專利名稱：非洲菊花托誘導方法
技術領域：
本發(fā)明涉及花卉培育方法，特別適用于非洲菊花托誘導方法。
背景技術：
非洲菊，學名Gerbera jamesonii Bolus，為菊科大丁草屬的多年生宿根草本植物，為世界五大切花之一，其花朵碩大，花枝挺拔，瓶插壽命長，又有“扶持郎君，事業(yè)發(fā)達” 之意，因而備受消費者的青睞。非洲菊可采用分株繁殖，但目前非洲菊種苗生產上大多采用組織培養(yǎng)進行快繁，因為幼小花蕾具有較強的再分化能力，常作為非洲菊種苗誘導的外植體?，F(xiàn)有技術一般以非洲菊的幼小花蕾，剝去花萼及小花序后縱切為四塊，接種于誘導培養(yǎng)基中，正常光照培養(yǎng)，該方法存在誘導率較低，不同品種間的誘導率存在很大的差異，嚴重制約了非洲菊種苗工廠化、規(guī)?；a。有研究表明花托的發(fā)育期直接影響愈傷組織的分化，以處于顯蕾初期直徑為 0. 7cm以下的頭狀花序的花托誘導效果最好，隨著花序直徑的增大，分化誘導率降低，感染率增高。也有研究表明以花托為外植體，在MS+6-BA 2. 5mg/L+2，4-D 1. Omg/L+NAA 0. 2mg/ L的培養(yǎng)基上，愈傷組織誘導率最高，誘導率達到100%，這些愈傷組織可以分化出不定芽。 也有研究結果顯示以非洲菊幼花托為外植體，在l/2MSH+8mg/L 6-BA+O. 3mg/L NAA培養(yǎng)基上，不定芽再生率最高，達到15. 2%。現(xiàn)在花托誘導方法為A外植體的選擇；現(xiàn)有技術一般選擇非洲菊花蕾直徑大小在0. 7cm以下。非洲菊花序不同發(fā)育時期的花蕾對花托的誘導有很大的影響，B外植體的消毒；花托的消毒程序為用肥皂水沖洗一遍，自來水沖洗干凈后置于超凈工作臺上， 70%酒精消毒30s，無菌水沖洗3-4遍，0. 升汞消毒6min，無菌水沖洗5-7遍即可。外植體的消毒是建立非洲菊試管苗無菌體系的一個重要環(huán)節(jié)。C花托誘導培養(yǎng)基的選擇；非洲菊花托愈傷組織誘導培養(yǎng)基配方為MS+6-BA 2. 5mg/L+2，4-D 1. Omg/L+NAA 0. 2mg/L+蔗糖30g/L+瓊脂7g/L，誘導率達到100% ；不定芽分化培養(yǎng)基為l/2MSH+8mg/L 6-BA+O. 3mg/L NAA+蔗糖30g/L+瓊脂7g/L，分化率為15. 2%，PH值控制在5. 8左右。D、培養(yǎng)條件及方式。花托的培養(yǎng)條件正常光照培養(yǎng)，光照強度為1500-20001x，光照時間14h/d，溫度 23- °C。

發(fā)明內容
本發(fā)明的目的在于克服上述缺陷，提供一種非洲菊花托誘導方法。本發(fā)明的方案是花托誘導方法包括外植體的選擇、外植體的消毒、花托誘導基的選擇、培養(yǎng)條件和方式，以非洲菊的幼小花蕾，剝去花萼及小花序后縱切為四塊，接種于誘導培養(yǎng)基中，正常光照培養(yǎng)，其特征在于外植體的選擇以花蕾直徑大小在0. 5-0. 8cm之間為選擇對象，并增加對選擇對象進行48小時的溫度為4度的冷藏預處理；花托誘導基的選擇所選擇的培養(yǎng)基配方為l/2MS+6-BA 10mg/L+NAA 0. 5mg/L+蔗糖30g/L+瓊脂7g/L，PH 值控制在5. 8左右；培養(yǎng)條件及方式為先7天黑暗預培養(yǎng)后轉入正常光照培養(yǎng)，光照強度為 1500-20001x，光照時間14h/d，溫度23_25°C，直至育成種苗。本發(fā)明的優(yōu)點在于其一，通過本技術可明顯提高花托的愈傷組織的誘導率和不定芽的分化率，通過本發(fā)明技術可使花托愈傷組織誘導率達到100%，不定芽分化率達到 38%，降低生產成本；其二，通過本發(fā)明技術可消減不同品種之間誘導率的差異，為工廠化種苗生產提供可能。
具體實施例方式非洲菊花托誘導方法涉及到非洲菊的組織培養(yǎng)技術，具體包括A外植體的選擇及預處理(創(chuàng)新點)；選擇非洲菊花蕾直徑大小在0. 5-0. 8cm之間，并進行48h的4°C冷藏預處理。非洲菊花序不同發(fā)育時期的花蕾對花托的誘導有很大的影響，試驗研究表明花蕾直徑大于 0. 8cm容易褐變，而且誘導愈傷組織能力差，分化不定芽能力亦差；花蕾直徑小于0. 5cm與 0. 5-0. 8cm的誘導率差異不顯著，但是直徑大小小于0. 5cm時增加了操作的難度。4 的 4°C冷藏預處理有利于降低褐變率和提前愈傷組織的誘導，并提高誘導率和不定芽分化率。B外植體的消毒；花蕾的消毒程序為用肥皂水沖洗一遍，自來水沖洗干凈后置于超凈工作臺上，先用無菌水沖洗5-7遍，70%酒精消毒30s，無菌水沖洗3-4遍，0. 1 %升汞消毒6min，無菌水沖洗5-7遍即可。外植體的消毒是建立非洲菊試管苗無菌體系的一個重要環(huán)節(jié)，通過以上的消毒程序，能控制污染率在3%以下。C花托誘導培養(yǎng)基的選擇；非洲菊花托誘導培養(yǎng)基配方為1/2MS+6-BA 10mg/L+NAA0. 5mg/L+蔗糖30g/L+瓊脂7g/L，PH值控制在5. 8左右。低濃度的無機鹽能減少花托的褐變率，高濃度的細胞分裂素(6-BA)可以提高不定芽的分化。D培養(yǎng)條件及方式。花托的培養(yǎng)條件為先7天黑暗預培養(yǎng)后轉入正常光照培養(yǎng)，光照強度為 1500-20001x，光照時間14h/d，溫度23-25°C。7天的暗培養(yǎng)可以減少外植體的褐變，同時有利于外植體愈傷組織的誘導。本發(fā)明花托誘導原理為非洲菊幼小花蕾作為一種再分化能力較強的材料，是用于非洲菊種苗生產的常用外植體。影響非洲菊花托誘導的因素很多，比如外植體大小，外植體切分方式、激素的種類及濃度、外植體接種前的預處理及接種后的不同光照處理都會影響大到非洲菊花托誘導的成功率。本專利在試驗研究和統(tǒng)計分析的基礎上，分析了以上因素對非洲菊花托誘導率的影響。研究結果顯示花蕾直徑大小在0. 5-0. 8cm的誘導率顯著高于直徑大于0. 8cm的誘導率，誘導率達到35%，與直徑小于0. 5cm的誘導率差異不顯著； 花蕾太小，容易干枯死亡且操作難度大，花蕾太大，則容易發(fā)生褐變；花蕾經誘導前的4。C冷藏預處理可明顯降低褐變頻率和提高誘導率，原因可能是經4°C冷藏預處理后，酚類物質的活性受到抑制，同時調整了外植體內部的激素水平。較高濃度的細胞分裂素及一定濃度的細胞生長素有利于外植體的誘導和分化。接種后的一定時間(7天)的暗培養(yǎng)有利于減少外植體褐變率，并提早外植體的萌動，縮短誘導周期。本發(fā)明英文名詞說明MS 組培中用到的一種基本培養(yǎng)基(包含大量元素、微量元素、鐵鹽和有機成分)6-BA 6-芐氨基嘌呤，一種植物細胞分裂素NAA:萘乙酸，一種植物細胞生長素cm 厘米mg/L:毫克每升2,4-D :2,4- 二氯苯氧乙酸，一種植物生長調節(jié)劑S 秒Min 分鐘g/L:克每升h/d:小時每天MSH 一種組織培養(yǎng)基本培養(yǎng)基，MSH培養(yǎng)基的基本組分包括SH大量元素，MS微量元素及鐵鹽，l_2mg/L水解酪蛋白，9. 9mg/LVBl,9. 5mg/LVB6,4. 5mg/L尼克酸。
權利要求
1.非洲菊花托誘導方法，包括外植體的選擇、外植體的消毒、花托誘導基的選擇、培養(yǎng)條件和方式，以非洲菊的幼小花蕾，剝去花萼及小花序后縱切為四塊，接種于誘導培養(yǎng)基中，正常光照培養(yǎng)，其特征在于外植體的選擇以花蕾直徑大小在0. 5-0. 8cm之間為選擇對象，并增加對選擇對象進行48小時的溫度為4度的冷藏預處理；花托誘導基的選擇所選擇的培養(yǎng)基配方為l/2MS+6-BA 10mg/L+NAA 0. 5mg/L+蔗糖30g/L+瓊脂7g/L，PH值控制在5. 8左右；培養(yǎng)條件及方式為先7天黑暗預培養(yǎng)后轉入正常光照培養(yǎng)，光照強度為 1500-20001x，光照時間14h/d，溫度23_25°C，直至育成種苗。
全文摘要
非洲菊花托誘導方法，涉及涉及花卉培育方法。包括外植體的選擇、外植體的消毒、花托誘導基的選擇、培養(yǎng)條件和方式，以非洲菊的幼小花蕾，剝去花萼及小花序后縱切為四塊，接種于誘導培養(yǎng)基中，正常光照培養(yǎng)，其特征在于外植體的選擇以花蕾直徑大小在0.5-0.8cm之間為選擇對象，并增加對選擇對象進行48小時的溫度為4度的冷藏預處理；花托誘導基的選擇所選擇的培養(yǎng)基配方為1/2MS+6-BA 10mg/L+NAA 0.5mg/L+蔗糖30g/L+瓊脂7g/L，PH值控制在5.8左右；培養(yǎng)條件及方式為先7天黑暗預培養(yǎng)后轉入正常光照培養(yǎng)，光照強度為1500-2000lx，光照時間14h/d，溫度23-25℃直至育成種苗。提高花托的愈傷組織的誘導率和不定芽的分化率。
文檔編號A01H4/00GK102499081SQ20111032647
公開日2012年6月20日 申請日期2011年10月24日 優(yōu)先權日2011年10月24日
發(fā)明者鐘海豐, 黃宇翔 申請人:清流縣鴻翔農莊農業(yè)發(fā)展有限公司