專利名稱：：木霉菌素衍生物及其用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明屬于新農(nóng)藥創(chuàng)制領(lǐng)域，涉及了一系列新木霉菌素衍生物，本發(fā)明還涉及該系列化合物的活性成分對(duì)植物病原真菌的抑制作用。
背景技術(shù)：
：根據(jù)國(guó)家"十一五"發(fā)展規(guī)劃，農(nóng)藥創(chuàng)新與創(chuàng)制是重點(diǎn)研究?jī)?nèi)容。而當(dāng)前新農(nóng)藥或先導(dǎo)物的發(fā)現(xiàn)主要還是以類同合成與天然活性物質(zhì)模型為主要途徑。生物源農(nóng)藥是天然活性物質(zhì)范疇，是新農(nóng)藥創(chuàng)制的重要途徑。因其對(duì)人畜毒性小，環(huán)境兼容好，有害生物不易產(chǎn)生抗性等突出優(yōu)點(diǎn)而符合現(xiàn)代社會(huì)對(duì)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)及農(nóng)藥的要求，這種形勢(shì)也將促進(jìn)生物農(nóng)藥的快速發(fā)展。農(nóng)用抗生素Ugric^"ra/""油iort")歷來(lái)是生物農(nóng)藥研究的重點(diǎn)，早在20世紀(jì)中期，美、德、日等發(fā)達(dá)國(guó)家就把農(nóng)用抗生素的研究列入了國(guó)家重點(diǎn)科研規(guī)劃，并成功開(kāi)發(fā)了許多優(yōu)秀的產(chǎn)品，如阿維菌素、多殺菌素等。在環(huán)境生態(tài)保護(hù)措施不斷強(qiáng)化的今天，我國(guó)農(nóng)藥面臨著日益巨大的更新?lián)Q代壓力和十分嚴(yán)峻的挑戰(zhàn)，為了可持續(xù)發(fā)展的需要及有利于我國(guó)農(nóng)產(chǎn)品的出口，國(guó)家進(jìn)一步加大了高效、安全、無(wú)公害生物農(nóng)藥的研發(fā)力度，新型農(nóng)用抗生素的研究更是被列入了國(guó)家"863計(jì)劃"和科技公關(guān)"十一五"計(jì)劃。近年來(lái)，以天然抗生素為先導(dǎo)化合物，結(jié)合化學(xué)合成技術(shù)進(jìn)行新農(nóng)藥的創(chuàng)制研究，己成為當(dāng)今新農(nóng)藥創(chuàng)制過(guò)程中最為有效的方法之一，取得了很好的效果。如，Z)/o:ra;^m/omyc^是一種多種微生物均可產(chǎn)生的含吡咯環(huán)抗生素，具抗細(xì)菌及真菌活性，但由于穩(wěn)定性等諸多原因而難以商品化，美國(guó)氰胺公司以其有效基團(tuán)為母體進(jìn)行了取代基的修飾和改造，克服了對(duì)光的不穩(wěn)定性，開(kāi)發(fā)了被譽(yù)為當(dāng)今世界新殺蟲劑三大支柱之一的殺蟲劑溴蟲腈(Chlorfenapyr);阿維菌素是迄今藥效最高、用量最低的殺蟲劑之一，但是由于其對(duì)人畜急性毒性較高及對(duì)鱗翅目害蟲防效較差而限制了它在農(nóng)業(yè)防治上的應(yīng)用，為此，國(guó)內(nèi)外研究人員通過(guò)化學(xué)手段對(duì)阿維菌素進(jìn)行了結(jié)構(gòu)改造，相繼開(kāi)發(fā)出依維菌素(/vermec"")、?，斁?五na附ecri打)、埃珀禾U諾菌素(^pn."o附ecri")、道拉菌素(Dora附ec"w)，大大降低了原藥毒性、提高了活性，并有效地?cái)U(kuò)大了阿維菌素的應(yīng)用范圍。它們分別應(yīng)用于農(nóng)業(yè)殺蟲(農(nóng)藥)、獸用驅(qū)蟲、衛(wèi)生用殺蟲、人用驅(qū)蟲四大行業(yè)，可以制成30多種劑型上百種產(chǎn)品，市場(chǎng)容量極大。就現(xiàn)在的國(guó)內(nèi)外市場(chǎng)來(lái)看，年銷售額上百億美元。世界主要農(nóng)牧業(yè)國(guó)家普遍應(yīng)用此藥，如在美國(guó)、南美、澳大利亞、新西蘭、歐洲等國(guó)家和地區(qū)，依維菌素占驅(qū)蟲藥市場(chǎng)50%以上?？梢?jiàn)，由天然源物質(zhì)經(jīng)化學(xué)結(jié)構(gòu)改造制取新農(nóng)藥，降低現(xiàn)有抗生素的毒性、提高其生物活性和穩(wěn)定性不僅對(duì)開(kāi)發(fā)新型綠色農(nóng)藥產(chǎn)品具有重要意義，而且對(duì)提高已有抗生素產(chǎn)品的綜合利用價(jià)值，進(jìn)一步促進(jìn)農(nóng)抗類生物農(nóng)藥的研究發(fā)展具有重要意義。對(duì)于存在某些不足之處的微生物代謝物，人們往往通過(guò)化學(xué)結(jié)構(gòu)改造以開(kāi)發(fā)效果更佳、安全性更高、物化性質(zhì)更合理的新藥劑。同時(shí)，這種從天然源品種中經(jīng)化學(xué)改造尋求新農(nóng)藥的方法，已成為當(dāng)今新農(nóng)藥開(kāi)發(fā)的重要途徑之一。我國(guó)有不少自行開(kāi)發(fā)的天然源物質(zhì)，有的由于種種原因(如毒性、穩(wěn)定性等)難以產(chǎn)業(yè)化，有的即便己產(chǎn)業(yè)化但仍存在某些不足，而無(wú)法形成大宗產(chǎn)品。此外，在生產(chǎn)過(guò)程中還會(huì)有結(jié)構(gòu)相近但效果相差甚大的副產(chǎn)品產(chǎn)生。如何通過(guò)化學(xué)手段，從中尋求具有活性的新藥劑。默克公司在阿維菌素上成功的例子，為我們提供了很好的啟示。無(wú)疑，這也成了我們創(chuàng)制新農(nóng)藥的方向之一。植物病害每年對(duì)農(nóng)作物產(chǎn)量造成巨大損失，盡管控制植物病害的方法和措施多種多樣，但殺菌劑在植物病害綜合防治中仍占有重要的地位。目前常用的很多化學(xué)殺菌劑具有廣譜、高效、低毒的特點(diǎn)，顯著地提高了殺菌劑控制植物病害的效果。然而某些化學(xué)殺菌劑具有抗藥性、對(duì)環(huán)境、食品累積性污染等問(wèn)題，所以對(duì)生物源農(nóng)藥，特別是從天然植物、動(dòng)物及微生物中尋找和開(kāi)發(fā)新型殺菌劑的開(kāi)發(fā)研究是當(dāng)前的研究熱點(diǎn)。內(nèi)生真菌及其天然產(chǎn)物在現(xiàn)代生物藥物開(kāi)發(fā)中具有重要的應(yīng)用潛力，單端孢霉烯類化合物是一類著名的真菌毒素，為鐮刀菌屬CP^ar/ww)、單端孢霉屬(7Wc/wAece從)、木霉屬(rr/ctoJenna)、漆斑霉屬(M,oAe"'wm)等真菌的代謝產(chǎn)物，這些化合物都有一個(gè)相似的倍半萜骨架，分子中通常含有一個(gè)穩(wěn)定的環(huán)氧和烯雙鍵結(jié)構(gòu)。單端孢霉烯類化合物具有抑制或殺死真菌(包括許多植物病原菌)以及抑制植物生長(zhǎng)等值得關(guān)注的功能。如Trichodermin(式III化合物)可抑制^451;^^///"5|^7(^1^、Awiger、C7"dospon'w附cwcw/wer/w/w、7/n'zoctom'<7ra/flra'、i.6ataffco/"、Camftia"/6z'C(ms以及i/n'zo/n/51sfo/omyfer等多禾中植物病原菌菌絲生長(zhǎng)，trichodermin對(duì)煙草、豆類植物、麥類等的胚芽鞘生長(zhǎng)具明顯抑制作用，并可以從根部吸收，導(dǎo)致上述植株死亡。Trichodermol(式II化合物)是結(jié)構(gòu)最為簡(jiǎn)單的單端孢霉烯類化合物，在檢索大量國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)并通過(guò)項(xiàng)目組對(duì)部分單端孢霉烯類活性物質(zhì)的初步研究后發(fā)現(xiàn)，以trichodermol為基本骨架的化合物不但具有高效的抑制真菌和抑制植物生長(zhǎng)的活性，而且其毒性低，對(duì)哺乳動(dòng)物較為安全，具有巨大的開(kāi)發(fā)潛力。(II)木霉菌素(Trichodermin,式III化合物)是一種己知的內(nèi)生真菌代謝產(chǎn)物，國(guó)外早有相應(yīng)報(bào)道。專利號(hào)200710106257.5的發(fā)明專利《一種紫杉木霉菌株及其在制備木霉菌酯素中的用途》提供了一種從內(nèi)生真菌南方紅豆杉中分離到的新內(nèi)生真菌紫杉木霉rric力oofe/7fflg菌株ZJUF0986，其發(fā)酵的代謝產(chǎn)物一木霉菌素(Trichodermin)是對(duì)多種植物病原菌具有良好防治效果其對(duì)立枯絲核菌和灰葡萄孢菌有很強(qiáng)的抑制作用，對(duì)水稻稻瘟病及紋枯病也有良好的抑制作用。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>(III)正是由于木霉菌素具有農(nóng)用抗菌素的特性，其具有抗菌高效性和廣譜性的特點(diǎn)，且在許多木霉菌發(fā)酵產(chǎn)物中能分離到；因?yàn)槠涫峭ㄟ^(guò)發(fā)酵、提取分離得到的，為了更好的篩選合成比其更高活性的化合物，本課題組對(duì)木霉菌素的母體結(jié)構(gòu)進(jìn)行官能團(tuán)改造，合成制備系列衍生物，一旦獲得性價(jià)比較高的木霉素衍生物，則極具產(chǎn)業(yè)化前景。經(jīng)申請(qǐng)人資料檢索，本發(fā)明的系列衍生物均為合成的新化合物，沒(méi)有其合成及應(yīng)用的相關(guān)報(bào)道。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種具有較好殺菌效果的木霉菌素衍生物及其制備方法和用途。為了解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明提供一種木霉菌素衍生物，其結(jié)構(gòu)通式為:(I);式中R為(為了方便說(shuō)明，對(duì)每個(gè)具體的R所對(duì)應(yīng)的木霉菌素衍生物編號(hào)如下)-F3C.CI化合物a-o化合物a-2化合物a-3化合物a-4ci02N.」《1化合物a-5化合物b-l01化合物b-2化合物b-3o02N化合物b-4化合物b-7化合物b-8o/==^化合物b-90o■3，化合物b-10化合物b-lloBr，白r，Br'v、，、化合物c-l化合物c-2化合物c-3化合物c-4OOIIo化合物b-12化合物b-13化合物c-5化合物c-6OIICF3-C—，CCI3——C—，CBr3—C—，CN—C——，0，化合物c-7化合物c-8化合物c-9化合物c-10化合物c-ll化合物C-12化合物c-13化合物c-14本發(fā)明還同時(shí)提供了上述木霉菌素衍生物的合成方法在縛酸劑和非質(zhì)子性有機(jī)溶劑4中，結(jié)構(gòu)式為"I、°H的木霉菌素水解物與結(jié)構(gòu)式為R-Cl的酰氯或與R-OH在室溫中、常壓下進(jìn)行反應(yīng)，反應(yīng)時(shí)間為0.4~24h，木霉菌素水解物與酰氯(或與R-OH)的摩爾比為l:16;木霉菌素水解物與縛酸劑的摩爾比為1:16;式中R為CH3、CH3,將所得反應(yīng)液進(jìn)行分離，即得木霉菌素衍生物。作為本發(fā)明的木霉菌素衍生物的合成方法的改進(jìn)非質(zhì)子性有機(jī)溶劑與木霉菌素水解物重量比為330:1;非質(zhì)子性有機(jī)溶劑為烷烴類、醚類、芳香烴類或取代烷烴類，優(yōu)選正己垸、環(huán)己垸、乙醚、苯、甲苯、氯仿、二氯甲烷和1，2-二氯乙烷?？`酸劑為三乙胺、吡啶、乙二胺等常用堿性試劑。本發(fā)明還同時(shí)提供了上述木霉菌素衍生物的用途，用于殺滅植物病原真菌。作為本發(fā)明的木霉菌素衍生物的用途的改進(jìn)所述植物病原真菌為番茄灰霉病菌dwerea、纟冬豐及腐霉尸j^&'iwnK&'附wm、鐮刀菌(黃瓜專{七型)Fwsfln'wnjoxyspofwmf.spa/a/wZ^、葉霉、立枯絲核菌、棉花枯萎或水稻稻瘟病菌。作為本發(fā)明的木霉菌素衍生物的用途的進(jìn)一步改進(jìn)木霉菌素衍生物被制成木霉菌素衍生物的重量含量為560%的可濕性粉劑、木霉菌素衍生物的重量含量為580%的乳油、微乳劑或水乳劑。本發(fā)明是從木霉菌素水解產(chǎn)物(trichodermol,式II化合物)出發(fā)與不同的酰氯或R-OH反應(yīng)，從而制備系列木霉菌素衍生物；以期望從中獲得具有較好的防治植物病原真菌的化合物。本發(fā)明的木霉菌素衍生物的合成方法可用以下方程式加以說(shuō)明<formula>formulaseeoriginaldocumentpage9</formula>"I)(1)將本發(fā)明所得的系列木霉菌素衍生物用小麥赤霉病菌<^'6^^/&"M、番茄灰霉病菌^"toc/"ewa、番莉葉霉病菌Fw/v/"/w/va進(jìn)行室內(nèi)活性測(cè)定，在5(Hig/mL下，所有化合物均顯示良好的抑菌活性，抑制率高達(dá)80%以上。其中化合物a-l、化合物c-4、化合物c-5、化合物c-6、化合物c-7、化合物c-10等對(duì)番茄灰霉病的抑制中濃度均在0.32.(^g/mL之間；配制成不同濃度的可濕性粉劑、乳油、微乳劑、水乳劑或懸浮劑使用，防治效果更好。本發(fā)明的木霉菌素衍生物在田間實(shí)際使用時(shí)，具體用法和用量如下將木霉菌素衍生物加工成可濕性粉劑、乳油、微乳劑或水乳劑，在田間使用時(shí)，每次按有效成分0.5g2g/每畝，稀釋后(例如以重量計(jì)稀釋500—600倍后)用小型噴霧器噴施，或沾花邊處理番茄花，在番茄定植以后當(dāng)葉片上有灰霉病出現(xiàn)時(shí)確定第一次用藥的時(shí)間，對(duì)作物進(jìn)行全部的噴霧處理；以后在病害的高發(fā)季節(jié)接合灌水和在連續(xù)陰雨天氣前噴施殺菌劑3次，且全部噴施次數(shù)為3到4次，噴霧間隔期控制在8—15天。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于合成了系列未見(jiàn)報(bào)道的不同于Trichodermin的新型衍生化合物，因?yàn)槠淠阁w結(jié)構(gòu)是天然內(nèi)生真菌的代謝產(chǎn)物，經(jīng)高效菌株發(fā)酵，經(jīng)過(guò)提取分離得到，活性很好，所以以此母體結(jié)構(gòu)為先導(dǎo)化合物設(shè)計(jì)合成的系列衍生物都具有一定的生物活性，其中化合物a-l、化合物c-4、化合物c-5、化合物c-6、化合物c-7、化合物c-10等對(duì)番茄灰霉病的抑制中濃度均在0.32.0pg/mL之間，具有進(jìn)一步開(kāi)發(fā)為商品殺菌劑的條件。具體實(shí)施例方式本發(fā)明采用發(fā)酵得到的木霉菌素(Trichodermin,式III化合物)為原料，通過(guò)水解得到木霉醇(trichodermol，式II化合物，即木霉菌素水解物)，進(jìn)一步進(jìn)行衍生化反應(yīng)，得到化合物a-lc-14，并進(jìn)行殺菌活性測(cè)定，從普篩中選出5(Hig/mL濃度下抑制率60X以上的進(jìn)行初篩，初篩后選出25ng/mL濃度下抑制率60X以上的進(jìn)行復(fù)篩，求出抑制中濃度。反應(yīng)原料木霉醇(trichodermol，式II化合物)的制備在反應(yīng)瓶中加入2.0g(6.85mmo1)木霉菌素(式III化合物)，24mL2mol/L的氫氧化鈉溶液，35mL甲醇，20。C下攪拌反應(yīng)1.5h。反應(yīng)液用乙酸乙酯提取三次，乙酸乙酯層用水洗滌2次，無(wú)水Na2S04干燥，濃縮得1.72g產(chǎn)物，反應(yīng)產(chǎn)物較純可直接用于下一步反應(yīng)。^-NMR(500MHz,CDC13,Sppm):5.396-5.386(1H,m,-C=Ci7-),4.357-4.321(1H,t,-CF陽(yáng)OH)，3.842-3.828(1H,d，-0-C^-CH2-)，3.516-3.503(1H,d，-COC界O-)，3.123-3.113(IH，d，-0-Cff2),2.824-2.814(1H,d,-0-Cff2),2.646-2.589(1H，dd,-CHiCHOH),2.001-1.955(2H,m,-CH=C-Ci/r),1.942-1.907(1H,dd,-CH-C-CH2-CH2-)，1.896-1.882(1H，d,隱C好2CHOH),1.711(3H，s,-CHOCH5),1.458-1.430(1H,m,-CH=C-CH2-C#2-),0.935(3H,s,C私-C-CH-OH),0.718(3H，s,C^-C-CH2-)。實(shí)施例l、一種木霉菌素衍生物a-l的合成方法，其反應(yīng)式為具體反應(yīng)過(guò)程如下:冰水浴下在反應(yīng)瓶中加入4.0g(16.0mmol)木霉水解物(結(jié)構(gòu)式為II)、6.0g(60.0mmol)三乙胺和80mL二氯甲垸，再滴加3.6g(19.3mmol)二甲基菊酰氯，室溫下(030°C)攪拌反應(yīng)0.5h。反應(yīng)液用1%濃度的鹽酸洗滌三次，再用飽和NaHCCb溶液洗滌兩次，最后用水洗滌兩次，無(wú)水Na2S04干燥，濃縮得6.5g固體產(chǎn)物，經(jīng)乙醇重結(jié)晶，過(guò)濾分離后得5.8g產(chǎn)物a-l，Y=90.6%。^-NMR(500MHz,CDC13,5ppm):5.596-5.573(1H,m,隱COOCH-),5.411-5.398(1H,m,-C=CH-),4.898-4.877(1H，m,Me2C=G&-)，3.830-3.819(1H,m，-0-CF-CH2-)，3.614-3.603(1H,d，-OC-C^-O-),3.125-3.117(1H，d,-0-C#2)，2.833-2.825(1H,d,-0-C&2)，2.545-2.498(1H,m,-COOCH-Cff^),2.088-2.099(1H,d，-COC^O,2.041-2.030(2H,m,-CH=C-Cff2-)，2,010-1.978(1H,m，-COOCH-CH^),1.960-1.950(1H,m,-CH=C-CH2-CH2-)，1.937-1.925(1H,m,C12C=CH-C^)，1.713(3H,s,-CH=C-C&),1.460-1.452(1H,d，-CH=C-CH2-CH2-)，1.263-1.254(3H,d，C-Me2),1.132-1.125(3H,d,C-脂)，0.%0(3H，s，-竭，0.709(3H,s，,。實(shí)施例2、一種木霉菌素衍生物c-2的合成方法，其反應(yīng)式為冰水浴下在反應(yīng)瓶中加入4.0g(16.0mmol)木霉水解物(結(jié)構(gòu)式為II)、6.0g(60.0mmol)三乙胺和80mL二氯甲烷，再滴加3.28g(19.3mmol)2-溴丙酰氯，室溫下(030°C)攪拌反應(yīng)0.5h。反應(yīng)液用1%的鹽酸洗漆三次，再用飽和NaHCCb溶液洗滌兩次，最后用水洗滌兩次，無(wú)水Na2S04干燥，濃縮得6.13g固體產(chǎn)物，經(jīng)乙醇重結(jié)晶，過(guò)濾分離后得5.25§產(chǎn)物<>2，11Y=85.5%。iH-NMR(500MHz,CDC13,S卯m):5.589-5.563(1H,m,-COOC&-),5.412-5.403(1H，d,-OCH陽(yáng))，4,442-4.393(IH,m，Br-Cff-)，3.853-3.836(IH,m,-0-C〃-CH2-)，3.596-3.585(IH,d,-C=C-C"-0-)，3.132-3.124(IH,d，-O-C^a),2.840-2.825(IH,m，-O-CH2):2.589-2.542(1H，m,-COOCH-Cff^),1.999-1.989(IH，m,-COOCH-Cff2),1.999-1.989(2H,d,-CH=C-Ciy2-)，1.999-1.989(1H，m,-CH=C-CH2-CH2-)，1.843-1.823(2H,m,Br-CH-C好》,1.717(3H,d,-CH=C-Ci^),1.702-1.688(IH,m,Br-CH-CH5),1.467-1.433(1H,m,-CH=C-CH2-CH2-)，0.943(3H,s,-她)，0.782-0.736(3H,m,-,。實(shí)施例3、一種木霉菌素衍生物c-5的合成方法，其反應(yīng)式為:冰水浴下在反應(yīng)瓶中加入4.0g(16.0mmol)木霉水解物(結(jié)構(gòu)式為II)、6.0g(60.0mmol)三乙胺和80mL二氯甲垸，再滴加2.0g(19.3mmo1)3，3-二甲基丁酰氯酰氯，室溫下(03(TC)攪拌反應(yīng)6h。反應(yīng)液用1%的鹽酸洗滌三次，再用飽和NaHC03溶液洗滌兩次，最后用水洗滌兩次，無(wú)水Na2S04干燥，濃縮得5.67g固體產(chǎn)物，經(jīng)乙醇重結(jié)晶，過(guò)濾分離后得4.86g產(chǎn)物c-5，Y=95.05%。iH-NMR(500MHz,CDC13,Sppm):7.036-6.963(H，m,-CH=CH-CH3),5，-5.862(H,dd，-CH=CH-CH3),5.630-5.615(1H,m,-COOC界)，5.419-5.405(1H,m,-C=CH-),3.837-3.827(1H，d,-0-C/f-CH2-)，3.632-3.621(1H,d,-OC-C/T-0-),3.130-3.122(1H,d,-0-Cff2),2,835-2.827(IH,m,-O-C玩)，2.577-2.530(1H，m,-COOCH-Cff2),2.011-2.003(IH,m,-COOCH-Cff》，2.0004.992(2H，d,-CH=C-C%-)，1.982-1.963(IH,m,-CH=C-CH2-Cfl2-)，1.886-1.868(3H,dd,-CH=CH-CHj),1.715(3H,d，-CH=C-Ciy》,1.393-1.417(IH,d,-CH=C-CH2-CfiT2-)，0.947(3H，s，-Me),0.719(3H,s,隱竭。實(shí)施例4、一種木霉菌素衍生物c-7的合成方法，其反應(yīng)式為<formula>formulaseeoriginaldocumentpage13</formula>將三氟乙酸2.4g(21mmol),iV,JV-雙環(huán)己基碳雙亞胺(DCC)(4.3g,21mmol)置于150ml的反應(yīng)瓶中,加入干的二氯甲烷(80ml),室溫下攪拌1h,接著加入催化量(0.5g)的4-二甲基氨基吡啶(DMAP)和木霉水解物(結(jié)構(gòu)式為II)(5g,20mmol),室溫下攪拌24h。過(guò)濾，所得濾液用用1%的鹽酸洗滌三次，再用飽和NaHC03溶液洗滌兩次，最后用水洗滌兩次，無(wú)水Na2S04干燥，濃縮得3.92g固體產(chǎn)物，經(jīng)乙醇重結(jié)晶，過(guò)濾分離后得3.0g產(chǎn)物c-7，Y=43.18%。iH-NMR(500MHz,CDC13,5ppm):5.710-5.688(1H,m,-COOC樂(lè)),5.420-5.403(1H,m，-C=C^-),3.888-3.877(1H,d,-0-C&-CH2-)，3.572-3.561(1H，d,-C=C-CH-0-)，3.152-3.144(1H,d,-0-C^2)，2.851-2.843(1H,d，-O-CH2),2.652-2.606(1H，m,-COOCH-C%),2.147-2.098(IH,m,-COOCH-CH^),2.022-2.004(2H，m，-CH=C-CH2-)，1.973-1.937(IH，m,-CH=C-CHrC#2-)，1.579(3H,s,-CH=C-C^j),1.456-1.423(IH,m,-CH=C-CH2-CH2-)，0.947(3H，s,-臉)，0.760(3H,s,-臉)。實(shí)施例5、一種木霉菌素衍生物C-10的合成方法，其反應(yīng)式為:將氰代乙酸2.55g(21mmol),iV,W-雙環(huán)己基碳雙亞胺(DCC)(4.3g,21mmol)置于150ml的反應(yīng)瓶中，加入二氯甲烷(80ml)，室溫下攪拌lh，接著加入催化量(0.5g)的4-二甲基氨基吡啶(DMAP)和木霉水解物(結(jié)構(gòu)式為n)(5g，20mmol),室溫下攪拌24h。過(guò)濾，所得濾液用1%的鹽酸洗滌三次，再用飽和NaHC03溶液洗滌兩次，最后用水洗滌兩次，無(wú)水Na2S04干燥，濃縮得3.7g固體產(chǎn)物c-10，Y=44.9%。^-NMR(500MHz,CDC13,Sppm):5.574-5.551(IH,m,-COOCF-)，5.397-5.383(IH,m，-OC開(kāi)-)，3.822-3.812(IH,d,-0-CH"CH2-)，3.646-3.643(2H，d,-CH2-CN)，3.580-3.569(1H，d，-C=C-C〃-0-)，3.120-3.112(IH,d,-O-C刷，2.815-2.807(1H，d,-0-C&2)，2.539-2.493(IH,m,-COOCH-C鞋2.002-1.985(IH,m,-COOCH-C^》，1.971-1.964(2H,d,-CHOCH^-),1.954-1.卯6(1H,m,-CH=C-CH2-Cff2-),1.701(3H,d,-CH=C-CH》，1.403-1.375(1H,m，-CH=C-CH2-CH2-)，O.卯l(3H，s,-Me),0.645(3H，s，-臉)。實(shí)施例6、生長(zhǎng)速率抑制率法測(cè)定化合物的生物活性將保存于石蠟油中的測(cè)試菌株病菌番茄灰霉病菌So,o;^dnerea、終極腐霉iy/^ww/ri附w附、番茄葉霉病菌F/w/w3f，小麥紋枯病菌iJ-cew"http://"棉花枯萎病菌Fax:j^w"w附/平v必/"/e"ww，水稻稻瘟病菌戶w7加e接種至PDA培養(yǎng)基上活化培養(yǎng)，25。C避光培養(yǎng)4d，接種針挑取部分菌絲塊轉(zhuǎn)接于PDA培養(yǎng)平板上，置于25'C的培養(yǎng)箱生長(zhǎng)，待其菌落基本長(zhǎng)滿培養(yǎng)皿為止即可用。先將測(cè)試菌株用(Dmm的打孔器切取菌餅，接入PDA培養(yǎng)基平板中心(根據(jù)不同測(cè)試菌生長(zhǎng)速度控制接種時(shí)間)，置于25。C培養(yǎng)箱中生長(zhǎng)約l-2d。取無(wú)菌濾紙片一張，滴上(用IOW槍)IOW樣品溶液，待溶劑揮干后移入PDA培養(yǎng)基平板上，培養(yǎng)皿中心到濾紙片中心的距離約為30mm左右，然后重新將培養(yǎng)皿置于25'C培養(yǎng)箱中生長(zhǎng)。測(cè)試時(shí)，以無(wú)菌水和丙酮為陰性對(duì)照，以trichodermin為陽(yáng)性對(duì)照，每塊平板中都需有陽(yáng)性對(duì)照。抑菌圈直徑的測(cè)量根據(jù)測(cè)試菌的生長(zhǎng)情況，掌握測(cè)量抑菌圈直徑的時(shí)機(jī)，測(cè)量時(shí)，以空白對(duì)照長(zhǎng)至濾紙片為依據(jù)，測(cè)量菌落邊緣到濾紙片的距離。待空白對(duì)照部分菌落長(zhǎng)到直徑5.0cm大小時(shí)，測(cè)量各菌落的大小，根據(jù)菌落的大小計(jì)算其抑制率。普篩結(jié)果每個(gè)化合物的抑制率都在80%以上，進(jìn)一步初篩，25^g/ml下抑制率見(jiàn)表l:表1、數(shù)值為25嗎/ml的抑制率(％)<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>化合物a-l、c-4、c-5、c-6、c-7、c-10對(duì)多種植物病原菌具有良好的活性，配制好制劑后活性更高，可以進(jìn)一步開(kāi)發(fā)為商品殺菌劑。實(shí)施例7、30%木霉菌素衍生物a-1可濕性粉劑(WP)的制備在混合機(jī)中加入30g木霉菌素衍生物a-l，市售的填料白炭黑10g，分散劑NN05g、拉開(kāi)粉5.0g、皂素10g、膨潤(rùn)土40g，充分混合，充分粉碎至325目，制得白色粉末制劑。該制劑水中分散性、稀釋穩(wěn)定性、冷熱貯穩(wěn)定性符合商品農(nóng)藥制劑的要求。實(shí)施例8、20X木霉菌素衍生物c-4乳油(EC)的制備20g木霉菌素衍生物c-4，農(nóng)乳500弁(十二烷基苯磺酸鈣)3.5g，乳化劑600系列(苯乙烯酸聚氧乙烯醚)5g，滲透劑氮酮0.5g、二甲苯71g，充分?jǐn)嚢杈鶆颍频玫S色透明油狀制劑。該制劑水中分散性、稀釋穩(wěn)定性、冷熱貯穩(wěn)定性符合商品農(nóng)藥制劑的要求。實(shí)施例9、5%木霉菌素衍生物c-5微乳劑(ME)的制備5g木霉菌素衍生物c-5，苯乙烯酚聚氧乙烯醚5g，環(huán)氧乙烷環(huán)氧丙烷嵌段共聚物8g，助溶劑異丙醇10g，去離子水72g，充分?jǐn)嚢杈鶆颍频玫S色透明微乳劑。該制劑水中分散性、稀釋穩(wěn)定性、冷熱貯穩(wěn)定性符合商品農(nóng)藥制劑的要求。實(shí)施例10、10%木霉菌素衍生物c-7水乳劑(EW)的制備10g木霉菌素衍生物c-7，苯乙烯酸聚氧乙烯醚5g，環(huán)氧乙烷環(huán)氧丙烷嵌段共聚物8g，異丁醇2.0g、分散劑TamolNN89062.0g，水73g，充分?jǐn)嚢杈鶆颍诟呒羟袡C(jī)下剪切乳化2hr，制得淡白色乳狀制劑。該制劑水中分散性、稀釋穩(wěn)定性、冷熱貯穩(wěn)定性符合商品農(nóng)藥制劑的要求。實(shí)施例11、25%木霉菌素衍生物c-lO懸浮劑(SC)的制備25g木霉菌素衍生物c-10，分散劑VanGeLB2.5g，環(huán)氧乙烷環(huán)氧丙烷嵌段共聚物5g，丙二醇5.0g、分散劑TamolNN89062.5g，增稠劑黃原酸膠0.5g，防腐劑苯甲酸鈉0.5g，水59g，充分?jǐn)嚢杈鶆?，在高剪切機(jī)下剪切乳化2hr，制得淡白色乳狀制劑。該制劑水中分散性、稀釋穩(wěn)定性、冷熱貯穩(wěn)定性符合商品農(nóng)藥制劑的要求。實(shí)施例12、田間試驗(yàn)以實(shí)施例10中的10X木霉菌素衍生物c-7水乳劑為例，同時(shí)配制同樣配方的10%木霉菌素(式ni)水乳劑作為參比藥劑。用量參照本發(fā)明的實(shí)際田間用量。在實(shí)驗(yàn)中，對(duì)于化合物組成的各種不同配方的制劑，按本發(fā)明的技術(shù)方案配制，均可達(dá)到比較理想的效果。試驗(yàn)設(shè)實(shí)施例10中的10%木霉菌素衍生物c-7水乳劑1200倍、800倍和10%木霉菌素水乳劑1200倍、800倍和常用殺菌劑施佳樂(lè)40%懸浮劑(SC)1200和800倍及清水對(duì)照6個(gè)處理，4次重復(fù)，隨機(jī)區(qū)組排列，實(shí)驗(yàn)對(duì)象為常規(guī)種植的番茄，每個(gè)小區(qū)約30株，從葉片發(fā)病初期開(kāi)始噴藥，每隔8天噴1次，共噴3次，噴藥時(shí)均勻噴葉面，重點(diǎn)噴葉背，直到稍微滴水為止。調(diào)査方法參照農(nóng)藥田間藥效試驗(yàn)準(zhǔn)則(一)，根據(jù)施藥前番茄葉片病情嚴(yán)重程度，確定施藥前是否先調(diào)査病指，然后在第二次和第三次施藥后7~10天各調(diào)査1次病指。每小區(qū)隨機(jī)抽査1015株，每株自上而下調(diào)査10片葉，每片葉按病斑占葉表面積的百分率進(jìn)行分級(jí)，計(jì)算供試藥劑各濃度處理平均病指及防效，并用DMRT法對(duì)試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行差異顯著性分析。0級(jí)果實(shí)不發(fā)??；l級(jí)病斑占整個(gè)果實(shí)面積的5%以下；3級(jí)病斑占整個(gè)果實(shí)面積的6%15%;5級(jí)病斑占整個(gè)果實(shí)面積的16%25%;7級(jí)病斑占整個(gè)果實(shí)面積的26%50%;9級(jí)病斑占整個(gè)果實(shí)面積的50%以上。表3、供試藥劑對(duì)番茄灰霉病的防效<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>結(jié)果說(shuō)明在相同有效用藥量的前提下，10%木霉菌素衍生物C-7水乳劑的效果明顯優(yōu)于10%木霉菌素水乳劑。最后，還需要注意的是，以上列舉的僅是本發(fā)明的若干個(gè)具體實(shí)施例。顯然，本發(fā)明不限于以上實(shí)施例，還可以有許多變形。本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員能從本發(fā)明公開(kāi)的內(nèi)容直接導(dǎo)出或聯(lián)想到的所有變形，均應(yīng)認(rèn)為是本發(fā)明的保護(hù)范圍。權(quán)利要求1、一種木霉菌素衍生物，其特征在于該木霉菌素衍生物的結(jié)構(gòu)通式為式中R為或2、如權(quán)利要求1所述的木霉菌素衍生物的用途，其特征在于用于殺滅植物病原真菌。3、根據(jù)權(quán)利要求2所述的木霉菌素衍生物的用途，其特征在于所述植物病原真菌為番茄灰霉病菌、終極腐霉、鐮刀菌、葉霉、立枯絲核菌、棉花枯萎或水稻稻瘟病菌。4、根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的木霉菌素衍生物的用途，其特征在于，所述木霉菌素衍生物被制成木霉菌素衍生物的重量含量為560%的可濕性粉劑、木霉菌素衍生物的重量含量為580%的乳油、微乳劑或水乳劑。全文摘要本發(fā)明公開(kāi)了一種木霉菌素衍生物，其結(jié)構(gòu)通式如右，該木霉菌素衍生物用于殺滅植物病原真菌，例如可殺滅番茄灰霉病菌、終極腐霉、鐮刀菌、葉霉、立枯絲核菌、棉花枯萎和水稻稻瘟病菌等。文檔編號(hào)A01N43/90GK101429203SQ20081016258公開(kāi)日2009年5月13日申請(qǐng)日期2008年12月4日優(yōu)先權(quán)日2008年12月4日發(fā)明者勇周,朱國(guó)念,林福呈,王國(guó)平,程敬麗,章初龍,趙金浩申請(qǐng)人:建德市大洋化工有限公司