專利名稱：用于治療病毒疾病的提取物的應(yīng)用的制作方法
用于治療病毒疾病的提取物的應(yīng)用
背景信息
本發(fā)明涉及用于治療病毒疾病的石榴和綠茶提取物的組合的應(yīng)用。在一 個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及用含有所述植物提取物的組合物治療病毒病損，
例如治療由單純皰疹病毒(HSV)導(dǎo)致的感冒瘡。
感冒瘡常常與令人不快的紅斑有關(guān)，然而許多受該病毒感染的個(gè)體證實(shí) 它是在我們社會(huì)中的相關(guān)病毒。也稱為熱病性皰疹，感冒瘡是由位于感冒瘡 患者神經(jīng)中的單純皰疹病毒引起的。單純皰疹病毒是皰疹病毒家族的成員， 享有能夠在體內(nèi)，尤其是神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)長(zhǎng)時(shí)間潛伏，或者持續(xù)個(gè)體一生潛伏的 獨(dú)特性質(zhì)。
感冒瘡具傳染性且會(huì)復(fù)發(fā)。第一次爆發(fā)常常發(fā)生在首次感染病毒后1-3 周。病毒最常通過接觸受感染個(gè)體的開放瘡而傳播。然而，該病毒甚至可以 在沒有開放瘡或者任何癥狀的情況下傳播。瘡最初是皮膚上小的充滿液體的 水皰的形式。
癥狀包括但不限于發(fā)熱、肌肉痛、腺體腫大、不適、瘙癢、炎癥、刺
激、疼痛、腫脹和灼燒。這些癥狀隨后是最初的麻刺感，然后是痛苦的水
皰。瘡?fù)ǔ５某掷m(xù)時(shí)間是2-3周，水皰結(jié)疤并最終從皮膚上完全脫落，通常受 患皮膚區(qū)域沒有任何瘢痕。
爆發(fā)的原因包括感冒或其他感染導(dǎo)致的免疫系統(tǒng)衰弱，受感染個(gè)體攜
帶病毒的時(shí)間長(zhǎng)度，疲憊，情緒壓力和身體應(yīng)激，月經(jīng)周期，免疫抑制，過 度暴露于風(fēng)和陽(yáng)光，使用藥物和酗酒。
最重建的病毒類型是單純皰疹病毒-l(HSV-l)和單純皰疹病毒-2(HSV-2)。 兩種病毒間的主要區(qū)別在于它們?cè)隗w內(nèi)的潛伏部位。HSV-1通常潛伏在三叉 神經(jīng)節(jié)，位于耳朵周圍的神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)，而HSV-2通常潛伏在骶神經(jīng)節(jié)，位于 脊柱基部的神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)。
HSV-1與唇周圍形成的感冒瘡的形成有關(guān)，受感染個(gè)體的下顎、鼻孔、手指以及牙齦和口腔頂部也不少。雖然公知可能較少知道，非常不尋常的是 在HSV-1患者生殖器區(qū)域中感冒瘡的形成。由于比健康風(fēng)險(xiǎn)的社會(huì)接受度更
高且通常更加不便而被公眾拋棄，HSV-1可導(dǎo)致受感染個(gè)體嚴(yán)重的危險(xiǎn)。 HSV-1可擴(kuò)散至眼睛，引起眼皰疹而可能導(dǎo)致失明。HSV-1也能夠擴(kuò)散至 腦，引起皰疹腦炎而導(dǎo)致死亡。
最聲名狼藉的單純皰疹病毒HSV-2與生殖區(qū)的感冒瘡有關(guān)。相信每4位 個(gè)體中約有l(wèi)位被HSV-2感染。HSV-2也可擴(kuò)散至眼和腦，如上所述。HSV-2不僅是不安且常常痛苦的身體折磨，而且可能導(dǎo)致患者情緒和心理上的痛 苦。
單純皰疹病毒-3(HSV-3)也稱為水痘-帶狀皰疹病毒，可導(dǎo)致水痘病，然后 是帶狀皰疹。水痘是導(dǎo)致水痘病的原發(fā)性感染。水痘病最初表現(xiàn)為腹部、胸 部和面部小的紅色腫塊，然后形成水皰，最終結(jié)疤并從身體脫落。雖然直到 感染該病毒后大約2天才表現(xiàn)癥狀，但癥狀可持續(xù)5-10天，包括瘙癢紅疹、 發(fā)熱和頭疼。
高度傳染性的水痘病通過受感染個(gè)體擴(kuò)散，最常通過打噴嚏、咳嗽和呼 吸擴(kuò)散。然后被吸入新感染的個(gè)體的肺部，進(jìn)入血流。進(jìn)入神經(jīng)細(xì)胞，病毒 潛伏數(shù)年，甚至一生，可能以帶狀皰疹的形式再現(xiàn)。認(rèn)為帶狀皰疹僅僅從水 痘病患者感染，從不會(huì)從帶狀皰疹個(gè)體感染。帶狀皰疹的最初癥狀通常包括 皮膚內(nèi)或皮膚下的麻刺感、瘙癢、麻木、或刺痛。帶狀皰疹通常感染身體一 側(cè)，特征是嚴(yán)重疼痛和瘙癢水皰的爆發(fā)。皰疹后神經(jīng)痛是一種痛苦的帶狀皰 疹后效應(yīng)。皰疹后神經(jīng)痛的治療包括甾體、抗病毒藥物、抗抑郁藥、抗驚厥 藥和局部試劑。
抗病毒劑如阿昔洛韋、伐昔洛韋或泛昔洛韋(farcyclovir)可用于治療口腔
和生殖器HSV-1和HSV-2，以及HSV-3導(dǎo)致的帶狀皰疹和水痘病。這些抗病
毒劑降低水皰治愈所需的時(shí)間，可有規(guī)律地口服攝取以預(yù)防復(fù)發(fā)。然而，這
些現(xiàn)有的藥物可導(dǎo)致副作用，例如惡心、嘔吐、腹瀉、頭痛、眩暈和/或皮
疹， 一些使用者可發(fā)生定向障礙、幻覺、譫妄和震顫。給予阿昔洛韋、伐昔
洛韋或泛昔洛韋也可能導(dǎo)致腎功能異常。建議預(yù)先存在腎功能障礙或脫水、
或患有肝功能障礙的患者小心使用這些藥物。腎毒性藥物、 一些鎮(zhèn)痛藥和環(huán) 孢霉素間的藥物相互作用也可能導(dǎo)致腎功能異常。因此，需要治療病毒病損(例如感冒瘡)的新的安全有效的組合物，該組合 物能夠最大程度地降低和/或消除損傷的數(shù)量和/或嚴(yán)重性。發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明涉及包含石榴提取物和綠茶提取物的組合物，并涉及使用這些植 物提取物來(lái)治療(例如)病毒病損的方法。在一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及治療病毒病損的方法，該方法包括給予 需要這種治療的對(duì)象組成包含石榴提取物和綠茶提取物的組合物。在一些實(shí)施方式中，病毒病損是皰疹病毒(例如HSV-1、 HSV-2或HSV-3) 導(dǎo)致的損傷。在其他實(shí)施方式中，病毒病損是感冒瘡。在一些實(shí)施方式中，給藥方法是局部給藥，例如對(duì)損傷局部使用提取物/ 組合物。在其他實(shí)施方式中，給藥方法是口服。另一方面，本發(fā)明涉及在受病毒(例如單純皰疹病毒)感染的對(duì)象中治療一 種或多種與病毒感染有關(guān)的癥狀的方法，該方法包括給予包含石榴提取物和 綠茶提取物的組合物。在一些實(shí)施方式中，癥狀包括發(fā)熱、肌肉痛、腺體 腫大、不適、瘙癢、炎癥、刺激、疼痛、腫脹和灼燒。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及控制由單純皰疹病毒導(dǎo)致的病毒生長(zhǎng) 和復(fù)制的方法，該方法包括給予需要這種治療的對(duì)象包含石榴提取物和綠茶 提取物的組合物。在其他實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及用還包含至少一種以下成分的組合物進(jìn) 行治療的方法(i)保護(hù)皮膚的活性成分，選自尿囊素、氫氧化鋁凝膠、爐甘 石、可可豆脂、魚肝油、膠態(tài)燕麥片、二甲硅油、甘油、硬脂、高嶺土、羊 毛脂、礦物油、凡士林、碳酸氫鈉、局部用淀粉、白凡士林、醋酸鋅和/或氧 化鋅；(ii)外用麻醉劑或止癢成分，選自苯佐卡因、苦味酸氨苯丁酯、二丁卡因、鹽酸二丁卡因、鹽酸奎尼卡因、鹽酸達(dá)克羅寧、利多卡因、鹽酸利多 卡因、鹽酸丙嗎卡因、丁卡因、鹽酸丁卡因、苯甲醇、樟腦、樟腦間甲酚(camphorated metacresol)、杜松焦油、薄荷醇、苯酚、苯酚鈉、間苯二酚、鹽 酸芐吡二胺、阿司匹林、氫化可的松、醋酸氫化可的松和/或鹽酸苯海拉明； 和/或(iii)其他成分，選自異硫氰酸烯丙酯、氨溶液、阿司匹林、酒石酸鉍鈉、 辣椒素、辣椒油樹脂、水合氯醛、三氯叔丁醇、硫酸環(huán)美卡因、桉樹油、丁香酚、水楊酸乙二醇酯、己雷瑣辛、二鹽酸組胺、鹽酸磺甲比林(metapyriline hydrochloride)、煙酸甲酯、水楊酸甲酯、果膠、水楊酰胺、鞣酸、麝香草 酚、水楊酸三乙醇胺、松節(jié)油、硫酸鋅、醋酸鋁、硫酸鋁、蔗糖硬脂酸酯、 蔗糖二硬脂酸酯和/或美洲金縷梅。在其他實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及用還包含一種或多種選自下組的試劑的 組合物進(jìn)行治療的方法，所述試劑選自抗微生物劑、其他抗病毒劑、抗真 菌劑、抗氧化劑、抗炎劑、安撫劑、緩沖劑、遮光劑、化妝品試劑、芳香 劑、軟化劑、增濕劑、干燥劑和增稠劑。發(fā)明詳述定義如本說(shuō)明書中所用，下面的字詞和短語(yǔ)一般旨在具有下面所提及的涵 義，除非使用這些字詞和短語(yǔ)的上下文中清楚指出例外。術(shù)語(yǔ)"收斂活性成分"包括但不限于醋酸鋁、硫酸鋁和北美金縷梅。術(shù)語(yǔ)"化妝品"包括化妝品、底妝、皮膚護(hù)理產(chǎn)品。術(shù)語(yǔ)"化妝"指在臉上 留下顏色的產(chǎn)品，包括妝底，即遮瑕膏、唇膏、口紅等。術(shù)語(yǔ)"妝底"指甚至超 出整個(gè)皮膚彩妝的液體、乳膏、摩絲、粉餅、遮瑕膏等產(chǎn)品。妝底通常在保 濕和/或油性皮膚上作用良好。術(shù)語(yǔ)"皮膚護(hù)理產(chǎn)品"指用于治療或以其他方式 護(hù)理，用于保濕、改善或清潔皮膚的產(chǎn)品。術(shù)語(yǔ)"化妝品"還包括人體非處方應(yīng) 用的其他安全的皮膚保護(hù)性藥物產(chǎn)品，如21 CFR 347和21 CFR 348聯(lián)邦法規(guī) 條文中所定義的那些。術(shù)語(yǔ)"有效量"指給予需要這種治療的哺乳動(dòng)物時(shí)，足以實(shí)現(xiàn)治療作用的 本發(fā)明提取物/化合物/組合物的量。有效量將根據(jù)需要治療的對(duì)象和疾病狀 況、對(duì)象的體重和年齡、疾病狀況的嚴(yán)重性、所選擇的具體提取物、遵循的 給藥方案等因素而變化，所有這些可由本領(lǐng)域普通技術(shù)人員容易確定。術(shù)語(yǔ)"外用鎮(zhèn)痛、麻醉和止癢活性成分"包括但不限于苯佐卡因、苦味 酸氨苯丁酯、二丁卡因、鹽酸二丁卡因、鹽酸奎尼卡因、鹽酸達(dá)克羅寧、利 多卡因、鹽酸利多卡因、鹽酸丙嗎卡因、丁卡因、鹽酸丁卡因、苯甲醇、樟 腦、樟腦間甲酚、杜松焦油、薄荷醇、苯酚、苯酚鈉、間苯二酚、鹽酸芐吡二胺、阿司匹林、氫化可的松、醋酸氫化可的松和鹽酸苯海拉明。術(shù)語(yǔ)"炎癥"指由組織破壞引起的局部防護(hù)效應(yīng)。其特征是疼痛、發(fā)熱、 泛紅和/或腫脹等征兆。術(shù)語(yǔ)"藥學(xué)上可接受的"是指合理醫(yī)療判斷范圍內(nèi)的這些提取物、材料、 組合物和/或劑型適用于接觸人體和動(dòng)物組織而不會(huì)產(chǎn)生與合理的效益/風(fēng)險(xiǎn)比 相適應(yīng)的過度毒性、刺激性、過敏反應(yīng)或其他問題并發(fā)癥。術(shù)語(yǔ)"皮膚護(hù)理產(chǎn)品"可包括但不限于21 CFR 347.10, 347.12和348.10中公布的保護(hù)皮膚的活性成分、收斂活性成分、外用鎮(zhèn)痛、麻醉和止癢活性成 分，以及55FR3370中公布的其他成分，或它們的混合物。術(shù)語(yǔ)"保護(hù)皮膚的活性成分"包括但不限于尿囊素、氫氧化鋁凝膠、爐 甘石、可可豆脂、魚肝油、膠態(tài)燕麥片、二甲硅油、甘油、硬脂、高嶺土、 羊毛脂、礦物油、凡士林、碳酸氫鈉、局部用淀粉、白凡士林、醋酸鋅和氧 化鋅。保護(hù)皮膚的活性成分可還包括遮光劑。術(shù)語(yǔ)"遮光劑"可包括但不限于有機(jī)或無(wú)機(jī)遮光劑，防曬乳二氧化鈦和 氧化鋅，以及皮膚保護(hù)劑和/或它們的混合物。最小SPF值不小于2的遮光產(chǎn)品包括但不限于氨苯甲酸(PABA);阿伏苯宗、西諾沙酯、二羥苯宗、胡莫柳、鄰氨基苯甲酸薄荷酯、甲氧基肉桂酸酯、氰雙苯丙烯酸辛酯、甲氧基肉 桂酸辛酯、水楊酸辛酯、羥苯甲酮、二甲氨苯酸辛酯、苯基苯并咪唑磺酸、 舒利苯酮、二氧化鈦、水楊酸三乙醇胺、二氧化鈦和氧化鋅。術(shù)語(yǔ)"局部施用"表示例如用手或用諸如擦巾、粉撲、輥?zhàn)踊驀婌F器等施 加器直接涂覆或分散到外皮上。如本文所用，"局部用載體"表示適用于哺乳動(dòng) 物局部給藥的一種或多種相容的固體或液體填充稀釋劑。局部用載體的例子包括但不限于水、蠟、油、軟化劑、乳化劑、增稠劑、膠凝劑以及它們的混合物。術(shù)語(yǔ)"治療"或"處理"表示任何哺乳動(dòng)物疾病或病癥的治療，包括(i)抑制 疾病或病癥，即阻止或限制疾病或病癥臨床癥狀的發(fā)展；和/或(ii)緩解疾病或 病癥，即使得疾病或病癥的臨床癥狀消退或治愈；和/或(iii)加速損傷愈合；和 /或(iv)防止或保護(hù)疾病或病癥，即使得不發(fā)生臨床癥狀。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)理 解，在人類醫(yī)學(xué)中，不總是能夠區(qū)分"防止"與"抑制"，因?yàn)樽罱K誘發(fā)的一種或 多種事件可能未知，潛在，或者患者未探知，直到這些事件發(fā)生之后。因此，本文所用術(shù)語(yǔ)"預(yù)防"或"預(yù)防性"旨在作為"治療"的元素，包括本文所定義的"防止"和"抑制"。本文所用術(shù)語(yǔ)"保護(hù)"表示包括"預(yù)防"和"防止"。例子包括 但不限于抑制病毒感染癥狀(例如損傷)的復(fù)發(fā)或惡化。術(shù)語(yǔ)"病毒病損"指所有病毒病癥感染的損傷，例如所有皰疹，包括但不 限于感冒瘡、生殖器皰疹、帶狀皰疹、水痘、各種帶狀皰疹形式以及其他病 毒性病癥。該術(shù)語(yǔ)并不限于口面部損傷，包括所有身體部位上的表現(xiàn)形式。本發(fā)明的提取物本發(fā)明的組合物包含來(lái)自石榴的提取物和來(lái)自綠茶的提取物。"提取物" 表示從植物(例如綠茶或石榴植物)分離的化合物的摻混物。這些化合物可通過 物理摘除一株植物，由一個(gè)或多個(gè)植株部分分離得到(例如，全植株、植株的 花、種子、根、根莖、莖、果實(shí)和/或葉)，例如研磨植物的花。這些化合物也可采用本領(lǐng)域公知的萃取方法從植物萃取(例如，用有機(jī)溶劑如CVCs低級(jí) 醇、CrQ垸基多元醇、d-Q烷基酮、d-C8烷基醚、乙酸CVQ烷基酯和氯 仿，和/或無(wú)機(jī)溶劑如水、無(wú)機(jī)酸如鹽酸、無(wú)機(jī)堿如氫氧化鈉)?；衔锏睦?包括但不限于鞣花酸、單寧、咖啡因和兒茶素如表掊兒茶酸沒食子酸酯 (Epigallocatechin Gallate)。本發(fā)明的組合物包含綠茶提取物。"綠茶"提取物指來(lái)自茶屬植物的提取 物。茶屬植物的例子包括但不限于茶種(sinensis)、大理茶種(taliensis)、滇緬 茶禾中(irrawadiensis)和日本山茶(japonica)。茶屬提取物參見Takehiko Yamamoto: Lekh Raj Juneja, D.C. Chu, Mujo Kim, L.R. Juneja, M. Kim在Chemistry and Applications of Green Tea(綠茶化學(xué)和應(yīng)用)中的描述(CRC出版社1997)。本發(fā)明的組合物也包含石榴提取物。"石榴提取物"指來(lái)自石榴屬植物的 提取物。石榴屬植物的例子包括但不限于石榴種(granatum)。石榴提取物參見 Ross, Ivan A.在Medicinal Plants of the World(世界醫(yī)用植物)第1巻中的描述 (Humana出版社2003)。在一個(gè)實(shí)施方式中，組合物中植物提取物的含量約為0.001-20重量％， 具體約為0.1-10重量％。除非另有說(shuō)明，提取物的重量指提取物的干重。應(yīng)用、測(cè)試與給藥 一般應(yīng)用本發(fā)明的提取物、組合物/制劑和方法可用于治療或控制病毒疾病和/或其 癥狀。病毒疾病可包括但不限于傳染性軟疣；人嗜T淋巴細(xì)胞病毒 (HTLV);人免疫缺陷病毒(HIV);獲得性免疫缺陷病毒(AIDS);人乳頭狀瘤病 毒；皰疹病毒；皰疹；病毒性痢疾；沙粒病毒；日冕病毒；腸道病毒；感 冒；流感；麻疹；風(fēng)疹；水痘；腮腺炎；脊髓灰質(zhì)炎；狂犬?。粏魏思?xì)胞增 多癥；埃博拉病毒；呼吸道合胞病毒；登革熱；黃熱??；拉沙熱；布尼亞病 毒；纖絲病毒；黃病毒；漢坦病毒；輪狀病毒；西尼羅熱；蟲媒病毒；副流 行性感冒；天花；EB病毒；細(xì)胞巨化病毒；病毒性胃腸炎；急性闌尾炎；肝 炎(A-E; X);感冒瘡；腦膜炎；腦炎；帶狀皰疹；肺；立夫特山谷熱；亨德 拉熱(hendra fever);薔薇疹；白蛉熱；嚴(yán)重急性呼吸道綜合征(SARS);疣；貓 抓??；傳染性紅斑綜合征；羊痘；手、足、口疾?。缓兔倒蹇氛?。本發(fā)明的一個(gè)目的是控制病毒性疾病如單純皰疹病毒(HSV-1、 HSV-2或 HSV-3)。本發(fā)明的另一個(gè)目的是改善與病毒感染有關(guān)的癥狀，所述癥狀包括 但不限于發(fā)熱、肌肉痛、腺體腫大、不適、瘙癢、炎癥、刺激、疼痛、腫 脹和灼燒。本發(fā)明的一個(gè)目的是提供用于在病毒活躍期過程中治療或控制HSV-1和 HSV-2的改良的組合物和方法。本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供有助于消除和/或 降低HSV-1和HSV-2導(dǎo)致的感冒瘡的數(shù)量的組合物。本發(fā)明的另一個(gè)目的是 提供有助于防止HSV-1和HSV-2導(dǎo)致的新的感冒瘡的爆發(fā)的組合物。本發(fā)明 的另一個(gè)目的是減少感冒瘡的治愈時(shí)間。本發(fā)明的另一個(gè)目的是控制HSV-1和HSV-2導(dǎo)致的病毒生長(zhǎng)和/或復(fù)制。本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供可與常規(guī)病毒病損藥物聯(lián)合使用以減輕表現(xiàn) 的組合物和組合物的成分。本發(fā)明的目的也是提供用于新型組合療法以最大 限度地控制病毒病損的使用本發(fā)明的組合物與常規(guī)病毒病損治療的方法。相 應(yīng)的目的是緩解受HSV-1和HSV-1折磨的人頻繁遭受的不良社交和心理沖擊。本發(fā)明的一個(gè)目的是提供用于在病毒活躍期過程中治療和控制HSV-3的 改良的組合物和方法。本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供有助于消除和/或降低HSV-3導(dǎo)致的水痘數(shù)量的組合物。本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供可與常規(guī)水痘藥物聯(lián)合使用以減輕其表現(xiàn)和/ 或減輕相關(guān)炎癥和刺激(包括瘙癢)的組合物和組合物的成分。本發(fā)明的另一個(gè) 目的也是提供使用本發(fā)明的組合物與常規(guī)水痘治療的方法，以提供最大限度 地控制水痘的新型組合療法。本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供有助于消除和/或降低HSV-3導(dǎo)致的帶狀皰疹 數(shù)量的組合物。本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供可與常規(guī)帶狀皰疹藥物聯(lián)合使用 以減輕其表現(xiàn)和/或減輕相關(guān)癥狀(從輕微瘙癢到嚴(yán)重而劇烈的疼痛)的組合物 和組合物的成分。本發(fā)明的另一個(gè)目的也是提供使用本發(fā)明的組合物與常規(guī) 帶狀皰疹治療的方法，以提供最大限度地控制帶狀皰疹的新型組合療法。測(cè)試本部分描述了如何選擇包含本發(fā)明提取物的組合物。抗病毒活性的體外評(píng)價(jià)可通過J /Voc/. (1990) 53， 340-344中報(bào)道的斑 塊減少；或?qū)嵤├?所述進(jìn)行確定。在預(yù)生長(zhǎng)的維洛細(xì)胞(Vero cell) (ATCC CCL-81)中加入與含有各種濃度的測(cè)試提取物的完全培養(yǎng)基混合的病毒懸液 (ATCC VR-260)，將該混合物進(jìn)行孵育直到在未處理的病毒對(duì)照培養(yǎng)基中觀察 到最大細(xì)胞病變效應(yīng)(CPE)。通過染料(MTS, (3-[4,5-二甲基噻唑-2-基-5]-[3-羧 甲氧基苯基]-2-[4-磺苯基]-2H四唑鹽))攝取方法(Promega的細(xì)胞效價(jià)水性單一 溶液(Cell Titer Aqueous One Solution))來(lái)確定CPE抑制。該方法測(cè)定細(xì)胞活 力，根據(jù)活的宿主細(xì)胞的線粒體酶對(duì)MTS甲臘的基于四唑鹽的MTS的減 少。然后通過分光光度法測(cè)定MTS甲Sf的紫色。每種培養(yǎng)物的光密度(OD)值 是甲臘含量的函數(shù)，甲膘含量則與活細(xì)胞的數(shù)量成比例。本發(fā)明的提取物顯 示優(yōu)異的抗病毒活性，如表l所述。抗炎活性的體內(nèi)評(píng)價(jià)可通過已很好表征的試驗(yàn)進(jìn)行測(cè)定，該試驗(yàn)測(cè)量角 叉菜膠-誘導(dǎo)的爪子水腫，根據(jù)局部應(yīng)用TPA的小鼠耳部炎癥應(yīng)答(Gabor, M., 小鼠耳部炎癥模型及其藥理學(xué)應(yīng)用(Mowse五ar /"/7awwa"o" Afocfefc aw/ P/zwmflco/ogZca/ ^ p//ca /ora), 2000).角叉菜膠誘導(dǎo)爪子水腫是一種炎癥模型， 在對(duì)大鼠爪子內(nèi)跖面給予角叉菜膠后導(dǎo)致時(shí)間依賴性水腫形成。對(duì)小鼠耳部 應(yīng)用12-0沖四垸酰基佛波醇-13-乙酸酉旨(TPA)導(dǎo)致即刻血管舒張和紅斑，然后 迅速發(fā)展為水腫，5-6小時(shí)達(dá)到最大程度。水腫的發(fā)生與蛋白質(zhì)和白細(xì)胞的外滲同步。該試驗(yàn)測(cè)定測(cè)試提取物通過全身或局部給藥途徑治療這些炎癥過程 的能力。給藥在一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的提取物可以藥學(xué)有效量，例如足以提供前 述疾病狀況的治療的劑量進(jìn)行給藥。本發(fā)明提取物的給予可通過用于類似用 途的試劑的任何已接受的給藥模式。在采用本發(fā)明提取物治療上述病癥的過程中，可使用任何藥學(xué)上可接受 的給藥模式。本發(fā)明的提取物可單獨(dú)給予或與其他藥學(xué)上可接受的輔料聯(lián)合 給予，包括固體、半固體、液體、或氣溶膠劑型，例如片劑、膠囊、粉末、 顆粒劑、扁膠囊、液體制劑、混懸劑、溶液劑、栓劑、氣霧劑等。本發(fā)明的 提取物也可以緩釋或控釋劑型給予，包括長(zhǎng)效注射劑、滲透泵、丸劑、經(jīng)皮 (包括電轉(zhuǎn)運(yùn))貼片等，使得提取物以預(yù)定的速率長(zhǎng)時(shí)間給予，即適用于精確劑 量單次給藥的單位劑量形式。組合物通常包含常規(guī)藥學(xué)載體或輔料及本發(fā)明 的提取物。此外，這些組合物還可包含其他藥用試劑、藥劑、載體、佐劑 等，包括但不限于滲透促進(jìn)劑和緩釋制劑。本發(fā)明的組合物和方法可用于需要治療或改善病毒病損的皮膚護(hù)理應(yīng)用。例如，本發(fā)明的提取物和組合物可摻入滯留(leave-on)制劑中拭子；藥 巾；藥簽；護(hù)膚液；藥膏；凝膠；乳膏；油；軟膏；糊劑；香油；酊劑；乳 劑；膠體懸浮液；唇膏；和棒(stick)組合物。被配制成溶液形式的本發(fā)明的組合物中適用于局部給予的組合物通常包 含藥學(xué)上可接受的水性或有機(jī)溶劑。術(shù)語(yǔ)藥學(xué)上可接受的有機(jī)溶劑指能夠?qū)?本發(fā)明的組合物分散或溶解在其中、并具有可接受的安全性(例如刺激性和致 敏特性)的溶劑。合適的有機(jī)溶劑的例子包括丙二醇；聚乙二醇(200-600); 聚丙二醇(425-2025);甘油；1,2,4-丁三醇；山梨糖醇酯；1,2,6-己三醇；乙醇；異丙醇；丁三醇；山梨糖醇酯；1,2,6_己三醇；乙醇；異丙醇；丁二醇； 以及它們的混合物。本發(fā)明局部制劑通常包含新的本發(fā)明組合物以及任選的極性溶劑。適用 于本發(fā)明制劑的溶劑包括能夠溶解新的本發(fā)明組合物的任何極性溶劑。合適 的極性溶劑包括水；醇(例如乙醇、丙醇、異丙醇、己醇和苯甲醇)；多元醇(例如丙二醇、聚丙二醇、丁二醇、己二醇、山梨糖醇和甘油；和溶解在甘 油、芳香油中的泛醇以及它們的混合物。也可使用這些溶劑的混合物。示例 性的極性溶劑是多元醇和水，例如但不限于甘油，二醇如丙二醇和丁二 醇，聚乙二醇，水以及它們的混合物。本發(fā)明局部組合物中可加入軟化劑。軟化劑組分可包括脂肪、油、脂肪 醇、脂肪酸和酯，它們有助于應(yīng)用和粘合，產(chǎn)生光澤，最重要的是提供閉合 保濕性?？墒褂玫暮线m的軟化劑是異硬脂酸衍生物、棕櫚酸異丙酯、羊毛脂油、二異丙基二聚酯(diisopropyl dimerate)、馬來(lái)酸化大豆油、棕櫚酸辛 酯、異硬脂酸異丙酯、乳酸十六垸基酯、蓖麻油酸十六垸基酯、醋酸生育 酚、乙?；蛎?、十六垸基乙酸酯、聚苯基三甲基硅氧烷、油酸甘油 酯、亞油酸生育酚酯、麥芽甘油酯、丙酸二十烷基酯(arachidylpropionate)、乳 酸十四烷基酯、油酸癸酯、蓖麻油酸丙二醇酯、羊毛脂酸異丙酯、季戊四醇 四硬脂酸酯、新戊二醇二辛酸酯/二癸酸酯、氫化可可甘油酯、異壬酸異壬 酯、異十三垸醇異壬酸酯、肉豆蔻醇肉豆蔻酸酯(myristalmyristate)、三異鯨蠟 醇檸檬酸酯、十六醇、辛基十二垸醇、油醇、泛醇、羊毛脂醇、亞油酸、亞 麻酸、脂肪酸蔗糖酯、羥基硬脂酸辛酯以及它們的混合物。其他合適的軟化 劑的例子參見化妝品條目參考(Cosmetic Bench Reference)，第1.19-1.22頁(yè) (1996)，納入本文作為參考。合適的軟化劑包括極性潤(rùn)滑乳化劑(例如線性或 支鏈聚甘油酯)和非極性軟化劑。本文所用術(shù)語(yǔ)"極性軟化劑"是指具有至少一個(gè)極性部分的任何潤(rùn)滑乳化 劑，化合物在極性軟化劑中的溶解度(30。C)大于約1.5%，大于約2%，或大于 約3%。合適的極性軟化劑包括但不限于多元醇指和多元醇醚，例如線性支 鏈聚甘油酯和聚甘油醚。這種軟化劑的非限制例子包括聚甘油基-3-二異硬 脂酸酯、聚甘油基-2-倍半異硬脂酸酯、聚甘油基-5-二硬脂酸酯、聚甘油基-10-二硬脂酸酯、聚甘油基-10-二異硬脂酸酯、乙?；瘑嗡岣视王ァ⒏视王?、 甘油基三辛酸酯/癸酸酯、蓖麻油酸甘油酯、異硬脂酸甘油酯、十四垸酸甘油 酯、亞油酸甘油酯、聚垸二醇如PEG600、單酸甘油酯、2-月桂酸單甘油酯(2陽(yáng) monolaurin)、去水山梨糖醇酯以及它們的混合物。本文所用"非極性軟化劑"表示不具有永久性電距的任何潤(rùn)滑乳化劑。合 適的非極性軟化劑包括但不限于酯和線性或支鏈烴。這種軟化劑的非限制性例子包括但不限于異壬酸異壬基酯、異硬脂酸異丙酯、羥基硬脂酸辛 酯、二異丙基二聚酯、羊毛脂油、棕櫚酸辛酯、棕櫚酸異丙酯、石蠟、異鏈
垸烴(isoparafm)、乙?；蛎?、蔗糖脂肪酸酯、十四垸酸異丙酯、硬脂酸異 丙酯、礦物油、硅油、二甲硅油、尿囊素、異十六烷、異十二烷、凡士林以 及它們的混合物。化合物在極性或非極性軟化劑中的溶解度根據(jù)本領(lǐng)域已知 的方法進(jìn)行確定。
起軟化劑作用的油還可賦予化妝品組合物(例如唇膏)以粘性、粘著性和拖
曳性質(zhì)。合適的油的例子包括但不限于辛酰甘油三酯；癸酰甘油三酯；異
硬脂酰甘油三酯；己二酰甘油三酯(adipic triglyceride);十四垸基乙酸丙二醇 酯；羊毛脂；羊毛脂油；聚丁烯；棕櫚酸異丙酯；十四烷酸異丙酯；異硬脂 酸異丙酯；癸二酸二乙酯；己二酸二異丙酯；乙酸生育酚；亞油酸生育酚 酯；硬脂酸十六烷基酯；乳酸乙酯；油酸十六烷基酯；蓖麻油十六烷基酯； 油醇；十六烷醇；羥基硬脂酸辛酯；辛基十二烷醇；麥胚芽油；氫化植物 油；蓖麻油；凡士林；改性的羊毛脂；支鏈烴；醇和酯；玉米油；棉籽油； 橄欖油；棕櫚仁油；菜籽油；紅花油；希蒙得木油；月見草油；鱷梨油；礦 物油；牛油樹脂；棕櫚酸辛酯；馬來(lái)酸化大豆油；甘油基三辛酸酯；二異丙 基二聚酯；以及揮發(fā)性和非揮發(fā)性硅油，包括聚苯基三甲基硅氧烷。
可使用的合適的油是醇和多元醇的乙酰甘油酯、辛酸酯和癸酸酯，例 如二醇和甘油的乙酰甘油酯、辛酸酯和癸酸酯；醇和多元醇的蓖麻油酸酯， 例如蓖麻油酸十六烷基酯，聚甘油基-3 二異硬脂酸酯，聚甘油醚，聚甘油 酯，辛酰甘油三酯，癸酰甘油三酯，異硬脂酰甘油三酯，己二酰甘油三酯， 聚苯基三甲基硅氧垸，羊毛脂油，聚丁烯，棕櫚酸異丙酯，異硬脂酸異丙
酯，蓖麻油酸十六烷基酯，辛基十二烷醇，油醇，氫化植物油，蓖麻油，改 性的羊毛脂，棕櫚酸辛酯，羊毛脂油，馬來(lái)酸化大豆油，蓖麻油酸十六垸基 酯，甘油基三辛酸酯，二異丙基二聚酯，合成的羊毛脂衍生物和支鏈醇，脂 肪酸蔗糖酯，羥基硬脂酸辛酯以及它們的混合物。
本發(fā)明的組合物中也可加入表面活性劑以提供有益的應(yīng)用性質(zhì)。可使用 的表面活性劑是能夠形成乳劑和/或結(jié)合結(jié)構(gòu)的那些表面活性劑。合適的表面 活性劑不存在皮膚病學(xué)或毒理學(xué)問題。陰離子表面活性劑、非離子表面活性 劑、陽(yáng)離子表面活性劑、兩性離子表面活性劑以及它們的混合物的適用的。例如，可使用克拉夫特點(diǎn)約等于或低于環(huán)境溫度的陰離子表面活性劑、非離 子表面活性劑、陽(yáng)離子表面活性劑、兩性離子表面活性劑以及它們的混合 物。
本發(fā)明的組合物可包含一種或多種在這里單獨(dú)或統(tǒng)稱為"固化劑"的材 料，它們能有效固化化妝品組合物中使用的特定液體基質(zhì)。如本文所用，術(shù) 語(yǔ)"固化"指液體基質(zhì)材料的物理和/或化學(xué)改變以在環(huán)境條件下形成固體或半 固體，即形成具有穩(wěn)定的物理結(jié)構(gòu)并能夠在正常使用條件下沉積到皮膚上的 最終組合物。如本領(lǐng)域技術(shù)人員所理解的那樣，用于化妝品組合物中的特定 固化劑的選擇將取決于所希望的組合物的具體類型，即凝膠或蠟基，所需流 變性，所用液體基質(zhì)材料以及組合物中使用的其他材料。
脂質(zhì)體制劑也適用于本發(fā)明的組合物。這種組合物可通過將本發(fā)明組合
物與磷脂如二棕櫚酰磷脂酰膽堿，膽固醇和水根據(jù)已知的方法，例如Mezei 等在《/尸Aamflco/. 34:473-474 (1982)中所述或該其改進(jìn)形式進(jìn)行混合而 制備。適用于形成脂質(zhì)體的脂質(zhì)可代替磷脂，例如卵磷脂。然后將脂質(zhì)體混 合物摻入上述局部制劑之一(例如，凝膠或水包油乳劑)中，以產(chǎn)生脂質(zhì)體制 劑。局部應(yīng)用脂質(zhì)體的其他組成和藥學(xué)應(yīng)用可參見例如Mezei，M.在藥物科學(xué) 問題(7b; /as 尸/wrmaceM"ca/ Sc/ewce力，Breimer等編，紐約伊沙維爾科技出版 社(Elsevier Science, New York, N.Y.),第345-358頁(yè)(1985)。
當(dāng)摻入口腔清洗劑或漱口水中時(shí)，本發(fā)明的局部組合物也可應(yīng)用于口 腔，或者摻入洗眼藥水、滴眼劑或眼部藥簽中時(shí)可用于眼科治療。
用于上文詳述病癥的另一種給藥方式是口服，采用方便的日給藥方案， 該給藥方案可根據(jù)嚴(yán)重程度進(jìn)行調(diào)節(jié)。對(duì)于這種口服給藥，通過摻入任何常 用的輔料，例如甘露醇、乳糖、淀粉、硬脂酸鎂、糖精鈉、滑石粉、纖維 素、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、葡萄糖、明膠、蔗糖、碳酸鎂等，形成藥學(xué)上可 接受的無(wú)毒性組合物。這種組合物采取溶液劑、混懸劑、片劑、可分散片 劑、丸劑、膠囊、粉末劑、緩釋制劑等形式。
組合物可采取丸劑或片劑的形式，因此組合物除活性成分外，還可包 含稀釋劑如乳糖、蔗糖、磷酸二鈣等；潤(rùn)滑劑如硬脂酸鎂等；粘合劑如淀 粉、阿拉伯膠、聚乙烯吡咯垸酮、明膠、纖維素及其衍生物等。
在制劑制備過程中，可能需要研磨提取物，使其在與其他成分混合之前具有合適的粒度。如果活性提取物基本上不溶，通常研磨至粒度小于200 目。如果活性提取物能充分溶于水，通常通過研磨調(diào)節(jié)粒度以提供在制劑中 的大致均勻分布，例如約40目。
用于口服制劑的合適的輔料的一些例子包括乳糖、右旋糖、蔗糖、山 梨糖醇、甘露醇、淀粉、阿拉伯膠、磷酸鈣、藻酸鹽、西黃蓍膠、明膠、硅
酸鈣、微晶纖維素、聚乙烯吡咯烷酮、纖維素、水、糖漿和甲基纖維素。制 劑還可包含潤(rùn)滑劑如滑石粉、硬脂酸鎂和礦物油；潤(rùn)濕劑；潤(rùn)滑劑和助懸 劑；防腐劑如羥基苯甲酸甲酯和羥基苯甲酸丙酯；甜味劑；和芳香劑。通過 采用本領(lǐng)域公知的方法，可將本發(fā)明的組合物配制成能夠在給予患者后提供 活性成分的速釋、緩釋或延遲釋放。
術(shù)語(yǔ)"單位劑量形式"指適合作為單一劑量用于人體對(duì)象或其他哺乳動(dòng)物 的物理離散單位，每個(gè)單位包含預(yù)定量的活性成分和合適的藥用輔料，所述 預(yù)定量經(jīng)計(jì)算能夠產(chǎn)生所需的治療效果。
為制備固體組合物如片劑，將主要的活性成分與藥用輔料混合，形成包 含本發(fā)明提取物均質(zhì)混合物的固體預(yù)制組合物。這些預(yù)配制組合物是均質(zhì)的 描述是指活性成分均勻分散在整個(gè)組合物中，使組合物可容易地再細(xì)分成相 等的有效劑量形式如片劑、丸劑和膠囊。然后固體預(yù)制物再細(xì)分成上述類型 的單位劑量形式，包含例如約0.1-500毫克本發(fā)明的活性成分。
可對(duì)本發(fā)明的片劑或丸劑進(jìn)行包衣或以其他方式化合，提供能夠?qū)崿F(xiàn)延 長(zhǎng)作用優(yōu)點(diǎn)的劑型。例如，片劑或丸劑可包含內(nèi)部劑量和外部劑量組分，后 者包封前者。兩種組分可由腸衣分離，阻止胃內(nèi)崩解并允許內(nèi)部組分原封不 動(dòng)地通過十二指腸或延遲釋放。可使用多種材料作為腸衣或包衣，這些材料 包括各種聚合酸以及聚合酸與諸如蟲膠、十六醇和醋酸纖維素等材料的混合 物。
藥學(xué)上可給予的液體組合物(例如)可通過以下方式制備將上文所述的活
性提取物以及任選的藥用佐劑溶解在載體，例如水、鹽水、水性右旋糖、甘 油、二醇、乙醇等載體中，從而形成溶液或混懸液。如果需要，給予的藥物
組合物可還包含少量無(wú)毒輔助物質(zhì)如潤(rùn)濕劑；乳化劑；增溶劑；pH緩沖劑 等，例如醋酸鈉、檸檬酸鈉、環(huán)糊精衍生物、單月桂酸去水山梨糖醇酯、三 乙醇胺乙酸酯、三乙醇胺油酸酯等。制備這種劑型的實(shí)際方法是已知的，或在本領(lǐng)域技術(shù)人員所明白的；例如參見雷明登藥物科學(xué)(We/^"gto^ 尸Afl，acew"ca/Sde"ce力，美國(guó)賓夕法尼亞州伊斯頓的Mack出版公司，第15 版(1975)。在任何情況下，給予的組合物或制劑將含有一定量能有效緩解治療 對(duì)象的癥狀的活性提取物。
口服給予的可摻有本發(fā)明新型組合物的液體劑型包括用糖漿適當(dāng)調(diào)味 的水性溶液劑；水性或油性混懸劑；和用食用油調(diào)味的乳劑，所述食用油包
括棉籽油、芝麻油、椰子油或花生油，以及酏劑和/或類似的藥用運(yùn)載體。
或者，液體或半固體口服制劑可通過以下方式制備將活性提取物溶解 或分散在植物油、二醇、甘油三酯、丙二醇酯(例如碳酸丙烯酯)等中，并將這 些溶液或懸浮液包封到硬或軟明膠膠囊殼中。
本發(fā)明包括與藥學(xué)上可接受的載體相結(jié)合的組合物。在制備本發(fā)明組合 物的過程中，活性成分通常與輔料混合，被輔料稀釋或包封在載體內(nèi)，所述 載體可以是膠囊、扁膠囊、紙或其他容器的形式。如果輔料用作稀釋劑，它 可以是固體、半固體或液體材料，用作活性成分的運(yùn)載體、載體或介質(zhì)。因 此，上述口服組合物可以是片劑、丸劑、粉末劑、錠劑、囊劑、扁膠囊、酏 劑、混懸劑、乳劑、溶液劑、糖漿劑、氣霧劑(固體形式或在液體介質(zhì)中)、例 如最多含有10重量％活性成分的軟膏劑、軟和硬明膠膠囊、栓劑、無(wú)菌注射 溶液以及無(wú)菌包裝的粉末劑。
胃腸外給藥可采用植入緩釋或持續(xù)釋放的系統(tǒng)，從而維持恒定的劑量水 平。這種胃腸外組合物中包含的活性提取物的百分?jǐn)?shù)高度依賴于其特殊性 質(zhì)，以及提取物的活性和對(duì)象的需要。
本發(fā)明的組合物可單獨(dú)使用或與一種或多種其他效應(yīng)試劑，例如與麻醉 劑、鎮(zhèn)痛劑、抗感染劑、抗菌劑、或抗真菌劑或其混合物聯(lián)合使用?？杉尤?本發(fā)明組合物中以緩解疼痛和瘙癢的合適的麻醉劑的一些例子包括但不限 于苯佐卡因、利多卡因、丁卡因、達(dá)克羅寧、丙嗎卡因、氨苯丁酯、樟 腦、薄荷腦、桉葉腦、麝香草酚、二丁卡因、布比卡因、甲哌卡因、羅哌卡 因、普魯卡因、可卡因、奴佛卡因、賽洛卡因、馬比佛卡因、氯化苯乙銨、 茴香醚、?？颂驵ぁ⒍∠惴?、咖啡因、尼古丁、利多卡因和丙胺卡因的組 合、丁香油、茶樹油、鹽酸利多卡因、鹽酸二丁卡因、鹽酸丁卡因、普莫卡 因、鹽酸達(dá)克羅寧、鹽酸丙嗎卡因、地哌冬、苦味酸氨苯丁酯、硫酸環(huán)美卡因、鹽酸環(huán)美卡因、鹽酸二甲異喹、阿片類鎮(zhèn)痛劑如嗎啡及其衍生物、以及 精神作用藥物，包括三環(huán)類抗抑郁藥(TCA)。
可加入本發(fā)明組合物中以緩解與病毒有關(guān)的發(fā)熱、疼痛和痛苦的合適的 鎮(zhèn)痛劑的一些例子包括但不限于對(duì)乙酰氨基酚、布洛芬、阿司匹林、水楊 酸酰胺、三乙醇胺水楊酸酯、水楊酸甲酯、水楊酸鹽、N,N-二甲基天冬氨
酸、N,N-二甲基谷氨酸、鹽酸曲吡那敏、氫化可的松、醋酸氫化可的松和安
替比林。
可加入本發(fā)明組合物中以抑制與病毒有關(guān)的感染的擴(kuò)散的合適的抗感染
劑或抗菌劑的一些例子包括苯扎溴銨、苯扎氯銨、鹽酸氯己定、三氯生、 山梨酸、氯化苯甲乙氧銨、氯化甲基苯甲乙氧銨、醇、氯化十六烷基吡啶 鑰、氯二甲酚、六氯酚和氯己定。
可加入本發(fā)明組合物中以控制與瘡有關(guān)的真菌生長(zhǎng)的局部抗真菌劑的例 子包括但不限于鹵普羅近、環(huán)吡酮、氟胞嘧啶、咪康唑、益康唑、克霉 唑、氟康唑、奧昔康唑、硫康唑、甲硝唑、伊曲康唑、酮康唑、布康唑、特 康唑、制霉菌素、聚維酮碘、托萘酯、鹽酸特比萘芬、硝酸咪康唑、制霉菌 素、兩性霉素B、灰黃霉素、苯甲酸、水楊酸、氧化汞、間苯二酚、三醋 汀、十一烯酸及其鈣、銅和鋅鹽。
實(shí)施例
給出下面的制劑和實(shí)施例是為了讓本領(lǐng)域技術(shù)人員更清楚地理解和實(shí)施 本發(fā)明。這些內(nèi)容應(yīng)解釋為限制本發(fā)明的范圍，而不僅僅是闡述和代表性 的。
實(shí)施例l
HSV-1試驗(yàn)
將維洛細(xì)胞(ATCC CCL-81)預(yù)生長(zhǎng)在96-孔組織培養(yǎng)板中，用補(bǔ)充有10% 熱滅活胎牛血清(FBS)、 L-谷氨酰胺、青霉素和鏈霉素的Dulbecco改進(jìn)的 Eagle培養(yǎng)基(DMEM)進(jìn)行培養(yǎng)。
每個(gè)復(fù)孔的細(xì)胞培養(yǎng)物中加入50 測(cè)試溶液和50 病毒懸液(ATCC VR-260)。采用的感染復(fù)數(shù)約為0.05空斑形成單位(PFU)/細(xì)胞。與測(cè)試樣品同時(shí)進(jìn)行僅含有培養(yǎng)基的細(xì)胞對(duì)照，含有培養(yǎng)基和病毒的病毒感染對(duì)照，含有 培養(yǎng)基和各個(gè)藥物濃度的藥物細(xì)胞毒性對(duì)照，僅含有培養(yǎng)基(無(wú)細(xì)胞)的反應(yīng)試 劑對(duì)照，含有測(cè)試樣品和培養(yǎng)基(無(wú)細(xì)胞)的測(cè)試樣品比色對(duì)照。將板在 37°C、含有5%C02的濕潤(rùn)環(huán)境中培養(yǎng)，直到在未處理的病毒對(duì)照培養(yǎng)物中觀
察到最大CPE(細(xì)胞病變效應(yīng))(第5天)。
通過染料(MTS)攝取方法(Promega的細(xì)胞效價(jià)水性單一溶液)來(lái)確定CPE 抑制。該方法根據(jù)存活宿主細(xì)胞的線粒體酶將四唑基MTS轉(zhuǎn)化成MTS甲3g 而造成的四唑基MTS的減少來(lái)測(cè)定細(xì)胞活力臘。將MTS (10 pl)加入培養(yǎng)板各 孔中。將板在37"C孵育4小時(shí)。然后在4卯/650 nm下通過分光光度法測(cè)定 MTS甲臘的紫色。每種培養(yǎng)物的光密度(OD)值是甲臘含量的函數(shù)，甲臘含量 則與活細(xì)胞的數(shù)量成比例。
測(cè)量并計(jì)算病毒感染孔CPE(細(xì)胞病變效應(yīng))降低的百分比(抗病毒效果)， 然后計(jì)算IC5。(提取物提供50% CPE降低時(shí)的抑制濃度)。
石榴(Punica granatum)提取物由地上部分制備，獲自美國(guó)德克薩斯州格林 維爾的植物真菌研究公司(PhytoMyco Research Corporation)。綠茶(Camellia sinensis)提取物獲自美國(guó)明尼蘇達(dá)州圣保羅的LKT實(shí)驗(yàn)有限公司(LKT Labs Inc.)。
如上所述進(jìn)行測(cè)試時(shí)，本發(fā)明的提取物能夠降低病毒復(fù)制，如表1所示。
表l
提取物ic50
綠茶提取物72.4
石榴提取物86.5
綠茶+石榴(l:l)52,2
如表1所示，本發(fā)明的提取物單獨(dú)測(cè)試時(shí)具有中等抗皰疹復(fù)制活性。然
而將本發(fā)明提取物組合后導(dǎo)致意外、較大的協(xié)同CPE降低。
權(quán)利要求
1.一種治療病毒病損的方法，所述方法包括給予需要這種治療的對(duì)象包含石榴提取物和綠茶提取物的組合物。
2. 如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述病毒病損是由單純皰疹病毒引起的。
3. 如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述病毒病損是感冒瘡。
4. 如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述組合物局部給予病損。
5. 如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述組合物口服給予。
6. 如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述組合物還包含至少一種選自下組的試劑(i)保護(hù)皮膚的活性成分，選自尿囊素、氫氧化鋁凝膠、 爐甘石、可可豆脂、魚肝油、膠態(tài)燕麥片、二甲硅油、甘油、硬脂、高嶺 土、羊毛脂、礦物油、凡士林、碳酸氫鈉、局部用淀粉、白凡士林、醋酸鋅 和/或氧化鋅，和(ii)外用鎮(zhèn)痛、麻醉和止癢活性成分，選自苯佐卡因、苦味 酸氨苯丁酯、二丁卡因、鹽酸二丁卡因、鹽酸奎尼卡因、鹽酸達(dá)克羅寧、利 多卡因、鹽酸利多卡因、鹽酸丙嗎卡因、丁卡因、鹽酸丁卡因、苯甲醇、樟 腦、樟腦間甲酚、杜松焦油、薄荷醇、苯酚、苯酚鈉、間苯二酚、鹽酸芐吡 二胺、阿司匹林、氫化可的松、醋酸氫化可的松和/或鹽酸苯海拉明。
7. 如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述組合物還包含至少一種 選自下組的其他試劑抗微生物劑、其他抗病毒劑、抗真菌劑、抗氧化劑、 緩沖劑、遮光劑、化妝品試劑、芳香劑、潤(rùn)滑劑、保濕劑、干燥劑和增稠 劑。
8. —種在需要這種治療的對(duì)象中治療與病毒感染有關(guān)的癥狀的方法，所 述方法包括給予對(duì)象包含石榴提取物和綠茶提取物的組合物。
9. 如權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于，所述病毒病損是由單純皰疹 病毒引起的。
10. 如權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于，所述癥狀選自下組發(fā)熱、肌肉痛、腺體腫大、不適、瘙癢、炎癥、刺激、疼痛、腫脹和灼燒。
11. 如權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于，所述組合物局部給予病損。
12. 如權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于，所述組合物口服給予。
13. 如權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于，所述組合物還包含至少一種 選自下組的試劑(i)保護(hù)皮膚的活性成分，選自尿囊素、氫氧化鋁凝膠、 爐甘石、可可豆脂、魚肝油、膠態(tài)燕麥片、二甲硅油、甘油、硬脂、高嶺 土、羊毛脂、礦物油、凡士林、碳酸氫鈉、局部用淀粉、白凡士林、醋酸鋅 和/或氧化鋅，和(ii)外用鎮(zhèn)痛、麻醉和止癢活性成分，選自苯佐卡因、苦味 酸氨苯丁酯、二丁卡因、鹽酸二丁卡因、鹽酸奎尼卡因、鹽酸達(dá)克羅寧、利 多卡因、鹽酸利多卡因、鹽酸丙嗎卡因、丁卡因、鹽酸丁卡因、苯甲醇、樟 腦、樟腦間甲酚、杜松焦油、薄荷醇、苯酚、苯酚鈉、間苯二酚、鹽酸芐吡 二胺、阿司匹林、氫化可的松、醋酸氫化可的松和/或鹽酸苯海拉明。
14. 如權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于，所述組合物還包含至少一種 選自下組的其他試劑抗微生物劑、其他抗病毒劑、抗真菌劑、抗氧化劑、 緩沖劑、遮光劑、化妝品試劑、芳香劑、潤(rùn)滑劑、保濕劑、干燥劑和增稠 劑。
15. —種控制單純皰疹病毒導(dǎo)致的病毒生長(zhǎng)和復(fù)制的方法，所述方法包括 給予需要這種治療的對(duì)象包含石榴提取物和綠茶提取物的組合物。
16. 如權(quán)利要求15所述的方法，其特征在于，所述病毒病損是由單純皰疹病毒引起的。
17. 如權(quán)利要求15所述的方法，其特征在于，所述組合物局部給予。
18. 如權(quán)利要求15所述的方法，其特征在于，所述組合物口服給予。
19. 如權(quán)利要求15所述的方法，其特征在于，所述組合物還包含至少一 種選自下組的試劑(i)保護(hù)皮膚的活性成分，選自尿囊素、氫氧化鋁凝 膠、爐甘石、可可豆脂、魚肝油、膠態(tài)燕麥片、二甲硅油、甘油、硬脂、高 嶺土、羊毛脂、礦物油、凡士林、碳酸氫鈉、局部用淀粉、白凡士林、醋酸 鋅和/或氧化鋅；和(ii)外用鎮(zhèn)痛、麻醉和止癢活性成分，選自苯佐卡因、苦 味酸氨苯丁酯、二丁卡因、鹽酸二丁卡因、鹽酸奎尼卡因、鹽酸達(dá)克羅寧、 利多卡因、鹽酸利多卡因、鹽酸丙嗎卡因、丁卡因、鹽酸丁卡因、苯甲醇、 樟腦、樟腦間甲酚、杜松焦油、薄荷醇、苯酚、苯酚鈉、間苯二酚、鹽酸芐 吡二胺、阿司匹林、氫化可的松、醋酸氫化可的松和/或鹽酸苯海拉明。
20. 如權(quán)利要求15所述的方法，其特征在于，所述組合物還包含至少一種選自下組的其他試劑抗微生物劑、其他抗病毒劑、抗真菌劑、抗氧化 齊U、緩沖劑、遮光劑、化妝品試劑、芳香劑、潤(rùn)滑劑、保濕劑、干燥劑和增 稠劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及植物提取物以及包含這種植物提取物的組合物，適用于病毒疾病的治療，包括但不限于例如由單純皰疹病毒導(dǎo)致的病毒病損的治療。
文檔編號(hào)A01N65/00GK101541182SQ200780028933
公開日2009年9月23日 申請(qǐng)日期2007年7月16日 優(yōu)先權(quán)日2006年8月4日
發(fā)明者C·薩里奧, K·馬哈茂迪, S·博杜帕利 申請(qǐng)人:強(qiáng)生消費(fèi)者公司