專利名稱：利用根誘導(dǎo)原球莖快速繁殖大花蕙蘭的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬植物細(xì)胞工程技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種利用根誘導(dǎo)原球莖快速繁殖大花蕙蘭的方法。
背景技術(shù)：
大花蕙蘭(Cymbidium hybridium)為蘭科蘭屬多年生草本植物,是近幾年在國(guó)際花卉市場(chǎng)上流行的高檔室內(nèi)盆栽花卉及高檔切花，因其花色艷美，花期較長(zhǎng)(2-3月)，又在冬春節(jié)日期間開(kāi)放，所以具有極高的觀賞價(jià)值。大花蕙蘭多為雜交品種，種子繁殖無(wú)法保持其品種特性，且結(jié)實(shí)率也相對(duì)較低。故傳統(tǒng)栽培靠分株繁殖，因而周期長(zhǎng)，繁殖系數(shù)低，繁殖速度慢，遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足商品化生產(chǎn)的要求。目前，國(guó)外已將組織培養(yǎng)技術(shù)應(yīng)用于大花蕙蘭的繁殖與生產(chǎn)。國(guó)內(nèi)也有許多研究者對(duì)大花蕙蘭的組織培養(yǎng)技術(shù)進(jìn)行了大量的研究，并用于商品化生產(chǎn)。
大花蕙蘭的組織培養(yǎng)始于20世紀(jì)60年代，Morel采用大花蕙蘭的莖尖，在含有細(xì)胞分裂素的KC培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，莖尖分生組織膨大形成類(lèi)原球莖，并分化出根和葉，首次獲得蘭花無(wú)病毒小植株Morel G. Producing virus free Cymbidium. Am [J] Orchid Soc Bull，1990 (9) :495_497。Wimber 對(duì) Morel 的方法進(jìn)行了改進(jìn)，采用液體振蕩培養(yǎng)的方法大大加快了原球莖的增殖速度，短期內(nèi)可以獲得大量再生植株Whimber D
D.Clonalmultiplicatication of Cymbidium through t issueculture of the shootmeristem. Am [J], Orchid Soc Bull，1963，32:105-107，此后組織培養(yǎng)技術(shù)在蘭花生產(chǎn)上得到了廣泛的應(yīng)用。在我國(guó)，大花蕙蘭的組織培養(yǎng)快繁技術(shù)研究起步較晚。一般來(lái)說(shuō)，大花蕙蘭組織培養(yǎng)過(guò)程包括以下兩種方法⑴原球莖途徑外植體的導(dǎo)入體胚誘導(dǎo)，原球莖形成原球莖，增殖芽的誘導(dǎo)分化，根的誘導(dǎo)分化，出苗。該方法的優(yōu)點(diǎn)是增殖系數(shù)高，但易產(chǎn)生變異，植株生長(zhǎng)弱。⑵直接誘導(dǎo)叢生芽途徑外植體的導(dǎo)入，直接誘導(dǎo)叢生芽，叢生芽增殖，根的誘導(dǎo)分化，出苗。該方法縮短了培養(yǎng)時(shí)間，降低了成本，植株生長(zhǎng)健壯，但其增殖系數(shù)不高。迄今為止，大花蕙蘭組織培養(yǎng)的過(guò)程均存在比較繁瑣，成本高等缺點(diǎn)，要想提高效率，降低成本并進(jìn)行快速繁殖，今后的研究重點(diǎn)應(yīng)該是簡(jiǎn)化繁殖過(guò)程，盡量避免誘導(dǎo)、繼代、育苗和生根4個(gè)階段用不同的培養(yǎng)基，探討能減少變異又能提高增殖系數(shù)，且再生植株生長(zhǎng)健壯的大花蕙蘭組織培養(yǎng)方法。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題在于提供一種利用根誘導(dǎo)原球莖快速繁殖大花蕙蘭的方法。本發(fā)明通過(guò)采用改良后含有特殊成分(6-BA、PIC和水解酪蛋白)的MS培養(yǎng)基進(jìn)行原球莖的誘導(dǎo)，針對(duì)大花蕙蘭根外植體，采用特定培養(yǎng)方法，使大花蕙蘭根誘導(dǎo)原球莖，誘導(dǎo)率達(dá)100%，培養(yǎng)45天后每個(gè)根外植體原球莖數(shù)達(dá)50個(gè)，原球莖成活率95%，植株生長(zhǎng)健壯，可直接生根。
所述的利用根誘導(dǎo)原球莖快速繁殖大花蕙蘭的方法，包括以下步驟I)選取大花蕙蘭無(wú)菌苗的根，接種于培養(yǎng)基中，進(jìn)行暗培養(yǎng)，培養(yǎng)室溫度為25±2°C。2)將暗培養(yǎng)獲得的原球莖轉(zhuǎn)到光下進(jìn)行培養(yǎng)，每天10-16小時(shí)光照，溫度為25±2°C。 3)原球莖變綠，轉(zhuǎn)接到上述不含特殊成分的培養(yǎng)基中，逐漸發(fā)育成正常植株，同時(shí)生根。4)室溫，打開(kāi)瓶蓋煉苗，I周后種植于溫室穴盤(pán)中。所述的培養(yǎng)基組分用量為MS基本培養(yǎng)基IL ;蔗糖30000mg/L ;瓊脂粉5000mg/L ；以及由6-BA 0. 5mg/L, PIC 0. 5mg/L和水解酪蛋白500mg/L組成的特殊成分。其中，所述的MS基本培養(yǎng)基配方如下表I所示，mg/L表示每升MS培養(yǎng)基中含各成分的暈克數(shù)。表I
權(quán)利要求
1.ー種利用根誘導(dǎo)原球莖快速繁殖大花蕙蘭的方法，其特征在干， 1)選取大花蕙蘭無(wú)菌苗的根，接種于培養(yǎng)基中，進(jìn)行暗培養(yǎng)，培養(yǎng)室溫度為25±2°C； 2)將暗培養(yǎng)獲得的原球莖轉(zhuǎn)到光下進(jìn)行培養(yǎng)，每天10-16小時(shí)光照，溫度為25±2°C； 3)原球莖變綠，轉(zhuǎn)接到步驟I)不含特殊成分的培養(yǎng)基中，逐漸發(fā)育成正常植株，同時(shí)生根； 4)室溫，打開(kāi)瓶蓋煉苗，I周后種植于溫室穴盤(pán)中。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的方法，其特征在于，所述的培養(yǎng)基組分用量為MS基本培養(yǎng)基1L，蔗糖30000mg/L，瓊脂粉5000mg/L，以及由6-BAO. 5mg/L，PIC 0. 5mg/L和水解酪蛋白500mg/L組成的特殊成分。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種利用根誘導(dǎo)原球莖快速繁殖大花蕙蘭的方法，采用改良后含有特殊成分(6-BA、PIC和水解酪蛋白)的MS培養(yǎng)基進(jìn)行原球莖的誘導(dǎo)，針對(duì)大花蕙蘭根外植體，采用特定培養(yǎng)方法，使大花蕙蘭根誘導(dǎo)原球莖，誘導(dǎo)率達(dá)100%，培養(yǎng)45天后每段根外植體原球莖數(shù)達(dá)50個(gè)，原球莖成活率95%，植株生長(zhǎng)健壯，直接生根。
文檔編號(hào)A01H4/00GK102754599SQ20121024481
公開(kāi)日2012年10月31日 申請(qǐng)日期2012年7月16日 優(yōu)先權(quán)日2012年7月16日
發(fā)明者周音, 張建軍, 殷麗青, 謝紀(jì)紅 申請(qǐng)人:上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院