專(zhuān)利名稱(chēng)：：一種枯草芽孢桿菌油懸浮劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種油懸浮劑及其制備方法，特別涉及枯草芽孢桿菌油懸浮劑及其制備方法。
背景技術(shù)：
：枯草芽孢桿菌，英文名(5aci2iussub"2is),是芽孢桿菌屬的一種。單個(gè)細(xì)胞O.7-0.8X2.0~3.0微米，著色均勻。無(wú)莢膜，周生鞭毛，能運(yùn)動(dòng)。革蘭氏陽(yáng)性菌，芽孢0.60.9X1.01.5微米，橢圓到柱狀，位于菌體中央或稍偏，芽孢形成后菌體不膨大。菌落表面粗糙不透明，污白色或微黃色?？莶菅挎邨U菌可利用蛋白質(zhì)、多種糖及淀粉，分解色氨酸形成吲哚。有的菌林是a-淀粉酶和中性蛋白酶的重要生產(chǎn)菌；有的菌林具有強(qiáng)烈降解核苷酸的酶系，故常作選育核苷生產(chǎn)菌的親株或制取5'-核苷酸酶的菌種，在遺傳學(xué)研究中應(yīng)用廣泛。因廣泛分布在土壤及腐敗的有機(jī)物中，易在枯草浸汁中繁殖，故名?？莶菅挎邨U菌是一種微生物殺菌劑，對(duì)多種植物真菌和細(xì)菌病原菌具有抑制生長(zhǎng)的作用，可用于農(nóng)林植物多種病蟲(chóng)害的防治。它通過(guò)營(yíng)養(yǎng)竟?fàn)庍M(jìn)行生長(zhǎng)繁殖從而占據(jù)生存空間的方式來(lái)阻止植物病原菌的生長(zhǎng)，能在植物表面迅速形成一層高密保護(hù)膜，使病原菌得不到生存空間，從而保護(hù)作物免受病原菌危害；枯草芽孢桿菌菌體生長(zhǎng)過(guò)程中產(chǎn)生的枯草菌素、多粘菌素、制霉菌素、短桿菌肽等活性物質(zhì)，抑制病菌孢子萌發(fā)和菌絲生長(zhǎng)，乂人而達(dá)到預(yù)防與治療的目的。經(jīng)田間藥效試驗(yàn)結(jié)果表明，枯草芽孢桿菌對(duì)于黃瓜白粉病、草莓白粉病、灰霉病的防治效果較好。目前國(guó)內(nèi)外生產(chǎn)的枯草芽孢桿菌均為可濕性粉劑和水劑，因枯草芽孢桿菌為微生物活體，水劑保存時(shí)間短，最多三個(gè)月，影響使用?？莶菅挎邨U菌可濕性粉劑相對(duì)而言保存時(shí)間較長(zhǎng)，但在存貯條件惡劣如溫度高時(shí)，孢子數(shù)下降較多；另外用于大棚使用時(shí)，因兌水較多而增加了大棚的濕度；用于森林病蟲(chóng)害防治或果樹(shù)殺菌時(shí)，因樹(shù)木高大，用噴水霧方法較為困難，且對(duì)操作人員危害嚴(yán)重，枯草芽孢桿菌大量流失于土壤中，造成污染。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中枯草芽孢桿菌可濕性粉劑和水劑的不足，提供一種枯草芽孢桿菌油懸浮劑，所述枯草芽孢桿菌油懸浮劑保存時(shí)間長(zhǎng)，藥效高，對(duì)環(huán)境和操作人員毒害小，適用于森林、果園等場(chǎng)合的防病除蟲(chóng)。為了實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案一種枯草芽孢桿菌油懸浮劑，其組分以重量百分比計(jì)包括2x10"活芽孢/克的枯草芽孢桿菌母粉1%~20%稀釋劑60%~80%表面活性劑5%~20%。所述稀釋劑優(yōu)選為為甲酯化的植物油之一或或幾種混合，優(yōu)選為曱酯化葵花籽油、曱酯化菜籽油、曱酯化大豆油、曱酯化花生油的一種或幾種混合。植物油的主要成分是高級(jí)不飽和脂肪酸甘油酯，即長(zhǎng)鏈的烯酸和炔酸的甘油酯，將植物油經(jīng)催化劑催化與曱醇發(fā)生酯化反應(yīng)生成某酸甲酯即為曱酯化，植物油經(jīng)曱酯化后作為農(nóng)藥助劑、溶劑，有助于提高制劑的藥效。曱酯化的植物油還是清潔的高性能的噴霧助劑，具有粘附、溶解植物表面蠟質(zhì)層的功能，使有效成分大多作用在作物上，且其來(lái)源于植物、生物降解性好、毒性低、對(duì)環(huán)境無(wú)毒害，可更好地防治作物多種病害。表面活性劑可以增加懸浮率，并在使用過(guò)程中均勻地與稀釋劑相溶。本發(fā)明所述表面活性劑優(yōu)選采用烷基酚聚氧乙烯醚0P-4、烷基酚聚氧乙烯醚0P-7、烷基酚聚氧乙烯醚OP-10、烷基酚聚氧乙烯醚0P-21、山梨醇酐單月桂酸酯SPAN-20、山梨醇酐單棕櫚酸酯SPAN-20、山梨醇酐單油酸酯SPAN-80中的一種或兩種以上混合。本發(fā)明所述枯草芽孢桿菌油懸浮劑還可包含常規(guī)的防凍液、增效劑、穩(wěn)定劑或與其他有效成分進(jìn)行復(fù)配，可以大大提高枯草芽孢桿菌油懸浮劑的藥效和農(nóng)業(yè)上的實(shí)用性。所述增效劑優(yōu)選木質(zhì)素磺酸鈉、十二烷基笨璜酸鈣、三苯乙基苯酚聚氧乙烯聚氧丙烯醚、蓖麻油聚氧乙烯醚、苯乙基聚氧乙烯醚、仲烷醇聚氧乙烯醚。所述穩(wěn)定劑優(yōu)選沸點(diǎn)20(TC以上的多烷基取代芳烴、二甘醇、三甘醇、鄰二氯苯的一種或兩種以上混合。所述防凍劑優(yōu)選乙二醇或丙二醇或兩種混合。本發(fā)明所述枯草芽孢桿菌油懸浮劑中枯草芽孢桿菌的濃度為2x109~4xlO"活芽孢/克。經(jīng)田間藥效試驗(yàn)證明，由于霧滴粒徑極小(2-5um),故在作物上的覆蓋面大，因此藥效比普通制劑高20%以上。施藥功效高，即省工省時(shí)，功效為常規(guī)噴霧的10倍，故大大降低施藥成本。本發(fā)明還提供一種枯草芽孢桿菌油懸浮劑的制備方法。本發(fā)明所述枯草芽孢桿菌油懸浮劑的制備方法如下按配方量將枯草芽孢桿菌、稀釋劑、表面活性劑均勻混合，再將其粉碎，使固體顆粒達(dá)到2-5^m以下的膠體粒徑，使其成為均勻的油懸浮劑，即得本發(fā)明所述枯草芽孢桿菌。經(jīng)檢測(cè)有效成分含量、pH值、傾倒性、穩(wěn)定性等各項(xiàng)指標(biāo)合格后進(jìn)行包裝儲(chǔ)運(yùn)。本發(fā)明所述枯草芽孢桿菌油懸浮劑的突出特點(diǎn)為1.本發(fā)明所述枯草芽孢桿菌油懸浮劑使枯草芽孢桿菌的孢子懸浮于稀釋劑中，這種方法增加了微生物活體的存活時(shí)間，3(TC貯存18周穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)顯示其分解率不到2。/。，而枯草芽孢桿菌可濕性粉劑的分解率高達(dá)20%?？梢?jiàn)油懸浮劑貨架期大大增加，更易于商品化。2.熱霧劑通常是將農(nóng)藥原藥溶解于高沸點(diǎn)溶劑中，形成單相溶液，因枯草芽孢桿菌母藥不能溶解，因此不能制成熱霧劑。本發(fā)明克服了枯草芽孢桿菌不能溶解，因此不能制成熱霧劑的缺陷，提供的枯草芽孢桿菌油懸浮劑可形成熱霧，由于它的霧滴微細(xì)，能被氣霧機(jī)送至很遠(yuǎn)很高的距離，并具有產(chǎn)長(zhǎng)時(shí)間的飄浮能力，可用于森林、果園等場(chǎng)合，防病除蟲(chóng)。3.提高了藥效。由于霧滴粒徑極小(2-5^im占80%以上)，故在作物上的覆蓋面大，可覆蓋常規(guī)噴霧無(wú)法到達(dá)的植抹葉背和葉片基部等隱蔽處，達(dá)到了對(duì)才直抹病害的全方位防治，因此藥效比普通制劑高20%以上。4.施藥功效高，省工省時(shí)。由于霧滴粒徑小，彌散性好，絕大部分可沉積于植株表面，藥液利用率高，可節(jié)省大量人工、藥械及時(shí)間，功效約為常規(guī)噴霧的10倍，大大降低施藥成本。5.對(duì)環(huán)境和操作人員毒害小。常規(guī)噴水霧對(duì)高大密植作物噴霧時(shí)，對(duì)操作人員危害嚴(yán)重，且藥滴大量流失于土壤中，造成污染。6.無(wú)污染。本發(fā)明所述枯草芽孢桿菌油懸浮劑的表面活性劑、稀釋劑都采用綠色物質(zhì)，對(duì)環(huán)境無(wú)影響。具體實(shí)施例方式下面結(jié)合實(shí)施例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式，應(yīng)當(dāng)指出，對(duì)于本
技術(shù)領(lǐng)域：
的普通技術(shù)人員來(lái)說(shuō)，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，還可以做出若干改進(jìn)和潤(rùn)飾，這些改進(jìn)和潤(rùn)飾也應(yīng)視為本發(fā)明的保護(hù)范圍。7實(shí)施例1:本發(fā)明所述枯草芽孢桿菌油懸浮劑的制備稱(chēng)取2x1()H個(gè)活芽孢/克的枯草芽孢桿菌母粉200克，曱酯化葵花籽植物油750克，OP-10表面活性劑50克，在混合釜中混合，在泵入超微粉碎妙、磨機(jī)中粉碎3小時(shí)，即可形成穩(wěn)定的油懸浮劑，經(jīng)檢測(cè)顆粒粒徑達(dá)到5um以下，枯草芽孢桿菌的濃度為4x10"舌芽孢/克。實(shí)施例2:本發(fā)明所述枯草芽孢桿菌油懸浮劑的制備稱(chēng)取2x10"個(gè)活芽孢/克的枯草芽孢桿菌200克，稀釋劑(甲酯化的葵花籽植物油)600克，OP-10表面活性劑200克，在混合釜中混合，再泵入超微粉碎砂磨機(jī)中粉碎3小時(shí)，形成一穩(wěn)定的油懸浮劑，經(jīng)檢測(cè)顆粒粒徑達(dá)到5um以下，枯草芽孢桿菌的濃度為4xl(T活芽孢/克。實(shí)施例3:本發(fā)明所述枯草芽孢桿菌油懸浮劑的制備稱(chēng)取2x10"個(gè)活芽孢/克枯草芽孢桿菌母粉10克，稀釋劑(葵花籽植物油)800克，SPAN-20表面活性劑190克，在混合釜中混合，再泵入超微粉碎砂磨機(jī)中粉碎3小時(shí)，形成一穩(wěn)定的油懸浮劑，經(jīng)^r測(cè)顆粒粒徑達(dá)到5um以下，枯草芽孢桿菌的濃度為2x10'活芽孢/克。實(shí)施例4:稱(chēng)取2x10"個(gè)活芽孢/克的枯草芽孢桿菌母粉100克，葵花籽植物油300克，OP-10表面活性劑200克，防凍液乙二醇、增效劑十二烷基^t酸4丐、穩(wěn)定劑鄰二氯苯共計(jì)400g,在混合釜中混合，再泵入超微粉碎砂磨機(jī)中粉碎3小時(shí)，形成穩(wěn)定的油懸浮劑，經(jīng)檢測(cè)顆粒粒徑達(dá)到5um以下，枯草芽孢桿菌的濃度為2xl(T活芽孢/克。實(shí)施例5:本發(fā)明所述枯草芽孢桿菌油懸浮劑的田間藥效試驗(yàn)參照GBT17980.67-2004農(nóng)藥田間藥效試驗(yàn)準(zhǔn)則(二)，于2008年7-8月在湖北省裏樊市進(jìn)行2x109、lxl(T、4x10"活芽孢/克枯草芽孢桿菌油懸浮劑的田間藥效試驗(yàn)，進(jìn)行超低容噴霧，防治水稻稻瘟病(葉瘟)，共施藥兩次，施藥制劑量為1200克/公項(xiàng)。藥前病情指數(shù)分別為1.02、0.99、1.00。第二次施藥后14天調(diào)查，病情指數(shù)分別為2.09、1.41、I.25,空白對(duì)照病情指數(shù)為9.57,該藥劑防效達(dá)到79.19%、85.42%、87.28%。同年在廣東省和海南省對(duì)該藥劑進(jìn)行的田間藥效試^r，防效均達(dá)到80%以上。實(shí)施例5:本發(fā)明所述枯草芽孢桿菌油懸浮劑的各項(xiàng)檢測(cè)指標(biāo)表l、枯草芽孢桿菌油懸浮劑檢測(cè)指標(biāo)<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>低溫穩(wěn)定性和熱貯穩(wěn)定性試驗(yàn)在正常生產(chǎn)情況下，每3個(gè)月至少抬r驗(yàn)一次。表2、本發(fā)明所述枯草芽孢桿菌油懸浮劑小試生產(chǎn)產(chǎn)品;險(xiǎn)測(cè)結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>實(shí)施例6:本發(fā)明所述枯草芽孢桿菌油懸浮劑與不同劑型穩(wěn)定性對(duì)比試驗(yàn)將含量分別為1.25x109、1.32x活芽孢/克枯草芽孢桿菌油懸浮劑和可濕性粉劑各200克，貯存于3(TC的恒溫箱內(nèi)，18周后，通過(guò)鑒別及定量測(cè)定試驗(yàn)測(cè)定每克菌劑所含活芽孢數(shù)量。結(jié)果表明，枯草芽孢桿菌油懸浮劑的分解率低于2%,而可濕性粉劑的分解率則高達(dá)20°/，油懸浮劑中活芽孢的存活率明顯高于可濕性粉劑，說(shuō)明本發(fā)明所述枯草芽孢桿菌油懸浮劑穩(wěn)定性高，可延長(zhǎng)枯草芽孢桿菌制劑的貨架期。表3、兩種枯草芽孢桿菌制劑3(TC貯存18周穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>實(shí)施例7:本發(fā)明所述枯草芽孢桿菌油懸浮劑與其他劑型的藥效對(duì)比試驗(yàn)參照GBT17980.67-2004農(nóng)藥田間藥效試驗(yàn)準(zhǔn)則(二)、GB/T17980.111-2004農(nóng)藥田間藥效試—驗(yàn)準(zhǔn)則(二)第lll部分殺菌劑防治番茄葉霉病、以及GB/T17980.95-2004農(nóng)藥田間藥效試'驗(yàn)準(zhǔn)則(二)第95部分殺菌劑防治香蕉葉斑病，對(duì)本發(fā)明實(shí)施例l、2、3制備的枯草芽孢桿菌油懸浮劑的藥效進(jìn)行對(duì)比試驗(yàn)，其結(jié)果如下表所示。表4、本發(fā)明所述枯草芽孢桿菌油懸浮劑與其他劑型的藥效對(duì)比實(shí)驗(yàn)<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>由以上對(duì)比試驗(yàn)結(jié)果可知，本發(fā)明所述枯草芽孢桿菌油懸浮劑藥效比普通制劑高20%左右。權(quán)利要求1.一種枯草芽孢桿菌油懸浮劑，其成分以重量百分比計(jì)包括2×1011活芽孢/克的枯草芽孢桿菌母粉1％～20％稀釋劑60％～80％表面活性劑5％～20％。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的枯草芽孢桿菌油懸浮劑，其特征在于，所述稀釋劑為曱酯化植物油的一種或幾種混合，優(yōu)選為曱酯化葵花籽油、曱酯化菜籽油、曱酯化大豆油、曱酯化花生油的一種或幾種混合。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的枯草芽孢桿菌油懸浮劑，其特征在于，所述表面活性劑為烷基酚聚氧乙烯醚OP-4、烷基酚聚氧乙烯醚OP-7、烷基酚聚氧乙烯醚OP-10、烷基酚聚氧乙烯醚0P-21、山梨醇酐單月桂酸酯SPAN-20、山梨醇酐單棕櫚酸酯SPAN-20、山梨醇酐單油酸酯SPAN-80中的一種或兩種以上混合。4、根據(jù)權(quán)利要求1所述的枯草芽孢桿菌油懸浮劑，其特征在于，還包含防凍液、增效劑和穩(wěn)定劑。5、根據(jù)權(quán)利要求4所述的枯草芽孢桿菌油懸浮劑，其特征在于，所述增效劑為木質(zhì)素磺酸鈉、十二烷基苯磺酸鈣、三苯乙基苯酚聚氧乙烯聚氧丙烯醚、蓖麻油聚氧乙烯醚、苯乙基聚氧乙烯醚或仲烷醇聚氧乙烯醚的一種或兩種以上混合。6、根據(jù)權(quán)利要求4所述的枯草芽孢桿菌油懸浮劑，其特征在于，所述穩(wěn)定劑包括二甘醇、三甘醇、鄰二氯苯或兩種以上混合。7、根據(jù)權(quán)利要求4所述的枯草芽孢桿菌油懸浮劑，其特征在于，所述防凍劑包括乙二醇或丙二醇或兩種混合。8.—種權(quán)利要求1所述枯草芽孢桿菌油懸浮劑的制備方法，其特征在于，按配方量將枯草芽孢桿菌、稀釋劑、表面活性劑均勻混合，粉碎至膠體粒徑為5^m以下，即得所述枯草芽孢桿菌的油懸浮劑。9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的的制備方法，其特征在于，所述稀釋劑為曱酯化植物油的一種或幾種混合，優(yōu)選為曱酯化葵花籽油、曱酯化菜籽油、甲酯化大豆油、曱酯化花生油的一種或幾種混合。10、根據(jù)權(quán)利要求8所述的的制備方法，其特征在于，所述表面活性劑為烷基酚聚氧乙烯醚0P-4、烷基酚聚氧乙烯醚0P-7、烷基酚聚氧乙烯醚OP-IO、烷基酚聚氧乙烯醚0P-21、山梨醇酐單月桂酸酯SPAN-20、山梨醇酐單棕櫚酸酯SPAN-20、山梨醇酐單油酸酯SPAN-8Q中的一種或兩種以上混合。全文摘要本發(fā)明提供一種枯草芽孢桿菌油懸浮劑，其成分以重量百分比計(jì)包括2×10¹¹活芽孢/克的枯草芽孢桿菌1％～20％、稀釋劑60％～80％、表面活性劑5％～20％。本發(fā)明還提供所述枯草芽孢桿菌油懸浮劑的制備方法，即將枯草芽孢桿菌母粉或孢子粉加入稀釋劑、表面活性劑中，將菌體均勻地分散，粉碎至膠體粒徑為5μm以下即得。本發(fā)明所述枯草芽孢桿菌油懸浮劑具有藥效高、成本低、對(duì)環(huán)境和操作人員污染毒害小的特點(diǎn)，是一種新型微生物殺菌劑，具有十分廣闊的應(yīng)用前景。文檔編號(hào)A01N25/04GK101611707SQ200910166429公開(kāi)日2009年12月30日申請(qǐng)日期2009年8月12日優(yōu)先權(quán)日2009年8月12日發(fā)明者勇劉,劉國(guó)忠,張潔巖,新李申請(qǐng)人:海南利蒙特生物農(nóng)藥有限公司