychusurticae,two-spottedspidermite);稻小蔑螟(Diatraeasaccharalis,sugarcaneborer);草地貪夜蛾(Spodopterafrugiperda,fallarmyworm);谷實(shí)夜蛾(Helicoverpazea,cornearworm);葡萄肖葉甲(Colaspisbrunnea,grapecolaspis);稻水象甲(Lissorhoptrusoryzophilus,ricewaterweevil);米象(Sitophilusoryzae,riceweevil);二條黑尾葉蟬(Nephotettixnigropictus,riceleafhoper);麥長棒(chinchbug,e.g,,Blissusleucopterusleucopterus);喜綠蜂(Acrosternumhilare,greenstinkbug);大豆大豆夜蛾(Pseudoplusiaincludens,soybeanlooper);藜豆夜蛾(Anticarsiagemmatalis,velvetbeancaterpillar);苜蓿綠夜蛾(Plathypenascabra,greencloverworm);歐洲玉米螟(0strinianubilalis,Europeancornborer);小地老虎(Agrotisipsilon,blackcutworm);甜菜夜蛾(Spodopteraexigua,beetarmyworm);煙芽夜蛾(Heliothisvirescens,tobaccobudworm);谷實(shí)夜蛾(Helicoverpazea,棉鈴蟲);墨西哥大豆狐蟲(Epilachnavarivestis,Mexicanbeanbeetle);桃蜂(Myzuspersicae,greenpeachaphid);馬鈴薯微葉蟬(Empoascafabae,potatoleafhopper),喜綠砵(Acrosternumhilare,greenstinkbug);紅腿埴(Melanoplusfemurrubrum,redleggedgrasshopper);異黑鰉(Mela,lusdifferentialis,differentialgrasshopper);灰地種錄(Hylemyaplatura,seedcornmaggot);大豆薊馬(Sericothripsvariabilis,soybeanthrips);蔥薊馬(Thripstabaci,onionthrips);土耳其斯坦葉螨(Tetranychusturkestani,strawberryspidermite);二斑葉螨(Tetranychusurticae,two-spottedspidermite);大麥歐洲玉米螟(Ostrinianubilalis,Europeancornborer);小地老虎(Agrotisipsilon,blackcutworm);麥二叉圻(Schizaphisgramin認(rèn),greenbug);麥長漆(chinchbug,例如,Blissusleucopterusleucopterus);喜綠棒(Acrosternumhilare,greenstinkbug);褐臭棒(Euschistusservus,brownstinkbug);灰地種竭(Jylemyaplatura,seedcornmaggot);小麥黑森癭蚊(Mayetioladestructor,Hessianfly);麥巖螨(Petrobialatens,brownwheatmite);油籽油菜甘藍(lán)蛘(Vrevicorynebrassicae,cabbageaphid),十字花科跳甲(Phyllotretacruciferae,cruciferfleabeetle);黃曲條跳甲(Phyllotretastriolata,stripedfleabeetle);芫等淡足跳曱(Phyllotretanemorum,stripedturnipfleabeetle);油菜露尾甲(Meligethesaeneus,rapeseedbeetle);以及露尾甲(pollenbeetle)(Meligethesrufimanus,Meligethesnigrescens,Meligethescanadianus,和Meligethesviridescens);馬鈴薯科羅拉多馬鈴薯葉甲(Leptinotarsadecemlineata,Coloradopotatobeetle);半翅目昆蟲,例如,豆莢草盲棒(Lygushesperus),美國牧草盲蝽(Lyguslineolaris),牧草盲棒(Lyguspratensis),長毛草盲蝽(LygusrugulipennisPopp),Lyguspabulinus,Calocorisnorvegicus,0rthopscompestris,Plesiocorisrugicollis,Cyrtopeltismodestus,Cyrtopeltisnotatus,Spanagonicusalbofasciatus,Diaphnocorischlorinonis,Labopidicolaallii,Pseudatomoscelisseriatus,Adelphocorisrapidus,Poecilocapsus1ineatus,麥長棒(Blissusleucopterus),小長棒(Nysiusericae),谷長棒若蟲(Nysiusrapha畫),褐臭棒(Euschistusservus),稻綠椿(Nezaraviridula),扁盾棒屬(Eurygaster),緣蝽科(Coreidae),紅蝽科(Pyrrhocoridae),(Tinidae),負(fù)子蝽科(Blostomatidae),獵蝽科(Reduviidae),和臭棒科(Cimicidae);目的病蟲害也包括咖啡豆象(Araecerusfasciculatus,coffeebeanweevil);菜豆象(Acanthoscelidesobtectus,beanweevil);蠶豆象(Bruchusrufmanus,broadbeanweevi1);豌豆象(Bruchuspisor認(rèn),peaweevil);巴西豆象(Zabrotessubfasciatus,Mexicanbeanweevil);黃瓜條葉甲(Diabroticabalteata,bandedcucumberbeetle);菜豆螢葉甲(Cerotomatrifurcata,beanleafbeetle);玉米根葉甲(Diabroticavirgifera:Mexicancornrootworm);美洲馬鈴薯跳甲(Epitrixcucumeris,potatofleabeetle);甘薯葉甲(Chaetocnemaconfinis,sweetpotatofleabeetle);苜蓿葉象蟲(Hyperapostica,alfalfaweevil);蘋果象甲(Anthonomusquadrigibbus,applecurculio);豆莖象(Sternechuspaludatus,beanstalkweevil);埃及苜蓿葉象(Hyperabrunnipennis,Egyptianalfalfaweevil);谷象(Sitophilusgranaries,granaryweevil);葡萄象曱(Craponiusinaequalis,grapecurculio);玉米象(Sitophiluszeamais,maizeweevil);李象(Conotrachelusnenuphar,plumcurculio);西印度群島甘薯象甲(Euscepespostfaciatus,WestIndiansweetpotatoweevil);紫絨總角金龜(Maladeracastanea,Asiaticgardenbeetle)5歐洲切根鮑金龜(Rhizotrogusmajalis,Europeanchafer)5薔薇總角金龜(Macrodactylussubspinosus,rosechafer);雜擬谷盜(Triboliumconfusum,confusedflourbeetle);黑粉蟲(Tenebrioobscurus,darkmealworm);赤擬谷盜(Triboliumcastaneum,redflourbeetle);黃粉蟲(Tenebriomolitor,yellowmealworm)。50.權(quán)利要求47的病蟲害管理控制系統(tǒng),其中病蟲害是選自下列的線蟲胞嚢線蟲屬、根結(jié)線蟲屬和球形胞囊線蟲屬(Globoderaspp.);尤其是胞囊線蟲成員,包括但不限于,大豆胞囊線蟲;甜菜胞嚢線蟲;禾谷胞嚢線蟲;和馬鈴薯金線蟲和馬鈴薯白線蟲(馬鈴薯胞囊線蟲)以及Lesion線蟲,包括4艮腐線蟲屬。51.包含絲氨酸蛋白酶抑制劑和至少一種非絲氨酸蛋白酶抑制劑的殺病蟲害或抑病蟲害組合物。52.權(quán)利要求51的殺病蟲害或抑病蟲害組合物,其中絲氨酸蛋白酶4中制劑是來自Nicotianaalata的NaPI。53.權(quán)利要求51或52的殺病蟲害或抑病蟲害組合物,其中非絲氨酸蛋白酶抑制劑是內(nèi)毒素。54.權(quán)利要求53的殺病蟲害或抑病蟲害組合物,其中非絲氨酸蛋白酶抑制劑是Bt蛋白。55.權(quán)利要求53或54的殺病蟲害或抑病蟲害組合物,其中內(nèi)毒素選自Cry家族成員和VIP。56.權(quán)利要求51的殺病蟲害或抑病蟲害組合物,其中非絲氨酸蛋白酶抑制劑是防衛(wèi)素分子或其病蟲害毒性部分。57.權(quán)利要求51的殺病蟲害或抑病蟲害組合物,其中植物病蟲害選自昆蟲、真菌、細(xì)菌、線蟲、蜱螨、原生動(dòng)物病原體、動(dòng)物寄生性肝吸蟲等。58.權(quán)利要求51的殺病蟲害或抑病蟲害組合物,其中病蟲害是昆蟲。59.權(quán)利要求58的殺病蟲害或抑病蟲害組合物,其中昆蟲選自鈴夜蛾屬、雙翅目、膜翅目(Hymenoptera)、鱗翅目、食毛目、同翅目、半翅目、直翅目、纓翅目、革翅目、等翅目、虱目、蚤目、毛翅目、鞘翅目昆蟲。60.權(quán)利要求58的殺病蟲害或抑病蟲害組合物,其中病蟲害選自小蠟螟(Achoroiagrisella)、東部黑頭長翅巻蛾(Aclerisgloverana)、黑頭長翅巻蛾(Aclerisvariana)、棉褐帶巻葉蛾(Adoxophyesorana)、小地老虎(Agrotisipsilon)、Alabamaargillacea、秋星尺蠖(Alsophilapometaria)、Amyeloistransitella、地中海粉螟(Anagastakuehniella)、桃條麥蛾(Anarsialineatella)、Anisotasenatoria、拃蠶(Antheraeapernyi)、黎豆夜蛾(Anticarsiagemmatalis)、黃巻蛾屬(Archipssp.)、條巻蛾屬(Argyrotaeniasp.)、Athetismindara、家蠶(Bombyxmori)、棉潛葉蛾(Bucculatrixthurberiella)、粉斑螟(Cadracautella)、色巻蛾屬(Choristoneurasp.)、Cochyllshospes、苜獵粉蝶(Coliaseurytheme)、米蛾(Corcyracephalonica)、Cydialatiferreanus、蘋果囊蛾(Cydiapomonella)、Datanaintegerrima、落葉松毛蟲(Dendrolimussibericus)、Desmiafeneralis、甜瓜絹野螟(Diaphaniahyalinata)、黃瓜絹野螟(Diaphanianitidalis)、西南玉米桿草螟(Diatraeagrandiosella)、小蔗螟(Diatraeasaccharalis)、白尺蠖蛾(Ennomossubsignaria)、丑ore認(rèn)aloftini、煙草粉螟(Esphestiaelutella)、Erannistilaria、細(xì)斑燈蛾(Estigmeneacrea)、Euliasalubricola、Eupocoelliaambiguella、女貞細(xì)巻蛾(Eupoeci1iaambiguella)、黃毒蛾(Euproctischrysorrhoea)、暗緣地老虎(Euxoamessoria)、蠟螟(Galleriamellonella)、梨小食心蟲(Grapholitamolesta)、黑擬蛉蛾(Harrisinaamericana)、Helicoverpasubflexa、谷實(shí)夜蛾(Helicoverpazea)、煙芽夜蛾(Heliothisvirescens)、新墨西哥草原毛蟲(Hemileucaoliviae)、向曰葵斑螟(Homoeosomaelectellum)、美國白蛾(Hyphantiacunea)、Keiferialycopersicella、Lambdinafiscellariafiscellaria、Lambdinafiscellarialugubrosa、雪毒蛾(Leucomasalicis)、葡萄漿果小巻蛾(Lobesiabotrana)、草地螟(Loxostegesticticalis)、舞毒蛾(Lymantriadispar)、Macallathyrisalis、天幕毛蟲屬(Malacosomasp.)、甘藍(lán)燈蛾(Mamestrabrassicae)、Mamestraconfigurata、Manducaquinquemaculata、煙草天蛾(Manducasexta)、豆野螟(Marucatestulalis)、Melanchrapicta、秋尺蛾(Operophterabr蘭ta)、古毒蛾屬(0rgyiasp.)、歐洲玉米螟(0strinianubilalis)、Paleacritavernata、Papiliocresphontes、棉紅鈴蟲(Pectinophoragossypiella)、Phryganidiacalifornica、Phyllo賺ycterblancardella、暗脈菜粉蝶(Pierisnapi)、油菜菜粉蝶(Pierisrapae)、苜藉綠夜蛾(Plathypenascabra)、Platynotaflouendana、荷蘭石竹小巻蛾(Platynotastultana)、Platyptiliacarduidactyla、印度谷螟(Plodiainterpunctella)、小菜蛾(Plutellaxylostella)、Pontiaprotodice、一點(diǎn)粘蟲(Pseudaletiaunipuncta)、大豆夜蛾(Pseudoplasiaincludens)、Sabulodesaegrotata、Schizuraconcinna、麥蛾(Sitotrogacerealella)、蘋白小巻蛾(Spilontaocellana)、灰翅夜蛾屬(Spodopterasp.)、Thaurnstopoeapityocampa、幕谷蛾(Tinsolabissel1iella)、粉玟夜蛾(Trichoplusiahi)、溫室結(jié)網(wǎng)野螟(Udearubigalis)、Xylomygescuriails、和蘋果巢蛾(Yponomeutapadella);歐洲玉米螟(Ostrinianubilalis,Europeancornborer);小地老虎(Agrotisipsilon,blackcutworm);谷實(shí)夜蛾(Helicoverpazeae,cornearworm);草地貪夜蛾(Spodopterafrugiperda,fallarmyworra);西南玉米桿草螟(Diatraeagrandiosella,southwesterncornborer);南美玉米苗斑螟(Elasmopalpuslignosellus,lessercornstalkborer);小蔑螟(Diatraeasaccharalis,surgarcaneborer);西部玉米才艮蟲(westerncornrootworm),例如,玉米才艮螢葉甲(Diabroticavirgiferavirgifera);北部玉米根蟲(northerncornrootworm),例如,Diabroticalongicornisbarberi;南部玉米根蟲(southerncornrootworm),例如,黃瓜十一星葉甲(Diabroticaundecimpunctatahowardi);梳爪叩甲屬(Melanotusspp.),金針蟲(wireworms));圓頭犀金龜(Cyclocephalaborealis,northernmaskedchafer(whitegrub));圓頭無斑犀金龜(Cyclocephalaimmaculata,southernmaskedchafer(whitegrub));曰本麗金龜(Popilliajaponica,Japanesebeetle);玉米跳甲(Chaetocnemapulicaria,cornfleabeetle);玉米象蟲(Sphenophorusmaidis,maizebillbug);玉米組管蜂(Rhopalosiphummaidis,cornleafaphid);玉米根椅(Anuraphismaidiradicis,cornrootaphid);麥長棒(Blissusleucopterusleucopterus,chinchbug);紅腿埴(Melanoplusfemurrubrum,redleggedgrasshopper);遷徙蚱蛭(Melanoplussanguinipes,migratorygrasshopper);灰地種蠑(Hylemyaplatura,seedcornmaggot);玉米斑潛竭(Agromyzaparvicornis,cornblotchleafminer);美洲錐尾薊馬(Anaphothripsobscrurus,grassthrips);竊葉議(Solenopsismilesta,thiefant);二斑葉螨(Tetranychusurticae,twospottedspidermite);高梁高粱螟(Chilopartellus,sorghumborer);草地貪夜蛾(Spodopterafrugiperda,fallarmyworm);谷實(shí)夜蛾(Helicoverpazea,cornearworm);南美玉米苗斑螟(Elasmopalpuslignosellus,lesercornstalkborer);粒趺地老虎(Feltiasubterranea,granulatecutworm);蜂螬(Phyllophagacrinita,whitegrub);(Eleodes),單葉叩曱屬(Conoderus),和Aeolusspp.,金針蟲);黑角負(fù)泥蟲(Oulemamelanopus,cerealleafbeetle);玉米跳甲(Chaetocnemapulicaria,cornfleabeetle);玉米象蟲(Sphenophorusmaidis,maizebillbug);玉米縊管椅(Rhopalosiphummaidis,cornleafaphid);蔑黃偽毛辨(Siphaflava,yellowsugarcaneaphid);麥長蝽(chinchbug),例如,Blissusleucopterusleucopterus;高梁痿蚊(Contariniasorghicola,sorghummidge);朱砂葉竭(Tetranychuscinnabarinuscarminespidermite);二斑葉竭(Tetranychusurticae,two-spottedspidermite);小麥一點(diǎn)粘蟲(Pseudaletiaunipunctata,armyworm);草地貪夜蛾(Spodopterafrugiperda,fallarmyworm);南美玉米苗斑螟(Elasmopalpuslignosellus,lessercornstalkborer)5西部灰地老虎(Agrotisorthogonia,palewesterncutworm);南美玉米苗斑螟(Elasmopalpuslignosellus,lessercornstalkborer);黑角負(fù)泥蟲(Oulemamelanopus,cerealleafbeetle);三葉草葉象(Hyperapunctata,cloverleafweevi1);南部玉米根蟲(southerncornrootworm),例如,黃瓜十一星葉甲(Diabroticaundecimpunctatahowardi);俄國麥辨(Russianwheataphid);麥二叉奸(Schizaphisgraminum,greenbug);麥長管對(Macrosiphumavenae,Englishgrainaphid);紅腿埴(Melanoplusfemurrubrum,redleggedgrasshopper);異黑埴(Melanoplusdifferentialis,differentialgrasshopper),遷徙鲊樣(Melanoplussanguinipes,migratorygrasshopper);小麥黑森癭蚊(Mayetioladestructor,Hessianfly);麥紅吸漿蟲(Sitodiplosismosellana,wheatmidge);美州麥桿錄(Meromyzaamericana,wheatstemmaggot);麥種錄(Hylemyacoarctata,wheatbulbfly);煙薊馬(Frankliniellafusca,tobaccothrips);麥堇蜂(Cephuscinctus,wheatstemsawfly);郁金香癭螨(Aceriatulipae,wheatcurlmite);向曰葵向曰葵莖象甲(Cylindrocupturusadspersus,sunflowerstemweevil);向曰葵紅色種子象(Smicronyxfulus,redsunflowerseedweevil);向曰葵灰色種子象(Smicronyxsordidus,graysunflowerseedweevil);向曰葵食芽蛾(Suleimahelianthana,sunflowerbudmoth);向曰葵螟(Homoeosomaelectellum,sunflowermoth);向曰葵葉甲(Zygogra邁maexclamationis,sunflowerbeetle);胡蘿卜金龜子(Bothyrusgibbosus,carrotbeetle);向曰葵籽癭蚊(Neolasiopteramurtfeldtiana,sunflowerseedmidge);棉煙芽夜蛾(Heliothisvirescens,tobaccobudworm);谷實(shí)夜蛾(Helicoverpazea,棉鈴蟲(cottonbollworm));甜菜夜蛾(Spodopteraexigua,beetarmyworm);紅鈴麥蛾(Pectinophoragossypiella,pinkbollworm);(棉鈴象曱,例如,墨西哥棉鈴象(Anthonomusgrandis));棉奸(Aphisgossypii,cottonaphid);沖帛盲蝽象(Pseudatomoscelisseriatus,cottonfleahopper);束翅粉虱(Trialeurodesabutilonea,bandedwingedwhitefly);無澤盲蜂(Lyguslineolaris,tarnishedplantbug);紅腿蟲皇(Melanoplusfemurrubrum,redleggedgrasshopper);異黑蟲皇(Melanoplusdifferentialis,differentialgrasshopper);蔥薊馬(Thripstabaci,onionthrips);煙薊馬(Franklinkiellafusca,tobaccothrips);朱砂葉螨(Tetranychuscinnabarinus,carminespider邁ite);二斑葉螨(Tetranychusurticae,two-spottedspidermite);稻小蔑螟(Diatraeasaccharalis,sugarcaneborer);草地貪夜蛾(Spodopterafrugiperda,fallarmyworm);谷實(shí)夜蛾(Helicoverpazea,cornearworm);葡萄肖葉甲(Colaspisbrunnea,grapecolaspis)5稻水象甲(Ussorhoptrusoryzophilus,ricewaterweevil);米象(Sitophilusoryzae,riceweevil);二條黑尾葉蟬(Nephotettixnigropictus,riceleafhoper);麥長蝽(chinchbug,e.g.,Blissusleucopterusleucopterus);喜綠蝽(Acrosternumhilare,greenstinkbug);大豆大豆夜蛾(Pseudoplusiaincludens,soybeanlooper);藜豆夜蛾(Anticarsiagemmatalis,velvetbeancaterpillar);苜蓿綠夜蛾(Plathypenascabra,greencloverworm);歐洲玉米螟(0strinianuMlalis,Europeancornborer);小地老虎(Agrotisipsilon,blackcutworm);甜菜夜蛾(Spodopteraexigua,beetarmyworm);煙芽夜蛾(Heliothisvirescens,tobaccobudworm);谷實(shí)夜蛾(Helicoverpazea,棉鈴蟲);墨西哥大豆狐蟲(Epilachnavarivestis,Mexicanbeanbeetle);桃蜂(Myzuspersicae,greenpeachaphid)5馬鈴薯微葉蟬(Empoascafabae,potatoleafhopper)5喜綠蝽(Acrosternumhilare,greenstinkbug);紅腿蟲皇(Melanoplusfemurrubrum,redleggedgrasshopper);異黑蟲皇(Melanoplusdifferentialis,differentialgrasshopper);灰地種錄(Hylemyaplatura,seedcornmaggot);大豆莉馬(Sericothripsvariabilis,soybeanthrips);蔥薊馬(Thripstabaci,onionthrips);土耳其斯坦葉螨(Tetranychusturkestani,strawberryspidermite);二斑葉螨(Tetranychusurticae,two—spottedspidermite);大麥歐洲玉米螟(Ostrinianubilalis,Europeancornborer);小地老虎(Agrotisipsilon,blackcutworm);麥二叉椅(Schizaphisgraminum,greenbug);麥長棒(chinchbug,例如,Blissusleucopterusleucopterus)喜綠蝽(Acrosternumhilare,greenstinkbug);褐臭蝽(Euschistusservus,brownstinkbug);灰地種竭(Jylemyaplatura,seedcornmaggot);小麥黑森癭蚊(Mayetioladestructor,Hessianfly);麥巖螨(Petrobialatens,brownwheatmite);油籽油菜甘藍(lán)埤(Vrevicorynebrassicae,cabbageaphid);十字花科跳甲(Phyllotretacruciferae,cruciferfleabeetle);黃曲條跳曱(Phyllotretastriolata,stripedfleabeetle);芫胥淡足跳曱(Phyllotretanemorum,stripedturnipfleabeetle);油菜露尾甲(Meligethesaeneus,rapeseedbeetle);以及露尾甲(pollenbeetle)(Meligethesrufimanus,Meligethesnigrescens,Meligethescanadianus,和Meligethesviridescens);馬鈴薯科羅拉多馬鈴薯葉甲(Leptinotarsadecemlineata,Coloradopotatobeetle);半翅目昆蟲,例如,豆莢草盲蝽(Lygushesperus),美國牧草盲蜂(Lyguslineolaris),牧草盲蜂(Lyguspratensis),長毛草盲棒(LygusrugulipennisPopp),Lyguspabulinus,Calocorisnorvegicus,0rthopscompestris,Plesiocorisrugicollis,Cyrtopeltismodestus,Cyrtopeltisnotatus,Spanagonicusalbofasciatus,Diaphnocorischlorinonis,Labopidicolaallii,Pseudatomoscelisseriatus,Adelphocorisrapidus,Poecilocapsus1ineatus,麥長棒(Blissusleucopterus),小長蝽(Nysiusericae),谷長蝽若蟲(Nysiusraphanus),褐臭棒(Euschistusservus),稻綠棒(Nezaraviridula),扁盾棒屬(Eurygaster),緣蜂科(Coreidae),紅蝽科(Pyrrhocoridae),(Tinidae),負(fù)子蝽科(Blostomatidae),獵棒科(Reduviidae),和臭蝽科(Cimicidae);目的病蟲害也包括咖啡豆象(Araecerusfasciculatus,coffeebeanweevil);菜豆象(Acanthoscelidesobtectus,beanweevil);蠶豆象(Bruchusrufmanus,broadbeanweevil);豌豆象(Bruchuspisorum,peaweevi1);巴西豆象(Zabrotessubfasciatus,Mexicanbeanweevil);黃瓜條葉甲(Diabroticabalteata,bandedcucumberbeetle);菜豆螢葉甲(Cerotomatrifurcata,beanleafbeetle);玉米根葉曱(DiabroUcavirgiferaMexicancornrootworm);美洲馬鈴薯跳甲(Epitrixcucumeris,potatofleabeetle);甘薯葉曱(Chaetocnemaconfinis,sweetpotatofleabeetle);苜蓿葉象蟲(Hyperapostica,alfalfaweevil);蘋果象甲(Anthonomusquadrigibbus,applecurculio);豆莖象(Sternechuspaludatus,beanstalkweevil);埃及苜蓿葉象(Hyperabrunnipennis,Egyptianalfalfaweevil);谷象(Sitophilusgranaries,granaryweevil);葡萄象甲(Craponiusinaequalis,grapecurculio);玉米象(Sitophiluszeamais,maizeweevil);李象(Conotrachelusnenuphar,plumcurculio);西印度群島甘薯象曱(Euscepespostfaciatus,WestIndiansweetpotatoweevil);紫絨熟角金龜(Maladeracastanea,Asiaticgardenbeetle);歐洲切根熟金龜(Rhizotrogusmajalis,Europeanchafer);薔薇緦角金龜(Macrodactylussubspinosus,rosechafer);雜擬谷盜(Triboliumconfusum,confusedflourbeetle);黑粉蟲(Tenebrioobscurus,darkmealworm);赤擬谷盜(Triboliumcastaneum,redflourbeetle);黃粉蟲(Tenebriomolitor,yellowmealworm)。61.權(quán)利要求58的殺病蟲害或抑病蟲害組合物,其中病蟲害是選自下列的線蟲胞嚢線蟲屬、根結(jié)線蟲屬和球形胞嚢線蟲屬(Globoderaspp.);尤其是胞嚢線蟲成員,包括但不限于,大豆胞嚢線蟲;甜菜胞嚢線蟲;禾谷胞嚢線蟲;和馬鈴薯金線蟲和馬鈴薯白線蟲(馬鈴薯胞嚢線蟲)以及Lesion線蟲,包括根腐線蟲屬。全文摘要本發(fā)明一般涉及一種控制植物病原體,包括植物病蟲害,的多面性方法,更具體地,本發(fā)明涉及經(jīng)遺傳修飾產(chǎn)生至少兩種殺病蟲害藥劑或抑病蟲害藥劑的植物例如農(nóng)作物,其中至少一種藥劑是來自茄科(solanaceae)的絲氨酸蛋白酶抑制劑或其前體,且至少一種其它藥劑是選自Bt蛋白、CRY家族成員、VIP和防衛(wèi)素的非絲氨酸蛋白酶抑制劑,并且其中所述植物對病蟲害表現(xiàn)出抗性或降低的易感性。文檔編號(hào)A01N65/00GK101257792SQ200680032647公開日2008年9月3日申請日期2006年7月6日優(yōu)先權(quán)日2005年7月8日發(fā)明者M(jìn)·A·安德森,R·L·希思申請人:赫?,斢邢薰?
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