專利名稱：一種南極大磷蝦粉營養(yǎng)強(qiáng)化輪蟲的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于水產(chǎn)生物餌料營養(yǎng)強(qiáng)化技術(shù)，特別是用南極大磷蝦粉營養(yǎng)強(qiáng)化輪蟲的方法。
背景技術(shù)：
裙皺臂尾輪蟲(Brachionus plicatilis)(以下簡稱輪蟲)是一種小型的多細(xì)胞水生動(dòng)物，廣泛分布于溫?zé)釒У貐^(qū)的半咸水和海水水域，是魚類、甲殼類的重要的天然生物餌料，一直在海水仔稚魚培育、蝦蟹育苗生產(chǎn)及名貴觀賞水族動(dòng)物的養(yǎng)殖中被廣泛應(yīng)用。目前，在輪蟲的大規(guī)模生產(chǎn)性培養(yǎng)中，主要以酵母作為適合餌料，而以酵母為餌料所培養(yǎng)的輪蟲體內(nèi)缺乏《3-系列多不飽和脂肪酸(co3-PUFA)，尤其是二十二碳六烯酸(DHA)和二十碳五烯酸(ΕΡΑ)。水產(chǎn)動(dòng)物營養(yǎng)學(xué)的研究結(jié)果已表明:o3-PUFA是水產(chǎn)動(dòng)物幼體所必需的營養(yǎng)物質(zhì)，也是幼體所需能量的主要來源，其組成和含量直接影響到幼體的正常生長發(fā)育和存活。特別是ω 3-PUFA中的DHA和ΕΡΑ，有著維持仔稚魚的細(xì)胞膜正常生理功能和神經(jīng)發(fā)育的重要作用，是維持海洋魚類正常生長和發(fā)育的必需脂肪酸。鑒于輪蟲及其營養(yǎng)價(jià)值對(duì)于水產(chǎn)動(dòng)物幼體的重要性，在投喂幼體之前，亟需對(duì)輪蟲進(jìn)行營養(yǎng)強(qiáng)化。目前，輪蟲主要采用微藻、油脂型強(qiáng)化劑和微囊強(qiáng)化劑等營養(yǎng)強(qiáng)化方法。微藻強(qiáng)化是最傳統(tǒng)的輪蟲營養(yǎng)強(qiáng)化方式，但微藻生產(chǎn)易受培養(yǎng)的環(huán)境條件和培養(yǎng)技術(shù)等因素的影響，而且有些藻類比如小球藻(Chlorella vulgaris)本身也缺乏DHA,因此微藻強(qiáng)化也存在較多的弊端。油脂型強(qiáng)化劑(如精制魚油、乳化型魚油、豆油等)和微囊強(qiáng)化劑(如50DE等)均能起到營養(yǎng)強(qiáng)化作用，但由于油脂性強(qiáng)化劑易氧化，且易污染水質(zhì)，導(dǎo)致輪蟲成活率降低，而微囊化處理工藝復(fù)雜且成本昂貴，鑒于這些原因，這些產(chǎn)品在實(shí)踐應(yīng)用上受到諸多限制。因此，新型營養(yǎng)強(qiáng)化材料的開發(fā)利用仍是一項(xiàng)亟待解決的研究課題。南極大磷蟲下(Euphausia superba)隸屬節(jié)肢動(dòng)物門，甲殼綱,磷蟲下目。南極大磷蟲下粉富含蛋白質(zhì)、氨基酸、脂肪酸、維生素等營養(yǎng)物質(zhì)，但是，目前未見有關(guān)南極大磷蝦粉營養(yǎng)強(qiáng)化輪蟲的報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種利用南極大磷蝦粉營養(yǎng)強(qiáng)化輪蟲的方法，通過使用南極大磷蝦粉提高輪蟲體內(nèi)《3-PUFA，尤其是DHA和EPA含量，提高ω 6系列多不飽和脂肪酸( 6-PUFA)中的花生四烯酸(二十碳四烯酸，ARA)的含量，使強(qiáng)化后的輪蟲營養(yǎng)更全面均衡，可滿足魚類、甲殼類幼體對(duì)輪蟲的營養(yǎng)需求。本發(fā)明的技術(shù)方案采用南極大磷蝦粉作為強(qiáng)化輪蟲的營養(yǎng)材料，其特征是先使用Pulverisette 16型交叉攪拌研磨機(jī)將南極大磷奸粉進(jìn)行超微粉碎,使南極大磷奸粉的粒徑< 120 μ m，然后按IOOg經(jīng)超微粉碎的南極大磷蝦粉加入到600mL純凈水的配比，并用均質(zhì)器攪拌，均質(zhì)器的轉(zhuǎn)速為15500-22000rpm,攪拌時(shí)間為2min,然后按相同方法反復(fù)攪拌3次，再采用超聲波破碎溶解20min，使南極大磷蝦粉的粒徑< 25 μ m,制得南極大磷蝦粉母液，并用純凈水將南極大磷蝦粉母液總體積補(bǔ)足至IL后，置于4°C冰箱內(nèi)儲(chǔ)存?zhèn)溆茫粡?qiáng)化輪蟲的步驟是將輪蟲收集至盛裝清潔海水的桶中，水溫(25±0.5) °C，鹽度28±1，連續(xù)充氣，自然光照，輪蟲密度為(550 ± 10) inds/mL,桶內(nèi)施加上述制備的南極大磷奸粉母液,所用南極大磷蝦粉的終濃度為50mg/L，即IL海水中，施加南極大磷蝦粉的量為50mg，強(qiáng)化時(shí)間6 18h0本發(fā)明的突出特點(diǎn)是用南極大磷蝦粉營養(yǎng)強(qiáng)化輪蟲，并具有以下顯著技術(shù)效果:一是按50mg/L的濃度使用南極大磷蝦粉強(qiáng)化輪蟲后，輪蟲體內(nèi)的DHA、EPA和ω 3-PUFA的含量顯著高于未強(qiáng)化輪蟲(見附表1)，尤其是《3-PUFA的含量幾乎是未強(qiáng)化輪蟲的10倍以上；二是南極大磷蝦粉不僅可提高輪蟲體內(nèi)DHA、EPA和co3-PUFA的含量，而且也可提高 6-PUFA中的花生四烯酸(二十碳四烯酸，ARA)的含量，按50mg/L的濃度使用南極大磷蝦粉強(qiáng)化輪蟲后，輪蟲體內(nèi)的ARA含量幾乎是未強(qiáng)化輪蟲的1.7倍(見附表I);三是南極大磷蝦粉強(qiáng)化輪蟲的濃度以50mg/L為優(yōu)，強(qiáng)化時(shí)間以12和18h為最適宜；四是南極大磷蝦粉營養(yǎng)價(jià)值高且資源豐富，成本尚不及50DE、乳化型魚油或油脂型魚油成本的1/3，而且不易污染水質(zhì)，也不影響輪蟲成活率，強(qiáng)化過程操作簡單，便于使用。
具體實(shí)施例方式本發(fā)明采用南極大磷蝦粉作為強(qiáng)化輪蟲的營養(yǎng)材料，南極大磷蝦粉所含的DHA、EPA、ARA和w3-PUFA在·脂肪酸組成中的含量分別為(16.86±2.12) %、(23.54±2.36)%、(0.17±0.02) % 和(42.56±4.25) % ；南極大磷蝦粉母液制備步驟是先使用交叉攪拌研磨機(jī)將南極大磷蝦粉進(jìn)行超微粉碎，例如選用Pulverisette 16型交叉攪拌研磨機(jī)(德國FRITSCH GmbH公司生產(chǎn))將南極大磷蝦粉進(jìn)行超微粉碎，使南極大磷蝦粉的粒徑< 120 μ m，然后按IOOg經(jīng)超微粉碎的南極大磷蝦粉加入到600mL純凈水的配比用均質(zhì)器攪拌，均質(zhì)器的轉(zhuǎn)速為15500-22000rpm，攪拌時(shí)間為2min,然后按相同方法反復(fù)攪拌3次,再采用超聲波破碎溶解20min,使南極大磷蝦粉的粒徑< 25 μ m，制得南極大磷蝦粉母液，并用純凈水將南極大磷蝦粉母液總體積補(bǔ)足至IL后，置于4°C冰箱內(nèi)儲(chǔ)存?zhèn)溆?；?qiáng)化輪蟲的步驟是將酵母培養(yǎng)的輪蟲收集至盛清潔海水的桶中，水溫(25±0.5)°C，鹽度28±1，連續(xù)充氣，自然光照，輪蟲密度為(550±10)inds/mL,桶內(nèi)施加上述制備的南極大磷奸粉母液,所用南極大磷奸粉的終濃度為50mg/L(即IL海水中，施加南極大磷蝦粉的量為50mg)，強(qiáng)化時(shí)間6 18h。本發(fā)明通過下述方式進(jìn)行驗(yàn)證:一個(gè)桶內(nèi)不施加南極大磷蝦粉母液，另一個(gè)桶內(nèi)施加終濃度為50mg/L的南極大磷蝦粉母液,于第6、12和18h分別收集兩桶內(nèi)的輪蟲,用純凈水漂洗干凈，冷凍干燥后，用Agilent6890型氣相色譜儀分析測定輪蟲體內(nèi)脂肪酸，以色譜峰峰面積歸一法計(jì)算出DHA、EPA、ARA和ω 3-PUFA的含量，即可以見到強(qiáng)化后輪蟲體內(nèi)的DHA,EPA,ARA和ω 3-PUFA的含量顯著高于未強(qiáng)化輪蟲，尤其是50mg/L濃度強(qiáng)化的輪蟲，其體內(nèi)《3-PUFA的含量幾乎是未強(qiáng)化輪蟲的10倍以上，ARA含量幾乎是未強(qiáng)化輪蟲的1.7倍(見附表I);而比較在不同取樣時(shí)間點(diǎn)的DHA、EPA、ARA和ω 3-PUFA的含量，50mg/L濃度的強(qiáng)化時(shí)間以12和18h為最適宜。附表1.南極大磷蝦粉強(qiáng)化輪蟲后體內(nèi)重要脂肪酸含量(％)的測定數(shù)據(jù):
權(quán)利要求
1.一種南極大磷蝦粉營養(yǎng)強(qiáng)化輪蟲的方法，本發(fā)明的技術(shù)方案采用南極大磷蝦粉作為強(qiáng)化輪蟲的營養(yǎng)材料，其特征是先使用Pulverisettel6型交叉攪拌研磨機(jī)將南極大磷蝦粉進(jìn)行超微粉碎，使南極大磷蝦粉的粒徑< 120 μ m，然后按IOOg經(jīng)超微粉碎的南極大磷蝦粉加入到600mL純凈水的配比，并用均質(zhì)器攪拌，均質(zhì)器的轉(zhuǎn)速為15500-22000rpm，攪拌時(shí)間為2min，然后按相同方法反復(fù)攪拌3次，再采用超聲波破碎溶解20min，使南極大磷蝦粉的粒徑< 25 μ m，制得南極大磷蝦粉母液，并用純凈水將南極大磷蝦粉母液總體積補(bǔ)足至IL后，置于4°C冰箱內(nèi)儲(chǔ)存?zhèn)溆?；?qiáng)化輪蟲的步驟是將輪蟲收集至盛裝清潔海水的桶中，水溫(25±0.5)°C，鹽度28±1，連續(xù)充氣，自然光照，輪蟲密度為(550±10)inds/mL，桶內(nèi)施加上述制備的南極大磷蝦粉母液，所用南極大磷蝦粉的終濃度為50mg/L，即IL海水中，施加南極大磷蝦粉的量為50mg，強(qiáng)化時(shí)間6 18h。
全文摘要
一種南極大磷蝦粉營養(yǎng)強(qiáng)化輪蟲的方法，本發(fā)明采用南極大磷蝦粉作為強(qiáng)化輪蟲的營養(yǎng)材料，其特征是用交叉攪拌研磨機(jī)將南極大磷蝦粉超微粉碎使粒徑＜120μm，然后按100g經(jīng)超微粉碎的南極大磷蝦粉加入到600mL純凈水的配比，用均質(zhì)器攪拌，再用超聲波破碎溶解，使蝦粉的粒徑＜25μm，制得南極大磷蝦粉母液，并用純凈水將母液總體積補(bǔ)足至1L后，置于4℃冰箱內(nèi)儲(chǔ)存；強(qiáng)化輪蟲的步驟是將輪蟲收集至盛裝清潔海水的桶中，水溫(25±0.5)℃，鹽度28±1，連續(xù)充氣，自然光照，輪蟲密度為(550±10)inds/mL，桶內(nèi)施加上述制備的南極大磷蝦母液，所用南極大磷蝦粉的終濃度為50mg/L，強(qiáng)化時(shí)間6～18h。
文檔編號(hào)A01K67/033GK103155905SQ20121040609
公開日2013年6月19日 申請(qǐng)日期2012年10月23日 優(yōu)先權(quán)日2012年10月23日
發(fā)明者陸建學(xué), 林聽聽, 高露姣, 黃艷青 申請(qǐng)人:中國水產(chǎn)科學(xué)研究院東海水產(chǎn)研究所