專利名稱：一種吳茱萸組培快繁方法
技術領域：
本發(fā)明涉及植物組培快繁技術領域，尤其涉及一種吳茱萸組培快繁方法。
背景技術：
吳茱萸為常用大宗中藥材，別名吳萸，吳椒、米椒子、茶辣、石虎等，屬蕓香科吳茱萸 屬植物。以果實供藥用，具有溫中、散寒、燥溫、疏肝止嘔，止痛的功能；主治胃腹冷痛、 惡心嘔吐、泛酸暖氣、腹瀉、痛經(jīng)、脅痛、疝痛、腳氣痛，蟯蟲病等癥；外用治濕疹、殺蟲、 高血壓?，F(xiàn)代藥理研究證明吳茱萸提取液有鎮(zhèn)痛、殺蟲、抑菌以及收縮子宮作用。隨著醫(yī) 藥科技的發(fā)展，吳茱萸的功能效用在不斷擴大，吳茱萸及其復方制劑的研究，新用途新劑型 及新藥的開發(fā)已越來越受到人們的關注，特別是在臨床上發(fā)現(xiàn)其可用于治療高血壓等心血管 疾病后，更引起了國內(nèi)外的高度重視。上述有關吳茱萸的現(xiàn)代研究，為其深度開發(fā)打下良好 的基礎，其開發(fā)潛力極大，發(fā)展前景廣闊。
我國吳茱萸生產(chǎn)應用歷史悠久，過去以野生為主，現(xiàn)大多依賴人工栽培，上世紀50年代 末，吳茱萸部分產(chǎn)區(qū)開展野生變家種馴化工作，生產(chǎn)發(fā)展較快，產(chǎn)量逐年增加，但目前吳茱 萸尚處于半野生狀態(tài)，種內(nèi)性狀變異復雜，株間產(chǎn)量、質(zhì)量差異極大，其主要表現(xiàn)在1、成 熟期差異較大，前后相差近一個月；2、單株產(chǎn)量相差較大，從0.5至3千克不等；3、藥材 折干率差異大，從15%至50%不等；4、藥用成分差異大；5、雌雄異株，各占50%左右。鑒 于以上的性狀差異，直接影響生產(chǎn)成本、產(chǎn)量和質(zhì)量，同時也影響著產(chǎn)品的市場競爭力。
中藥材種質(zhì)是中藥材生產(chǎn)過程中的重要生產(chǎn)資料，隨著中藥材規(guī)范化生產(chǎn)的普及，特別 對于作為中藥飲片和中成藥主要原料的藥用植物來說，在中藥材生產(chǎn)過程中，只有采用主要 經(jīng)濟性狀整齊一致的優(yōu)良種質(zhì)與品種，才是確保其中藥飲片和中成藥質(zhì)量穩(wěn)定而可靠的重要 手段之一。吳茱萸是極其重要的中藥飲片和中成藥原料藥材，我國著名的地道藥材(浙江省 是主產(chǎn)地之一)，但對其種質(zhì)資源和品種資源(基因型或化學型等)的研究與篩選還很不夠， 繁育方法還很傳統(tǒng)。因此，通過植物組培快繁技術手段，培育出符合藥典要求的優(yōu)良吳茱萸 品種，確保品種的純正和統(tǒng)一性具有十分現(xiàn)實的經(jīng)濟意義。
在吳茱萸的繁殖方法方面，進行了種子播種繁殖、分株、根插、扦插等研究，但吳茱萸 種子發(fā)芽率低，分株、根插、扦插等繁殖率低、成活率低、發(fā)根少、生根慢。難以滿足生產(chǎn)
上對優(yōu)質(zhì)種苗的要求。
在吳茱萸的組織培養(yǎng)方面，盧萍(1989)進行了吳茱萸的愈傷組織誘導與植株再生的研 究，雖然葉的愈傷組織誘導率達到100%，但植株分化率極低(2.6%)，且組培苗生根亦難。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決上述現(xiàn)有技術的缺陷，提供一種吳茱萸組培快繁方法。 本發(fā)明目的通過以下技術方案來實現(xiàn)這種吳茱萸組培快繁方法，按如下步驟進行
1) 、選種組培材料應在4 5年生雌性吳茱萸優(yōu)良品系健壯母株上選取1 2年生的枝 條，作為插穗；
2) 、材料培育將插穗扦插于含泥炭、珍珠巖和蛭石混合基質(zhì)的盆缽中，再放在溫室中 進行肥水、防病蟲害管理，經(jīng)1 2個月培育枝條萌發(fā)出嫩枝；
3) 、外植體的選取與滅菌取長約5 10cm的新萌發(fā)的嫩枝，剪去葉片，切成長約1.5cm 的帶頂芽的莖段或帶腋芽的莖段作為外植體，經(jīng)滅菌處理后備用；
4) 、培養(yǎng)基的配制，包括基本培養(yǎng)基和組培各階段培養(yǎng)基的各組分與每升所含重量為
(1 )基本培養(yǎng)基-選用WPM培養(yǎng)基或MS培養(yǎng)基，蔗糖或白糖20 30g/L，瓊脂7 9 g/L， pH5.6 5.8;
(2) 誘導培養(yǎng)基WPM+BA0.5 5.0mg/L十NAA0.05 0.5mg/L+蔗糖或白糖30g/L; 或 WPM+BA 0.5 5.0 mg/L+ IBA 0.05 0.5mg/L+蔗糖或白糖30g/L;或MS+BA 0.5 5.0 mg/L+ NAA 0.05 0.5mg/L+蔗糖或白糖30g/L; 或MS+BA 0.5 5.0 mg/L+ IBA 0.05 0.5mg/L+蔗糖 或白糖30g/L;
(3) 增殖培養(yǎng)基WPM+BA0.1 3.0mg/L+KT0.0 2. 0+NAA0.01 0.5mg/L+蔗糖或白糖 30g/L;或WPM+BA0.1 3.0mg/L+KT0.0 2. 0+IBA0.01 0.5mg/L+蓆糖或白糖30g/L;或MS +BAO.l 3.0mg/L+KTO.0 2. 0+NAA 0.01 0.5mg/L+蔗糖或白糖30g/L;或MS +BA0.1 3.0mg/L+KT0.0 2. 0+ IBA 0.01 0.5mg/L+蔗糖或白糖30g/L;
(4) 生根培養(yǎng)基1/2WPM+IBA0.1 1.0mg/L+蔗糖或白糖20g/L;或1/2WPM+NAA0.1 1.0 mg/L+蔗糖或白糖20g/L;或1/2MS+IBA0.1 1.0 mg/L+庶糖或白糖20g/L;或1/2MS+NAA0.1 1.0 mg/L+蔗糖或白糖20g/L;
5) 、誘導培養(yǎng)在無菌條件下將經(jīng)表面滅菌后的外植體帶頂芽的莖段或帶腋芽的莖段的 一端或二端切口變褐處切除后，頂芽和帶腋芽莖段的芽向上接種在誘導培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)條 件下培養(yǎng)30 45天后，誘導頂芽和腋芽萌芽，然后分化叢芽；
6) 、增殖培養(yǎng)在無菌條件下將叢芽切成單株接入增殖培養(yǎng)基中進行增殖培養(yǎng)，在培養(yǎng) 條件下培養(yǎng)30 45天增殖出叢生芽；根據(jù)對幼苗數(shù)量的需求，每隔30 45天按同樣方法進 行幼苗再增殖培養(yǎng)；
7) 、生根培養(yǎng)將培養(yǎng)的叢生苗切成單株后，接種在生根培養(yǎng)基中進行生根培養(yǎng)，在培 養(yǎng)條件下培養(yǎng)20 30天后，幼苗長高成約5 7cm、苗基部長出3 5根細根；
58)、移栽將生根組培苗移栽于穴盤內(nèi)的育苗袋中，培育1 2個月至成苗。 所述的吳茱萸組培快繁方法，所述的插穗長5 10cm (含l節(jié))，插穗上端剪成平口，距
離葉柄0.3 0.4cm，下端近節(jié)處削成馬耳形斜面，用500 mg/kgiBA溶液蘸下端切口 1 2cm
處，ls 2s后，取出晾15 30min。
所述的吳茱萸組培快繁方法，所述的材料培育時枝條扦插的混合基質(zhì)由泥炭珍珠巖-蛭石按體積比l: 2: 2配制而成。
所述的吳茱萸組培快繁方法，所述的培養(yǎng)基，包括基本培養(yǎng)基和組培各階段培養(yǎng)基的各 組分與每升所含重量為-
(1) 基本培養(yǎng)基選用WPM培養(yǎng)基，蔗糖或白糖20 30g/L，瓊脂7 9g/L， pH5.6 5.8;
(2) 誘導培養(yǎng)基WPM+BA2.5mg/L+NAA0.2mg/L+蔗糖或白糖30g/L;
(3) 增殖培養(yǎng)基WPM+BA1.0mg/L++KT1.0+NAA0.1mg/L+蔗糖或白糖30g/L;
(4) 生根培養(yǎng)基1/2WPM+IBA0.5mg/L+蔗糖或白糖20g/L。 所述的吳茱萸組培快繁方法，所述的滅菌處理是整理好的外植體進行預處理，用加1%
中性洗潔精的溶液浸泡并振蕩10 30min，自來水沖洗30 60min;預處理后的外植體用75% 酒精表面消毒30 45s，無菌水沖洗3遍；然后用0.1^升汞溶液浸泡振蕩滅菌10 15min， 無菌水洗3~5遍。
所述的吳茱萸組培快繁方法，所述的各組培階段的培養(yǎng)條件是，培養(yǎng)溫度為25 28'C， 光照光強為2500 3000 Lx，光照時間為12h/d。
所述的吳茱萸組培快繁方法，所述的組培苗移栽基質(zhì)采用育苗袋。 本發(fā)明的有益效果是
1) 、引進現(xiàn)代植物組織培養(yǎng)技術，生產(chǎn)藥用植物種苗，具有不受地區(qū)、季節(jié)與氣候限制， 便于工廠化生產(chǎn)等優(yōu)勢。選擇野生資源吳茱萸的優(yōu)良株進行組織培養(yǎng)繁殖，實現(xiàn)吳茱萸雌雄 株種苗分別繁殖，合理搭配，可以提高藥材的產(chǎn)量和質(zhì)量。
2) 、提出的吳茱萸組培優(yōu)化培養(yǎng)基針對性強、適用性好，克服了組培苗玻璃化嚴重的問 題，原始外植體誘導率80%;組培苗培增殖率每周期(約45天)2 3倍；組培苗生根率達 卯％以上；組培苗移栽成活率達90%以上；種苗的大田定植成活率達到95%以上，年組培苗 生產(chǎn)能力可達100萬苗以上(一年為8個培養(yǎng)周期)，適于大規(guī)模工廠化生產(chǎn)。
3) 、引進現(xiàn)代的穴盤苗生產(chǎn)技術，具有省工、省力、效率高、集中育苗、能源土地利用 率高，適宜遠距離運輸和移栽成活率、大田定植成活率高等優(yōu)點。
具體實施例方式
通過以下實施例對本發(fā)明作進一步的詳細說明，但本發(fā)明的內(nèi)容并不局限于此。 實施例l
1) 、選種組培材料應在4 5年生雌性吳茱萸優(yōu)良品系健壯母株上選取1 2年生的枝 條，作為插穗；
2) 、材料培育將插穗扦插于含泥炭、珍珠巖和蛭石混合基質(zhì)的盆缽中，再放在溫室中 進行肥水、防病蟲害管理，經(jīng)1 2個月培育枝條萌發(fā)出嫩枝；
3) 、外植體的選取與滅菌取長約5 10cm的新萌發(fā)的嫩枝，剪去葉片，切成長約1.5cm 的帶頂芽的莖段或帶腋芽的莖段作為外植體，經(jīng)滅菌處理后備用；
4) 、培養(yǎng)基的配制，包括基本培養(yǎng)基和組培各階段培養(yǎng)基的各組分與每升所含重量為 (1 )基本培養(yǎng)基選用WPM培養(yǎng)基或MS培養(yǎng)基，蔗糖或白糖20 30g/L，瓊脂7 9 g/L，
pH5.6 5.8;
(2) 誘導培養(yǎng)基WPM+BA0.5 5.0mg/L+NAA0.05 0.5mg/L+庶糖或白糖30g/L; 或 WPM+BA 0.5 5.0 mg/L+ IBA 0.05 0.5mg/L+蔗糖或白糖30g/L;或MS+BA 0.5 5.0 mg/L+ NAA0.05 0.5mg/L+蔗糖或白糖30g/L; 或MS+BA0.5 5.0 mg/L+ IBA 0.05 0.5mg/L+庶糖 或白糖30g/L;
(3) 增殖培養(yǎng)基WPM+BA0.1~3.0mg/L+KT0.0~2. 0+NAA0.01 0.5mg/L+蔗糖或白糖 30g/L;或WPM+BA 0.1 3.0mg/L+KT0.0~2. 0+ IBA 0.01 0.5mg/L+蔗糖或白糖30g/L;或MS +BA0.1 3.0mg/L+KT0.0 2. 0+NAA0.01 0.5mg/L+蔗糖或白糖30g/L;或MS +BA0.1 3.0mg/L+KT0.0 2. 0+ IBA0.01 0.5mg/L+蔗糖或白糖30g/L;
(4) 生根培養(yǎng)基1/2WPM+IBA0.1 1.0mg/L+庶糖或白糖20g/L;或1/2WPM+NAA0.1 1.0 mg/L+蔗糖或白糖20g/L;或1/2MS+IBA0.1 1.0mg/L+庶糖或白糖20g/L;或1/2MS+NAA0.1 1.0mg/L+蔗糖或白糖20g/L;
5) 、誘導培養(yǎng)在無菌條件下將經(jīng)表面滅菌后的外植體帶頂芽的莖段或帶腋芽的莖段的 一端或二端切口變褐處切除后，頂芽和帶腋芽莖段的芽向上接種在誘導培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)條 件下培養(yǎng)30 45天后，誘導頂芽和腋芽萌芽，然后分化叢芽；
6) 、增殖培養(yǎng)在無菌條件下將叢芽切成單株接入增殖培養(yǎng)基屮進行增殖培養(yǎng)，在培養(yǎng) 條件下培養(yǎng)30 45天增殖出叢生芽；根據(jù)對幼苗數(shù)量的需求，每隔30 45天按同樣方法進 行幼苗再增殖培養(yǎng)；
7) 、生根培養(yǎng)將培養(yǎng)的叢生苗切成單株后，接種在生根培養(yǎng)基中進行生根培養(yǎng)，在培
養(yǎng)條件下培養(yǎng)20 30天后，幼苗長高成約5 7cm、苗基部長出3 5根細根；
78)、移栽將生根組培苗移栽于穴盤內(nèi)的育苗袋中，培育1 2個月至成苗。
所述的吳茱萸組培快繁方法，其特征在于所述的插穗長5 10cm (含l節(jié))，插穗上端 剪成平口，距離葉柄0.3 0.4cm，下端近節(jié)處削成馬耳形斜面，用500mg/kgiBA溶液蘸下端 切口l 2cm處，ls 2s后，取出晾15 30min。
所述的吳茱萸組培快繁方法，其特征在于所述的材料培育時枝條扦插的混合基質(zhì)由泥 炭珍珠巖蛭石按體積比l: 2: 2配制而成。
所述的吳茱萸組培快繁方法，其特征在于所述的滅菌處理是整理好的外植體進行預處
理，用加1%中性洗潔精的溶液浸泡并振蕩10 30min，自來水沖洗30 60min;預處理后的 外植體用75%酒精表面消毒30 45s，無菌水沖洗3遍；然后用0.1 %升汞溶液浸泡振蕩滅菌 10 15min，無菌水洗3~5遍。
所述的吳茱萸組培快繁方法，其特征在于，所述的各組培階段的培養(yǎng)條件是，培養(yǎng)溫度 為25 28'C，光照光強為2500 3000Lx,光照時間為12h/d。
所述的吳茱萸組培快繁方法，其特征在于所述的組培苗移栽基質(zhì)采用育苗袋。 實施例2:
本例中，基本培養(yǎng)基選用WPM培養(yǎng)基，蔗糖或白糖20 30g/L，瓊脂7 9g/L， pH5.6 5.8;誘導培養(yǎng)基WPM+BA0.5 5.0mg/L+NAA0.05 0.5mg/L+蔗糖或白糖30g/L;增殖培養(yǎng) 基WPM+BA0.1 3.0mg/L+KT0.0 2. 0+NAA0.01 0.5mg/L+蔗糖或白糖30g/L;生根培養(yǎng)基 1 /2WPM+IBAO. 1 1.0 mg/L+蔗糖或白糖20g/L 。
其余步驟，條件均同于實施例l。
實施例3:
本例中，基本培養(yǎng)基選用ffPM培養(yǎng)基，蔗糖或白糖20 30g/L，瓊脂7 9g/L， pH5.6 5.8;誘導培養(yǎng)基WPM+BA0.5 5.0mg/L+IBA0.05 0.5mg/L+蔗糖或白糖30g/L;增殖培養(yǎng) 基WPM+BA0.1 3.0mg/L+KT0.0 2. 0+ IBA0.01 0.5mg/L+蔗糖或白糖30g/L;生根培養(yǎng)基 1/2WPM+NAA0.1 1.0 mg/L+蔗糖或白糖20g/L 。
其余步驟，條件均同于實施例l。
實施例4:
本例中，基本培養(yǎng)基選用MS培養(yǎng)基，蔗糖或白糖20 30g/L，瓊脂7 9g/L， pH5.6 5.8;誘導培養(yǎng)基MS+BA0.5 5.0mg/L+NAA0.05 0.5mg/L+蔗糖或白糖30g/L;增殖培養(yǎng) 基MS +BA0.1 3.0mg/L+KT0.0 2. 0+NAA0.01 0.5mg/L+蔗糖或白糖30g/L;生根培養(yǎng)基 1/2MS+IBA0.1 1.0 mg/L+蔗糖或白糖20g/L。
其余步驟，條件均同于實施例l。
8實施例5:
本例中，基本培養(yǎng)基選用MS培養(yǎng)基，蔗糖或白糖20 30g/L，瓊脂7 9g/L， pH5.6 5.8;誘導培養(yǎng)基MS+BA0.5 5.0mg/L+IBA0.05 0.5mg/L+蔗糖或白糖30g/L;增殖培養(yǎng)基.. MS +BA 0.1 3.0mg/L+KT0.0 2. 0+ IBA 0.01 0.5mg/L+蔗糖或白糖30g/L;生根培養(yǎng)基 1/2MS+NAA0.1 1.0 mg/L+蔗糖或白糖20g/L。
其余步驟，條件均同于實施例l。
實施例6:
本例中，基本培養(yǎng)基選用WPM培養(yǎng)基，蔗糖或白糖20 30g/L，瓊脂7 9g/L， pH5.6 5.8;誘導培養(yǎng)基WPM+BA2.5mg/L+NAA0.2mg/L+蔗糖或白糖30g/L;增殖培養(yǎng)基WPM+BA l.Omg/L+KTl.O+NAAO.lmg/L+蔗糖或白糖30g/L;生根培養(yǎng)基1/2WPM+IBA0.5 mg/L+蔗糖或 白糖20g/L。
其余步驟，條件均同于實施例l。
除上述實施例外，本發(fā)明還可以有其他實施方式。凡采用等同替換或等效變換形成的技 術方案，均落在本發(fā)明要求的保護范圍。
權利要求
1、一種吳茱萸組培快繁方法，其特征在于該方法按以下步驟進行1)、選種組培材料應在4～5年生雌性吳茱萸優(yōu)良品系健壯母株上選取1～2年生的枝條，作為插穗；2)、材料培育將插穗扦插于混合基質(zhì)中，再放在溫室中進行肥水、防病蟲害管理，經(jīng)1～2個月培育枝條萌發(fā)出嫩枝；3)、外植體的選取與滅菌取長5～10cm的新萌發(fā)的嫩枝，剪去葉片，切成長1.5cm的帶頂芽的莖段或帶腋芽的莖段作為外植體，經(jīng)滅菌處理后備用；4)、培養(yǎng)基的配制，包括基本培養(yǎng)基和組培各階段培養(yǎng)基的各組分與每升所含重量為(1)基本培養(yǎng)基選用WPM培養(yǎng)基或MS培養(yǎng)基，蔗糖或白糖20～30g/L，瓊脂7～9g/L，pH5.6～5.8；(2)誘導培養(yǎng)基WPM+BA0.5～5.0mg/L+NAA0.05～0.5mg/L+蔗糖或白糖30g/L；或WPM+BA 0.5～5.0mg/L+IBA 0.05～0.5mg/L+蔗糖或白糖30g/L；或MS+BA 0.5～5.0mg/L+NAA0.05～0.5mg/L+蔗糖或白糖30g/L；或MS+BA0.5～5.0mg/L+IBA 0.05～0.5mg/L+蔗糖或白糖30g/L；(3)增殖培養(yǎng)基WPM+BA0.1～3.0mg/L+KT0.0～2.0+NAA0.01～0.5mg/L+蔗糖或白糖30g/L；或WPM+BA 0.1～3.0mg/L+KT0.0～2.0+IBA 0.01～0.5mg/L+蔗糖或白糖30g/L；或MS+BA0.1～3.0mg/L+KT0.0～2.0+NAA0.01～0.5mg/L+蔗糖或白糖30g/L；或MS+BA0.1～3.0mg/L+KT0.0～2.0+IBA0.01～0.5mg/L+蔗糖或白糖30g/L；(4)生根培養(yǎng)基1/2WPM+IBA0.1～1.0mg/L+蔗糖或白糖20g/L；或1/2WPM+NAA0.1～1.0mg/L+蔗糖或白糖20g/L；或1/2MS+IBA0.1～1.0mg/L+蔗糖或白糖20g/L；或1/2MS+NAA0.1～1.0mg/L+蔗糖或白糖20g/L；5)、誘導培養(yǎng)在無菌條件下將經(jīng)表面滅菌后的外植體帶頂芽的莖段或帶腋芽的莖段的一端或二端切口變褐處切除后，頂芽和帶腋芽莖段的芽向上接種在誘導培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)條件下培養(yǎng)30～45天后，誘導頂芽和腋芽萌芽，然后分化叢芽；6)、增殖培養(yǎng)在無菌條件下將叢芽切成單株接入增殖培養(yǎng)基中進行增殖培養(yǎng)，在培養(yǎng)條件下培養(yǎng)30～45天增殖出叢生芽；根據(jù)對幼苗數(shù)量的需求，每隔30～45天按同樣方法進行幼苗再增殖培養(yǎng)；7)、生根培養(yǎng)將培養(yǎng)的叢生苗切成單株后，接種在生根培養(yǎng)基中進行生根培養(yǎng)，在培養(yǎng)條件下培養(yǎng)20～30天后，幼苗長高成5～7cm、苗基部長出3～5根細根；8)、移栽將生根組培苗移栽于穴盤內(nèi)的育苗袋中，培育1～2個月至成苗。
2、 根據(jù)權利要求1所述的吳茱萸組培快繁方法，其特征在于所述的插穗長5 10cm， 插穗上端剪成平口，距離葉柄0.3 0.4cm，下端近節(jié)處削成馬耳形斜面，用500mg/kgffiA溶 液蘸下端切口 1 2cm處，l秒 2秒后，取出晾15 30分鐘。
3、 根據(jù)權利要求1所述的吳茱萸組培快繁方法，其特征在于所述的材料培育時枝條扦插的混合基質(zhì)由泥炭珍珠巖蛭石按體積比l: 2: 2配制而成。
4、 根據(jù)權利要求1所述的吳茱萸組培快繁方法，其特征在于所述的培養(yǎng)基，包括基本 培養(yǎng)基和組培各階段培養(yǎng)基的各組分與每升所含重量為-(1) 基本培養(yǎng)基選用WPM培養(yǎng)基，蔗糖或白糖20 30g/L，瓊脂7 9g/L， pH5.6 5.8;(2) 誘導培養(yǎng)基WPM+BA2.5mg/L+NAA0.2mg/L+蔗糖或白糖30g/L;(3) 增殖培養(yǎng)基WPM+BA1.0mg/L+KT1.0+NAA0.1mg/L+蔗糖或白糖30g/L;(4) 生根培養(yǎng)基1/2WPM+IBA0.5mg/L+蔗糖或白糖20g/L。
5、 根據(jù)權利要求1所述的吳茱萸組培快繁方法，其特征在于所述的滅菌處理是整理好 的外植體進行預處理，用加重量比為1%中性洗潔精的溶液浸泡并振蕩10 30分鐘，自來水 沖洗30 60分鐘；預處理后的外植體用75%酒精表面消毒30 45秒，無菌水沖洗3遍；然 后用0.1%升汞溶液浸泡振蕩滅菌10 15分鐘，無菌水洗3~5遍。
6、 根據(jù)權利要求1所述的吳茱萸組培快繁方法，其特征在于，所述的各組培階段的培養(yǎng) 條件是，培養(yǎng)溫度為25 28'C，光照光強為2500 3000 Lx,光照時間為12h/d。
7、 根據(jù)權利要求1所述的吳茱萸組培快繁方法，其特征在于所述的組培苗移栽基質(zhì)采 用育苗袋。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種吳茱萸組培快繁方法，屬植物繁殖技術領域，包括如下步驟選種、材料培育、外植體的選取與滅菌、培養(yǎng)基的配制、誘導培養(yǎng)、增殖培養(yǎng)、生根培養(yǎng)、移栽。本發(fā)明的優(yōu)點是提出的吳茱萸組培優(yōu)化培養(yǎng)基針對性強、適用性好，克服了組培苗玻璃化嚴重的問題，原始外植體誘導率80％；組培苗培增殖率每周期(約45天)2～3倍；組培苗生根率達90％以上；組培苗移栽成活率達90％以上；組培穴盤苗的大田定植成活率達到95％以上，年組培苗生產(chǎn)能力可達100萬苗以上，適于大規(guī)模工廠化生產(chǎn)。
文檔編號A01H4/00GK101491216SQ200910096469
公開日2009年7月29日 申請日期2009年3月9日 優(yōu)先權日2009年3月9日
發(fā)明者呂永平, 剛 徐, 汪一婷, 牟豪杰, 陳劍平 申請人:浙江省農(nóng)業(yè)科學院