專利名稱：微管蛋白抑制劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本文描述的本發(fā)明涉及微管蛋白抑制劑(tubulysins)和微管蛋白抑制劑的類似 物，和制備微管蛋白抑制劑和微管蛋白抑制劑的類似物的方法。
背景技術(shù)：
微管蛋白抑制劑是一組微管蛋白聚合作用的強(qiáng)力抑制劑。微管蛋白抑制劑用于治 療包括致病細(xì)胞群的疾病和疾病狀態(tài)，諸如癌癥。通常，微管蛋白抑制劑為由示于下表的 N-甲基哌啶酸(Mep)、異亮氨酸(He)、稱為微管纈氨酸(tubuvalin) (Tuv)的非天然氨基 酸，以及或者稱為微管酪氨酸(tubutyrosine) (Tut，酪氨酸的類似物)的非天然氨基酸或 者稱為微管苯丙氨酸(tubuphenylalanine) (Tup，苯丙氨酸的類似物)的非天然氨基酸組
成的線性四肽 兩種特別的分枝桿菌在發(fā)酵過程中合成高滴度的微管蛋白抑制劑。然而，每種細(xì) 菌一般合成微管蛋白抑制因子的混合物，并且該混合物與那些分枝桿菌的每一菌種都不 同。例如，一種細(xì)菌，過渡型原囊粘菌(Archangium g印hyra)，產(chǎn)生作為主要成分因子的微 管蛋白抑制劑A、B、C、G和I，可通過其包含的Tut殘基鑒定其中的每一種。作為對(duì)比，另一 種細(xì)菌，碟形囊球粘菌(Angiococcusdisciformis)，產(chǎn)生作為主要成分因子的微管蛋白抑 制劑D、E、F和H，可通過其包含的Tup殘基鑒定其中的每一種。這樣的細(xì)菌發(fā)酵物是微管蛋白抑制劑的方便來源。然而，由于分枝桿菌僅產(chǎn)生某 些微管蛋白抑制劑和/或微管蛋白抑制劑的混合物，需要經(jīng)過內(nèi)部轉(zhuǎn)化將那些微管蛋白抑 制劑變成想要的醫(yī)療和藥理應(yīng)用的因子的方法。此外，需要制備醫(yī)療和藥理應(yīng)用的新穎微 管蛋白抑制劑、微管蛋白抑制劑的類似物和微管蛋白抑制劑衍生物的方法。發(fā)明簡(jiǎn)述本文描述制備微管蛋白抑制劑的方法。本文描述的還有微管蛋白抑制劑的類似物 和衍生物。在一個(gè)實(shí)施方案中，描述了從微管蛋白抑制劑的混合物，諸如由發(fā)酵或某些其 它方法產(chǎn)生的微管蛋白抑制劑的混合物，制備一種或多種微管蛋白抑制劑的方法。在另一 個(gè)實(shí)施方案中，本文描述了從一種或多種微管蛋白抑制劑制備微管蛋白抑制劑混合物的方 法。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本文描述了將一種微管蛋白抑制劑轉(zhuǎn)化為另一種微管蛋白抑制 劑的方法。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本文描述了將一種或多種微管蛋白抑制劑，或微管蛋白抑 制劑的混合物，轉(zhuǎn)化為一種或多種微管蛋白抑制劑的類似物，或微管蛋白抑制劑類似物的 混合物的方法。應(yīng)該理解的是，如在本文所用的，術(shù)語微管蛋白抑制劑共同地和單獨(dú)地均指 天然存在的微管蛋白抑制劑和本文描述的或可自本文描述的方法制備的微管蛋白抑制劑 的類似物和衍生物。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本文描述了新的微管蛋白抑制劑、微管蛋白抑制劑的類似 物和微管蛋白抑制劑衍生物，以及制備這樣的新的微管蛋白抑制劑、微管蛋白抑制劑的類 似物和微管蛋白抑制劑衍生物的方法。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述方法包括用酸處理一種或 多種微管蛋白抑制劑以制備中間體。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述方法包括隨后使中間體與 試劑反應(yīng)，以從不同的微管蛋白抑制劑的混合物制備微管蛋白抑制劑的混合物、從微管蛋 白抑制劑的混合物制備單一的微管蛋白抑制劑、從單一的微管蛋白抑制劑制備微管蛋白抑 制劑的混合物，或從不同的微管蛋白抑制劑制備單一的微管蛋白抑制劑的步驟。在本文描述的方法的一個(gè)實(shí)施方案中，中間體是式(la)、(Ib)或(Ic)化合物 其中R、R1、S、T、U、V、W、Y和Z如下文在多個(gè)實(shí)施方案、方面及其變化中描述。應(yīng)該理解的是，式(la)、(lb)和(Ic)中間體化合物可形成鹽，諸如與殘留酸 (residual acid)共軛堿的所成的鹽。此外，應(yīng)該理解的是，亞胺鹽(iminium)中間體，諸如 那些式(la)、(Ib)和(Ic)的中間體也可與相應(yīng)的?；s醛胺平衡，其中殘酸共軛堿被加至 亞胺鹽中間體中。還應(yīng)該認(rèn)識(shí)到的是，亞胺鹽中間體可形成溶劑化物或水合物，其每一個(gè)可 與亞胺鹽中間體平衡。在任何情況下，不受理論的束縛，相信親核試劑，諸如RCN、RXH和相 應(yīng)的陰離子及其鹽與亞胺鹽中間體反應(yīng)(不論亞胺鹽是否呈現(xiàn)鹽、水合物、溶劑化物或酰 基縮醛胺形式)，制備本文描述的化合物，諸如分別為式(2a)、(2b)和(2c)化合物 其中R、R1、R10, S、Τ、U、V、W、Y和Z如下文在多個(gè)實(shí)施方案、方面及其變化中描述。發(fā)明詳述本文描述的是使單一的微管蛋白抑制劑或微管蛋白抑制劑化合物的混合物轉(zhuǎn)化 單一的微管蛋白抑制劑化合物或不同的微管蛋白抑制劑化合物的混合物的方法。在一個(gè)實(shí) 施方案中，本文描述的微管蛋白抑制劑一般指下式的四肽化合物 及其藥用鹽，此處η 是 1-3 ；V是H、0R2或鹵代，而W是H、OR2或烷基，此處R2在每種情況下獨(dú)立選自H、烷基和 C (0) R3，此處R3是烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、芳基或芳烷基，其各自被任選取代；前提是當(dāng)V和W 都是OR2時(shí)，則R2不是H ；或V和W與所連接的碳結(jié)合在一起，形成羰基；X = H、(V4烷基、鏈烯基，其各自被任選取代，或CH2QR9 ；此處Q是-N-、_0-或-S-； R9 = H、CV4烷基、鏈烯基、芳基或C(O) R10 ；和R10 = CV6烷基、鏈烯基、芳基或雜芳基；Z是烷基而Y是0 ；或Z是烷基或C (0) R4，而Y不存在，此處R4是烷基、CF3或芳基；R1是H，或R1表示1-3個(gè)取代基，所述取代基選自商代、硝基、羧酸基或其衍生物、 氰基、羥基、烷基、鹵代烷基、烷氧基、鹵代烷氧基、苯酚保護(hù)基團(tuán)、前藥部分和0R6，此處R6是 任選取代的芳基、C(0)R7、P(0) (OR8) 2或SO3R8,此處R7和R8在每種情況下獨(dú)立選自H、烷基、 鏈烯基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基和芳烷基，其各自被任選取代，或R8是金屬陽離子；且R是OH或離去基團(tuán)，或R形成羧酸衍生物。在一個(gè)變化中，Z是甲基。在另一個(gè)變化中，R1是H。在另一個(gè)變化中，R1是在C (4) 的OR6，此處R6是H、烷基或COR7。在另一個(gè)變化中，V是H而W是OC (O)R3。作為例證的離去基團(tuán)包括，但不限于鹵化物、磺酸鹽，諸如三氟甲磺酸鹽等、任選 取代的苯氧基，諸如五氟苯氧基等、自酯形成試劑或胺形成試劑形成的中間體，諸如氯甲酸 異丁酯、DCC、HOBt, EDC、PyBOP, BOP, BOP-Cl 等。
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作為例證的羧酸衍生物包括，但不限于酯、酰胺、酰亞胺、?；ｋ?(acylhydrazides)、腈，及其任選取代的變體。在另一個(gè)實(shí)施方案中，描述了以下以下通式的微管蛋白抑制劑
η 是 1-3 ；V是H、0R2或鹵代，而W是H、OR2或烷基，此處R2在每種情況下獨(dú)立選自H、烷基或 C (0) R3,此處R3是烷基、鏈烯基或芳基，前提是當(dāng)V和W都是OR2時(shí)，則R2不是H ；或V和W 與所連接的碳結(jié)合在一起，形成羰基；X = H、(V4烷基、鏈烯基，其各自被任選取代，或CH2QR9 ；此處Q是-N-、_0-或-S-； R9 = H、CV4烷基、鏈烯基、芳基或C(O) R10 ；和R10 = CV6烷基、鏈烯基、芳基或雜芳基；Z是烷基或C (0) R4,此處R4是烷基、CF3或芳基；T是H或0R6，此處R6是H、烷基、芳基、COR7、P (0) (OR8) 2或SO3R8,此處R7和R8在每 種情況下獨(dú)立選自H、烷基、鏈烯基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基和芳烷基，其各自被任選取代，或 R8是金屬陽離子或R6是苯酚保護(hù)基團(tuán)，或前藥部分；S和U各自獨(dú)立選自H、鹵代、硝基、氰基、烷基、鹵代烷基、烷氧基和鹵代烷氧基；和R是OH或離去基團(tuán)，或R形成羧酸衍生物。在一個(gè)實(shí)施方案中，描述了天然微管蛋白抑制劑及其相應(yīng)的類似物和衍生物。這 樣的天然微管蛋白抑制劑一般為由N-甲基哌啶酸(Mep)、異亮氨酸(lie)、稱為微管纈氨酸 (Tuv)的非天然氨基酸，以及或者稱為微管酪氨酸(Tut，酪氨酸的類似物)的非天然氨基酸 或者稱為微管苯丙氨酸(Tup，苯丙氨酸的類似物)的非天然氨基酸組成的線性四肽。在另 一個(gè)實(shí)施方案中，描述了天然存在的以下通式的微管蛋白抑制劑及其類似物和衍生物 及其藥用鹽，此處R、R1和Rw如在本文多個(gè)實(shí)施方案中描述。在一個(gè)實(shí)施方案中，通過制備式(Ia)中間體化合物，使第一種微管蛋白抑制劑或 作為備選的微管蛋白抑制劑的混合物轉(zhuǎn)化為第二種微管蛋白抑制劑，其中η 是 1-3 ；V是H、0R2或鹵代，而W是H、OR2或烷基，此處R2在每種情況下獨(dú)立選自H、烷基和 C(O)R3,此處R3是各自被任選取代的烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、芳基或芳烷基；前提是當(dāng)V和W 都是OR2時(shí)，則R2不是H ；或V和W與所連接的碳結(jié)合在一起，形成羰基；X = H、(V4烷基、鏈烯基，其各自被任選取代，或CH2QR9 ；此處Q是-N-、_0-或-S-；R9 = H、CV4烷基、鏈烯基、芳基或C(O) R10 ；和R10 = CV6烷基、鏈烯基、芳基或雜芳基；Z是烷基而Y是0 ；或Z是烷基或C (0) R4，而Y不存在，此處R4是烷基、CF3或芳基；R1是H，或R1表示1-3個(gè)取代基，所述取代基選自商代、硝基、羧酸基或其衍生物、 氰基、羥基、烷基、鹵代烷基、烷氧基、鹵代烷氧基、苯酚保護(hù)基團(tuán)、前藥部分和0R6，此處R6是 任選取代的芳基、C(0)R7、P(0) (OR8) 2或SO3R8,此處R7和R8在每種情況下獨(dú)立選自H、烷基、 鏈烯基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基和芳烷基，其各自被任選取代，或R8是金屬陽離子；且R是OH或離去基團(tuán)，或R形成羧酸衍生物。通過在基本無水的條件下將式(2b)微
管蛋白抑制劑或微管蛋白抑制劑的混合物與酸混合制備中間體 及其藥用鹽，此處η 是 1-3 ；V是H、0R2或鹵代，而W是H、OR2或烷基，此處R2在每種情況下獨(dú)立選自H、烷基和 C(O)R3,此處R3是各自被任選取代的烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、芳基或芳烷基；前提是當(dāng)V和W 都是OR2時(shí)，則R2不是H ；或V和W與所連接的碳結(jié)合在一起，形成羰基；X = H、(V4烷基、鏈烯基，其各自被任選取代，或CH2QR9 ；此處Q是-N-、_0-或-S-； R9 = H、CV4烷基、鏈烯基、芳基或C(O) R10 ；和R10 = CV6烷基、鏈烯基、芳基或雜芳基；Z是烷基而Y是0 ；或Z是烷基或C (0) R4，而Y不存在，此處R4是烷基、CF3或芳基；R1是H，或R1表示1-3個(gè)取代基，所述取代基選自商代、硝基、羧酸基或其衍生物、 氰基、羥基、烷基、鹵代烷基、烷氧基、鹵代烷氧基、苯酚保護(hù)基團(tuán)、前藥部分和0R6，此處R6是 任選取代的芳基、C(0)R7、P(0) (OR8) 2或SO3R8,此處R7和R8在每種情況下獨(dú)立選自H、烷基、 鏈烯基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基和芳烷基，其各自被任選取代，或R8是金屬陽離子；且R是OH或離去基團(tuán)，或R形成羧酸衍生物。然后用式RkiCO2H化合物處理式(Ia)中間體化合物，此處Rltl不同于如在用于制備 第二種式(2a)化合物的第一種微管蛋白抑制劑中存在的R1(l。在一個(gè)變化中，Z是甲基。在另一個(gè)變化中，R1是H。在另一個(gè)變化中，R1是在C(4) 的OR6，此處R6是H、烷基或COR7。在另一個(gè)變化中，V是H而W是OC(O)R3。在另一個(gè)變化 中，R是0H。在另一個(gè)變化中，R形成酯衍生物。在另一個(gè)變化中，R形成酰胺衍生物。在 另一個(gè)變化中，R形成?；ｋ菅?acylhydrazide)生物，諸如自胼形成的化合物。在另一個(gè)實(shí)施方案中，通過制備式(Ib)中間體化合物，使第一種微管蛋白抑制劑 或作為備選的微管蛋白抑制劑的混合物，轉(zhuǎn)化為第二種微管蛋白抑制劑，其中V是H、0R2或 鹵代，而W是H、OR2或烷基，此處R2在每種情況下獨(dú)立選自H、烷基或C0R3，此處R3是烷基、 鏈烯基或芳基，前提是當(dāng)V和W都是OR2時(shí)，則R2不是H ；或V和W與所連接的碳結(jié)合在一 起，形成羰基；Z是CH3或C0R4，而Y不存在；或Z是CH3,且Y是0 ；此處R4是烷基、CF3或芳 基；T是H或OR6,此處R6是H、烷基、芳基、COR7、P (0) (OR8) 2或SO3R8,此處R7和R8在每種情 況下獨(dú)立選自H、烷基、鏈烯基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基和芳烷基，其各自被任選取代，或R8是金屬陽離子；且S和U各自獨(dú)立選自H、鹵代、硝基、氰基、烷基、鹵代烷基、烷氧基和鹵代烷 氧基，或其相應(yīng)的羧酸衍生物，此處R不是0H。通過在基本無水的條件下，使式(2b)微管蛋 白抑制劑或微管蛋白抑制劑的混合物與酸混合制備中間體
其中Rltl是H、烷基、鏈烯基、環(huán)烷基、芳基和芳烷基，其各自被任選取代；V是H、0R2 或鹵代，而W是H、OR2或烷基，此處R2在每種情況下獨(dú)立選自H、烷基或C0R3，此處R3是烷 基、鏈烯基、環(huán)烷基、芳基或芳烷基，其各自被任選取代，前提是當(dāng)V和W都是OR2時(shí)，則R2不 是H ；或V和W與所連接的碳結(jié)合在一起，形成羰基；Z是CH3或C0R4，而Y不存在；或Z是 CH3,且Y是0 ；此處R4是烷基、CF3或芳基；T是H或OR6,此處R6是H、烷基、芳基、C0R7、P (0) (OR8) 2或SO3R8,此處R7和R8在每種情況下獨(dú)立選自H、烷基、鏈烯基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基 和芳烷基，其各自被任選取代，或R8是金屬陽離子；且S和U各自獨(dú)立選自H、鹵代、硝基、氰 基、烷基、鹵代烷基、烷氧基和鹵代烷氧基，或其相應(yīng)的羧酸衍生物，此處R不是0H。然后，用 式RkiCO2H化合物處理式(Ib)中間體化合物，此處Rltl不同于如在制備式(2b)第二種化合 物的第一種微管蛋白抑制劑的R"1。在另一個(gè)實(shí)施方案中，通過制備式(Ic)中間體化合物，使第一種微管蛋白抑制劑 或微管蛋白抑制劑的混合物轉(zhuǎn)化為第二種微管蛋白抑制劑，其中T是H或0H。通過在基本 無水的條件下，使式(2c)微管蛋白抑制劑或微管蛋白抑制劑的混合物與酸混合，制備中間 體
(2c)其中T是H或OH和Rltl是H、烷基、鏈烯基、環(huán)烷基、芳基和芳烷基，其各自被任選 取代，或其相應(yīng)的羧酸衍生物，此處R不是0H。然后用式RkiCO2H化合物處理式(Ic)中間體 化合物，此處Rltl不同于如存在于用于制備式(2c)第二種化合物的起始微管蛋白抑制劑中 的R1。在前述的各個(gè)實(shí)施方案中，應(yīng)該理解的是，在某些構(gòu)型中，微管蛋白抑制劑可轉(zhuǎn)化 為不同的微管蛋白抑制劑的混合物，而不是轉(zhuǎn)化為單一的微管蛋白抑制劑。在這樣的實(shí)施 方案中，單一的起始微管蛋白抑制劑或微管蛋白抑制劑的混合物，可首先轉(zhuǎn)化為普通的式 (la), (Ib)或(Ic)中間體化合物或這些中間體化合物的混合物，然后將這些中間體化合物 與羧酸混合物反應(yīng)，以提供想要的微管蛋白抑制劑的混合物。例如，如果需要微管蛋白抑制 劑B和C或其相應(yīng)的類似物或衍生物的混合物，單一的起始微管蛋白抑制劑，諸如微管蛋白抑制劑A或其相應(yīng)的類似物或衍生物或作為備選的微管蛋白抑制劑的混合物，可首先轉(zhuǎn)化 為相應(yīng)的式(la)、(lb)或(Ic)化合物，其中T是0H，然后與羧酸，諸如分別相應(yīng)于微管蛋 白抑制劑B和C上的適當(dāng)?shù)幕鶊F(tuán)的丁酸和丙酸的混合物反應(yīng)。應(yīng)該認(rèn)識(shí)到的是，可產(chǎn)生基 于用于第二個(gè)步驟的相對(duì)比例的羧酸統(tǒng)計(jì)學(xué)上的混合物?；蛘?，還應(yīng)該認(rèn)識(shí)到的是，動(dòng)力學(xué) 和熱力學(xué)因素可影響在第二個(gè)步驟中獲得的微管蛋白抑制劑的最終的比例，從而將不產(chǎn)生 基于羧酸比率的統(tǒng)計(jì)學(xué)上的微管蛋白抑制劑的混合物。在另一種情況下，應(yīng)該理解的是，常 規(guī)最佳的相對(duì)比率的羧酸混合物將從普通的式(la)、(lb)和(Ic)中間體提供想要的微管 蛋白抑制劑的混合物。在另一個(gè)實(shí)施方案中，可用式R9QH化合物或由其制備的陰離子處理式(Ib)中間
體化合物，以得到下式化合物 其中Q是-N-、-0-或-S- ；R9是H、烷基、鏈烯基、環(huán)烷基、芳基或芳烷基，其各自被 任選取代，或R9是C(O)R20、S(O)2R20或P(O) (OR20)2 ；此處R20在每種情況下獨(dú)立選自H、烷 基、鏈烯基、環(huán)烷基、芳基和芳烷基，其各自被任選取代，或R2°是金屬陽離子；V是H、OR2或 鹵代，而W是H、0R2或烷基，此處R2在每種情況下獨(dú)立選自H、烷基或C0R3，此處R3是各自被 任選取代的烷基、鏈烯基、環(huán)烷基、芳基或芳烷基，前提是當(dāng)V和W都是OR2時(shí)，則R2不是H ； 或V和W與所連接的碳結(jié)合在一起，形成羰基。Z是CH3或C0R4，而Y不存在；或Z是CH3,且 Y是0 ；此處R4是烷基、CF3或芳基；T是H或OR6,此處R6是H、烷基、芳基、COR7、P (0) (OR8) 2 或SO3R8,此處R7和R8在每種情況下獨(dú)立選自H、烷基、鏈烯基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基和芳烷 基，其各自被任選取代，或R8是金屬陽離子；且S和U各自獨(dú)立選自H、鹵代、硝基、氰基、烷 基、鹵代烷基、烷氧基和鹵代烷氧基或其相應(yīng)的羧酸衍生物，此處R不是0H。在另一個(gè)實(shí)施方案中，可用式R9QH化合物或其陰離子處理式(Ic)中間體化合物，
以得到下式化合物
任選取代，或R9是C(0)R2°、S(0)2R2°或P(O) (OR20)2 ；此處R2tl在每種情況下獨(dú)立選自H、烷基、 鏈烯基、環(huán)烷基、芳基和芳烷基，其各自被任選取代，或R2°是金屬陽離子；且T是H或OH或 其相應(yīng)的羧酸衍生物，此處R不是0H。 應(yīng)該理解的是，可經(jīng)由相應(yīng)的式(Ia)中間體和R9QH類似地制備相應(yīng)的式(2a)化
12合物。在另一個(gè)實(shí)施方案中，可用腈化合物，R21CN處理式(Ib)中間體化合物，以得到下
式化合物 其中R21是各自被任選取代的烷基、鏈烯基、環(huán)烷基、芳基或芳烷基；V是H、OR2或 鹵代，而W是H、0R2或烷基，此處R2在每種情況下獨(dú)立選自H、烷基或C0R3，此處R3是各自被 任選取代的烷基、鏈烯基、環(huán)烷基、芳基或芳烷基，前提是當(dāng)V和W都是OR2時(shí)，則R2不是H ； 或V和W與所連接的碳結(jié)合在一起，形成羰基。Z是CH3或C0R4，而Y不存在；或Z是CH3,且 Y是0 ；此處R4是烷基、CF3或芳基；T是H或OR6,此處R6是H、烷基、芳基、COR7、P (0) (OR8) 2 或SO3R8,此處R7和R8在每種情況下獨(dú)立選自H、烷基、鏈烯基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基和芳烷 基，其各自被任選取代，或R8是金屬陽離子；且S和U各自獨(dú)立選自H、鹵代、硝基、氰基、烷 基、鹵代烷基、烷氧基和鹵代烷氧基或其相應(yīng)的羧酸衍生物，此處R不是0H。在另一個(gè)實(shí)施方案中，可用腈化合物，R21CN處理式(Ic)中間體化合物，以得到下 式化合物 其中R21是各自被任選取代的烷基、鏈烯基、環(huán)烷基、芳基或芳烷基，和T是H或0H， 或其相應(yīng)的羧酸衍生物，此處R不是0H。應(yīng)該理解的是，可經(jīng)由相應(yīng)的式(Ia)中間體和R21CN類似地制備相應(yīng)的式(2a)化 合物。在另一個(gè)實(shí)施方案中，可用式R22 (TMS) CCH2的鏈烯基硅烷處理式(Ib)中間體化合
物，以得到下式化合物 其中R22是各自被任選取代的烷基、鏈烯基、環(huán)烷基、芳基或芳烷基；V是H、OR2或 鹵代，而W是H、0R2或烷基，此處R2在每種情況下獨(dú)立選自H、烷基或C0R3，此處R3是各自被任選取代的烷基、鏈烯基、環(huán)烷基、芳基或芳烷基，前提是當(dāng)V和W都是OR2時(shí)，則R2不是H ； 或V和W與所連接的碳結(jié)合在一起，形成羰基；Z是CH3或C0R4，而Y不存在；或Z是CH3,且 Y是0 ；此處R4是烷基、CF3或芳基；T是H或OR6,此處R6是H、烷基、芳基、COR7、P (0) (OR8) 2 或SO3R8,此處R7和R8在每種情況下獨(dú)立選自H、烷基、鏈烯基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基和芳烷 基，其各自被任選取代，或R8是金屬陽離子；且S和U各自獨(dú)立選自H、鹵代、硝基、氰基、烷 基、鹵代烷基、烷氧基和鹵代烷氧基，或其相應(yīng)的羧酸衍生物，此處R不是0H。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，可用式R22 (TMS) CCH2的鏈烯基硅烷處理式(Ic)中間體化合 物，以得到下式化合物 其中R22是各自被任選取代的烷基、鏈烯基、環(huán)烷基、芳基或芳烷基；和T是H或0H， 或其相應(yīng)的羧酸衍生物，此處R不是0H。應(yīng)該理解的是，可經(jīng)由相應(yīng)的式(Ia)中間體和R22 (TMS)CCH2類似地制備相應(yīng)的式 (2a)化合物。應(yīng)該理解的是，在前述的實(shí)施方案中，可通過異構(gòu)化作用形成其它烯烴，這取決于 反應(yīng)條件和R22的特性。例如，當(dāng)R22是烷基時(shí)，應(yīng)該認(rèn)識(shí)到的是，在反應(yīng)條件下，雙鍵可沿著 鏈烯基鏈遷移至其它碳原子，包括形成末端或ω-烯烴。在另一個(gè)實(shí)施方案中，用式R23C(O)CH2Ra化合物處理式(Ib)中間體化合物，以得到 下式化合物 其中R23是H、烷基、鏈烯基、環(huán)烷基、芳基或芳烷基，其各自被任選取代；Ra是C(O) R9> C(O)OR9或CN ；R9選自H、烷基、鏈烯基、環(huán)烷基、芳基和芳烷基，其各自被任選取代；V是 H、OR2或鹵代，而W是H、OR2或烷基，此處R2在每種情況下獨(dú)立選自H、烷基或C0R3，此處R3 是各自被任選取代的烷基、鏈烯基、環(huán)烷基、芳基或芳烷基，前提是當(dāng)V和W都是OR2時(shí)，則 R2不是H ；或V和W與所連接的碳結(jié)合在一起，形成羰基；Z是CH3或C0R4，而Y不存在；或 Z是CH3,且Y是0 ；此處R4是烷基、CF3或芳基；T是H或0R6，此處R6是H、烷基、芳基、C0R7、 P(O) (OR8) 2或SO3R8,此處R7和R8在每種情況下獨(dú)立選自H、烷基、鏈烯基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、 芳基和芳烷基，其各自被任選取代，或R8是金屬陽離子；且S和U各自獨(dú)立選自H、鹵代、硝 基、氰基、烷基、鹵代烷基、烷氧基和鹵代烷氧基，或其相應(yīng)的羧酸衍生物，此處R不是0H。在另一個(gè)實(shí)施方案中，用式R23C(O)CH2Ra化合物處理式(Ic)中間體化合物，以得到下式化合物
其中R23是H、烷基、鏈烯基、環(huán)烷基、芳基或芳烷基，其各自被任選取代；Ra是C(O) R9> C(O)OR9或CN ；R9選自H、烷基、鏈烯基、環(huán)烷基、芳基和芳烷基，其各自被任選取代；和T 是H或0H，或其相應(yīng)的羧酸衍生物，此處R不是0H。應(yīng)該理解的是，可經(jīng)由相應(yīng)的式(Ia)中間體和R23C(O)CH2Ra類似地制備相應(yīng)的式 (2a)化合物。在另一個(gè)實(shí)施方案中，用水處理式(Ib)中間體化合物，以得到下式(3b)的第二種
中間體化合物。 其中V是H、0R2或鹵代，而W是H、OR2或烷基，此處R2在每種情況下獨(dú)立選自H、烷 基或C0R3，此處R3是各自被任選取代的烷基、鏈烯基、環(huán)烷基、芳基或芳烷基，前提是當(dāng)V和 W都是OR2時(shí)，則R2不是H ；或V和W與所連接的碳結(jié)合在一起，形成羰基；Z是CH3或C0R4， 而Y不存在；或Z是013，且￥是0;此處R4是烷基、CF3或芳基；T是H或0R6，此處R6是H、 烷基、芳基、C0R7、P(0) (OR8)2或SO3R8,此處R7和R8在每種情況下獨(dú)立選自H、烷基、鏈烯基、 環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基和芳烷基，其各自被任選取代，或R8是金屬陽離子；且S和U各自獨(dú)立 選自H、商代、硝基、氰基、烷基、商代烷基、烷氧基和商代烷氧基，或其相應(yīng)的羧酸衍生物，此 處R不是0H。在另一個(gè)實(shí)施方案中，用水處理式(Ic)中間體化合物，以得到式(3c)第二種中間
體化合物物。
其中T是H或0H，或其相應(yīng)的羧酸衍生物，此處R不是0H。
應(yīng)該理解的是，可經(jīng)由相應(yīng)的式(Ia)中間體和水類似地制備相應(yīng)的式(3a)化合
在另一個(gè)實(shí)施方案中，用鹵化劑、磺?；瘎?、膦?；瘎┗蛄柞；瘎┨幚硎?3b)中間體化合物，以得到下式化合物
其中X3 是鹵素、OS(O)2R24, OP(O) (OR24)R24 或 OP(O) (OR24)2 ；此處 R24 在每種情況下 獨(dú)立選自H、烷基、鏈烯基、環(huán)烷基、芳基和芳烷基，其各自被任選取代，或R24是金屬陽離子； V是H、OR2或鹵代，而W是H、OR2或烷基，此處R2在每種情況下獨(dú)立選自H、烷基或C0R3，此 處R3是各自被任選取代的烷基、鏈烯基、環(huán)烷基、芳基或芳烷基，前提是當(dāng)V和W都是OR2時(shí)， 則R2不是H ；或V和W與所連接的碳結(jié)合在一起，形成羰基；Z是CH3或C0R4，而Y不存在；或 Z是CH3,且Y是0 ；此處R4是烷基、CF3或芳基；T是H或0R6，此處R6是H、烷基、芳基、C0R7、 P(O) (OR8) 2或SO3R8,此處R7和R8在每種情況下獨(dú)立選自H、烷基、鏈烯基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、 芳基和芳烷基，其各自被任選取代，或R8是金屬陽離子；且S和U各自獨(dú)立選自H、鹵代、硝 基、氰基、烷基、鹵代烷基、烷氧基和鹵代烷氧基，或其相應(yīng)的羧酸衍生物，此處R不是0H。在另一個(gè)實(shí)施方案中，用鹵化劑、磺?；瘎㈧Ⅴ；瘎┗蛄柞；瘎┨幚硎?3c)中 間體化合物，以得到下式化合物 其中X3 是鹵素、OS (0) 2R24、OP (0) (OR24) R24 或 OP (0) (OR24) 2 ；此處 R24 在每種情況下 獨(dú)立選自H、烷基、鏈烯基、環(huán)烷基、芳基和芳烷基，其各自被任選取代，或R24是金屬陽離子； 且T是H或0H，或其相應(yīng)的羧酸衍生物，此處R不是0H。應(yīng)該理解的是，可經(jīng)由相應(yīng)的式(Ia)中間體并用鹵化劑、磺酰化劑、膦?；瘎┗?磷?；瘎┨幚恚愃频刂苽湎鄳?yīng)的式(3a)化合物。在另一個(gè)實(shí)施方案中，描述了下式(2d)化合物 其中Rltl是H、烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、芳基或芳烷基，其各自被任選取代；且T是H 或0Η，或其相應(yīng)的羧酸衍生物，此處R不是OH ；用三氟乙酸處理之，并且在減壓下濃縮該混 合物，以得到中間體亞胺鹽化合物。應(yīng)該理解的是，這樣的亞胺鹽化合物可以相應(yīng)的三氟乙 酸鹽化合物，及其它的水合物和溶劑化物存在，以及作為如由下式闡述的?；s醛胺化合物和其它其它加成加合物存在
使那些式的化合物，或本文描述的其它相應(yīng)的中間體混合，并通過用TFA和醇處 理(2d)化合物制備，得到相應(yīng)的下式N，0-縮醛化合物 其中R9是H、烷基、鏈烯基、環(huán)烷基、芳基或芳烷基，其各自被任選取代，或R9是 C(O)R20, S(O)2R2tl或P(O) (OR20)2 ；此處R2tl在每種情況下獨(dú)立選自H、烷基、鏈烯基、環(huán)烷基、 芳基和芳烷基，其各自被任選取代，或R2°是金屬陽離子；和T是H或0H，或其相應(yīng)的羧酸衍 生物，此處R不是0H。在另一個(gè)實(shí)施方案中，使式(2d)化合物與三氟乙酸混合，并在減壓下濃縮該混合
物，隨后使?jié)饪s的混合物與硫醇混合，得到下式N，S-縮醛化合物 其中R9是H、烷基、鏈烯基、環(huán)烷基、芳基或芳烷基，其各自被任選取代，或R9是 C(O)R20、S(O)2R20或P(O) (OR2tl)2，此處R2tl在每種情況下獨(dú)立選自H、烷基、鏈烯基、環(huán)烷基、 芳基和芳烷基，其各自被任選取代，或R2°是金屬陽離子和T是H或0H，或其相應(yīng)的羧酸衍 生物，此處R不是0H。在另一個(gè)實(shí)施方案中，使式(2d)化合物與三氟乙酸混合，并在減壓下濃縮該混合 物，隨后使?jié)饪s的混合物與腈混合，得到下式化合物 其中R21是各自被任選取代的烷基、鏈烯基、環(huán)烷基、芳基或芳烷基，和T是H或0Η， 或其相應(yīng)的羧酸衍生物，此處R不是0Η。
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在另一個(gè)實(shí)施方案中，使式(2d)化合物與三氟乙酸混合，并在減壓下濃縮該混合 物，隨后使?jié)饪s的混合物與酮混合，在Biginelli-型反應(yīng)中，得到下式化合物 其中R23是H、烷基、鏈烯基、環(huán)烷基、芳基或芳烷基，其可各自被任選取代，Ra是 ((0)礦、((0)( 8或^ R8選自H、烷基、鏈烯基、環(huán)烷基、芳基和芳烷基，其各自被任選取代， 和T是H或0H，或其相應(yīng)的羧酸衍生物，此處R不是0H。在另一個(gè)實(shí)施方案中，使式(2d)化合物與三氟乙酸混合，并在減壓下濃縮該混合 物，隨后使?jié)饪s的混合物與鏈烯基硅烷混合，得到下式化合物 其中R22是各自被任選取代的烷基、鏈烯基、環(huán)烷基、芳基或芳烷基；和T是H或0H， 或其相應(yīng)的羧酸衍生物，此處R不是0H。在另一個(gè)實(shí)施方案中，使式(2d)化合物與三氟乙酸混合，并在減壓下濃縮該混合 物，隨后使?jié)饪s的混合物與水混合，得到式(3d)化合物 其在T是OH時(shí)也可稱為羥基微管蛋白抑制劑D，或當(dāng)T是OH時(shí)稱為羥基微管蛋白 抑制劑A，或指其相應(yīng)的羧酸衍生物，此處R不是0H。在另一個(gè)實(shí)施方案中，用磺酰鹵和堿處理N-羥基甲基微管蛋白抑制劑A或N-羥 基甲基微管蛋白抑制劑D，以得到下式化合物 其中R24是各自被任選取代的烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、芳基或芳烷基；和T是H或OH 或其相應(yīng)的羧酸衍生物，此處R不是0H。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，在亞磷酸三苯酯和咪唑的存在下，用溴或碘處理N-羥基甲 基微管蛋白抑制劑A或N-羥基甲基微管蛋白抑制劑D，以得到下式化合物 其中X4是Br或I ；和T是H或0H，或其相應(yīng)的羧酸衍生物，此處R不是OH。在另一個(gè)實(shí)施方案中，描述了下式的微管蛋白抑制劑的共軛物 及其藥用鹽，此處η是1-3 ；T是H或0R6，此處R6是H、烷基、芳基、C0R7、P (0) (OR8)2 或SO3R8,此處R7和R8在每種情況下獨(dú)立選自H、烷基、鏈烯基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基和芳 烷基，其各自被任選取代，或R8是金屬陽離子或R6是苯酚保護(hù)基團(tuán)，或前藥部分；Z是烷基 或C (0) R4,此處R4是烷基、CF3或芳基；和R是OH或離去基團(tuán)，或R形成羧酸衍生物。作為 例證的這樣的化合物和它們的制備方法的實(shí)例在J. Med. Chem. 51，1530-1533(2008)中描 述，該文獻(xiàn)的公開通過引用結(jié)合于本文。應(yīng)該理解的是，可在前述式的任何雜原子上通過 除去相應(yīng)的氫或其它基團(tuán)形成共軛物，包括，但不限于通過從R(此處R = 0H)、從T (此處 T = OH)等除去氫，形成共軛物。本文描述的共軛物可包括如通常在美國專利申請(qǐng)公布號(hào) 2005/0002942 (其公開通過引用結(jié)合于本文)中描述的間隔基連接鍵(spacer linkers)和 /或可除去的連接鍵(releasable linkers).此外，本文描述的共軛物可包括靶向配體，包 括，但不限于靶向致病細(xì)胞群的共軛物的葉酸鹽(folate)和葉酸鹽的類似物和衍生物，諸 如通常在美國專利申請(qǐng)公布號(hào)2005/0002942中描述的那樣。在另一個(gè)實(shí)施方案中，描述了以下通式的微管蛋白抑制劑 及其藥用鹽，此處η 是 1-3;V是H、0R2或鹵代，而W是H、OR2或烷基，此處R2在每種情況下獨(dú)立選自H、烷基或 COR3,此處R3是烷基、鏈烯基或芳基，前提是當(dāng)V和W都是OR2時(shí)，則R2不是H ；或V和W與 所連接的碳結(jié)合在一起，形成羰基；
X = H、CV4烷基、鏈烯基，其各自被任選取代，或CH2QR9 ；此處Q是-N-、_0_或_S_ ； R9 = H、CV4烷基、鏈烯基、芳基或C(O) R10 ；和R10 = CV6烷基、鏈烯基、芳基或雜芳基；Z是CH3或C0R4，而Y不存在；或Z是CH3,且Y是0 ；此處R4是烷基、CF3或芳基；T是H或OR6，此處R6是H、烷基、芳基、COR7、P (0) (OR8) 2或SO3R8,此處R7和R8在每 種情況下獨(dú)立選自H、烷基、鏈烯基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基和芳烷基，其各自被任選取代，或 R8是金屬陽離子；S和U各自獨(dú)立選自H、鹵代、硝基、氰基、烷基、鹵代烷基、烷氧基和鹵代烷氧基；和R是OH或離去基團(tuán)，或R形成羧酸衍生物。在美國專利申請(qǐng)公布號(hào)2006/0128754 和2005/0239713 (其公開通過引用結(jié)合于本文)中描述了另外的微管蛋白抑制劑。在另一個(gè)實(shí)施方案中，描述了下式的微管蛋白抑制劑 及其藥用鹽，此處η是1-3 ；T是H或0R6，此處R6是H、烷基、芳基、C0R7、P(0) (OR8)2 或SO3R8,此處R7和R8在每種情況下獨(dú)立選自H、烷基、鏈烯基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基和芳烷 基，其各自被任選取代，或R8是金屬陽離子，或R6是苯酚保護(hù)基團(tuán)，或前藥部分；Z是烷基或 C (0) R4,此處R4是烷基、CF3或芳基；和R是OH或離去基團(tuán)，或R形成羧酸衍生物。作為例 證的這樣的化合物和它們的制備方法的實(shí)例在J. Med. Chem. 51，1530-1533(2008)中描述， 該文獻(xiàn)的公開通過引用結(jié)合于本文。在另一個(gè)實(shí)施方案中，描述了下式的微管蛋白抑制劑 及其藥用鹽，此處η、S、Τ、U、V、W、Ζ、R和Rki如在本文的多個(gè)實(shí)施方案中描述。在另一個(gè)實(shí)施方案中，描述了下式的微管蛋白抑制劑 及其藥用鹽，此處n、S、T、U、V、W、Z、QR9和R如在本文的多個(gè)實(shí)施方案中描述。在 一個(gè)變化中，Q是-N-、-0-或-S-；和R9是H、烷基、鏈烯基、環(huán)烷基、芳基或芳烷基，其各自被 任選取代。在另一個(gè)變化中，QR9結(jié)合在一起形成C (0) R10^S (0) 2R1(i、P (0) (OR10a)2,此處Rw和 ORltla在每種情況下獨(dú)立選自H、烷基、鏈烯基、環(huán)烷基、芳基和芳烷基，其各自被任選取代，或Rltla是金屬陽離子。在另一個(gè)實(shí)施方案中，描述了下式的微管蛋白抑制劑 及其藥用鹽，此處R12表示一個(gè)或多個(gè)取代基，所述取代基選自各自被任選取代的 烷基、鏈烯基、環(huán)烷基、芳基和芳烷基；且此處η、S、Τ、U、V、W、Z和R如在本文的多個(gè)實(shí)施方 案中描述。應(yīng)該理解的是，可通過異構(gòu)化作用形成其它烯烴，這取決于反應(yīng)條件和R1的特 性。例如，當(dāng)R1是烷基時(shí)，應(yīng)該認(rèn)識(shí)到的是，在該反應(yīng)條件下，雙鍵可沿著鏈烯基鏈遷移至 其它碳原子，包括形成末端或ω-烯烴。在另一個(gè)實(shí)施方案中，描述了下式的微管蛋白抑制劑 及其藥用鹽，此處R13 是 C (0) R10、C (0) OR10 或 CN ；且此處 η、S、Τ、U、V、W、Ζ、R 和 R10 如在本文的多個(gè)實(shí)施方案中描述，此處Rki在每種情況下是獨(dú)立選擇的。在另一個(gè)實(shí)施方案中，描述了下式的微管蛋白抑制劑 及其藥用鹽，此處η、S、Τ、U、V、W、Z和R如在本文的多個(gè)實(shí)施方案中描述。在另一個(gè)實(shí)施方案中，描述了下式的微管蛋白抑制劑及其藥用鹽，此處X3 是鹵素、OS(O)2R10, OP(O) (ORltla)Rltl 或 OP(0) (OR10a)2 ；此處 Rki 和Rltla在每種情況下獨(dú)立選自H、烷基、鏈烯基、環(huán)烷基、芳基和芳烷基，其各自被任選取代， 或Ricia是金屬陽離子；且此處η、S、Τ、U、V、W、Z和R如在本文的多個(gè)實(shí)施方案中描述。用于制備本文描述的共軛物的另外的微管蛋白抑制劑，在Peltier等“微管蛋白抑制劑 D 的總合成(The Total Synthesis ofTubulysin D) J. Am. Chem. Soc. 128 16018-19 (2006) ”中描述，其公開在此通過引用結(jié)合于本文中。在前述的各個(gè)實(shí)施方案中，應(yīng)該理解的是，在一個(gè)變化中，各式化合物在指定的不 對(duì)稱骨架碳原子上具有以下絕對(duì)構(gòu)型 如本文所描述的，微管蛋白抑制劑化合物可為微管蛋白聚合作用的抑制劑，并且 也可為DNA-烷化劑(alkylators)。因此，本文描述了治療包括致病細(xì)胞群的疾病和疾病狀 態(tài)，諸如癌癥的方法。
實(shí)施例通用方法經(jīng)由注射器將三氟乙酸(TFA，0. 20mL)加入到無水二氯甲烷(DCM，0. 80mL)中的微 管蛋白抑制劑混合物(20mg，含微管蛋白抑制劑A、B、C、G、I和羥基微管蛋白抑制劑)的淺 棕色溶液中。于室溫和氬氣下攪拌40分鐘后，向該溶液中加入相應(yīng)的親核試劑(例如，但 不限于H20、MeOH、l-丙醇、乙二醇、3-甲基丁醇、丙硫醇、2-硫烷基乙醇、1，2-乙二硫醇 (ethanedithiol)、乙酸、丁酸、反式-4-氯-2- 丁烯酸)，0. 20mL用于所有硫醇而0. 50mL由 于所有其它的，并且于BUchi旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(BUchi Rotavapor)中減壓下濃縮該溶液，然后采 用油泵的方法再濃縮之。將粗產(chǎn)物溶解于二甲基亞砜(DMS0，1.0mL)中，并采用制備型HPLC 純化，獲得白色固體樣產(chǎn)物。通用制備型HPLC 參數(shù)柱Waters XTerra Prep MS C18 10 μ m，19x250mm ；流動(dòng) 相A :2. OmM磷酸鈉緩沖液，pH 7. 0 ；流動(dòng)相B 乙腈；方法用30分鐘從10% B至80% B，流 速=26mL/min。實(shí)施例.天然微管蛋白抑制劑的互變。將TFA(1. OmL)加至微管蛋白抑制劑的混 合物(105mg微管蛋白抑制劑A、B、C、G、I和羥基微管蛋白抑制劑A)于無水DCM(5. OmL)中 的淺棕色溶液中，將得到的淺棕色_綠色樣的溶液于室溫、氬氣下攪拌50分鐘。LC/MS指 示，微管蛋白抑制劑混合物轉(zhuǎn)化為羥基-微管蛋白抑制劑。向該溶液中加入丁酸(10mL)， 并且使該溶液經(jīng)蒸發(fā)第一次濃縮至小容量，以去除TFA和DCM，然后于真空下再濃縮約1小 時(shí)至稠厚油。HPLC分析指示羥基微管蛋白抑制劑中間體完全轉(zhuǎn)化為微管蛋白抑制劑B。將 粗產(chǎn)物溶解于 DMSO (1. 2mL)中，并通過制備型 HPLC，于 Waters XTerra Prep MS C18 10 μ m, 19x250mm柱上，使用以25mL/分鐘經(jīng)20分鐘從25% B至50% B梯度(A 2. OmM磷酸鹽緩沖 液，pH 7. 0 ；B =ACN)純化。收集11. 5至13. 5分鐘的流分并使之凍干至86mg的白色固體， 其含77mg的微管蛋白抑制劑B和9. Omg的磷酸鈉鹽。通過HPLC在實(shí)驗(yàn)全程監(jiān)測(cè)互變，與 參比標(biāo)準(zhǔn)樣品比較，顯示僅轉(zhuǎn)化為微管蛋白抑制劑B。應(yīng)該理解的是，其它微管蛋白抑制劑 的混合物可類似地轉(zhuǎn)化為單一的微管蛋白抑制劑。還應(yīng)該理解的是，此種和其它的微管蛋 白抑制劑的混合物可類似地轉(zhuǎn)化為除了微管蛋白抑制劑B外的不同的微管蛋白抑制劑。
實(shí)施例.天然微管蛋白抑制劑的互變。重復(fù)前述實(shí)施例中的條件用于(a)使微管 蛋白抑制劑A轉(zhuǎn)化為微管蛋白抑制劑B，(b)使微管蛋白抑制劑A轉(zhuǎn)化為微管蛋白抑制劑 I，(c)使微管蛋白抑制劑A和B的混合物轉(zhuǎn)化為微管蛋白抑制劑B，和(d)使微管蛋白抑制 劑A、B和I的混合物轉(zhuǎn)化為微管蛋白抑制劑B。在每種情況下，微管蛋白抑制劑B的得率 >90%。應(yīng)該理解的是，在實(shí)施例(a)至(d)的每一個(gè)中，相應(yīng)的微管蛋白抑制劑可轉(zhuǎn)化 為除了微管蛋白抑制劑B外的不同的微管蛋白抑制劑。還應(yīng)該理解的是，微管蛋白抑制劑 B可類似地轉(zhuǎn)化為不同的微管蛋白抑制劑。在某些情況下，也可分離N-羥基甲基取代的微 管蛋白抑制劑。令人驚奇的發(fā)現(xiàn)是，該半酰胺(hemiaminal)在天然pH下是穩(wěn)定的并且不
被分解為游離胺和甲醛。
羥基微管蛋白抑制劑A的1H NMR頻譜與其結(jié)構(gòu)相一致；MS的m/z = 760。在該實(shí) 驗(yàn)中得到的微管蛋白抑制劑B的1H NMR頻譜與其結(jié)構(gòu)相一致；MS的m/z = 830。實(shí)施例。甲氧基微管蛋白抑制劑(EC0313)。
將TFA(0. 20mL)加至于無水DCM(0. 80mL)中的微管蛋白抑制劑B(21. Omg)溶液 中，并將該混合物于室溫、氬氣下攪拌1小時(shí)。將MeOH(l. OmL)加至攪拌的溶液中，并在Ih 后蒸發(fā)溶劑。通過制備型HPLC，于Waters XTerra Prep MS C18 10 μ m，19x250mm柱上，使 用以IOmL/分鐘經(jīng)25分鐘從20% B至50% B梯度(A 1. OmM磷酸鹽緩沖液，pH 7. 0 ;B ACN)將殘余物純化。收集18. 8至22. 3分鐘的流分并使之凍干至18. Omg的白色固體，其 含15. 5mg的標(biāo)題化合物和2. 5mg的磷酸鈉鹽。在該實(shí)驗(yàn)中得到的甲氧基微管蛋白抑制劑 的1H NMR頻譜與其結(jié)構(gòu)相一致；MS的m/z = 774。 實(shí)施例.2-羥基乙氧基微管蛋白抑制劑(EC0346)
TFA(75 μ L)加至于無水DCM(0. 30mL)中的微管蛋白抑制劑B(4. 8mg)溶液中，
并將該混合物于室溫、氬氣下攪拌1小時(shí)。將乙:
(0. 30mL)加至攪拌的溶液中，并在30min 后蒸發(fā)溶劑。通過制備型 HPLC，于 Waters Phenomenex Luna C18IOym 4. 6x250mm 柱 上，使用以2. 5mL/分鐘經(jīng)20分鐘從10% B至80% B梯度(A :1. OmM磷酸鹽緩沖液，pH 7. 0 ； B =ACN)將殘余物純化。收集6. 3至6. 7分鐘的流分并使之凍干至4. 9mg的白色固體，其含 4. Smg的標(biāo)題化合物和0. Img的磷酸鈉鹽。在該實(shí)驗(yàn)中得到的2-羥基乙氧基微管蛋白抑制 劑的1H NMR頻譜與其結(jié)構(gòu)相一致；MS的m/z = 804。 將TFA (60 UL)加至于無水DCM (0. 54mL)中的微管蛋白抑制劑B (6. 9mg)溶液中， 并將該混合物于室溫、氬氣下攪拌30分鐘。將1，2-乙二硫醇(2.0yL)加至攪拌的溶液中， 并在 5h 后蒸發(fā)溶劑。通過制備型 HPLC，于 Waters XTerra Prep MS C18 IOym 19x 250mm 柱，使用以25mL/分鐘經(jīng)20分鐘從10% B至80% B梯度(A :2. OmM磷酸鹽緩沖液，pH 7.0; B =ACN)將殘余物純化。收集9. 5至10. 7分鐘的流分并使之凍干至7. 7mg的白色固體，其 含3. 4mg的標(biāo)題化合物和4. 3mg的磷酸鈉鹽。在該實(shí)驗(yàn)中得到的2-巰基乙硫基微管蛋白 抑制劑的1H NMR頻譜與其結(jié)構(gòu)相一致；MS的m/z = 836。實(shí)施例.異-丁酰氨基微管蛋白抑制劑(EC0585) 含因子A、B、C、G、I的微管蛋白抑制劑和羥基微管蛋白抑制劑(R分別=C(O) CH2CH (CH3) 2 > C (0) CH2CH2CH3^ C (0) CH2CH3、C (0) CH = C (CH3) 2、C (0) CH3 和 H)的混合物轉(zhuǎn)化為 單一的微管蛋白抑制劑。向于異戊腈(150yL)中的微管蛋白抑制劑混合物(25mg)溶液中 加入含TFA(30 μ L)、濃H2SO4 (20 μ L)和異戊腈(150 μ L)的溶液。于室溫?cái)嚢?2小時(shí)后，用 2. OmM磷酸鈉緩沖液(pH = 7. 0，15mL)猝滅反應(yīng)，并注入制備型HPLC中純化。柱Waters XTerra Prep MSC18 10 μ m, 19x 250mm ；流動(dòng)相 A :2. OmM 磷酸鈉緩沖液，pH 7. 0 ；流動(dòng)相 B 乙腈；方法用30分鐘從10% B至80% B，流速=26mL/min。收集從17. 22-18. 36分鐘的 流分并使之凍干以產(chǎn)生EC0585的白色固體(16mg)。在該實(shí)驗(yàn)中得到的異_ 丁酰氨基微管 蛋白抑制劑的1H NMR頻譜與其結(jié)構(gòu)相一致；MS的m/z = 843。實(shí)施例.N-高烯丙基微管蛋白抑制劑EC0550 含因子A、B、C、G、I的微管蛋白抑制劑和羥基微管蛋白抑制劑(R分別=C(O) CH2CH(CH3) 2、C (0) CH2CH2CH3^C(O) CH2CH3^C(O) CH = C (CH3) 2、C (0) CH3 和 H)的混合物轉(zhuǎn)化為單 一的微管蛋白抑制劑。于室溫下，將TFA(0. 15mL)加至于無水DCM(0. 60mL)中的微管蛋白抑 制劑混合物(19mg)溶液中。于室溫、氬氣下攪拌40分鐘后，用無水Me0H(0.50mL)猝滅反 應(yīng)。于真空，在BUchi旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(Biichi Rotavapor)上與無水Me0H(2x)和無水DCM(2x) 共同蒸發(fā)30分鐘，再在真空下與無水MeOH和無水DCM(2x)共同蒸發(fā)1. 5小時(shí)，濃縮溶液。 將殘余物溶解于無水DCM(0. 75mL)中，向其中加入烯丙基三甲基硅烷(0. 30mL)，在冰浴中 冷卻，并向其中加入BF3*Et20(0. 23mL)。于氬氣下、冰浴中攪拌反應(yīng)混合物30分鐘，然后移 去冷卻物，于室溫再攪拌反應(yīng)混合物2小時(shí)又50分鐘。濃縮反應(yīng)混合物，并經(jīng)制備型HPLC 純化殘余物。柱Waters XTerra PrepMS C18 10 μ m，19x 250mm ；流動(dòng)相 A 2. OmM 磷酸鈉緩 沖液，pH7. O ；流動(dòng)相B 乙腈；方法用30分鐘從15% B至80% B，流速=26mL/min。收集 從14. 41-15. 17分鐘的流分并使之凍干以得到EC0550的白色固體(IOmg)。在該實(shí)驗(yàn)中得 到的N-高烯丙基(homoallyl)微管蛋白抑制劑的1H NMR頻譜與其結(jié)構(gòu)相一致；MS的m/z =784。實(shí)施例.微管蛋白抑制劑B酰胼EC0347的合成。
于-15°C，借助注射器將N，N-二異丙基乙胺(DIPEA、6. IyL)和氯甲酸異 丁酯(3. O μ L)順序加至于無水EtOAc (2. OmL)中的微管蛋白抑制劑B (0. 15mg)溶液 中。于_15°C、氬氣下攪拌45分鐘后，使反應(yīng)混合物冷卻至-20°C，并向其中加入無水胼 (5.0yL)。于-20°C、氬氣下攪拌反應(yīng)混合物3小時(shí)，用l.OmM磷酸鈉緩沖液(ρΗ 7.0、 1. OmL)猝滅并注入制備型 HPLC 用于純化。柱Waters XTerra PrepMS C18 10 μ m, 19x 250mm ；流動(dòng)相A =LOmM磷酸鈉緩沖液，ρΗ7· 0 ；流動(dòng)相B 乙腈；方法用20分鐘從10% B 至80% B，流速=25mL/min。收集從15. 14-15. 54分鐘的流分并使之凍干以產(chǎn)生EC0347的 白色固體(2. 7mg)。在該實(shí)驗(yàn)中得到的微管蛋白抑制劑B酰胼的1H NMR頻譜與其結(jié)構(gòu)相一 致；MS 的 m/z = 844。 于0°C，將 DIPEA(0. 60mL)加至于無水 DCM(5. OmL)中的 HOBt-A (685mg、91 % )混 懸液中，氬氣下攪拌2分鐘，并且向其中加入無水胼(0. IOmL) 0于0°C、氬氣下，攪拌反應(yīng)混 合物10分鐘并于室溫中再攪拌30分鐘，過濾，并將濾液經(jīng)快速色譜法(硅膠，于DCM中的 2% MeOH)純化，得到澄清稠厚油樣EC0311 (371mg)，靜置使其固化。實(shí)施例.EC0312的合成。 于-15°C，借助注射器將DIPEA (36 μ L)和氯甲酸異丁酯(13 μ L)先后加至于無水 EtOAc (2. OmL)中的微管蛋白抑制劑B(82mg)溶液中。于_15°C、氬氣下攪拌45分鐘后，向 反應(yīng)混合物中加入無水EtOAc(l. OmL)中的EC0311溶液。于_15°C、氬氣下攪拌得到的溶 液15分鐘和于室溫下再攪拌45分鐘，濃縮和殘余物經(jīng)快速色譜法(硅膠，于DCM中的2至 8% MeOH)純化，得到白色固體樣EC0312(98mg)。在該實(shí)驗(yàn)中得到的EC0312的1H匪R頻譜 與其結(jié)構(gòu)相一致；MS的m/z = 1057。實(shí)施例.依據(jù)本文描述的方法制備以下化合物。 在該實(shí)驗(yàn)中得到的EC0575的1H匪R頻譜與其結(jié)構(gòu)相一致；MS的m/z = 862。 在該實(shí)驗(yàn)中得到的EC0560的1H匪R頻譜與其結(jié)構(gòu)相一致；MS的m/z = 820。 在該實(shí)驗(yàn)中得到的EC0356的1H NMR頻譜與其結(jié)構(gòu)相一致；MS的m/z = 817。
E 在該實(shí)驗(yàn)中得到的EC0611的1H NMR頻譜與其結(jié)構(gòu)相一致；MS的m/z = 802。 在該實(shí)驗(yàn)中得到的EC0623的1H NMR頻譜與其結(jié)構(gòu)相一致；MS的m/z = 818。應(yīng)該認(rèn)識(shí)到的是，前述實(shí)施例僅為本文描述的方法的示例性說明，且可作許多常 規(guī)修正以制備另外的微管蛋白抑制劑化合物及其類似物和衍生物。例如，可使用另外的醚 形成醇，包括但不限于醇，諸如乙醇、丙醇、仲-丁醇等，多元醇，諸如乙二醇、聚乙二醇、丙 二醇、聚丙二醇、丙三醇等，包括烷基及其?；苌铩被?，諸如氨基乙醇、氨基丙醇、聚 氨基烷基乙醇等，包括烷基及其?；苌锛捌渌?。類似地，另外的硫醇、羧酸、氨基酸、胺 類等可用作親核體以捕獲式(1)和(3)的中間體亞胺鹽化合物。方法實(shí)施例.細(xì)胞DNA合成的抑制。采用預(yù)測(cè)藥物抑制葉酸鹽受體陽性KB細(xì)胞 的生長(zhǎng)能力的體外細(xì)胞毒性試驗(yàn)，評(píng)價(jià)本文描述的化合物。于37°C，在缺乏或存在至少100 倍過量的葉酸下，將KB細(xì)胞暴露于一系列濃度范圍的葉酸鹽-藥物共軛物最多7h。然后用 新鮮培養(yǎng)基漂洗細(xì)胞，并于37°C在新鮮培養(yǎng)基中孵育72小時(shí)。采用3H-胸苷摻入試驗(yàn)評(píng)估 細(xì)胞生存能力。方法實(shí)施例.體外濃度-依賴的細(xì)胞毒性活性。將細(xì)胞濃密地接種在24-孔 Falcon板中，并允許其形成幾乎匯合成片的單層細(xì)胞過夜。在加入測(cè)試品之前三十分鐘， 從所有孔吸出用過的培養(yǎng)基并換入新鮮的無葉酸鹽的RPMI (FFRPMI)。注意，指定的孔接受 含100 μ M葉酸的培養(yǎng)基；在后者孔中的細(xì)胞用于測(cè)定靶向特異性，因?yàn)檫^量的葉酸(能夠
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27競(jìng)爭(zhēng)FR結(jié)合)的存在產(chǎn)生的細(xì)胞毒性活性將表示與FR-特異輸送無關(guān)的總活性的部分。 在一次用含10%熱滅活的胎牛血清的ImL新鮮FFRPMI漂洗后，每一孔接受含缺乏或存在 ΙΟΟμΜ游離葉酸(結(jié)合位點(diǎn)競(jìng)爭(zhēng)劑)的、漸增濃度的測(cè)試品(每個(gè)樣品4個(gè)孔)的ImL培養(yǎng) 基。處理的細(xì)胞于37°C脈經(jīng)沖2h，用0. 5mL的培養(yǎng)基漂洗4次，然后追蹤(chased)進(jìn)ImL 的新鮮培養(yǎng)基長(zhǎng)達(dá)70h。從所有孔吸出用過的培養(yǎng)基并換入含5 μ Ci/mL3H-胸苷的新鮮培 養(yǎng)基。在37°C再孵育2h后，用0. 5mL的PBS洗滌細(xì)胞3次，然后每孔用0. 5mL冰冷的5% 三氯乙酸處理。15min后，吸出三氯乙酸，并且通過加入0. 5mL的0. 25N氫氧化鈉溶解細(xì)胞 材料15min。將450 μ L的各個(gè)溶解的樣品轉(zhuǎn)移至含3mL的Ecolume閃爍合劑的閃爍計(jì)數(shù)瓶 中，然后在液體閃爍計(jì)數(shù)儀中計(jì)數(shù)。最終結(jié)果表示為相對(duì)于未處理對(duì)照品的3H-胸苷結(jié)合 的百分比。如下表中所示，劑量依賴性細(xì)胞毒性是可檢測(cè)的，并且在大多數(shù)情況下，IC5tl值 (減少50%的3H-胸苷結(jié)合至新合成的DNA所需的藥物共軛體濃度)在低的納摩爾范圍內(nèi)。 此外，這些共軛物的細(xì)胞毒性在過量的游離葉酸存在下被減少，提示觀察到的殺細(xì)胞作用 是通過結(jié)合葉酸鹽受體介導(dǎo)的。
方法實(shí)施例.腫瘤模型和療法。四至七周齡小鼠(Balb/c或nu/nu品系)購自 Harlan Sprague Dawley, Inc. (Indianapolis，IN)。由于正常嚙齒類動(dòng)物食物含高濃度的葉酸(6mg/kg食物)，在植入腫瘤之前，使在本研究中的所用的小鼠保持無葉酸鹽_膳 食(Harlan膳食#TD00434) 1周，以實(shí)現(xiàn)血清葉酸鹽濃度接近正常人血清范圍。為了接種 腫瘤細(xì)胞，將于100 μ L中的IxlO6M 109細(xì)胞或IxlO6KB細(xì)胞在背中區(qū)域行皮下組織注射。 每2-3天在兩個(gè)垂直方向用卡鉗測(cè)量腫瘤大小，并將它們的體積計(jì)算為0. 5xLxff2,此處L =長(zhǎng)軸測(cè)量值(mm)和W=與L垂直的軸的測(cè)量值(mm)。然后依據(jù)下述發(fā)表的方法計(jì)算 細(xì)胞殺傷對(duì)數(shù)(LCK)和處理組與對(duì)照組的比值(T/C)(見，如，Lee等〃 BMS-247550 一種 與類似于紫杉醇的作用模式起作用，但具有優(yōu)越的抗腫瘤效果的新的大環(huán)內(nèi)酯類抗腫瘤藥 類似物(BMS-247550 :a novel epothilone analog with a mode of action similarto paclitaxel but possessing superior antitumor efficacy) “ Clin CancerRes 7 1429-1437(2001) ；Rose,“紫杉酚-基組合化學(xué)療法及其它體內(nèi)臨床前抗腫瘤研究 (Taxol-based combination chemotherapy and otherin vivo preclinical antitumor studies) " J Natl Cancer Inst Monogr 47-53(1993))。每天以 PBS 新鮮制備給藥溶液， 并通過小鼠的尾側(cè)靜脈給藥。重要的是，給藥劑量在皮下注射腫瘤為50-100mm3體積時(shí)開 始。 通過經(jīng)心臟穿刺收集血液并且提交血清用于血尿素氮(BUN)、肌酐、總蛋 白、AST-SG0T、ALT-SGPT 加 Ani-Lytics，Inc. (Gaithersburg, MD)的標(biāo)準(zhǔn)血液細(xì)胞 板(cell panel)的獨(dú)立分析，評(píng)估持久的藥物毒性。此外，由Animal Reference Pathology Laboratories (ARUP ；Salt Lake City, Utah)的經(jīng)美國醫(yī)療專科委員會(huì)認(rèn)證的 (board-certified)病理學(xué)家實(shí)施對(duì)福爾馬林固定的心、肺、肝、脾、腎、腸、骨骼肌和骨(脛 骨/腓骨)進(jìn)行組織病理學(xué)評(píng)價(jià)。
權(quán)利要求
一種方法，該方法用于將下式的第一種化合物其中n是1 3；V是H、OR2或鹵代，而W是H、OR2或烷基，此處R2在每種情況下獨(dú)立選自H、烷基或C(O)R5，此處R5在每種情況下獨(dú)立選自烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、芳烷基和芳基；前提是當(dāng)V和W都是OR2時(shí)，則R2不是H；或V和W與所連接的碳結(jié)合在一起，形成羰基；Z是烷基而Y是O；或Z是烷基或C(O)R4，而Y不存在，此處R4是烷基、CF3或芳基；R1是H，或R1表示1 3個(gè)取代基，所述取代基選自鹵代、硝基、羧酸基或其衍生物、氰基、羥基、烷基、鹵代烷基、烷氧基、鹵代烷氧基、苯酚保護(hù)基團(tuán)、前藥部分和OR6，此處R6是任選取代的芳基、C(O)R7、P(O)(OR8)2或SO3R8，此處R7和R8在每種情況下獨(dú)立選自H、烷基、鏈烯基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基和芳烷基，其各自被任選取代，或R8是金屬陽離子；R是OH或離去基團(tuán)，或R形成羧酸衍生物；以及R10是烷基或鏈烯基，其各自被任選取代；轉(zhuǎn)化為下式的第二種化合物其中n是1 3；V是H、OR2或鹵代，而W是H、OR2或烷基，此處R2在每種情況下獨(dú)立選自H、烷基或C(O)R5，此處R5在每種情況下獨(dú)立選自烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、芳烷基和芳基，前提是當(dāng)V和W都是OR2時(shí)，則R2不是H；或V和W與所連接的碳結(jié)合在一起，形成羰基；X是氫、C1 4烷基、鏈烯基，其各自被任選取代，或CH2QR9；此處Q是 N 、 O 或 S ；R9是氫、C1 4烷基、鏈烯基、芳基或C(O)R10；而R10是C1 6烷基、鏈烯基、芳基或雜芳基；其中當(dāng)X是C(O)R10時(shí)，在第二種化合物中的R10與在第一種化合物中的R10不同；Z是烷基而Y是O；或Z是烷基或C(O)R4，而Y不存在，此處R4是烷基、CF3或芳基；R1是H，或R1表示1 3個(gè)取代基，所述取代基選自鹵代、硝基、羧酸基或其衍生物、氰基、羥基、烷基、鹵代烷基、烷氧基、鹵代烷氧基、苯酚保護(hù)基團(tuán)、前藥部分和OR6，此處R6是任選取代的芳基、C(O)R7、P(O)(OR8)2或SO3R8，此處R7和R8在每種情況下獨(dú)立選自H、烷基、鏈烯基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基和芳烷基，其各自被任選取代，或R8是金屬陽離子；且R是OH或離去基團(tuán)，或R形成羧酸衍生物；該方法包括在基本無水的條件下使第一種化合物與酸混合的步驟。FPA00001174765300011.tif,FPA00001174765300012.tif
2. 一種方法，該方法用于將多個(gè)下式化合物 其中 η 是 1-3 ；V是H、0R2或鹵代，而W是H、OR2或烷基，此處R2在每種情況下獨(dú)立選自H、烷基或C (0) R5，此處R5在每種情況下獨(dú)立選自烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、芳烷基和芳基；前提是當(dāng)V和W都 是OR2時(shí)，則R2不是H ；或V和W與所連接的碳結(jié)合在一起，形成羰基；Z是烷基而Y是0 ；或Z是烷基或C (0) R4,而Y不存在，此處R4是烷基、CF3或芳基； R1是H，或R1表示1-3個(gè)取代基，所述取代基選自商代、硝基、羧酸基或其衍生物、氰基、 羥基、烷基、鹵代烷基、烷氧基、鹵代烷氧基、苯酚保護(hù)基團(tuán)、前藥部分和0R6，此處R6是任選 取代的芳基、C(0)R7、P(0) (OR8) 2或SO3R8,此處R7和R8在每種情況下獨(dú)立選自H、烷基、鏈烯 基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基和芳烷基，其各自被任選取代，或R8是金屬陽離子； R是OH或離去基團(tuán)，或R形成羧酸衍生物；以及R10在每種情況下獨(dú)立選自烷基和鏈烯基，其各自被任選取代；轉(zhuǎn)化為基本上單一的下其中 η 是 1-3 ；V是H、0R2或鹵代，而W是H、OR2或烷基，此處R2在每種情況下獨(dú)立選自H、烷基或C (0) R5，此處R5在每種情況下獨(dú)立選自烷基、環(huán)烷基、鏈烯基、芳烷基和芳基，前提是當(dāng)V和W都 是OR2時(shí)，則R2不是H ；或V和W與所連接的碳結(jié)合在一起，形成羰基；X是氫、C1^4烷基、鏈烯基，其各自被任選取代，或CH2QR9 ；此處Q是-N-、-0-或-S- ；R9 是氫、烷基、鏈烯基、芳基或C(O)Rw ；和R10是。烷基、鏈烯基、芳基或雜芳基；Z是烷基而Y是0 ；或Z是烷基或C (0) R4,而Y不存在，此處R4是烷基、CF3或芳基；R1是H，或R1表示1-3個(gè)取代基，所述取代基選自商代、硝基、羧酸基或其衍生物、氰基、 羥基、烷基、鹵代烷基、烷氧基、鹵代烷氧基、苯酚保護(hù)基團(tuán)、前藥部分和0R6，此處R6是任選 取代的芳基、C(0)R7、P(0) (OR8) 2或SO3R8,此處R7和R8在每種情況下獨(dú)立選自H、烷基、鏈烯 基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基和芳烷基，其各自被任選取代，或R8是金屬陽離子；且R是OH或離去基團(tuán)，或R形成羧酸衍生物；該方法包括在基本無水的條件下使多個(gè)第一種化合物與酸混合的步驟。
3.權(quán)利要求1或2的方法，其中η= 2和R = 0H。
4.權(quán)利要求1或2的方法，其中V是H而W是OR2。
5.權(quán)利要求1或2的方法，其中Y不存在和Z是烷基。
6.權(quán)利要求3的方法，其還包括加入式RkiCO2HK合物的步驟。
7.權(quán)利要求3的方法，其還包括加入式R9QH化合物或其陰離子的步驟，其中Q 是-N-、-0-或-S- ；R9是H、烷基、鏈烯基、環(huán)烷基、芳基或芳烷基，其各自被任選取代，或R9 是C(0)R2°、S(O)2R2q或P(O) (OR20)2 ；此處R2q在每種情況下獨(dú)立選自H、烷基、鏈烯基、環(huán)烷 基、芳基和芳烷基，其各自被任選取代，或R2°是金屬陽離子。
8.權(quán)利要求3的方法，其還包括加入式R21CN化合物的步驟，其中R21是烷基、鏈烯基、 環(huán)烷基、芳基或芳烷基，其各自被任選取代的。
9.權(quán)利要求3的方法，其還包括加入式R22(TMS) CCH2化合物的步驟，其中R22是烷基、鏈 烯基、環(huán)烷基、芳基或芳烷基，其各自被任選取代。
10.權(quán)利要求3的方法，其還包括加入式R23C(O)CH2Ra化合物的步驟，其中R23是H、烷 基、鏈烯基、環(huán)烷基、芳基或芳烷基，其各自被任選取代；Ra是C(O) R9、C (O)OR9或CN ；R9選自 H、烷基、鏈烯基、環(huán)烷基、芳基和芳烷基，其各自被任選取代。
11.權(quán)利要求3的方法，其還包括加水的步驟。
12.權(quán)利要求3的方法，其還包括(a)加水形成羥基化合物；和(b)用鹵化劑、磺?；?劑、膦?；瘎┗蛄柞；瘎┨幚砹u基化合物的步驟。
全文摘要
本文描述了制備微管蛋白抑制劑的方法。該方法用于制備預(yù)定的微管蛋白抑制劑的混合物、從微管蛋白抑制劑的混合物中制備單一的微管蛋白抑制劑和用于將一種微管蛋白抑制劑轉(zhuǎn)化為不同的微管蛋白抑制劑。本文描述的微管蛋白抑制劑用于治療包括致病細(xì)胞群的疾病和疾病狀態(tài)。
文檔編號(hào)A01N43/40GK101909441SQ200880123654
公開日2010年12月8日 申請(qǐng)日期2008年10月23日 優(yōu)先權(quán)日2007年10月25日
發(fā)明者C·P·利蒙, I·R·弗拉霍夫, 王羽 申請(qǐng)人:恩多塞特公司